取代苄脲衍生物和含有該衍生物的藥物的製作方法

2023-05-24 17:45:41 1

專利名稱：：取代苄脲衍生物和含有該衍生物的藥物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及新的取代苄脲衍生物或其鹽，以及含該衍生物用作活性成分的藥物，本發明特別涉及取代苄脲衍生物或其鹽，它們是有效的抗動脈硬化藥，能選擇性地抑制動脈壁內巨噬細胞中的醯基-輔酶A膽甾醇醯基轉移酶(ACAT)，從而預防泡沫細胞的形成，也涉及含該衍生物用作活性成分的藥物。在日本，心臟病和腦血管疾病繼癌症之後分列致死病因的第二位和第三位，並且如果將二者相加，佔致死總數的一半以上。這些疾病多數都存在動脈硬化的最終症狀。老化也會造成動脈硬化，對此並無常規診斷。另外，當時動脈硬化的病名還未出現。但已發現動脈硬化的死亡率非常高。對於動脈硬化的致病機理，還有許多未知的方面。近年來，對該機理已進行了許多研究，並已很快發現了該機理。尤其發現，當發生動脈硬化時，形成動脈粥樣硬化損害，其中積累了大量膽甾醇酯。隨著該損害的發展，血管腔持續收縮，從而造成更糟的情況，即血管完全阻塞。如上文所述，動脈硬化是十分可怕的疾病。到目前為止，防治動脈硬化的方法主要是減輕其危險因素。該方法是一種消除與動脈硬化疾病發病有關的惡化因素的方法。特別是除飲食治療外，還有許多有效的治療和預防方法，如施用各種降血脂藥和抗高血壓藥。但這些藥並非直接作用於動脈硬化，因此亟需研製一種能直接作用於動脈硬化的藥物。ACAT抑制劑是具有直接作用的建議使用的藥物之一。ACAT是一種膽甾醇醯化酶，從而能合成所積累的膽甾醇酯。動脈硬化的動脈粥樣硬化損害中，膽甾醇酯過量積累。因此希望對ACAT的抑制能防止膽甾醇酯的過量積累，也能防止硬化損害的發展。常用的ACAT抑制劑包括在日本公開特許公報117651/1990、234839/1992和7295/1992「H.Tawara等人，藥物化學雜誌，37，2079-2084(1994)」以及日本公開特許公報41006/1996和258200/1995中所述的化合物。這些文獻研究了對小腸微粒體或肝微粒體中的ACAT的抑制活性，或者對血漿中膽甾醇的間接降低作用，但並未述及任何關於對巨噬細胞中ACAT的抑制活性的內容，而對抗動脈硬化作用的研究表明，對巨噬細胞中ACAT的抑制更為重要。另外，在「ThomasP.Maduskuie，Jr等人，藥物化學雜誌，38，1067-1083(1995)」描述的化合物中，發現其中的某些化合物對巨噬細胞中ACAT的抑制比對肝微粒體中ACAT的抑制更強。但不能由此說明它們具有足夠的選擇性作用。因此，本發明的目的是提供某些化合物，在全身(如，肝、內臟黏膜、動脈、腎上腺、卵巢和皮膚)所存在的ACAT中，它們尤其能有力地和選擇性地抑制動脈壁內巨噬細胞中的ACAT，從而防止泡沫細胞的形成，並可用作防治動脈硬化的藥物。為此，本發明進行了大量研究。結果發現，下述的通式(1)所示的取代苄脲衍生物對巨噬細胞中ACAT的抑制比對肝中ACAT的抑制更強，因此可用作防治動脈硬化的藥物，從而完成了本發明。因此在本發明中，提供了如以下通式(1)所示的取代苄脲衍生物或其鹽其中R1和R2可彼此相同或不同，分別為氫原子或滷原子、或烷基或烷氧基，R3是可以被取代的苯基或雜環基團，n是1-6的整數，R4是可以被取代的苯基。在本發明中，也提供了含取代苄脲衍生物(1)或其鹽用作活性成分的藥物。在本發明中，還提供了一種藥物組合物，該組合物包含取代苄脲衍生物(1)或其鹽，以及可藥用載體。本發明還提供了取代苄脲衍生物(1)或其鹽作為藥物的用途。