一種甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育方法

2023-05-05 21:41:56 3

專利名稱：一種甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育方法
技術領域：
本發明屬於甘藍型油菜育種技術領域，具體涉及一種甘藍型油菜自交不親和 兩系雜交種的選育方法。
背景技術：
國內外大量研究表明甘藍型油菜品種間雜種具有很強的雜種優勢。目前， 利用甘藍型油菜雜種優勢的途徑包括細胞質雄性不育(CMS)、細胞核雄性不育 (GMS)、自交不親和(SI)和化學殺雄等。甘藍型油菜細胞核雄性不育(GMS)具 有不育性穩定的優點，但其育性存在分離，在制種時，需要在甘藍型油菜初 花期撥掉不育系中50%的可育株，不僅會降低制種產量，增加制種成本，而 且往往由於可育株難以徹底拔除，影響制種純度，增加生產風險。化學殺雄 途徑存在汙染環境和生產出的雜交種純度不高等缺點。當前國際上公認的最 有實用價值的甘藍型油菜細胞質雄性不育系是Pol cms,但其育性易受環境條 件的影響，保持系和恢復系的選育程序複雜，周期長，且存在細胞質負效應 的潛在危險。與甘藍型油菜雜種優勢利用的其他途徑相比，甘藍型油菜自交 不親和雜種具有選育周期短、易於篩選到恢復系、無不良細胞質效應、制種 產量高等優點。前人提出了自交不親和單交雜種(自交不親和系AX自交不 親和系B)、自交不親和三系雜種((自交不親和系X保持系)X恢復系)、自 交不親和三交雜種((自交不親和系AX自交不親和系B) X恢復系)和自交 不親和雙交雜種((自交不親和系AX自交不親和系B) X (自交不親和系C X自交不親和系D))等利用甘藍型油菜自交不親和系配置雜交種的可能方法 (傅廷棟主編，雜交油菜的育種與利用，P142-145， 2000年8月，湖北科學 技術出版社)。儘管這些方法已經被提出來很多年，因為甘藍型油菜自交不親 和雜種選育方法的原因，目前育種家還沒有選育出能在生產上大面積推廣的 甘藍型油菜自交不親和雜種。針對現有甘藍型油菜自交不親和雜種選育方法的 缺點，本發明提出一種甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育方法，該方 法有望選育出能在生產上大面積推廣的甘藍型油菜自交不親和雜種，促進甘 藍型油菜雜種優勢的利用。

發明內容
本發明的目的在於克服現有技術缺陷，提出一種甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育方法，本發明包括甘藍型油菜自交不親和系的選育和繁殖，甘藍 型油菜自交不親和恢復系的選育和繁殖，甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選 育及其種子的生產方法，以加快甘藍型油菜自交不親和兩系在育種中的應用。 本發明通過以下技術方案實現 一種甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育方法，其步驟如下
(1) 甘藍型油菜自交不親和系的選育以甘藍型油菜自交不親和系S-1300 (見文獻馬朝芝等，甘藍型油菜雙低自交不親和系的選育，華中農業大學學報，
