Age抑制劑的製作方法

2023-05-14 12:59:56 2

專利名稱：：Age抑制劑的製作方法AGE抑制劑美M反應(Maillardreaction)，非SHMt基化，通過蛋白質中M基團與含有g基團的化合物(一般為糖)的縮合而引發。被稱作"高級糖基化終產物"(advancedglycationend-products,AGE)的4艮多產物由這一複雜過程的後期階段形成。這些AGE形成的結果是蛋白質交聯。這樣的交聯已在長壽蛋白質中觀察到，比如^^、、晶狀體晶體蛋白、纖維連接蛋白、微管蛋白、髓磷脂、層粘連蛋白、肌動蛋白、血紅蛋白、白蛋白和與低密度脂蛋白(LDL)相關的脂質。AGE修飾蛋白隨年齡而日益增加，並JLA們相信它們有助於正常組織重塑。此外，AGE增加的形成和累積已與下述疾病的發生相關白內障(Nagaraj等，/.祝o/.C7^附.(1996)271，19338)，尿毒症(Miyata等，^V/"^;/"t(1999)55，389)，動脈粥樣硬化(Kume等，J附./屍"幼o/.(1995)147，654;Stitt等，Mo/.M^/.(1997)3,617),阿爾茲海默氏病(Miinch等，祝oc/^附.7>Yms.(2003)31(6),1397;L(ith等，Ofr^"/(2005)15(2)，211)，帕金森氏症(Webster等，A^wratoac一(2005)/(172),95)，炎症性疾病(Anderson等,/CW".//ive釔(1999)104,103)，年齡相關的風溼病以及最重要的是糖尿病臨床併發症(Brownlee,M.J/im.Wev.AfW(1995)461，223;Brinkmann等，/說》/C7ie附.(1998)273,18714)。血糖升高並持續的糖尿病患者中交聯蛋白質水平升高，這通過對涉及蛋白質的結構和功能的修飾而導致組織損傷。此夕卜，AGE與膜受體結合併刺激細胞應答。由於美拉德在上世紀初的發現，人們已相信葡萄糖是參與交聯反應的糖。然而，更近些時候，人們已將注意力集中到a-二羰基化合物作為體內和體外的活性交聯劑，例如甲基乙二醛(methyglyoxal，MG)、乙二醛(glyoxal,GO)和3-去氧葡糖醛酮(3-deoxyglucosone，3-DG)。人們相信MG的主要來源是丙糖_磷酸二羥l^g^I(dihydroxyacetonephosphate)^"H"^J^國3-^^(glyceraldehyde-3畫phosphate)的非S^1去磷酸化，它們都是葡萄糖代謝物。MG也可通過磷酸丙糖的自發分解或通過蘇氨酸或丙酮的代謝而形成。一些研究也證實了通過葡萄糖自氧化而產生a-二羰基。人們相信a-二羰基可在酮胺轉化期間形成，所述酮胺即所謂的Amadori產物，其為美拉德反應中的關鍵中間體。此酮胺自身通過Schiff鹼加合物的轉化而形成，所述Schiff鹼在葡萄糖與胺的>^應期間最先形成。此外，有才艮道細菌產生MG。多不飽和脂肪酸的脂質過氧化也產生活性lt&化合物，例如MG和GO以及那些特徵性的脂質，比如丙二趁(MDA)和4-羥基壬烯醛。一般而言，這些高活性二羰基結合蛋白質的氨基、胍基和巰基並且不可逆地形成AGE比如羧乙基)賴氨酸(CEL)、iVHl-羧甲基)賴氨酸(CML)、來源於甲基乙二醛的氫咪唑酮7VH5-氫-5-甲基-4-咪唑酮-2-基)-鳥氨酸(MG-HD、來源於乙二醛的氫咪唑酮(G^H0、精氨嘧啶(argpyrimidine)、來源於乙二醛的賴氨酸二聚體1，3-二(A^-賴氨醯)咪唑鹽(GOLD)、以及來源於甲基乙二醛的賴氨酸二聚體1，3-二(A^-賴氨醯)-4-甲基咪唑鹽(MOLD)。人們已努力地研究了這些二g化合物的體內作用機制，以理解有機體內美拉德反應的進程。在糖尿病對象中，發生AGE形成和積累的增加，因此導致一系列糖尿病的長期併發症，比如腎病、視網膜病、神經病、潰瘍以及^6r管和大血管併發症(Bucala等，Z)/W"^J^We將(1995)3,258;Ulrich等，T^ce"f^WTfi.(2001)56，1;Porta等，Z)/"6"r/^/fl(2002)45，1617;Lorenzi等，"/fl6e似/og/fl(2001)44,791;Ziegler等,及ev.TV^/fY^/o/.(2002)50,451;Thornallay,P.J.iev.7V^ira6/o/.(2002)50,37;Chiarelli等，ZWfl6.7Vw化M"flA.(2000)13,192)。更特別地，由AGE引起的腎組織損傷導致腎功能的進行性損失(MakitaZ.等，TV./M^/.(1991)325，836)。實際上，在糖尿病患者(1型和2型)中，曱基乙二醛的血漿濃度證實為正常對象的2至6倍(McLellan等，C7/化5W.(1994)87,21)。氧化應fcl與衰老和慢性疾病的當前標準相關的另一個因素，所述慢性疾病例如糖尿病、動脈粥樣石更化和相關的血管疾病、類風溼多關節炎和尿毒症。氧化應激被定義為在抗氧化劑和氧化劑形成系統間的顯著失衡。氧化應急的增加可對脂蛋白的修飾和轉錄、以及細胞的功能和代謝產生深遠的影響。氧化應激可通過幾種與氧自由基過度產生相關的機制產生，例如葡萄糖和糖化蛋白的自氧化以及抗氧化酶的糖基化。實際上，已報導在糖基化反應中MG產生活性氧(ROS)(自由基)。因此，可以說氧化應激和AGE形成不可分離地結合在一起。通常，乙二醛酶系統(乙二醛酶i和乙二醛酶n)和醛糖還原酶催化這些a-二氣基解毒成D-乳酸、乙醇酸和丙酮醇。然而，這種解毒代謝的功能紊亂導致機體中高活性oc-二g導所形成的AGE量增加。AGE形成的抑制可延緩AGE相關疾病的病理生理學進程並改善衰老期間的生活質量。因此可設想在防止糖尿病併發症中對ot-二g化合物的藥理學清除是一種有價值的治療策略。存在大量文獻與這種事實相關抗交聯之長期後果的早期藥理幹預阻止糖尿病晚期併發症的iO艮。即使AGE形成抑制劑不能治癒其背後的病理學過程，它們應該延緩由基礎病症導致的併發症的t艮。在專門開發的作為AGE形成抑制劑的藥物中，JL^胍(匹馬吉定，AG)是研究最多和應用最多的藥物。AG是一種具有兩個關鍵活性官能團的親核化合物，所述兩個關鍵活性官能團即親核性肼官能團畫NH2NH2和a-二l^導向的胍官能團隱NH-C(-NH)NH2的。這兩種官能團結合在一起共同形成活性雙官能團的甲基乙二醛、乙二醛和3-脫氧葡糖醛酮(desoxyglucosone)的清除劑(Brownlee等，5We"ce(1986)232,1629)。儘管AG抗糖尿病併發症的有益效果已在糖尿病大鼠模型中被大量證實，但AG是一種公知的一氧化氮(NO)選擇性抑制劑，由於安全性的關係，與通過AG防止糖尿病性腎病進程相關的臨床試驗,i(J故棄(Oturai等，vlPM/51(1996)104,259;Monnier,V.M.JrW.5/oc/^附.祝o//^s.(2003)419，1)。吡哆胺(吡啶酮)是另一種能防止糖尿病大鼠併發症的試劑，其比氨基胍更有效且其能清除脂質過氧化產物和a-二羰基化合物(Metz等，J/r/wV^5zVc/^/w/s^ja/idB/o^/y^/cs(2003)419，41)。二甲雙胍，一種廣泛用於2型糖尿病控制的降糖藥，也通過形成三氮雜萆酮而在體內和體外降低甲基乙二醛和乙二醛的水平(Beisswenger等，M^"6.(2003)29,6895)。然而，與二甲雙胍相比，AG被證明是一種好得多(450倍)的甲基乙二醛清除劑(Battah等，/"^vi.Omgra^1245(2002)355)。其它具有AGE形成抑制活性的化合物包括D-青黴胺(WondrakGet等，說》c/ie附.屍/mf7M""/.