暴馬丁香樹皮揮髮油成分的分離鑑定和新用途的製作方法
2023-05-04 07:23:06 1
專利名稱：：暴馬丁香樹皮揮髮油成分的分離鑑定和新用途的製作方法
技術領域：
：本發明所屬醫藥產品研究開發
技術領域：
。本發明涉及暴馬丁香5:^7卵sM;rCTw'sRupr.樹皮揮髮油的分離鑑定和新用途。
背景技術：
：暴馬丁香5yr^7《ss/wr朋sisRupr.為長白山常見藥用植物之一，在我國主要分布在吉林、遼寧、華北、西北和華中地區，資源豐富。樹皮、樹幹及枝條均可藥用，味苦，性微寒，經現代藥理實驗證明具有清肺祛痰、止咳、平喘、消炎、利尿的功能。目前，關於暴馬丁香樹皮揮髮油的分離鑑定和化學成分及藥理作用研究鮮見報導，僅有幾篇報導從樹皮、樹枝中分離得到數個化合物，未對暴馬丁香樹皮揮髮油做過抑菌研究。因此，本發明採用水蒸氣蒸餾法對藥用植物暴馬丁香樹皮揮髮油進行了提取，利用6890/5973N氣相色譜與質譜聯用儀器分離和鑑定，並對暴馬丁香樹皮揮髮油進行了抑菌試驗。本發明的暴馬丁香樹皮揮髮油對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌具有抑制作用，這種抑菌作用具有積極的應用價值。
發明內容本發明的目的是對暴馬丁香樹皮揮髮油成分進行提取、分離和鑑定並將暴馬丁香樹皮揮髮油進行抑菌試驗，利於在抑菌方面進行開發應用。本發明的暴馬丁香樹皮揮髮油成分對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用，可開發為天然抗菌劑應用於食品、藥品等行業，製備出具有抑菌作用的各種形式的產品。1.本發明涉及暴馬丁香5yW/^aa/mre/75i'sRupr.樹皮揮髮油的分離鑑定和新用途。取暴馬丁香樹皮，乾燥後剪碎，用蒸餾水浸泡6-8h後超聲lh，溫度為30'C功率為80W。將藥材與浸泡液一同倒入揮髮油提取器中，採用水蒸氣蒸餾法提取4-5h。放出水層，用乙醚反覆洗揮髮油提取器，使暴馬丁香揮髮油充分溶解到乙醚中。將溶有揮髮油的乙醚溶液倒入燒杯中，再向燒杯中加無水硫酸鈉吸乾水分，回收乙醚後即得到純淨的揮髮油，放入冰箱4'C保存備用。暴馬丁香樹皮揮髮油用6890/5973N氣相色譜與質譜聯用儀器分析，暴馬丁香揮髮油主要ifc學成分為n-Hcxadecanoicacid(27.46%)，9，12—Octadecadienoicacid(Z，Z)-(28.52%)，9'17-0ctadecadienal(14.16%)andTricosane(2.44%)。2.暴馬丁香樹皮揮髮油的提取、分離和鑑定，其特徵在於該工藝包括以下過程(1)取暴馬丁香樹皮，挑去雜物，水洗，烘乾或晾乾，粉碎，用蒸餾水浸泡6-8h後超聲lh，溫度為3(TC功率為80W;(2)將(1)中藥材與浸泡液一同倒入揮髮油提取器中，採用水蒸氣蒸餾法提取4-5h，獲得上面浮有揮髮油的水溶液；(3)將(2)中上面浮有揮髮油的水溶液放出水層，用乙醚反覆洗揮髮油提取器，使暴馬丁香揮髮油充分溶解到乙醚中，將溶有揮髮油的乙醚溶液倒入燒杯中，再向燒杯中加無水硫酸鈉吸乾水分，回收乙醚後即得到純淨的揮髮油，放入冰箱4'C保存備用。(4)將(3)屮暴馬丁香樹皮揮髮油用6890/5973N氣相色譜與質譜聯用儀器分析，暴馬丁香揮髮油主要化學成分為n-Hexadecanoicacid(27.46%)，9，12-0ctadecadienoicacid(Z，Z)-(28.52%)，9,17-0ctadccadienal(14.16%)andTricosane(2.44%)。