1998, 17 (3): 2U-213)為母本，與自交親和的甘藍型油菜品系華雙3號(或 稱為華(油)雙3號，二者為同一個品種，華中農業大學選育的油菜品種， 該品種於1998年3月26日通過湖北省農作物品種審定委員會審定，審定證 書編號鄂種審證字第156號，為公開推廣應用的品種)雜交，得到F!種子； 利用親和指數法檢測Fi植株的自交親和性，對Ft不親和的植株進行剝蕾自 交，得到F2;檢測F2植株的親和性，選擇不親和植株進行人工剝蕾自交，得 到F3的種子；播種F3的種子，選擇F3家系，對中選株系所有單株套袋自交， 每個株系選擇3-5個單株人工剝蕾自交，得到F4的種子；播種單株親和指數 均小於1的F3家系上收穫的種子，選擇F4家系，對中選株系所有單株套袋自 交，每個株系選擇3-5個單株人工剝蕾自交，選親和指數均小於1的F4家系 為所需要的甘藍型油菜自交不親和系；對自交不親和性不穩定的F3家系，重 復上述選育步驟，直至選育出自交不親和性穩定的甘藍型油菜自交不親和系； 申請人:通過上述步驟得到了甘藍型油菜自交不親和系07-P63-6育34;
(2) 甘藍型油菜自交不親和恢復系的選育以甘藍型油菜自交不親和系 S-1300為母本，與自交親和的油菜品系浙油18 (購自浙江省農業科學院)、 滬油17 (購自上海市農業科學院)和恢5900 (見文獻馬朝芝等，RAPDs 和RFLPs分析甘藍型雜交油菜親本的遺傳多樣性，作物學報，2003， 29(5): 701-707)雜交，得到F1種子；種植該F1，考察其自交親和性；同時種植所 述自交親和的油菜品系，考察其產量及產量相關性狀，選擇田間表現較好， 與所述的甘藍型油菜自交不親和系S-1300配製的Ft組合的親和指數高於10 的育種材料作為目標恢復系，即恢浙油18、恢滬油17和恢5卯0;
(3) 甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育以甘藍型油菜自交不親和系 S-1300及其改良的自交不親和系07-P63-6育34為母本，以自交不親和恢復系 恢浙油18、恢滬油17和灰5900為父本，配製兩系雜交種；按隨機區組排列 設計將F,組合和對照品種同時種植在田間，考察植株的農藝性狀、產量、抗病性、生育期和品質性狀，選擇得到強優勢的雜交組合，備用；
(4) 甘藍型油菜自交不親和系的繁殖採用早播、稀植和高肥措施培育甘藍
型油菜自交不親和系壯苗，在隔離條件下於甘藍型油菜的花期噴施3%NaCl
溶液，配置蜜蜂輔助傳粉，考察每一植株的親和指數，收穫親和指數小於1
的植株上的種子作為甘藍型油菜自交不親和系原原種，將其保存於-2(TC冰箱 中備用；在下一個播種季節取少量原原種，在隔離條件下於甘藍型油菜的開 花期噴施3y。NaCl溶液，配置蜜蜂輔助授粉繁殖自交不親和系，得到甘藍型 油菜自交不親和系原種；
(5) 甘藍型油菜自交不親和恢復系的繁殖方法採用甘藍型油菜細胞質雄性 不育或細胞核雄性不育或化學殺雄途徑的方法繁殖甘藍型油菜自交不親和恢 復系(參見傅廷棟主編，雜交油菜的育種與利用,湖北科學技術出版社，1995， 145-150);
(6) 甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的種子生產方法以步驟(1)得到 的甘藍型油菜自交不親和係為母本，以步驟(2)得到的甘藍型油菜自交不親
和恢復係為父本，使母本與父本按2: l或3: l或4: l的行比種植在人工隔 離條件下或天然隔離區中，於甘藍型油菜的開花期，配置蜜蜂輔助授粉，在 甘藍型油菜終花期的末期，去除父本行的植株，於甘藍型油菜的成熟期，收 獲所述母本行植株的種子，得到甘藍型油菜自交不親和性兩系雜交種種子。 本發明的優點在於-
1. 選育甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種，克服了甘藍型油菜自交不親 和雜種不能在生產上大面積推廣的技術難題。
2. 與甘藍型油菜三系雜交種選育方法比較，甘藍型油菜自交不親和兩系 雜交種只需要母本和父本兩個親本，並不涉及保持系和臨保系，具有簡化育 種程序，縮短育種周期，提高育種效率的優點。
3. 與甘藍型油菜三系雜交種選育方法比較，母本(甘藍型油菜自交不親 和系)的繁殖方法簡單。