(2002)63,361)、LR隱卯、亞甲基-雙(4,4'-(2-氯苯基脲基苯氧基異丁酸))(methylenebis(4，4，-(2-chlorophenylureidophenoxy畫isobutyricacid)))(Rahbar等，Jfc/r.忍/o/;^);51.(2003)419，63)、硫胺素(苯磷石克胺)(Stracke等，/五a:/;.C7/".EmfecT/"o/."/"&tes(2001)109,330)、肌肽(p-丙氨醯-L-組氨酸)，一種廣泛分布於哺乳動物組織中的天然二肽(Hipkiss.A.R.,/.所oc/^附.07/(1998)30,863)、薑黃素(Sajithlal如，Gfi/od^附.」P/ifl簡flco/.(1998)56,1607)，另一種從薑黃(CWcwiw"/ortg")中分離出的天然化合物，2，3-二^Jj^噢(NNC39-0028)(Soulis等，ZW"^to/^Z"(1999)42，472)。考慮到AGE對衰老期間生活質量的顯著影響，需要開發能清除高活性oc-二a^化合物如甲基乙二醛、乙二醛和3-脫氧葡糖醛酮並具有低細胞毒性和低致突變性的有效試劑。本發明人已令人驚奇地發現一類新化合物，其能通過清除活性oc-二羰基化合物而抑制高^t基化終產物的形成。這些化合物中的一些本身是已知的但並不了解其治療應用。因此，專利申請W002/100344公開了合成中間體formulaseeoriginaldocumentpage16Jones等人的文章(r"n^M/wi丄欲ew(1988),29(31)，3856-3856頁)公開了合成中間體formulaseeoriginaldocumentpage16和formulaseeoriginaldocumentpage16;Kasina等人的文章(/<ow/7ifl/C7^附/Wfj(1986)，29(10),1933-1940頁)公開了合成中間體formulaseeoriginaldocumentpage16Tada等人的文章(/(9w艦/0/々nVM/似n1"Mrfi^VwrfC/re附/s外(1984),32(5),992-996頁)公開了式I的肽的味道，其中R2代表氳原子，X代表C=0,代表畫NH-(CH2)mCOOH且m=1、2或3;Shinoda等人的文章(T^/;ftVfeC7^附/s^j(1984)volumedate1983,21st，43-46頁)公開了具有鹹味的肽有專利申請WO2004/002418公開了式的肽及其治療應用。不過，此文件未指出此肽是AGE抑制劑。此外，與由發明人發現的那些化合物類似的衍生物，特別是2,3-二氨基丙酸(DAPA)，已在專利申請(WO92/14456)中公開。DAPA對鳥氨自羧酶的脫g作用非常敏感，所述鳥氨酸脫羧酶為普遍存在的酶，其參與大量多胺的合成，形成乙二胺和/或2-氣基乙醯胺。為有助於經由尿來消除oc-二g化合物和清除劑的縮合產物，所述清除劑分子中存在酸官能團例如-COOH或S03H是必不可少的。否則，縮合產物將通過腎小管重吸收機制而保留在循環中，而具有通過另一個代謝反應釋放a-二lt基的風險。從鳥氨酸脫羧酶代謝的觀點看，由本申請的發明人所發現的化合物能用作通過形成在尿中消除的加合物而清除活性a-二羰基化合物比如甲基乙二醛、乙二醛和3-脫氧葡糖醛酮的比DAPA更有效的藥物。實際上，DAPA阻止胰島素被MG修飾，如圖1所示。然而，圖7表明，當與根據本發明的化合物L-DAPA-L-Val(93%)、L-DAPA-L-Leu(81%)和L-DAPA-L-Ile(79%)相比時，DAPA毒性更高且其保護細胞的有效性更低(當與MG共孵育時68。/o的細胞存活)。此外，DAPA似乎有致突變性。因此，本發明涉及以下通式I的化合物或其藥學可接受的加成鹽、其異構體、對應異構體和非對映異構體以及其混合物其中X^表CH2、C=0、C-S或CHOH，R代表^J^酸，任選地被一個或多個卣原子(優選氟)、或被一個或多個CFs基團所取代，且11=0、l或2或者X代表CH2、C=0、C二S或CHOH，&代表含有兩個胺基酸的肽，每個JL^酸任選地被一個或多個卣原子(優選氟)、或被一個或多個CF3基團取代，且11=0或1或者XR代表P03H或S03H且n=0、1或2;R2代表H、XRpd-C6烷基、d-C6芳烷基或芳基，所述烷基、芳烷基和芳基能被氨基(NH2)、羧基(COOH)、一個或多個滷原子(優選氟)、或一個或多個CF3基團取代；下述化合物除外-其中R2代表氫原子，X代表C=0，A代表-NH-(CH2)m-COOH且m=l、2或3且n-0、l或2;-由以下各式所代表的化合物formulaseeoriginaldocumentpage19以及化合物L-鳥氨醯-牛磺酸、L-二氨基丁醯-牛磺酸和L-二氨基丙醯-牛磺酸。就本發明而言，術語"d-C6烷基"意指1到6個碳原子的直鏈或支鏈的任何烷基。特別地，其可涉及曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。就本發明而言，術語"芳基"指一個或多個5至8個碳原子的芳香環，其可能鄰接或稠合。特別地，所述芳基可為苯基或萘基，優選苯基。就本發明而言，術語"芳烷基"指任何如上定義的芳基，其與如上定義的烷基連接。特別地，苯甲基是芳烷基。就本發明而言，化合物的"藥學可接受的加成鹽，，意指任何藥學可接受的並具有母體化合物所期望之藥理學活性的鹽。這樣的鹽包括(1)由無機酸形成的酸加成鹽，所述無機酸比如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或由有機酸形成的酸加成鹽，所述有機酸比如乙酸、笨晴酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡庚糖酸(l'acideglucoheptonique)、葡糖酸、穀氨酸、羥基乙酸、羥基萘甲酸、2-羥基乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、曱磺酸、粘康酸、2-萘磺酸、丙酸、7JC楊酸、琥珀酸、二苯甲g-L-酒石酸、酒石酸、對甲笨璜酸、三甲基乙酸、三氟乙酸等；或(2)當存在於母體化合物中的子被金屬離子代替或與有機或無M配位而形成的鹽，所述金屬離子例如鹼金屬離子、鹼土金屬離子或鋁離子。可接受的有機鹼包括二乙醇胺、乙醇胺、N-甲基葡糖胺、三乙醇胺、三羥甲基氨基甲烷等。可接受的無機喊包括氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉和氫氧化鈉。優選的藥學可接受的鹽是由鹽酸、三氟乙酸、二苯甲醯基-L-酒石酸和磷酸形成的鹽。應當理解，所有提及的藥學可接受鹽包括給定酸加成鹽的如本文中所定義的溶劑加成形式(溶劑化物)或結晶形式(多晶型)。式I的C-l位置(在NH2和X基團連接處的碳原子)的立體化學可為及或S或其混合物。C-2位置(在NH2和R2基團連接處的碳原子)的立體化學可為i或或其混合物。