3.根據本發明1至2所述的製備暴馬丁香樹皮揮髮油的原料為暴馬丁香5)^i/7卵a孤re/75J'sRupr.的樹皮。4.根據本發明1至2所述的暴馬丁香樹皮揮髮油對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用。5.根據本發明1至2所述的暴馬丁香樹皮揮髮油，其特徵在於該樹皮揮髮油可作為天然抗菌劑用於食品、藥品等行業，代替有毒副作用的合成抗菌劑。根據本發明，本發明中的"％"是重量百分比。具體實施例方式本發明所述的暴馬丁香樹皮揮髮油成分的提取、分離和鑑定包括以下實施例，下面的實施例可進一步說明本發明，但不以任何方式限制本發明。實施例1:(1)取暴馬丁香樹皮100g，挑去雜物，水洗，烘乾或晾乾，粉碎，用蒸餾水300mL浸泡6h後超聲lh，溫度為3CTC功率為80W;(2)將(1)中藥材與浸泡液一同倒入揮髮油提取器中，採用水蒸氣蒸餾法提取4h，獲得上面浮有揮髮油的水溶液；(3)將(2)中上面浮有揮髮油的水溶液放出水層，用乙醚反覆洗揮髮油提取器，使暴馬丁香揮髮油充分溶解到乙醚中，將溶有揮髮油的乙醚溶液倒入燒杯中，再向燒杯中加無水硫酸鈉吸乾水分，回收乙醚後即得到純淨的揮髮油，放入冰箱4x:保存備用。(4)將(3)中暴馬丁香樹皮揮髮油用6890/5973N氣相色譜與質譜聯用儀器分析，暴馬丁香揮髮油主要化學成分為n-Hexadecanoicacid(27.46%)，9,12-0ctadecacHenoicacid(Z,Z)-(28.52%)，9，17-Octadecadienal(14.16%)andTricosane(2.44%)。實施例2:(1)取暴馬丁香樹皮200g，挑去雜物，水洗，烘乾或晾乾，粉碎，用蒸餾水600mL浸泡8h後超聲lh，溫度為3(TC功率為80W:(2)將(1)屮藥材弓浸泡液一同倒入揮髮油提取器中，採用水蒸氣蒸餾法提取5h,獲得上面浮有揮髮油的水溶液；(3)將(2)中上面浮有揮髮油的水溶液放出水層，用乙醚反覆洗揮髮油提取器，使暴馬丁香揮髮油充分溶解到乙醚中，將溶有揮髮油的乙醚溶液倒入燒杯中，再向燒杯中加無水硫酸鈉吸乾水分，回收乙醚後即得到純淨的揮髮油，放入冰箱4'C保存備用。(4)將(3)中暴馬丁香樹皮揮髮油用6890/5973N氣相色譜與質譜聯用儀器分析，暴馬丁香揮髮油主要化學成分為n-Hexadecanoicacid(27.46%),9,12-0ctadecadienoicacid(Z，Z)-(28.52%)，9,17-Octadecadienal(14.16%)andTricosane(2.44%)，詳細化學成分見表2。藥理試驗例:暴馬丁香樹皮揮髮油的抑菌作用1實驗材料大腸桿菌、鏈球菌、沙門氏菌、巴氏菌和金黃色葡萄球菌均來自於美國菌種保藏中心(ATCC)，37'C在蛋白腖牛肉湯中培養12h。培養基為牛肉膏蛋白腖培養基。菌的活化與培養時用液體培養基，組成為牛肉膏蛋白腖氯化鈉蒸餾水(3:10:5:1000)。菌的保存及抑菌實驗時用固體培養基，組成為牛肉膏蛋白腖氯化鈉瓊脂蒸餾水(3:10:5:22:1000)。2實驗方法2.1培養基的配製取牛肉膏0.6g、蛋白腖2g、氯化鈉1g、蒸餾水200ml，混合併攪拌使其完全溶解，配成液體培養基。用量筒量取液體培養基，將其平均分裝在10個50ml的三角瓶內，每瓶20ml。取牛肉膏3g、蛋白腖IOg、氯化鈉5g、瓊脂22g、蒸餾水1000ml，混合後將其置於電爐子上加熱，使瓊脂完全溶解，配成固體培養基。