用於經鼻給藥的組合物的製作方法

2023-05-24 04:37:36

專利名稱：：用於經鼻給藥的組合物的製作方法用於經鼻給藥的組合物現有技術已公開通過包含脂質囊泡和與水可混溶的有機溶劑的組合的水性載體向皮膚和細胞膜遞送生物活性材料。例如，包含磷脂和乙醇的水性載體體系描述於EP158441，且上述組分之間的重量比為40:i至i:20。美國專利號5，711，965描述了包含磷脂、乙醇和水的溶液，其各自重量比為io:16:74的溶液。美國專利號5，540，934和5，716，638以及WO03/000174描述了一種水性組合物，其中存在乙醇並包含囊泡(醇質體(ethosomes))。美國專利號6，627，211描述了適於向鼻黏膜給藥抗驚厥劑的載體。明顯地是在該載體中有機溶劑的含量較高(30%至60%乙醇和30至60%丙二醇)。W02007/043057描述了磷脂、一種或多種C2-C4醇和水在製備適於鼻內給藥活性劑的囊泡組合物中的用途，其中所述磷脂和一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且組合物的水含量不小於30%重量。整個說明書中，成分的濃度以相對組合物的總重量表示。US6，410，588公開了大麻二酚治療多發性硬化的用途。
發明內容本發明提供包含大麻二酚(cannabidiol)和乙酸格拉默(glatirameracetate)的組合、和藥物可接受的載體的藥物組合物。該載體優選適於經鼻或腸胃外給藥。因此該載體可為液體形式(包括粘性液體)、或半固體(例如，凝膠、乳膏)。因此，發現包含水、一種或多種C2-C4醇和磷脂的載體尤其適合。大麻二酚和乙酸格拉默優選以協同有效量存在於組合物中。更具體地，大麻二酚和乙酸格拉默的濃度範圍分別為0.5-40%和0.5-30%。最優選本發明提供適於鼻內給藥的藥物組合物，其包含乙酸格拉默和大麻二酚的組合以及載體，該載體包含不小於30%重量的水、12至30%重量的C2-C4醇和0.2至10%形成囊泡結構的磷脂。該C2-C4醇優選為乙醇。優選地，該組合物進一步包含多元醇，且更具體地，包含丙二醇，且其濃度為1至30%重量。包含大麻二酚和乙酸格拉默的組合物適於治療多發性硬化。本發明還提供大麻二酚、乙酸格拉默和藥物可接受的載體在製備用於治療多發性硬化的經鼻或腸胃外給藥的組合物中的用途，其中所述載體優選包含磷脂、一種或多種C2-C4醇和水，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且所述組合物的水含量不小於30%重量。該C2-C4醇優選為乙醇，且該組合物可進一步包含多元醇，如丙二醇。本發明還提供用於鼻內給藥的藥物組合物，其包含雙氯芬酸(diclofenac)和選自地西泮(diaz印am)和芬太尼(fentanyl)中至少一種的活性成分的組合以及載體，其中所述載體包含不小於30%重量的水、12至30%重量的C2-C4醇和0.2至10%形成囊泡結構的磷脂。優選地，該組合物進一步包含多元醇，且更具體地，丙二醇，其濃度為1至30%重本發明還提供雙氯芬酸和選自地西泮和芬太尼中至少一種的活性成分和藥物可接受的載體在製備用於治療疼痛的經鼻給藥的組合物中的用途，其中所述載體包含磷脂、一種或多種C2-C4醇和水，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且所述組合物的水含量不小於30%重量。該C2-C4醇優選為乙醇，且該組合物可進一步包含多元醇如丙二醇。在另一方面，本發明提供用於治療失眠的藥物組合物，其包含治療有效量的溴替唑侖(brotizolam)或其藥物可接受的鹽、磷脂、一種或多種C2-C4醇和水，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且組合物的水含量不小於30%重量，所述磷脂在組合物中形成囊泡。該C2-C4醇優選為乙醇，且該組合物可進一步包含多元醇如丙二醇。本發明還提供溴替唑侖、磷脂、一種或多種C2-C4醇和水在製備適於鼻內給藥的組合物中的用途，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且所述組合物的水含量不小於30%重量。該C2-C4醇優選為乙醇，且該組合物可進一步包含多元醇如丙二醇。在另一方面，本發明提供包含治療有效量的潑尼松龍(prednisolone)或藥物可接受的衍生物或其鹽、磷脂、一種或多種C2-C4醇和水的藥物組合物，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且組合物的水含量不小於30%重量，所述磷脂在組合物中形成囊泡。