就本發明而言，"氣基酸"意指所有的D或L構型的天然a-氣基酸殘基(例如丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、天冬醯胺(Asn)、天冬氨酸(Asp)、半胱氨酸(Cys)、穀氨醯胺(Gln)、穀氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、組氨酸(His)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、賴氨酸(Lys)、曱硫氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、脯氨酸(Pro)、絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和纈氨酸(Val),以及非天然胺基酸(例如p-丙氨酸、烯丙基甘氨酸、叔-亮氨酸、正亮氨酸(Nle)、3-氨基-己二酸、2-氨基苯甲酸、3-氨基苯甲酸、4-氨基苯甲酸、2-氨基丁酸、4-M-l-羧甲基哌啶、1-M-l-環丁烷羧酸、4-氨基環己烷乙酸、l-^J^l-環己烷羧酸、(1R,2R)-2-氨基環己烷羧酸、(1R,2S)-2-氨基環己烷羧酸、(1S,2R)-2-氨基環己烷羧酸、(1S，2S)-2-氨基環己烷羧酸、3-氨基環己烷羧酸、4-氨基環己烷羧酸、(1R,2R)-2-氛基環戊烷羧酸、(1R，2S)-2-氨基環戊烷羧酸、1-#^-1-環戊烷羧酸、l-氨基-l-環丙烷羧酸、4-(2-氨基乙氧基)-苯甲酸、3-氨基甲基苯甲酸、4-氨基甲基苯曱酸、2-氨基丁酸、4-絲丁酸、6-氨基己酸、l-氨基茚滿-l-羧酸、4-氨基曱基-苯乙酸、4-氨基苯乙酸、3-M-2-萘甲酸、4-M苯基丁酸、4-#^-5-(3-丐|咮基)-戊酸、(4R,5S)-4-絲-5-甲基庚酸、(R)-4-M-5-曱基己酸、(R)-4-絲-6-甲l^克代己酸、(S)-4-絲-戊酸、(R)-4-絲-5隱苯基戊酸、4-氨基苯基丙酸、(R)畫4-氨基pimericacid(l'acide(R)-4國aminopim6rique)、(4R,5R)-4國^^-5-羥基己酸、(R)-4-^-5-羥基戊酸、(R)-4-iJ^5-(對羥基苯基)-戊酸、8-氨基辛酸、(2S,411)-4-#^-吡咯烷-2-羧酸、(2S,4S)-4-^J^-吡咯烷-2-羧酸、氮雜環丁烷-2-羧酸、(2S，4R)-4-千基-吡咯烷-2-羧酸、(S)-4，8-二氨基辛酸、叔丁基甘氨酸、Y-^i^氨酸、P~環己基丙氨酸、瓜氨酸(lacitruline)、2,3-二氨基丙酸、馬尿酸、高環己基丙氨酸、lamoleucine、高苯丙氨酸、4-羥基脯氨酸、二氫吲咮--羧酸、哌咬-4-曱酸、oc-曱基-丙氨酸、哌咬-3-曱酸、正纈氨酸、八氫吲咮-2-羧酸、鳥氨酸、青黴胺、苯基甘氨酸(Phg)、4-苯基-吡咯烷-2-羧酸、p底咬曱酸、炔丙基甘氨酸、3-他咬基丙氨酸、4-他咬基丙氨酸、l-吡咯烷-3-羧酸、肌氨酸、他汀類(thestatines)、四氫異喹啉-l-羧酸、1，2，3,4-四氫異會啉-3-羧酸、氨甲環酸、4，4-二氟脯氨酸、4-氟脯氨酸、oc-(3,4-二氟節基)-脯氨酸、Y-(3，4-二氟苄基)-脯氨酸、oc-(三氟甲基)苯丙氨酸、六氟亮氨酸、5，5，5-三氟亮氨酸、6,6,6-三氟正亮氨酸、2-(三氟甲基)亮氨酸、2-(三氟甲基)正亮氨酸、4,4，4-三氟纈氨酸、4,4,4,4，,4',4'-六氟纈氨酸、五氟苯丙氨酸、2,3-二氟苯丙氨酸、2，4-二氟苯丙氨酸、2，5-二氟苯丙氨酸、2，6-二氟苯丙氨酸、3,4-二氟苯丙氨酸、3，5-二氟苯丙氨酸、3，3-二氟-3-(4-氟苯基)丙氨酸、2,3-二氟苯基甘氨酸、2,4-二氟苯基甘氨酸、2,5-二氟苯基甘氨酸、3,4-二氟苯基甘氨酸、4,4-二氟乙基甘氨酸、4，4，4-三氟乙基甘氨酸和六氟正亮氨酸)。此術語還包括攜帶常規JL^保護基(例如乙醯基、叔丁氧羰基、苄氧g或9-芴基甲基氣基)的天然和非天然胺基酸，以M氛基端保護的(優選地以d-ds烷基、酯、苯基醯胺或爺基醯胺或醯胺保護，其分別給出下式的^&末端-CO(d國ds烷基)、畫COO(d畫Cw烷基)、-CONH苯基、CONH千基或CONH2)天然和非天然氛基酸。優選地，根據本發明的胺基酸具有未保護的g末端。有利地，根據本發明的胺基酸具有以Crds烷基酯(-COO(d-ds烷基))、優選以d3-ds烷基酯(-COO(C『d8烷基))保護的J^末端。有利地，所述M酸通過N末端與式I化合物的X基團相連。有利地，由此形成的鍵如下-X-NH-R，其中R代表M酸分子的其餘部分。有利地，根據本發明的M酸被一個或多個滷原子(Br、Cl、I或F)取代，所述卣原子優選氟，或被一個或多個CF3基團取代。有利地，這種取代出現在胺基酸的烷基或芳基部分。甚至更有利地，氮原子不被取代。以卣原子特別是以氟原子或以CF3基團取代的主要優點涉及所得化合物的生物利用度，特別是提高其細胞膜滲透作用和結合特性。有利地，JL^酸選自丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、(5-丙氨酸、正亮氨酸、天冬氨酸、賴氨酸或叔亮氨酸，優選選自丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、正亮氨酸或叔亮氨酸。有利地，苯丙氨酸的苯基被一個或多個滷原子所取代，有利地被氟取代，或被一個或多個CF3基團取代，有利地在對位取代，其次在鄰位或間位取代。有利地，正亮氨酸的丁基被一個或多個卣原子所取代，有利地被氟取代，或被一個或多個CF3基團取代。就本發明而言，術語"CVds烷基"意為1至18個碳原子的直鏈或支鏈的任何烷基。特別地，其可涉及曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。就本發明而言，術語"含有兩個氛基酸的肽"意為如下定義的兩個胺基酸的或肽醯殘基的任意序列。所述序列可為線型或環狀的。例如，環狀肽可從序列中兩個半胱氨酸殘基之間形成二硫橋製備或得到。有利地，所述肽通過N末端連接到式I化合物的其餘部分。可通過本領域中已知的任何常規方法(在溶液中或固相中)製備肽衍生物，例如在以下實施例中所描述的方法。在本申請中具體描述的肽序列按照氨基端在左而羧基端在右進行書寫。有利地，所述肽選自Ala-Gly、Ala-Ala、Ala-Pro或Ala-Val，優選選自L誦Ala-Gly、L國Ala-L-Ala、L-Ala畫L畫Pro或L-Ala-L-Val。有利地，根據本發明的化合物是X代表C-O、CH2或C-S的化合物。有利地，根據本發明的化合物是R2代表H或XRi並優選XRi的化合物。在一個具體實施方案中，根據本發明的化合物是&代表胺基酸的化合物，所述M酸有利地選自丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、苯丙氨酸或叔亮氨酸。有利地，根據本發明的化合物是X為C-O，！^0且Ri為丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、正亮氨酸、苯丙氨酸或叔亮氨酸的化合物。有利地，根據本發明的化合物是R2為XR!或H且n=0的化合物。在本發明另一個具體實施方案中，根據本發明的化合物表示為以下通式n、或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物其中:Ri代表國NH-R3-(C二0)R4或，其中R3代表-d-Cu烷基，有利地為d-C6烷基，任選地被一個或多個選自下述的基團取代滷原子(優選氟)、《F3基團、苯基、苯酚、-COOH、氨基或者被一個或多個卣原子(優選氟)或一個或多個CF3基團取代的苯基；-苯基，任選地被氨基、OH基、一個或多個卣原子(優選氟)、或一個或多個CFg基團取代；R4代表OH、NH2、CVC3o烷絲，有利地為d-C2o烷氧基；R2代表H、CORi或d-C6烷基，其任選地被一個或多個卣原子(優選氟)或一個或多個CFs基團取代；n=0、l或2;Y代表氧或硫原子，有利地為氧原子。就本發明而言，術語"d-d2烷基"意為1至12個碳原子的直鏈或支鏈的任何烷基。特別地，其可涉及甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。術語"d-C別烷氧基"意為任何-O-R基團，其中R為如本文中所定義的d-Cso烷基基團。