一種絲裂黴素c多泡脂質體及其製備方法
2023-05-01 01:03:11
專利名稱：一種絲裂黴素c多泡脂質體及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種絲裂黴素C的緩釋製劑，特別涉及一種絲裂黴素C多泡脂質體及其製備方法。
背景技術：
絲裂黴素C(Mitomycin C，MMC)是Hata等人於1955年發現的抗生素類廣譜抗癌藥物，為細胞周期非特異性藥物。絲裂黴素C對腫瘤細胞的G1期、特別是晚G1期及早S期最敏感，在組織中經酶活化後，它的作用類似於雙功能或三功能烷化劑，可與DNA發生交叉聯結，抑制DNA合成，對RNA及蛋白合成也有一定的抑制作用。到目前為止，本品已經在臨床上應用了20多年，是治療各種實體瘤的有效藥物。其臨床上主要用於消化道癌症，對肺癌、乳腺癌、宮頸癌等也有顯著療效，還可用於惡性淋巴瘤的聯合治療。另外，絲裂黴素C還可用於小梁切除術治療青光眼，因切除手術後常發生球結膜下和鞏膜之間成纖維細胞過度增生、纖維化、瘢痕形成致濾過通道阻塞，使濾過泡難以形成，發生率可達15％～30％，而抗代謝物絲裂黴素C可增加小梁切除術的成功率，已經得到多年臨床應用的肯定。絲裂黴素C作為抗癌藥物的一種，有嚴重的全身性毒性，治療窗窄，而藥物本身性質不穩定，目前只能製成凍乾粉針，臨用前配製成溶液靜脈注射。絲裂黴素C在體內半衰期短，治療過程中需多次注射給藥，給藥後需有護理人員看護，極為不便，患者順應性差。
另一方面，Kim等人於1983年最先發現並研究了多泡(多囊)脂質體，他們通過復乳法，以磷脂、膽固醇和中性脂質為成膜材料，以氯仿和乙醚為有機溶劑，成功製備了多泡脂質體，並憑藉光學顯微鏡和電鏡觀察了多泡脂質體的微觀結構。在製備過程中，首先將藥物溶液和油相在機械作用力下形成W/O(油包水)型初乳，再將初乳與外水相混合製得復乳，通過氮氣吹乾除去有機溶劑製得多泡脂質體混懸液。多泡脂質體顆粒的平均粒徑在5～50μm之間。通過復乳法製備得多泡脂質體具有高包封率(20％～90％)、高載藥量、高穩定性(4℃下可保存一年以上)、低滲漏、緩釋作用(可延遲釋放數天至數周)。因其非同心圓的拓樸結構，使得多泡脂質體在注射部位形成藥物「儲庫」，隨著磷脂雙分子層的不斷代謝，包封在囊泡中的藥物逐步釋放至血液或病變部位，發揮很好的延遲釋放作用。通過調節製備過程中的參數和處方比例，可以輕鬆控制藥物釋放時間在幾天到數周之間。
然而，目前存在的問題是由於不同的藥物活性成分有不同的理化性質和作用機理，其製備包封率和藥物釋放及製劑穩定性有較大的差異，因此針對具體藥物及其釋放要求，需研究採用特定的處方和工藝。
發明內容
本發明要解決的技術問題即為上述課題，提供一種具有緩釋作用的絲裂黴素C多泡脂質體及其製備方法。
本發明的技術方案包括一種絲裂黴素C多泡脂質體的製備方法，其可以包括下列步驟①將脂質成分溶於有機溶劑中，以作為脂質相，其中該脂質成分包括重量比為2∶1～4∶1的中性磷脂和膽固醇，以及在脂質成分中佔摩爾百分比為2～6％的中性脂質，該中性磷脂在脂質相中的濃度為20～40mg/ml；②將絲裂黴素C溶於緩衝鹽溶液中使其濃度為20μg/ml～3000μg/ml，調節pH為7.4～9.2以作為內水相；③將等體積的所述內水相加入脂質相上層，混合乳化製得油包水型初乳；
