二苯並環庚酮衍生物的製作方法
2023-04-23 08:20:01
專利名稱：二苯並環庚酮衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及式I的4-[(6-氟-螺[1,3-苯並間二氧雜環戊烯-2,5′-[5H]二苯並[a,d]環庚烯]-5-基)羰基]-嗎啉， 其中R1和R2各自獨立地為氫或滷素。
本發明還涉及式I化合物的製備、含有式I化合物的藥物組合物及其作為藥物，特別是用於治療肥胖和其它病症的藥物的應用。
已經發現，式I化合物是CB1受體的調節劑。
已經分離兩種不同亞類的大麻素受體(CB1和CB2)，兩種都屬於G蛋白偶聯的受體超家族。還已經描述了CB1的可變剪接形式，CB1A和CB1B，但是它們在測試組織中只是低水平表達。(D.Shire，C.Carrillon，M.Kaghad，B.Calandra，M.Rinaldi-Carmona，G.Le Fur，D.Caput，P.Ferrara，J.Biol.Chem.270(8)(1995)3726-31；E.Ryberg，H.K.Vu，N.Larsson，T.Groblewski，S.Hjorth，T.Elebring，S.Sjgren，P.J.Greasley，FEBS Lett.579(2005)259-264)。CB1受體主要位於腦內並且較少存在於一些外周器官中，而CB2受體優勢分布在外周且主要位於脾和免疫系統的細胞中(S.Munro，K.L.Thomas，M.Abu-Shaar，Nature 365(1993)61-61)。因此，為了避免副作用，CB1-選擇性的化合物是理想的。
Δ9-四氫大麻酚(Δ9-THC)是印第安大麻中主要的對精神起作用的化合物(Y.Gaoni，R.Mechoulam，J.Am.Chem.Soc.，86(1964)1646)，印第安大麻為canabis savita(大麻)，其用於醫學上已經很多年(R.Mechoulam(Ed.)＂Cannabinoids as therapeutic Agents＂，1986，pp.1-20，CRC Press)。Δ9-THC是非選擇性的CB1/2受體激動劑，且在USA作為屈大麻酚(marinol)提供，用於緩解癌症化療誘發的嘔吐(CIE)和通過刺激食慾來逆轉AIDS患者的體重減輕。在UK Nabolinone(LY-109514，Cesamet)，一種合成的Δ9-THC的類似物，用於CIE(R.G Pertwee，Pharmaceut.Sci.3(11)(1997)539-545，E.M.Williamson，F.J.Evans，Drugs 60(6)(2000)1303-1314)。
Anandamide(花生四烯醯乙醇醯胺)被鑑定為CB1受體的內源性配體(激動劑)(R.G.Pertwee，Curr.Med.Chem.，6(8)(1999)635-664；W.A.Devane，L.Hanus，A.Breuer，R.G.Pertwee，L.A.Stevenson，G.Griffin，D.Gibson，A.Mandelbaum，A.Etinger，R.Mechoulam，Science 258(1992)1946-9)。Anandamide和2-花生四烯醯甘油(2-AG)在突觸前的神經末梢負調節腺苷酸環化酶和電壓敏感的Ca2+通道，並激活向內調整的K+通道(V.Di Marzo，D.Melck，T.Bisogno，L.De Petrocellis，Trends in Neuroscience 21(12)(1998)521-8)，由此影響神經遞質釋放和/或作用，這降低了神經遞質的釋放(A.C.Porter，C.C.Felder，Pharmacol.Ther.，90(1)(2001)45-60)。
作為Δ9-THC的anandamide也通過CB1受體-介導的機制增加攝食。CB1受體選擇性拮抗劑阻止與anandamide給藥相關的攝食增加(C.M.Williams，T.C.Kirkham，Psychopharmacology 143(3)(1999)315-317；C.C.Felder，E.M.Briley，J.Axelrod，J.T.Simpson，K.Mackie，W.A.Devane，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90(16)(1993)7656-60)並導致食慾抑制和體重減輕(G.Colombo，R.Agabio，G.Diaz，C.Lobina，R.Reali，G.L.Gessa，Life Sci.63(8)(1998)L113-PL117)。