烷氧基基團的實例包括但不限於甲氡基、乙氡基、異丙氡基等。有利地，根據本發明的化合物為n-O的化合物。有利地，RfH或COR^在一個具體實施方案中，根據本發明的化合物選自以下各式的化合物、或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物formulaseeoriginaldocumentpage24formulaseeoriginaldocumentpage25formulaseeoriginaldocumentpage25formulaseeoriginaldocumentpage25formulaseeoriginaldocumentpage25formulaseeoriginaldocumentpage25formulaseeoriginaldocumentpage25本發明還涉及根據本發明的化合物在防止食物中蛋白質變質中的用途。所述的食物可以是動物或植物來源的。根據本發明的化合物以有效量被施加到所述食物中以防止其中所含蛋白質的變質和降解。這樣的應用增加了食物能被消費和儲存的時間並保持其營養和感官上的品質。此外，本發明涉及包含根據本發明的化合物和藥物或化妝品可接受之載體的藥物或化妝品組合物。本發明涉及用作藥物的以下通式I的化合物、或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物H2N+R2人其中X代表CH2、C=0、C-S或CHOH，！^代表^J^酸，任選地被一個或多個離原子(優選氟)、或被一個或多個CF3基團所取代，且11=0、l或2或X代表CH2、C=0、C-S或CHOH，R!代表含有兩個胺基酸的肽，每個Jl^酸任選地被一個或多個卣原子(優選氟)、或被一個或多個CF3基團取代，且11=0或1或XRi代表P03H或S03H且n=0、1或2;R2代表H、XRpC廣C6烷基、d-C6芳烷基或芳基，所述烷基、芳烷基和芳基能被^J^(NH2)、g(COOH)、一個或多個滷原子(優選氟)、或一個或多個CF3基團所取代；外formulaseeoriginaldocumentpage27但化合物U""2除外。有利地，用作藥物的根據本發明的化合物表示為以下通式n、或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物formulaseeoriginaldocumentpage27其中:COIR,Ri代表NH-R3-(C-0)R4或，其中R3代表-d-Cu烷基，有利地為d-C6烷基，任選地被一個或多個選自下述的基團取代卣原子(優選氟)、-CF3、苯基、苯酚、-COOH、^或者被一個或多個卣原子(優選氟)或一個或多個CF3基團取代的苯基;-苯基，任選地被M、OH基、一個或多個卣原子(優選氟)、或一個或多個CF3基團所取代；和R4代表OH、NH2、d國C3o烷lLio有利地為C廣C2o烷^J^;R2代表H、CORi或d-C6烷基，其任選地被一個或多個卣原子(優選氟)或一個或多個CF3基團取代；n=0、l或2;Y代表氧或硫原子，有利地為氧原子。有利地，用作藥物的根據本發明的化合物選自以下各式的化合物、或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物formulaseeoriginaldocumentpage28formulaseeoriginaldocumentpage29formulaseeoriginaldocumentpage30在一個具體實施方案中，根據本發明的藥物是活性g化合物的清除劑，有利地為高^t基化終產物形成的抑制劑。有利地，根據本發明的藥物是用於預防和/或治療由於高,基化終產物形成或由於蛋白質交聯而導致的疾病或狀態，用於預防和/或治療機體衰老的有害效應，所述效應是高,基化終產物的形成或蛋白質的交聯，或用於減緩或停止患者中由糖尿病導致的併發症的逸艮，所述併發症產生於高Wt基化終產物的形成或蛋白質的交聯。有利地，根據本發明的藥物意在治療、預防和/或減緩患者中選自以下疾病的*:類風溼性多關節炎、阿爾茲海默氏病、尿毒症、神經退4亍性疾病、動脈粥樣硬化、糖尿病的微血管併發症和大血管併發症包括糖尿病性視網膜病和由糖尿病性腎病引起的腎衰竭、孩bk管病變和大血管病變、白內障、與透析或阿爾茲海默氏病相關的澱粉樣變性、帕金森氏病、牙齦炎、齲齒(lescaries)、口腔-牙齒病症、糖尿病性潰瘍、慢性腎衰竭、慢性腎透析、炎性疾病、年齡相關的風溼性疾病和卟啉病，以及意在治療早期癌症。甚至更有利地，根據本發明的藥物通過口服途徑施用。此外，本發明涉及如上所定義的通式I或n的化合物在製備清除活性g化合物的藥物中的用途，所述清除活性g化合物的藥物有利地是高,基化終產物形成的抑制劑，有利地用於-預防和/或治療由於高級糖基化終產物形成或由於蛋白質交聯而產生的狀態或疾病，預防和/或治療機體衰老的有害效應，所述效應為高,基化終產物形成或蛋白質交聯，或用於減緩或阻止患者中由糖尿病產生的併發症的逸艮，所述併發症產生於高^t基化終產物的形成或蛋白質的交聯；-治療、預防和/或減緩患者中選自以下的疾病的逸艮類風溼性多關節炎、阿爾茲海默氏病、尿毒症、神經退行性疾病、動脈粥樣硬化、糖尿病的微血管併發症和大血管併發症包括糖尿病性視網膜病和由糖尿病性腎病引起的腎衰竭、孩bk管病變和大血管病變、白內障、與透析或阿爾茲海默氏病相關的澱粉樣變性、帕金森氏病、牙齦炎、齲齒(lescaries)、口腔-牙齒病症、糖尿病性潰瘍、慢性腎衰竭、慢性腎透析、炎性疾病、年齡相關的風溼性疾病和卟啉病，以及治療早期癌症。本發明還涉及用於預防和/或治療由於高級糖基化終產物形成或由於蛋白質交聯而產生的病狀或疾病的方法，用於預防和/或治療機體衰老的有害效應的方法，所述效應為高^u^^化終產物形成或蛋白質交聯，或用於減緩或停止患者中由糖尿病產生的併發症的選艮的方法，所述併發症是由於高M基化終產物的形成或由於蛋白質的交聯；用於治療、預防和/或減緩患者中選自以下的疾病的逸艮的方法類風溼性多關節炎、阿爾茲海默氏病、尿毒症、神經退行性疾病、動脈粥樣硬化、糖尿病的#管併發症和大血管併發症包括糖尿病性視網膜病和由糖尿病性腎病引起的腎衰竭、微血管病變和大血管病變、白內障、與透析或阿爾茲海默氏病相關的澱粉樣變性、帕金森氏病、牙齦炎、齲齒(lescaries)、口腔-牙齒病症、糖尿病性潰瘍、慢性腎衰竭、慢性腎透析、炎性疾病、年齡相關的風溼性疾病和卟啉病，以及用於治療早期癌症的方法；所述方法包括給需要此治療的患者施用有效量的如上定義的根據本發明的通式I或II的化合物。因此，本發明涉及包含根據本發明之化合物的藥物或藥物組合物。所述組合物或藥物可被配製以施用於哺乳動物，包括人。劑量根據治療和待治療的疾病而變化。所述組合物或藥物以適於通過消化道或胃腸外途徑施用的方式提供。在用於口服、舌下、皮下、肌肉、靜脈、透皮、局部或直腸給藥的本發明的藥物組合物或藥物中，活性成分可以以與常規藥物載體混合的單位劑型給動物或人拖用。合適的單位劑型包括用於口服給藥的形式，例如片劑、明皿嚢、粉末、顆粒和口服溶液或混懸液，舌下和口含給藥形式，皮下、肌肉、靜脈、鼻內、眼內或直腸給藥形式。當以片劑形式製備固體組合物或藥物時，主要活性成分與藥物載體比如明膠、澱粉、乳糖、硬脂酸鎂、滑石、或阿拉伯膠等混合。可用蔗糖或其他適合的材料對片劑進行包衣，或者可以處理片劑，以便其具有延長的或延遲的活性且其持續地釋放預定量的活性成分。明皿嚢形式的製劑是通過將活性成分與稀釋劑混合併將所得混合物灌裝到軟或硬明膠膠嚢中而得到。糖漿或酏劑形式的製劑可含有活性成分以及甜朱劑和防腐劑、以及調味劑和提供合適顏色的試劑。水可分歉的粉末或顆粒可含有與介軟劑、潤溼劑或助懸劑、以及矯p未劑或增甜劑相混合的活性成分。