新型豬用生長調節劑的製備方法
2023-05-01 08:08:26 1
專利名稱::新型豬用生長調節劑的製備方法
技術領域:
:本發明涉及一種畜禽伺養飼料添加劑的生產方法,特別是一種專用於食用豬生長調節劑的製備方法。二
背景技術:
:目前,我國養豬生產、尤其是地方品種豬生產中普遍存在生長速度慢、胴體背膘過厚、瘦肉率低等問題,嚴重製約我國養豬業的高效發展。因此,提高地方品種豬的生長速度、減少脂肪過度沉積、提高胴體品質是養豬生產中亟待解決的重大問題。近年來,多種藥物添加劑、激素類生長物質的過度和不規範使用,雖然在一定程度上提高了養豬生產的經濟效益,但其在豬肉產品中的殘留已嚴重威脅著人類的健康,因此生豬的健康養殖和安全優質豬肉產品的生產是目前養豬業努力實現的目標。環腺苷一磷酸(adenosine-3,,5,-monophosphate,cAMP)是動物體內天然存在的、對生長和代謝具有重要調節作用的細胞因子,由於其只能在細胞內發揮作用,因而難以在生產中應用。二
發明內容本發明的目的是提供一種新型豬用生長調節劑的製備方法,利用研究發現的DBC(N6-2'-O-dibutyryladenosine-3',5,-monophosphate)屬cAMP的衍生物,具有親脂性,可通過細胞膜在細胞內發揮作用,與cAMP具有相同的生理作用和作用機制。外源的DBC在體內發揮作用後,多餘的可被磷酸二酯酶降解,不會在動物體內殘留,與其他化學藥物添加劑相比具有重高的安全性。通過製備DBC製劑與輔劑配合研製成可經飼料添加或皮下注射的製劑,並經動物試驗驗證具有穩定性好、安全性高、效果明顯的新型豬用生長調節劑。一種新型豬用生長調節劑的製備方法,製備步驟如下(1)製備cAMP以ATP為原料,加入Ba(0H)2,溶於蒸餾水中,於96。C回餾加熱40min,然後迅速冷卻至室溫,離心後取上清液即為cAMP樣品;(2)cAMP成鹽cAMP、0.4mol/L三乙胺和無水吡啶按1:7.2:5.3(w/v/v)比例加入,冰凍下在cAMP溶液中加入0.4mol/L三乙胺溶液,室溫減壓抽去過剩的三乙胺至無臭味為止,在55。C溫度下,繼續減壓濃縮成黃色油狀物,加入無水吡啶,振搖脫水,在55。C下繼續減壓抽去吡啶,再用無水吡啶重複脫水1次,於55"C減壓抽乾至成海綿狀物,乾燥後即得cAMP三乙胺鹽;(3)醯化和水解cAMP三乙胺鹽、重蒸丁酐、無水吡啶和蒸餾水按1:7.5:15:6.9(w/w/v/v)比例加入,在cAMP三乙胺鹽中加入無水吡啶和重蒸丁酐,振搖,置35-4(TC恆溫室密閉避光反應一周,反應完全後取出反應液,冷卻至l(TC以下,緩慢加入蒸餾水,並使水解時溫度保持在l(TC以下,結束後將水解液置冰浴中放置使反應完全,然後在5(TC以下減壓濃縮,加約2倍量乙醚混勻,於2(TC下用約3倍量蒸餾水分7次抽提,去乙醚層,合併水層,在40。C以下減壓濃縮使成黃色糖漿狀物,再用乙醚提取2次,室溫抽去剩餘乙醚,用無水乙醇溶解,即得DBC。(4)製備DBC鈉鹽DBC、氯化鈉、無水乙醚和無水乙醇按1:0.265:9.5:0.1(w/v/v/v)比例加入,在DBC中加入氯化鈉溶液,充分混勻後室溫減壓濃縮至幹,加l/5無水乙醚溼潤,抽乾後乾燥過夜,次日用無水乙醇溶解,在冰浴中加入另4/5的無水乙醚,置冷室l小時後過濾,濾餅用無水乙醚洗滌,減壓乾燥後即得DBC鈉鹽。(5)DBC結構的鑑定經質譜掃描分析鑑定,產品的分子式為C18H23N508PNa,分子量為490.0。(6)DBC的性質DBC鈉鹽為白色結晶狀粉末,可溶於水和乙醇,不溶於乙醚;對熱和酸鹼較穩定,加熱至50-85。C其含量不受影響,加熱至90。C以上開始受到破壞,加熱至IO(TC其含量仍保留75%,加熱至ll(TC以上時明顯受到破壞,含量降到20%以下;在pH3-IO範圍內比較穩定,在pH3-5範圍內表現出最高的活性。本發明將DBC鈉鹽與不同輔劑按不同比例混合後可經詞料添加和皮下注射的DBC生長調節劑。