瘦素是下丘腦感知營養狀態和調節攝食和能量平衡的主要信號。在暫時食物限制後，CB1受體剔除小鼠比它們的野生型同窩出生仔畜吃得少，CB1拮抗劑SR141716A減少野生型的攝食，但是對於剔除小鼠則不減少。另外，在肥胖db/db和ob/ob小鼠和Zucker大鼠中，缺陷的瘦素信號傳導與升高的下丘腦而不是小腦的內大麻素(endocannabinoid)水平有關。正常大鼠和ob/ob小鼠的急性瘦素治療減少了下丘腦中的anandamide和2-花生四烯醯甘油。這些發現顯示下丘腦中的內大麻素可以強烈激活CB1受體以保持攝食和形成受瘦素調節的神經網路的一部分(V.Di Marzo，S.K.Goparaju，L.Wang，J.Liu，S.Bitkai，Z.Jarai，F.Fezza，G.I.Miura，R.D.Palmiter，T.Sugiura，G.Kunos，Nature 410(6830)822-825)。
而且，已有報導CB1受體在骨質和由雌激素缺乏導致的骨損失的調節中起作用。CB1和CB2受體拮抗劑在體內防止了卵巢切除-誘導的骨損失，並且通過促進破骨細胞凋亡和抑制一些破骨細胞成活因子的產生在體外引起破骨細胞的抑制(A.I.Idris，R.J.van’t Hof，I.R.Greig，S.A.Ridge，D.Baker，R.A.Ross，S.H.Wilson，Nature Medicine 11(7)(2005)，774-779)。因此，大麻素受體拮抗劑可用於治療骨質疏鬆和其它骨疾病如癌症相關的骨疾病和骨的佩吉特氏病。
目前，至少兩種CB1選擇性拮抗劑/反向激動劑(SR-141716和SLV-319)正在進行治療肥胖症和/或戒菸的臨床試驗。在雙盲安慰劑-對照的研究中，在每日10和20mg的劑量下，與安慰劑相比，SR141716顯著降低體重(F.Barth，M.Rinaldi-Carmona，M.Arnone，H.Heshmati，G.Le Fur，＂Cannabinoid antagonistsFrom research tools to potential new drugs.＂論文摘要，222nd ACS National Meeting，芝加哥，伊利諾伊，美國，2001年8月26-30日)。在一些III期研究中，SR-141716降低體重、腰圍並且改善代謝參數(血漿HDL、甘油三酯和胰島素敏感性)(RIO-lipids，RIO-Europe andRIO-North America)。另外，SR-141716在III期試驗中還顯示出戒菸效果(STRATUS-US)。但是，仍需要具有適合用於人的藥物的藥物動力學和藥效性質的有效的低分子量CB1調節劑。
已經分別提議為CB1受體拮抗劑(反向激動劑)的其它化合物有氨基烷基吲哚(AAI；M.Pacheco，S.R.Childers，R.Arnold，F.Casiano，S.J.Ward，J.Pharmacol.Exp.Ther.257(1)(1991)170-183)，如6-溴-(WIN54661；F.M.Casiano，R.Arnold，D.Haycock，J.Kuster，S.J.Ward，NIDA Res.Monogr.105(1991)295-6)或6-碘普拉多林(AM630，K.Hosohata，R.M.Quock，R.M；Hosohata，T.H.Burkey，A.Makriyannis，P.Consroe，W.R.Roeske，H.I.Yamamura，Life Sci.61(1997)115-118；R.Pertwee，G.Griffin，S.Fernando，X.Li，A.Hill，A.Makriyannis，Life Sci.56(23-24)(1995)1949-55)。在WO9602248，US5596106中公開的芳基苯並[b]噻吩和苯並[b]呋喃(LY320135，C.C.Felder，K.E.Joyce，E.M.Briley，M.Glass，K.P.Mackie，K.J.Fahey，G.J.Cullinan，D.C.Hunden，D.W.Johnson，M.O.Chaney，G.A.Koppel，M.Brownstein，J.Pharmacol.Exp.Ther.284(1)(1998)291-7)，3-烷基-(5,5-二苯基)咪唑烷二酮(M.Kanyonyo，S.J.Govaerts，E.Hermans，J.H.Poupaert，D.M.Lambert，Bioorg.Med.Chem.Lett.9(15)(1999)2233-2236.)以及3-烷基-5-芳基咪唑烷二酮(F.Ooms，J.Wouters，O.Oscaro.T.Happaerts，G.Bouchard，P.-A.Carrupt，B.Testa，D.M.Lambert，J.Med.Chem.45(9)(2002)1748-1756)已知分別拮抗CB1受體，用作hCB1受體的反向激動劑。WO0015609(FR2783246-A1)，WO0164634(FR2805817-A1)，WO0228346，WO0164632(FR2805818-A1)，WO0164633(FR2805810-A1)公開了取代的1-二(芳基)甲基-氮雜環丁烷衍生物為CB1的拮抗劑。在WO0170700，WO02076949和WO0276949A1中公開了作為CB1拮抗劑的4,5-二氫-1H-吡唑衍生物。