使用栓劑用於直腸給藥，所述栓劑使用在直腸溫度下熔融的粘合劑製備，所述粘合劑例如可可脂或聚乙二醇。對於胃腸外、鼻內或眼內給藥而言，合適的製劑包括含有藥物相容的*劑和/或潤溼劑的水性混懸液、等張鹽溶液或無菌注射溶液。活性成分還可以配製成微膠嚢形式，任選地與一種或多種載體添加劑一起配製。活性成分也可通過局部途徑施用。本發明還涉及根據本發明的化合物作為用於表皮和乳頭真皮(dermepapillaire)的抗衰老和重塑活性成分和/或作為抗皺活性成分的化妝品用途。根據本發明的化合物對皮膚具有收斂作用(effettenseur)。其可通過口月良或局部途徑施用。根據本發明的化妝品或藥物組合物可配製成通過局部途徑施用。其可以以通常用於此種施用的形式來提供，即尤其是洗劑、泡沫、皿、體、噴劑、香波、血清、面膜、護膚乳或霜(bodymilkorcream),例如與賦形劑一起使得尤其可滲透皮膚從而改善活性成分的性質和可達到性。所述形式可為單相介質，其包含中性羥丙基纖維素凝膠或包含羧甲基纖維素鈉凝膠。也可以製備骨霜和包含*在親脂相中親水相的兩相介質。除了根據本發明的組合物以外，這樣的組合物或藥物通常包含生理可接受的介質，例如所述介質通常含有水或醇、醚或二元醇等溶劑。其也可包含化妝品或藥學可接受的賦形劑。這樣的賦形劑可選自表現出與活性成分有適合的相容性的化合物。這樣的賦形劑的實例包括天然的7jC溶性聚合物比如多糖(黃原膠、角豆樹膠、果膠peptine等)或多肽，纖維素衍生物比如甲基纖維素、羥丙基纖維素和羥丙基曱基纖維素，以及合成聚合物、泊洛沙姆、卡波姆、PVA或PVP。最後，本領域技術人員可選擇向此化妝品或藥物組合物中添加各種共溶劑輔料比如乙醇、甘油、千醇，保溼劑(甘油)，擴散劑(卡必醇、尿素)或抗菌防腐劑(0.15%對羥基苯甲酸甲酯)。所述組合物還可包含表面活性劑、穩定劑、乳化劑、增稠劑、提供補充或可能的協同作用的其它活性成分、微量元素、精油、芳香物、著色劑、膠原、化學或礦物濾料、水化劑或溫泉水。本發明還涉及通過應用含有根據本發明化合物的組合物而用於對皮膚進行化妝品抗衰老處理的方法。在本申請中使用的縮略語如下DAPA-2，3-二^J^丙酸，DABA=2，3-二氨基丁酸(無相反i兌明)或2，4-二氨基丁酸，DASA-二^^琥珀酸，EDC=1-[3-(二曱基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽，HOBt=1-羥基苯並三唑水合物、Boc-叔丁氧^1^、TFA-三氟乙酸、THF-四氫呋喃。參考附圖，將更好地理解本發明，其中圖1顯示根據本發明的二鹽酸鹽形式的二氣基清除劑的作用比較以及與DAPA對通過甲基乙二醛(MG)修飾胰島素(Ins)的作用的比較。在二羰基清除劑存在或不存在的情況下，與甲基乙二醛共孵育後胰島素的百分數被標出。在二^l&清除劑(4.08mM)存在下，將胰島素(0.034mM)在體外於10mM的pH7.45的磷酸鹽緩沖液(含有0.1MNaCl)中與甲基乙二醛(3.4mM);37匸孵育21小時。通過HPLC(與圖3中相同的條件)測定胰島素濃度。圖2顯示現有技術中的二羰基清除劑對通過甲基乙二搭修飾胰島素的作用比較。實驗^與圖1中描述的M相同。標有星號(*)的化合物是以鹽酸鹽的形式使用的。圖3顯示根據本發明的兩個化合物L-DAPA-L-Leu(實施例1)和L-DAPA-L-Val(實施例23)對於由甲基乙二搭誘發的胰島素修飾作用通過HPLC所得的結果。可以觀察到這些修"飾被阻止。HPLC條件如下C-18,Symmetry300(4.6x250mm)柱，>^應混合物進樣體積100流速1ml/分鐘；溫度40'C;溶劑A:水+0.1%TFA;溶劑B:60/40CH3CN/H20+0.1%TFA;線性梯度為15分鐘內由50°/。B至55%B;檢測UV215nm:PDA(在220nm提取的色鐠圖)。圖4顯示根據本發明的兩個化合物L-DAPA-L-Leu(實施例1)和L-DAPA-L-Val(實施例23)對於由甲基乙二搭誘發的促生長素抑制素-14修飾作用通過HPLC所得的結果。HPLC條件如下C-18，Symmetry300(4.6x250mm)柱，>^應混合物進樣體積100pi;1ml/分鐘；溶劑A:水+0.:r/oTFA;溶劑B:80/20CH3CN/H20+0.1%TFA;線性梯度15分鐘內由20。/。B至60。/。B並在60。/。B恆定10分鐘；室溫；檢領'J:PDA(在215nm提取的色鐠圖)。根據本發明的化合物阻止由曱基乙二搭誘發的修飾。在該圖中，(a)代表單獨促生長素抑制素-14的結果；(b)代表促生長素抑制素-14+甲基乙二醛的結果；(c)代表促生長素抑制素-14+甲基乙二醛+L-DAPA-L-Val(實施例23)的結果；(d)代表促生長素抑制素-14+甲基乙二醛+L-DAPA-L-Leu(實施例1)的結果。為獲得這些結果，在有或無(a)甲基乙二搭(3.6mM)、在根據本發明的化合物(4.3mM)存在((c)和(d))或不存在(b)的情況下，將促生長素抑制素-14(0.03mM)在體外於10mMpH7.45含0.1MNaCl的磷酸鹽緩衝液中在37"C孵育24小時。圖5顯示根據本發明的三個化合物L-DAPA-L-Ile(實施例18)、L-DAPA-L-Val(實施例23)和L-DAPA-L-Leu(實施例1)對於由甲基乙二醛誘發的RNA酶A修飾作用通過HPLC所得的結果。HPLC條件如下C-18，Symmetry300(4.6x250mm)柱，稀釋到1/10後的反應混合物進樣體積100jU;流速lml/分鐘；溫度40'C;溶劑A:水+0.1。/oTFA;溶劑B:60/40CH3CN/H20+0.1%TFA;線性梯度20分鐘內由20%B至80%B;檢測UV215nm:PDA(在215nm提取色譜圖)。根據本發明的化合物阻止對核糖核酸酶A的修飾。在該圖中(a)代表RNA酶A的結果；(b)代表冊入酶入+甲基乙二醛的結果；(c)代表RNA酶A十曱基乙二醛+L-DAPA-L-Ile(實施例18)的結果；(d)代表RNA酶A+甲基乙二醛+L-DAPA-L-Val(實施例23)的結果；(e)代表RNA酶A+曱基乙二醛+L-DAPA-L-Leu(實施例l)的結果。為獲得這些結果，在有或無(a)甲基乙二醛(32mM)、在根據本發明的化合物(38mM)存在((c)、(d)和(e))或不存在(b)情況下，將RNA酶A(0.08mM)在體外於100mMpH7.45磷酸鹽緩衝液中於37X:孵育21小時。圖6和圖7代表在有或無甲基乙二醛(MG)下，在根據本發明的化合物和根據現有技術的化合物(特別是Jl^胍(AG)和二氨基丙酸(DAPA))存在下EA內皮細胞的生長。根據本發明的化合物的通用製備方法包括步驟(a)，或步驟(a)和(b),或步驟(a)、(b)和(c),或步驟(a)和(d)，或步驟(a)、(d)和(e),所述步驟如下-a)將M酸或肽烷基酯與N-保護的二胺基酸(例如DAPA、DABA、DASA、Orn或Lys，根據n的值)在有機溶劑中偶聯，所述有機溶劑有利地為二氯曱烷，有利地通過^f吏用形成活性酯的試劑比如EDC和HOBt，有利地在室溫下攪拌進行；-b)步驟(a)中所得烷基酯的鹼水解，有利地使用LiOH，有利地在溶劑THF/MeOH/H20、MeOH/H20或H20中進行，然後酸化，有利地以pH5的KHS04水性溶液進行以獲得純酸；-c)步驟(b)中所得酸的N-保護基團的脫保護和揮發性成分的除去，所述脫保護有利地使用3MHCl-二氧六環(或THF)進行；國d)通過向步驟(a)所得肽中加入Lawesson，s試劑製備石危代醯胺，有利地在惰性氣氛下進行，以及加熱2小時，所述加熱有利地在80t:進行；-e)通過低溫下有利地在O"C加入在有機溶劑(優選二氯甲烷)中的TFA，使在步驟(d)中得到的以二-Boc、叔丁基酯保護的硫代醯胺脫保護。