一種狹葉金粟蘭提取物的製備方法和應用的製作方法

2023-05-09 07:22:46

專利名稱：：一種狹葉金粟蘭提取物的製備方法和應用的製作方法
技術領域：
：本發明屬於農藥領域，具體涉及狹葉金粟蘭提取物的製備方法以及在製備殺蟲劑、殺菌劑中的應用。技術背景自上世紀60年代以來，公眾對農藥毒性和農藥對環境的汙染問題越來越重視。一些毒性高、殘留長的農藥品種，如有機汞製劑、有機氯製劑、高毒的有機磷製劑等相繼被禁用。到了上世紀90年代，人們對食品安全和環境保護的要求越來越高。世界各國制定了有關逐步取締、禁用高毒高殘留農藥的法規。我國加入WTO後，農藥殘留問題，已經成為限制我國農產品出口的國際貿易技術壁壘。一些發達國家明確禁止從我國進口曾經使用過某種有機合成化學農藥品種的農產品。所以，面對日益擴大的經濟全球化，尋求高效、安全和對環境友好的農藥是我國廣大農藥科學工作者的機遇和挑戰。植物性農藥的優勢之一是能徹底降解、無殘留。化學合成農藥的廣泛而不合理使用，有害生物對農藥的抗性程度越來越高，抗性產生的速度也越來越快，尤其是對選擇性強、藥效高的農藥品種。抗性問題已成為有害生物防治中的一大難題。上世紀80年代初，擬除蟲菊酯使用不到三年，在我國北方棉區出現大面積的棉蚜高抗種群。自上世紀六十年代末內吸劑商品化以來，殺菌劑抗藥性的問題已經成為生產上的嚴重問題，一些重要的殺菌劑品種，比如多菌靈和甲霜靈等都是在使用12年後就在生產上出現嚴重的抗藥性問題。根據南京農業大學等單位的有關研究報導，多菌靈等多種殺菌劑在我國已經出現了嚴重的抗藥性問題。使用不同作用機理的農藥是解決農藥抗藥性問題的主要措施之一。但是，目前在世界上，可利用的作用機理不同的農藥品種還比較少。因此，發現新的具有不同作用機理的農藥是農藥科學工作者的另一個機遇和挑戰。植物性農藥通常不是單一的一種化合物，而是植物有機體的全部或一部分有機物質，成分複雜，作用方式多樣，所以有害生物難以對其產生抗藥性。狹葉金粟蘭(OL^ra77^Ma77^^"/b〃Z/S)隸屬金粟蘭科金粟蘭屬。僅分布於重慶市和湖北西部的利川、建始、巴東、秭歸、宜昌、神農架、興山。為我國特有種。多年生草本，株高1543cm;根狀莖深黃色，生多數深黃色鬚根；莖直立，無毛，單生或數個叢生，下部節上對生兩片鱗狀葉。葉對生，810片，披針形或狹橢圓形，長511cm，寬1.53cm，頂端漸尖，基部楔形，邊緣有銳鋸齒，齒間有一腺體，近基部或1/4以下全緣，兩面均無毛；側脈46對，葉柄長710mm;鱗狀葉三角形，膜質；託葉條裂成鑽形。穗狀花序單一，頂生，連總花梗長58cm，總花梗長約1cm;苞片寬卵形或近半圓形，全緣，少數為2淺裂；花白色；雄蕊3枚；藥隔基部結合，著生於子房上部外側；中央藥隔著生1個2室的花葯，兩側藥隔各具一個l室的花葯，藥隔延伸成線形，長46mm，水平伸展或斜上，藥室在藥隔的基部；子房倒卵形，綠色，無花柱；核果倒卵形或近球形，長約2.5ran，近無柄；花期4月，果期5月。生長於海拔4001200m山坡林下、溝邊、路旁或巖縫中。狹葉金粟蘭同屬的其它植物是重要的藥用資源，我國民間廣泛用於通經活絡,止血祛風散寒，但狹葉金粟蘭目前僅被視為一種野草，沒有發現任何經濟價值。
