一種利用米渣替代部分玉米漿乾粉的金黴素發酵培養基的製作方法

2023-05-08 23:13:56 1

本發明涉及一種金黴素的發酵培養基，尤其涉及一種利用米渣替代部分玉米漿乾粉的金黴素發酵培養基。
背景技術：
：金黴素(chlortetracyclin)，又稱氯四環素，其抗菌譜與四環素相似，因具有抑菌、促生長、飼料利用率高及在肌體內殘留量低等優點，作為藥物飼料添加劑廣泛應用於畜牧業，是目前藥物飼料添加劑中使用量最大的品種。近年來由於禽畜養殖規模的擴大和集約化、舍飼化程度的提高，國內外市場對藥物飼料添加劑產品的需求日益增加，目前我國已經成為世界上最大的金黴素生產國。金黴素的發酵生產方法，是由金色鏈黴菌(streptomycesaureofaciens)做為出發菌株，經過純種培養、發酵生產金黴素。金黴素發酵生產中主要使用玉米漿乾粉做為氮源，其市場價格較高。米渣是大米製作澱粉糖或生產味精的過程中產生的下腳料，其蛋白質含量豐富，高達60％以上(幹基)。目前，米渣大部分只是被用作飼料。福建地區具有年產味精80000噸的江南最大的味精生產基地，米渣產量巨大，價格低廉。技術實現要素：本發明的目的在於，提供一種利用米渣替代部分玉米漿乾粉的金黴素發酵培養基，既提高金黴素生產水平，降低金黴素生產成本，又解決了部分味精生產過程中產生的環保問題。為實現上述技術目的，達到上述技術效果，本發明提供了一種利用米渣替代部分玉米漿乾粉的金黴素發酵培養基，以米渣替代80％-90％質量比例的玉米漿乾粉。所述金黴素發酵培養基，每升培養基水溶液中含有：玉米粉28～32g、玉米澱粉12～16g、玉米漿乾粉2～4g、米渣16～20g、kh2po40.02～0.04g、mgso40.04～0.06g、豆油0.4～0.6g。更優選地，所述金黴素發酵培養基，每升培養基水溶液中含有：玉米粉30g、玉米澱粉15g、玉米漿乾粉3g、米渣18g、kh2po40.03g、mgso40.05g、豆油0.5g。其中，所述米渣來源於味精生產中製糖工藝階段產生的新鮮米渣經烘乾後得到的固體產物，質量要求為：蛋白質含量≥60％，水分≤10％，總糖≤20％，脂肪≤12％，灰分≤5％，幹渣顆粒通過60目篩的數量≥90％。利用米渣替代部分玉米漿乾粉發酵生產金黴素的方法，是由金色鏈黴菌(streptomycesaureofaciens)作為出發菌株，經過純種培養、二級發酵生產金黴素。具體工藝步驟包括了砂土孢子製備工序、母瓶斜面孢子製備工序、子瓶斜面孢子製備工序、子瓶孢子液製備工序、種子製備工序和發酵製備工序。所述發酵製備工序中發酵工藝如下：將培養基滅菌，滅菌完成後溫度降至30～35℃時，將培養好的一級種子移入發酵罐，移種後發酵生產採取變溫發酵，接種後培養溫度控制在30～33℃，培養48h後降溫至28～30℃，培養壓力控制在0.01～0.04mpa，發酵周期120～144小時。本發明具有以下有益效果：1.本發明通過調整培養基的營養成分達到提高金黴素生產水平、降低金黴素生產成本的目的，以米渣替代部分玉米漿乾粉做為發酵培養基中的氮源，金黴素放罐效價平均提高14.12％，且原料投入成本降低。2.本發明利用福建省地域優勢，以味精生產過程中產生的米渣做為金黴素發酵生產中的原材料，既提高金黴素生產水平、降低金黴素生產成本，又解決了部分味精生產過程中產生的環保問題。具體實施方式實施例1本發明的一種金黴素發酵培養基，1000升培養基水溶液中含有：玉米粉30kg、玉米澱粉15kg、玉米漿乾粉3kg、米渣18kg、kh2po40.03kg、mgso40.05kg、豆油0.5kg。其中米渣的質量要求為：蛋白質含量≥60％，水分≤10％，總糖≤20％,脂肪≤12％，灰分≤5％，幹渣顆粒通過60目篩的數量≥90％。利用米渣替代部分玉米漿乾粉的金黴素發酵生產方法，是由金色鏈黴菌(streptomycesaureofaciens)做為出發菌株，經過純種培養、二級發酵生產金黴素。具體工藝步驟包括砂土孢子製備工序、母瓶斜面孢子製備工序、子瓶斜面孢子製備工序、種子製備工序、發酵製備工序。砂土孢子製備工序的步驟為：取河沙加入10％稀鹽酸，加熱煮沸30分鐘，倒去酸水，用自來水衝洗至中性，烘乾過40目篩。