在本發明中，還提供了一種防治動脈硬化的方法，該方法包括向人類或哺乳動物施用有效量的取代苄脲衍生物(1)或其鹽。本發明的化合物有選擇性地並且很強地抑制巨噬細胞中ACAT，因此可用作防治動脈硬化的藥物。通過對本發明的以下優選實施方案的詳細描述和所附的權利要求書，本發明的上述目的和其它目的、特點和優點都將是顯而易見的。本發明的取代苄脲衍生物如通式(1)所示。通式(1)中，R1和R2的滷原子以及R3和R4的取代基的滷原子包括氟、氯、溴和碘原子。烷基優選C1-6的烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基以及直鏈或支鏈戊基和己基。烷氧基優選C1-6的烷氧基，特別包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基以及直鏈或支鏈戊氧基和己氧基。其中，滷原子中優選氟原子，烷基中優選甲基，烷氧基中優選甲氧基。R3所代表的雜環基團的實例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、咪唑基、噻唑基、三唑基、惡唑基、異惡唑基、吲哚基、喹啉基和異喹啉基。R3和R4所示的苯基或R3所示的雜環基團上的取代基的實例包含1-3個取代基，它們選自滷原子、滷代C1-6的烷基、直鏈或支鏈的C1-6烷氧基、氨基；單C1-6烷基氨基或二-C1-6烷基氨基、羥基、C7-16芳烷氧基、亞甲基二氧基、氰基、苯甲醯基、C1-6鏈烷醯基、氨基甲醯基、羧基、C1-6烷氧羰基、C1-6鏈烷醯氧基、硝基、磺酸基、磺醯氨基、巰基、C1-6烷硫基、C1-6烷基磺醯基、直鏈或支鏈C1-6烷基、C1-6烷醯氨基、苯甲醯氨基、羥基-C1-6烷基、羧基-C1-6烷基、羧基-C1-6烷氧基、和C2-6鏈烯基。尤其包括滷原子；滷代C1-6的烷基，如氟甲基、氯甲基和1，1，1-三氟甲基；C1-6烷氧基，如甲氧基和乙氧基；氨基；單C1-6烷基氨基，如一甲基氨基和-乙基氨基；二-C1-6烷基氨基，如二甲基氨基和二乙基氨基；羥基；C7-16芳烷氧基，如苄氧基；亞甲基二氧基；氰基；苯甲醯基；C1-6鏈烷醯基，如乙醯基和丙醯基；氨基甲醯基；羧基；C1-6烷氧羰基，如甲氧羰基和乙氧羰基；C1-6烷醯氧基，如乙醯氧基和丙醯氧基；硝基；磺酸基；磺醯氨基；巰基；C1-6烷硫基，如甲硫基和乙硫基；C1-6烷基磺醯基，如甲磺醯基和乙磺醯基；直鏈或支鏈C1-6烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基；C1-6烷醯氨基，如乙醯氨基和丙醯氨基；苯甲醯氨基、羥基-C1-6烷基，如羥甲基和羥乙基；羧基-C1-6烷基，如羧甲基和羧乙基；羧基-C1-6烷氧基，如羧甲氧基和羧基二甲基甲氧基；和C2-6鏈烯基，如乙烯基和烯丙基。其中，優選該1-3個取代基選自滷原子、直鏈或支鏈的C1-6的烷基、C1-6烷氧基、硝基、羥基、亞甲基二氧基、單C1-6烷基氨基、二-C1-6烷基氨基、氨基、和羧基，特別優選該1-3個取代基選自氟原子、甲基、異丙基、甲氧基、亞甲基二氧基、羥基、二甲基氨基和硝基。另外，通式(1)中的n是1-6的整數，特別優選1-4的整數。當R3的雜環基團選自吡啶基、咪唑基、噻唑基、三唑基、惡唑基、異惡唑基、喹啉基和異喹啉基，或採用氨基化合物、羧酸、磺酸等進行取代時，本發明的取代苄脲衍生物(1)可形成鹽。這時對該鹽並無特殊限制，只要它們是可藥用鹽。當氨基化合物被取代時其具體實例包括有機酸鹽，如富馬酸、馬來酸、檸檬酸和酒石酸的鹽，以及無機酸鹽，如鹽酸、氫溴酸和硫酸的鹽；當羧酸或磺酸被取代時鹽例如有鈉鹽、鉀鹽和鈣鹽。本發明的取代苄脲衍生物(1)可以是溶劑化物，典型的如水合物。