發明內容本發明的一個目的是克服現有技術不足，提供狹葉金粟蘭提取物的製備方法，從而實現從野草狹葉金粟蘭獲得有效藥用成分。本發明的另一個目的是提供所述狹葉金粟蘭提取物的應用。本發明的目的通過以下技術方案實現提供一種狹葉金粟蘭提取物的製備方法，以狹葉金粟蘭為原料，採用溶劑提取法、超臨界萃取法、微波提取法、超聲波提取法、破碎提取法、水蒸汽蒸餾法或萃取法提取得到。所述狹葉金粟蘭為狹葉金粟蘭的根、莖、葉、花果或全株。所述溶劑提取法採用的溶劑為水、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇、無水乙醚、正丁醇、N，N-二甲基甲醯胺或N，N二甲基亞碸。本發明同時提供了所述狹葉金粟蘭提取物在製備殺蟲劑或殺菌劑方面的應用。狹葉金粟蘭提取物應用於製備殺蟲劑或殺菌劑時，採用的有效濃度為0.lmg/mL700mg/mL。作為優選，採用狹葉金粟蘭提取物的有效濃度為0.5mg/mL100mg/mL。本發明的有益效果是(1)本發明提供了一種具有優良殺蟲、殺菌活性的植物提取物;(2)本發明提供的殺蟲殺菌提取物活性高，使用量低，防病蟲效果顯著。(3)本發明方法簡單易行，成本較低，具有良好的應用和推廣前景。具體實施方式下面結合具體實施例來進一步詳細說明本發明。實施例1甲醇浸提採集狹葉金粟蘭植物的根、莖、葉、花果或全株，室內晾乾或在50550C烘乾，粉碎。粉碎物在室溫條件下，用植物幹樣510倍體積的甲醇浸泡3次，每次浸泡13天，合併3次浸泡液，過濾、減壓濃縮，除去甲醇，即可得到狹葉金粟蘭甲醇提取物。實施例2乙醇浸提採集狹葉金粟蘭植物的根在50550C烘乾，粉碎。粉碎物在室溫條件下，用幹樣510倍體積的乙醇浸泡3次，每次浸泡13天，合併3次浸泡液，過濾、減壓濃縮，除去乙醇，即可得到狹葉金粟蘭根乙醇提取物。實施例3N，N-二甲基甲醯胺浸提將狹葉金粟蘭植物的莖在50550C烘乾，粉碎。粉碎物在室溫條件下，用幹樣510倍體積的N，N-二甲基甲醯胺浸泡3次，每次浸泡13天，合併3次浸泡液，過濾、減壓濃縮，除去N，N-二甲基甲醯胺，即可得到狹葉金粟蘭莖N，N-二甲基甲醯胺提取物。實施例4N，N-二甲基亞碸浸提將狹葉金粟蘭植物的葉在50550C烘乾，粉碎。粉碎物在室溫條件下，用幹樣510倍體積的N，N-二甲基亞碸浸泡3次，每次浸泡13天，合併3次浸泡液，過濾、減壓濃縮，除去N，N-二甲基亞碸，即可得到狹葉金粟蘭葉N，N-二甲基亞碸提取物。實施例5乙酸乙酯浸提將狹葉金粟蘭植物的葉在50550C烘乾、粉碎。粉碎物在室溫條件下，用幹樣510倍體積的乙酸乙酯浸泡3次，每次浸泡13天，合併3次浸泡液，過濾、減壓濃縮，除去乙酸乙酯，即可得到狹葉金粟蘭葉乙酸乙酯提取物。實施例6超聲波提取將狹葉金粟蘭植物的全株在50550C烘乾，粉碎。粉碎物在室溫條件下，用樣品510倍體積比的丙酮冷浸泡24h後，超聲波提取45min，過濾、減壓濃縮提取液，除去丙酮，即可得到狹葉金粟蘭丙酮提取物。實施例7蒸餾法提取稱取狹葉金粟蘭果乾粉100g，加500mL蒸餾水，蒸餾得蒸餾液，用300mL無水乙醚萃取兩次,合併萃取乙醚液，減壓濃縮，除去無水乙醚，得黃綠色油狀物。實施例8超臨界提取將晾乾的狹葉金粟蘭莖幹粉過2號篩，取其細粉末lkg放入萃取池中，加入100mL乙醇改性，在22.0Mpa，60。C條件下先靜態萃取2h，然後動態萃取50min，C02流速為30mL/min，收集提取物。實施例9微波提取在lOOOmL平底燒瓶中，加入狹葉金粟蘭葉乾粉20g和300mL乙醇。