京都酚逆序列修飾的脂肪胺/醇衍生物及其製備方法和應用的製作方法

2023-05-24 19:32:41 3

專利名稱：京都酚逆序列修飾的脂肪胺/醇衍生物及其製備方法和應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種人工合成的多肽化合物，特別是涉及一種對二肽的羧基端用脂肪胺、脂肪醇進行保護修飾而得到的化合物及其製備方法以及在製備鎮痛抗炎藥物中的應用。
背景技術：
疼痛作為人類主要生命指徵之一，具有重要的生物學意義。世界疼痛大會將疼痛確認為繼呼吸、脈搏、體溫和血壓之後的「人類第5大生命指徵」，眾多患者正在忍受著疼痛的折磨。目前，臨床上使用的鎮痛藥物都存在各自的毒副作用，例如阿片類鎮痛藥的成癮性和水楊類鎮痛藥對胃腸道的刺激性，尋找鎮痛藥物是新藥研究的熱點之一。在鎮痛劑設計 中發明人認識到京都酚逆序列(Arg-Tyr)是一種有潛力的鎮痛二肽，以及口服活性差。按照這種認識，發明人對二肽的羧基端用脂肪胺、脂肪醇進行保護修飾，形成了本發明。

發明內容
本發明要解決的第一個技術問題是，提供通式I中的化合物(5a_l)Arg-Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 式中，X 為 NH 或 0;式中，n 為 6、8、10、12、14 或 16。對所合成的通式I中的化合物(5a_l)進行編號5a中X = NH，n = 6 ;5b中X =NH, n = 8 ；5c 中 X = NH, n = 10 ；5d 中 X = NH, n = 12 ；5e 中 X = NH, n = 14 ；5f 中 X =NH,n = 16 ；5g 中 X = 0,n = 6 ；5h 中 X = 0,n = 8 ；5i 中 X = 0,n = 10 ；5j 中 X = 0,n =12 ；5k 中 X = 0，n = 14 ；51 中 X = 0，n = 16。以上編碼號只是為了方便描述，並無任何對發明的限制意義。本發明所要解決的第二個技術問題是提供通式化合物5a_l的製備方法，該方法包括(I)濃硫酸、濃硝酸條件下，Arg硝基化得Ne-Arg (NO2)；(2)弱鹼性水二氧六環條件下，Nc-Arg(NO2)與(Boc)2O反應製得Na-Boc-Nc-Arg(NO2)，L-Tyr 與(Boc)2O 反應製得 Boc-Tyr ；(3)在 DCC 和 HOBt 存在下，Boc-Tyr 在無水 THF 中與脂肪胺(CH3(CH2)nCH2NH2,n = 6,8,10,12,14,16)或脂肪醇(CH3(CH2)nCH2OH, n = 6，8，10，12，14，16)縮合成Boc-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 ；(4)在含氯化氫的乙酸乙酯中，Boc-Tyr-XCH2(CH2)nCH3脫Boc保護，得Tyr-XCH2-(CH2)nCH3 ；(5)在 DCC 和 HOBt 存在下，Na-Boc-Nc-Arg(NO2)在無水 THF 中與Boc-Tyr-X-CH2 (CH2) nCH3 縮合，製備得到 Na-Boc-Ne-Arg (NO2) -Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 ；(6)H2/Pd 條件下 Na-Boc-Ns-Arg(NO2)-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 脫-NO2 保護，得Boc-Arg-Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 ；
(7)在含氯化氫的乙酸乙酯中，Boc-Arg-Tyr-XCH2 (CH2) nCH3脫Boc保護，得Arg-Tyr-XCH2(CH2)nCH3O該製備方法可以用圖I的路線概括。本發明所要解決的第三個技術問題是提供了所述的化合物在製備鎮痛和抗炎藥物中的應用。本發明所要解決的第四個技術問題是在小鼠熱甩尾法模型上評價本發明的化合物的鎮痛活性。本發明的第五個目的是在小鼠耳腫脹模型上評價本發明的化合物的抗炎活性。



圖I為本發明通式5a_l化合物的合成路線示意圖。i)DCC,HOBt,CH3(CH2)nCH2NH2(n = 6,8,10,12,14,16)或CH3(CH2)nCH2OH, (n = 6,8,10，12，14，16) ；ii)EtoAc/HCl,冰浴；iii)DCC, HOBt, Boc-Tyr ；iv)H2, Pd/C ；v)EtOAc/HCl,冰浴；5a 中 X = NH, n = 6 ;5b 中 X = NH, n = 8 ;5c 中 X = NH, n = 10 ;5d 中 X = NH, n =12 ；5e 中 X = NH, n = 14 ；5f 中 X = NH, n = 16 ；5g 中 X = 0，n = 6 ；5h 中 X = 0，n = 8 ;5i 中 X = 0，n = 10 ;5j 中 X = 0，n = 12 ；5k 中 X = 0，n = 14 ；51 中 X = 0，n = 16。
具體實施例方式為了進一步闡述本發明，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它們僅用來對本發明進行具體描述，不應當理解為對本發明的限制。實施例 I 製備 Ns-Arg (NO2)冰鹽浴攪拌條件下，向500ml茄瓶中加入80ml濃硝酸，然後緩慢加入80ml濃硫酸。IOmin後，分批加入47. 33g(272mmol)L-Arg，反應混合物冰鹽浴下攪拌反應2h。向反應混合物中緩慢加入冰水96ml，然後緩慢加入濃氨水，調pH = 8，再用冰醋酸調pH = 6，有大量無色固體析出，放入4°C冰箱中繼續析晶。減壓過濾，棄去濾液，濾餅用80°C熱水溶解，放入4°C冰箱中重結晶。室溫下減壓過濾，收集不溶物52. 5g，為無色固體，產率88% .ESI-MS (m/e) :220 [M+H]+ 實施例2 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2)稱取I. 752g Nc-Arg (NO2)於反應瓶中，加入3ml水溶解，冰浴條件下，緩緩滴加INNaOH 8ml，將溶有I. 92g(Boc)20的二氧六環緩緩倒入其中，調反應液pH為9，反應48h，期間每隔2h用單通抽反應體系中CO2—次。TLC檢測反應完全後,調反應液pH為7,旋除二氧六環，再調反應液PH為2，用乙酸乙酯萃取反應液三次，得到的乙酸乙酯層再用飽和NaCl萃洗三次，得到乙酸乙酯層用無水NaSO4乾燥過夜，過濾除去NaSO4,旋幹乙酸乙酯得到標題化合物 2. 4g，為無色固體，產率 94% .ESI-MS (m/e) :320 [M+H]+.實施例3製備Tyr-OMe將120ml無水甲醇放入反應瓶中，冰浴攪拌下滴加10. 4ml氯化亞碸，30min內滴加完畢，分批加入7. 24g(40mmol) L-Tyr,反應混合物室溫攪拌24小時，薄層層析監測至原料消失。水泵減壓抽乾反應液，加入甲醇溶解，抽乾，重複3次；加入乙醚，抽乾，重複3次。用甲醇-乙醚重結晶，過濾得標題化合物8. 78g，為無色固體，產率87% .ESI-MS(m/e)196 [M+H]+.實施例4製備Boc-Tyr稱取0. 905g Boc-Tyr於反應瓶中，加入2ml水溶解，冰浴條件下，緩緩滴加INNa0H5ml，將溶有I. 199g (Boc)2O的二氧六環緩緩倒入其中，調反應液pH為9，反應48h，期間每隔2h用單通抽反應體系中CO2—次。TLC檢測反應完全後,調反應液pH為7,旋除二氧六環，再調反應液PH為2，用乙酸乙酯萃取反應液三次，得到的乙酸乙酯層再用飽和NaCl萃洗三次，得到乙酸乙酯層用無水NaSO4乾燥過夜，過濾除去NaSO4,旋幹乙酸乙酯得到標題化合物 0. 91g，為無色固體，產率 65% .ESI-MS (m/e) :282 [M+H]+.實施例5 製備 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 (Ia)將2. 256g (8. 03mmol) Boc-Tyr溶20ml無水四氫呋喃(THF)，冰浴下往裡加 I.35g (IOmmol) N-羥基苯並三唑(HOBt)和2. 472g (12mmol) 二環己基羰二亞胺(DCC)的無水THF溶液。反應混合物冰浴攪拌30分鐘，得對應的活潑酯溶液，待用。將I. 29g(IOmmol) CH3(CH2)7NH2溶於20ml無水四氫呋喃(THF)，然後與上面待用的活潑酯溶液混溶，用N-甲基嗎啉(NMM)調pH = 8 9。得到的反應混合物室溫反應24小時。TLC(展開劑CHCl3 CH3OH = 30 I)顯示CH3(CH2)7NH2消失。反應混合物減壓濃縮至幹，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用5%碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次；5%硫酸氫鉀水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次和飽和碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液32°C減壓濃縮，重結晶純化，得到標題化合物2. Og，為無色固體，產率64% . ESI-MSWe) :415. 7[M+Na]+.實施例6 製備 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 (Ib)按照實施例5 的方法，3. 472g (12mmol) Boc-Tyr 與 I. 57g (IOmmol) CH3 (C-H2) 9NH2 反應，得到標題化合物3. lg，為無色固體，產率74% . ESI-MS (m/e) :443. 5 [M+Na]+.實施例7 製備 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 10CH3 (Ic)按照實施例5 的方法，3. 