具有抗腫瘤活性的四個卡山烷型二萜類化合物的製作方法
2023-12-09 04:02:36 2
專利名稱：具有抗腫瘤活性的四個卡山烷型二萜類化合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及通過植物化學的提取分離手段從豆科雲實屬植物喙莢雲實[Caesalpinia minax Hance]的種子苦石蓮中提取分離得到4個新的卡山燒型二職類化合物及此類化合物對宮頸癌、結腸癌的細胞毒作用、及其在腫瘤的臨床預防和治療中的應用。
背景技術：
苦石蓮為豆科雲實屬植物_莢雲實(Caesalpinia minax Hance)的種子。_莢雲實俗稱南蛇勒，龍爪刺，為低矮灌木，生於海拔150-680m的山地、山谷、河谷或路邊灌叢中，在我國主要分布於西南和華南地區的廣西、雲南、貴州、廣西、廣東及海南等地.苦石蓮性涼，味苦，有清熱化溼，活血散瘀，止痛之功效，是我國南方民 間常用草藥，其在民間主要用於治療風熱感冒、流感、肝炎、痢疾、淋濁、癰腫、皮膚瘙癢、瘡癬、跌打損傷、毒蛇咬傷等，為我國中藥典籍《中華本草》等收錄，同時被廣西中藥材標準、貴州中藥材標準、四川中藥材標準等收載，是寶貴的傳統壯藥。研究表明，苦石蓮中的特徵性成分及活性成分主要為卡山烷型(cassane) 二職及其內酯類化合物。經藥理活性研究，這類化合物具有很好的抗菌，抗病毒和抗瘧疾，抗腫瘤等活性。本發明所涉及的化合物Minaxin A( I )、Neocaesalpin AA( II )、NeocaesalpinAB(III) ,Neocaesalpin AD(IV)均為新化合物，其抗腫瘤活性為首次發現，迄今為止，以上研究成果尚未有專利或文獻報導。本發明的目的在於充分利用我國特有的含有卡山烷型二萜的植物資源，深入進行研究開發，尋找具有獨特化學結構，抗腫瘤活性強，且毒副作用小的該類化合物，以期為臨床研究提供新型抗腫瘤藥物。
發明內容
本發明提供卡山烷型二萜類化合物在製藥中的應用。本實驗室利用現代分離技術和結構測定手段對豆科雲實屬植物喙莢雲實的種子苦石蓮進行化學成分研究過程中，從中分離得到4個新的卡山烷型二萜，分別為MinaxinA( I )、Neocaesalpin AA( II )、Neocaesalpin AB(III )、Neocaesalpin AD(IV)。通過對這些化合物進行體外抗腫瘤藥效學研究，發現其對人宮頸癌Hela，人結腸癌HCT-8均有一定的抑制作用。化合物I -IV對人宮頸癌Hela及人結腸癌HCT-8的IC5tl分別為40. 0,39. 8、31. 6、32. 8 μ g/ml 及 10. 5、33. O、29. 5、35. 5 μ g/ml。
權利要求
1.具有抗腫瘤活性的四個卡山烷型二萜類化合物，其特徵在於其是由豆科植物喙莢雲實的種子苦石蓮中提取分離得到的，化學結構式為
2.權利要求I所述的四個化合物I-IV經腫瘤藥效學實驗證明，具有抗腫瘤活性。Minaxin A(化合物 I )、Neocaesalpin AA (化合物 II )、Neocaesalpin AB (化合物III)、Neocaesalpin AD (化合物IV )對於人宮頸癌細胞Hela及人結腸癌細胞HCT-8的IC5。分別為 40. O、39. 8、31. 6、32. 8 μ g/ml 及 10. 5、33. 0、29· 5、35. 5 μ g/ml。
3.權利要求I所述的4個卡山烷型二萜(化合物I -IV)的製備方法，包括以下步驟 廣西南寧採得喙莢雲實的種子苦石蓮8. Okg,由廣西藥用植物研究所袁經權研究員鑑定為[Caesalpinia minax Hance]。苦石蓮8. Okg粉碎後，甲醇加熱回流提取二次,每次二小時，合併提取液，減壓回收溶劑，濃縮後得總浸膏2020g。苦石蓮總浸膏用氯仿-甲醇溶解後，與100 200目的矽膠拌樣，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，最終得到石油醚部分130g，氯仿部分325g，乙酸乙酯部分160g，丙酮部分305g，甲醇部分llOOg。(提取流程見附圖
5所示)。取氯仿部分經矽膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯洗脫劑I : 0-1 I梯度洗脫，得到12個餾分(Fr. A-L)，從中選取餾分C (15. 4g)，餾分D (8. 9g)，餾分E ￠. Sg)經LH20凝膠柱層析，以氯仿-甲醇40 60洗脫除去色素。餾分C經反相MCI柱層析，以甲醇-水(30 70-100 O)梯度洗脫，得到8個組分(C1-C8)。C7-C8經薄層檢識後合併，合併組分以甲醇-水(60 40)經反相高壓製備色譜分離，得到化合物I (10. Omg)。餾分D經反相MCI柱層析，以甲醇-水(30 70-100 O)梯度洗脫， 得到6個組分(D1-D6)。D2-D3經薄層檢識後合併，合併組分經300 400目矽膠柱層析，氯仿-石油醚(I 1-1 O)梯度洗脫，得到化合物II (8.0!^)，化合物111(5.3!^)。餾分E經中壓製備液相，以甲醇-水(40 70-100 O)梯度洗脫，得到4個組分(E1-E4)。E2組分以甲醇-水(68 32)經反相高壓製備色譜分離，得到化合物IV (8.2mg)。
全文摘要
本發明涉及通過植物化學的提取分離手段從豆科雲實屬植物喙莢雲實[Caesalpina minax Hance]的種子苦石蓮中分離得到4個新的卡山烷型二萜類化合物及此類化合物對宮頸癌、結腸癌的細胞毒作用、及其在腫瘤的臨床預防和治療中的應用。
文檔編號C07D307/77GK102863506SQ20111018785
公開日2013年1月9日 申請日期2011年7月6日 優先權日2011年7月6日
發明者許旭東, 馬國需, 曹麗, 袁經權, 馬麗焱, 吳海峰, 吳麗珍, 鄭慶霞, 鍾明亮, 楊峻山 申請人:中國醫學科學院藥用植物研究所