一種石蠟組織晶片取樣方法
2023-05-09 02:09:26
專利名稱：一種石蠟組織晶片取樣方法
技術領域：
本發明涉及一種石蠟組織晶片取樣方法，用於在石蠟組織上提取目的組織，製備組織 晶片，屬於組織晶片技術領域。
背景技術：
組織晶片技術是基因晶片技術的發展和延伸，與細胞晶片、蛋白晶片、抗體晶片一樣， 屬於一種特殊生物晶片技術。組織晶片技術可以將數十個甚至上千個不同個體的臨床組織 標本按預先設計的順序排列在一張玻片上進行分析研究，是一種高通量、多樣本的分析工 具。組織晶片技術使科研人員能同時對幾百甚至上千種組織樣本同時進行分析，進行某一
個或多個特定的基因，或與其相關的表達產物的研究。該技術可以與DNA、 RNA、蛋白質、 抗體等技術相結合，與傳統的病理學技術、組織化學及免疫組化技術相結合，在基因、基 因轉錄和相關表達產物生物學功能三個水平上進行研究。這對人類基因組學的研究與發 展，尤其對基因和蛋白質與疾病關係的研究，疾病相關基因的驗證、新藥物的開發與篩選、 疾病的分子診斷，治療過程的追蹤和預後等方面具有實際意義和廣闊的市場前景。
目前，美國Clontech和Stratagene等少數生物技術公司己開展了人及動物的組織芯 片產品開發和銷售，但數量少、價格高、品種單一，滿足不了醫學科研和醫藥工業研發的 需要。2001年4月，美國LifeSpan生物科學公司建立了正常和疾病組織基因表達資料庫。 美國Tissuelnformactics公司用動物組織晶片技術進行藥物毒理篩選和尋找新藥物作用 位點。此外，日本、英國等國正積極籌建國家臨床組織病理資料庫。
中國在組織晶片技術方面的研究進展迅速。2001年10月，中國國家科技部將組織芯 片技術列為"十五"國家科技攻關西部開發重大項目，並己在西安正式立項。該立項分成 7個子項目，包括組織晶片技術、組織晶片生物信息資料庫、自動化組織晶片儀、自動分 析裝置、組織晶片相關技術與試劑、組織晶片實際應用技術，為中國與世界相關技術同步 發展奠定了基礎。
目前，組織晶片的製備主要依靠機械化晶片製備儀來完成。製備儀包括操作平臺、特 殊的打孔採樣裝置和一個定位系統。打孔採樣裝置對供體組織蠟塊進行採樣，同時也可對 受體蠟塊進行打孔，其孔徑與採樣直徑相同，兩者均可精確定位。製備儀的定位裝置可使 穿刺針或受體蠟塊線性移動，從而製備出孔徑、孔距、孔深完全相同的組織微陣列蠟塊。通過切片輔助系統將其轉移並固定到矽化和膠化玻片上即成為組織晶片。根據樣本直徑 (0. 2 2. 0 mra)不同，在一張45 mmX25 ram的玻片上可以排列40 2000個以上的組織 標本。一般按照樣本數目的多少，將組織晶片分為低密度晶片(〈200點)、中密度晶片(200 600點)和高密度晶片(〉600點)。常用組織晶片含有組織標本的數目在50 800個之間。 根據研究目的不同，晶片種類可以分成腫瘤組織晶片、正常組織晶片、單一或複合、特定 病理類型等數10種組織晶片。
但目前依據上述方法製備組織晶片有以下不足
第一，現有組織晶片製作成本很高。除特殊的儀器設備外(數十萬元)，製作1個組 織晶片的費用在萬元以上，每張切片單價在50 100元； 第二、製備組織晶片需專門的技術人員；
第三，製備組織晶片時需待所有蠟塊標本收集齊全後才能進行，日常工作中不能隨時 取樣。
第四，現有組織晶片機器取樣只能為圓形，對有些腫瘤組織不太適合。
發明內容
本發明的目的是提供一種成本低、操作簡單且取樣形狀多樣的石蠟組織晶片取樣方法。
為了達到上述目的，本發明的技術方案是提供一種石蠟組織晶片取樣方法，其特徵在
於，具體步驟為
第一步將廢棄的石蠟組織切片刀的刀口用砂輪打磨掉，在刀身中部兩側製作對稱的
凹槽，將刀身的一端打磨出方形刀口，所述方形刀口深6mm,寬a為0.5-10mm; 第二步在石蠟組織標記目的區域，沿標記線垂直向下切得到所需組織。 進一步地，所述兩側的凹槽間設有絲線或布條。 所述目的區域為正方形、長方形或三角形。
