吸附無細胞百白破-Sabin株脊髓灰質炎聯合疫苗及製備方法

2023-05-18 23:33:41 2

吸附無細胞百白破-Sabin株脊髓灰質炎聯合疫苗及製備方法
【專利摘要】本發明提供一種吸附無細胞百白破-Sabin脊髓灰質炎聯合疫苗及製備方法，每100ml聯合疫苗中含有下列組份：百日咳毒素3000~6000ugPN、絲狀血細胞凝集素3000~6000ugPN、百日咳桿菌粘附素1000~2000ugPN、破傷風類毒素1000～3000Lf、白喉類毒素3000~6000Lf、Al(OH)3126～154mg、sIPVⅠ型3000~6000DU、sIPVⅡ型5700~7100DU、sIPVⅢ型4500~9000DU、NaCl765~935mg、2-苯氧乙醇0~600mg、餘量H2O。該疫苗能預防多種目標疾病，減少接種針次，簡化免疫程序，提高接種率，降低交叉感染機會。
【專利說明】吸附無細胞百白破-Sab i η株脊髓灰質炎聯合疫苗及製備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種吸附無細胞百日咳、白喉、破傷風和Sabin株脊髓灰質炎聯合疫苗及其製備方法，屬於生物醫學【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 百日咳是由百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)引起的小兒呼吸道傳染病，傳染性很強。臨床特徵為咳嗽逐漸加重、呈陣發性痙攣性咳嗽，未經治療的病人，病程可延續2~3月。百日咳病是影響兒童健康和導致死亡的主要疾病之一，在未實行計劃免疫前，5歲以下兒童發病率達到20~60%。最初應用的疫苗是基於用甲醛處理以殺死細菌並使有毒物質失活後的完整菌體。自二十世紀70年代後期實施計劃免疫後,全菌體百白破(Daphtheria Tetanus and whole Pertussis Combined Vaccine,簡稱 DTwP)聯合疫苗覆蓋率大大提高。但該疫苗與包括發熱和局部反應的副作用相關。近年來，無細胞百白破是經培養，提純百日咳抗原成分、精製白喉類毒素、精製破傷風類毒素，用氫氧化鋁吸附製成，無細胞百白破(DTaP)聯合疫苗的人群血清學效果和人群保護率與DTwP疫苗相近，副反應明顯低於DTwP疫苗。因具有良好的免疫原性和安全性，而廣泛用於兒童的預防接種。但是基於對百日咳有效抗原更明確的認識，現有較少數量的高度純化的抗原的疫苗，即組份疫苗。本發明的疫苗中使用的百日咳抗原包括百日咳毒素PT，絲狀血細胞凝集素FHA，百日咳桿菌粘附素PRN。
[0003]白喉是由白喉桿菌引起的急性呼吸道傳染病，以咽、喉等處黏膜充血、腫脹並有灰白色偽膜形成為突出臨床特徵，嚴重者可引起心肌炎與末梢神經麻痺。因呼吸道堵塞和心臟衰竭的致死率高達10%。破傷風是由破傷風桿菌侵入傷口，並在傷口內繁殖、分泌毒素而引起的急性特異性感染，主要表現為全身或局部肌肉的持續性收縮和陣發性痙攣。這些細菌的毒素是相應疾病的主要病因，針對這些細菌提供保護作用的疫苗包含被弱毒化的失去侵染性的類毒素，使用甲醛進行處理來製備白喉類毒素(DT)和破傷風類毒素(TT)。
[0004]脊髓灰質炎(WPV)是由脊髓灰質炎病毒1、I1、III型引起的傳播廣泛且危害極大的急性傳染病，能侵襲任何年齡段人群，但主要是3歲以下的兒童(佔所有病例的50%)，嚴重造成肢體不可逆轉的麻痺甚至死亡。在疫苗問世前，該病在全世界範圍內流行。50年代中後期，美國的兩位科學家Salk和Sabin先後研製成功脊髓灰質炎滅活疫苗(InactivatedPoliovirus Vaccine,簡稱IPV)和口服脊髓灰質炎減毒活疫苗(Oral PoliovirusVaccine，簡稱0PV)。