一種fk506的口服藥物組合物的製作方法

2023-12-08 22:36:11

專利名稱：一種fk506的口服藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物，更確切地，本發明涉及一種含有FK506的藥物組合物。
背景技術：
FK506(藤黴素或他克莫司，tacrolimus)是一種強效免疫抑制劑。1984年，日本藤澤製藥有限公司從筑波山的土壤中分離出一株放線菌(Streptomycestsukubaensis No.9993株)，在其發酵培養基中發現了FK506。通過吸附樹脂和有機溶媒萃取、提純、精製，進而分離出了FK506，並且以乙腈反應成功的使之結晶化，EP184162中敘述了FK506的製法。(周吉海，FK506的發現和應用開發。日本醫學介紹，1994，15(6)，267-268)FK506是一種中性大環內酯類抗生素，標準產品為無色稜形結晶，分子量844，分子式C44H69NO12，可溶於甲醇、乙醇、丙酮、氯仿，幾乎不溶於水。結構式如下(張煒，新型免疫抑制劑FK506。臨床皮膚科雜誌，1995，1，47-49)
FK506是一種高效大環內酯類免疫抑制劑，其免疫抑制作用是環孢素A的10～100倍，而毒副反應與環A比較發生率低，程度也輕。臨床上，它已被成功地用於治療移植(肝、腎、骨髓移植等)排斥反應和自身免疫性疾病；另外，FK506局部應用還有抗炎活性，可用於治療炎症性皮膚病。(張煒，新型免疫抑制劑FK506。臨床皮膚科雜誌，1995，1，47-49)。
但是，由於FK506在水中幾乎不溶(溶解度為1～2ug/ml)，故口服生物利用度很低，口服1mg後的最高血藥濃度僅為0.4ng/ml。(Kazunari Yamashita et al.Establishment of new preparation method for solid dispersion formulation oftacrolimus.Int.J.Pharm.2003，267，79-91)專利EP 0240773中也提到了這一點。
提高FK506在水中的溶解度，進而提高其生物利用度一直是本領域的技術人員著力解決的問題。

發明內容
本發明公開了FK506與環糊精形成的具有高溶出度及高生物利用度的包合物形式的藥物組合物。在此包合物中，FK506分子全部或部分嵌入環糊精分子穴內，利用環糊精的羥基親水性可增加FK506的溶解度和溶解速度，從而提高其生物利用度。
本發明公開了一種含FK506和一種環糊精的包合物的口服藥物組合物，其在0.4％十二烷基硫酸鈉(SDS)水溶液中30分鐘的溶出度可達到95％以上，且重現性良好。
本發明公開的藥物組合物為一種包合物形式的含有FK506和一種環糊精的口服藥物組合物，其中的環糊精優選羥丙基-β-環糊精；本發明公開的藥物組合物，其中FK506與羥丙基-β-環糊精的摩爾比為1∶0.5至1∶5，優選為1∶1；本發明公開的藥物組合物，還含有一種表面活性劑，此表面活性劑優選泊洛沙姆188；本發明公開的藥物組合物，FK506與泊洛沙姆188的重量比為1∶0.05至1∶0.5，優選1∶0.1；本發明公開了藥物組合物的製備過程(1)將FK506溶於有機溶媒中；(2)將一種環糊精加至上述(1)溶液中，攪拌；(3)將一種表面活性劑溶於(2)中；(4)將崩解劑、賦形劑等輔料混懸於上述(3)溶液中；(5)將上述(4)混懸液中的有機溶媒揮幹；(6)將揮乾物研細，過篩，即可。
本發明所述的FK506可以是任何一種FK506類化合物。FK506有許多衍生物、拮抗劑、激動劑與同型物都是已知的，它們具有FK506的基本結構和至少一種生物學的性質(例如免疫學性質)。在許多專利中都敘述過這類化合物，例如EP184162、EP315978、EP323042、EP423714、EP427680、WO91/13889、WO91/19495、EP484936、EP532088等。這些化合物一起稱作FK506類化合物。
在上述步驟(1)中所採用的有機溶媒為任何一種可以溶解FK506的溶媒，包括但不限於醇類(甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇等)，乙酸乙酯，乙醚等，優選的為低級烷醇。
本發明中所述的環糊精為一種水溶性環糊精，可以為羥丙基-β-環糊精、α-環糊精、γ-環糊精、甲基環糊精、羥乙基環糊精、支鏈環糊精、環糊精聚合物等。優選為羥丙基-β-環糊精(HP-β-CYD)。HP-β-CYD為β-環糊精的衍生物，具有筒狀分子結構，分子量為1540，極易溶於水，包合量大。無溶血反應，毒性低，可用於注射劑。FK506與所用的環糊精的摩爾比可以為1∶0.5至1∶5，優選地為1∶1。
本發明中所述的表面活性劑可以是非離子或離子表面活性劑。適用的表面活性劑有—聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物和嵌段共聚物(商品名稱是Poloxamer，中文名為泊洛沙姆)，一種優選的泊洛沙姆是可以從BASF公司購得的Poloxamer188；—乙氧基化的膽甾醇，已知的商品名稱為Solulan，如Amerchol公司的SolulanC24；—維生素衍生物如維生素E衍生物，有Eastman公司的生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)；—聚山梨醇類，即吐溫類，如吐溫-20、吐溫-60、吐溫-80等；—十二烷基硫酸鈉或月桂基硫酸鈉。
如果在本發明的組合物中應用表面活性劑，則FK506與其重量比為1∶0.05至1∶0.5，優選1∶0.1；本發明中應用的崩解劑、賦形劑為藥物製劑生產中常規應用的輔料。常用崩解劑有交聯羧甲基纖維素鈉(CCNa)、低取代羥丙基纖維素(L-HPC)、微晶纖維素(MCC)、交聯聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、羧甲基纖維素鈣、羧甲基澱粉鈉等；常用賦形劑有乳糖、蔗糖、澱粉、甘露醇等。上述崩解劑或賦形劑可分別單獨使用，也可合併使用。上述崩解劑或賦形劑與FK506的重量比可以從0.5∶1至20∶1，優選的為1∶1至10∶1。
另外，本包合物還可採用下列藥劑書中常提到的其他方法進行製備共沉澱法、超聲波法、研磨法、冷凍乾燥法、噴霧乾燥法等。
上述過程製備的固體分散體可單獨作為製劑使用，也可再與其他輔料採用常規製劑工藝製成粉劑、細粒劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、注射劑等等劑型。在此過程中，如果需要，還可加入著色劑、甜味劑、矯味劑、稀釋劑、潤滑劑等輔料，如阿斯巴甜、蔗糖、乳糖、澱粉、微晶纖維素、硬脂酸鎂、滑石粉等。
按上述過程製備出的FK506環糊精包合物的溶解度比FK506原粉顯著提高，以此包合物與其他輔料製備成的各種劑型，其溶出度比用FK506原粉直接配製成的製劑提高很多，口服後生物利用度也有大幅度提高。另外，根據本發明製備的FK506環糊精包合物穩定性良好，在進行加速試驗(《中國藥典》規定的考察藥物製劑穩定性的方法，條件為40℃、相對溼度75％，六個月後，外觀、含量、溶出度均無明顯變化，提示本藥物組合物的有效期可達兩年以上。


