聯合療法和用於評估對治療的抗性的方法

2023-05-16 23:04:41

專利名稱：聯合療法和用於評估對治療的抗性的方法
聯合療法和用於評估對治療的抗性的方法本發明涉及用於測定受試者對用2，2- 二甲基-N-((S)-6-氧-6，7_ 二氫_5H_ 二苯並[b, d]氮雜卓-7-基)-N』 -(2，2，3，3，3-五氟-丙基)-丙二酸胺(2，2-dimethyl-N-((S) -6-OXO-6, 7-dihydro-5H-dibenzo[b, d]azepin-7-yl)-N 1 -(2, 2, 3, 3, 3-pentafIuoro-propyl) -maIonamide)治療的抗性的方法和試劑盒。本發明還涉及用於治療患有增殖性病症的患者的聯合療法，包括施用抗IL6劑和抗IL-8劑中的至少一種和2，2-二甲基 _N_ ((S) -6-氧 _6，7- 二氧-5H- 二苯並[b, d]氣雜卓-7-基)-N』 - (2, 2, 3, 3, 3-五氣-丙基)_丙二醯胺。
背景技術：
蛋白質刻缺蛋白(Notch)是一種存在於大多數生物體，包括哺乳動物中的跨膜蛋白，其在調節基因表達中具有作用。在配體結合刻缺蛋白的胞外域時，蛋白質刻缺蛋白正好在膜外部被腫瘤壞死因子α轉化酶(TACE)切割，釋放仍然在與配體相互作用中的胞外域。然後，Y-分泌酶正好在膜內部切割該蛋白質，釋放胞內域(稱為活性胞內刻缺蛋白或「ICN」)。ICN移位至細胞核，並激活轉錄因子CSL，如此誘導基因轉錄。錯誤的刻缺蛋白信號傳導牽涉多種病症，包括增殖性病症。因此，對刻缺蛋白信號傳導的抑制是腫瘤學中很感興趣的領域。Y-分泌酶抑制阻斷刻缺蛋白信號傳導途徑，並且因此，Y-分泌酶抑制劑具有抗增殖活性。2，2- 二甲基-N-((S)-6-氧-6,7- 二氫 _5Η_ 二苯並[b，d]氮雜·卓-7-基)-N』 - (2，2，3，3，3-五氟-丙基)-丙二醯胺(在本文中又稱為「化合物I 」)是一種有力的且選擇性的Y-分泌酶抑制劑，其抑制腫瘤細胞中的刻缺蛋白信號傳導。已知用化合物I處理的異種移植物顯示與血管發生有關的基因表達降低，這與化合物I抑制腫瘤血管發生的能力一致。Luistro等，Cancer Research, 69:7672-80 (2009)。令人感興趣地，這些研究在H460a異種移植物方面顯示血管生成基因概況(profile)的很小變化。白介素-6(IL6)和白介素_8(IL8)是在此類多種多樣的病症，諸如感染和免疫、炎症、自身免疫性疾病、和癌症中發揮重要作用的有力細胞因子。申請人已經發現了 IL6和IL8之每種的表達升高對用化合物I的治療賦予抗性。發明概述本發明涉及用於測定受試者對用2，2- 二甲基-N-((S)-6-氧-6，7_ 二氫_5H_ 二苯並[b，d]氮雜卓-7-基)-N』 -(2，2，3，3，3-五氟-丙基)-丙二醯胺治療的抗性的方法，包括測量自所述受試者獲得的生物樣品中存在的生物標誌的水平，所述生物標誌是IL6或IL8。本發明還涉及在幫助測定受試者對用化合物2，2- 二甲基-N- ((S) -6-氧_6，7_ 二氫-5H-二苯並[b，d]氮雜卓-7-基)-N』 -(2，2，3，3，3-五氟-丙基)-丙二醯胺治療的抗性中使用的試劑盒，其中所述試劑盒包含用於檢測生物標誌IL6或IL8的藥劑。本發明進一步涉及治療患有增殖性病症的患者的方法，包括對患者施用(A)化合物I ;和⑶抗IL6或抗IL8劑。本發明進一步涉及㈧化合物I ;和⑶抗IL6和/或抗IL8劑的序貫或同時組合，其作為藥物，特別是作為用於在治療增殖性病症諸如癌症，特別是實體瘤，更特別是乳腺、結腸直腸、肺、和前列腺腫瘤中使用的藥物使用。