4. 甘藍型油菜自交不親和恢復系(父本)的選育方法簡單，因為絕大多
數甘藍型油菜常規品種(系)都能恢復甘藍型油菜自交不親和系的不親和特 性，因而容易篩選到優良的雜交組合。
5. 甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種制種產量高，種子生產成本低。
更詳細的技術方案參見《具體實施方式
》。


圖1:是本發明的技術路線圖。
6圖2:是本發明實施例中甘藍型油菜自交不親和系S-1300套袋自交及其 雜種Fi的結籽情況，圖中a-d表示甘藍型油菜自交不親和系S-1300套袋自交 表現為幾乎不結籽；e表示甘藍型油菜自交不親和系S-1300為母本，常規甘 藍型油菜品系浙油18為父本配置的Ft代雜種套袋自交表現為結籽正常。 圖3:是甘藍型油菜自交不親和系S-1300在隔離棚條件下的繁殖效果。 圖4:是隔離棚條件下甘藍型油菜自交不親和兩系雜種種子生產情況(甘 藍型油菜自交不親和系S-1300為母本，浙油18為父本，母本與父本的行比 為2: O。
圖5:是天然隔離區條件下甘藍型油菜自交不親和兩系雜種種子生產情 況(甘藍型油菜自交不親和系S-1300為母本、中雙10號(中國農業科學院 油料作物研究所選育的優質甘藍型油菜品種，已在生產上大面積推廣)為父 本，母本與父本的行比為2: 1)，圖中顯示的時期為甘藍型油菜的苗期。
圖6:是天然隔離區條件下甘藍型油菜自交不親和兩系雜種種子生產情 況(甘藍型油菜自交不親和系S-1300為母本、甘藍型油菜品種中雙10號為
父本，其中母本與父本的行比為2: 1)，圖中顯示的時期為甘藍型油菜角果
成熟期。
具體實施例方式
實施例1
1、甘藍型油菜自交不親和系的選育，步驟如下-
(1) 以甘藍型油菜自交不親和系品系S-1300為母本，與自交親和的甘 藍型油菜品系華雙3號雜交，得到雜種一代(Fi)種子。
(2) 播種步驟(1)的Fi種子，在甘藍型油菜花期，對雜種F植株的主 花序套袋自交，判斷其親和性，若Fi表現自交親和，則對其套袋自交，若Ft 表現自交不親和，則對其剝蕾自交，得到F2的種子；
(3) 種植步驟(2)的F2種子；甘藍型油菜花期，對每個F2植株進行套 袋自交；選擇自交不親和的植株，進行人工剝蕾自交；分單株收穫F2植株剝 蕾自交種子。
(4) 播種步驟(3)的親和指數小於1的F2植株剝蕾自交種子，得到F3 家系；根據苗期長勢、生育期等育種目標篩選F3家系，並對篩選到的F3家系 所有單株進行套袋自交、選擇自交不親和的優良單株進行人工剝蕾自交，成 熟期保留親和指數均小於1的F3家系上收穫的剝蕾自交種子作為F4家系的種 子；
(5) 播種F4家系的種子，根據苗期長勢、生育期等育種目標篩選F4家系，並對篩選到的F4家系所有單株套袋自交，選擇自交不親和的優良單株進
行人工剝蕾自交；所有單株親和指數均小於1的F4家系即為新的甘藍型油菜 自交不親和系；
(6)若沒有所有單株親和指數均小於1的F4家系，則重複步驟(4)， 直到選育出不親和性穩定的新甘藍型油菜自交不親和系。通過上述步驟申請 人已經獲得甘藍型油菜自交不親和系07-P63-6育34。
2、 甘藍型油菜自交不親和恢復系的選育
(1) 以甘藍型油菜自交不親和系S-1300作母本，與自交親和的甘藍型油 菜品種浙油18、滬油17和恢5卯0雜交，得到雜種一代(Fi )種子；
(2) 播種步驟1)的Fi種子，在甘藍型油菜的開花期對所有Ft植株套 袋自交，於成熟期鑑定F^直株的親和指數；
(3) 在步驟(2)進行地同時種植自交親和的甘藍型油菜品系，考察其產 量及其相關性狀。
(4) 綜合步驟(2)和步驟(3)的結果，選擇田間表現較好、與甘藍型 油菜自交不親和系S-1300配置的Fi組合親和指數高於10的材料即為甘藍型 油菜自交不親和恢復系。通過上述步驟申請人己經獲得甘藍型油菜自交不親 和恢復系恢浙油18、恢滬油17和恢5900。