附圖1FK506不同樣品的溶出曲線；附圖2狗口服FK506不同劑型後的藥時曲線。
具體實施例方式以下實施例、實驗例僅是對本發明的進一步說明，不應理解為對本發明的限制。
儀器設備FA2004型電子天平(上海精科天平廠)79-3型恆溫磁力攪拌器(上海司樂儀器廠)ZK-82β型電熱真空乾燥箱(上海市實驗儀器總廠)8210E-MTH型BRANSONIC超聲波清洗器(美國BRANSON公司)
原料來源FK506華北製藥集團新藥研究開發有限責任公司HP-β-CYD西安德立生物技術有限公司泊洛沙姆188 BASF公司其他均為市售。
實施例1FK5061gHP-β-CYD1.8g交聯羧甲基纖維素鈉 1g乳糖 2g將FK506溶於乙醇中，加入HP-β-CYD，攪拌一段時間後加入交聯羧甲基纖維素鈉和乳糖。將上述溶液的有機溶媒揮淨，剩餘物在真空乾燥箱中乾燥(真空度-0.1Mpa；室溫)12小時後，研細，過篩即製成FK506環糊精包合物。
實施例2FK5061gHP-β-CYD3.6g交聯羧甲基纖維素鈉 1g乳糖 2g將FK506溶於乙醇中，加入HP-β-CYD，攪拌一段時間後加入交聯羧甲基纖維素鈉和乳糖。將上述溶液的有機溶媒揮淨，剩餘物在真空乾燥箱中乾燥(真空度-0.1Mpa；室溫)12小時後，研細，過篩即製成FK506環糊精包合物。
實施例3FK5061g
羥乙基環糊精1.7g交聯羧甲基纖維素鈉 1g乳糖2g將FK506溶於乙醇中，加入羥乙基環糊精，攪拌一段時間後加入交聯羧甲基纖維素鈉和乳糖。將上述溶液的有機溶媒揮淨，剩餘物在真空乾燥箱中乾燥(真空度-0.1Mpa；室溫)12小時後，研細，過篩即製成FK506環糊精包合物。
實施例4FK506 1gHP-β-CYD 1.8g泊洛沙姆188 0.05g交聯羧甲基纖維素鈉 1g乳糖2g將FK506溶於乙醇中，加入HP-β-CYD，攪拌一段時間後加入泊洛沙姆188、交聯羧甲基纖維素鈉和乳糖。將上述溶液的有機溶媒揮淨，剩餘物在真空乾燥箱中乾燥(真空度-0.1Mpa；室溫)12小時後，研細，過篩即製成FK506環糊精包合物。
實施例5FK506 1gHP-β-CYD 1.8g泊洛沙姆188 0.1g交聯羧甲基纖維素鈉 1g乳糖2g
將FK506溶於乙醇中，加入HP-β-CYD，攪拌一段時間後加入泊洛沙姆188、交聯羧甲基纖維素鈉和乳糖。將上述溶液的有機溶媒揮淨，剩餘物在真空乾燥箱中乾燥(真空度-0.1Mpa；室溫)12小時後，研細，過篩即製成FK506環糊精包合物。
實施例6FK506 1gHP-β-CYD 1.8g十二烷基硫酸鈉 0.05g交聯羧甲基纖維素鈉 1g乳糖2g將FK506溶於乙酸乙酯中，加入HP-β-CYD，攪拌一段時間後加入十二烷基硫酸鈉、交聯羧甲基纖維素鈉和乳糖。將上述溶液的有機溶媒揮淨，剩餘物在真空乾燥箱中乾燥(真空度-0.1Mpa；室溫)12小時後，研細，過篩即製成FK506環糊精包合物。
實驗例1溶出試驗(1)儀器ZRS-8G型智能溶出試驗儀(天津大學無線電廠)WATERS 2010型高效液相色譜儀(515型泵，2487型檢測器，717型自動進樣器；美國WATERS公司)EXTEND-C18柱(406×250mm；安捷倫公司)(2)試驗樣品A按實施例1製備的包合物
B按實施例4製備的包合物C按實施例5製備的包合物D FK506原粉(3)試驗方法本試驗採用《中國藥典》2000版附錄XC《溶出度測定法》中第三法(因藥物劑量小，採用小杯槳法)。由於藥物難溶，為達到漏槽條件，採用0.4％十二烷基硫酸鈉水溶液作為溶出介質，轉速為100轉/分。分別於試驗進行到15min、30min、60min時取樣，測量濃度並計算累積溶出度。
(4)檢測方法見下述文獻Establishment of new preparation method for solid dispersionformulation of tacrolimus.Int.J.Pharm.2003，267，79-91(5)試驗結果見表1表1FK506不同樣品的溶出度結果

