一種主動靶向阿黴素-兩親性硫酸軟骨素膠束的製備方法

2023-05-24 10:13:56

一種主動靶向阿黴素-兩親性硫酸軟骨素膠束的製備方法
【專利摘要】本發明公開了一種含有葉酸靶向基團的、由硫酸軟骨素的親水集團作為親水鏈段、長鏈脂肪酸作為疏水鏈段的兩親性多糖—葉酸-脂肪醯-硫酸軟骨素的製備方法，及其在阿黴素類抗腫瘤藥物製劑方面的應用。葉酸-脂肪醯-硫酸軟骨素的平均分子量（ M w）為3,100~53,　000Da，通式如下：其中x為碳原子的個數，是10~22的整數；y為雙鍵的個數，為0~6的整數；n為8~150的整數； O -烷基取代度為5％~50％；葉酸取代度為0.5-2%。
【專利說明】-種主動靶向阿黴素-兩親性硫酸軟骨素膠束的製備方法

【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種載有阿黴素的葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素納米膠束的製備 方法。

【背景技術】
[0002] 阿黴素又稱多柔比星（doxorubicin)，屬於蒽環類抗腫瘤抗生素，在臨床上已有 四十餘年的應用歷史。其結構式如下：

【權利要求】
1. 一種阿黴素-葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素納米膠束，其特徵在於，葉酸受體靶 向兩親性硫酸軟骨素平均分子量0/W)為3, ΚΚΓ53, OOODa，其化學結構式如下：
其中X為碳原子的個數，是ΚΓ22的整數；y為雙鍵的個數，為(Γ6的整數；η為8~150 的整數烷基取代度為5%?50 % ;葉酸取代度為0. 1-5% ; 優選的，x=16, y=3 烷基取代度為5%?20% ;葉酸取代度為0. 5-2% ; 上述的阿黴素-葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素納米膠束，其製備方法如下： 根據權利要求1所述的兩親性硫酸軟骨素衍生物，其特徵在於，x=16,y=3 烷基取代 度為5%?20 % ;葉酸取代度為0. 5-2%。
2. 權利要求1或2所述的一種阿黴素-葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素納米膠束的制 備方法，其特徵在於，步驟如下： (1)將分子量為3, 00(T40, OOODa的硫酸軟骨素溶於甲醯胺中，加入二甲基氨基吡啶 (DMP)溶解後，攪拌下滴加脂肪醯氯，2(T70°C攪拌l~8h，透析去除未反應的試劑及溶劑，真 空乾燥即得微黃色的脂肪醯-硫酸軟骨素固體粉末；其中，硫酸軟骨素、脂肪醯氯、DMAP、甲 醯胺的質量比為1:2.5?0.07:1?0.1 :20?10; (2) 葉酸加入DMSO中，滴加3-5滴三乙胺後攪拌使其完全溶解，待用；脂肪醯-硫酸軟 骨素溶於甲醯胺中，加入N，N'_二環己基碳二亞胺（DCC)、DMAP溶解後，避光攪拌反應lh，將 硫酸軟骨素的羧基活化，滴加葉酸DMSO溶液，20-50°C下避光反應24h ;反應結束後，離心除 去1，3_二環己基脲（D⑶）沉澱，得粘稠橙紅色上清液；取上清乙醇沉澱，離心收集沉澱，無 水乙醇反覆洗滌沉澱至上清液不在顯黃色為止；透析去除未反應的試劑及溶劑，〇. lmol/L 的Na2CO3-NaHCO3 (pH 10)緩衝溶液中避光透析去除未反應的葉酸，去離子水中避光透析除 去緩衝溶液，95%乙醇溶液中繼續透析48h，得沉澱，真空乾燥後即得葉酸-脂肪醯-硫酸軟 骨素；其中，脂肪醯-硫酸軟骨素、DMAP、DCC、甲醯胺、葉酸、DMSO的質量比為1:1?0. 1:0. 5? 0. 1:20^10:0. Γ〇. 01:10^10 ； (3) 稱取阿黴素溶於DMSO中，葉酸-脂肪醯-硫酸軟骨素溶於甲醯胺後，將阿黴素 DMSO 溶液滴入葉酸-脂肪醯-硫酸軟骨素甲醯胺溶液中攪拌均勻，去離子水避光透析，冷凍幹 燥，即得阿黴素葉酸-脂肪醯-硫酸軟骨素納米膠束。
3. 根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於，所述步驟（1)中，長鏈脂肪醯氯為、棕 櫚醯氯、棕櫚一烯醯氯、十七烷醯氯、十七碳一烯醯氯、硬脂醯氯、油醯氯、亞油醯氯、花生醯 氯、花生一烯醯氯、花生二烯醯氯中的一種或幾種。
4. 根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於，所述步驟（1)中，硫酸軟骨素為豬硫 酸軟骨素、牛硫酸軟骨素、鯊魚硫酸軟骨素、雞硫酸軟骨素、鴨硫酸軟骨素中的一種或幾種。
5. 根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於，所述步驟（2)中，後處理的具體方法 是： 離心轉速為5000-10000轉/分鐘，時間為20-40min ; 透析的具體方法是：〇. lmol/L的Na2CO3-NaHCO3 (pH 10)緩衝溶液中避光透析48h去除 未反應的葉酸，去離子水中避光透析48h除去緩衝溶液，95%乙醇透析得沉澱，95%乙醇、甲 醇或丙酮洗滌2次，45°C下真空乾燥l(T20h。
6. 根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於，所述步驟（1)中，脂肪醯氯與硫酸軟 骨素的質量比為2. 7、. 07 :1，硫酸軟骨素的分子量為3, 000-40, OOODa。
7. 根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於，所述步驟（2)中，葉酸與硫酸軟骨素 的質量比為〇. 1?〇. 01 :1。
8. 根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於，所述步驟（1) (2) (3)中，所述透析 袋的截留分子量為l〇〇(Tl〇〇〇〇,透析是指利用該透析袋對去離子水透析48h。
9. 權利要求1或2所述的一種葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素衍生物作為藥物載體的 應用。
10. 權利要求1或2所述的一種阿黴素兩親性硫酸軟骨素納米膠束在腫瘤疾病治療物 中的應用。
【文檔編號】A61K47/36GK104368005SQ201410584680
【公開日】2015年2月25日 申請日期:2014年10月28日 優先權日:2014年10月28日
【發明者】肖玉良, 武夏明, 韓俊芬 申請人:泰山醫學院