④將2～6倍體積的外水相加入所述油包水型初乳的上層，攪拌形成水包油包水(W/O/W)型復乳，其中外水相中含有3.2～6g/100ml的滲透壓調節物；⑤除去步驟④得到的復乳中的有機溶劑而製得絲裂黴素C多泡脂質體。
其中，上述中性磷脂及膽固醇為成膜材料；膽固醇為膜穩定劑，可通過改變磷脂相轉變溫度調節脂質體膜層的流動性，從而改善脂質體的穩定性，減小貯存過程中因脂質體膜層相變引起的藥物滲漏。膽固醇用量過小，其調節作用甚微，當用量過大時難以形成脂質體的磷脂雙分子層，研究表明當磷脂與膽固醇重量比在2∶1～4∶1之間時形成的脂質體最穩定。
本發明步驟①中所述的中性磷脂是指處於其等電點時淨電荷為零的磷脂，其選自卵磷脂、大豆磷脂、腦磷脂、鞘磷脂、氫化大豆磷脂、二肉豆蔻醯磷脂醯膽鹼(DMPC)、二油醯磷脂醯膽鹼(DOPC)、磷脂醯乙醇胺、二油醯磷脂醯乙醇胺(DOPE)等天然和合成磷脂中的一種或幾種；本發明優選自卵磷脂、二油醯磷脂醯膽鹼和二油醯磷脂醯乙醇胺。
而本發明所說的中性脂質是指本身沒有形成囊泡能力的，並且缺少帶電荷的或親水的「頭部」基團的油或脂肪，如三油酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三癸酸甘油酯、三辛酸甘油酯、三己酸甘油酯、維生素E和角鯊烯中的一種或幾種。其在脂質體中主要起支架作用，分布於非同心水性腔室磷脂雙分子層節點處，支撐起多泡(多囊)脂質體的拓撲結構；中性脂質是形成多泡(多囊)脂質體的決定性因素之一。本發明優選三油酸甘油酯。
該有機溶劑可為能溶解脂質成分的任何溶劑，通常選自乙醚、氯仿、二氯甲烷、異丙基乙醚、四氫呋喃、滷代醚和滷代酯中的一種或幾種。本發明優選二氯甲烷或乙醚-氯仿混合物。更佳為二氯甲烷，因二氯甲烷可有效溶解磷脂和類脂，並且毒性低於氯仿，揮幹速率更優。
該步驟①的脂質成分中還可以含有帶負電荷或正電荷的類脂，帶電荷類脂可有效調節脂質體表面電荷，使脂質體帶負電或正電，以增強制劑穩定性。該類脂與中性磷脂的重量比為1∶5～1∶60，類脂用量太少作用不明顯，太多則增加成本，本發明優選1∶5～1∶20。
本發明所述的帶負電荷的類脂選自磷脂醯絲氨酸、二棕櫚醯磷脂醯絲氨酸(DPPS)、二硬脂醯磷脂醯絲氨酸(DSPS)、磷脂醯甘油、二棕櫚醯磷脂醯甘油(DPPG)、二硬脂醯磷脂醯甘油(DSPG)、磷脂醯肌醇、二棕櫚醯磷脂醯肌醇(DPPZ)、二硬脂醯磷脂醯肌醇(DSPZ)、磷脂酸、二棕櫚醯磷脂酸(DPPA)及二硬脂醯磷脂酸(DSPA)中的一種或幾種；而所述帶正電荷的類脂選自二醯基三甲胺丙烷、二醯基二甲胺丙烷、硬脂胺(SA)及膠原蛋白中的一種或幾種。
本發明的類脂最優選硬脂胺和/或膠原蛋白等帶正電荷的類脂。因為絲裂黴素C在鹼性條件下呈電負性，使磷脂雙分子層帶相反電荷有利於提高電負性藥物的包封率，並可減小藥物滲漏。另外，加入一定電荷類脂可增大水性腔室，從而增大包封體積，並可增加脂質體製劑的穩定性，減小粒子沉降和聚集。