溶出曲線見附圖1，由結果可知，FK506固體分散體的溶出度明顯高於原粉。
實驗例2生物利用度試驗(1)儀器
WATERS 2010型高效液相色譜儀(美國WATERS公司)EXTEND-C18柱(406×250mm；安捷倫公司)(2)試驗樣品a FK506原粉b按實施例5製備的包合物(3)試驗方法採用隨機交叉試驗設計方法，分別給予6隻Beagle狗(購自廣州市醫藥工業研究所)樣品a與樣品b(劑量為1mg)。Beagle狗禁食過夜(12小時)，隨機分成兩組於次日早晨空腹口服給藥。給藥前取空白血5ml，給藥後2小時方可飲水，4小時後方可餵食。給藥後0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8hr取血5ml，肝素抗凝，立即3000r/min離心5min，分離出血漿於-20℃保存備用。洗淨期為一周，之後給另一製劑進行交叉試驗。
(4)檢測方法見下述文獻Evaluation of a rapid micro-scale assay for tacrolimus by liquidchromatography-tandem mass spectrometry.Ann Clin Biochem.2002 Sep；39(Pt5)487-92.
(5)試驗結果見表2表2狗服用FK506原粉及固體分散體後的藥物動力學參數

藥時曲線見附圖2，由結果可知，FK506固體分散體的生物利用度(藥時曲線下面積可定性表示)明顯高於原粉。
權利要求
1.一種藥物組合物，含有FK506和一種環糊精。
2.根據權利要求1的藥物組合物，其中的環糊精為羥丙基-β-環糊精。
3.根據權利要求2的藥物組合物，其中FK506與羥丙基-β-環糊精的摩爾比為1∶0.5至1∶5。
4.根據權利要求3的藥物組合物，其中FK506與羥丙基-β-環糊精的摩爾比為1∶1。
5.根據權利要求4的藥物組合物，其中還含有一種表面活性劑。
6.根據權利要求5的藥物組合物，其中的表面活性劑為泊洛沙姆188。
7.根據權利要求6的藥物組合物，FK506與泊洛沙姆188的重量比為1∶0.05至1∶0.5。
8.根據權利要求7的藥物組合物，FK506與泊洛沙姆188的重量比為1∶0.1。
9.根據權利要求1中的藥物組合物，其製備過程為(1)將FK506溶於有機溶媒中；(2)將一種環糊精加至上述(1)溶液中，攪拌；(3)將一種表面活性劑溶於(2)中；(4)將崩解劑、賦形劑等輔料混懸於上述(3)溶液中；(5)將上述(4)混懸液中的有機溶媒揮幹；(6)將揮乾物研細，過篩，即可。
10.權利要求9所述的過程，其中有機溶媒為甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、乙酸乙酯、乙醚之一。
全文摘要
本發明公開了一種FK506的口服藥物組合物，此組合物含有FK506和一種環糊精。此組合物可大大提高FK506在水中的溶解度，進而提高其生物利用度。
文檔編號A61P37/00GK1823771SQ20051001236
公開日2006年8月30日 申請日期2005年2月21日 優先權日2005年2月21日
發明者張莉, 張麗霞, 張永祥 申請人:華北製藥集團有限責任公司