例如，可根據以下的製備方法1-3中的任一方法來製備本發明的取代苄脲衍生物(1)。製備方法1其中，R1至R4以及n的定義如上，X是滷原子。更具體地如上述的反應方案所示，羥基苯甲醛化合物(2)與滷素化合物(3)反應(第一步)，將所得的化合物(4)與化合物(5)反應(第二步)，得到O-甲基肟衍生物(6)。然後還原該化合物(6)得到苄胺衍生物(7)(第三步)，然後將苄胺衍生物(7)與異氰酸酯(8)反應(第四步)，從而得到本發明的化合物(1)。以下分別對各步驟進行詳細說明。一般在適宜的鹼和溶劑存在下進行第一步反應。適用的鹼的實例包括氫化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、叔丁醇鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉和碳酸鉀。對這裡適用的溶劑並無特殊限制，只要其不會影響該反應。其實例包括醚，如四氫呋喃、二惡烷和乙醚；醯胺，如二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺和N-甲基-α-吡咯烷酮；烴，如苯、甲苯和二甲苯；醇，如乙醇、丁醇、甲氧基乙醇和乙氧基乙醇；亞碸，如二甲亞碸；酮，如丙酮和甲乙酮。優選在0℃至加熱回流溫度下反應1-48小時。特別優選在室溫下反應8-24小時，其中是將等摩爾量的滷素化合物(3)加入溶於二甲基甲醯胺的羥基苯甲醛(2)中，然後加入基本等摩爾量的碳酸鉀。一般是在適宜的鹼和溶劑存在下反應形成第二步的O-甲基肟。這裡適用的鹼包括三乙胺、吡咯烷、哌啶和吡啶。對這裡適用的溶劑並無特殊限制，只要其不會影響該反應。其實例包括醇，如甲醇和乙醇。吡啶既可用作鹼，也可用作溶劑。優選在0℃至加熱回流溫度下反應1-24小時。特別優選在室溫下反應6-12小時，其中是將等摩爾量的0-甲基羥銨一鹽酸鹽(5)加入溶於吡啶的苯甲醛化合物(4)中。優選在氫氣氛下進行第三步的還原反應，該反應所採用的醇有甲醇或乙醇，加入與醇等量的乙酸溶解其中的肟化合物(6)，然後加入以化合物(6)為基礎計算的5-25重量％的10％載鈀碳。優選在室溫下反應1-24小時。特別優選在室溫下反應1小時，其中加入以在1∶1的乙醇和乙酸的混合溶劑中的肟化合物(6)為基礎計算的20％(重量)的10％載鈀碳。也可採用三氟乙酸基硼氫化鈉〔NaBH3(OCOCF3)〕進行第三步還原反應。特別是將硼氫化鈉懸浮於四氫呋喃中。在懸浮液中加入與硼氫化鈉等摩爾量的三氟乙酸，然後加入相當於硼氫化鈉1/2至1/7的肟化合物(6)，在室溫下反應1-6小時，然後加熱回流1-6小時，從而得到苄胺衍生物(7〕〔可依據「N.Umine等人，藥物化學公報，第26卷，2897(1987)」所述的方法進行該合成〕。在適宜的溶劑中進行第四步反應。對這裡適用的溶劑並無特殊限制，只要其不會影響該反應。其實例包括烴，如苯、甲苯和二甲苯；和醚，如乙醚、四氫呋喃和二惡烷。特別優選在室溫至150℃下反應1-24小時，採用與苄胺衍生物(7)等摩爾量的異氰酸酯(8)，用苯或甲苯作溶劑。製備方法2其中R1至R4的定義如上，X是滷素。如上述的反應方案所示，羥基苯甲醛化合物(2)先與化合物(5)反應(第一步)，得到0-甲基肟衍生物(9)。然後還原化合物(9)得到苄胺衍生物(10)(第二步)。或者也可直接還原羥基苯甲醛化合物(2)得到苄胺衍生物(10)(第三步)。然後，將苄胺衍生物(10)與異氰酸酯(8)反應(第四步)得到脲衍生物(11)。此後將脲衍生物(11)與滷素化合物(3)或醇(3』)反應(第五步)，從而得到本發明的化合物(1)。以下分別對各步驟進行詳細說明。可根據製備方法1的第二步合成法進行製備方法2的第一步合成。