在幾個專利中公開了作為CB1拮抗劑/反向激動劑的橋連和非橋連的3-吡唑氨甲醯衍生物(WO0132663，WO0046209，WO9719063，EP658546，EP656354，US5624941，EP576357，US3940418，WO03020217，WO0335005，J.M.Mussinu等，Bioorg.Med.Chem.2003,11,251；S.Ruiu等，J.Pharm.Expt.Ther.，2003,306,363)。G.Tarzia等在Bioorg.Med.Chem.2003,11,3965中描述了吡咯CB1大麻素受體激動劑。在WO03077847，WO03082190，WO03086288和WO03087037中已經將苯乙基醯胺類作為CB1大麻素受體拮抗劑/反向激動劑要求保護。在WO0337332，WO03040107，WO03063781，WO03082833和WO03078413中描述了各種氮雜雜環(咪唑、三唑和噻唑)。WO03051850中描述了二苯基吡嗪氨甲醯，WO03084930中描述了二苯基吡啶氨甲醯，並且在WO03084943中描述了二苯基苯氨甲醯。
本發明的一個目的是分別提供選擇性的、直接作用CB1受體的拮抗劑(反向激動劑)。這些拮抗劑/反向拮抗劑可以用於醫學治療，特別是用於治療和/或預防與CB1受體調節有關的疾病。
除非另外指出，闡明下列定義以舉例說明和定義本文用於描述本發明的各術語的含義和範圍。
術語「滷素」是指氟，氯，溴和碘，優選氯和氟。
術語「藥用鹽」包括式(I)化合物與無機或有機酸的鹽，所述無機或有機酸如鹽酸，氫溴酸，硝酸，硫酸，磷酸，檸檬酸，甲酸，馬來酸，乙酸，富馬酸，琥珀酸，酒石酸，甲磺酸，水楊酸，對甲苯磺酸等，其對活生物體是非毒性的。優選的與酸形成的鹽是甲酸鹽，馬來酸鹽，檸檬酸鹽，鹽酸鹽，氫溴酸鹽和甲磺酸鹽，特別優選鹽酸鹽。
在一個實施方案中，本發明涉及如上定義的式I化合物，該化合物是4-[(6-氟-螺[1,3-苯並間二氧雜環戊烯-2,5′-[5H]二苯並[a，d]環庚烯]-5-基)羰基]-嗎啉，即式Ia化合物 本發明的式I化合物可以通過本領域已知的方法製備，或者可以通過下述方法製備，該方法包括將式II的5,5-二氯-5H-二苯並[a，d]環庚烯 其中R1和R2各自獨立地為氫或滷素，在升高的溫度下與式III的兒茶酚衍生物反應， 獲得式I化合物
升高的溫度是指100℃～180℃的溫度，優選110～130℃的溫度。
由此，可以在惰性溶劑(例如甲苯或吡啶)中或不用溶劑，在鹼(例如吡啶)存在或不存在下，在升高的溫度(例如＞100℃)，用式II的二取代的二氯甲烷衍生物將式III的兒茶酚中間體酮縮醇化，得到式I化合物。
(2-氟-4,5-二羥基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮(III)可以由相應的式VII的二苯基亞甲基保護的酮縮醇通過以下方法容易地製備在合適的惰性溶劑(例如二氯甲烷)中用酸(例如三氟乙酸)進行處理；或者在合適的還原劑(例如三乙基矽烷)存在下，不用溶劑或者使用合適的惰性溶劑(例如二氯甲烷)，用酸(例如三氟乙酸)進行處理。
式VII的二苯基亞甲基保護的酮縮醇是按照方案I中所述的路線由4-氟藜蘆醚製備的。實施例1中更詳細描述了反應順序。
方案1 式II的二取代的二氯甲烷衍生物可以通過本領域已知的方法製備，由相應的酮VIII通過在DMF或另一N-甲醯化試劑的存在下與亞硫醯二氯反應製備，或者通過在存在或不存在合適的溶劑例如三氯氧化磷的情況下與五氯化磷反應而製備(方案2)。
方案2 式VIII的二苯並環庚酮是可商購的或者可以用本領域已知的方法製備。
一些式I化合物可以具有不對稱中心並因此能夠以多於一種立體異構形式存在。本發明因此還涉及在一個或多個不對稱中心基本上純的異構體形式的化合物，以及混合物，包括其外消旋混合物。這些異構體可以通過不對稱合成製備，例如使用手性中間體，或者混合物可以通過常規方法，例如色譜法(使用手性吸附劑或洗脫劑的色譜法)，或使用拆分試劑將混合物拆分。
如上所述，式I化合物可以用作治療活性物質的、尤其是用作治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病的治療活性物質。在一個實施方案中，本發明因此還涉及如上定義的化合物，其用作治療活性物質的、尤其是用作治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病的治療活性物質。
本發明還涉及藥物組合物，其包含如上定義的化合物和藥用載體和/或輔劑。
在另一個實施方案中，本發明涉及一種治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病的方法，該方法包含對人或動物給藥如上定義的化合物。
本發明進一步涉及如上定義的化合物在治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病中的應用。