用量筒量取固體培養基，將其平均分裝在5個150ml的三角瓶內，每瓶IOOml。三角瓶瓶口均用棉塞塞緊並用牛皮紙包紮。2.2火菌將配好的固體培養基、液體培養基均放入高壓滅菌鍋中滅茼，溫度上升到121t:時，開始計時20min。培養皿、量筒、鑷子、剪刀、6mm濾紙片(放在小燒杯中)、滴管、氨瓶等實驗器材均放入烘箱屮170'C滅菌2h。實驗前用75%乙醇擦拭超淨工作檯並紫外滅菌20min。37'C恆溫培養箱在使用前需用75%乙醇擦拭滅菌。2.3菌的培養與査菌將5個菌種在超淨工作檯上、酒精燈環境下倒入裝有液體培養基的三角瓶中，每種菌培養兩份。將這10個三角瓶放入搖床37。C搖菌6h。顯微鏡做鏡檢後開始查菌，記錄數據並計算菌濃度，若5個中方格總菌數為A，菌液稀釋倍數為B，則lml菌液中總菌數二A/5X25X10000X13=50000AB2.4樣品液及濾紙片的製備將暴馬丁香樹皮揮髮油配製成5mg/ml的溶液(可加04uL二甲基亞碸助容)，按1:2"稀釋成2.5mg/ml、1.25mg/ml、0.625mg/ml、0.3125mg/ml的溶液。將濾紙片用打孔器打成直徑為6mm的圓片，在超淨工作檯將濾紙片放進各梯度樣品中浸泡2h。2.5有菌瓊脂平板的製備將稀釋好的菌液與固體培養基混合併搖晃均勻，此時菌的濃度應達到3.6X108CFU/ml。將有菌培養基依次倒入各培養皿中，晃動培養皿使培養基均勻地鋪在培養皿底部，冷卻至凝固。2.6抑菌實驗方法用記號筆在有菌瓊脂平板上標號，將浸泡好的濾紙片用鑷子夾出，放入寫相應對照編號的培養皿中，每個樣品做三個平行，放入37'C恆溫培養箱培養。3.實驗結果抑菌效果用抑菌圈直徑DD表示(單位mm)。在抑菌實驗結束後的第12h、24h、36h、48h觀察菌的生長情況，測量抑菌圈直徑並記錄。表l暴馬丁香樹皮揮髮油的抑菌活性tableseeoriginaldocumentpage6結果表明暴馬丁香樹皮揮髮油對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用。通過具體實施實例說明暴馬丁香樹皮揮髮油可作為天然抗菌劑用於食品、藥品等行業，代替有毒副作用的合成抗菌劑。tableseeoriginaldocumentpage7402-Methyl-Z,Z_3,13_octadecadienol4140.3530.50Tritetracontane42Tetratetracontane4341.9392.44Tricos肌e44Tricosan45Heptacosane4643.1840.60Heptacosane47Hexatriacontane4844.2552.17Octacosane49Pentadecane50Hentriacontane5145.3700.71Heneicosane52Octecosane53Hentriacontane5446.6751.07Heneicosane55Octscoseine56Pentacosane5748.2390.72Hentriacontane58Octacosane59Tetratriacontane6050.1660.59Heptacosane61Tetratetracontane62Tritetracontane權利要求1.本發明涉及暴馬丁香SyringaamurensisRupr.樹皮揮髮油的分離鑑定和新用途。取暴馬丁香樹皮，乾燥後剪碎，用蒸餾水浸泡6-8h後超聲1h，溫度為30℃功率為80W。將藥材與浸泡液一同倒入揮髮油提取器中，採用水蒸氣蒸餾法提取4-5h。