該C2-C4醇優選為乙醇，且該組合物可進一步包含多元醇如丙二醇。本發明還提供潑尼松龍、磷脂、一種或多種C2-C4醇和水在製備適於鼻內給藥的組合物中的用途，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且所述組合物的水含量不小於30%重量。所述組合物用於治療多發性硬化。適於製備本發明組合物的磷脂包括磷脂醯膽鹼(PC)、氫化磷脂醯膽鹼、磷脂酸(PA)、磷脂醯絲氨酸(PS)、磷脂醯乙醇胺(PE)、磷脂醯甘油(PPG)和磷脂醯肌醇(PL)。根據本發明可使用的磷脂的化學結構描述於US4，614，730，其在此引入作為參考。優選地，本發明的組合物中的磷脂的濃度為0.5至5%重量。本文所用的術語C2-C4醇是指包含兩個、三個或四個碳原子的鏈烷醇。本發明使用的醇特別包括乙醇、l-丙醇、異丙醇和叔丁醇，尤其優選前者。本發明考慮的用作鼻內藥物遞送載體的組合物中乙醇的濃度優選為15_27重量％。醇和磷脂的重量比不小於2:1，且更優選不小於5:1。根據本發明特別優選的實施方案，該組合物進一步包含一種或多種與水可混溶的多元醇，且尤其是二醇(1，2-二醇，如乙二醇和丙二醇，且尤其優選後者)，其濃度為1至30%重量，且優選5至20重量。可以通過在能夠形成囊泡的條件下將各種成分，即水、磷脂、一種或多種C2-C4醇(且還可能有一種或多種多元醇)和活性組分一起混合製備本發明的組合物。更具體地說，可以通過將磷脂溶於醇(或醇/二醇混合物)，隨後添加其水溶液或固體形式的活性成分，隨後添加水便利地製備本發明的組合物。優選在攪拌下，一般在室溫或升高的溫度，優選不超過5(TC下進行組合物的製備。或者，製備磷脂和活性組分在水中的分散液，可能在加熱條件下，在攪拌下向其中5加入醇，任選與多元醇一起(例如乙醇和丙二醇的混合物)。還可能首先製備在其中包有活性組分的凍幹液體脂質囊泡，且隨後將該脂質囊泡分散於水、C2-C4醇和任選的多元醇的混合物中。應注意本發明的組合物可以包含本領域眾所周知的其他賦形劑，諸如表面活性劑，防腐劑，增稠劑，共溶劑，粘合劑，抗氧化劑，緩衝劑，粘度和吸收促進劑和能夠調節製劑的pH和滲透性(osmolality)的試劑。本發明可以使用的合適的表面活性劑包括離子型、非離子型或兩性表面活性劑。更具體地說，可以適當使用親水性表面活性劑(例如吐溫，吐溫80，Myrj，Brjs，Labrasol等)或親脂性表面活性劑(例如Span20，Span60，Myrj，Arlacel83等)，優選濃度範圍在0-25重量％。本發明可以使用的合適的防腐劑包括，例如苄醇、對羥基苯甲酸酯類(parabens)、氯丁醇、苯甲烴銨鹽及其組合。抗氧化劑的某些實例包括生育酚類、丁基羥基甲苯、偏亞硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鉀、抗壞血酸棕櫚酸酯等。這些防腐劑和抗氧化劑在製劑中的存在濃度可為約0.001%-約5%w/w。關於緩衝劑，經鼻給藥系統可以包含用於將製劑pH維持在約7.0的緩衝劑。具體的緩衝劑當然可以根據所用特定經鼻給藥系統以及選擇的具體活性分子的不同而改變。適用於本發明的緩衝劑包括，例如乙酸鹽、檸檬酸鹽、谷醇溶蛋白、碳酸鹽和磷酸鹽緩衝劑及其組合。本發明的藥物製劑可以包括PH調節劑。關於增稠劑，可以使用藥學上可接受的增稠劑將本發明製劑的粘度維持在期望的水平上。可以加入到本發明組合物中的增稠劑包括，例如甲基纖維素，黃原膠，黃蓍膠，粘合劑，瓜爾膠，羧甲基纖維素，羥丙基纖維素，卡波姆，聚乙烯醇，藻酸鹽，阿拉伯膠，脫乙醯殼多糖，黏膜粘著聚合物系統(mucoadhesivepolymer-systems)，如聚(丙烯酸酯)，纖維素衍生物，透明質酸，透明質酸衍生物，殼多糖，膠原蛋白，果膠，澱粉，聚(乙二醇)，硫酸化的多糖類，角叉菜膠，藻酸鈉，明膠，果膠及其組合。增稠劑的期望濃度依賴於選擇的試劑和期望的粘度。所述組合物還可以包含凝膠形成或生物粘合化合物，諸如聚羧乙烯(carbopol)，藻酸鹽，小核菌葡聚糖(scleroglucan)，纖維素衍生物，澱粉，清蛋白，普盧蘭尼克凝膠，二乙氨乙基(DEAE)-葡聚糖凝膠，聚卡波非，透明質酸，透明質酸鹽，澱粉，明膠，膠原蛋白(cholagen)等。還可以將組合物摻入w/o乳膏，o/w乳膏，親水性軟膏或親脂性軟膏，凝膠，其它半固體基質中。