372g(12mmol) Boc-Tyr 與 I. 85g (IOmmol) CH3 (C-H2) nNH2 反應，得到標題化合物3. 45g，為無色固體，產率77% .ESI-MS (m/e) :471. 5 [M+Na]+.實施例8 製備 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 (Id)按照實施例5 的方法,5. 48g Boc-Tyr (18mmol)與 3. 215g (15mmol) CH3 (C-H2) 13NH2反應，得到標題化合物5. 81g，為無色固體，產率81% .ESI-MS (m/e) :499. 5 [M+N4a]+.實施例9 製備 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 (Ie)按照實施例5 的方法，3. 372g(12mmol) Boc-Tyr 與 2. 42g (IOmmol) CH3 (C-H2) 15NH2 反應，得到標題化合物3. 17g，為無色固體，產率63% .ESI-MS (m/e) :527. 7 [M+Na]+.實施例10 製備 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 16CH3 (If)按照實施例5 的方法，5. 062g(18mmol)Boc-Tyr 與 4. 035g(15mmol) CH3-(CH2) 17NH2反應，得到標題化合物7g，為無色固體，產率88% .ESI-MS (m/e) :555. 5 [M+Na]+.實施例11 製備 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3 (Ig)將4. 125g(15mmol) Boc-Tyr溶於30ml無水四氫呋喃(THF),冰浴下往裡加0. 525g(15mmol)N-羥基苯並三唑(HOBt)和3. 708g(18mmol) 二環己基羰二亞胺(DCC)的無水THF溶液。反應混合物冰浴攪拌30分鐘，得對應的活潑酯溶液，待用。
將2. 34g(18mm0l) CH3 (CH2)7OH溶於20ml無水四氫呋喃(THF)，然後與上面待用的活潑酯溶液混溶。得到的反應混合物室溫反應24小時。TLC(展開劑CHCl3 CH3OH =30 I)顯示Boc-Tyr消失。反應混合物減壓濃縮至幹，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用5%碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次；5%硫酸氫鉀水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次和飽和碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液32°C減壓濃縮，柱層析純化，得I. 204g標題化合物，為無色油狀物，產率20% .ESI-MS (m/e) :416. 7 [M+Na]+.實施例12 製備 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3 (Ih)按照實施例11 的方法，3. 372g(12mmol) Boc-Tyr 與 2. 775g (15mmol) CH3- (CH2)9OH反應，得到標題化合物2. 5g，為無色油狀物，產率49% .ESI-MS (m/e) :444. 7 [M+Na]+.實施例13 製備 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 (Ii) 按照實施例24 的方法，2. 81g (IOmmol) Boc-Tyr 與 2. 232g (12mmol) CH3-(CH2) n0H反應，得到標題化合物I. 4g，為無色油狀物，產率31% . ESI-MS (m/e) :472. 8 [M+Na]+.實施例14 製備 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 (Ij)按照實施例11 的方法，5. 058g (19. 8mmol) Boc-Tyr 與 4. 922g (23mmol)CH3- (CH2) 130H反應，得到標題化合物2. 2g，為無色油狀物，產率23 % . ESI-MS (m/e)500. 7[M+Na]+.實施例 I5 製備 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 (Ik)
按照實施例11 的方法，5. 06g(20mmol) Boc-Tyr 與 5. 808g (24mmol) CH3-(CH2) 150H反應，得到標題化合物2. 4g，為無色油狀物，產率24% . ESI-MS (m/e) :528. 8 [M+Na]+.實施例I6 製備 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 (11)按照實施例11 的方法，6. 744g (24mmol) Boc-Tyr 與 5. 4g (20mmol) CH3-(CH2) 170H 反應，得到標題化合物2. 9g，為無色油狀物，產率27% . ESI-MS (m/e) :556. 8 [M+Na]+.實施例17 製備 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 (2a)3. Og (7. 65mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2)6CH3 溶於適量乙酸乙酯，加入約 25ml4N 無水氯化氫-乙酸乙酯液，室溫攪拌3小時，TLC(展開劑石油醚丙酮=5 I)顯示原料點消失。反應混合液在室溫下減壓濃縮，殘留物再用乙酸乙酯溶解並室溫下濃縮，如此反覆4 次；然後向濃縮物中加入乙醚，室溫下減壓濃縮，如此反覆3次，直至除淨游離的氯化氫，得標題化合物2. 45g，為無色固體，產率97% .ESI-MS (m/e) :293. 5 [M+H]+.實施例18 製備 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 (2b)按照實施例17 的方法，以 3. Ig (7. 38mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 為原料，得標題化合物 2. Olg,為無色固體，產率 97% ESI-MS (m/e) :321. 5 [M+H]+.實施例19 製備 HCl Tyr-NH CH2 (CH2) 10CH3 (2c)按照實施例17 的方法，以 2. 75g (5. 58mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 10CH3 為原料，得標題化合物 2. 05g，為無色固體，產率 94% .ESI-MS (m/e) :349. 5 [M+H]+.實施例 20 製備 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 (2d)按照實施例17 的方法，以 4. Og (8. 4mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 為原料，得標題化合物 2. 98g，為無色固體，產率 86% .ESI-MS (m/e) :377. 6 [M+H]+.實施例21 製備 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 (2e)
按照實施例17 的方法，以 3. 17g (6. 29mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 為原料，得標題化合物 2. 67g，為無色固體，產率 96% .ESI-MS (m/e) :405. 6 [M+H]+.實施例22 製備 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 16CH3 (2f)按照實施例17 的方法，以 7. Og(13. 2mmol)Boc-Tyr-NHCH2(CH2)16CH3 為原料，得標題化合物 5. 5g，為無色固體，產率 89% .ESI-MS (m/e) :433. 5 [M+H]+ 實施例23 製備 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3 (2g)按照實施例17的方法，以2. 2g (5. 6mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3為原料，得標題化合物 I. 8g，為無色固體，產率 98% ESI-MS (m/e) :294. 7 [M+H]+.實施例24 製備 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3 (2h)按照實施例17的方法，以2. 5g (5. 94mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3為原料，得標題 化合物 2. 02g，為無色固體，產率 95% . ESI-MS (m/e) :322. 6 [M+H]+.實施例25 製備 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 (2i)按照實施例17 的方法，以 I. 9g (4. 23mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 為原料，得標題化合物 I. 53g，為無色固體，產率 94% . ESI-MS (m/e) :350. 5 [M+H]+.實施例26 製備 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 (2j)按照實施例17 的方法，以 2. 2g (4. 61mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 為原料，得標題化合物 I. 87g，為無色固體，產率 98% .ESI-MS (m/e) :378. 6 [M+H]+.實施例27 製備 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 (2k)按照實施例17 的方法，以 2. 4g (4. 75mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 為原料，得標題化合物 2. 02g，為無色固體，產率 96% . ESI-MS (m/e) :406. 6 [M+H]+.實施例28 製備 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 (21)按照實施例17 的方法，以 2. 9g (5. 44mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 為原料，得標題化合物 2. 46g，為無色固體，產率 97% . ESI-MS (m/e) :434. 5 [M+H]+.實施例29 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OMe將2. 807g (8. 8mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2)溶於 20ml 無水四氫呋喃(THF)，冰浴下往裡加I. 08g(8mmol)N-輕基苯並三唑(HOBt)和I. 978g (9. 6mmol) 二環己基羰二亞胺(DCC)的無水THF溶液。反應混合物冰浴攪拌30分鐘，得對應的活潑酯溶液，待用。將I. 852g(6. 57mmol)HCl Tyr-OMe溶於30ml無水四氫呋喃(THF)，然後與上面待用的活潑酯溶液混溶，用N-甲基嗎啉(NMM)調pH = 8 9。得到的反應混合物室溫反應14小時。TLC顯示HCl .Tyr-OMe消失。反應混合物減壓濃縮至幹，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用5%碳酸氫鈉水溶液洗3次,飽和氯化鈉水溶液洗3次；5%硫酸氫鉀水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次和飽和碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液32°C減壓濃縮，柱層析純化，得標題化合物 I. 7g，為無色固體，產率 52% .Mp 72°C,Mo = - 89.1 (c = 1.04, CH3OH),ESI-MS (m/z) 519. 6 [M+Na]+. IR(KBr) 3325. 14, 2958. 48 , 1657. 85, 1524. 64,1260.73.屮-匪1 (3001泡，01^0-(16) 8 /ppm = 9. 21 (s，1H)，8. 49 (s，1H)，8. 12-8. 09 (d，J=9Hz, 1H), 7. 90-7. 88 (m, 1H), 6. 70-6. 97 (d, J = 9Hz，2H)，6. 83—6. 81 (d，J = 6Hz，lH)，6. 67-6. 64 (d, J = 9Hz，3H)，4. 43-4. 37 (Q, J = 6Hz，lH)，3. 95-3. 93 (m，1H)，3. 13-3. 11 (d, J=6Hz,2H)，2. 88-2. 81 (m, 2H)，I. 57-1. 52 (m, 2H)，I. 45 (s, 2H)，I. 38 (s,9H).
實施例30 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 (3a)將I. 914g(6mmoI)Na-Boc-Nc-Arg(NO2)溶於 20ml 無水四氫呋喃(THF),冰浴下往裡加0. 599g (4. 44mmo1) N-輕基苯並三唑(HOBt)和I. 098g (5. 33mmol) 二環己基擬二亞胺(DCC)的無水THF溶液。反應混合物冰浴攪拌30分鐘，得對應的活潑酯溶液，待用。將I. 46g (4. 44mmol) HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 溶於 30ml 無水四氫呋喃(THF)，然後與上面待用的活潑酯溶液混溶，用N-甲基嗎啉(NMM)調pH = 8 9。得到的反應混合物室溫反應14小時。TLC顯示HCl Tyr-NHCH2(CH2)6CH3消失。反應混合物減壓濃縮至幹，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除不溶物。濾液依次用5%碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次；5%硫酸氫鉀水溶液洗3次,飽和氯化鈉水溶液洗3次和飽和碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯層用無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液32°C減壓濃縮，柱層析純化，得標題化合物I. 5g，為無色固體，產率57% .Mp87 0C, [a]2D° =- 120.1 (c= 1.01,CH3OH), ESI-MS (m/z) :592. 9 [M-H]'IR(KBr) :3318. 41, 2930.42，1650. 26，1529. 87，1263. 40,684. 95. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 11 (s，1H), 8. 45 (s, 1H), 7. 78 (m, 1H), 7. 70-7. 67 (d, J = 9Hz，2H)，6. 97—6. 94 (d，J = 9Hz，2H)，
6.63-6. 61 (d, J = 6Hz,2H)，4. 40-4. 33 (Q, J = 6Hz, 1H)，3. 86-3. 84 (m, 1H)，3. 10-2. 90 (m,4H), 2. 83-2. 72(m，2H)，I. 54-1. 47(m，6H)，I. 38(s，9H)，I. 23 (s，10H) ,0. 88-0. 84 (t, J =
6.0Hz,3H).實施例31 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 (3b)按照實施例30 的方法,3. 062g (9. Bmmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)與 2. 56g (7. 18mmo1)HCl Tyr-NH-CH2 (CH2)8CH3反應，得標題化合物3. 05g，為無色固體，產率68% .Mp 98 °C，[a]2° = - 85.7 (c = 2.05, CH3OH), ESI-MS (m/z) :644. 3 [M+Na]+ IR (KBr) :3312. 67,2934. 92，1646. 79，1529. 90，1262. 13，1165. 64,683. 16. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 15 (s，lH) ,8.49-8. 47 (m，lH)，7.91 (s，lH)，7.81 (m，2H) ,7.72-7. 69 (d，J = 9Hz,1H) ,6. 97-6. 94 (d, J = 9Hz，3H)，6. 63—6. 61 (d，J = 6Hz，2H)，4. 39—4. 34 (m，1H)，3. 84 (s，1H)，3. 09 (m, 2H)，3. 03-2. 89 (m, 1H)，2. 83-2. 69 (m, 2H)，I. 54-1. 47 (m, 2H)，I. 38 (s,9H)，I. 44-1. 37(m，4H)，I. 23 (m, 10H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例32 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 10CH3 (3c)按照實施例30 的方法，I. 914g (6mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)與 2. 05g (5mmol)HCl Tyr-NH-CH2(CH2) 10CH3反應，得標題化合物2. 2g，為無色固體，產率64% .Mp 104°C,[a]2D° = - 32.8 (c = 6.8, CH3OH), ESI-MS (m/z) :672. 3 [M+Na]+ IR (KBr) :3319. 46,
2925.19,2855. 17，1638. 89，1520. 02，1260. 59，1166. 98,684. 44. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 15(s，lH)，8. 47 (s，1H)，7. 91 (s，1H)，7. 81 (s，2H)，7. 72-7. 70 (d, J = 6Hz，lH)，
6.96-6. 93 (d, J = 9Hz,3H)，6. 63-6. 60 (d, J = 9Hz,2H)，4. 39 (s, 1H)，3. 84 (s, 1H)，3. 08 (m,2H)，3. 03-2. 94 (m, 1H)，2. 80-2. 72 (m, 1H)，I. 37 (m, 15H)，I. 22 (s, 18H)，0. 86-0. 82 (t, J =
