趕黃草用於酒精性肝病茶劑的製備方法

2023-04-24 23:32:56

專利名稱：：趕黃草用於酒精性肝病茶劑的製備方法
技術領域：
：本發明屬於藥品及保健品領域，具體涉及趕黃草茶劑的製備方法及其在治療酒精性肝病中的用途。
背景技術：
：趕黃草又名扯根菜、水澤蘭、山珍珠等，據《天寶本草》、《救荒本草》等記載，趕黃草具有通絡活血、祛瘀除溼、活血散瘀等作用。據中國藥品標準WS3-B-2526-97所公開的肝蘇顆粒是以趕黃草為原料製備而得，其製備方法如下取扯根菜lOOOg，切碎，加水煎煮三次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度1.151.18(6065°C)的清膏，冷卻，加乙醇使含醇量達60%，攪拌，靜置，濾過，沉澱用60%乙醇洗滌三次，合併洗液與濾液，回收乙醇並濃縮成相對密度為1.301.32的稠膏，加適量蔗糖及澱粉，混勻，制顆粒，乾燥，製成540g，即得。功能主治為降酶、保肝、退黃、健脾。用於慢性活動性肝炎、B型肝炎，也可用於急性病毒性肝炎。現已有用趕黃草製備的製劑有顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、糖漿劑、口服液劑型。本發明人已於2008年11月6日申請了涉及趕黃草的專利，
專利名稱：為趕黃草提取物的新用途，申請號=200810305398.4。本次發明的趕黃草茶劑的製備方法與之前公開的顆粒劑、片劑、口服液、膠囊劑、丸劑、糖漿劑有本質的差異。本次發明的趕黃草茶劑系將趕黃草藥材直接切成小段或粉碎後加或不加輔料製成的茶劑，加入開水浸泡或煎煮後服用，而上述其他劑型均是將趕黃草藥材採用加水煎煮三次，每次2小時並用乙醇醇沉後再回收乙醇二次濃縮得浸膏，根據不同劑型的需要再採用各劑型需要的工藝製備成不同的製劑。如顆粒劑、膠囊劑需要將浸膏乾燥後制粒或制粒後乾燥；口服液也需要高溫滅菌等。不同的製備工藝製備出來的成品在療效上有很大的差異。本發明的目的是將趕黃草製成適宜的劑型，既能避免製備工藝不當導致有效成分大量損失或降解，又能方便病人使用，同時還能提高生物利用度。而通過將趕黃草製成茶劑，則完全解決了上述問題，為了進一步說明將趕黃草製備成茶劑的合理性，我們進行了以下研究工作。1、我們比較了將趕黃草製備成不同劑型後，其中的有效成分含量差異。其中茶劑為直接加開水浸泡，口服液和顆粒劑則按照中國藥品標準WS3-B-2526-97所公開的提取方法製備，試驗結果見表1。表1茶劑水溶液與口服液、顆粒劑中有效成分的比較時間I劑型含量(槲皮素/生藥)茶劑(水溶液)Oio0月口服液0.098tableseeoriginaldocumentpage4結論由以上試驗結果可見，相同生藥量的趕黃草製劑中，茶劑中槲皮素含量最高，其次為口服液，最低為顆粒劑。茶劑有效成分含量最高在於避免了長時間高溫煎煮、濃縮等工藝對其的影響，而口服液含量高於顆粒劑的原因在於其減少了乾燥成型這一環節，受熱時間比顆粒劑更短，因此含量略高於顆粒劑。2、為進一步驗證高溫對槲皮素的影響，我們考察了滅菌時間對口服液中槲皮素的影響，試驗結果見表2.表2滅菌時間對口服液性狀及槲皮素含量的影響tableseeoriginaldocumentpage4100°C30分鐘~~棕色液體04324Γ5結論由上述試驗結果可見，滅菌時間對口服液中槲皮素的含量影響較大，隨著滅菌時間的延長，槲皮素持續下降。3、我們還比較了不同劑型製劑在長期放置過程中有效成分的變化，口服液為力思特製藥公司製備，顆粒劑為市售肝蘇顆粒，試驗結果見表3。表3顆粒劑與口服液長期穩定性考察中有效成分的比較tableseeoriginaldocumentpage4結論由上述試驗結果可見，以趕黃草藥材製成的固體製劑(以顆粒劑為代表)和液體製劑(以口服液為代表)，在儲存過程中，槲皮素在固體製劑中的下降率(5個月下降13.2%)遠遠低於在液體製劑中的下降率(5個月下降46.7%)，說明槲皮素在水溶液中極不穩定。4、由上述3項試驗結果可見，趕黃草中的藥效成分槲皮素對高溫極不穩定，在水溶液中的長期穩定性也較差，因此現在公開的採用加水煎煮3次，每次2小時的提取工藝值得商榷，我們分析認為製備為茶劑應該是趕黃草藥材的最佳選擇。