在一個有利的實施方案中，才艮據本發明的化合物可才艮據下述的方法製備，即實施步驟(l)、或步驟(1)和(2)、或步驟(l)、(2)和(3)、或步驟(1)和(4)、或步驟(l)、(4)和(5)。1.]\-保護羧酸和~^,基酯的偶^應向適當N-保護(優選以Boc基團保護)的二胺基酸(例如DAPA、DABA、DASA、Orn或Lys)(1.0mmol)和^J^J^基酯(1.1mmol)的二氯甲烷溶液(5.0ml)中加入形成活性酯的試劑(例如EDC(1.2mmol)和HOBt(1.1mmol))，並將反應混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並以EtOAc萃取7JC相。依次以INHC1、H20、飽和NaHC03和鹽水洗滌合併有機層，以Na2S04乾燥，然後過濾。減壓下蒸發溶劑然後將殘留物以快速柱色鐠純化以得到二肽。2.烷基酯的鹼水解在室溫下向烷基酯(l.Ommol)在THF/MeOH/H20或MeOH/H20的溶液中加入鹼溶液(優選1.0mmolLiOH)。然後攪拌反應混合物直到所有的起始酯都已消失(約過夜)。以pH5的KHS04水溶液酸化反應混合物，然後以有機溶劑(優選CH2Cl2)萃取。乾燥有機相(Na2S04)，然後減壓下蒸發以得到粗酸，其不經過進一步純化直接用於以下反應中。3.N-保護基團的脫保護在室溫下將N-保護的二肽羧酸(1mmol)的3MHCl-二氧六環(或THF)溶液攪拌3至9小時。通過蒸發除去揮發性成分以得到二肽鹽酸鹽。4.硫代醯胺的製備在室溫下於氬氣氛中向上述二肽(步驟1)(2.0mmol)的甲苯(10ml)溶液中一次全部加入Lawesson，s試劑(1.1mmol)。在80n攪拌反應混合物兩小時。通過減壓蒸發除去溶劑。殘留物通過M柱色鐠(CH2Cl2然後10/1CH2Cl2/Et20)純化以得到相應的石克代酖胺。5.以二-Boc、叔丁基酯保護的硫代醯胺的脫保護在0t:向以二-Boc保護的硫代醯膝&丁基酯(1mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入TFA(5ml);將所得溶液在0t:保存過夜。通過蒸發除去揮發性成分以得到三氟乙酸鹽形式的二硫代肽(dithi叩eptide)。以下實施例作為非限制性舉例說明給出。以下根據本發明的化合物通過實施上述方法而製備。實施例1:L-DAPA-L-Leu.2HCl4NMR(300顧z,CD3OD)S4,37(t,■/=5,8Hz,1H),4,30(dd,J=9,4,5，6Hz，IH)，3,45(dd,/=13,9'6,0Hz,IH)，3,34(dd,13，9,5,3Hz,1H),1,64~1,49(m,3H),0,78(d，/=6,4Hz,3H)，6,74(d,J=6,4Hz,3H);13CNMR(75MHz,CD3OD)S176,6，167，3，53,0,51,7,41,4，40,6，26,1,23，4,21,5;MS(ESI)m/z28[M+Hf;HRMS根據<:91120]\303(M+H)的計算值218.1505;實測值218.1512。[cc]D26+3，41(cl,0,6NHCl)實施例2:L-DAPA-D-Leu.2HCl問d22+7，8(cl'0H20)[a]D26+39,59(c1,0，6NHC1)工HNMR(300MHz.CD3OD)34,38(dd,/=5,0'6,7Hz,IH),4,30(t,/=7,8Hz,IH)'3,60-3,43(m，2H),1,67-1,56(m,3H),0,86(d,J-6,0Hz,3H),0'83(d,J=6，0Hz，3H);13CNMR(75MHz,D20)S175,9,166,0,52,3,50,7,39,6,39,1,24,5,22,0,20,9;MS(ESI),"/z218[M+H]+;HRMS根據6,2Hz，1H),3,36(d，J=5,9Hz,2H),1,78-1,62(m'3H)，0,98(d，J-6，lHz，3H),0，95(d,J-6,1Hz,3H);13CNMR(62,5MHz,D20)3176,6,166,8,52,6,51,1，40,3,39'7,25,1,22,7，21,1;MS(ESQm/z218[M+HJ+,240[M+Na]十；HRMS根據<:911201\303(M+H)的計算值218.1505;實測值218.1512，根據C9H19N303Na(M+Na)的計算值240.1324;實測值240.1364。實施例4:L-DAPA-L-LeuOMe.2TFA[a]D+3,8(cl'2,MeOH);&NMR(300MHz,CD3OD)S4,55(t'/-7,4Hz,1H),4,42(t，J=5,9Hz,1H),3,75(s，3H),3，52(d，/=5，9Hz，2H),1,81-1,61(m，3H),0,95(d,/=6,8Hz,3H),0,93(d》6,6Hz，3H);13CNMR(62,5MHz,CD3OD)5175,0，167,4>53,4,52,8,51，9，41,3,40,9，25,9，23,3,21，6;MS(ESI)w/z232(M+H]+,254[M+Na]+;HRMS根據d。H22N303(M+H)的計算值232-1661;實測值232.1660。實施例5:L-DAPA-L-LeuOMe.2HCl工HNMR(300MHz,CD3OD)64,46(dd,/-7,7,5，6Hz,1H),4,44(t,J=4'9Hz,IH)，3,67(s，3H),3,48(d,J-5，6Hz,2H),1,75-1,55(m，3H),0,89(d,/=6,4Hz,3H)，0,86(d,/=6，4Hz,3H);13CNMR(75MHz,CD3OD)S175,0,167,1，53,4，52,9,51,8,41,《40，8，26,0，23,3'21,6;MS(ESI)m/z232[M+H〗+;HRMS根據C1H22N303(M+H)的計算值232.1661;實測值232.1660。〖a]D24+6'2(cO，7,MeOH)實施例6:L-DAPA-L-IleNH7.2HCl[q:〗d+25(c0,5,MeOH);&NMR:(300MHz,CD3OD)54,59(dd,J"-7'0,5,5Hz,1H)>4,37(d，7=5,5Hz,IH)，3,57(dd,J-13,4,5,5Hz,1H),3,36(dd,13,4，7,2Hz，1H),2,01-1,91(m,1H),1,58-1,47(m'1H),1,44-1,28(m,IH)，1,05(d;J=6,8Hz,3H),0,95(t,J-7,4Hz,3H);13C賺(62,5MHz,CD卿S176,3,167,6，60,6，51,3,41,2,37,8,25,5,16,3,12,0;MS(ESI)"i/z217[M+H〗+>239[M+Na]+;HRMS#4tC9H21N402(M+H)的計算值217.1665;實測值217.1674，根據C9H2。N402Na(M+Na)的計算值239.1484;實測值239.1499。實施例7:D-DAPA-D-Leu.2HCl工HNMR(300MHz,D20)S4,38-4,31(m，2H),'3,50-3,34(m，2H),1,62-1,50(m:3H)，0,79(d,/=6,4Hz,3H),0,75(d,6,4Hz,3H).