6.0Hz,3H).實施例33 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 (3d)按照實施例30 的方法，I. 6g (5mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)與 I. 504g (3. Bmmol)HCl Tyr-NH-CH2(CH12CH3反應，得標題化合物0. 81g，為無色固體，產率33% .Mp 105°C,[a]2D° = - 207.8 (c = 0.73, CH3OH), ESI-MS (m/z) 700. 3 [M+Na]+. IR(KBr) :3326. 27,2930.89,2342. 47，1652. 85，1529. 62，1263. 94,672. 84. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 16 (s, 1H), 8. 48 (s, 1H), 7. 94 (s, 1H), 7. 82 (m, 1H), 7. 72-7. 70 (d, J = 6Hz，lH)，
7.00 (s,2H)，6. 96-6. 93 (d, J = 9Hz,2H)，6. 63-6. 60 (d, J = 9Hz,2H)，4. 37-4. 35 (m, 1H)，
3.83 (m, 1H), 3. 08 (m, 2H), 3. 03-2. 89 (m, 3H), 2. 86-2. 67 (m, 1H)，I. 37 (s, 9H)，I. 22 (m, 28H)，
0.86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例 34 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 (3e)按照實施例30 的方法，I. 914g (6mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)與 2. Og (5mmol)HCl Tyr-NH-CH2 (CH2) 14CH3反應，得標題化合物I. 96g，為無色固體，產率56% .MpllO0C,[a]2D° = - 64.0 (c = 2.86, CH3OH), ESI-MS (m/z) :728. 5 [M+Na]+ IR (KBr) :3321. 22, 2931.61，1638. 03，1533. 06，1258. 94,685. 21. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 14 (s，1H)，8. 48 (s, 1H)，7. 94-7. 92 (m, 1H)，7. 84-7. 80 (d, J = 6Hz, 1H)，7. 72-7. 70 (d, J = 6Hz,1H) ,7. 00-6. 98 (d, J = 6Hz, 1H) ,6. 96-6. 93 (d, J = 9Hz,2H) ,6. 62-6. 59 (d, J = 9Hz,2H), 4. 39-4. 33 (Q, J = 6Hz 1H), 3. 85-3. 83 (m, 1H), 3. 08-3. 00 (m, 3H), 2. 97-2. 70 (m, 1H)，
2.81-2. 69(m，2H)，I. 58-1. 45 (m, 6H)，I. 37(s，9H)，I. 22(s，26H)，0. 87-0. 83 (t, J = 6. OHz,3H).實施例35 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 16CH3 (3f)按照實施例30 的方法，I. 914g(6mmol)Na-Boc_NG-Arg(NO2)與 2. 16g(4. Bmmol)HCl Tyr-NH-CH2 (CH2) 16CH3反應，得標題化合物I. 74g，為無色固體，產率52% . Mp 108°C，[a]2° = - 299.2 (c = 0.44, CH3OH), ESI-MS (m/z) 756. 4[M+Na]+. IR(KBr) :3318. 16,2934. 39,2344. 03，1648. 16，1529. 94，1262. 19,678. 71. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 14 (s, 1H), 8. 48 (s, 1H), 7. 91 (s, 1H), 7. 82 (m, 1H), 7. 72-7. 69 (d, J = 9Hz，lH)，7.21-7. 19 (m, 1H), 7. 00 (m, 1H), 6. 96-6. 94 (d, J = 6Hz，2H)，6. 63—6. 60 (d，J = 9Hz，2H)，
4.37-4. 31 (m, 1H)，4. 14-4. 08 (Q, 1H)，3. 18-3. 16 (m, 2H)，3. 07-2. 98 (m, 2H)，2. 95-2. 91 (m,1H), 2. 84-2. 67 (m, 1H)，I. 38 (m, 15H)，I. 22(m，30H)，0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例36 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3 (3g)按照實施例30 的方法，I. 914g(6mmol)Na-Boc_NG-Arg(NO2)與 I. 64g(4. 98mmol)HCl Tyr-O-CH2(CH2)6CH3反應，得標題化合物I. 4g，為無色固體，產率47% .Mp 55。。，[af° = 102 (c = 3.93, CH3OH), ESI-MS (m/z) :617. 5 [M+Na]+ IR (KBr) :3326. 55,2940. 62，1652. 29，1523. 28，1262. 36,574. 71. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 24 (s，1H)，8. 13-8. 11 (d, J = 6Hz，lH)，7. 00-6. 97 (d, J = 9Hz，2H)，6. 86-6. 83 (d, J = 9Hz，lH)，
6.66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 38-4. 34 (t，J = 6Hz，1H)，3. 97-3. 93 (t，J = 6Hz 3H)，
3.11 (s，2H)，2. 86-2. 84 (m, 2H)，I. 62-1. 58 (m, 2H)，I. 57-1. 45 (m, 4H)，I. 37 (s,9H)，I. 23 (s,10H) ,0. 88-0. 84(t, J = 6. 0Hz,3H).實施例37 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3 (3h)按照實施例30 的方法，2. 105g (6. Bmmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)與 2. 2g (6. 15mmol)HCl .Tyr-OCH2(CH2)8CH3反應，得標題化合物2. 0g，為微黃色固體，產率49% .Mp 65。。，[a]2° = 131.6 (c = 1.76, CH3OH ) , ESI-MS (m/z) :645. 6 [M+Na]+ IR (KBr) :3328. 67,2934. 64，1648. 66，1520. 60，1263. 29,566. 41. 1H-MirOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =9. 24 (s, 1H) ,8. 13-8. 10 (d, J = 9Hz, 1H) ,7. 00-6. 97 (d, J = 9Hz,2H) ,6. 86-6. 83 (d, J=9Hz,2H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz,2H) ,4. 38-4. 34 (t, J = 6Hz，1H)，3. 97—3. 93 (t，J =6Hz 3H)，3. 11 (s，2H)，2. 86-2. 84 (m, 2H)，I. 57-1. 46 (m, 6H)，I. 37 (s,9H)，I. 23 (s, 14H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例38 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 (3i)按照實施例30 的方法，I. 194g(6mmol)Na-Boc-Nc-Arg(NO2)與 I. 3g(3. 37mmol)HCl Tyr-OCH2(CH2)ltlCH3反應，得標題化合物I. 05g，為無色固體，產率48 % .Mp 60。。，[a]2D° = - 75.9 (c = 2.53, CH3OH), ESI-MS (m/z) :673. 8 [M+Na]+ IR (KBr) :3325. 14,
2932.24，1650. 58，1524. 25，1263. 84，566. 08. 1H-MirOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =9. 23(s, 1H) ,8. 12-8. 09(d, J = 9Hz，1H)，7. 00—6.97 (d，J = 9Hz，2H)，6. 85—6.82 (d，J=9Hz,2H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz,2H) ,4. 38-4. 34 (t, J = 6Hz，1H)，3. 97—3. 93 (t，J = 6Hz 3H) ,3. 11 (s，2H)，2. 86-2. 84(m，2H)，I. 57-1. 46 (m, 6H)，I. 37(s，9H)，I. 23 (s，18H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例39 製備 N°-Boc-NG-Arg(N02)-Tyr-0CH2(CH2)12CH3 (3j)按照實施例30 的方法，I. 76g (5. 52mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)與 2. Ig (5. 08mmol)HCl Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 反應，得標題化合物 I. 04g，產率 32 % .Mp 61 °C，[a]2° = - 119.8 (c = 1.98, CH3OH), ESI-MS(m/z) :679. 8[M+H]+. IR(KBr) :3325. 27，