考慮到絲裂黴素C的分子結構中含有氨基苯醌、氨基甲酸醌及氨雜三丙烷3個重要組成部分，在酸、鹼、光照、高溫條件下均不穩定，在酸性溶液中三元環發生酸催化開環，而鹼性過強氨甲酸酯鏈水解；加之絲裂黴素C的降解產物無療效，且毒性更大。故為了加強絲裂黴素C的穩定性，本發明人經研究發現在上述步驟②中，調節內水相pH值至一定鹼性範圍，可減少絲裂黴素C的降解，而pH在8.0～8.7範圍則絲裂黴素C最穩定。
較佳地，步驟②的內水相中絲裂黴素C的濃度為500～1000μg/ml，在此範圍內，即可具有較高的藥物濃度，又可取得較高的包封率。而步驟②中所述的緩衝鹽溶液則選用脂質體製備領域中最常規使用的磷酸鹽緩衝溶液。
步驟②的內水相中還可以加入不超過10％(w/v)，一般不超過4％(w/v)的滲透壓調節物，以進一步增強制劑穩定性；其中，此處及下文中所提及的重量體積(w/v)百分比均指g/100ml。
本發明所述滲透壓調節物可為現有技術中常用於調節滲透壓的物質，如葡萄糖、蔗糖、甘露醇、麥芽糖等碳水化合物類，以及氯化鈉等。本發明優選葡萄糖和/或蔗糖。
上述步驟③中所述混合乳化可採用現有技術，如通過攪拌、振蕩、聲處理、超聲波、高速剪切勻漿機等裝置和方法來處理；本發明優選採用高速剪切勻漿機。
而上述步驟④中混合形成復乳和步驟⑤中的去除溶劑方法均可採用現有技術，其中去除溶劑方法包括但不僅限於氣流吹乾、減壓蒸發等，通常選用氮氣、氦氣、氬氣等惰性氣體及氫氣、二氧化碳等氣體吹乾溶劑，最常用且成本低的是氮氣吹乾。
本發明還提供一種絲裂黴素C多泡脂質體，其是由上述製備方法製得的。
本發明通過將絲裂黴素C製成緩釋「儲庫」製劑，可以解決藥物穩定性和全身毒性兩方面問題。將絲裂黴素C包封在脂質體中4℃條件下保存可有效降低藥物的降解；藥物緩釋可使局部藥物濃度維持在有效的治療濃度，減少給藥次數，提高患者順應性。本發明的絲裂黴素C多泡脂質體具有高的包封率，在體內、外試驗中均顯示有良好的緩釋作用，從而較現有製劑可有更佳的抗細胞增殖及抗腫瘤效果，並由此降低了用藥次數及總用藥量，進一步降低了全身毒性。
圖1為本發明絲裂黴素C多泡脂質體的體外釋放-時間曲線圖。
圖2為本發明絲裂黴素C多泡脂質體混懸液在小鼠體內的血藥濃度-時間曲線圖。
圖3為作為對照的現有絲裂黴素C溶液在小鼠體內的血藥濃度-時間曲線圖。
具體實施例方式
下面用實施例來進一步說明本發明，但本發明並不受其限制。
下面實施例中絲裂黴素C多泡脂質體粒徑採用粒度大小分析儀檢測；包封率測定方法為取0.5mL本發明絲裂黴素C多泡脂質體混懸液，加入4.5mL生理鹽水，混和均勻，600×g離心5分鐘，分離上清液和沉澱。依據已建立的分析方法檢測(中國藥典2005版二部p176)上清液中游離絲裂黴素C濃度；將沉澱用10％的Triton X-100溶液破膜溶解，依法測定包封的絲裂黴素C的濃度，用以下公式計算絲裂黴素C多泡脂質體的包封率包封率(％)＝被包封的絲裂黴素C量/混懸液中絲裂黴素C總量×100實施例1步驟1精密稱取卵磷脂200mg、膽固醇50mg、硬脂胺40mg和三油酸甘油酯17.4mg，用5ml二氯甲烷溶解，作為脂質相；步驟2精密稱取5mg絲裂黴素C和蔗糖100mg，用適量蒸餾水溶解，並用磷酸二氫鈉和氫氧化鈉調節pH至8.0，定容至5ml，作為內水相，緩慢加入