同樣可分別根據製備方法1的第三、四、五步的合成來進行本製備方法中的第二步、第四步的合成反應以及第五步的脫氫滷化反應。優選採用如下方法進行第三步反應，其中是將羥基苯甲醛化合物(2)溶於10％的氨水，加入佔化合物(2)重量30％的Raney鎳(W-2)，在35-40℃、氫氛圍下攪拌該混合物12小時。由該方法可直接得到該苄胺衍生物(10)(可依據日本公開特許公報310653/1993所述的方法進行該合成)。優選在常規的Mitsunobu反應條件下採用醇(3』)進行第五步的脫水縮合反應。特別優選在惰性氣氛如氮氣或氬氣存在下進行該反應，其中是將1-2當量的偶氮二羧酸二乙酯和三苯膦用作脫水縮合劑。對這裡適用的溶劑並無特殊限制，只要其不會影響該反應。其實例包括醚，如四氫呋喃和乙醚；滷代烴，如氯仿和二氯甲烷。優選在0-100℃下反應1-24小時。製備方法3其中R1至R4的定義如上，R5是低級烷基。如上述的反應方案所示，滷素化合物(3)先與羥基苯乙酸酯(12)反應(第一步)。所得的化合物(13)經水解(第二步)製備得到羧酸(14)。羧酸(14)與化合物(15)反應得到疊氮化合物(16)(第三步)，然後經Curtius重排得到異氰酸酯(17)(第四步)。然後將異氰酸酯(17)與胺(18)反應(第五步)，從而得到本發明的化合物(1)。以下分別對各步驟進行詳細說明。可根據製備方法1的第一步合成法進行製備方法3的第一步合成。根據常規的水解方法進行第二步的水解反應。更具體地說，其中僅需在1-10N的氫氧化鈉或氫氧化鉀水溶液中進行該反應。有時由於化合物(13)的溶解性問題，還可加入甲醇、乙醇或二惡烷等溶劑。在室溫至100℃下反應0.5-24小時。第三步的疊氮化反應和第四步的Curtius重排可經單釜法反應進行，而無需對反應混合物進行常規的後處理。一般在適宜的鹼和溶劑存在下進行第三步和第四步的反應。對這裡適用的溶劑並無特殊限制，只要其不會影響該反應。其實例包括烴，如苯、甲苯和二甲苯。適用的鹼包括三乙胺、吡咯烷、哌啶、吡啶，其中最優選三乙胺。優選在室溫至加熱回流的溫度下反應0.5-8小時。特別優選在80℃下經攪拌反應1-3小時，其中採用的是溶於甲苯的化合物(15)，它與羧酸(14)等摩爾，並加入1-2當量的三乙胺。第五步反應是由第三步和第四步反應得到的反應混合物所進行的單釜法反應。優選在第五步中採用相當於羧酸(14)1-2當量的氨基化合物(18)。優選在室溫至150℃下反應1-24小時。可根據現有技術中本身已知的方法分離和純化上述反應方案中所得的化合物(1)，例如洗滌、提取、重結晶和/或色譜法。也可經現有技術中本身已知的方法將該化合物(1)轉化為鹽或溶劑化物。由此得到的本發明的化合物(1)可用於防治動脈硬化和各種有關的疾病，例如腦梗塞、暫時性局部缺血、心絞痛、外周血栓和外周閉塞。當將本發明的化合物(1)用作藥物時，僅需將化合物(1)與該
技術領域：
中所熟知的固體或液體載體混合，從而製備出適用於非胃腸給藥、口服給藥或外用的藥物組合物(藥物製劑)。藥物製劑的實例包括液體製劑如注射劑、吸入劑、糖漿和乳劑，固體製劑如片劑、膠囊和顆粒劑，以及外用製劑，如油膏劑和栓劑。如需要，這些製劑中可包含常用的添加劑，如輔料、穩定劑、潤溼劑、乳化劑、表面吸收劑和表面活性劑。添加劑的具體實例包括注射用蒸餾水、林格溶液、葡萄糖、蔗糖漿、明膠、食用油、可可脂、硬脂酸鎂和滑石粉。當本發明的化合物(1)用作動脈硬化的防治藥物時，其劑量根據不同的給藥方法、患者的年齡、體重和病症情況而定。但優選該化合物(1)經口服給藥時，成人所用劑量為0.1-1000mg/天。將通過以下參考實施例、實施例和實驗實施例來進一步說明本發明。