可以將組合物作為滴劑，噴霧劑(mist)，氣溶膠，滴注劑，通過使用吸量管(pipetor)，專用設備，蒸發器，氣化器(v即OTizators)等給藥至鼻腔。本發明的製劑還可以包含試劑，諸如減少或防止黏膜乾燥和預防其剌激的耐受促進劑。可以將本發明的組合物以液體，噴霧劑，氣溶膠，霧化劑或半固體製劑施用於鼻腔。半固體製劑可以基於凝膠，w/o或o/w乳膏或親水性/親脂性軟膏。組合物可以包含以分子形式分散(可溶，溶解等)的活性劑或活性劑的細顆粒/晶體。所述組合物可以從噴鼻器(nasalsprays)，定量-劑量噴霧器，擠壓瓶，液體滴管，一次性單_劑量滴管，霧化器，具有單位劑量安瓿的藥筒系統，單劑量泵，雙劑量泵，多劑量泵或任意其它設備給藥。例如，可以將本發明的組合物儲存在如Remington'sPharmaceuticalSciences(第16版，83和92章)中詳細描述的噴霧劑或氣溶膠設備/容器中，或從其中給藥。關於噴霧設備，應注意可以使用單(單位)劑量或多劑量系統。一般而言，噴霧裝置包含瓶和泵；這類裝置商購自各種來源。一般而言，配入單次噴霧動作的液體體積在5-250微升/每個鼻孔/單次給藥的範圍，並且製劑中活性成分的濃度可易於調整，使得一次或多次噴入鼻孔的噴霧符合劑量方案。應注意上述包含大麻二酚和乙酸格拉默的組合物也可腸胃外給予(例如，通過靜脈注射)。大麻二酚為2-[3-甲基-6-(1-甲基乙烯基)-2-環己烯-1-基]-5-戊基_1，3_苯二醇。已描述了合成(-)-形式的大麻二酚的方法，例如通過T.Petrzilka等人，Helv.Chim.Acta52,1102(1969);H.J.Kurth等人，Z.Naturforsch.36B，275(1981);已描述了(±)-形式的大麻二酚的合成，例如通過R.Mechoulam，Y.Gaoni，J.Am.Chem.Soc.87，3273(1965)。大麻二酚可以日劑量10-400mg給予。乙酸格拉默通常以日劑量1至60mg給藥。乙酸格拉默為由丙氨酸，穀氨酸，賴氨酸和酪氨酸分別以約4.6:1.5:3.6:i.o的摩爾比組成的多肽類混合物，它通過化學聚合4種胺基酸合成，形成具有約4000-約13，000道爾頓的平均分子量的產物。相應的摩爾分數(molarfractions)約為丙氨酸0.427，穀氨酸0.141，賴氨酸0.337和酪氨酸0.093，並且可以在約+/-10改變。合成乙酸格拉默的方法已描述於例如US7049399。乙酸格拉默通常以日劑量20mg皮下注射(SC)給藥。雙氯芬酸為2-(2-(2，6-二氯苯基氨基)苯基)乙酸。合成雙氯芬酸的方法已通過例如A.Sallman，R,Pfister，美國專利3，558，690，(1971)描述。雙氯芬酸通常以日劑量25-150mg給藥。地西泮為7-氯-1，3-二氫-1_甲基-5-苯基-2H-l，4-苯並-二氮雜革-2-酮。例如，SternbachLH，ReederE，Keller0，&MetlesicsW.描述了地西泮的合成方法[Quinazolinesand1，4-benzodiaz印inesIIIsubstituted2_amino_5_phenyl_3H_l，4-benzodiaz印ine4-oxides.JOrgChem，26:4488-4497，1961]。地西泮一般以0.2-100mg的每日劑量給藥。芬太尼為N-(1-苯乙基-4-哌啶基)-N-苯基-丙醯胺。芬太尼通常以日劑量100至400mg給藥。其製備描述於，例如，Gupta，P.K等人，J.Chem.Res.2005，7，452-453和描述於Def.Res.Dev.Establ.，Gwalior474002，India;Eng.)溴替唑侖為8-溴-6-(鄰氯苯基)-l-甲基-4H-s-三唑並[3，4c]噻吩並[2，3e]l，4-二氮雜革。其合成方法已描述於，例如日本專利未審查的公開號80899/1976(美國專利號4，094，984)。溴替唑侖通常以日劑量0.01至lmg給藥。潑尼松龍為11，17-二羥基-17-(2-羥基乙醯基)-10，13-二甲基-6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17-十二氫環戊二烯並[a]菲-3-酮。合成潑尼松龍的方法已描述於例如，KurosawaT，IkegawaS，ChibaH，ItoY，NakagawaS，KobayashiK，TohmaM.[Convenientsynthesisof18_hydroxylatedCortisolandprednisolone.Steroids.1992年9月;57(9):426-9.]。