放出水層，用乙醚反覆洗揮髮油提取器，使暴馬丁香揮髮油充分溶解到乙醚中。將溶有揮髮油的乙醚溶液倒入燒杯中，再向燒杯中加無水硫酸鈉吸乾水分，回收乙醚後即得到純淨的揮髮油，放入冰箱4℃保存備用。暴馬丁香樹皮揮髮油用6890/5973N氣相色譜與質譜聯用儀器分析，暴馬丁香揮髮油主要化學成分為n-Hexadecanoicacid(27.46％)，9，12-Octadecadienoicacid(Z，Z)-(28.52％)，9，17-Octadecadienal(14.16％)andTricosane(2.44％)。2.暴馬丁香樹皮揮髮油的分離鑑定，其特徵在於該工藝包括以下過程(1)取暴馬丁香樹皮，挑去雜物，水洗，烘乾或晾乾，粉碎，用蒸餾水浸泡6-8h後超聲lh，溫度為3(TC功率為80W;(2)將(1)中藥材與浸泡液一同倒入揮髮油提取器中，採用水蒸氣蒸餾法提取4-5h，獲得上面浮有揮髮油的水溶液；(3)將(2)中上面浮有揮髮油的水溶液放出水層，用乙醚反覆洗揮髮油提取器，使暴馬丁香揮髮油充分溶解到乙醚中，將溶有揮髮油的乙醚溶液倒入燒杯中，再向燒杯中加無水硫酸鈉吸乾水分，回收乙醚後即得到純淨的揮髮油，放入冰箱4。C保存備用。(4)將(3)中暴馬丁香樹皮揮髮油用6890/5973N氣相色譜與質譜聯用儀器分析，暴馬丁香揮髮油主要化學成分為n-Hexadecanoicacid(27.46%)，9,12-Octadecadienoicacid(Z,Z)-(28.52%)，9，17-Octadecadienal(14.16%)andTricosane(2.44%)。3.根據本發明1至2所述的製備暴馬丁香樹皮揮髮油的原料為暴馬丁香6>/7'77《a柳"re/57'5Rupr.的樹皮。4.根據本發明1至2所述的暴馬丁香樹皮揮髮油對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用。5.根據本發明l至2所述的暴馬丁香樹皮揮髮油，其特徵在於該樹皮揮髮油可作為天然抗菌劑用於食品、藥品等行業，代替有毒副作用的合成抗菌劑。全文摘要本發明所屬醫藥產品研究開發
技術領域：
。本發明涉及暴馬丁香SyringaamurensisRupr.樹皮揮髮油的分離鑑定和新用途。取暴馬丁香樹皮，乾燥後剪碎，用蒸餾水浸泡6-8h後超聲1h，溫度為30℃功率為80W。將藥材與浸泡液一同倒入揮髮油提取器中，採用水蒸氣蒸餾法提取4-5h。放出水層，用乙醚反覆洗揮髮油提取器，使暴馬丁香揮髮油充分溶解到乙醚中。將溶有揮髮油的乙醚溶液倒入燒杯中，再向燒杯中加無水硫酸鈉吸乾水分，回收乙醚後即得到純淨的揮髮油，放入冰箱4℃保存備用。暴馬丁香樹皮揮髮油用6890/5973N氣相色譜與質譜聯用儀器分析，暴馬丁香揮髮油主要化學成分為n-Hexadecanoicacid(27.46％)，9，12-Octadecadienoicacid(Z，Z)-(28.52％)，9，17-Octadecadienal(14.16％)andTricosane(2.44％)。本發明暴馬丁香樹皮揮髮油對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用，可開發為天然抗菌劑應用於食品、藥品等行業，製備出具有抑菌作用的各種形式的產品。文檔編號A61K36/185GK101612175SQ20091014572公開日2009年12月30日申請日期2009年5月31日優先權日2009年5月31日發明者張崇禧申請人:山東大學威海分校