將燒瓶置於N幾07-3型實驗專用微波爐中，設定功率為400W，提取時間15min，重複兩次，將兩次的提取液過濾、濃縮得狹葉金粟蘭葉乙醇提取物。實施例10破碎提取稱取狹葉金粟蘭莖幹粉30g用300mL乙醇浸泡後置於破碎提取器中。破碎提取12min，提取液過濾、濃縮得狹葉金粟蘭莖乙醇提取物。實施例11萃取將實施例1所獲得的狹葉金粟蘭的甲醇粗提取物用極少量的甲醇溶解，再加5倍量的水，所得溶液置分液漏鬥中，在室溫條件下，加入等體積的石油醚(II)進行萃取，重複35次，直到石油醚萃取液的顏色變成近無色透明為止。將萃取的石油醚溶液在溫度低於50。C下減壓濃縮，即獲得石油醚提取物。石油醚萃取後的的水溶液先在55°C的溫度下，減壓濃縮，除去所含有的甲醇後加入水補充至原來的體積。將水溶液置分液漏鬥內，加入等體積的氯仿進行萃取。濃縮回收氯仿然後再次萃取，具體方法和條件同上，直到氯仿萃取液的顏色近無色透明為止。氯仿萃取液減壓濃縮除去氯仿後，即獲得狹葉金粟蘭的氯仿提取物。根據上述方法和條件，依次用等體積的有機溶劑乙酸乙酯、正丁醇進行萃取，濃縮回收和再萃取。就可以分別獲得狹葉金粟蘭的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物。最後剩下的水溶液，自然風乾，或者在65。C下烘乾，即可獲得狹葉金粟蘭水提取物。實施例11狹葉金粟蘭全株甲醇提取物對植物病原真菌菌絲生長的抑制作用實驗l.供試病原菌水稻稻瘟病菌(Jfe^a/wr^e^ri'sea)、惹枝霜疫黴病菌(屍ero/70//t力or3Jjtc/ij-)、黃瓜疫霄菌(屍A7to/7力tAars/27e7o/isO、香蕉炭疽病菌(6biJ"o^rj'c力"邁歷iAsae)、西瓜枯萎病菌(F"sarj'，ojf"or咖)、禾舀紋枯病菌(處/加"o"j's5"o7s/lz')。2.試驗方法採用含毒介質的生長速率法測定狹葉金粟蘭全株甲醇提取物對植物病原菌菌絲生長的抑制作用。將狹葉金粟蘭全株甲醇提取物乾物質用滅菌蒸餾水溶解後，配製成一定濃度的母液，然後取lmL母液加入到9mL瑢融的、冷卻至約5(TC左右的馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養基中，充分搖勻，迅速倒入直徑為6cm的培養皿中，靜置待凝結，製成含甲醇粗提取物乾物質濃度為10mg/邁L的PDA含毒培養平板。設加無菌蒸餾水為對照。供試病菌均預先在PDA培養基中培養，用孔徑為0.5cm的打孔器在菌落邊緣切取生長一致的菌塊作為接種體。將接種體移入PDA含毒培養平板中央。置25"恆溫培養。用十字交叉法測量菌落直徑，並校正，計算抑菌百分率。抑菌率(%)=(對照菌落直徑一處理菌落直徑)/(對照菌落直徑)X1003.試驗結果狹葉金粟蘭全株甲醇提取物對6種植物病原菌菌絲生長的抑制作用測試結果見表l。表1狹葉金粟蘭全株甲醇提取物對植物病原菌菌絲生長的抑制作用病原菌平均抑制率(％)±SE水稻紋枯病宂solaniIOO土O.OOa黃瓜疫黴菌屍.100±0.OOa荔枝霜疫黴菌屍."Ych7IOO土O.OOa74.97±0.20c香蕉炭疽菌C搬5V36"83.66±0.47b稻瘟菌脫^rj'sea100±0.00a注1)濃度為10mg/mL2)表中數據為3次重複的平均值；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換X'從表1可見，在含有狹葉金粟蘭全株甲醇提取物乾物質10mg/mL的測定濃度下，狹葉金粟蘭甲醇提取物對供試的多種植物病原菌的菌絲生長都表現出抑制活性。