由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法
2023-05-09 16:49:41 3
專利名稱：由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法
由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法本發明涉及一種製做綠原酸的方法，特別是由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法。綠原酸(chlorogenic acid簡稱CA)是一種縮酚酸，屬酚類化合物。具有抗菌、抗 病毒、升高白細胞、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基等作用。因而在食療及制 藥業的應用上受到人們高度重視。現有的由杜仲葉提取綠原酸產品提取工藝採用有機溶劑在酸性條件下提取，存在 下列缺點產品純度低、工序複雜、操作繁瑣、消耗溶劑多、材料不易再生、產生的汙水較多， 能耗高、提取成本相對比較高，終產物的純度只能到60%。本發明的目的是提供一種以杜仲葉為原料，經提取、分離、純化製備綠原酸的方 法。它能解決現有技術中消耗溶劑多、材料不易再生、產生的汙水較多，能耗高的缺點。本 發明由於應用了超濾、樹脂分離及納濾技術，它的分離、純化方法工藝簡便，成本低，所用材 料能再生利用，不產生汙染，利於工業化生產。提取分離杜仲葉中綠原酸的工藝流程為杜仲葉一乾燥粉碎一乙醇溶液回流提取一減壓蒸除乙醇一絮凝去雜一脫色 —XDA-5樹脂吸附一純淨水洗脫糖和京尼平苷酸一20%乙醇洗脫得到綠原酸粗品一減壓 回收乙醇一過150Da納濾膜濃縮一乙醇重結晶一低溫乾燥得綠原酸精品。它包括如下步 驟A.製備綠原酸提取液將乾燥粉碎的杜仲葉過60目篩，加到乙醇水溶液中，調PH = 4，加熱攪拌提取，過 濾，將濾液減壓蒸出乙醇，得綠原酸水提取液。B.綠原酸提取液的分離濾液加活性碳脫色、過超濾膜去蛋白質、多糖，得綠原酸粗品水提取液。C.純化綠原酸綠原酸粗品溶液用大孔吸附樹脂吸附，用含酸的乙醇溶液解吸附，得綠原酸純品 溶液。D.製備綠原酸精品綠原酸純化液經納濾，乙醇重結晶，得綠原酸純品。步驟A中用於提取綠原酸杜仲葉粉碎後過40-80目篩；步驟A中所述的加熱溫度為65度，攪拌提取時間為2小時，提取次數為2次；步驟A中所述的溶液為60%乙醇，固液比例為1 12，溶液的PH = 4。步驟B中所述的脫色劑為活性碳，添加比例為5%攪拌脫色時間為20分鐘，步驟B中所述的超濾膜為5000Da的中空纖維膜，超濾壓力0. 4PM，溫度為30度。步驟C中用於吸附的樹脂為XAD-5，樹脂和吸附液的比例為1 5，吸附時間4小 時；步驟C中用於解吸附的溶液為20%乙醇水溶液，溶液的PH = 3 ；解吸附的溶液與 樹脂的比例為4 1，解吸附時間為3小時。步驟D中所用納濾膜為截留分子量為150Da的陶瓷膜，工作壓力為0.4Mpa，溫度為常溫；步驟D中所用的重結晶溶液為無水乙醇及正己烷，二種溶液體積比為1 1，重結 晶溫度為0度。本發明中採用乙醇提取、超濾、樹脂吸附、納濾分離純化濃縮、乙醇重結晶的方法， 它替代了現有的有機溶劑在酸鹼性條件下提取、萃取的工藝。本方法首先用60%乙醇溶液 從杜仲葉中提取綠原酸、蛋白、多糖及黃酮等物質，經脫色、超濾去除蛋白質、多糖、色素，分 離得綠原酸粗品；經大孔樹脂、納濾純化、乙醇重結晶，製備了綠原酸純品。本發明的優點是無汙染、能耗低、所用材料可再生回收利用，提取成本低、可連續 生產。在提取過程中未使用有毒溶劑，產品安全，易實現工廠化生產。下面以實施例對本發明具體說明。實施例由杜仲葉提取、分離、純化綠原酸的方法，包括以下步驟A.製備含綠原酸的水提取物將粉碎過60目篩的幹杜仲葉0. 5KG(綠原酸含量為4. 96% )放入IOL的三口瓶 中，用6L60%乙醇溶液，加HCL調PH = 4，攪拌加熱到65度，在該溫度下提取2小時，過濾， 得濾液(1)；濾渣加4L60%乙醇溶液調PH = 4，攪拌加熱到65度，在該溫度下提取2小時， 過濾，得濾液(2)。合併濾液(1)和(2)，減壓回收乙醇，得提取液3L。B.製備含綠原酸的粗品溶液將含綠原酸的水提取液加熱到50度，以5%比例添加活性碳150g，攪拌30分鐘，靜置30分鐘，離心過濾；將濾液在壓力為0. 4MP、溫度30度下超濾，截流液加去離 子水超濾3次。