蕓薹屬游離小孢子再生植株的培養基配方的製作方法

2023-11-07 01:47:52

專利名稱：蕓薹屬游離小孢子再生植株的培養基配方的製作方法
技術領域：
本發明涉及園藝作物蕓薹屬的小孢子再生植株的培養基配方的改進，屬於 生物工程領域。
背景技術：
傳統的小孢子培養均是採用MS和F培養基，MS與F培養基無機鹽濃度 較高，成本較高；且激素的濃度不合理，種類不齊全，因此誘導分化率較低。

發明內容
本發明就是針對上述問題，提供一種誘導成胚率高、分化率高的蕓薹屬遊 離小孢子再生植株的培養基配方。
為實現上述目的，本發明採用如下技術方案，本發明的培養基包括胚狀體 誘導培養基、分化培養基和生根培養基，所述的胚狀體誘導培養基包括大量元 素、微量元素和有機元素，所述的大量元素包括KNO380-200mg，Ca(NO)2 4H20 400—600 mg， KH2P04 80—200 mg， FeS04 7H20 22-30 mg, EDTA Na2 28-42 mg; 所 述的微量元素包括KI 0.5-1.0 mg，CoCl2 6H20 0. 01-0. 05 mg， H3B03 5-8 mg,Na2Mo04 2H20 0.1-0. 5 mg, MnS04 4H20 18—25 mg， CuS04 5H20 0.01-0.05 mg， ZnS04 7H20 6—10 mg;所述的有機元素包括肌醇60-150 mg，煙酸2-10 mg， 吡哆醇0.2-0.7mg，硫胺素0. 2-0. 7 mg，甘氨酸1. 5-2. 5 mg，葉酸0.2-0.7mg， 生物素0. 01-0. 1 mg，穀氨醯胺600-1000 mg，絲氨酸60-150 mg，谷光甘肽20-40 mg， 6-苄基腺嘌呤0. 5-1. 5 mg，蔗糖50-200 g，活性炭0. 1-0. 5 g，用水定容 至1L，pH6. 0-6.5;
所述的分化培養基包括大量元素、微量元素和有機元素，所述的大量元素 包括NH4N031500-2000 mg， KN031800-2000 mg， CaCl2 2H20 300-500 mg, MgS02 7H20200-500 mg， KH2P04 100-250 mg， FeS04 7H20 25-30mg， EDTA Na2 25-45 mg， 所述的微量元素包括KI0.5-1.0 mg，CoCl2 6H20 0.01-0.05 mg, H3B03 5-8 mg，Na2Mo04 2H20 0.1-0. 5 mg， MnS04 4H20 18-25 mg， CuS04 5H20 0. 01_0.05 mg， ZnS04 7H20 6-10 mg，所述有機元素包括肌醇60-150 mg，煙酸0. 2-0. 8 mg， 吡哆醇0. 2-0. 7 mg，硫胺素0. 1-0. 15 mg，甘氨酸1. 5-2. 5 mg，蔗糖20-50g， 瓊脂8-12 g，用水定容至lL，p朋.O-6.5;
生根培養基包括大量元素、微量元素和有機元素，其中大量元素是分化培 養基大量元素的濃度的一半，微量元素與分化培養基微量元素的濃度一致，所 述的有機元素包括肌醇60-150 mg，煙酸0.2-0.8 mg，吡哆醇0. 2-0. 7 mg， 硫胺素O. 1-0. 15 mg，甘氨酸1. 5-2. 5 mg，蔗糖10-20g，瓊脂8-10g，用水定 容至1L， pH5. 8-5.9;
作為另一種優選方案所述的分化培養基中添加激動素0. 01-5卯m、 6苄基 嘌呤0.01-5ppm、萘乙酸0.01-5ppm。
本發明的有益效果
1. 基因型適應性廣，出胚率較高；且由於一個胚代表著一種遺傳基因型， 所以本發明為育種提供了大量的新基因型純系，極大地豐富了蕓薹屬的育種資 源；
2. 可將常規育種中純合材料的獲取時間由8 — 10年降低為2年，且遺傳背 景完全納合；可加快育種步伐，大大的縮短育種時間，應用前景廣闊。
具體實施例方式