3、 甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育，步驟如下
(1) 以甘藍型油菜自交不親和系S-1300和07-P63-6育34為母本，分別 與藍型油菜自交不親和恢復系恢浙油18、恢滬油17和恢5卯0雜交，得到Fi 雜交組合。
(2) 按隨機區組試驗設計將F!組合和對照品種種植在試驗田，2-3次重 復、小區面積3-5行，行長1,9m，行寬25cm，株距17cm;在甘藍型油菜的 成熟期，每小區隨機取10-15個單株、並收穫小區剩餘的植株，根據育種目 標考察各組合株高、分枝部位、單株產量等農藝性狀、抗病性、生育期和小 區產量，分析收穫種子的含油量、芥酸含量等品質性狀；
(3)符合育種目標的Fi組合，即為強優勢組合，供下一步的試驗。通過 上述步驟，本發明的優勢雜交組合的小區產量比對照品種中油雜2號(中國 農業科學院油料作物研究所選育並通過審定，全國大面積推廣的優質油菜品 種)增產8-12%。
4、 甘藍型油菜自交不親和系的繁殖，採用如下步驟 (l)在中國長江中下遊的冬油菜地區於每年的8月下旬至9月上旬隔離條件
下播種甘藍型油菜自交不親和系S-1300，設株、行距分別為2米和1米，培育儘可能多分枝的大株型甘藍型油菜自交不親和系，於該自交不親和系的蕾 薹期用60目的尼龍紗帳套住每一個甘藍型油菜自交不親和系S-1300單株， 在尼龍紗帳內配置蜜蜂輔助授粉；對該自交不親和系的主花序套袋，使其自 交，鑑定該自交不親和系植株的親和性；
(2) 在甘藍型油菜自交不親和系S-1300的開花期，對隔離條件下的甘藍型 油菜自交不親和系S-1300植株每天上午噴施3。/。NaCl溶液1次，累計噴20-30 次；
(3) 在甘藍型油菜自交不親和系S-1300的成熟期分單株收穫所述自交不親 和系的種子，按親和指數=籽粒數/花朵數的公式計算親和指數，淘汰親和指 數大於2的植株，分析每一單株種子的芥酸和硫苷含量，選芥酸含量小於1%、 硫苷含量小於30umol/g植株的種子作為原原種，保存在-2(TC冰箱中備用，得 到甘藍型油菜自交不親和系原原種；
(4) 在下一個繁殖季節繼續在隔離條件下播種步驟(3)的原原種，並在所 述的自交不親和系的開花期每天上午噴施3%的NaCl溶液1次，共噴20-30 次，配置蜜蜂輔助授粉，收穫得到作為生產上應用的甘藍型油菜自交不親和 系原種。
5、 甘藍型油菜自交不親和恢復系的繁殖
採用甘藍型油菜細胞質雄性不育、細胞核雄性不育、化學殺雄等雜種優 勢利用途徑恢復系的繁殖方法來繁殖甘藍型油菜自交不親和恢復系(參見
傅廷棟主編，雜交油菜的育種與利用，湖北科學技術出版社，1995， 145-150)。
6、 甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的種子生產方法
(1) 以甘藍型油菜自交不親和係為母本、甘藍型油菜自交不親和恢復系 為父本，母本與父本按2: l或3: l或4: 1的行比種植在人工隔離棚或天然 隔離區，田間管理同當地大田生產；
(2) 甘藍型油菜花期，在人工隔離棚或天然隔離區配置蜜蜂輔助授粉；
(3) 甘藍型油菜終花後，去除父本行植株；
(4) 甘藍型油菜成熟期，收穫母本行植株種子，得到甘藍型油菜自交不 親和兩系雜交種種子。
實施例2 (試驗比較)
具體步驟如下 1、利用親和指數法判斷甘藍型油菜的親和性對所調査的甘藍型油菜植株在初花期進行主枝套袋，當主枝上有3-5朵花開 放時，把主枝上所開花打掉，並把花序中心頂上的小蕾打掉一些，然後把主枝和 兩個側枝用硫酸紙袋套上，用曲別針別緊。每隔一天把紙袋向上抽提，並且抽提 的過程中用手輕拍紙袋使花粉散落有利於花朵受粉，起到輔助授粉的作用。抽提 紙袋時若有側芽上的花或花蕾露出袋外要及時把它打掉，以免所收的種子不純。 等紙袋內基本所有花授粉結束後，取下紙袋，打掉花蕾和未授粉的花朵，初步根 據角果發育情況調査親和性。收穫後脫粒、考種，按照公式親和指數 (Self-compatibility Index， SCI)=籽粒數/花朵數來計算植株的親和指數。