另外，本發明涉及如上定義的化合物在製備用於治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病的藥物中的應用。這種藥物包含如上定義的化合物。
在本文中，表述「與CB1受體的調節有關的疾病」是指可以通過調節CB1受體來治療和/或預防的疾病。這些疾病包括但不限於，精神疾病，特別是焦慮，精神病，精神分裂症，抑鬱，精神作用物質的濫用，例如物質濫用和/或依賴，包括酒精依賴和尼古丁依賴，神經病，多發性硬化，偏頭痛，緊張，癲癇，運動障礙，帕金森氏病，健忘症，認知障礙，記憶缺失，老年性痴呆，阿爾茨海默氏病，攝食障礙，肥胖症，II型糖尿病或非胰島素依賴型糖尿病(NIDD)，胃腸疾病，嘔吐，腹瀉，泌尿疾病，心血管疾病，不育病症，炎症，感染，癌症，神經炎症，特別是動脈粥樣硬化，或格-巴(Guillain-Barré)症候群，病毒性腦炎，腦血管發病和顱創傷，以及骨疾病如骨質疏鬆症，特別是與基因誘因、激素缺乏或老化相關的骨質疏鬆症，癌症相關的骨疾病和骨的佩吉特氏病。
在一個優選的方面，表述「與CB1受體的調節有關的疾病」涉及攝食障礙，肥胖症，II型糖尿病或非胰島素依賴型糖尿病(NIDD)，神經炎症，腹瀉，物質濫用和/或依賴，包括酒精依賴和尼古丁依賴。在更優選的方面，所述術語涉及攝食障礙，肥胖症，II型糖尿病或非胰島素依賴型糖尿病(NIDD)，物質濫用和/或依賴，包括酒精依賴和尼古丁依賴，特別優選肥胖症。
在另一優選方面，表述「與CB1受體的調節有關的疾病」涉及骨疾病如骨質疏鬆症，特別是與基因誘因、激素缺乏或老化相關的骨質疏鬆症，癌症相關的骨疾病和骨的佩吉特氏病。
另一個優選目的是提供治療或預防肥胖症及和肥胖症相關的病症的方法，該方法包含給藥治療有效量的根據式I的化合物，並組合或聯合治療有效量的其它用於治療肥胖症或攝食障礙的藥物，以使它們一起提供有效緩解。適當的其它藥物包括但不限於食慾抑制劑，脂酶抑制劑和選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRI)。上述藥劑的組合或聯合可以包括分開、順序或同時給藥。
優選的脂酶抑制劑是四氫一制胰脂菌素。
與本發明化合物組合使用的適當的食慾抑制劑包括但不限於阿米雷司，安非氯醛，苯丙胺，苄非他明，對氯苯丁胺，氯苄雷司，氯福雷司，氯氨雷司，氯特胺，環己異丙甲胺，右芬氟拉明，右苯丙胺，安非拉酮，二苯甲哌啶乙醇，N-乙基苯異丙胺，芬布酯，芬氟拉明，非尼雷司，芬普雷司，氟多雷司，氟氨雷司，糠基甲基苯異丙胺，左苯丙胺，左法哌酯，馬吲哚，美芬雷司，甲胺苯丙酮，去氧麻黃鹼，去甲偽麻黃鹼，噴託雷司，苯甲曲秦，芬美曲秦，芬特明，苯丙醇胺，匹西雷司和西布曲明，和它們的藥用鹽。
最優選的食慾抑制劑是西布曲明和芬特明。
與本發明化合物組合使用的適當的選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑包括氟西汀，氟伏沙明，帕羅西汀和舍曲林，和它們的藥用鹽。
另一個優選目的是提供治療或預防人的II型糖尿病(非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM))的方法，該方法包括給藥治療有效量的根據式I的化合物，並組合或聯合治療有效量的脂酶抑制劑，特別是，其中所述脂酶抑制劑是奧利司他。本發明的還一個目的是如上所述的方法，用於同時、分開或順序給藥根據式I的化合物和脂酶抑制劑，特別是四氫一制胰脂菌素。
另一個優選目的是提供治療或預防人的II型糖尿病(非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM))的方法，該方法包括給藥治療有效量的根據式I的化合物，並組合或聯合治療有效量的抗糖尿病藥劑，所述抗糖尿病藥劑選自1)PPARγ激動劑，如吡格列酮或羅西格列酮等；2)雙胍類，如二甲雙胍等；3)磺醯脲類，如格列本脲等；4)PPARα/γ激動劑，如GW-2331等；5)DPP-IV-抑制劑，如LAF-237(Vildagliptin)或MK-0431等；6)葡糖激酶活化劑，如在例如WO 00/58293 A1中公開的化合物等。本發明的還一個目的是如上所述的方法，用於同時、分開或順序給藥根據式I的化合物和治療有效量的抗糖尿病藥劑，如1)PPARγ激動劑，如吡格列酮或羅西格列酮等；2)雙胍類，如二甲雙胍等；3)磺醯脲類，如格列本脲等；4)PPARα/γ激動劑，如GW-2331 GW-2331等；5)DPP-IV-抑制劑，如LAF-237(Vildagliptin)或MK-0431等；6)葡糖激酶活化劑，如在例如WO 00/58293A1中公開的化合物等。