潑尼松龍通常以日劑量5_60mg給藥。如本文所述，鼻內給藥或經鼻給藥包括將所述組合物給藥入哺乳動物鼻孔而達到鼻道或鼻腔的黏膜。例如，可以將這類製劑以噴鼻劑，鼻吸入劑，滴鼻劑，氣溶膠，推進劑，加7壓分散體，水性氣溶膠，霧化劑，鼻混懸液，滴注劑，鼻用凝膠，鼻用軟膏劑和鼻用乳膏劑，藉助於任何新或舊類型設備給藥。本發明組合物的給藥還可以使用包含所述組合物的鼻塞或鼻用海綿進行。應注意，當施用時，本文所述的活性化合物可以藥物可接受的鹽、外消旋和單獨對映異構體的形式提供。附圖簡述圖1A-B為顯示相對於口服給藥藥物水溶液(以相同劑量)和相對於未治療的對照組，小鼠在用戊巴比妥鈉(40mg/kg)睡眠誘導前5分鐘經鼻給藥溴替唑侖(藥物劑量0.25mg/kg或2.5mg/kg)後的潛伏期(圖1A)和總睡眠時間(圖1B)的柱狀圖；圖2為顯示相對於皮下給藥藥物水溶液(以相同劑量)和相對於未治療的對照組，以劑量為3mg/Kg動物預防性鼻內給藥潑尼松龍組合物對髓鞘少突膠質糖蛋白(Myelinoligodendrocyteglycoprotein)(M0G肽)誘導的(n=6)實驗性變應性腦脊髓炎(EAE)的臨床表現的圖；圖3為顯示相對於皮下給藥藥物水溶液(以13.7mg/kg)和相對於未治療的對照組，以劑量為5.7mg/Kg動物和13.7mg/Kg動物鼻內給藥潑尼松龍組合物對M0G肽誘導的EAE的臨床表現的圖；圖4為顯示相對於未治療的對照組，經鼻給藥地西泮和/或雙氯芬酸的混合組合物後小鼠扭體測試的結果的柱狀圖；禾口圖5為顯示相對於其皮下給藥和相對於未治療的對照組，鼻內給藥CBD和GA後EAE的臨床表現的圖。實施例參比例1包含乙酸格拉默(GA)的本發明的鼻用組合物降，《《》磷脂5乙醇15丙二醇20維生素E0.2注射用GA水溶液加至100該最終組合物包含12mg/mLGA。參比例2皮下(SC)給藥的GA溶液-對照溶液8tableseeoriginaldocumentpage9上述製劑如下製備將磷脂溶於乙醇且將丙二醇添加至該溶液，然後添加維生素E並混合。然後，將地西泮添加至該混合物中。緩慢添加水並通過Heidolph頂置式攪拌器恆定攪拌。將該組合再攪拌15分鐘。該最終組合物包含6.25mg/mL地西泮。參比例5包含乙酸格拉默(GA)的本發明的鼻用組合物9tableseeoriginaldocumentpage1010克上述製劑如下製備將0.5g大豆磷脂溶於1.5g乙醇且將2g丙二醇添加至該溶液中，然後添加維生素E並混合5分鐘。然後，緩慢添加含20mg/mLGA的GA水溶液，並用Heidolph頂置式攪拌器持續攪拌。將該組合物再攪拌15分鐘。該最終組合物包含12mg/mLGA。參比例6用於皮下(SC)給藥的GA溶液-對照溶液Copaxone⑧注射(20mg/mL)180ii1生理鹽水至3000ii1參比例7用於經鼻給藥的GA溶液_對照溶液tableseeoriginaldocumentpage10實施例1溴替唑侖(催眠/睡眠作用)鼻用組合物tableseeoriginaldocumentpage10tableseeoriginaldocumentpage11該製劑根據上述方法製備。最終製劑包含0.25mg/g溴替唑侖。溴替唑侖在人中的劑量對於睡眠前的一次給藥為0.01至約lmg，優選約0.05至約0.3mg。實施例2經鼻給藥本發明的組合物後，溴替唑侖在小鼠中的催眠(睡眠)作用_實施例1的組合物的測試鼻內給藥上述含溴替唑侖的組合物的功效通過以下實驗方案在小鼠中使用戊巴比妥-誘導的睡眠評估進行測試。在下述的該測試中，時間以分鐘計，用戊巴比妥處理後翻正反射(rightingreflex)的消失作為睡眠潛伏期(sle印latency)，而翻正反射的消失和翻正反射的恢復之間的時間作為睡眠持續期。該模型在大鼠和小鼠中廣泛使用以評價藥物的催眠/鎮靜作用[Avoka等人，J.Ethnopharmacol.2006;103:166-75]。實驗方案在雌性C57B1/6小鼠，6-7周齡中進行實驗。使用以下的動物組(n=4):組1:以劑量為0.25mg/Kg動物(18y1/小鼠)鼻內給藥溴替唑侖組合物。將9實施例1的組合物給藥於每個鼻孔。組2:以劑量為0.25mg/kg動物(18y1/小鼠)口服給藥溴替唑侖。組3:口服給予水的未治療的對照動物。將動物用上述組合物給藥且5分鐘後注射苯巴比妥鈉-SP(40mg/kgi.p)。翻正反射消失的發生和翻正反射消失的持續時間分別記錄為潛伏期(laency)和總睡眠時間(TST)，以分鐘計。圖1表示該實驗的結果。