2、 甘藍型油菜自交不親和系07-P63-6育34的選育
(1) 1998年春天，在武漢華中農業大學油菜試驗田，用自交不親和系 S-1300作母本，與中國半冬性油菜品系華雙3號雜交，得到雜種一代(F1)種 子。
(2) 1999年秋天，播種F1種子(2行、10株/行)；2000年春天，油菜 花期對F1植株進行套袋自交以判斷F1的親和性，並剝蕾自交；5月初收穫 Fl植株，Fl植株自交幾乎不結籽。
(3) 2000年秋天，在武漢華中農業大學油菜試驗田種植Fl植株的自交 種子得F2植株(田間編號01-9-701， 2行區，每行10株，共20株F2植株)； 2001年春天於甘藍型油菜開花期，選擇8-10個單株進行自交和剝蕾自交；5 月初油菜角果成熟時，分單株收穫F2自交種子，考察其親和指數，保留親和 指數小於l植株的自交種子。
(4) 採用步驟3 (3) ~ (6)的選育方法，於2006年得到不親和性穩定、 品質為雙低的甘藍型油菜自交不親和系。
2006年秋天，在武漢華中農業大學試驗田育床播種親和指數較低、硫苷 和芥酸含量低、剝蕾自交種子多的l個單株上收穫的種子，試驗號為育34; 11月上旬移栽到隔離棚P63-6，田間號分別為07-P63-6育34，移栽5行約50 株；2007年春夭，用尼龍網紗將隔離棚罩住以隔離外來的花粉；所有單株均 正常生長，自交結籽很少，親和指數低於1，芥酸含量<1%、硫苷含量 <30umol/g，符合雙低標準。
3、 甘藍型油菜自交不親和恢復系的選育
(1)以甘藍型油菜自交不親和系S-1300為母本，2005年春天於武漢華中 農業大學試驗田，2005年夏天於甘肅省和政縣華中農業大學西北油菜試驗基 地分別與自交親和的甘藍型油菜材料浙油18、滬油17和恢5900雜交，得到 3份Fl種子；2005年秋天種植Fi組合在武漢華中農業大學油菜試驗田(3
10行區，10株/行)，2006年春天調査各個組合的自交結籽情況，發現這3個Fi 組合的親和指數大於10，表明其父本都能恢復甘藍型油菜自交不親和系 S-1300的自交不親和性。
(2) 2005年秋天將這3份自交親和的甘藍型油菜材料按隨機區組設計(2 次重複，3行/小區，10株/行)種植在華中農業大學油菜試驗田，田間管理同 大田生產。
(3) 觀察到這3份甘藍型油菜材料田間表現較好，且它們與甘藍型油菜 自交不親和系S-300所配組合的親和指數大於10，可作為甘藍型油菜自交不 親和恢復系，即恢浙油18、恢滬油17和恢5900，供進一步進行組合比較試 驗。
4、 甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育
(1) 2007年春，分別以甘藍型油菜自交不親和系S-1300、 07-P63-6育34 為母本，與3個甘藍型油菜自交不親和恢復系(浙油18、滬油17、恢5卯0) 雜交，得到Fi雜交組合。
(2) 2007年秋天，將上述的Fi雜交組合和1個對照品種(中油雜2號) 按隨機區組試驗設計(2次重複，3行/小區，10株/行)種植在華中農業大學 油菜試驗田，田間管理同大田生產。
(3) 2008年5月，每小區隨機取樣10株，考察株高、分枝部位、單株產 量等農藝性狀，同時收穫剩餘植株以考察小區產量，最後進行品質分析。通 過上述步驟，本發明的優勢雜交組合的小區產量比對照品種中油雜2號(中 國農業科學院油料作物研究所選育並通過審定，全國大面積推廣的優質油菜 品種)增產8-12%，說明甘藍型油菜自交不親和雜種具有很強的雜種優勢。