另取非耕作層的不含腐植質的瘦黃土或紅土，加自來水浸泡洗滌數次，直至中性。烘乾碾碎，過100目篩。砂和土以3:1的比例混合均勻，裝入10×100mm的小試管中，每管裝1g左右，塞上棉塞，滅菌烘乾。將金黴素產生菌的斜面孢子在無菌條件下接入合格的砂土管中，標識菌株名稱及保藏日期，置於放有乾燥劑的容器中，蓋緊密封，於4℃冰箱冷藏保存。母瓶孢子斜面製備工序的步驟為：在無菌條件下從砂土管中挑取適量砂土接於母瓶斜面培養基上，標識後，放於溫度34±1℃，溼度30％～50％的恆溫室培養7天，成熟後放於4℃冰箱冷藏備用。子瓶孢子斜面製備工序的步驟為：在無菌條件下用接種鏟從母瓶孢子菌種斜面上刮取一定量孢子，劃線接至子瓶孢子斜面培養基上，同時做露碟和肉湯無試檢查，接好的斜面標識後放於溫度34±1℃，溼度30％～50％的恆溫室培養6天，成熟後放於4℃冰箱冷藏備用。子瓶孢子液製備工序的步驟為：選取生長合格的5個子瓶孢子斜面，在無菌條件下用接種鏟將子瓶孢子斜面上的菌層刮下碾散後各加入20ml無菌水，攪拌均勻後過濾得到子瓶孢子液，標識後放於4℃冰箱保存。其中，種子製備工序的步驟為：在無菌條件下，將合格的100ml子瓶孢子液以火焰法接種到一級種子罐中，溫度控制在26～28℃，罐壓控制在0.04～0.06mpa，攪拌轉速120～140r/min條件下進行培養，培養時間24～28小時，種子生長良好可移入發酵罐。發酵製備工序中發酵工藝如下：將培養基滅菌，滅菌完成後溫度降至30～35℃時，將培養好的一級種子移入發酵罐，移種後發酵生產採取變溫發酵，接種後培養溫度控制在30～33℃，培養48h後降溫至28～30℃，培養壓力控制在0.01～0.04mpa，發酵周期120～144小時。實施例2為驗證本發明中利用米渣替代部分玉米漿乾粉的培養基配方對金黴素發酵產生的有益影響，採用米渣替代部分玉米漿乾粉的培養基(以下簡稱米渣組)及全部使用玉米漿乾粉的培養基(以下簡稱玉米漿乾粉組)按照實施例1的生產方法分別進行金黴素發酵生產，測定金黴素效價。米渣組發酵製備工序中發酵罐內1000升培養基水溶液中含有：玉米粉30kg、玉米澱粉15kg、玉米漿乾粉3kg、米渣18kg、kh2po40.03kg、mgso40.05kg、豆油0.5kg。其中米渣的質量要求為：蛋白質含量≥60％，水分≤10％，總糖≤20％,脂肪≤12％，灰分≤5％，幹渣顆粒通過60目篩的數量≥90％。玉米漿乾粉組發酵製備工序中發酵罐內1000升培養基水溶液中含有：玉米粉30kg、玉米澱粉15kg、玉米漿乾粉21kg、kh2po40.03kg、mgso40.05kg、豆油0.5kg。上述培養基按照實施例1的生產方法分別進行5批次的發酵。表1米渣組及玉米漿乾粉組的金黴素效價項目玉米漿乾粉組發酵效價(μg/ml)米渣組發酵效價(μg/ml)1224612576822276524700321488257544220172533152208924917平均值2216425294相對效價(％)100.00114.12如表1所示，以利用米渣替代部分玉米漿乾粉的培養基配方發酵生產金黴素比完全使用玉米漿乾粉，其發酵效價提高14.12％，有效地提高了產量。目前市場價格玉米漿乾粉3000-4000元/噸，而米渣系味精生產的廢棄下腳料，價格低廉，降低了發酵原料投入成本。本發明提高金黴素生產產量，降低生產成本，並解決了部分味精生產過程中產生的環保問題。實施例3本發明的一種金黴素發酵培養基，每1000升培養基水溶液中含有：玉米粉28kg、玉米澱粉12kg、玉米漿乾粉4kg、米渣16kg、kh2po40.02kg、mgso40.04kg、豆油0.4kg。其餘條件同實施例1。實施例4本發明的一種金黴素發酵培養基，每1000升培養基水溶液中含有：玉米粉32kg、玉米澱粉16kg、玉米漿乾粉2kg、米渣20kg、kh2po40.04kg、mgso40.06kg、豆油0.6kg。其餘條件同實施例1。雖然以上描述了本發明的具體實施方式，但是熟悉本
技術領域：
的技術人員應當理解，我們所描述的具體的實施例只是說明性的，而不是用於對本發明的範圍的限定，熟悉本領域的技術人員在依照本發明的精神所作的等效的修飾以及變化，都應當涵蓋在本發明的權利要求所保護的範圍內。當前第1頁12