2933.53，1652. 46，1524. 26，1262. 52,571. 07. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 23 (s,1H)，8. 51 (s，1H)，8. 11-8. 09 (d, J = 6Hz, 1H)，6. 99-6. 96 (d, J = 9Hz,2H)，6. 85-6. 82 (d, J =9Hz, 1H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 39-4. 35 (t, J = 6Hz, 1H)，3. 97-3. 93 (t, J = 6Hz,3H), 3. 11 (s，2H)，2. 86-2. 84 (m, 2H)，I. 57(m，2H)，I. 46 (m, 4H)，I. 37(s，9H)，I. 23(s，22H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例40 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 (3k)按照實施例30 的方法，1.837g (5. 76mmol)N°-Boc-NG-Arg (NO2)與
1.94g (4. 39mmol) HCl Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 反應，得標題化合物 I. 8g，為無色固體，產率 58 % .Mp 64. 7 V，[a]2^ = - 5.3 (c = 0.6, CH3OH), ESI-MS(m/z) :707. 9[M+H]+ IR(KBr) :3322. 96,2933. 28,2855. 09，1659. 90，1519. 15，1264. 00，569. 82. 1H-NMR (300MHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 22 (s，1H)，8. 51 (s，1H)，8. 11-8. 08 (d, J = 9Hz，1H)，6. 99-6. 96 (d，J = 9Hz，2H)，6. 85-6. 82 (d, J = 9Hz，1H)，6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 39-4. 35 (m, 1H)，
3.97-3. 93 (t，J = 6Hz，3H)，3. 11 (s，2H)，2. 86-2. 85(m，2H)，I. 58 (m, 2H)，I. 46(m，4H)，I. 38(s,9H)，I. 23(s,26H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例41 製備 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 (31)按照實施例30 的方法，2. Ig (6. 58mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)與 2. 55g (5. 44mmo1)HCl Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3反應，得標題化合物I. 9g，為無色固體，產率48 % Mp 72 °C，[a]2D° = - 39.3 (c = 1.18, CH3OH), ESI-MS (m/z) :736. 3 [M+H]+ IR (KBr) :3323. 01,
2925.30,2854. 27，1655. 84，1518. 10，1262. 25，1126. 54,567. 18. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 23(s，lH)，8. 51(s，lH)，8. 12-8. 09 (d, J = 9Hz，1H)，6. 99-6. 96 (d，J = 9Hz,2H), 6. 86-6. 83 (d, J = 9Hz, 1H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 39-4. 35 (t, J = 6Hz, 1H)，
3.97-3. 93 (t，J = 6Hz，3H)，3. 11 (s，2H)，2. 98-2. 89 (m, 2H)，I. 58 (m, 2H)，I. 45(m，4H)，
I.37(s,9H)，I. 23(m,30H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).
實施例42製備Arg-Tyr取I. 8g(3. 63mmol)Na-Boc-Nc-Arg(NO2)-OMe 於反應瓶中，加入適量甲醇溶解，冰浴攪拌條件下緩慢加入IN NaOH水溶液至pH = 12，冰浴下攪拌反應2h。TLC監測Boc-Arg (NO2) -Tyr-OMe消失後，用飽和KHSO4調節反應液pH為7，蒸去甲醇，再將反應液pH調節為2，用乙酸乙酯萃洗反應液三次，得到的乙酸乙酯層用飽和NaCl洗滌三次，隨後用無水硫酸鈉乾燥過夜。濾除硫酸鈉，旋除乙酸乙酯得Boc-Arg(NO2)-Tyr I. 2g,為無色固體。將800mg(l. 66mmol)N°-Boc-NG-Arg(N02)-Tyr 用 IOml CH3OH 溶解，再加入 240mgPd/C(5% )，減壓排出反應瓶中的空氣，通入氫氣置換，反覆置換三次後，通氫氣室溫攪拌反應，直至TLC顯示Boc-Arg(NO2)-Tyr消失。停止反應,濾除Pd/C,濾液減壓濃縮至幹,得Boc-Arg-Tyr 704mg,為無色固體。取704mg (I. 61mmol) Na-Boc-Ne-Arg-Tyr 溶於適量乙酸乙酯,加入約 20ml 4N 鹽酸乙酸乙酯液，室溫攪拌3小時，TLC顯示原料點消失。反應混合液在室溫下減壓濃縮，殘留物再用乙酸乙酯溶解並室溫下濃縮，如此反覆5次；然後向濃縮物中加入乙醚，室溫下減壓 濃縮，如此反覆5次，直至除淨游離的氯化氫，得標題化合物480mg，為白色固體，產率59% .Mp 123-124 °C, [a]2° = - 7.1 (c = 2.21, CH3OH), ESI-MS (m/z) 338. 2 [M+H]+. IR(KBr)3174. 85，1665. 97，1513. 64，1233. 75,826. 70,565. 01. 1H-MffiGOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm=9. 38 (s, 1H)，9. 17-9. 15 (m, 1H)，8. 98-8. 95 (m, 1H)，8. 42-8. 38 (m, 1H)，7. 95-7. 91 (m,1H)，7. 58-7. 53 (m, 1H)，7. 42-7. 39 (m, 1H)，7. 25-7. 22 (m, 1H)，7. 09-7. 06 (d, J = 9Hz,2H)，
6.69-6. 67 (d, J = 6Hz,2H) ,4. 39-4. 35 (dd, J = 3Hz, J = 9Hz，1H)，3. 88-3. 86 (m，1H)，3. 16 (m, 2H)，3. 05-2. 84 (m, 2H)，I. 77-1. 76 (m, 2H)，I. 56 (m, 2H).實施例43 製備 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 (5a)取430mg(0. 73mmol)N°-Boc-NG-Arg (NO2)-Tyr-NHCH2 (CH2)6CH3 溶於適量乙酸乙酯，加入約15ml 4N鹽酸乙酸乙酯液，室溫攪拌3小時，TLC顯示原料點消失。反應混合液在室溫下減壓濃縮，殘留物再用乙酸乙酯溶解並室溫下濃縮，如此反覆5次；然後向濃縮物中加入乙醚，室溫下減壓濃縮，如此反覆5次，直至除淨游離的氯化氫，得標題化合物 320mg，為無色固體 90% .Mp 126-127 °C, [a]^0 = - 13.0 (c = 2.29, CH3OH),ESI-MS (m/z) 449. 4 [M+H]+. IR(KBr) :3182. 43,2936. 06，1656. 07，1514. 07，1239. 21，567. 11. 1H-NMR(300MHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 34 (s, 1H) ,8. 80-8. 77 (d, J = 9Hz，lH)，
8.44-8. 43 (d, J = 3Hz, 1H)，8. 39-8. 38 (m, 1H)，8. 10 (s, 1H)，7. 92 (s, 1H)，7. 62-7. 59 (m,1H) ,7. 51-7. 40 (m, 1H) ,7. 29-7. 23 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz，2H)，6. 68-6. 65 (d，J = 9Hz,2H)，4. 37-4. 36 (m, 1H)，3. 82 (s, 1H)，3. 13-3. 02 (m, 3H)，2. 93-2. 88 (m, 1H)，