脂質相上層；步驟3用高速剪切勻漿機(Fluko，ATS工業系統有限公司)將步驟2所得混合物在10000rpm的轉速下作用9分鐘，製得W/O型初乳；步驟4為製得二氯甲烷微球混懸液，將20mL含有3.2％(w/v)葡萄糖的外水相加在W/O型初乳的上層，以4500rpm的轉速作用15秒鐘，形成二氯甲烷微球的混懸液；步驟5為製得多泡脂質體，將上述混懸液注入盛有30mL外水相的1000mL錐形瓶中，通以氮氣(8L/min)，37℃水浴20分鐘緩慢除去二氯甲烷；向錐形瓶中加入60mL生理鹽水，在600×g條件下離心5分鐘分離脂質體，棄上清液，用生理鹽水洗滌沉澱三次，將所得沉澱再分散在5～10ml生理鹽水中，得多泡脂質體混懸液。
測得絲裂黴素C多泡脂質體粒徑為5～50μm；包封率為87.4％。
實施例2步驟1精密稱取卵磷脂200mg、膽固醇50mg、膠原蛋白10mg和三油酸甘油酯15.6mg，用5ml二氯甲烷溶解，作為脂質相；步驟2精密稱取5mg絲裂黴素C和蔗糖200mg，用適量蒸餾水溶解，並用磷酸二氫鉀和氫氧化鉀調節pH至8.7，定容至5ml，作為內水相，緩慢加入脂質相上層；步驟3同實施例1；步驟4為製得二氯甲烷微球混懸液，將20mL含有6.0％(w/v)葡萄糖的外水相加在W/O型初乳的上層，以4500rpm的轉速作用15秒鐘，形成二氯甲烷微球的混懸液；步驟5同實施例1。
測得絲裂黴素C多泡脂質體粒徑為5～50μm；包封率為75.1％。
實施例3步驟1精密稱取二油醯磷脂醯膽鹼100mg、膽固醇50mg、硬脂胺20mg和三油酸甘油酯3.4mg，用5ml氯仿-乙醚混合物(體積比為1∶1)溶解，作為脂質相；步驟2精密稱取2.5mg絲裂黴素C，用適量蒸餾水溶解，並用磷酸氫二鈉和氫氧化鈉調節pH至8.4，定容至5ml，作為內水相，緩慢加入脂質相上層；步驟3同實施例1；步驟4為製得氯仿-乙醚微球混懸液，將60mL含有3.2％(w/v)葡萄糖的外水相加在W/O型初乳的上層，以4500rpm的轉速作用15秒鐘，形成氯仿-乙醚微球的混懸液；步驟5同實施例1。
測得絲裂黴素C多泡脂質體粒徑為5～50μm；包封率為80.6％。
實施例4步驟1精密稱取二油醯磷脂醯乙醇胺150mg、膽固醇50mg、膠原蛋白15mg和三油酸甘油酯7.5mg，用5ml氯仿-乙醚混合物(體積比為1∶1)溶解，作為脂質相；步驟2精密稱取3.75mg絲裂黴素C，100mg蔗糖，用適量蒸餾水溶解，並用磷酸氫二鈉和氫氧化鈉調節pH至6.5，定容至5ml，作為內水相，緩慢加入脂質相上層；步驟3同實施例1；步驟4為製得氯仿-乙醚微球混懸液，將40mL含有5.7％(w/v)葡萄糖的外水相加在W/O型初乳的上層，以4500rpm的轉速作用15秒鐘，形成氯仿-乙醚微球的混懸液；步驟5同實施例1。
測得絲裂黴素C多泡脂質體粒徑為5～50μm；包封率為76.8％。
實施例5步驟1精密稱取卵磷脂200mg、膽固醇100mg、硬脂胺40mg和三油酸甘油酯20.4mg，用5ml二氯甲烷溶解，作為脂質相；步驟2精密稱取5mg絲裂黴素C和蔗糖100mg，用適量蒸餾水溶解，並用磷酸氫二鈉和氫氧化鈉調節pH至9.2，定容至5ml，作為內水相，緩慢加入脂質相上層；步驟3同實施例1；步驟4為製得二氯甲烷微球混懸液，將20mL含有3.2％(w/v)葡萄糖外水相加在W/O型初乳的上層，以4500rpm的轉速作用15秒鐘，形成二氯甲烷微球的混懸液；步驟5同實施例1。