其顯示戊巴比妥給藥前僅5分鐘給予溴替唑侖的鼻給藥治療明顯縮短了潛伏期且明顯增加了戊巴比妥誘導的睡眠的TST。口服溴替唑侖相對於對照組對於兩個參數都沒有明顯作用。用於治療和預防多發性硬化的製劑本發明的鼻用載體的功效表現在其在用於預防和治療實驗性變應性腦脊髓炎(EAE)模型(多發性硬化的動物模型)中發生的神經病症狀的製劑中的用途。預防多發性硬化實施例3包含皮質類固醇的本發明的鼻用組合物tableseeoriginaldocumentpage12該組合物通過上述實施例描述的方法製備。該最終組合物包含2.5mg/mL潑尼松龍。實施例4用於皮下(SC)給藥的潑尼松龍溶液_對照溶液tableseeoriginaldocumentpage12將潑尼松龍溶於PEG400和鹽水的混合物。得到含0.5mg/mL潑尼松龍的澄清溶液。實施例5皮質類固醇鼻用製劑預防EAE的效果小鼠中的EAE是人多發性硬化的可接受的模型EAE的誘導在雌性、6-7周齡(重量17-18g)C57Bl/6小鼠中誘導EAE，其使用稍加修改的之前公開的方案[KataokaH，等人CellMolImmunol.2005]。通過使用該方法，小鼠用在完全弗氏佐劑(CompleteFreund'sadjuvant)(CFA)中的與分枝桿菌混合的髓鞘少突膠質糖蛋白(M0G35—55)肽免疫，然後立即注射和在48小時後注射百日咳毒素。臨床評估根據以下EAE評分標準進行。tableseeoriginaldocumentpage13使用以下實驗組，每組含6隻動物組1:以劑量為3mg/Kg動物(0.05mg/20y1/小鼠)預防性鼻內給藥潑尼松龍組合物(實施例3)。EAE誘導後的第l天至第4天，將10iU組合物每天兩次給藥於每個鼻孔，然後每天給藥一次1.5mg/kg(每隻小鼠0.025mg/10iil，5ii1/鼻孔)直到實驗結束。組2:預防性皮下給藥將實施例4的溶液中的潑尼松龍3mg/kg(每隻小鼠0.05mg/100iU)作為對照皮下給藥。EAE誘導後的第l天至第4天，每天兩次皮下注射該溶液，然後每天一次皮下給藥1.5mg/kg(每隻小鼠0.025mg/50ul)直到實驗結束。組3:對照無治療。圖2中的結果顯示，相對於SC(皮下)給藥相同藥物劑量的溶液，鼻內給藥含潑尼松龍的本發明的組合物(實施例3)有效預防EAE的發展。多發性硬化的治療實施例6包含皮質類固醇的本發明的鼻用組合物降，《《潑尼松龍0.5磷脂5乙醇15丙二醇20維生素E0.2水(DDW)59.313該組合物通過上述實施例描述的方法製備。該最終組合物包含5mg/mL潑尼松龍。實施例7包含皮質類固醇的本發明的鼻用組合物tableseeoriginaldocumentpage14該組合物通過上述實施例描述的方法製備。該鼻用組合物包含10-120mg/mL潑尼松龍。該組合物可以滴劑、噴霧(nebulation)、噴霧器(spray)、設備、經鼻遞送至腦的特殊裝置給藥。人的劑量潑尼松龍的初始劑量可為每天2mg至60mg。應保持或調節該初始劑量直到觀察到滿意的反應。該鼻用組合物每天或每隔一天給藥1至4次或一周一次。實施例8GA和潑尼松龍改進位劑治療EAE的作用根據實施例5描述的方案，在6-7周齡體重為16.84±1.23g的雌性C57B1/6小鼠中誘導EAE。與對照比較，用本發明的鼻用組合物治療EAE:每天給藥組合物一次，開始於第11天(當個體小鼠發展到臨床評分EAE>0.5時開始治療)直到研究結束。使用4個實驗組，每組含6隻動物組1:以劑量為5.7mg/Kg動物(0.lmg/20y1/小鼠)鼻內給藥潑尼松龍組合物(實施例6)。將10iU組合物每天一次給藥於每個鼻孔。組2:以劑量為13.7mg/Kg動物(240mcg/20y1/小鼠)鼻內給藥GA組合物(參比例1)。將10iU組合物每天一次給藥於每個鼻孔。組3:以劑量為13.7mg/kg皮下給藥GA對照溶液(參比例2)。將200y1溶液每天一次給藥於小鼠(240iigGA/動物/天)。組4:對照無治療。圖3為顯示該實驗所得結果的圖。該結果顯示以本發明的組合物(實施例6)鼻內給藥潑尼松龍有效地治療EAE(多發性硬化的模型)。例如，從第22天至實驗結束，以穩定狀態獲得以下EAE評分組1(鼻內給藥的潑尼松龍新組合物)0.4組2(鼻內給藥的GA參照組合物)0.5至0組3(皮下給藥的GA參照溶液)1.5組4(未治療的對照)3鼻內給藥地西泮和雙氯芬酸混合組合物治療疼痛實施例9地西泮(較低劑量)和雙氯芬酸混合物鼻用組合物降，《《》地西泮0.3125雙氯芬酸鈉1.25磷脂2乙醇15丙二醇22維生素E0.2蒸餾水加至100上述製劑如下製備將磷脂溶於乙醇且將丙二醇添加至該溶液中，然後添加維生素E並混合。