一種快速培育牛樟芝的方法與流程
2023-05-17 04:49:16
本發明屬於食用菌栽培領域，具體涉及一種快速培育牛樟芝的方法。
背景技術：
牛樟芝（Antrodia camphorata）又名牛樟菇，屬於非褶菌目、多孔菌科、薄孔菌屬多年生蕈菌類，具有護肝、抗癌、調節免疫、抗過敏、解毒和抗炎等功效，因而受到保健人群、疾病患者的青睞及市場的熱捧。牛樟芝的人工栽培方法有牛樟樹椴木栽培法、固態栽培法和液體發酵法。但椴木栽培法培養時間長，培養成本高，得到的牛樟芝產量低，而固態栽培法和液體發酵法雖然培養時間短，但無法獲得野生牛樟芝某些特有的化學組分，得不到市場的認可。
技術實現要素：
本發明的目的在於提供一種快速培育牛樟芝的方法，其利用櫟樹段栽培牛樟芝，既保護了資源稀缺的牛樟樹，又可解決牛樟芝因營養不足，導致的菌絲生長、繁殖慢，培養周期長等生產瓶頸問題，可短期內獲得具有較高生物量及近野生牛樟芝有效成分的牛樟芝子實體，有效緩解市場供求矛盾及藥企原料不足問題，具有良好的社會與經濟效益。
為實現上述目的，本發明採用如下技術方案：
一種快速培育牛樟芝的方法，包括以下步驟：
1）蜜環菌菌液的製備：選擇幼嫩、健壯的野生蜜環菌菌索，取其尖端，用體積濃度為70％的酒精表面消毒5-7min，然後在無菌條件下去掉外部皮鞘，將白色菌髓部分切成長1-1.5cm的小段，接種於斜面培養基上，在20-25℃條件下培養15-20d，至菌絲布滿斜面；再將所得菌絲剪成1.0-1.5cm的小段，按重量體積比1:2-3（g/mL）加入質量濃度為1.0%-1.5%的葡萄糖溶液，1000r/min勻漿10min，得蜜環菌菌液；
2）蜜環菌接種：於每年10月-11月，選取直徑10cm以上的櫟樹，將其鋸成長30cm的木段，堆積15-20d後，在木段上每隔3-4cm砍一個魚鱗口，深度至木質部為度，將步驟1）製備的蜜環菌菌液接至切口處，於20-25℃、相對溼度55-65%條件下進行培養；
3）牛樟芝菌的接種：待步驟2）接種蜜環菌的櫟樹木段培養30-40d後，在木段原切口交互處再砍一個魚鱗口，在所有切口處均接種健康牛樟芝菌，於20-25℃、相對溼度70-85%條件下進行培養；
4）牛樟芝菌的培養：待切口出現白色的牛樟芝氣生菌絲時，將菌材移入培養床繼續培養40-50d，即收穫牛樟芝子實體。
步驟1）中斜面培養基的原料配方為：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、麥麩提取物5g、根系提取物5g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g、維生素B1 10mg，水100mL，調節pH至5~6.5。
其中，所述麥麩提取物是將麥麩用體積濃度為50%的酒精反覆浸提2-3次後，將浸提液合併，真空濃縮至原體積1/5-1/6，再加入其體積1.5-2.0倍的水混勻即得；
所述根系提取物是將葫蘆科植物的根系用體積濃度為90%的甲醇浸泡12h，然後將浸泡液真空濃縮至幹，加入其重量2.0-3.0倍的水溶解即得。
本發明的顯著效果在於：本發明利用資源豐富的櫟樹為基材，先在櫟樹段上接種蜜環菌，依靠蜜環菌生長分解、獲取樹段中的營養，然後再接種牛樟芝菌，使牛樟芝菌通過蜜環菌獲得營養，快速生長。該方法既保護了資源稀缺的牛樟樹，又可解決牛樟芝因營養不足，導致的菌絲生長、繁殖慢，培養周期長等生產瓶頸問題，其生產周期可較常規牛樟樹椴木栽培法縮短20-35天，能在短期內獲得具有較高生物量及近野生牛樟芝有效成分的牛樟芝子實體，有效緩解市場供求矛盾及藥企原料不足問題，具有良好的社會與經濟效益。
具體實施方式
為了使本發明所述的內容更加便於理解，下面結合具體實施方式對本發明所述的技術方案做進一步的說明，但是本發明不僅限於此。
實施例1
一種快速培育牛樟芝的方法，包括以下步驟：
1）蜜環菌菌液的製備：選擇幼嫩、健壯的野生蜜環菌菌索，取其尖端，用體積濃度為70％的酒精表面消毒5min，然後在無菌條件下去掉外部皮鞘，將白色菌髓部分切成長1cm的小段，接種於斜面培養基上，每管放置一段，在20℃條件下培養20d，至菌絲布滿斜面；再將所得菌絲剪成1.0cm的小段，按重量體積比1:3（g/mL）加入質量濃度為1.0%的葡萄糖溶液，1000r/min勻漿10min，得蜜環菌菌液；
2）蜜環菌接種：於每年10月-11月，將直徑10cm的櫟樹鋸成長30cm的木段，堆積15d後，在木段上每隔3cm砍一個魚鱗口，深度至木質部為度，將步驟1）製備的蜜環菌菌液接至切口處，於20℃、相對溼度55%條件下進行培養；
3）牛樟芝菌的接種：待步驟2）接種蜜環菌的櫟樹木段培養30d後，在木段原切口交互處再砍一個魚鱗口，在所有切口處均接種健康牛樟芝菌，於20℃、相對溼度70%條件下進行培養；