測得絲裂黴素C多泡脂質體粒徑為5～50μm；包封率為81.7％。
實施例6步驟1精密稱取卵磷脂120mg、膽固醇30mg和三油酸甘油酯1.6mg，用5ml二氯甲烷溶解，作為脂質相；步驟2精密稱取5mg絲裂黴素C和葡萄糖200mg，用適量蒸餾水溶解，並用磷酸氫二鉀和氫氧化鉀調節pH至8.0，定容至5ml，作為內水相，緩慢加入脂質相上層；步驟3～5同實施例1。
測得絲裂黴素C多泡脂質體粒徑為5～50μm；包封率為67.4％。
實施例7步驟1精密稱取卵磷脂200mg、膽固醇100mg、磷脂醯甘油40mg和三油酸甘油酯20.4mg，用5ml二氯甲烷溶解，作為脂質相；步驟2精密稱取5mg絲裂黴素C和蔗糖100mg，用適量蒸餾水溶解，並用磷酸氫二鉀和氫氧化鉀調節pH至8.0，定容至5ml，作為內水相，緩慢加入脂質相上層；步驟3同實施例1；步驟4為製得二氯甲烷微球混懸液，將20mL含有4％(w/v)蔗糖和40mM精氨酸的外水相加在W/O型初乳的上層，以4500rpm的轉速作用15秒鐘，形成二氯甲烷微球的混懸液；步驟5同實施例1。
測得絲裂黴素C多泡脂質體粒徑為5～50μm；包封率為54.9％。
實施例8步驟1精密稱取卵磷脂200mg、膽固醇50mg、硬脂胺40mg和三油酸甘油酯17.4mg，用5ml二氯甲烷溶解，作為脂質相；步驟2精密稱取15mg絲裂黴素C和蔗糖100mg，用適量蒸餾水溶解，並用磷酸二氫鈉和氫氧化鈉調節pH至8.0，定容至5ml，作為內水相，緩慢加入脂質相上層；
步驟3同實施例1；步驟4同實施例1；步驟5同實施例1。
測得絲裂黴素C多泡脂質體粒徑為5～50μm；包封率為79.4％。
上述實施例中所用卵磷脂為德固賽公司產品；膠原蛋白、二油醯磷脂醯膽鹼、二油醯磷脂醯乙醇胺、磷脂醯甘油購於Sigma公司；硬脂胺購於Fluka公司；膽固醇購於上海藍季科技發展有限公司；三油酸甘油酯購於廣州化學試劑廠；其餘試劑為常規市售產品。
試驗實施例1 絲裂黴素C多泡脂質體穩定性研究1.樣品製備1.1.根據實施例1製備三批絲裂黴素C多泡脂質體混懸液，批號為Y5M3-M1、Y5M3-M2、Y5M3-M3；1.2.根據實施例1，但內水相中不使用緩衝鹽溶液調節pH值，僅用蒸餾水溶解、定容來製備三批絲裂黴素C多泡脂質體混懸液，批號為Y5M3-N1、Y5M3-N2、Y5M3-N3，以作為對照。
2.保存及取樣置於4℃冰箱保存，分別於第1、2、3個月取樣，高效液相法測定絲裂黴素C含量，計算含量下降百分比。結果如下表所示。
結果表明，經調節絲裂黴素C多泡脂質體中內水相pH，可顯著提高製劑穩定性，三個月含量下降僅為0.3％左右。