經動物實驗證明飼料添加和皮下注射DBC調節劑可被動物有效吸收,穩定性好,顯著提高豬的生長性能、改善胴體品質,並且不會在動物體內殘留,與其他化學藥物添加劑相比具有重高的安全性。三具體實施例方式一種新型豬用生長調節劑的製備方法,其步驟如下(1)製備cAMP以ATP為原料,加入Ba(0H)2,溶於蒸餾水中,於96。C回餾加熱40min,然後迅速冷卻至室溫,離心後取上清液即為cAMP樣品;(2)cAMP成鹽cAMP、0.4mol/L三乙胺和無水吡啶按1:7.2:5.3(w/v/v)比例加入,冰凍下在cAMP溶液中加入0.4mol/L三乙胺溶液,室溫減壓抽去過剩的三乙胺至無臭味為止,在55"溫度下,繼續減壓濃縮成黃色油狀物,加入無水吡啶,振搖脫水,在55。C下繼續減壓抽去吡啶,再用無水吡啶重複脫水1次,於55"減壓抽乾至成海綿狀物,乾燥後即得CAMP三乙胺鹽;(3)醯化和水解cAMP三乙胺鹽、重蒸丁酐、無水吡啶和蒸餾水按1:7.5:15:6.9(w/w/v/v)比例加入,在cAMP三乙胺鹽中加入無水吡啶和重蒸丁酐,振搖,置35-40。C恆溫室密閉避光反應一周,反應完全後取出反應液,冷卻至l(TC以下,緩慢加入蒸餾水,並使水解時溫度保持在l(TC以下,結束後將水解液置冰浴中放置使反應完全,然後在50。C以下減壓濃縮,加約2倍量乙醚混勻,於20。C下用約3倍量蒸餾水分7次抽提,去乙醚層,合併水層,在4(TC以下減壓濃縮使成黃色糖漿狀物,再用乙醚提取2次,室溫抽去剩餘乙醚,用無水乙醇溶解,即得DBC。(4)製備DBC鈉鹽DBC、氯化鈉、無水乙醚和無水乙醇按1:0.265:9.5:0.1(w/v/v/v)比例加入,在DBC中加入氯化鈉溶液,充分混勻後室溫減壓濃縮至幹,加l/5無水乙醚溼潤,抽乾後乾燥過夜,次日用無水乙醇溶解,在冰浴中加入另4/5的無水乙醚,置冷室l小時後過濾,濾餅用無水乙醚洗滌,減壓乾燥後即得DBC鈉鹽。(5)根據詞料添加和皮下注射兩種不同的使用方法,選擇不同的輔劑按比例與DBC混合,製成不同的製劑。飼料添加DBC調節劑DBC鈉鹽(固體)輔劑1=1:5(w/w),混勻後添加於詞料中使用,為白色粉狀製劑。皮下注射DBC調節劑DBC鄰鹽(液體)輔劑2=l:2(v/v),混勻後分裝滅菌,皮下注射使用,為無色透明液體。動物實驗1、DBC的吸收特性選擇斷奶仔豬12頭,公母各一半,隨機分為2組,每組6頭。第一組在基礎日糧中添加DBC製劑20ppm,第二組皮下注射DBC製劑1.Omg/kg體重。分別於採食和注射後0.5h、1.Oh、3.Oh、5.Oh、8.Oh、12.Oh、17.Oh、24.Oh、34.Oh、48.Oh、67,Oh、72.Oh、96.Oh前腔靜脈採血5ml,測定血漿中DBC的含量。結果表明,飼料添加後3小時血液中DBC達到最大濃度,為84.75pmol/ml;皮下注射後2小時血液中DBC達到最大濃度,為92.96pmol/ml;之後血液中DBC的濃度逐漸下降,在96h達到最低水平。證明飼料添加和皮下注射DBC可被動物有效吸收。2、DBC對豬生長性能的調控選擇30kg體重的斷奶仔豬42頭,隨機分為7組,每組6頭。I、II和III組分別皮下注射DBC製劑0.5、1.0和1.5mg/kg體重;IV、V和V工組分別飼料添加DBCIO、20和30ppm,VH為對照組,飼餵基礎日糧。試驗至90kg體重時結束。DBC對豬生長性能的調節見表1。表lDBC豬生長性能的調節tableseeoriginaldocumentpage7注同行肩標小寫字母不同者差異顯著(p<0.05)。從表中結果可見,n、m組和v、vi組比vn組日增重分別提高ii.83%、i3.12%(P<0.05)和11.21%、12.24%(P<0.05),II、III組比I組日增重分別提高8.71%和9.92%(P<0.05),V、Vl組比IV組日增重分別提高5.04y。