本發明的又一個方面是包含⑷化合物I ;和⑶抗IL6或抗IL8劑的試劑盒。在又一個方面，本發明涉及㈧化合物I ;和⑶抗IL6和/或抗IL8劑的組合用於製造用於治療增殖性病症，特別是癌症，更特別是實體瘤諸如乳腺、結腸直腸、肺、和前列腺腫瘤的藥物的用途。附圖簡述圖I描繪了對NCI_H460a和A549細胞系實施的細胞因子陣列測定法的結果。圖2描繪了分泌性IL6和IL8的量，如使用ELISA自各種細胞系測量的。圖3描繪了編碼IL6和IL8的mRNA的量，如使用qRT-PCR自各種細胞系測量的。 圖4描繪了分泌性IL6和IL8的量，如使用ELISA自H460a細胞、A549親本細胞、A549對照細胞、A549IL6過表達細胞和A549IL8過表達細胞測量的。圖5描繪了接受下列各項的異種移植物模型中用化合物I處理和用泰素(TaxoI)"處理對腫瘤生長的影響H460a細胞、A549親本細胞、A549對照細胞、A549IL6過表達細胞、A549IL8過表達細胞、和A549IL6過表達細胞和A549IL8過表達細胞的I: I混合物。圖6描繪了編碼IL8的mRNA的量和分泌性IL8的量，如自親本H460a細胞、接受對照載體的H460a細胞、和IL8敲低H460a細胞測量的。圖7描繪了化合物I處理對腫瘤生長的影響，如在H460a和IL_8敲低H460a異種移植物模型中測量的。圖8描繪了用化合物I處理、用抗IL8抗體處理、和用化合物I和IL_8抗體的聯合療法對H460a異種移植物模型中腫瘤生長的影響。圖9描繪了用化合物I處理、用抗IL6抗體處理、和用化合物I和IL_6抗體的聯合療法對H460a異種移植物模型中腫瘤生長的影響。

圖10描繪了 IL6和IL8編碼mRNA在各種細胞系中的水平，如使用qRT_PCR測量的。圖11描繪了由各種細胞系分泌的IL6和IL8水平，如使用ELISA測量的。圖12描繪了用化合物I處理後U87MG和LOX細胞中HesI mRNA的下調。圖13描繪了化合物I處理對U87MG和LOX細胞中腫瘤生長的影響。圖14描繪了使用ELISA測量的，在H460a細胞、用化合物I處理的H460a細胞、IL8敲低H460a細胞、用化合物I處理的IL8敲低H460a細胞、U87MG細胞、和用化合物I處理的U87MG細胞中分泌性IL6和IL8的量。發明詳述定義除非另有敘述，本申請(包括說明書和權利要求書)中使用的下列術語具有下文給出的定義。必須注意，如說明書和所附權利要求書中使用的，單數形式「一種」、「一個」和「所述/該」包括複數提及物，除非上下文另有明確規定。如本文中所使用的，「化合物I」指可用作Y-分泌酶抑制劑的2，2-二甲基 _N_ ((S) -6-氧 _6，7- 二氧-5H- 二苯並[b, d]氣雜卓-7-基)-N』 - (2, 2, 3, 3, 3-五氣-丙基)_丙二醯胺。化合物I具有以下結構。
權利要求
1.一種用於測定受試者對用化合物2，2- 二甲基-N-((S)-6-氧-6，7- 二氫-5H- 二苯並[b, d]氮雜卓-7-基)-N』 - (2，2, 3, 3, 3-五氟-丙基)-丙二酸胺治療的抗性的方法，包括測量自所述受試者獲得的生物樣品中存在的生物標誌的水平，所述生物標誌是IL6或IL8。
2.依照權利要求I的方法，其中所述受試者是哺乳動物。
3.依照權利要求I的方法，其中所述受試者是人。
4.依照權利要求I的方法，其中所述生物標誌是IL6。
5.依照權利要求I的方法，其中所述生物標誌是IL8。
6.依照權利要求I的方法，其中測量IL6和IL8兩者的水平。
7.依照權利要求I的方法，其中所述生物樣品是血液。
8.依照權利要求I的方法，其中所述生物樣品是血清。