試驗實施例2 絲裂黴素C多泡脂質體的體外釋放測定取實施例1的絲裂黴素C多泡脂質體混懸液10ml，用40ml磷酸緩衝溶液(pH 8.0)稀釋，將所得混懸液置於37℃恆溫搖床(轉速為15rpm)中，在預定的時間點取出等量的樣品，以600×g離心分離上清液和沉澱，依法測定上清液中絲裂黴素C的量，每個時間點的藥物釋放百分比用以下公式計算藥物釋放百分比(％)＝上清液中游離絲裂黴素C的量/多泡脂質體中包封的絲裂黴素C原始量×100結果表明在第6天(144小時)時，藥物釋放達到了80％以上，包封的絲裂黴素C基本釋放完全(如圖1所示)。說明本發明絲裂黴素C的多泡脂質體具有明顯的緩釋效果。
試驗實施例3 絲裂黴素C多泡脂質體的小鼠體內藥物動力學研究通過小鼠肌肉內注射的藥物動力學研究，證明絲裂黴素C多泡脂質體的體內緩釋作用。
取實施例1製得的多泡脂質體，配製絲裂黴素C濃度為10mg/mL的多泡脂質體混懸液備用。
1.動物昆明種小鼠80隻(雌雄各半，體重為18～22g)，按照《實驗動物管理規定》飼養、管理小鼠。試驗開始前禁食過夜，並做頸動脈插管。
2.給藥與血樣採集80隻小鼠隨機分為兩組，分別在右腿肌肉注射2.5mg/kg劑量的絲裂黴素C多泡脂質體混懸液和絲裂黴素C溶液(對照)。給藥後，在預定的時間點通過頸動脈插管採集血樣(0.3mL)，每次抽取血樣之後給小鼠注入等體積的生理鹽水。立即10,000×g離心血樣10分鐘，將所得小鼠血漿於-20℃冷凍保存，待進一步分析檢測。
3.樣品檢測3.1.分析方法的建立精密吸取血漿0.5ml置於5ml塑料離心管中，精密加入100μl內標對照硝基苯甲醛的甲醇溶液(1000μg/ml)，加入3.0ml乙酸乙酯，渦旋萃取5min，離心(11,000rpm/min，10min)將上層有機相轉移至另一5ml離心管中，下層再加2.0ml乙酸乙酯進行第二次萃取，合併乙酸乙酯層，於35～38℃水浴氮氣吹乾。殘渣用200μl甲醇復溶，混勻，離心，取上清液20μl進行HPLC分析，記錄色譜圖，以樣品峰和內標峰面積之比進行定量分析。
3.2.樣品檢測分析測定每個時間點樣品的絲裂黴素C量，利用Topfit 2.0程序計算血藥濃度-時間關係數據。
4.試驗結果由圖2可知，本發明絲裂黴素C多泡脂質體在小鼠體內呈明顯的緩釋行為，5天(120小時)後檢測到的血液中絲裂黴素C的濃度仍在1μg/ml左右；而作為對照的絲裂黴素C溶液(未包封)在肌肉注射後4小時左右血藥濃度便降低到0.1μg/ml以下(如圖3所示)。因此可以證明，絲裂黴素C經多泡脂質體包封后，有效實現了絲裂黴素C的體內緩速釋放。
權利要求
1.一種絲裂黴素C多泡脂質體的製備方法，其包括下列步驟①將脂質成分溶於有機溶劑中，以作為脂質相，其中該脂質成分包括重量比為2∶1～4∶1的中性磷脂和膽固醇，以及在脂質成分中佔摩爾百分比為2～6％的中性脂質，該中性磷脂在脂質相中的濃度為20～40mg/ml；②將絲裂黴素C溶於pH為7.4～9.2的緩衝鹽溶液中，使其濃度為20μg/ml～3000μg/ml，以作為內水相；③將等體積的所述內水相加入脂質相上層，混合乳化製得油包水型初乳；④將2～6倍體積的外水相加入所述油包水型初乳的上層，混合形成水包油包水型復乳，其中外水相中含有3.2～6g/100ml的滲透壓調節物；⑤除去步驟④得到的復乳中的有機溶劑而製得絲裂黴素C多泡脂質體。
2.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於該步驟①中所述的脂質成分中還含有帶負電荷或正電荷的類脂，該類脂與中性磷脂的重量比為1∶5～20。