再一個優選目的是提供治療或預防人血脂異常的方法，該方法包含給藥治療有效量的根據式I的化合物，並組合或聯合治療有效量的降脂藥劑，如1)膽汁酸螯合劑，如考來烯胺等；2)HMG-CoA還原酶抑制劑，如阿託伐他汀等；3)膽甾醇吸收抑制劑，如依澤替米貝等；4)CETP抑制劑，如torcetrapib，JTT 705等；5)PPARα-激動劑，如苄氯貝特(beclofibrate)，非諾貝特等；6)脂蛋白合成抑制劑，如煙酸等；和7)煙酸受體激動劑。本發明的還一個目的是如上所述的方法，用於同時、分開或順序給藥根據式I的化合物和治療有效量的降脂藥劑，如1)膽汁酸螯合劑，如考來烯胺等；2)HMG-CoA還原酶抑制劑，如阿託伐他汀等；3)膽甾醇吸收抑制劑，如依澤替米貝等；4)CETP抑制劑，如torcetrapib，JTT 705等；5)PPARα-激動劑，如苄氯貝特，非諾貝特等；6)脂蛋白合成抑制劑，如煙酸等；和7)煙酸受體激動劑。
本發明化合物的另外的生物學活性的證明可以通過本領域公知的體外、離體、和體內測定完成。例如，為了證明藥劑治療與肥胖症有關的病症如糖尿病、症候群X，或動脈粥樣硬化病和相關病症如高甘油三酯血症和高膽固醇血症的功效，可以使用下列測定。測量血糖水平的方法將db/db小鼠(獲自Jackson實驗室，Bar Harbor，ME)抽血(通過眼睛或尾靜脈)並且按照相等的平均血糖水平分組。將它們每日口服給藥(在藥用載體中通過管飼法)試驗化合物一次，共7～14天。此時，將動物再次通過眼睛或尾靜脈抽血並測定血糖水平。測量甘油三酯水平的方法將hApoA1小鼠(獲自Jackson實驗室，Bar Harbor，ME)抽血(通過眼睛或尾靜脈)並且按照相等的平均血清甘油三酯水平分組。將它們每日口服給藥(在藥用載體中通過管飼法)試驗化合物一次，共7～14天。此時，將動物再次通過眼睛或尾靜脈抽血並測定血清甘油三酯水平。測量HDL-膽甾醇水平的方法為了測定血漿HDL-膽甾醇水平，將hApoA1小鼠抽血並按照相等的平均血漿HDL-膽甾醇水平分組。將小鼠每日口服載體或試驗化合物一次，共7～14天，然後在次日抽血。分析血漿的HDL-膽甾醇。
另外，為了證明本發明化合物的CNS活性，可以使用下列體內測定測試任務學習和空間記憶的方法將Morris水迷宮(Water Maze)常規用於評估任務學習和空間記憶(Jaspers等，Neurosci.Lett.117149-153，1990；Morris，J.Neurosci.Methods1147-60，1984)。在該測定中，將動物放置在水池中，水池分成幾個象限(quadrant)。1個平臺隱藏在象限之一中。將動物放置在水池中並期望在預定時間內找出隱藏的平臺。在多次訓練試驗過程中，動物了解到平臺的位置並從池中逃脫。動物在該任務中接受多次試驗。對於每隻動物記錄行進的總距離，找出平臺的試驗次數，發現平臺的潛伏期，和遊泳路線。通過發現隱藏平臺所需的時間長度和試驗次數來測量動物的學習能力。記憶缺失或改善通過在試驗次數或獲知後預定延遲時間下發現平臺的潛伏期來測定。學習和記憶可以通過在獲知階段動物穿過平臺位於的象限的次數來測量。檢測藥物依賴性的方法動物的自給藥(self-administration)是化合物在人類中可能濫用的預示。對於該方法的改進也可以用於鑑定防止或阻止具有濫用可能的藥物的增強性能的化合物。消除藥物自給藥的化合物可以防止藥物的濫用或其依賴性(Ranaldi等，Psychopharmacol.161442-448，2002；Campbell等，Exp.Clin.Psychopharmacol.8312-25，2000)。在自給藥的試驗中，將動物放置在含有能動杆和非能動杆的工作室中。對於能動杆的每次響應產生試驗化合物或已知是自給藥的藥物的輸注。對非能動杆的按壓沒有效果，但是也作記錄。然後通過在每日活動期間有接觸藥物的機會，在固定時期內來訓練動物自給藥化合物/藥物。該室房屋燈的照明表示活動時間的開始和可以獲得化合物/藥物。當活動時間結束時，房屋燈被關閉。最初，每按壓一次能動杆發生一次藥物輸注。一旦杆-按壓行為已經建立，增加要產生藥物輸注的按壓的次數。在獲得穩定的化合物/藥物自給藥以後，可以評估第二種化合物對藥物增強行為的影響。在活動時間前該第二種化合物的給藥可以加強或消除自給藥行為，或對其不產生變化。
進行下列測試以便測定式I化合物的活性。
使用人胚腎(HEK)細胞的膜製備物來測定本發明的化合物對大麻素CB1受體的親合力，其中使用澤姆利基森林病毒(Semliki Forest Virus)系統結合作為放射性配體的[3H]-CP-55,940瞬時轉染人大麻CB1受體。在加入或不加入本發明的化合物下將新鮮製備的細胞膜製備物和[3H]-配體溫育後，通過在玻璃纖維濾器上過濾來進行結合的和游離的配體的分離。濾器上的放射性通過液體閃爍計數來測量。
使用人胚腎(HEK)細胞的膜製備物來測定本發明的化合物對大麻素CB2受體的親合力，其中使用澤姆利基森林病毒系統結合作為放射性配體的[3H]-CP-55,940瞬時轉染人大麻CB2受體。在加入或不加入本發明的化合物下將新鮮製備的細胞膜製備物和[3H]-配體溫育後，通過在玻璃纖維濾器上過濾來進行結合的和游離的配體的分離。濾器上的放射性通過液體閃爍計數來測量。