本發明的原理是在科研工作中，常常需要了解與某一疾病或不同疾病相關的基因或
蛋白產物等，現有單張切片檢測單個指標的方法工作量大，成本高，費時費力，而且較難
獲得陽性結果，只有採用組織晶片技術才有可能達到目的；現有組織晶片技術價格高昂， 需要專門的設備和技術熟練的人員，不能常規使用；結合病理科技術工作的實踐經驗，將 廢棄的病理切片刀經改造後，製備成0.5mm至10mm寬的平口刀，在石蠟組織上提取邊長 為0.5-10mm的正方形、長方形或三角形小組織塊，用於製備組織晶片。
本發明具有廉價、方便、快速、取材多樣、節約組織量、隨時收集隨時取樣的優點，能普及至每一個病理科及相關研究單位，促進組織晶片技術得以更廣泛地推廣；同時利用
廢棄的切片刀製備取樣刀，來源充分，變廢為寶。
圖1為廢棄的石蠟組織切片刀示意圖； 圖2為本發明採用的切片刀主視圖； 圖3為本發明採用的切片刀側視圖； 圖4為圖3中局部放大圖5為正方形目的區域示意圖； 圖6為三角形目的區域示意圖7為長方形目的區域示意圖。
具體實施例方式
下面結合實施例來具體說明本發明。
實施例1
如圖1所示，為廢棄的石蠟組織切片刀示意圖，用砂輪將廢棄的石蠟組織切片刀的刀
口3用砂輪打磨掉，在刀身中部兩側製作對稱的凹槽l，將刀身的一端打磨出方形刀口2， 所述方形刀口2深6mm，寬a為0.5mm;兩側的凹槽1間設有絲線，便於握刀使用。如圖2 所示，為本發明採用的切片刀主視圖，圖3為其側視圖，圖4為圖3中局部放大圖。
在石蠟組織標記目的區域4沿標記線垂直向下切得到所需組織。所述目的區域為邊長 為5mm的主方形。如圖5所示，為正方形目的區域示意圖。根據目的區域4的大小，選用 寬度a為5mm的自製平口刀，沿標記線，垂直向下切，當有一突破感時，表明組織切斷， 直至四個方向均與周圍組織分離，此時用刀輕輕向上挑，或用小鑷子鉗夾，小組織即與原 石蠟組織脫離。因為機器取樣均為圓形，若要將此長方形內的目的組織均包含在內，則要 佔用更多的組織，因此，此種取樣方法更節約石蠟組織。
將小組織放入印pendorf管或其它容器，做好標記，存放。待收集更多的樣本後，用 於製作石蠟組織晶片。
實施例2
類似於實施例l,區別在於，目的區域為邊長為lmm的三角形，如圖6所示，為三角 形目的區域示意圖，選用寬度a為10mm的自製平口刀進行取樣。所述兩側的凹槽1間設 有布條。
實施例3
5類似於實施例l，區別在於，目的區域為長為3mm、寬為2mm的長方形，如圖7所示， 為長方形目的區域示意圖，選用寬度a為2mm和3mm的自製平口刀進行取樣。
權利要求
1、一種石蠟組織晶片取樣方法，其特徵在於，具體步驟為第一步將廢棄的石蠟組織切片刀的刀口(3)用砂輪打磨掉，在刀身中部兩側製作對稱的凹槽(1)，將刀身的一端打磨出方形刀口(2)，所述方形刀口(2)深6mm，寬a為0.5-10mm；第二步在石蠟組織標記目的區域(4)，沿標記線垂直向下切得到所需組織。
2、 如權利要求l所述的石蠟組織晶片取樣方法，其特徵在於，所述兩側的凹槽(1) 間設有絲線或布條。
3、 如權利要求1所述的石蠟組織晶片取樣方法，其特徵在於，所述目的區域(4)為 正方形、長方形或三角形。
全文摘要
本發明提供了一種石蠟組織晶片取樣方法，其特徵在於，具體步驟為第一步將廢棄的石蠟組織切片刀的刀口用砂輪打磨掉，在刀身中部兩側製作對稱的凹槽，將刀身的一端打磨出方形刀口，所述方形刀口深6mm，寬a為0.5-10mm；第二步在石蠟組織標記目的區域，沿標記線垂直向下切得到所需組織。本發明具有廉價、方便、快速、取材多樣、節約組織量、隨時收集隨時取樣的優點。
文檔編號G01N1/06GK101666718SQ20091019616
公開日2010年3月10日 申請日期2009年9月23日 優先權日2009年9月23日
發明者君 侯, 侯英勇, 劉亞嵐, 盧韶華, 晨 徐, 譚雲山 申請人:復旦大學附屬中山醫院