在供試的植物病原菌中，狹葉金粟蘭全株甲醇提取物對水稻紋枯病、荔枝霜疫黴菌、稻瘟菌和黃瓜疫黴菌菌絲生長的抑制率均是100%、對香蕉炭疽菌菌絲生長的抑制率也達83.66%、對西瓜枯萎菌菌絲生長的抑制率為74.97%。實施例12不同濃度的狹葉金粟蘭全株丙酮提取物對荔枝霜疫黴菌菌絲生長的抑制作用供試病原菌和試驗方法參見實施例ll。試驗結果見表2表2不同濃度的狹葉金粟蘭全株丙酮提取物對荔枝霜疫黴病病原真菌菌絲生長的抑制作用濃度(mg/mL)平均抑制率(％)±SE0.19.89士0.07e0.532.51士0.09d162.66士0.80c585.05±0.02b10IOO土O.OOa50100±0.OOa100IOO土O.00a200100士0.00a注表中數據為3次重複的平均值；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換f=arCSinVF實施例13狹葉金粟蘭全株甲醇提取物的分步萃取物對荔枝霜疫黴菌菌絲生長的抑制作用供試病原菌和試驗方法參見實施例11。試驗結果見表3表3狹葉金粟蘭全株甲醇提取物的分步萃取物對荔枝霜疫黴菌菌絲生長的抑菌作用tableseeoriginaldocumentpage12注1)濃度為lmg/mL2)表中數據為3次重複的平均值；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換r=arCSinVF實施例14不同濃度的狹葉金粟蘭葉乙酸乙酯提取物對西瓜枯萎菌菌絲生長的抑制作用供試病原菌和試驗方法參見實施例11。試驗結果見表4表4不同濃度的狹葉金粟蘭葉乙酸乙酯提取物對西瓜枯萎菌菌絲生長的抑制作用濃度(mg/mL)平均抑菌率(％)±SE19.47土0.03f532.07士0.01e1059.97±0.40d5075.26士0.07c10086.19±0.Olb200100±0.OOa400100±0.OOa700100±0.OOa注表中數據為3次重複的平均值；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換f=arcsinVF實施例15狹葉金粟蘭植株甲醇提取物對家蠅成蟲的毒殺活性1、家蠅(i/"SCaGfe/Z7esZ^'CaW'ci77a):引自廣東省衛生防疫站。產卵詞料和幼蟲飼料配方麥麩250g、麵粉12.5g、奶粉8g、酵母粉2.53g和水450500mL;成蟲飼料配方白糖:奶粉二l:1。麵粉、麥麩、奶粉以及酵母粉均為市售。家蠅羽化後，在籠中加入成蟲詞料和充分溼潤的海綿或棉花團，供成蟲取食。成蟲羽化3d後清晨將盛滿產卵詞料的培養皿放入成蟲養蟲籠中接卵，下午3點以後取出培養皿，將家蠅卵塊挑入盛有少量幼蟲詞料的罐頭瓶中，每瓶可放家蠅卵約500粒，用尼龍紗封住瓶口，每天增加一定量的新詞料，並清理瓶中殘渣,幼蟲化蛹後將罐頭瓶轉入養蟲籠中.取羽化後34d的成蟲供試。養蟲室內的相對溼度在75%80%，溫度為26土rC。2、試驗方法先稱取lg白砂糖於直徑為2.5cm、高為7.5cm的試管中，然後將O.lg樣品用10mL丙酮溶解，取lmL樣品液於盛白砂糖的試管中，搖勻，使樣品能均勻地附著在白砂糖上，用風扇吹乾備用。