2.83-2. 72 (m, 2H)，I. 78-1. 76 (m, 2H)，I. 54-1. 51 (m, 2H)，I. 31-1. 27 (m, 2H)，I. 22 (s,9H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例44 製備 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 (5b)按照實施例43 的方法，以 800mg (I. 29mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 8CH3為原料，得標題化合物620mg，為無色固體，產率94 % . Mp 127-128 V，[a]2° = - 39.4 (c = 1.31, CH3OH), ESI-MS (m/z) :477. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3101. 92,
2932.95，1657. 55，1515. 14，1357. 76，1239. 89,564. 88. 1H-NMR(30OMHz, DMS0_d6) 8 /ppm=9. 34(s,1H),8. 79-8.76 (d, J = 9Hz，1H)，8. 43-8. 41 (d，J = 6Hz，1H)，8. 38-8.36 (m，1H) ,8. 12-8. 08 (t, J = 6Hz，lH)，7.91(m，lH)，7.51(m，2H)，7.07-7.04(d，J = 9Hz，2H)，
6.68-6. 65 (d, J = 9Hz,2H)，4. 40-4. 34 (m, 1H)，3. 82-3. 81 (m, 1H)，3. 13-3. 09 (m, 2H)，3. 07-3. 02 (m, 1H)，2. 94-2. 87 (m, 1H)，2. 83-2. 71 (m, 2H)，I. 78-1. 73 (m, 2H)，I. 54-1. 49 (m,2H)，I. 32-1. 28 (m, 2H)，I. 27 (s, 10H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例45 製備 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 10CH3 (5c)按照實施例43 的方法，以 700mg (I. 08mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 10CH3為原料，得標題化合物520mg,為無色固體，產率89 % . Mp 132-133 V，[a]2D° = - 34.5 (c =1.14, CH3OH), ESI-MS (m/z) :505. 5 [M+Na]+ IR (KBr) :3186. 92,
2931.65，1656. 99，1535. 35，1472. 93，1241. 65,821. 43,569. 81. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 34 (s, 1H)，8. 80-8. 77 (d, J = 9Hz，1H)，8. 44-8. 42 (d, J = 6Hz，1H) 8. 39-8. 38 (m,1H) ,8. 11 (m, 1H)，7. 92 (s, 1H)，7. 50 (m, 1H)，7. 54-7. 42 (m, 1H)，7. 29-7. 25 (m, 1H)，
7.07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H)，6. 68-6. 65 (d, J = 9Hz,2H)，4. 38-4. 34 (m, 1H)，3. 82 (s, 1H)，
3.13-3. 03 (m, 3H)，2. 92-2. 86 (Q, J = 6Hz, 1H)，2. 83-2. 72 (m, 2H)，I. 78-1. 76 (m, 2H)，
1.51 (m, 2H)，I. 31-1. 27 (m, 2H)，I. 22 (s,9H)，0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz，3H).實施例46 製備 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 (5d)按照實施例43 的方法，以 540mg (0. 8mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 12CH3為原料，得標題化合物340mg，為無色固體，產率75 % . Mp 138-139 V，[af° = - 23.5 (c = 1.6, CH3OH), ESI-MS (m/z) :533. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3254. 80,2930. 14，1657. 35，1532. 19，1240. 84,686. 11. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 36 (s,1H) ,8. 78-8. 76 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 53-8. 50 (m, 1H) ,8. 41-8. 37 (m, 1H) ,8. 10 (m, 1H)，
7.91 (s, 1H) ,7. 44-7. 14 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d，J = 9Hz，2H)，7. 02 (s, 1H) ,6. 68-6. 65 (d,J = 9Hz，2H)，4. 38-4. 36 (m, 1H)，3. 15 (m, 2H)，3. 13-3. 11 (m, 1H)，2. 95-2. 88 (m, 1H)，
2.86-2. 72 (m, 2H)，I. 78-1. 76 (m, 2H)，I. 51 (m, 2H)，I. 33-1. 29 (m, 2H)，I. 23 (s, 22H)，
0.86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例47 製備 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 (5e)按照實施例43 的方法，以 400mg (0. 57mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 14CH3為原料，得標題化合物300mg，為無色固體，產率88 % . Mp 141-142 V，[a]2D° = - 26.4 (c = 1.49, CH3OH), ESI-MS (m/z) :561. 6 [M+H]+ IR (KBr) :3171. 12,
2928.33，1656. 44，1514. 55，1410. 90，1241. 34,821. 01,572. 80. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 31 (s, 1H) ,8. 78-8. 76 (d, J = 6Hz，1H)，8. 43-8. 41 (d, J = 6Hz, 1H)，
8.38-8. 37 (d, J = 3Hz，lH)，8. 12-8. 08 (t, J = 6Hz，1H)，7. 91 (s，1H)，7. 63-7. 57 (t，J =9Hz, 1H), 7. 46-7. 40 (t, J = 9Hz, 1H)，7. 26-7. 20 (t, J = 9Hz, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H), 6. 68-6. 65 (d, J = 9Hz，2H)，4. 39-4. 34 (dd, J = 6Hz, J = 9Hz, 1H)，3. 82-3. 81 (m, 1H)，
3.13-3. 03 (m, 3H)，2. 94-2. 86 (m, 1H)，2. 83-2. 71 (m, 2H)，I. 78-1. 73 (m, 2H)，I. 54-1. 49 (m,2H)，I. 30-1. 29 (m, 2H)，I. 22(s,9H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例 48 製備 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 16CH3 (5f)按照實施例 43 的方法，以 500mg (0. 69mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 16CH3為原料，得標題化合物340mg，為無色固體，產率79 % . Mp 143-144 V，[a]2D° = - 10.7 (c = 1.93, CH3OH), ESI-MS (m/z) :589. 7 [M+H]+ IR (KBr) :3303. 15,2926.49,1653. 90,1536. 20,1237. 58,820. 90,687. 79,558. 56. 1H-NmrUOOMHz, DMS0_d6)8 /ppm = 8. 78-8. 75 (d, J = 9Hz，1H)，8. 44-8. 42 (d，J = 6Hz, 1H), 8. 39-8. 35 (m, 2H),
8.10-8. 06 (t, J = 6Hz, 1H)，7. 93 (m, 1H)，7. 53 (m, 1H)，7. 45-7. 25 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J=9Hz，2H)，6. 68-6. 65 (d, J = 9Hz，2H)，4. 40-4. 34 (m, 1H), 3. 82-3. 81 (m, 1H), 3. 13(m，2H)，