3.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於所述帶負電荷的類脂選自磷脂醯絲氨酸、二棕櫚醯磷脂醯絲氨酸、二硬脂醯磷脂醯絲氨酸、磷脂醯甘油、二棕櫚醯磷脂醯甘油、二硬脂醯磷脂醯甘油、磷脂醯肌醇、二棕櫚醯磷脂醯肌醇、二硬脂醯磷脂醯肌醇、磷脂酸、二棕櫚醯磷脂酸及二硬脂醯磷脂酸中的一種或幾種；所述帶正電荷的類脂選自二醯基三甲胺丙烷、二醯基二甲胺丙烷、硬脂胺及膠原蛋白中的一種或幾種。
4.如權利要求3所述的製備方法，其特徵在於該類脂為硬脂胺和/或膠原蛋白。
5.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟①中的中性磷脂選自卵磷脂、大豆磷脂、氫化大豆磷脂、二肉豆蔻醯磷脂醯膽鹼、二油醯磷脂醯膽鹼、磷脂醯乙醇胺、二油醯磷脂醯乙醇胺、腦磷脂、鞘磷脂中的一種或幾種；該中性脂質選自三油酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三癸酸甘油酯、三辛酸甘油酯、三己酸甘油酯、維生素E和角鯊烯中的一種或幾種；該有機溶劑選自乙醚、氯仿、二氯甲烷、異丙基乙醚、四氫呋喃、滷代醚和滷代酯中的一種或幾種。
6.如權利要求5所述的製備方法，其特徵在於該中性磷脂選自卵磷脂、二油醯磷脂醯膽鹼和二油醯磷脂醯乙醇胺，該中性脂質為三油酸甘油酯，該有機溶劑為二氯甲烷或乙醚-氯仿混合物。
7.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟②中將絲裂黴素C溶於pH為8.0～8.7的磷酸鹽緩衝溶液中，使其濃度為500～1000μg/ml，以作為內水相。
8.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於步驟②中所述的內水相中還可以加入＞0g/100ml，且≤4g/100ml的滲透壓調節物。
9.如權利要求1或8所述的製備方法，其特徵在於所述滲透壓調節物為葡萄糖和/或蔗糖。
10.如權利要求1～8任一項所述的製備方法製得的絲裂黴素C多泡脂質體。
全文摘要
本發明公開了一種絲裂黴素C多泡脂質體及其製備方法，該製備方法包括下列步驟①將包括中性磷脂、膽固醇和中性脂質的脂質成分溶於有機溶劑中，使中性磷脂含量為20～40mg/ml，以作為脂質相；②將絲裂黴素C溶於緩衝鹽溶液中使其濃度為20μg/ml～3000μg/ml，以作為內水相；③將等體積的所述內水相加入脂質相上層，混合乳化製得油包水型初乳；④將含有滲透壓調節物的外水相加入所述油包水型初乳的上層，攪拌形成水包油包水型復乳；⑤除去復乳中的有機溶劑而製得絲裂黴素C多泡脂質體。該絲裂黴素C多泡脂質體具有較高的包封率，並有較佳的緩釋作用，而取得更佳的抗腫瘤效果。
文檔編號A61K9/127GK101045049SQ200610025159
公開日2007年10月3日 申請日期2006年3月28日 優先權日2006年3月28日
發明者陸偉根, 陳亭亭 申請人:上海醫藥工業研究院