但本發明並非僅限於這些實施例。參考實施例13-(4-硝基苄氧基)苄胺的合成將3.783g(0.100mol)硼氫化鈉懸浮於160毫升無水四氫呋喃中，在室溫下向該懸浮液中滴加溶於20毫升無水四氫呋喃的11.402(0.100mol)三氟乙酸溶液。攪拌所得的混合物10分鐘。向該混合物中滴加溶於20毫升無水四氫呋喃的5.726g(0.02mol)0-甲基-3-(4-硝基苄氧基)苯甲醛肟。在室溫下攪拌該混合物3小時，並加熱回流2小時。冷卻該混合物，在冰水混合物冷卻下加入20毫升水，經減壓蒸餾除去溶劑。用氯仿提取殘留物，經減壓蒸餾除去所得的提取物中的溶劑，從而得到粗產品。將粗產品溶於800毫升2N的鹽酸中，用氯仿洗滌該溶液，然後用50％氫氧化鈉進行中和，然後用氯仿提取。經減壓蒸餾除去所得的提取物中的溶劑，從而得到4.234g(產率82％)標題化合物。MS(FAB，Pos.)m/z259(M+1)實施例1將2.58g(10.0mmol)3-(4-硝基苄氧基)苄胺懸浮於110毫升甲苯中，在室溫下向該懸浮液中滴加溶於10毫升甲苯的2.03g(10.0mmol)異氰酸2，6-二異丙基苯基酯溶液。然後將該混合物加熱回流l小時。然後冷卻該混合物，經過濾收集沉積的結晶，用甲苯洗滌，經減壓乾燥，從而得到3.90g(產率84.6％)所需的化合物，1-(2，6-二異丙基苯基)-3-〔3-(4-硝基苄氧基)苄基〕脲(化合物1)，為無色結晶。化合物1的數據見表1。參考實施例21-(2，6-二異丙基苯基)-3-(3-羥基-4-甲氧苄基)脲的合成將600mg(3.92mmol)3-羥基-4-甲氧苄胺和810mg(3.90mmol)異氰酸2，6-二異丙基苯基酯加入40毫升甲苯中，將該混合物加熱回流8小時。冷卻該反應混合物，然後經過濾收集沉積的結晶，用乙醚洗滌並風乾，從而得到1.03g(產率74.1％)所需的化合物結晶。MS(FAB，Pos.)m/z357(M+1)實施例2將270mg(0.758mmol)l-(2，6-二異丙基苯基)-3-(3-羥基-4-甲氧苄基)脲、160mg(0.804mmol)1-溴-3-苯基丙烷以及250mg(1.8lmmol)碳酸鉀加入15毫升二甲基甲醯胺中，在室溫下攪拌該混合物24小時。經減壓蒸餾除去所得的反應混合物中的二甲基甲醯胺，殘餘物溶於氯仿，用水洗滌該溶液，然後用無水硫酸鈉進行乾燥。此後經減壓蒸餾除去該乾燥產品中的氯仿。加入乙醚研磨該沉積結晶，然後經過濾收集，得到263mg(產率、73.3％)所需的化合物，1-(2，6-二異丙基苯基)-3-〔4-甲氧基-3-(3-苯基丙氧基)苄基〕脲(化合物8)，為無色結晶。化合物8的數據見表2。參考實施例34-(4-硝基苄氧基)苯基乙酸的合成將3.15g(10.0mmol)4-(4-硝基苄氧基)苯基乙酸乙酯溶於50毫升甲醇和50毫升1，4-二惡烷的混合溶劑中，然後加入70毫升1N的氫氧化鈉水溶液，將所得的混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，用稀鹽酸酸化該反應混合物，並用氯仿提取。用無水硫酸鈉乾燥所得的提取物。經減壓蒸餾除去氯仿，加入乙醚研磨該沉積結晶，得到2.64g(產率92.0％)所需的化合物，為無色結晶。MS(FAB，Pos.)m/z288(M+1)實施例3向350mg(1.22mmol)4-(4-硝基苄氧基)苯基乙酸、340mg(1.24mmol)二苯基磷醯基疊氮化物和30毫升甲苯的混合物中加入0.50毫升(3.59mmol)三乙胺。將所得的混合物在內溫為80℃下攪拌3小時。然後，向該反應混合物中加入250mg(1.41mmol)2，6-二異丙胺，在相同溫度下攪拌該混合物6小時。