3.07-3. 03 (m, 1H)，2. 94-2. 91 (m, 1H)，2. 86-2. 77 (m, 2H)，I. 79-1. 74 (m, 2H)，I. 58-1. 49 (m,2H)，I. 31-1. 27 (m, 2H)，I. 22(s,30H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例49 製備 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3 (5g)按照實施例43 的方法，以 750mg (I. 26mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-OC-H2 (CH2) 6CH3為原料，得標題化合物510mg，為無色固體，產率83 % . Mp 109-110 V，[afo = - 33.3 (c = 1.62, CH3OH), ESI-MS (m/z) :450. 4 [M+H]+ IR (KBr) :3194. 15,2936. 20，1660. 13，1524. 89，1358. 14，1231. 17,833. 14,661. 54. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 41 (s, 1H) ,9. 19-9. 17 (d, J = 6Hz，2H)，8. 46-8. 44 (d，J = 6Hz，lH)，
8.41-8. 39 (m, 2H)，8. 00 (s, 1H)，7. 81 (s，1H)，7. 07-7. 05 (d, J = 6Hz,2H)，6. 70-6. 67 (d, J =9Hz，2H)，4. 42-4. 34 (m, 1H), 4. 01-3. 96 (m，2H)，3. 94-3. 89 (m, 1H), 3. 18-3. 14 (t，J = 6Hz,2H), 2. 92-2. 89 (d, J = 9Hz，2H)，I. 80-1. 74(m，2H)，I. 60-1. 54 (m, 2H)，I. 48-1. 44(m，2H)，
I.23 (s, 10H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例50 製備 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3 (5h)按照實施例43 的方法，以 800mg (I. 29mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OC-H2(CH2)8CH3為原料，得標題化合物570mg，為無色固體，產率86 % . Mp 112-113 °C,[a]2^ = - 87.7 (c = 1.63, CH3OH), ESI-MS (m/z) :478. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3340. 48,3191. 91,2843. 74，1669. 32，1359. 81,1238. 80,834. 75,671. 82. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 22-9. 20 (d, J = 6Hz，2H)，8. 49-8. 47 (d，J = 6Hz，1H)，8. 43-8. 39 (m，2H)，8. 00(s，1H)，7. 54(s，1H)，7. 07-7. 04(d，J = 9Hz，2H)，6. 71-6. 68 (d，J = 9Hz,2H)，4. 42-4. 35 (m, 1H)，4. 03-3. 91 (m, 3H)，3. 17 (s，2H)，2. 92-2. 89 (d, J = 9Hz,2H)，
1.80-1. 76 (m, 2H)，I. 60-1. 55 (m, 2H)，I. 48-1. 46 (m, 2H)，I. 23 (s, 14H)，0. 86-0. 82(t, J =
6.0Hz,3H).實施例51 製備 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 (5i)按照實施例43 的方法，以 500mg(0. 77mmol) N°-Boc-NG-Arg (NO2)-Tyr-OC-H2 (CH2) 10CH3為原料，得標題化合物320mg，為無色固體，產率77 % . Mp 116-117 V，[afo = - 17.3 (c = 1.81, CH3OH), ESI-MS (m/z) :506. 4 [M+H]+ IR (KBr) :3401. 62,3135. 64，1660. 13，1527. 30，1222. 44,826. 64,565. 08. 1H-MffiGOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm=9. 38 (s, 1H) ,9. 19-9. 160 (d, J = 9Hz，2H)，8. 46-8. 44 (d，J = 6Hz，1H)，8. 41-8. 39 (m，2H)，7. 97(m，1H)，7. 61-7. 44(m，2H)，7. 07-7. 04(d，J = 9Hz，2H)，6. 70-6. 67 (d，J = 9Hz,2H)，4. 42-4. 37 (m, 1H)，4. 08-4. 02 (m, 2H)，3. 98-3. 89 (m, 2H)，3. 18-3. 14(t, J = 6Hz,2H)，
2.92-2. 89 (d, J = 9Hz,2H)，I. 79-1. 75 (m, 2H)，I. 59-1. 54 (m, 2H)，I. 51-1. 46 (m, 2H)，
I.23 (s, 18H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例52 製備 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 (5 j)按照實施例43 的方法，以 580mg (0. 86mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OC-H2 (CH2) 12CH3為原料，得標題化合物430mg，為無色固體，產率88 % . Mp 139-140 V，[a]2° = -67.2 (c = 1.29, CH3OH), ESI-MS (m/z) :534. 4 [M+H]+ IR (KBr) :3336. 49,3171. 37,2932. 91, 1658. 63，1504. 92，1218. 19. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =
9.34 (s, 1H) ,9. 20-9. 18 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 38(s,3H) ,8. 01-7. 97 (t, J = 6Hz J = 6Hz,1H), 7. 80 (m, 1H), 7. 53 (m, 1H), 7. 07-7. 05 (d, J = 6Hz，2H)，6. 70-6. 67 (d，J = 9Hz，2H)，
4.42-4. 36 (Q, J = 6Hz 1H)，4. 04-3. 97 (m, 2H)，3. 94-3. 88 (m, 1H)，3. 18-3. 16 (m, 2H)，
2.92-2. 89 (d, J = 9Hz，2H)，I. 80(m，2H)，I. 59-1. 57 (m, 2H)，I. 47(m，2H)，I. 23(s，22H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例 53 製備 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 (5k)按照實施例43 的方法，以 800mg (I. 13mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-OC- H2 (CH2) 14CH3為原料，得標題化合物520mg，為無色固體，產率77 % Mp 143-144 V，[af° =-55.9 (c = 1.46, CH3OH), ESI-MS (m/z) :562. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3184. 48,
2929.63. 1721. 03. 1661. 55，1513. 36，1357. 11，1227. 39,825. 79,570. 18.1H-NmrGoomHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 22-9. 19 (d, J = 9Hz, 1H) ,8. 48-8. 47 (d,J = 3Hz, 1H) ,8. 43-8. 42 (m, 1H) ,8. 39 (s, 1H) ,8. 00 (m, 1H)，7. 55 (s，1H)，7. 22 (m, 1H)，
7.07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H)，6. 70-6. 67 (d, J = 9Hz,2H)，4. 42-4. 35 (m, 1H)，4. 07-3. 96 (m,2H) ,3. 94-3. 91 (m, 1H)，3. 17(s，2H)，2. 91-2. 89 (d，J = 6Hz，2H)，I. 80-1. 78(m，2H)，
1.60-1. 57(m，2H)，I. 46 (m, 2H)，I. 22(s，26H)，0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).實施例54 製備 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 (51)按照實施例43 的方法，以 850mg (I. 17mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-OC-H2 (CH2) 16CH3為原料，得標題化合物640mg，為無色固體，產率87 % . Mp 146-147 V，[a]2° = -35.3 (c = 2.41, CH3OH), ESI-MS (m/z) :590. 6 [M+H]+ IR (KBr) :3186. 89,29 28. 04,1739. 68,1661. 65,1513. 79,1356. 93,1225. 64,1111. 31,825. 40,565. 51. 1H-NMR(300MHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 38 (s, 1H) ,9. 19-9. 17 (d, J = 6Hz，2H)，