挑選羽化後34d整齊一致的家蠅成蟲，用乙醚麻醉後，迅速向每管中接入13頭家蠅成蟲。每處理設3個重複，以丙酮為空白對照、10Pg/g的阿維菌素作參照。12h、24h後統計死亡蟲數，計算死亡率和校正死亡率。校正死亡率=處理死亡率-對照f亡率"(K)l-對照死亡率3、試驗結果見表5表5狹葉金慄蘭不同部位甲醇提取物對家蠅的毒殺作用tableseeoriginaldocumentpage14注1質量百分比濃度為0.5%2表中數據為3次重複的平均值，每重複13頭蟲；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)3方差分析前原始數據經反正弦變換屍=arCSinVT試驗結果表明，狹葉金粟蘭地上部分甲醇提取物對家蠅有較好的活性。實施例16狹葉金粟蘭莖甲醇提取物的分步萃取物對家蠅成蟲的毒殺活性試蟲和試驗方法同實施例15。試驗結果見表6表6狹葉金粟蘭莖甲醇提取物的分步萃取物對家蠅成蟲的毒殺活性12h平均校正死亡率(%)24h平均校正死亡率(%)石油醚層氯仿層乙酸乙酯層正丁醇層水層阿維菌素±SE63.43±0.00a6.15±10.64c23.86±4.69b0.00±0.00c0.00±0.00c61.33±0.61a士SE88.12±0.00a41.15±3.33b35.01±1.31c0.00±0.00d0.00±0.00d87.51±0.86a注1)質量百分比濃度為O.5%2)表中數據為3次重複的平均值，每重複13頭蟲；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換J'=arcsinVF試驗結果0.5%濃度下，以石油醚層萃取物對家蠅的活性最高，處理12h、24h後家蠅成蟲死亡率分別約達63.43%，88.12%。氯仿層、乙酸乙酯層也有一定活性。實施例17不同溶劑、提取方法所得狹葉金粟蘭提取物對家蠅成蟲的毒殺活性試蟲和試驗方法同實施例15。試驗結果見表7表7不同溶劑、提取方法所得狹葉金粟蘭提取物對家蠅成蟲的毒殺活性溶劑、提取方法提取植物部12h平均校正死亡24h平均校正死亡率甲醇冷浸全株70.60±0.60a86.30±0.30a乙醇冷浸根0.0士0.008d12.15士1.32c乙酸乙酯冷丙酮超聲乙醇超臨界取水蒸汽蒸餾阿維菌素葉全株—一+*聖果60.42±1.32b70.60±0.60a69.00±3.84a35.23±0.60c70.77±0.00a86.30±0.30a86.15±4.69a46.30±0.30b86.33士1.41a88.86±0.97a注1)質量百分比濃度為O.5%2)表中數據為3次重複的平均值，每重複13頭蟲；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弓玄變換:arcsinVZ實施例18狹葉金粟蘭不同部位甲醇提取物對致倦庫蚊4齡幼蟲的毒殺作用1、試蟲致倦庫蚊(0^ex^j'/7^/e/ksc^z^s):從廣東省衛生防疫站引種。幼蟲生活在自來水中，自來水須提前靜置至少24h以脫氯，餵以酵母片，化蛹後將蛹收集到裝有脫氯自來水的杯內，然後放在密閉的紗籠內，羽化後的成蟲餵以5%的葡萄糖水，羽化後35d在紗籠內放一隻小白鼠供成蚊吸血，致倦庫蚊在晚上吸血。成蚊吸血後約35d可產卵，卵產於籠中裝有脫氯自來水的燒杯中。卵孵化後餵以少量酵母片，然後慢慢增加酵母片的用量，脫氯自來水每2-3d更換1次。