然後，將地西泮添加至該混合物中然後添加雙氯芬酸鈉並再攪拌10分鐘。緩慢添加水並通過Heidolph頂置式攪拌器恆定攪拌。將該組合再攪拌15分鐘。該最終組合物包含6.25mg/mL地西泮。實施例10地西泮和雙氯芬酸混合物鼻用組合物組分，％w/w，地西泮1雙氯芬酸鈉7.5磷脂2.515組分，％w/w，乙醇16丙二醇25維生素E0.2緩衝液加至100實施例11包含阿片類藥物和抗炎劑的組合物降，《《》芬太尼0.01-1雙氯芬酸鈉0.5-10磷脂3乙醇17丙二醇17維生素E0.2蒸餾水加至100芬太尼的建議劑量為每次給藥10-300mcg。雙氯芬酸的建議劑量為每次給藥0.05-100mg。實施例12地西泮和雙氯芬酸鼻用組合物在小鼠中的鎮痛作用的試驗對鼻內給藥含雙氯芬酸_地西泮的組合物和含地西泮的組合物(分別為實施例9和參比例3-4詳述的組合物)的鎮痛功效進行測試。該實驗使用雌性C75/BL小鼠(8-9周)進行。使用以下每組4隻動物的實驗組組1:鼻內給藥參比例3的地西泮低劑量組合物。:鼻內給藥參比例4的地西泮高劑量組合物。:鼻內給藥實施例9的含低劑量的地西泮和雙氯芬酸的地西泮和雙氯芬酸組合物。組2組3結果與未治療的對照動物比較。腹腔內注射弱乙酸溶液誘導傷害性定型行為(nociceptive16stereotypedbehavior)(扭體)，其模仿急性疼痛。該模型廣泛用於評價抗疼痛藥物的鎮痛(抗傷害(antinociceptive))作用。小鼠在Isoflurane⑧麻醉下接受治療。治療後半小時，3組中的所有小鼠腹腔內給藥乙酸0.6%(10ml/kg)並單獨養在具有平滑地板的籠中。通過計數注射乙酸5分鐘後，10分鐘內的扭體次數記錄抗傷害作用。一次扭體通過腹縊和至少一個後肢的伸展所指示。根據圖4的結果，明顯地是給藥實施例9的雙氯芬酸和地西泮的鼻用組合物，完全減少了注射乙酸溶液誘導的疼痛。該組合物比以相同低劑量給藥的地西泮具有高得多的作用，甚至與兩倍高的劑量給藥的地西泮相比也具有高得多的作用。這些結果表明當使用混合的組合物時能降低藥物的劑量。鼻內給藥乙酸格拉默(GA)和大麻二酚(CBD)混合組合物治療多發性硬化實施例13含GA和CBD(大麻二酚)的本發明的鼻用組合物tableseeoriginaldocumentpage17該組合物通過上述方法製備。該最終組合物包含11.2mg/mLGA和40mg/mLCBD。實施例14包含GA和CBD的本發明的鼻用組合物tableseeoriginaldocumentpage17tableseeoriginaldocumentpage18該組合物通過上述方法製備。該最終組合物包含11.2mg/mL的GA和20mg/mL的CBD。實施例15包含GA和CBD的本發明的鼻用組合物tableseeoriginaldocumentpage18該最終組合物包含11.8mg/mL的GA和12mg/mL的CDB。實施例16包含GA和CBD的本發明的鼻用組合物tableseeoriginaldocumentpage18該組合物通過上述實施例描述的方法製備。將CBD混合於/溶於磷脂/乙醇/丙二醇相中。GA以水溶液添加。該GA溶液可包含緩衝劑、二醇(glycols)、聚二醇(polyglycols)、增溶劑如檸檬酸酯、碳水化合物、甘露醇、糖醇、鹽、穩定劑、抗氧化劑(BHA、BHT、硫化物、生育酚、抗壞血酸衍生物)。該鼻用組合物包含5-100mg/mL的GA和1-100mg/mL的CBD。該組合物可以滴劑、霧化、噴霧、設備、經鼻遞送至腦的特殊設備給藥。GA在人體內的劑量按需要給藥0.5-80mg的GA。GA在人體內的劑量按需要給藥0.5-80mg的GA。CBD的劑量按需要給藥0.l-500mg。鼻用組合物的給藥可每天或每隔一天進行或一周一次。實施例17通過鼻內的GA-CBD組合治療實驗性變應性腦脊髓炎(EAE)-神經元再生的證據小鼠中的EAE是人多發性硬化的可接受的模型。EAE的誘導在雌性、6-7周齡(重量17-18g)C57Bl/6小鼠中誘導EAE，其使用稍加修改的之前公開的方案[KataokaH，等人CellMolImmunol.2005]。通過使用該方法，小鼠用X在完全弗氏佐劑(CFA)中的與分枝桿菌混合的髓鞘少突膠質糖蛋白(M0G35—55)肽免疫，然後立即注射和在48小時後注射百日咳毒素。臨床評估根據EAE評分標準進行(詳見實施例5)。使用以下實驗組，每組含6隻動物在所有治療組中每天向小鼠給藥組合物一次，開始於第11天(當個體小鼠發展到臨床評分EAE>0.5時開始治療)直到研究結束。