和5.43%(P<0.05)。n、III組和V、VI組比VII組料重比分別降低18.73%、14.83呢(P〈0.05)和19.62%、18.73%(P<0.05)。證明飼料添加和皮下注射DBC製劑可顯著提高豬的生長性能,且以皮下注射l.Omg/kg體重和詞料添加20ppm作用效果最好,兩種使用方法對豬生長性能的調節無顯著差異。3、DBC對豬胴體組成的影響試驗至90kg體重結束時屠宰,通過屠宰試驗測定豬的胴體組成。DBC對豬胴體組成的影響見表2。表2DBC對豬胴體組成的影響tableseeoriginaldocumentpage8注同行肩注小寫字母不同者差異顯著(p<0.05)。表2的結果表明,II、III組和V、VI組比VII組眼肌面積分別提高31.99%、35.97%(P〈0.05)和36.39%、37.15%(P<0.05),背膘厚分別降低19.95%、21.21%(P<0.05)和20.97%、20.50%(P〈0.05),瘦肉率分別提高12.42%、13.87%(P〈0.05)和11.94%、15.52%(P<0.05)。證明DBC製劑能顯著改善豬的胴體組成,且以皮下注射1.Omg/kg體重和飼料添加20ppm效果最好,兩種使用方法對豬胴體組成的影響無顯著差異。權利要求1、一種新型豬用生長調節劑的製備方法,其特徵在於製備步驟如下(1)製備cAMP以ATP為原料,加入Ba(OH)2,溶於蒸餾水中,於96℃回餾加熱40min,然後迅速冷卻至室溫,離心後取上清液即為cAMP樣品;(2)cAMP成鹽cAMP、0.4mol/L三乙胺和無水吡啶按1∶7.2∶5.3(w/v/v)比例加入,冰凍下在cAMP溶液中加入0.4mol/L三乙胺溶液,室溫減壓抽去過剩的三乙胺至無臭味為止,在55℃溫度下,繼續減壓濃縮成黃色油狀物,加入無水吡啶,振搖脫水,在55℃下繼續減壓抽去吡啶,再用無水吡啶重複脫水1次,於55℃減壓抽乾至成海綿狀物,乾燥後即得cAMP三乙胺鹽;(3)醯化和水解cAMP三乙胺鹽、重蒸丁酐、無水吡啶和蒸餾水按1∶7.5∶15∶6.9(w/w/v/v)比例加入,在cAMP三乙胺鹽中加入無水吡啶和重蒸丁酐,振搖,置35-40℃恆溫室密閉避光反應一周,反應完全後取出反應液,冷卻至10℃以下,緩慢加入蒸餾水,並使水解時溫度保持在10℃以下,結束後將水解液置冰浴中放置使反應完全,然後在50℃以下減壓濃縮,加約2倍量乙醚混勻,於20℃下用約3倍量蒸餾水分7次抽提,去乙醚層,合併水層,在40℃以下減壓濃縮使成黃色糖漿狀物,再用乙醚提取2次,室溫抽去剩餘乙醚,用無水乙醇溶解,即得DBC。(4)製備DBC鈉鹽DBC、氯化鈉、無水乙醚和無水乙醇按1∶0.265∶9.5∶0.1(w/v/v/v)比例加入,在DBC中加入氯化鈉溶液,充分混勻後室溫減壓濃縮至幹,加1/5無水乙醚溼潤,抽乾後乾燥過夜,次日用無水乙醇溶解,在冰浴中加入另4/5的無水乙醚,置冷室1小時後過濾,濾餅用無水乙醚洗滌,減壓乾燥後即得DBC鈉鹽。全文摘要本發明公開一種新型豬用生長調節劑的製備方法中是以ATP為原料,加入Ba(OH)2溶於蒸餾水中,於96℃回餾加熱40min,冷卻離心後得cAMP;再將cAMP、0.4mol/L三乙胺和無水吡啶按比例生成cAMP三乙胺鹽,經醯化和水解製備出DBC;DBC、氯化鈉、無水乙醚和無水乙醇按比例生成DBC鈉鹽。將DBC鈉鹽與不同輔劑按比例混合製備成飼料添加和皮下注射的DBC生長調節劑。經動物實驗證明飼料添加和皮下注射DBC調節劑可被動物有效吸收,穩定性好,顯著提高豬的生長性能、改善胴體品質,並且不會在動物體內殘留,與其他化學藥物添加劑相比具有重高的安全性。文檔編號A23K1/16GK101429223SQ20071006635公開日2009年5月13日申請日期2007年11月5日優先權日2007年11月5日發明者勇劉,曦張,程美玲,高士爭申請人:雲南農業大學