冷卻反應混合物，經減壓蒸餾除去反應混合物中的甲苯。將反應混合物溶於氯仿和甲醇的混合溶劑中，用水洗滌，並用無水硫酸鈉乾燥。經減壓蒸餾除去氯仿，在矽膠上對殘留物進行柱色譜純化。減壓濃縮氯仿洗脫餾分，從而得到194mg(產率34.5％)所需的化合物，1-(2，6-二異丙基苯基)-3-〔4-(4-硝基苄氧基)苄基〕脲(化合物17)，為無色結晶。化合物17的數據見表5。實施例4在氮氣氛下，將356mg(1.00mmol)1-(2，6-二異丙基苯基)-3-(4-羥基-3-甲氧基苄基)脲，147mg(1.50mmol)3-呋喃甲醇和393mg(1.50mmol)三苯膦溶於20毫升THF(四氫呋喃)中。在室溫和攪拌下向該溶液中滴加溶於5毫升THF的261mg(1.50mmol)偶氮二羧酸二乙酯。攪拌該混合物4小時，經減壓濃縮反應混合物，在矽膠上對殘留物進行柱色譜純化。減壓濃縮用氯仿-甲醇(100∶1)洗脫的餾分，從而得到409mg(產率93.6％)所需的化合物，1-(2，6-二異丙基苯基)-3-〔4-(3-呋喃甲氧基)-3-甲氧基-苄基〕脲(化合物33)，為無色結晶。化合物33的數據見表9。實施例5將252mg(0.50mmol)1-(2，6-二異丙基苯基)-3-〔3-甲氧基-4-(4-甲氧基羰基苄氧基)苄基〕脲(化合物27)溶於5毫升二惡烷和5毫升甲醇中。然後，在該溶液中加入3毫升1N的氫氧化鈉水溶液，將該混合物在室溫下攪拌4小時。然後用2N鹽酸將反應混合物的pH調節至3-4。經減壓蒸餾除去溶劑，用氯仿提取所得的殘留物。過濾該氯仿提取物，經減壓蒸餾除去濾液中的溶劑，從而得到238mg(產率97.0％)所需的化合物，1-(2，6-二異丙基-苯基)-3-〔4-(4-羧基苄氧基)-3-甲氧苄基〕脲(化合物34)，為無色結晶。化合物34的數據見表9。實施例6-36採用與實施例1、2、3或4類似的方法製備化合物2-7、化合物9-16、化合物18-32以及化合物35和36。上述化合物的數據見表1-10。實驗實施例1測定本發明的化合物(1)的藥理作用。結果如下。i)測定對J774細胞中ACAT的抑制活性將〔14C〕油酸和膽甾醇加入培養液中，從而產生油酸膽甾醇酯，通過對其放射性的測定來測定J774細胞中ACAT的活性。具體地說是將經培養的J774細胞置於含無血清RPMI1640培養基的24F培養板中，從而使1×10-6個細胞/孔。在細胞中加入〔14C〕油酸、脫脂BAS(牛血清白蛋白)、再生核糖體(0.3M葡萄糖溶液，其中含重量比為2∶1的膽甾醇和磷脂醯膽鹼)和25-羥基膽甾醇，在37℃、5％CO2存在下培養細胞4小時。培養完成後，採用1％SDS(十二烷基硫酸鈉)溶液使所培養的細胞破裂，用己烷提取破裂溶液中的脂。減壓使提取液乾燥成固體。經薄層色譜法展開所得的剩餘物(展開溶劑乙醚/己烷/乙酸＝80/20/1)，採用成像板(imagingplate)測定所形成的油酸膽甾醇酯的量。在培養液中加入1％各試樣的DMSO(二甲亞碸)溶液，測定其與DMSO對照組相比，對酶催化活性的抑制率。表11每一被測化合物的濃度均為100nM。(平均值±標準誤差；n＝3)TMP-153〔H.Tawada等人，藥物化學雜誌，37，2079-2084(1994)〕Dup128〔T.P.Maduskuie，Jr等人，藥物化學雜誌，38，1067-1083(1995)〕ii)測定對大鼠肝微粒體中ACAT的抑制活性通過對〔14C〕油酸和內源膽甾醇形成的油酸膽甾醇酯的放射性的測定來測定鼠肝微粒體中ACAT的活性。更具體地說，將〔14C〕油酸-CoA和脫脂BSA加入鼠肝微粒體組分中，在37℃下，反應5分鐘，該鼠肝微粒體組分是採用現有技術中本身已知的方法製備而成的。