5、 甘藍型油菜自交不親和系的繁殖
(l)在中國長江中下遊的冬油菜地區於每年的8月下旬至9月上旬隔離條件 下播種甘藍型油菜自交不親和系S-1300，設株、行距分別為2米和1米，培 育儘可能多分枝的大株型甘藍型油菜自交不親和系，於該自交不親和系的蕾 薹期用60目的尼龍紗帳套住每一個甘藍型油菜自交不親和系S-1300單株， 在尼龍紗帳內配置蜜蜂輔助授粉；對該自交不親和系的主花序套袋，使其自 交，鑑定該自交不親和系植株的親和性；
(2)在甘藍型油菜自交不親和系S-1300的開花期，對隔離條件下的甘藍型 油菜自交不親和系S-1300植株每天上午噴施3。/。NaCl溶液1次，累計噴20-30 次；(3) 在甘藍型油菜自交不親和系S-1300的成熟期分單株收穫所述自交不親 和系的種子，按親和指數=籽粒數/花朵數的公式計算親和指數，淘汰親和指 數大於2的植株，分析每一單株種子的芥酸和硫苷含量，選芥酸含量小於1%、 硫苷含量小於30umol/g植株的種子作為原原種，保存在-2(TC冰箱中備用，得 到甘藍型油菜自交不親和系原原種；
(4) 在下一個繁殖季節繼續在隔離條件下播種步驟(3)的原原種，並在所 述的自交不親和系的開花期每天上午噴施3%的NaCl溶液1次，共噴20-30 次，配置蜜蜂輔助授粉，收穫得到作為生產上應用的甘藍型油菜自交不親和 系原種。
6、 甘藍型油菜自交不親和恢復系的繁殖方法
與甘藍型油菜細胞質雄性不育、甘藍型油菜細胞核雄性不育和甘藍型油菜 化學殺雄等雜種優勢利用途徑的恢復系繁殖方法相同。2006年9月25日， 將甘藍型油菜自交不親和恢復系浙油18播種於苗床，11月5日移栽至P63-8; 2007年在甘藍型油菜的初花期，摘除已開放花朵，用60目的尼龍網紗帳將 隔離棚罩住以阻止外來的花粉進入，並配置蜜蜂輔助授粉；成熟時，混合收 獲隔離棚甘藍型油菜自交不親和恢復系浙油18的種子。
7、 甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的種子生產方法
(1) 2003年秋天，分別將甘藍型油菜自交不親和系S-1300 (母本)和甘藍 型油菜自交不親和恢復系恢浙油18 (父本)播種於苗床；2003年11月將母 本(S-1300)和父本(浙油18)以2: 1的行比移栽至隔離棚P63-2，田間管 理同大田生產。2004年在甘藍型油菜的開花期，在隔離棚P63-2配置蜜蜂輔 助授粉，終花期後，拔除父本行植株、保留母本行植株；在甘藍型油菜的成 熟期，收穫母本行植株，得到甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種種子。
(2) 2007年秋天，將甘藍型油菜自交不親和系S-1300 (母本)、甘藍型油菜 自交不親和恢復系恢中雙10號(父本)，以2: 1的行比種植在一天然隔離區， 田間管理同大田生產。2008年在甘藍型油菜的終花期後，拔除父本行植株、 保留母本行植株；在甘藍型油菜的成熟期，收穫母本行植株，得到甘藍型油 菜自交不親和兩系雜交種種子。
權利要求
1、一種甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育方法，其步驟如下(1)甘藍型油菜自交不親和系的選育以甘藍型油菜自交不親和系S-1300為母本，與自交親和的甘藍型油菜品系華雙3號雜交，得到F1種子；利用親和指數法檢測F1植株的自交親和性，對F1不親和的植株進行剝蕾自交，得到F2檢測F2植株的親和性，選擇不親和植株進行人工剝蕾自交，得到F3的種子；播種F3的種子，選擇F3家系，對中選株系所有單株套袋自交，每個株系選擇3-5個單株人工剝蕾自交，得到F4的種子；播種單株親和