〖a]D-ll,7(cl，0,H2O)MS(ESI)加々218[M+H]+;240[M+Na〗+;HRMS根據0,MeOH);[a]D26-6，I5(cl,0，6NHCl)^NMR(300MHz，D20)S4,53(q，J-7,'4Hz,1H),4,48&J=6,0Hz，1H),3,64(d,■/=6,0Hz,2H),1,50(d，/=7,4Hz,3H);13C證(75MHz,D20)5176,7,166,5,51,2,49,9,40,3，16,6;MS(ESI)176[M+H]+;分析計算C6HI5N303C12:C,29,05;H,6，09;N，16，94;C，28,58;實測值C,28,67;H，6,24;N，16,67;CI,27,64。實施例9:L-DAPA-L-Ala.2HCl工fi麗(300MHz,D20)S4,51(q,7,5Hz,IH)，4,46(t，7=6,0Hz,1H):3,62(d,J=6,0Hz,2H),1,49(d,/=7,5Hz，3H);13CNMR(75MHz，D20)S176,8，166，5，51,2，49,9，40,3'16,6;MS(ESI)/k/z176[M+H]+;HRMS根據C6HmN3C)3(M+H)的計算值176.1035;實測值176.1037〖cx]d26+7,83(c1,0,6NHC1)實施例10:L-DAPA-D-Ala.2HCl10^NMR(300MHz,D20)54,33-4,24(m,2H),3,50-3,39(m,2H),1'41(d,■7=7,4Hz,3H);13CNMR(75MHz,D20)5176,0,166,0，50,9,49,5'39,8,16，3;MS(ESI)m/z176[M+H]+;HRMS根據C6H"N303(M+H)的計算值176.1035;實測值176.1044。[a]D26+M,56(c1,0'6NHCI)實施例11:D-DAPA-L-Ala.2HCl.COOH工HNMR(300MHz,D20)54,49-4,4〗(m，2H)，3,68-3,54(m,2H)，1,49(d，7=7,3Hz,13C賺(75MHz,D20)S176,4,166,3'51,3,49,8，40,1,16,6;MS(ESI)w/zl76[M+H]+;HRMS#4^C6H14N303(M+H)的計算值176.1035;實測值176.1043。[ot]D26-60，9(cl,0，6NHCl)實施例12:qy,35>DAPA-L-Leu.2HCl工HNMR(300MHz,D20)54,34(t,/=7,2Hz，IH)'4,22(d'J=4,2Hz'1H),3,87(dq,</=4,2，7,2他，1H),1,58-1,56(m'3H),1'34(d,/=6,8Hz,3H),0,79(d,/=6，0Hz,3H),.0,76(d,J-6,0Hz,3H);13C證(75MHz，D20)S175，9，165,6，54，4,52,0,47,9，39,0，24,3'，22,0，20,5,14，0;MS(ESI)"i/z232[M+H]+;HRMS+MtC1H22N303(M+H)的計算值232.1661;實測值232.1663。[oc]D22+9，6(c0,2,H20)實施例13:L-DAPA-Glv-OC^H^2HCl工flNMR(300MHz,CD3OD)54,44(t，J=5，8Hz,1H),4，20(t,■/=6,7Hz,2H),4,17,4,07(ABq,17,8Hz，2H),3,53(d,/=5,8Hz,2H)，1,73-1,64(m，2H)，1,43-1,30(m，26H),0，91(t,■/=6,7Hz,3H);13C賺(75MHz,CD3OD)5171,6,167,5,67,0,51,9，42,3，41,2,33,1，30,8,30,7,30,5，30,4,29,7;MS(ESI)w/2386[M+Hf;HRMS根據98(c0,5，MeOH)實施例14:L-DAPA-L-Leu-OCi6Hw2HCl工HNMR(300MHz，CD3OD)S4,34-4,28(m,2H),4,01-3,86(m,2H),3,41-3,29(m'2H),1,61-1,39(m'5H),1,164,05(m，26H),0'76(d，/=6,4Hz,3H),0，72(d,J=6,4Hz,3H),0,66(t,/=6,7Hz，3H);13CNMR(75MHz,CD3OD)S174,6，167,2,67,2，53,0，51,8，41，4,40，9，33,2,30,9,30,6,30,6，30,6，30,4，29,7,27,0,26,1,23,8,23，4,21,8,14,6;MS(ESI)ffi/z442[M+H〗+;HRMS#4&C25H52N303(M+H)的計算值442.4009;實測值441.3983。[oc]d26+13，1(c2,0>MeOH)實施例15:L-DAPA-L-QLeu.2TFA:&NMR(300MHz,D20)S4'79(dd,J=9,3，5,4Hz,m)'4,56(t，J=6,4Hz,1H),3,48(4d,/=13,8,5,8Hz,1H),3,41(dd,/=13，8,6,6Hz,1H),1,79-1,53(m,3H),0,81(d，/=6,4Hz'3H),0,77'(d,J=6,4Hz,3H);13C證(62,5MHz,D20)S194,5，174,9，58,0,54，6,41,5，38,8,24，7，22,0:—;MS(ESI)m/z234[M+H〗+;HRMS根據82(d,/=6,4Hz,3H)，0,78(d,7=6，2Hz,3H);13CNMR(62,5MHz,D20)5194,5，174,8'57,9,54,6,41,5,38,8,24,7，22,0，20,7;MS(ESI)w/z234[M+H]+;HRMS根據C9H2oN302S的計算值234.1276;實測值234.1306[cc〗d26+90,6(c1,0,MeOH)實施例17:L-DAPA-Glv.2HCl17工HNMR(300MHz,D20)S4,54(t,5,8Hz,IH)，4,20(d,/=18,0Hz,1H),4,10(d,18,0Hz'1H),3,65(d,/-5,8Hz，1H);13C證(75MHz,D20)S173,1,166,5，50,5，41，6，39，5;MS(ESI)m々162[M+H〗+HRMS根據CsHuN303(M+H)的計算值162.0879;實測值162.0864。[ot]D25+28(cl,8,H20)實施例18:L-DAPA-L-Ile.2HCl^麗(300MHz,D20)54,52(t，J=5,9Hz,1H);4,46(d,/=4,9Hz，1H);3,60(d,/=5，9Hz，2H);2,05(m，1H);1，45(m,1H);1,27(m,1H);0>97(d，J=6>9Hz,3H);0,90(t,/=7，3Hz,3H);13CNMR(62,5MHz,D20)5175,5,166,8，58,8,51,1,40,3，37,0,25,3,15,7,11,6;MS(JESI)m/z28〖M+H],240,Naf;HRMS根據(:9112(^303的計算值218.1505;實測值218.1537。[a]D26+22,4(c1，2,H20)實施例19:L-DAPA-(3-Ala.2HCl2HC1，n■19丄HNMR(300MHz,CD3OD)S4,40(t,5，8Hz，1H),3,54(m，'4H);2,64(m,2H);13CNMR(62,5MHz,CD3OD)3174,0,166,6,52,1，41,1,36,9,34,2;MS(ESI)w/z176[M+Hf;HRMS4M)IC6H14N303(M+H)的計算值176.1035;實測值176.1068。