下述實施例中所用方法如無特別說明均為常規方法，所有培養基均用蒸餾 水配製。
實施例l 具體配方見表1:表l _蕓薹屬游離小孢子的培養基配方及滅菌方式
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實施例2
具體配方見表2:
表2 蕓薹屬游離小孢子培養的培養基配方及滅菌方式
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權利要求
1、蕓薹屬游離小孢子再生植株的的培養基配方，其特徵在於培養基包括胚狀體誘導培養基、分化培養基和生根培養基，所述的胚狀體誘導培養基包括大量元素、微量元素和有機元素，所述的大量元素包括KNO380-200mg，Ca(NO)2·4H2O 400-600mg，KH2PO4 80-200mg，FeSO4·7H2O 22-30mg，EDTA·Na2 28-42mg；所述的微量元素包括KI 0.5-1.0mg，CoCl2·6H2O0.01-0.05mg，H3BO35-8mg，Na2MoO4·2H2O 0.1-0.5mg，MnSO4·4H2O 18-25mg，CuSO4·5H2O 0.01-0.05mg，ZnSO4·7H2O 6-10mg；所述的有機元素包括肌醇60-150mg，煙酸2-10mg，吡哆醇0.2-0.7mg，硫胺素0.2-0.7mg，甘氨酸1.5-2.5mg，葉酸0.2-0.7mg，生物素0.01-0.1mg，穀氨醯胺600-1000mg，絲氨酸60-150mg，谷光甘肽20-40mg，6-苄基腺嘌呤0.5-1.5mg，蔗糖50-200g，活性炭0.1-0.5g，用水定容至1L，pH6.0-6.5。所述的分化培養基包括大量元素、微量元素和有機元素，所述的大量元素包括NH4NO31500-2000mg，KNO31800-2000mg，CaCl2·2H2O300-500mg，MgSO2·7H2O200-500mg，KH2PO4 100-250mg，FeSO4·7H2O 25-30mg，EDTA·Na225-45mg，所述的微量元素包括KI0.5-1.0mg，CoCl2·6H2O 0.01-0.05mg，H3BO3 5-8mg，Na2MoO4·2H2O 0.1-0.5mg，MnSO4·4H2O 18-25mg，CuSO4·5H2O 0.01-0.05mg，ZnSO4·7H2O6-10mg，所述有機元素包括肌醇60-150mg，煙酸0.2-0.8mg，吡哆醇0.2-0.7mg，硫胺素0.1-0.15mg，甘氨酸1.5-2.5mg，蔗糖20-50g，瓊脂8-12g，用水定容至1L，pH6.0-6.5。生根培養基包括大量元素、微量元素和有機元素，其中大量元素是分化培養基大量元素的濃度的一半，微量元素與分化培養基微量元素的濃度一致，所述的有機元素包括肌醇60-150mg，煙酸0.2-0.8mg，吡哆醇0.2-0.7mg，硫胺素0.1-0.15mg，甘氨酸1.5-2.5mg，蔗糖10-20g，瓊脂8-10g，用水定容至1L，pH5.8-5.9。
2、根據權利要求1所述的蕓薹屬游離小孢子再生植株的培養基配方，其特 徵在於所述的分化培養基中添加激動素0. 01-5ppm、 6苄基嘌呤0.01-5ppm、萘 乙酸0. 01-5ppm。
全文摘要
蕓薹屬游離小孢子再生植株的培養基配方涉及園藝作物蕓薹屬的小孢子再生植株的培養基配方的改進，屬於生物工程領域。本發明就是提供一種誘導成胚率高、分化率高的蕓薹屬游離小孢子再生植株的培養基配方。本發明的培養基包括胚狀體誘導培養基、分化培養基和生根培養基，所述的胚狀體誘導培養基、分化培養基和生根培養基均包括大量元素、微量元素和有機元素。本發明為育種提供了大量的新基因型純系，極大地豐富了蕓薹屬的育種資源。
文檔編號C12N5/04GK101433184SQ20071015812
公開日2009年5月20日 申請日期2007年11月15日 優先權日2007年11月15日
發明者劉祥軍 申請人:劉祥軍