使用4個實驗組組1:鼻內給藥GA-CBD組合物。在EAE發展的前3天以劑量為6.8mgGA/Kg動物和24.45mgCBD/Kg動物(10y1/小鼠)給藥實施例13的組合物。此外，直到實驗結束，將實施例14的組合物以劑量為6.8mgGA/Kg動物和12.2mgCBD/Kg動物(10iU/小鼠)給藥。每天給藥組合物一次。在實驗結束時，將小鼠處死，去除腦用於神經發生分析。組2:以GA劑量為6.8mg/Kg動物(120mcg/10y1/小鼠)鼻內給藥GA組合物(參比例5)。組合物每天給藥一次。組3:以GA劑量為6.8mg/kg皮下給藥GA對照溶液(參比例6)。將100ii1溶液每天一次給藥於小鼠(120iigGA/動物/天)。組4:對照-無治療。將兩隻小鼠從第20天至實驗結束每天腹腔內注射50mg/KgBrDU(5-Br-2'-脫氧尿苷)，其為摻入分化腦神經元的DNA中的胸苷類似物。在實驗結束時，將小鼠處死，去除腦用於神經發生分析。19圖5的結果顯示，相比鼻內給藥相同劑量的單獨的GA或皮下給藥相同劑量的GA，鼻內給藥包含低劑量GA和CBD的組合物治療小鼠的EAE有效得多。在實驗結束時(第26天)得到以下EAE評分組1(鼻內GA-CBD組合物)0.5組2(鼻內GA組合物)2組3(皮下GA對照溶液)3.4組4(未治療的對照組)3組織切片顯示僅在用GA-CBD鼻內治療的小鼠(組1)中具有活性神經元的高度再生。實施例18用GA-CBD組合物對小鼠EAE的鼻內治療作用在未治療的對照動物和用GA水溶液給藥的動物中的再生治療在雌性C57B1/6中按之前的實施例5所述誘導EAE。進行該實驗以檢測經鼻給藥不在本發明的載體中的GA溶液在EAE模型中是否有效。每天給藥組合物一次，開始於第11天(當個體小鼠發展到臨床評分EAE>0.5時開始治療)直到研究結束。使用以下實驗組，每組含6隻動物組1:以高劑量為13.7mg/Kg動物(240mcg/20y1/小鼠)鼻內給藥GA水溶液對照(參比例7)。將10組合物每天一次給藥於每個鼻孔。組2:對照無治療。結果顯示鼻內給藥水溶液中的GA對EAE(多發性硬化的模型)沒有作用，且與未治療的小鼠沒有差異。從EAE誘導後第16天開始，根據以下治療流程將動物再分成4個新的組。組1A:將源自之前用鼻內GA水溶液治療的組中的兩隻小鼠現在用實施例15的組合物鼻內治療。組IB:將源自之前用鼻內GA水溶液治療的組中的兩隻小鼠現在不治療。組2A:三隻之前未治療的小鼠_保持不治療組2B:將一隻之前未治療的小鼠現在用實施例15的組合物鼻內治療。表VI示出實施例18的實驗結果。該結果顯示當小鼠從第16天用GA和CBD的組合治療時EAE評分減少，其針對復發的病症。在組1A中，在第22天平均評分為2，表明減少了l分(從3至2)，且在組2B中，減少了2分，從4分至2分。在兩個未治療的小鼠組，IB和2A中，分數基本保持相同。表VItableseeoriginaldocumentpage21實施例19EAE小鼠模型中經鼻和皮下給藥新的藥物組合乙酸格拉默和大麻二酚(GA&CBD)的治療功效實驗在雌性、6-7周齡C57B1/6小鼠中進行。小鼠用在完全弗氏佐劑(CFA)中與0.lml(5mg分枝桿菌)混合的300ygM0G35—55肽進行免疫。對每隻小鼠在尾的底部注射0.2ml的混合物。以0.lml的體積立即注射百日咳毒素(200ng/小鼠)和在48小時後注射百日咳毒素(200ng/小鼠)。臨床評估根據以下標準進行(EAE評分，參見實施例5)。製備以下製劑製劑Atableseeoriginaldocumentpage21將該組合再攪拌15分鐘。該最終組合物包含12mg/mLGA和12mg/mlCBD。製劑B組合物%w/w注射用GA水溶液12CBD0.24乙醇15丙二醇21Phospholipon90G4乙酸維生素E0.2蒸餾水47.6該最終組合物包含2.4mg/mLGA和2.4mg/mlCBD。實驗組按以下準備，每組含5隻動物組A-鼻內-乙酸格拉默和CBD-製劑A:5隻小鼠每隻每天一次以10微升製劑A接受該組合(GA&CBD乙酸格拉默6.8mg/kg和CBD6.7mg/kg)。當單個小鼠發展到臨床評分EAE>0.5時開始治療，直到研究結束。組B-皮下-乙酸格拉默和CBD-製劑B:5隻小鼠每隻每天以50微升製劑B接受該組合(GA&CBD乙酸格拉默6.8mg/kg和CBD6.7mg/kg)—次。當個體小鼠發展到臨床評分EAE>0.5時開始治療，直到研究結束。組C.