從此人們有了預防和消滅脊髓灰質炎的有力武器，實踐證明這兩種疫苗都是安全有效的。世界衛生組織(World Health Organization, WHO) 1988年發起全球範圍內消滅脊髓灰質炎的倡議，此後，消滅脊髓灰質炎的活動在降低脊髓灰質炎的發病率和減少脊髓灰質炎病毒的傳播範圍方面都取得了重大進展。2007年I月~2008年6月，16個國家從AFP病例的糞便標本中檢測到野毒株(WPV)，只檢測到WPVI型和WPVIII型，自1999年以來在全球範圍內未檢測到WPVII型，這些進步的取得歸功於全世界共同實施的消滅脊髓灰質炎策略。在全球消滅脊髓灰質炎(WPV)行動中，口服脊髓灰質炎減毒活疫苗(OPV)得到廣泛應用，已大幅度降低全球脊髓灰質炎的發病率。然而，由於疫苗相關麻痺型脊髓灰質炎(Vaccine Associated Paralytic Poliomyelitis, VAPP)和疫苗衍生脊髓灰質炎病毒(Vaccine- derived Poliovirus, VDPV)風險,今後必須停止口服脊髓灰質炎減毒活疫苗OPV的使用，以徹底根除脊髓灰質炎。只有使用脊髓灰質炎滅活疫苗IPV才能避免VAPP和VDPV風險。脊髓灰質炎滅活疫苗IPV可預防脊髓灰質炎爆發，並能產生群體免疫力，是消滅脊髓灰質炎後續階段的最佳選擇。目前全球有6個廠商在生產IPV，但所使用的生產毒種均為野毒株。用野毒株生產IPV需達到生物安全水平3級(BSL-3)的要求，全世界消滅脊髓灰質炎後，甚至BSL-4的條件亦非絕對保證。對於疫苗生產廠家難以達到如此嚴格的生物安全要求，因而WHO鼓勵疫苗生產廠家研發減毒株脊髓灰質炎滅活疫苗SabinIPV (Inactivated Poliovirus Vaccine, Sabin strain,簡稱 sIPV)。
[0005]在我國實施的兒童計劃免疫中，無細胞百白破疫苗、脊髓灰質炎滅活疫苗都是分開接種的，較多的接種針次，複雜化的免疫程序，不僅給家長們帶來諸多麻煩，給兒童帶來痛苦，且增加各種費用，而且會影響接種率，增加交叉感染機會，不利於計劃免疫的推進。
【發明內容】

[0006]為解決現有疫苗接種次數多，接種程序複雜等問題，本發明提供一種方便、安全、有效的吸附無細胞百白破-Sabin株脊髓灰質炎聯合疫苗(DTaP-sIPV)及其製備方法，以徹底消滅脊髓灰質炎和預防白百破，保障兒童健康成長。
[0007]本發明提供的是這樣一種吸附無細胞百白破-Sabin脊髓灰質炎聯合疫苗，其特徵在於每IOOmL聯合疫苗中含有下列組份:
百日咳毒素(PT)3000~6000ugPN
絲狀血細胞凝集素(FHA)3000~6000ugPN
百日咳桿菌粘附素(PRN)1000~2000ugPN
破傷風類毒素(TT)1000~3000Lf
白喉類毒素(DT)3000~6000Lf
Al (OH)3126 ~154mg
sIPV I 型3000 ~6000 DU
sIPV II型5700 ~7100DU
sIPV III型4500 ~9000DU
NaCl765 ~935mg
2-苯氧乙醇O~600mg
H2O餘量。
[0008]所述百日咳毒素PT、絲狀血細胞凝集素FHA、百日咳桿菌粘附素PRN、破傷風類毒素TT、白喉類毒素DT、Al (OH) 3、SlPV I型、sIPV II型、sIPV III型、NaCl、2_苯氧乙醇均是常規產品。
[0009]所述H2O為醫用注射用水。
[0010]本發明的另一目的是提供一種吸附無細胞百白破-Sabin脊髓灰質炎聯合疫苗的製備方法，其特徵在於經過下列各步驟:(1)按常規方法分別製備無細胞百日咳抗原(PT、FHA、PRN)、破傷風類毒素(TT)和白喉類毒素(DT)，以及1、I1、III型Sabin株脊髓灰質炎病毒滅活液sIPV I型、sIPV II型、sIPVΠΙ型；
(2)按每IOOmL聯合疫苗中含有下列組份進行備料:
【權利要求】
1.一種吸附無細胞百白破-Sabin脊髓灰質炎聯合疫苗，其特徵在於每IOOmL聯合疫苗中含有下列組份: 百日咳毒素PT3000~6000ugPN 絲狀血細胞凝集素FHA3000~6000ugPN 百日咳桿菌粘附素PRN1000~2000ugPN 破傷風類毒素TT1000~3000Lf 白喉類毒素DT3000~6000Lf Al (OH)3126 ~154mg sIPV I 型3000 ~6000 DU sIPV II 型5700 ~7100DU sIPV III型4500 ~9000DU NaCl765 ~935mg 2-苯氧乙醇O~600mgH2O餘量。
2.根據權利要求1所述的吸附無細胞百白破-Sabin脊髓灰質炎聯合疫苗，其特徵在於:所述百日咳毒素PT、絲狀血細胞凝集素FHA、百日咳桿菌粘附素PRN、破傷風類毒素TT、白喉類毒素DT、Al (OH) 3、sIPV I型、sIPV II型、sIPV III型、NaCl、2_苯氧乙醇均是常規產品O
3.根據權利要求1所述的吸附無細胞百白破-Sabin脊髓灰質炎聯合疫苗，其特徵在於:所述H2O為醫用注射用水。
4.一種吸附無細胞百白破-Sabin脊髓灰質炎聯合疫苗的製備方法，其特徵在於經過下列各步驟: (O按常規方法分別製備無細胞百日咳抗原PT、FHA, PRN、破傷風類毒素TT和白喉類毒素DT，以及1、I1、111型Sabin株脊髓灰質炎病毒滅活液sIPV I型、sIPV II型、sIPV III型； (2)按每IOOmL聯合疫苗中含有下列組份進行備料: 百日咳毒素PT3000~6000ugPN 絲狀血細胞凝集素FHA3000~6000ugPN 百日咳桿菌粘附素PRN1000~2000ugPN 破傷風類毒素TT1000~3000Lf 白喉類毒素DT3000~6000Lf Al (OH)3126 ~154mg sIPV I 型3000 ~6000 DU sIPV II型5700 ~7100DU sIPV III型4500 ~9000DU NaCl765 ~935mg 2-苯氧乙醇O~600mgH2O餘量； (3)將步驟(2)所備Al(OH)3^NaCl和H2O混合後，進行高壓滅菌，再在室溫下連續攪拌，並依次加入白喉類毒素、破傷風類毒素、百日咳毒素、絲狀血細胞凝集素、百日咳桿菌粘附素、SlPV I型、sIPV II型、sIPV III型，然後調節pH值為5.8~7.2，再加入2-苯氧乙醇作為防腐劑，即得到吸附無細胞百白破-Sabin株脊髓灰質炎聯合疫苗。
5.根據權利要求4所述的製備方法，其特徵在於:所述步驟(1)的常規方法是根據中華人民共和國藥典2010年版的要求製備各原液，其中製備百日咳毒素PT、絲狀血細胞凝集素FHA、百日咳桿菌粘附素PRN所用的百日咳I相CS菌株的菌號為58003-3 ;製備破傷風類毒素TT所用的破傷風梭狀芽孢桿菌的菌號為64008 ;製備白喉類毒素DT所用的白喉桿菌PW8株的菌號為38007，均購自中國食品藥品檢定研究院血清室；製備1、I1、III型Sabin株脊髓灰質炎病毒滅活液所用的脊髓灰質炎病毒分別是I型為SabinSO+2，II型為SabinSO+2，III型為PfizerSOR+Ι，均購自世界衛生組織WHO。
6.根據權利要求4所述的製備方法，其特徵在於:所述步驟(3)的pH值用pH8.0的PB緩衝液進 行調節。
【文檔編號】A61P31/14GK103908667SQ201410156859
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年4月18日 優先權日:2014年4月18日
【發明者】孫明波, 姜述德, 楊淨思, 廖國陽, 姜莉, 衡燮, 馬豔, 高娜, 奚光躍, 姬光, 宋霞, 陳洪波, 梁疆莉, 周健 申請人:中國醫學科學院醫學生物學研究所