通過使用CHO細胞的功能研究來測定本發明化合物的大麻素CB1拮抗劑活性，在所述CHO細胞中穩定地表達人大麻素CB1受體(參見M.Rinaldi-Carmona等，J.Pharmacol.Exp.Ther.278(1996)871)。細胞系統中人大麻素受體的穩定表達最初分別在Nature 1990，346，561-564(CB1)和Nature 1993，365，61-65(CB2)中描述。使用毛喉素刺激腺苷酸環化酶並通過將累積的環AMP的量定量進行測量。CB1受體被CB1受體激動劑(例如CP-55,940或(R)-WIN-55212-2)的伴隨激活可以以濃度依賴性的方式減少毛喉素誘導的cAMP的累積。這種CB1受體介導的反應可以被CB1受體拮抗劑如本發明的化合物所拮抗。
式I的化合物顯示對CB1受體的極好的親合力，這在Devane等Mol.Pharmacol.34(1988)605-613中描述的實驗條件下測定。本發明的化合物或它們的藥用鹽或溶劑化物是拮抗劑並且對於CB1受體是選擇性的，其親合力低於IC50＝1μM，優選低於0.100μM。它們顯示對CB2受體的至少10倍的選擇性。
CB1受體拮抗劑/反向激動劑對NMRI小鼠中CP 55,940-誘導的低體溫的作用動物將雄性NMRI小鼠用於該研究，且小鼠獲自Füllinsdorf(瑞士)的研究諮詢有限公司(RCC)。將重30-31g的小鼠用於該研究。環境溫度約為20-21℃，相對溼度為55-65％。在房間中保持12小時的明-暗周期，所有試驗在光亮階段進行。任意獲得自來水和食物。方法所有測量在上午12:00和下午5:00之間進行。在實驗開始前將小鼠放置在該環境中並習慣至少兩小時。它們始終自由接觸食物和水。對於每個劑量，使用8隻小鼠。通過直腸探頭(Physitemp的RET2)和數字溫度計(ColeParmer，Chicago USA的Digi-sense n°8528-20)記錄直腸體溫測量值。將探頭插入每隻小鼠中約3.5cm。
在載體或CB1受體拮抗劑/反向激動劑給藥之前15分鐘獲得體溫。分別在該化合物的i.p.或p.o.給藥之後30或90分鐘時記錄直腸體溫，以便評估化合物本身的任何影響。立即靜脈內給藥CB受體激動劑CP 55,940(0.3mg/kg)，然後在CP 55940的i.v.給藥後20分鐘，再次測量體溫。
通過記錄缺乏食物的動物中的食物消耗來評估式(1)化合物關於它們調節攝食行為的能力的體內活性。
每日訓練大鼠接觸食物2小時，並缺食22小時。當它們根據該計劃表訓練時，每日在這2小時攝食活動期間內攝取的食物量日復一日恆定。
為了檢測式I化合物減少攝食的能力，在交換(cross-over)研究中使用8隻動物。將大鼠單獨收養在Plexiglas盒中，在底面上有柵格，將紙放置在籠底之下收集任何溢出物。將裝有預先稱重量的食物的食物分配器(燒杯)提供給它們2小時。在攝食活動時間結束時，大鼠返回它們的養籠中。在實驗開始前稱量每隻大鼠，記錄在該2小時攝食活動期間食物的消耗量。在2小時攝食活動時間之前60分鐘口服給藥各種劑量的試驗化合物或載體。在實驗中包括陽性對照利莫那班(SR141716)。使用採用重複測量的方差分析(Anova analysis)，接著posthoc檢驗Student Neumann-Keuls。與鹽水處理的大鼠相比*P＜0.05。
另外式I化合物在疾病或病症中的效用可以在已經在文獻中報導的動物疾病模型中證明。下面是這些動物疾病模型的實例a)狨的甜食攝取的減少(Behavioural Pharm，1998,9,179-181)；b)小鼠中的蔗糖和乙醇攝取的減少(Psychopharm.1997,132,104-106)；c)大鼠中增加的運動效能和位置調節(Psychopharm.1998,135,324-332；Psychopharmacol 2000,15125-30)；d)小鼠中的自發運動活性(J.Pharm.Exp.Ther.1996,277,586-594)；e)小鼠中鴉片劑自給藥的減少(Sci.1999,283,401-404)。
式I化合物和/或它們的藥用鹽可以用作藥物，例如用於腸內、腸胃外或局部給藥的藥物製劑的形式。例如，它們可以例如以片劑、包衣片劑、糖錠劑、硬和軟明膠膠囊、溶液劑、乳劑或混懸劑的形式經口給藥，例如以栓劑形式直腸給藥，例如以注射液或輸注液的形式腸胃外給藥，或例如以軟膏劑、乳膏劑或油劑的形式局部給藥。優選口服給藥。
藥物製劑的製備可以以本領域任何技術人員熟悉的方式進行，將所述式(I)化合物和/或它們的藥用鹽，任選地組合其它有治療價值的物質，與適當的非毒性、惰性的、治療上相容的固體或液體載體材料和常規藥用輔劑(如果需要)一起形成蓋侖給藥形式。
適當的載體物質不僅有無機載體材料，而且有有機載體材料。因此，例如乳糖，玉米澱粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其鹽可以用作片劑、包衣劑、糖錠劑和硬明膠膠囊的載體材料。軟明膠膠囊的適當的載體材料為，例如植物油，蠟，脂肪和半固體和液體多元醇(然而，根據活性成分的性質，在軟明膠膠囊的情形中可以不需要載體)。用於製備溶液劑和糖漿的適當的載體材料為，例如水，多元醇，蔗糖，轉化糖等。注射液的適當載體材料為，例如水，醇，多元醇，甘油和植物油。栓劑的適當載體材料為，例如天然或硬化油，蠟，脂肪和半液體或液體多元醇。局部製劑的適當的載體材料為甘油酯，半合成的和合成的甘油酯，氫化油，液體蠟，液體石蠟，液體脂肪醇，甾醇類，聚乙二醇和纖維素衍生物。