對照無治療未治療的小鼠結果平均平均平均(±SE)持平均(±SE)組發病率死亡率續時間(天)(±SE)發病(天)(±SE)組評分最大評分製劑A16140.391.2IN-GA/CBD5/50±±±±治療1.791.80.290.336.7mg/6.7mg/kg22tableseeoriginaldocumentpage23上表和圖5示出相對於未治療的對照組，鼻內給藥CBD和GA後、皮下給藥CBD和GA後EAE的臨床表現，且顯示經鼻給藥和皮下給藥藥物組合相對對照的病態小鼠在減少疾病方面都具有統計學意義的功效。fp〈0.05，製劑A相對於對照，^P〈0.05，製劑B相對於對照，且經鼻給藥為最有效的治療。權利要求藥物組合物，其包含大麻二酚和乙酸格拉默的組合，以及藥物可接受的載體。2.根據權利要求l的藥物組合物，其中所述載體適於經鼻給藥。3.根據權利要求2的藥物組合物，其中所述載體為液體載體。4.根據權利要求2的藥物組合物，其中所述載體包含水、一種或多種C2-C4醇和磷脂。5.根據權利要求4的藥物組合物，其適於鼻內給藥，該組合物包含乙酸格拉默和大麻二酚的在載體中的組合，該載體包含不小於30%重量的水、12至30%重量的C2-C4醇和0.2至10%形成囊泡結構的磷脂。6.根據權利要求5的藥物組合物，其中所述C2-C4醇為乙醇。7.根據權利要求5的藥物組合物，其進一步包含一種或多種與水可混溶的多元醇。8.大麻二酚和乙酸格拉默的組合和藥物可接受的載體在製備用於治療多發性硬化的經鼻或腸胃外給藥的組合物中的用途。9.根據權利要求8的用途，其中所述載體包含磷脂、一種或多種C2-C4醇和水。10.根據權利要求9的用途，其中所述磷脂和所述一種或多種C2-C4醇在組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且所述組合物的水含量不小於30%重量。11.根據權利要求IO的用途，其中所述C2-C4醇為乙醇。12.根據權利要求10的用途，其中該組合物進一步包含一種或多種與水可混溶的多元醇。13.用於鼻內給藥的藥物組合物，其包含雙氯芬酸和選自地西泮和芬太尼中至少一種的活性成分的組合，以及載體，其中所述載體包含不小於30%重量的水、12至30%重量的C2-C4醇和0.2至10%形成囊泡結構的磷脂。14.根據權利要求13的藥物組合物，其中所述C2-C4醇為乙醇。15.根據權利要求13的藥物組合物，其進一步包含一種或多種與水可混溶的多元醇。16.雙氯芬酸和選自地西泮和芬太尼中至少一種的活性成分、和藥物可接受的載體在製備用於治療疼痛的經鼻給藥的組合物中的用途，其中所述載體包含磷脂、一種或多種C2-C4醇和水，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且所述組合物的水含量不小於30%重量。17.根據權利要求16的用途，其中存在於組合物中的C2-C4醇為乙醇。18.根據權利要求17的用途，其中該組合物進一步包含一種或多種與水可混溶的多元醇。19.用於治療失眠的藥物組合物，其包含治療有效量的溴替唑侖或其藥物可接受的鹽、磷脂、一種或多種C2-C4醇和水，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且組合物的水含量不小於30%重量，所述磷脂在組合物中形成囊泡。20.溴替唑侖、磷脂、一種或多種C2-C4醇和水在製備用於治療失眠的經鼻給藥的組合物中的用途，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且所述組合物的水含量不小於30%重量。21.藥物組合物，其包含治療有效量的潑尼松龍或藥物可接受的衍生物或其鹽、磷脂、一種或多種C2-C4醇和水，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且組合物的水含量不小於30%重量，所述磷脂在組合物中形成囊泡。22.潑尼松龍、磷脂、一種或多種C2-C4醇和水在製備適於鼻內給藥的組合物中的用途，其中所述磷脂和所述一種或多種醇在所述組合物中的濃度分別為0.2至10%和12至30%重量，且所述組合物的水含量不小於30%重量，所述磷脂在組合物中形成囊泡。全文摘要包含大麻二酚和乙酸格拉默的組合，以及藥物可接受的載體的藥物組合物。文檔編號A61K38/02GK101720220SQ200880018261公開日2010年6月2日申請日期2008年3月30日優先權日2007年3月29日發明者埃爾卡·圖伊圖,比亞納·戈丁,沙赫·達奇申請人:耶路撒冷希伯來大學伊薩姆研究開發公司