指數均小於1的F3家系上收穫的種子，選擇F4家系，對中選株系所有單株套袋自交，每個株系選擇3-5個單株人工剝蕾自交，選親和指數均小於1的F4家係為所需要的甘藍型油菜自交不親和系；對自交不親和性不穩定的F3家系，重複上述選育步驟，直至選育出自交不親和性穩定的甘藍型油菜自交不親和系；申請人通過上述步驟得到了甘藍型油菜自交不親和系07-P63-6育34；(2)甘藍型油菜自交不親和恢復系的選育以甘藍型油菜自交不親和系S-1300為母本，與自交親和的油菜品系浙油18、滬油17和恢5900雜交，得到F1種子；種植該F1，考察其自交親和性；同時種植所述自交親和的油菜品系，考察其產量及產量相關性狀，選擇田間表現較好，與所述的甘藍型油菜自交不親和系S-1300配製的F1組合的親和指數高於10的育種材料作為目標恢復系，即恢浙油18、恢滬油17和恢5900；(3)甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育以甘藍型油菜自交不親和系S-1300及其改良的自交不親和系07-P63-6育34為母本，以自交不親和恢復系恢浙油18、恢滬油17和灰5900為父本，配製兩系雜交種；按隨機區組排列設計將F1組合和對照品種同時種植在田間，考察植株的農藝性狀、產量、抗病性、生育期和品質性狀，選擇得到強優勢的雜交組合，備用；(4)甘藍型油菜自交不親和系的繁殖採用早播、稀植和高肥措施培育甘藍型油菜自交不親和系壯苗，在隔離條件下於甘藍型油菜的花期噴施3％NaCl溶液，配置蜜蜂輔助傳粉，考察每一植株的親和指數，收穫親和指數小於1的植株上的種子作為甘藍型油菜自交不親和系原原種，將其保存於-20℃冰箱中備用；在下一個播種季節取少量原原種，在隔離條件下於甘藍型油菜的開花期噴施3％NaCl溶液，配置蜜蜂輔助授粉繁殖自交不親和系，得到甘藍型油菜自交不親和系原種；(5)甘藍型油菜自交不親和恢復系的繁殖方法採用甘藍型油菜細胞質雄性不育或細胞核雄性不育或化學殺雄途徑的方法繁殖甘藍型油菜自交不親和恢復系(參見傅廷棟主編，雜交油菜的育種與利用，湖北科學技術出版社，1995，145-150)；(6)甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的種子生產方法以步驟(1)得到的甘藍型油菜自交不親和係為母本，以步驟(2)得到的甘藍型油菜自交不親和恢復係為父本，使母本與父本按2∶1或3∶1或4∶1的行比種植在人工隔離條件下或天然隔離區中，於甘藍型油菜的開花期，配置蜜蜂輔助授粉，在甘藍型油菜終花期的末期，去除父本行的植株，於甘藍型油菜的成熟期，收穫所述母本行植株的種子，得到甘藍型油菜自交不親和性兩系雜交種種子。
全文摘要
本發明屬於油菜育種技術領域，具體涉及一種甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育方法。其特徵是，本發明針對因為現有甘藍型油菜自交不親和雜種選育方法的缺點而使甘藍型油菜自交不親和雜種還不能在生產上大面積推廣的問題，提出一種甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育方法，包括甘藍型油菜自交不親和系的選育和繁殖，甘藍型油菜自交不親和恢復系的選育和繁殖，甘藍型油菜自交不親和兩系雜交種的選育及其種子的生產方法。本發明為甘藍型油菜自交不親和雜種的選育提出了一種有效的方法，有利於甘藍型油菜自交不親和雜種的大面積推廣，促進甘藍型油菜雜種優勢的利用。
文檔編號A01H1/04GK101422133SQ200810236960
公開日2009年5月6日 申請日期2008年12月23日 優先權日2008年12月23日
發明者傅廷棟, 沈金雄, 塗金星, 馬朝芝, 高長斌 申請人:華中農業大學