按中國藥典規定，茶劑分為3種，分別為塊狀茶劑、袋裝茶劑、煎煮茶劑，其中塊狀茶劑和袋裝茶劑均為泡水服用，而煎煮茶劑則需加水煎煮後服用。我們考察了煎煮時間對槲皮素的影響，考察結果見表4。、表4浸泡溫度和煎煮時間對藥液中槲皮素含量的影響tableseeoriginaldocumentpage5總結由上述試驗結果分析，隨著煎煮時間的延長，藥液種槲皮素含量越來越低，煎煮2小時與煎煮1小時比較，含量下降了一半。因此我們確定趕黃草煎煮茶劑的煎煮時間為每次1小時。5、趕黃草不同劑型優缺點的比較根據各劑型的特點對不同劑型趕黃草製劑優缺點進行比較，見表5。表5趕黃草不同製劑優缺點比較"1製備方法穩定性生物利用度切斷或粉碎後加或不加輔料製成塊狀麗S茶劑、袋裝茶劑、煎煮茶劑，省略了長時間多次煎煮、除雜和濃縮步驟，有利於藥效成分的保留顆粒劑需進行長時間多次煎煮、除雜和濃縮麗S步驟，藥效成分的損失較大膠囊劑、片劑需進行長時間多次煎煮、除雜和濃縮麗藥物在體有一個崩^步驟，藥效成分的損失較大解、溶解、過程，生物利用度略低。口服液、糖漿劑需進行長時間多次煎煮、除雜和濃縮WmS步驟，藥效成分的損失較大結論茶劑無論是製備工藝、穩定性還是生物利用度，相比其他劑型都有較大優勢。
發明內容本發明所解決的技術問題是提供趕黃草茶劑的製備方法及用途。具體地，是趕黃草茶劑的製備及其治療酒精性肝病的藥物中的用途，其中，該茶劑是由下述幾種方法製備而得A塊狀茶劑可製備為不含糖塊狀茶劑和含糖塊狀茶劑。不含糖塊狀茶劑以趕黃草藥材粗粉、碎片與茶葉或適宜的黏合劑壓製成塊狀的茶劑；含糖塊狀茶劑以趕黃草提取物、趕黃草細粉與蔗糖等輔料壓製成塊狀的茶劑。B袋裝茶劑以茶葉、趕黃草粗粉或部分趕黃草藥材粗粉吸取藥材提取液經乾燥後，裝入袋的茶劑，可裝入飲用茶袋作為袋泡茶劑。C煎煮茶劑以趕黃草藥材加工成段、絲或粗粉後，裝入袋供煎服的茶劑。煎煮方法加水煮沸，每次1小時。發明人通過對趕黃草茶劑對酒精性肝病治療作用的考察發現趕黃草茶劑對CCl4肝損傷模型和酒精肝損傷模型小鼠有治療作用，可明顯降低小鼠血清中ALT、AST，同時也可降低CCl4和酒精對肝細胞造成的損失，故趕黃草茶劑對酒精性肝病具有治療作用。顯然，根據本發明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的範圍僅限於以下的實例。凡基於本發明上述內容所實現的技術均屬於本發明的範圍。具體實施例方式以下通過趕黃草茶劑對酒精性肝病的治療作用的臨床前研究來說明本發明的有益效果。1實驗材料1.1試劑與藥品四氯化碳上海試一化學試劑有限公司；乙醇成都長聯化工試劑有限公司；聯苯雙酯浙江萬邦藥業有限公司；ALT/AST測試盒上海榮盛生物技術有限公司。1.2動物昆明種健康小鼠，體重(20士2g)，由四川省實驗動物專委會養殖場提供。1.3方法1.3.1受試藥品的製備趕黃草茶劑的製備取趕黃草1000g，切段，製成茶劑水溶液，用凍幹機冷凍升華製成相對密度1.301.32的稠膏，即得。趕黃草口服液的製備取趕黃草lOOOg，加水煎煮三次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度1.051.20的清膏，冷卻，加乙醇使含醇量達5075%，攪拌，靜置，濾過，沉澱用5075%乙醇洗滌三次，合併洗液與濾液，回收乙醇並濃縮成相對密度為1.301.32的稠膏，即得。1.3.2趕黃草提取物對CCl4誘導的小鼠肝損傷的作用小鼠正常飼養2d，隨機分成正常對照組、CCl4模型組、趕黃草茶劑低劑量組(8.35g生藥/kg)、趕黃草茶劑中劑量組(16.7g生藥/kg)、趕黃草茶劑高劑量組(25.05g生藥/kg)，趕黃草口服液低劑量組(8.35g生藥/kg)、趕黃草口服液中劑量組(16.7g生藥/kg)、趕黃草口服液高劑量組(25.05g生藥/kg)，每組10隻。除正常組外其餘各組小鼠腹腔注射0.CCl4花生油溶液10ml/kg，正常組小鼠同時腹腔注射等容積生理鹽水，首次造模Ih後給藥。各給藥組均以0.2ml/10g(體重)等容積灌胃給藥，正常對照組給予等容積蒸餾水。