養蚊室溫度26土1。C，相對溼度75%，光周期L:D二12:12。2、試驗方法將待測樣品先用少量丙酮溶解，然後加入脫氯自來水中，丙酮/水的體積比控制在2%以下，配120mL藥液，將配好的藥液平均分為3份轉入3隻lOOmL燒杯，分別向每隻燒杯中放入30頭致倦庫蚊4齡幼蟲，以丙酮為空白對照、50Pg/mL的魚藤酮為參照。處理24h、48h後統計死蟲數，按下式計算死亡率死亡率(％)=^:蟲氣XIOO供試總蟲數校正死亡率(%)=處理死亡率一-艦亡率邏l-對照死亡率3、試驗結果見表8表8狹葉金粟蘭不同部位甲醇提取物對致倦庫蛟4齡幼蟲的毒殺作用部位根莖葉花果全株24h平均校正死亡率(％)±48h平均校正死亡率(％)±40.72±0.08d55.23±0.08b50.81±0.03c51.05±0.06c50.85±0.40c59.63±0,06a65.08±0.02d90.15±0.06b86.23±0.09c84.28±0.08c85.70±0.09c93.78士0.071a注1)濃度為5mg/mL2)表中數據為3次重複的平均值，每重複30頭蟲；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弓玄變換J':arcsinVZ實施例19狹葉金粟蘭全株不同濃度丙酮提取物對致倦庫蚊4齡幼蟲的毒殺作用試蟲和試驗方法同實施例18，試驗結果見表9。表9狹葉金粟蘭全株不同濃度丙酮提取物對致倦庫蚊4齡幼蟲的毒殺作用濃度24h平均校正死亡率(％)士48h平均校正死亡率(%)±0.110.22±0.04g12.63土0.09f0.529.92±0.06f35.10±0.lie15105010020040070040.35±0.04e50.55±0.05d65.25±0.03c95,79±0.0%100±0.00a100±0.00a100±0.00a100±0.00a68.26±0.04d80.48±0.llc98.13±0.07bIOO土O.OOaIOO土O.OOaIOO士O.OOaIOO士O.OOa100±0.OOa注表中數據為3次重複的平均值，每重複13頭蟲；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換r=arcsinVF實施例20狹葉金粟蘭全株不同部位甲醇提取物對斜紋夜蛾的拒食作用1.試蟲斜紋夜蛾(&ofl^^ez^):卵塊採自華南農業大學農場.低齡幼蟲用芋頭(CWocasj'aesotA/e/3te)葉飼養，高齡幼蟲用木薯(ife/j'力"esciL/e/7ta)葉飼養2、試驗方法將新鮮木薯葉用打孔器打成直徑為2cm的葉碟。提取物0.lg溶於10mL丙酮水=1:1的混合溶液，浸漬葉碟1-2s，晾乾後放入墊有濾紙(加適量水保溼)的9cm培養皿中，每個培養皿放入6片處理葉碟，接入6頭已飢餓3-4h的斜紋夜蛾3齡幼蟲。每處理設5個重複，用丙酮作空白對照、1Pg/mL的印楝素為參照。24h後調查取食葉面積。按如下公式計算拒食率對照組取食葉面積-處理組取食葉面積inn拒食率(%)=-對照組取食葉面積-"003、驗結果見表IO表10狹葉金粟蘭全株甲醇提取物對斜紋夜蛾的拒食作用部位根聖葉花果全株印楝素24h拒食率(％)±SE44.89±0.05d98.24±0.lla82.71±0.10c80.30±0.09e85.88±0.02b97.89±0.OOa注1)濃度為10mg/mL2)表中數據為5次重複的平均值；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換X'葉碟法結果表明lOmg/mL濃度的狹葉金粟蘭地上部分甲醇提取物處理斜紋夜蛾24h後，其拒食率達63%以上。