每次加水2L，得綠原酸粗品溶液約8L。C.純化綠原酸取XAD-5樹脂經再生處理，綠原酸粗品溶液和樹脂量的比例是5:1，本實施例中 為1. 6KG，溶液調PH = 4，在20L攪拌罐中攪拌吸附4小時，離心過濾，樹脂用去離子水攪拌洗3次，直至洗出水不混濁；每次用水10L，收集洗 脫水可以過納濾膜脫多糖後再回收使用；水洗後的樹脂用10%乙醇3L洗1次，濾除溶液得 吸附有綠原酸的樹脂。取6.5L PH= 3的20%乙醇溶液(和樹脂比為4 1)，和樹脂一起 放入攪拌罐中，攪拌洗脫3小時，過濾，用去離子水洗一次，收集濾液約9L。D.製備綠原酸精品將純化的綠原酸溶液在常溫下過納濾膜，膜為截留分子量為150Da的陶瓷膜，工 作壓力為0. 4MP ；濃縮比例為10倍，得濃縮液900ml，減壓濃縮得固形物；用無水乙醇在60 度下溶解得150ml溶液，加入等體積正己烷在0度下重結晶16小時，得純度為92%的綠原 酸精品17. 86克。
權利要求
一種由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法A製備綠原酸提取液將乾燥粉碎的杜仲葉過60目篩，加到乙醇水溶液中，調PH＝4，加熱攪拌提取，過濾，將濾液減壓蒸出乙醇，得綠原酸水提取液B.綠原酸提取液的分離濾液加活性碳脫色、過超濾膜去蛋白質、多糖，得綠原酸粗品水提取液C.純化綠原酸綠原酸粗品溶液用大孔吸附樹脂吸附，用含酸的乙醇溶液解吸附，得綠原酸純品溶液。D.製備綠原酸精品綠原酸粗品溶液過納濾膜，乙醇重結晶，得綠原酸純品。
2.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟A中 所述的提取溫度為65度，攪拌提取時間為2小時。
3.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟A中 用於提取綠原酸的溶液為60%的乙醇溶液，其PH為4。
4.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟A中 用於提取綠原酸的固液比為1 12。
5.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟B中 用於超濾的膜的截留分子量為5000Da的中空纖維膜，超濾時工作壓力為0. 4MPa，工作溫度 為30度。
6.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟B中 所用的脫色劑為活性碳，添加比例為溶液的5%;攪拌脫色溫度為40度，攪拌脫色時間為30 分鐘。
7.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟C中 所用的純化樹脂為XAD-5，樹脂用量和被純化溶液比例為1 5;吸附時間為4小時，溶液PH=4。
8.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟C中 用於洗脫吸附的溶液為20%乙醇溶液，溶液PH = 3，洗脫時間為3小時。
9.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟D中 用於純化濃縮的膜是截留分子量為150Da的陶瓷膜，工作壓力為0. 4MPa，工作溫度為常溫， 純化後的溶液被濃縮倍數為10倍。
10.根據權利要求1所述由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法，其特徵是步驟D中 用於重結晶的溶劑是乙醇和正己烷，重結晶的溫度為0度。
全文摘要
由杜仲葉提取、分離和純化綠原酸的方法包括A製備綠原酸提取液，B.綠原酸提取液的分離，C.純化綠原酸D.製備綠原酸精品；本發明將超濾膜及納濾膜技術和大孔吸附樹脂純化技術相結合，有效解決了綠原酸提取中工序複雜、操作繁瑣、消耗溶劑多、材料不易再生、產生的汙水多，能耗高、提取成本相對比較高的缺點；提供了一種提取、分離、純化杜仲葉中綠原酸的新方法，該方法工藝簡便，成本低，能耗低，所用材料能再生利用，不產生汙染，利於工業化生產。
文檔編號C07C69/732GK101935278SQ200910147928
公開日2011年1月5日 申請日期2009年6月11日 優先權日2009年6月11日
發明者丁松法, 喬玉環, 吳美娟, 周大捷, 周宗明 申請人:周大捷