連續給藥第5天後進行第二次造模，方法同前。各組術次造模後15h再次給藥，給藥後Ih眼眶取血，分離血清。用ALT/AST測試盒測定ALT、AST。結果趕黃草茶劑和趕黃草口服液低、中、高劑量均可使小鼠CCl4肝損傷血清ALT、AST升高的水平降低，與模型組比較有極顯著性差異，其中趕黃草茶劑的效果優於趕黃草口服液。結果見表6。表6趕黃草茶劑對小鼠四氯化碳肝損傷血清轉氨酶的影響tableseeoriginaldocumentpage71.3.3趕黃草茶劑對50%乙醇誘導的小鼠酒精肝損傷的作用小鼠正常飼養2d，隨機分成正常對照組、酒精模型組(50%乙醇)、趕黃草茶劑低劑量組(8.35g生藥/kg)、趕黃草茶劑中劑量組(16.7g生藥/kg)、趕黃草茶劑高劑量組(25.05g生藥/kg)，趕黃草口服液低劑量組(8.35g生藥/kg)、趕黃草口服液中劑量組(16.7g生藥/kg)、趕黃草口服液高劑量組(25.05g生藥/kg)，各給藥組均以0.2ml/10g(體重)灌胃+0.25ml50%乙醇，正常對照組灌胃給予等容積蒸餾水，酒精模型組igO.25ml50%乙醇+0.2ml/10g(體重)蒸餾水，共10d。末次給藥後禁食16h，稱重，摘除眼球缺血，分離血清，測定ALT、AST；同時，頸椎脫臼處死小鼠，立即破腹取肝臟，用生理鹽水衝洗乾淨，取肝臟左葉相同部位，用10%福馬林溶液固定，石蠟包埋，HE染色，作病理檢查。結果普通光鏡檢查正常對照組肝細胞切片具有正常的多邊形細胞形狀和結構，胞漿豐富，細胞核圓形，肝小葉類圓形；酒精組病理切片見肝細胞明顯腫脹，細胞內可見數量較多而不等、大小不一的脂肪滴，細胞核由於脂肪滴的擠壓而偏向細胞邊緣，肝小葉中央呈現片狀或點狀壞死；酒精加趕黃草口服液及茶劑組切片見肝細胞有腫脹現象，亦有脂肪滴，但腫脹程度及脂肪滴空泡程度明顯比酒精組輕，肝細胞脂肪變較輕，脂肪滴小，偶然也可見到少量的肝小葉中央點狀壞死。電鏡檢查觀察正常對照組切片中，肝細胞胞質內含豐富的細胞器和包含物，核膜清晰而規則，核仁大而明顯，電子密度均勻，線粒體形狀正常，胞質內無脂肪滴沉積，粗面內質網分布規律；酒精組肝細胞切片，體積腫大，細胞核邊緣不規則，核仁不顯，線粒體明顯腫脹，其粗面內質網明顯擴張，出現斷裂，胞質內可見到多量大小不一的脂肪滴沉積；酒精加趕黃草口服液及茶劑組肝細胞較規則，細胞核仁清晰，有少量的線粒體出現腫脹變形，粗面內質網未見明顯的擴張和斷裂，少見細胞質內脂肪滴沉積。趕黃草茶劑低、中、高劑量均可使小鼠酒精肝損傷血清ALT、AST升高的水平降低。與模型組比較有極顯著差異。結果見表7。表7趕黃草茶劑對小鼠50%乙醇誘導小鼠肝損傷血清轉氨酶的影響tableseeoriginaldocumentpage81.3.4結論本實驗結果顯示趕黃草茶劑和趕黃草口服液對CCl4肝損傷模型和酒精肝損傷模型小鼠均有保護作用，有明顯的降低小鼠血清中ALT、AST的作用，同時也可降低CCl4和酒精對肝細胞造成的損傷。從試驗數據分析，趕黃草茶劑的效果優於趕黃草口服液，分析是趕黃草茶劑藥液中槲皮素含量高於趕黃草口服液的原因所致，由此也說明趕黃草製備成茶劑能取得更好的藥效。權利要求本發明公開了趕黃草茶劑的製備方法及其在治療酒精性肝病的藥物中的用途，其特徵在於所屬趕黃草茶劑是由以下方法製備而得A塊狀茶劑可製備為不含糖塊狀茶劑和含糖塊狀茶劑。不含糖塊狀茶劑以趕黃草藥材粗粉、碎片與茶葉或適宜的黏合劑壓製成塊狀的茶劑；含糖塊狀茶劑以趕黃草提取物、趕黃草細粉與蔗糖等輔料壓製成塊狀的茶劑。B袋裝茶劑以茶葉、趕黃草粗粉或部分趕黃草藥材粗粉吸取藥材提取液經乾燥後，裝入袋的茶劑，可裝入飲用茶袋作為袋泡茶劑。C煎煮茶劑以趕黃草藥材加工成段、絲或粗粉後，裝入袋供煎服的茶劑，煎煮方法加水煮沸，每次1小時。全文摘要本發明屬於藥品及保健品領域，具體涉及趕黃草用於酒精性肝病的新製備方法。該新製備方法是將趕黃草製成茶劑用於治療酒精性肝病，該茶劑對酒精性肝病有明確的治療作用。文檔編號A61K9/00GK101829165SQ201010165639公開日2010年9月15日申請日期2010年5月7日優先權日2010年5月7日發明者張蕊申請人:張蕊