9.依照權利要求I的方法，其中所述生物樣品是尿液。
10.依照權利要求I的方法，其中通過測量所述樣品中存在的蛋白質量來測量所述生物標誌。
11.依照權利要求I的方法，其中通過測量編碼所述生物標誌的HiRNA水平來測量所述生物標誌。
12.依照權利要求I的方法，其中將所述樣品中存在的生物標誌水平與所述生物標誌的閾值水平比較，且若更大的話，則認為所述受試者對用2，2-二甲基 _N_ ((S) -6-氧 _6，7- 二氧-5H- 二苯並[b, d]氣雜卓-7-基)-N』 - (2, 2, 3, 3, 3-五氣-丙基)_丙二醯胺的治療具有體內抗性。
13.依照權利要求12的方法，其中所述生物標誌是IL6，且IL6的所述閾值水平是約500pg/mlο
14.依照權利要求12的方法，其中所述生物標誌是IL8，且IL8的所述閾值水平是約50pg/mlο
15.一種在幫助測定受試者對用化合物2，2- 二甲基-N- ((S) -6-氧-6，7- 二氫-5H- 二苯並[b，d]氮雜卓-7-基)-N』 - (2，2，3，3，3-五氟-丙基)-丙二醯胺治療的抗性中使用的試劑盒，所述試劑盒包含用於檢測自所述受試者獲得的生物樣品中生物標誌IL6或IL8的藥劑。
16.(A)化合物I ;和(B)抗IL6和/或抗IL8劑的序貫或同時組合，其作為藥物使用，特別用於在治療增殖性病症諸如癌症中使用。
17.依照權利要求16的組合，其中所述組合包含抗IL6和抗IL8劑兩者。
18.依照權利要求16或17的組合，其中所述抗IL6劑是抗IL6抗體。
19.依照權利要求16或17的方法，其中所述抗IL8劑是抗IL8抗體。
20.依照權利要求16至18中任一項的組合，其中所述抗IL6劑是幹擾編碼IL6的核酸表達的核酸。
21.依照權利要求20的組合，其中所述幹擾編碼IL6的核酸表達的核酸是反義RNA。
22.依照權利要求20的組合，其中所述幹擾編碼IL6的核酸表達的核酸是shRNA或SiRNA0
23.依照權利要求16、17或19的組合，其中所述抗IL8劑是幹擾編碼IL8的核酸表達的核酸。
24.依照權利要求23的組合，其中所述幹擾編碼IL8的核酸表達的核酸是反義RNA。
25.依照權利要求23的組合，其中所述幹擾編碼IL8的核酸表達的核酸是shRNA或SiRNA0
26.—種試劑盒，其包含(A)化合物I ;和⑶抗IL6和/或抗IL8劑。
27.(A)化合物I ;和⑶抗IL6和/或抗IL8劑的組合用於製造用於治療增殖性病症，特別是癌症的藥物的用途。
28.新的方法、組合、用途和試劑盒，基本上如本文中所描述的。
全文摘要
本發明涉及一種用於測定受試者對用2,2-二甲基-N-((S)-6-氧-6,7-二氫-5H-二苯並[b,d]氮雜卓-7-基)-N』-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二醯胺治療的抗性的方法，其通過測量自受試者獲得的生物樣品中存在的一種或多種生物標誌的水平來進行，所述生物標誌是IL6和/或IL8。本發明還涉及一種用於患有增殖性病症的患者的聯合療法，包括對患者施用2,2-二甲基-N-((S)-6-氧-6,7-二氫-5H-二苯並[b,d]氮雜卓-7-基)-N』-(2,2,3,3,3-五氟-丙基)-丙二醯胺和抗IL6和/或抗IL8劑。
文檔編號A61K38/00GK102893155SQ201180024094
公開日2013年1月23日 申請日期2011年5月17日 優先權日2010年5月19日
發明者J.F.博伊蘭, 何巍 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司