8.47-8. 45 (d, J = 6Hz, 1H)，8. 42-8. 41 (m, 1H)，8. 00 (m, 1H)，7. 63-7. 57 (t, J = 9Hz, 1H)，
7.46-7. 40 (t, J = 9Hz, 1H)，7. 30-7. 23 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H)，6. 70-6. 68 (d,J = 6Hz,2H)，4. 42-4. 37 (m, 1H)，4. 07-4. 00 (m, 2H)，3. 98-3. 93 (m, 1H)，3. 26 (m, 2H)，
2.92-2. 89 (d, J = 9Hz，2H)，I. 80-1. 75(m，2H)，I. 56-1. 55 (m，2H)，I. 49-1. 46 (m,2H)，
I.23(s,30H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).試驗例I本發明的化合物5a_l的鎮痛活性實驗I)受試化合物本發明的化合物5a_l陽性對照品阿司匹林；2)實驗動物ICR小鼠，雄性，體重20±2g;每12隻小鼠一組，空白及陽性對照各一組。3)劑量設置阿司匹林 165 u mol/kg, Arg-Tyr 100 u mol/kg, 5a-1 10 u mol/kg,
均單次灌胃。藥物配製生理鹽水(NS)溶解。4)給藥方案0. 2ml溶液/鼠。5)動物模型ICR雄性小鼠使用前靜息I天，操作間保持室內溫度22°C，每組小鼠12隻。基礎痛閾的測定是在開始時，先測三次，每次間隔5分鐘，取其平均值為基礎痛閾。每次試驗設生理鹽水組為平行對照。
6)痛閾提高率的測定
灌胃後每30min測定一次痛閾值，共測定6組180min。痛閾改變以下列公式表示痛閾提高％ =[(給藥後痛閾-基礎痛閾)/基礎痛閾]X 100%。7)統計方法本實驗數據統計均採用t檢驗和方差分析，以X土SD表示。8)實驗結果受試化合物熱輻射甩尾實驗痛閾提高結果如表I所示。在10 ii mol/kg劑量下受試化合物經灌胃給藥後對疼痛有顯著的抑制作用。表I化合物5a_l的鎮痛作用
痛閾提高(X±SD%)
化合物30 min 60 min90 min 120 min150 min 180 min
"^a48.33 ± 11.68c~84.96 ± 12.66°~65.12 ± 8.45° 49.5.7 ± 8.53° 40.38 ± 9.97° 25.47 ±7.24°~
5b39.11 ± 8.14g 84.24 ±12.61e 54.25 ± 12.35c 39.36 ±7.86e 34.05 ±7.14e 19.34 ± 3.89e
5c50.21± 10.83 c 88.57 ±10.00e 46.41 ± 11.IOc 41.66 ± 10.98e 25.90 ± 6.58e 14.19 ± 4.27J
5d55.57±10.08c 80.80±12.57e 49:79±7.59c 39.15±6.35e 23.79 ± 5.12.37±3.91
5e55.74 ±9.17c 82.58 ±12.21e 57.43 ± 12.81f 38.47 ±9.37e 24.84 ± 5.07e 15.40 ± 3.31d
5f64.91 ±9.33e 85.76 ±10.98e 42.63 ± 10.02c 28.26 ± 6.45c 18.87 ± 4.26J 12.32 ±2.68
Sg53.07 ±11.40c 78.56 ±10.50e 55.74 ± 10.75c 42.24 ± 9.42e 26.16 ± 5.83e 13.97 ± 3.61d
5h54.28 ±9.14。 78.66 ±11.21e 55:78 ± 8.24f 33.01 ±7.40f 28.25 ± 5.85e 13.54 ± 3.11b
5i47.81 ±9.55c 77.33 ± 10.06e 50.31 ± 9.78c 40.43 ± 6.00e 27.94 ± 6.07e 14.14 ± 3.32a
5j41.19±6.68c 78.35 ±10.96r 45.11±9.59c 30.67±5.82c 21.22±5.13r 15.78±4.06d
5k45.39 ±9.39c 78.76 ± 8.98e 57.26 ± 12.59f 40.14 ± 8.84e 24.52 ± 5.59e 10.57 ±2.86
SI45.89 ±9.73c 84.49 ± 13.85e 51.25 ± 10.73c 37.40 ± 9.37s 21.55 ± 5.16f 9.25 ±3.02
Ar§29.80 ± 5.54h52.75 + 10.551 26.21 ± 6.36h 18.10 ± 5.64h14.59 ±3.43a11.22 ±3.69Tyr
Aspirin48.88 ± 7.73a64.31 ± 10.85a47.47± 8.77a27.37 ±5.48a16.81 ±2.88a12.95 ± 3.15b
NS6.91 ±2.469.86 ±2.8010.24 ±2.847.66 ± 2.7510.04 ± 3.4110.06 ±2.95Aspirin 劑量165 u mol/kg ；Arg-Tyr 劑量100 u mol/kg ;5a_l 劑量10 u mol/kg. a)與NS組比較P < 0. 01 ；b)與NS組比較P < 0. 05 ；c)與NS組比較P < 0. 01，與Arg-Tyr 組比較 P < 0. 01 ；d)與 NS 組比較 P < 0. 01，與 Arg-Tyr 組比較 P < 0. 05 ；e)與NS 組比較 P < 0.01，與 Arg-Tyr 組比較 P < 0. 01，與 Aspirin 比較 P < 0. 01 ；f)與 NS 組比較 P < 0. 01，與 Arg-Tyr 組比較 P < 0. 01，與 Aspirin 比較 P < 0. 05 ；g)與 NS 組比較 P
<0. 01，與 Arg-Tyr 組比較 P < 0. 05，與 Aspirin 比較 P < 0. 01 ；h)與 NS 組比較 P < 0. 01，與 Aspirin 比較 P < 0. 01 ；i)與 NS 組比較 P < 0. 01，與 Aspirin 比較 P < 0. 05 ；j)與 NS組比較P < 0. 05 ;與Arg-Tyr組比較P < 0. 05試驗例2本發明化合物5c，51的鎮痛活性劑量和效應的關係試驗方法同試驗例1，受試化合物為5c, 51 ;將受試化合物分別按IOii mol/kg,IIi mol/kg和0. I Ii mol/kg劑量,均採用灌胃單次給藥。試驗結果見表2。結果表明,本發明化合物5c，51的鎮痛活性呈現劑量依賴關係。表2不同劑量5c，51的鎮痛活性
權利要求
1.一種通式為I的化合物Arg-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 I 式中，X為NH或O ;式中，n 為 6、8、10、12、14 或 16。
2.一種製備權利要求I所述的化合物的方法，其特徵在於包括以下步驟 (1)濃硫酸、濃硝酸條件下，Arg硝基化得Ne-Arg(NO2)； (2)弱鹼性水二氧六環條件下,Nti-Arg(NO2)與(Boc) 20反應製得Na-Boc-Nti-Arg (NO2),L-Tyr 與(Boc)2O 反應製得 Boc-Tyr ； (3)在DCC和HOBt存在下，Boc-Tyr在無水THF中與脂肪胺或脂肪醇縮合成Boc-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 ； (4)在含氯化氫的乙酸乙酯中，Boc-Tyr-XCH2(CH2)nCH3脫Boc保護，得Tyr-XCH2-(CH2)nCH3;(5)在DCC 和 HOBt 存在下，Na-Boc-Nc-Arg(NO2)在無水 THF 中與 Boc-Tyr-X-CH2(CH2)nCH3 縮合，製備得到 Na-Boc-Ns-Arg (NO2) -Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 ； (6)H2/Pd條件下 Na-Boc-Ns-Arg(NO2)-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 脫-NO2 保護，得Boc-Arg-Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 ； ⑵在含氯化氫的乙酸乙酯中，Boc-Arg-Tyr-XCH2 (CH2)nCH3脫Boc保護，即得Arg-Tyr-XCH2(CH2)nCH3O
3.根據權利要求2所述的方法，其特徵在於所述步驟(3)中所述的脂肪胺為正八胺、正十胺、正十二胺、正十四胺、正十六胺或正十八胺；所述脂肪醇為正八醇、正十醇、正十二醇、正十四醇、正十六醇或正十八醇。
4.根據權利要求2所述的方法，其特徵在於所述Arg和Tyr均為L構型胺基酸。
5.權利要求I所述的化合物在製備鎮痛和抗炎藥物中的用途。
全文摘要
本發明公開了京都酚逆序列(Arg-Tyr)修飾的脂肪胺/醇衍生物及其製備方法和作為鎮痛劑和抗炎劑的應用，京都酚逆序列修飾的脂肪胺/醇衍生物的結構為通式I即Arg-Tyr-XCH2(CH2)nCH3，式中X為NH或O；n為6、8、10、12、14或16。本發明採用小鼠熱甩尾法模型評價了通式化合物的鎮痛活性，採用小鼠耳腫脹模型評價了通式I化合物的抗炎活性，實驗結果表明通式I代表的12種化合物具有優秀的鎮痛作用，且在相同劑量下具有較好的抗炎活性，可應用於鎮痛藥和抗炎藥的生產中。
文檔編號A61P29/00GK102796165SQ201110135588
公開日2012年11月28日 申請日期2011年5月24日 優先權日2011年5月24日
發明者趙明, 彭師奇, 於言言 申請人:首都醫科大學