反應結束後，用己烷提取該反應混合物中的脂，減壓將該提取物乾燥成固體。用TLC將所得的剩餘物展開(展開溶劑乙醚/己烷/乙酸＝80/20/1)，採用成像板測定所形成的油酸膽甾醇酯的量。向反應混合物中以1％的量加入各試樣的DMSO(二甲亞碸)溶液，測定其與DMSO對照組相比的對酶活性的抑制率。表12每一被測化合物的濃度均為100nM。(平均值±標準誤差；n＝3)由試驗i)和ii)的結果表明，本發明的化合物(1)對大鼠的類巨噬細胞(macrophage-likecell)中的ACAT的抑制活性比對肝微粒體中ACAT的抑制活性強。這表明本發明的化合物可直接降低膽甾醇酯在動脈壁上的沉積和貯存，從而能預防動脈粥樣硬化損害的形成和發展。因此，該化合物可用於防治動脈硬化，以及各種有關的疾病，例如，腦梗塞、暫時性局部缺血、心絞痛、外周血栓和外周閉塞。權利要求1.一種取代苄脲衍生物或其鹽，如以下通式(1)所示其中R1和R2彼此相同或不同，分別為氫原子或滷原子、或烷基或烷氧基，R3是可以被取代的苯基或雜環基團，n是1-6的整數，R4是可以被取代的苯基。2.權利要求1的取代苄脲衍生物或其鹽，其中在通式(1)中，R1和R2彼此相同或不同，分別為氫原子、滷原子、C1-6的直鏈或支鏈烷基、或C1-6的直鏈或支鏈烷氧基，R3是苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、咪唑基、噻唑基、三唑基、惡唑基、異惡唑基、吲哚基、喹啉基或異喹啉基，它可被1-3個取代基取代，所述取代基選自滷原子、滷代C1-6烷基、直鏈或支鏈的C1-6烷氧基、氨基、單C1-6烷基氨基或二-C1-6烷基氨基、羥基、C7-16芳烷氧基、亞甲基二氧基、氰基、苯甲醯基、C1-6鏈烷醯基、氨基甲醯基、羧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷醯氧基、硝基、磺酸基、磺醯氨基、巰基、C1-6烷硫基、C1-6烷基磺醯基、C1-6的直鏈或支鏈烷基、C1-6烷醯氨基、苯甲醯氨基、羥基-C1-6烷基、羧基-C1-6烷基、羧基-C1-6烷氧基、和C2-6鏈烯基，R4是苯基，它可被1-3個取代基取代，所述取代基選自滷原子、滷代C1-6的烷基、直鏈或支鏈的C1-6烷氧基、氨基、單C1-6烷基氨基或二-C1-6烷基氨基、羥基、C7-16芳烷氧基、亞甲基二氧基、氰基、苯甲醯基、C1-6鏈烷醯基、氨基甲醯基、羧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷醯氧基、硝基、磺酸基、磺醯氨基、巰基、C1-6烷硫基、C1-6烷基磺醯基、C1-6的直鏈或支鏈烷基、C1-6烷醯氨基、苯甲醯氨基、羥基-C1-6烷基、羧基-C1-6烷基、羧基-C1-6烷氧基、和C2-6鏈烯基。3.一種藥物，含有權利要求1或2的取代苄脲衍生物或其鹽用作活性成分。4.權利要求3的藥物，它是一種防治動脈硬化的藥物。5.一種藥物組合物，該組合物包含權利要求1或2的取代苄脲衍生物或其鹽以及一種可藥用載體。6.將權利要求1或2的取代苄脲衍生物或其鹽用作藥物的用途。7.一種防治動脈硬化的方法，該方法包括向人類或哺乳動物施用有效量的權利要求1或2的取代苄脲衍生物或其鹽。全文摘要公開了一種取代苄脲衍生物或其鹽,如以下通式(1)所示:其中R文檔編號C07D333/16GK1181377SQ9712155公開日1998年5月13日申請日期1997年10月29日優先權日1996年10月30日發明者金丸喜彥,廣田浩之,柴田晶弘,甲本照夫,內藤博之,橘公一,大真理,石井二三夫,佐藤進申請人:愛斯製藥株式會社