實施例21狹葉金粟蘭全株不同濃度甲醇提取物對斜紋夜蛾的拒食作用試蟲和試驗方法同生物活性實施例20，試驗結果見表ll。表11狹葉金粟蘭全株不同濃度甲醇提取物對斜紋夜蛾的拒食作用濃度(mg/mL)15105010020024h拒食率(％)±SE32.13±0.07e62.69±0.08d85.88±0.19c95.65±0.17b100±0.OOa100±0.OOa400100士0.00a700100±0.00a注表中數據為5次重複的平均值；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換r=arCSinVF實施例22狹葉金粟蘭全株甲醇提取物的分步萃取物對斜紋夜蛾的拒食作用試蟲和試驗方法同實施例20，試驗結果見表12。表12狹葉金粟蘭甲醇提取物的分步萃取物對斜紋夜蛾的拒食作用萃取層石油醚層氯仿層乙酸乙層正丁醇層水層印楝素注1)濃度為5mg/mL2)表中數據為5次重複的平均值；同列數據後隨相同字母者表示在0.05水平上差異不顯著(DMRT法)；方差分析前原始數據經反正弦變換f二arcsinVF24h拒食率(％)±SE68.10±0.03c95.50±0.24b6.24±0.12d0.00±0.00e0.00土0.00e98.12±0.00a20權利要求1、一種狹葉金粟蘭提取物的製備方法，其特徵在於以狹葉金粟蘭為原料，採用溶劑提取法、超臨界萃取法、微波提取法、超聲波提取法、破碎提取法、水蒸汽蒸餾法或萃取法提取得到。2、根據權利要求1所述的狹葉金粟蘭提取物的製備方法，其特徵在於所述狹葉金粟蘭為狹葉金粟蘭的根、莖、葉、花果或全株。3、根據權利要求1所述的狹葉金粟蘭提取物的製備方法，其特徵在於所述溶劑提取法採用的溶劑為水、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇、無水乙醚、正丁醇、N，N-二甲基甲醯胺或N，N二甲基亞碸。4、權利要求1所述製備方法製備得到的狹葉金粟蘭提取物的應用，其特徵在於在製備殺蟲劑或殺菌劑方面的應用。5、根據權利要求4所述的應用，其特徵在於所述製備殺蟲劑或殺菌劑採用狹葉金粟蘭提取物的有效濃度為0.lmg/mL700mg/mL。6、根據權利要求4或5所述的應用，其特徵在於所述製備殺蟲劑或殺菌劑採用狹葉金粟蘭提取物的有效濃度為0.5mg/raL100mg/mL。全文摘要本發明公開了一種狹葉金粟蘭提取物的製備方法，以狹葉金粟蘭為原料，採用溶劑提取法、超臨界萃取法、微波提取法、超聲波提取法、破碎提取法、水蒸汽蒸餾法或萃取法提取得到，同時公開了所述提取物在製備殺蟲劑和殺菌劑方面的應用。本發明將狹葉金粟蘭變廢為寶，製備成一種具有優良殺蟲、殺菌活性的植物提取物，防病蟲效果顯著，且方法簡單易行，成本較低，具有良好的應用和推廣前景。文檔編號A01N65/00GK101223888SQ20081002590公開日2008年7月23日申請日期2008年1月18日優先權日2008年1月18日發明者徐漢虹,杜曉英,田永清申請人:華南農業大學