常規的穩定劑，防腐劑，潤溼劑和乳化劑，稠度改善劑，調味劑，改變滲透壓的鹽，緩衝物質，增溶劑，著色劑和掩蔽劑和抗氧化劑被考慮作為藥物輔劑。
式I化合物的劑量可以在寬限度內變化，這取決於控制的疾病，患者的年齡和個體條件，和給藥方式，當然在每個具體的情形中將適合個體需要。對於成人患者，考慮約1～1000mg，特別是約1～100mg的日劑量。根據疾病的嚴重程度和精確的藥代動力學曲線，化合物可以以1個或幾個日劑量單位、例如1～3個劑量單位給藥。
藥物製劑便利地含有約1-500mg，優選1-100mg的式I化合物。
下列實施例用來更詳細地闡明本發明。然而，它們不是意欲以任何方式限制本發明的範圍。
實施例MS＝質譜，EI＝電子碰撞，ISP＝離子噴霧(正離子)。所有實驗均在惰性氣氛(氮氣或氬氣)下進行。
實施例1(2-氟-4,5-二羥基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮的製備a)4-溴-5-氟-苯-1,2-二醇的製備向冷卻的(-78℃)4-氟藜蘆醚(5.0g，32mmol)在二氯甲烷(106ml)中的溶液中緩慢加入三氯化硼的二氯甲烷溶液(1M，96ml，96mmol，3.0eq.)。將反應混合物溫熱到20℃並且攪拌過夜。將反應混合物倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取(3次)。合併的有機層用碳酸氫鈉水溶液洗滌，硫酸鈉乾燥並且過濾。在真空中除去揮發物。用氯仿(50ml)和二氯甲烷(10ml)稀釋棕色固體。緩慢加入溴的四氯化碳溶液(5ml)。在室溫攪拌3h後，在真空中除去揮發物。經過快速色譜純化，得到標題化合物(6.51g，98％)，為棕色固體。ISP MSm/e＝207.9([M+H]+)。b)5-溴-6-氟-2,2-二苯基-苯並[1,3]間二氧雜環戊烯的製備將4-溴-5-氟-苯-1,2-二醇(12g，58.0mmol)和二苯基二氯甲烷(1.2eq.，16.50g)的混合物在室溫攪拌直至不再產生氣體。將混合物在攪拌下在180℃加熱20分鐘。將反應混合物冷卻到室溫，用甲醇(50ml)稀釋並且劇烈攪拌。通過過濾收集沉澱的產物，並將其溶解在甲苯(50ml)中。加入甲醇(100ml)並且在室溫攪拌混合物30分鐘。通過過濾收集沉澱的產物(產率10.3g，48％)，從母液回收另一批(6.4g，30％)。
ISP MSm/e＝370.0([M+H+])。c)(6-氟-2,2-二苯基-苯並[1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-嗎啉-4-基-甲酮的製備向冷卻的(-78℃)5-溴-6-氟-2,2-二苯基-苯並[1,3]間二氧雜環戊烯(17.59g，47.4mmol)在乙醚(300ml)中的溶液中緩慢加入正丁基鋰的己烷溶液(1.6M，30ml，48mmol，1.0eq.)。將反應混合物在-78℃攪拌1h，然後加入4-嗎啉碳醯氯(8.5g，56.9mmol，1.2eq.)。讓反應混合物溫熱到20℃並且倒入碳酸氫鈉水溶液中。用乙酸乙酯萃取水層。合併的有機層用鹽水洗滌。在真空中除去揮發物。經過快速色譜純化，得到(6-氟-2,2-二苯基-苯並[1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-嗎啉-4-基-甲酮化合物(13.0g，68％)，為淡黃色固體。
ISP MSm/e＝406.2([M+H]+)。d)(2-氟-4,5-二羥基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮的製備向(冰浴)冷卻的(6-氟-2,2-二苯基-苯並[1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-嗎啉-4-基-甲酮(5.70g，14.06mMol)在三氟乙酸(60ml)中的溶液中在10分鐘內加入三乙基矽烷(2.1eq，4.7ml)。將混合物在0℃攪拌20分鐘並且在室溫攪拌4h。減壓下除去揮發物，殘餘物用矽膠柱色譜(2∶1乙酸乙酯/庚烷-乙酸乙酯-10∶1乙酸乙酯/甲醇)純化，得到(2-氟-4,5-二羥基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮，為淡棕色固體(3.19g，94％)。
ISP MSm/e＝242.2([M+H]+)。
實施例25,5-二氯-5H-二苯並[a,d]環庚烯-的製備按照J.J.Looker，J.Org.Chem.1966,31,3599製備5,5-二氯-5H-二苯並[a,d]環庚烯5-二苯並環庚烯酮(dibenzosuberenone)(2g，9.7mmol)溶解在磷醯氯(4.5ml)中並且加入五氯化磷(3.13g，15.03mmol)。將混合物在120℃加熱4h。讓混合物冷卻到室溫，並且在減壓下除去溶劑。將粗產物不經進一步純化地使用。