4）牛樟芝菌的培養：待切口出現白色的牛樟芝氣生菌絲時，將菌材移入培養床繼續培養40d，即收穫牛樟芝子實體。
所用斜面培養基的配方為：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、麥麩提取物5g、根系提取物5g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g、維生素B1 10mg，水100mL，調節pH至6.5。
其中，所述麥麩提取物是將麥麩用體積濃度為50%的酒精反覆浸提2次後，將浸提液合併，真空濃縮至原體積1/5，再加入其體積2.0倍的水混勻即得；
所述根系提取物是將葫蘆科植物的根系用體積濃度為90%的甲醇浸泡12h，然後將浸泡液真空濃縮至幹，加入其重量2.0倍的水溶解即得。
實施例2
一種快速培育牛樟芝的方法，包括以下步驟：
1）蜜環菌菌液的製備：選擇幼嫩、健壯的野生蜜環菌菌索，取其尖端，用體積濃度為70％的酒精表面消毒6min，然後在無菌條件下去掉外部皮鞘，將白色菌髓部分切成長1.2cm的小段，接種於斜面培養基上，每管放置一段，在22℃條件下培養18d，至菌絲布滿斜面；再將所得菌絲剪成1.3cm的小段，按重量體積比1:2（g/mL）加入質量濃度為1.2%的葡萄糖溶液，1000r/min勻漿10min，得蜜環菌菌液；
2）蜜環菌接種：於每年10月-11月，將直徑12cm的櫟樹鋸成長30cm的木段，堆積16d後，在木段上每隔3cm砍一個魚鱗口，深度至木質部為度，將步驟1）製備的蜜環菌菌液接至切口處，於22℃、相對溼度60%條件下進行培養；
3）牛樟芝菌的接種：待步驟2）接種蜜環菌的櫟樹木段培養35d後，在木段原切口交互處再砍一個魚鱗口，在所有切口處均接種健康牛樟芝菌，於23℃、相對溼度80%條件下進行培養；
4）牛樟芝菌的培養：待切口出現白色的牛樟芝氣生菌絲時，將菌材移入培養床繼續培養45d，即收穫牛樟芝子實體。
所用斜面培養基的配方為：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、麥麩提取物5g、根系提取物5g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g、維生素B1 10mg，水100mL，調節pH至6.0；
其中，所述麥麩提取物是將麥麩用體積濃度為50%的酒精反覆浸提2次後，將浸提液合併，真空濃縮至原體積1/5，再加入其體積1.8倍的水混勻即得；
所述根系提取物是將葫蘆科植物的根系用體積濃度為90%的甲醇浸泡12h，然後將浸泡液真空濃縮至幹，加入其重量2.5倍的水溶解即得。
實施例3
一種快速培育牛樟芝的方法，包括以下步驟：
1）蜜環菌菌液的製備：選擇幼嫩、健壯的野生蜜環菌菌索，取其尖端，用體積濃度為70％的酒精表面消毒7min，然後在無菌條件下去掉外部皮鞘，將白色菌髓部分切成長1.5cm的小段，接種於斜面培養基上，每管放置一段，在25℃條件下培養15d，至菌絲布滿斜面；再將所得菌絲剪成1.5cm的小段，按重量體積比1:2（g/mL）加入質量濃度為1.5%的葡萄糖溶液，1000r/min勻漿10min，得蜜環菌菌液；
2）蜜環菌接種：於每年10月-11月，將直徑15cm的櫟樹鋸成長30cm的木段，堆積20d後，在木段上每隔4cm砍一個魚鱗口，深度至木質部為度，將步驟1）製備的蜜環菌菌液接至切口處，於25℃、相對溼度65%條件下進行培養；
3）牛樟芝菌的接種：待步驟2）接種蜜環菌的櫟樹木段培養40d後，在木段原切口交互處再砍一個魚鱗口，在所有切口處均接種健康牛樟芝菌，於25℃、相對溼度85%條件下進行培養；
4）牛樟芝菌的培養：待切口出現白色的牛樟芝氣生菌絲時，將菌材移入培養床繼續培養50d，即收穫牛樟芝子實體。
所用斜面培養基的配方為：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、麥麩提取物5g、根系提取物5g、瓊脂20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g、維生素B1 10mg，水100mL，調節pH至5；
其中，所述麥麩提取物是將麥麩用體積濃度為50%的酒精反覆浸提3次後，將浸提液合併，真空濃縮至原體積1/6，再加入其體積1.5倍的水混勻即得；
所述根系提取物是將葫蘆科植物的根系用體積濃度為90%的甲醇浸泡12h，然後將浸泡液真空濃縮至幹，加入其重量3.0倍的水溶解即得。
將實施例1-3收穫的牛樟芝子實體與野生牛樟芝子實體進行品質比較，結果見表1。
表1 不同來源牛樟芝子實體的品質比較
由表1可見，採用本發明方法栽培獲得的牛樟芝子實體與野生牛樟芝子實體品質相近。
以上所述僅為本發明的較佳實施例，凡依本發明申請專利範圍所做的均等變化與修飾，皆應屬本發明的涵蓋範圍。