實施例34-[(6-氟-螺[1,3-苯並間二氧雜環戊烯-2,5′-[5H]二苯並[a,d]環庚烯]-5-基)羰基]-嗎啉的製備將5,5-二氯-5H-二苯並[a,d]環庚烯(0.783g，3.0mmol)溶解在甲苯(8ml)中並且加熱到120℃。在20分鐘內滴加4-(2-氟-4,5-二羥基苯甲醯)-嗎啉(0.36g，1.5mmol)在甲苯(4ml)中的溶液。滴加完成後，將混合物在120℃進一步加熱1h。將混合物冷卻到室溫並且蒸發。殘餘物用矽膠柱色譜(1∶0～10∶1二氯甲烷/乙酸乙酯洗脫劑)純化，得到標題化合物，為灰白色泡沫。
MSm/e 430.4[(M+H)+]NMRδ(CDCl3)3.33(br s，2H)，3.60(br s，2H)，3.74(br s，4H)，6.54，(d，1H，J＝8.8Hz)，6.87(d，1H，J＝5.2Hz)，7.17，(s，2H)，7.44(m，4H)，7.50(m，2H)，7.93(m，2H)ppm。
蓋侖製劑實施例實施例A可以以常規的方式製備含有下列成分的薄膜包衣片劑成分 每片核式(I)的化合物10.0mg 200.0mg微晶纖維素 23.5mg 43.5mg含水乳糖 60.0mg 70.0mg聚乙烯吡咯烷酮K3012.5mg 15.0mg澱粉羥乙酸鈉 12.5mg 17.0mg硬脂酸鎂 1.5mg4.5mg(核重量) 120.0mg 350.0mg薄膜包衣羥丙基甲基纖維素 3.5mg7.0mg聚乙二醇6000 0.8mg1.6mg滑石 1.3mg2.6mg氧化鐵(黃色) 0.8mg1.6mg二氧化鈦 0.8mg1.6mg篩分活性成分，並且與微晶纖維素混合，混合物用聚乙烯吡咯烷酮的水溶液制粒。將顆粒與澱粉羥乙酸鈉和硬脂酸鎂混合，並且壓制，得到分別為120或350mg的核。將該核用上面所述的薄膜包衣的水溶液/懸浮液包衣。
實施例B可以以常規的方式製備含有下列成分的膠囊成分每個膠囊式(I)的化合物 25.0mg乳糖150.0mg玉米澱粉20.0mg滑石5.0mg篩分組分並且混合，填充入2號膠囊中。
實施例C注射液可以具有下面的組成式(I)的化合物 3.0mg聚乙二醇400 150.0mg乙酸適量添加至pH5.0注射液用水 加至1.0ml將活性成分溶解於聚乙二醇400和注射用水(部分)的混合物中。通過加入乙酸調節pH至5.0。通過加入剩餘量的水，將體積調節至1.0ml。過濾溶液，並且使用適宜過量填充入小瓶中，且滅菌。
權利要求
1.通式I的化合物， 其中R1和R2各自獨立地為氫或滷素。
2.根據權利要求1的化合物，其中R1和R2都是氫。
3.根據權利要求1或2的化合物，該化合物是4-[(6-氟-螺[1，3-苯並間二氧雜環戊烯-2，5′-[5H]二苯並[a，d]環庚烯]-5-基)羰基]-嗎啉。
4.一種用於製備如權利要求1～3中任何一項定義的式I化合物的方法，該方法包括將式II的5，5-二氯-5H-二苯並[a，d]環庚烯 其中R1和R2各自獨立地為氫或滷素，在升高的溫度下與式III的兒茶酚衍生物反應， 獲得式I化合物
5.通過根據權利要求4的方法製備的根據權利要求1～3中任何一項的化合物。
6.藥物組合物，其包含根據權利要求1～3中任何一項的化合物和藥用載體和/或輔劑。
7.根據權利要求6的藥物組合物，其用於治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病。
8.用作治療活性物質的根據權利要求1～3中任何一項的化合物。
9.用作治療活性物質的根據權利要求1～3中任何一項的化合物，所述治療活性物質用於治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病。
10.一種治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病的方法，該方法包括向人或動物給藥根據權利要求1～3中任何一項的化合物。
11.根據權利要求1～3中任何一項的化合物的應用，其用於治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病。
12.根據權利要求1～3中任何一項的化合物的應用，其用於製備用於治療和/或預防與CB1受體的調節有關的疾病的藥物。
13.基本上如此前所述的新型化合物、工藝和方法以及這些化合物的應用。
全文摘要
本發明涉及式(I)的化合物，其中R
文檔編號A61K31/5377GK101052632SQ200580037874
公開日2007年10月10日 申請日期2005年11月2日 優先權日2004年11月9日
發明者讓-馬克·普朗謝, 斯文·泰勒 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司