[cc]D26+3,8(c0'5,H20)實施例20:D-DAPA-B-Ala.2HClformulaseeoriginaldocumentpage46NMR(300MHz,CD3OD)S4,40(t，/=5,8Hz,1H)，3，54(m，4H>;2，64(m,13CNMR(62,5MHz,CD3OD)S174,0,166,6,52,1,41,1,36,9，34,2;MS(ESI)w/z176[M+H]+;實施例21:formulaseeoriginaldocumentpage46HNMR(300MHz,CD3OD)S7,32(m,5H);4,79(dd,/=9,9,4,4Hz,1H);4,48(t,/=5,9Hz,1H);3,61(dd，J-13,9,6,1Hz，1H);3,51(dd'/=13,9，5,7Hz，1H);3,35(dd,/=14,2,3'4Hz，1H);3,08(dd,14,2,9,9Hz,1H);13CNMR(62,5MHz,CD3OD)5175,1，167,2，138,2,130,3,129,7,128,1,68,2，56,2,51,7,41,3,37,5;MS(BSI)w/z252[M+H]+.HRMS根據d2H^N3C)3(M+H)的計算值252.1348;實測值252.1341'[(x]d26+41,8(c1，0,H20)實施例22:formulaseeoriginaldocumentpage46工HNMR(300MHz,CD3OD)S7,32(m，5H);4,79(dd，/=9,9，4,4Hz,1H);4,48(t,J-5'9Hz'1H);3，61(dd，J-l3,9,6,1Hz,1H);3,51(dd,/=13,9,5,7Hz,1H);3,35(dd，■/-14，2，3,4Hz,IH);3，08(dd,/-14,2,9,9Hz，1H);13CNMR(62,5MHz,CD3OD)S175,1，167,2，138,2130,3，129，7，128,1，68,2，56,2，51,7,41,3，37,5;MS(ESI)附/z252[M+H〗+,269[M+H20〗+.HRMS根據d;jH,8N303(M+H)的計算值252.1348;實測值252.1349。[cx]d26-38,0(c1,9，H20)實施例23:LDAPALVal.2HCl23工HNMR(300MHz,D20)S4'54(t,=5,9Hz,1H);4,42(d，《/=5,0Hz,1H);3,60(d,J=5,9H乙'2H);2,29(m，1H);0,97(t,/=6,7Hz,6H);13CNMH(62，5MHz,D20)S175,5,166,9，59,5'51，1,40'3,30,4，19,0，17,6;MS(ESI)附/z204[M+H]+;HRMS根據QHwN3C)3(M+H)的計算值204.1348;實測值204.1365。[a〗D26+22,2(c2,0，H20)實施例24:L-DAPA-D-DAPA.3HC124&NMR(300MHz'D20)S4,60(m,H);4,55(dd，/=6,5,4,9Hz,1H);3，65(m,3H);3,45(dd,/=13,5,7,7Hz,1H);13CNMR(62，5MHz,D20)S171,6,167,6'51,8,51,5，40,2，40,1;MS(ESI)"!/zl91[M+H]+;HRMS4MtC6H15N403(M+H)的計算值191.1144;實測值191.1146。:cx〕D26-43,4(c,0,4,H20)實施例28:(2S,3R)-DASA-l-Glv-4-Glv.2HClformulaseeoriginaldocumentpage4828工HNMR(300MHz,D20)S4,61(s,1H);4,43(s,1H);4,06,4,04(2s,4H);13CNMR(62,5MHz,D20)S172,9,172，7，52,7，42,5;MS(ESI)加/z263[M+H]+;285[M+Na]+;HRMS根據(:81115>[406的計算值263.0992;實測值263.0970。[cc〗D26-2,2(cl'5,H20)實施例29:(2S,3S)-DASA-l-L-Val-4-L-Val.2HClformulaseeoriginaldocumentpage4829工HNMR(300MHz,D20)S4,78(m,1H);4,65(m,1H);4，35(m,IH)，4,21(m:1H);2,12(m,2H);0'85(m,12H);13CNMR(62,5MHz,D20)175,7，174,8，59,2，59,0,52,8,52,3,30,0,29,7，18,4,18，3,17，2,16,9.MS(ESI)wi々347〖M+H]+，369.〖M+Na]+;HRMS根據C14H26N406Na的計算值369.1750;實測值369.1760。formulaseeoriginaldocumentpage48實施例30:(2S,3S)畫DASA-l國L畫Ile-4國L畫Ile.2HClH3C、、CH3Ot-COOH2HCIA/N、乂COOH0H/^CH330工HNMR(300MHz'D20)S4,78(m，1H);4,62(m，1H);4,40(m,2H);1,75(m，6H);0,85(m，12H);13CNMR(62,5MHz,D20)173,9，173,1,164,9,163,7，56,3，54,8,52,0,51,8，39,4,24,5,24'4,22,5,22,2，20，5;MS(ESI)w/z375[M+H]+,397[M+Naf;HRMS根據C16H30N4O6Na的計算值397.2063;實測值397.1995。[cc]D"-I8，7(c0,3,MeOH)實施例31:L-DAPA-L-Pro.2HClH。N2HCI31工HNMR(300MHz,D20)S4，62(m,1H);4,39(m,1H);3,62(d,/=7，6Hz,1H);3,57K2H);3,42(dd，13,6,6,1Hz，1H);2,05(m,2H);1,95(m，2H);13CNMR(62,5Hz,D20)5173,1,164,9,59,6,52,6,46,0,39,2,28,2,22,3;MS(ESI)w/z202[M+H〗；HRMS根據(:811161\303的計算值202.1192;實測值202.1196。〖ct〗D26-72,2(cl，3,H20)實施例34:L國DAPA-L-Ala國L畫Ala,2HCl2HQCOOH實施例35:L-DAPA-L-Ala-L-Val.2HCl，,2HCIH2NOCOOH35實施例36:L畫DAPA國L-Ala國L-Pro.2HCl2HC)H2NH2NOCH，36OCOOHN實施例37:D-DAPA-GW.2HC1H2N、2HCIH2N'OHN^COOH37工HNMR(300MHz,D20)S4,42(t,5,8Hz,IH),4,00(d,18,1Hz，1H),4,10(d,J=18,1Hz'IH),3,53(d,5,8Hz，2H);13CNMR(75MHz,D20)S172,7，166,4,50,5,41,4,39,5;MS(ESI)m/z162[M+H]+;HRMS根據(:511121\303(M+H)的計算值162.0879;實測值162.0863,[a]D"-28,8(cU，H20)實施例38:L-DAPA-GlvOMe.2THF.COOCH.工HNMR(300MHz,CD3OD)S4,39(t，/=5,7Hz，IH)，4,15(d,/=17,8Hz,1H)4,05(d,/=17,8Hz，IH)，3，75(s,3H)，3,52(dd,/=5,7，1,5Hz,2H);13C鵬R(75MHz,CD3OD)S171，9,167,5，53,1'51,9，42,1,41,0;MS(ESI)m/z1M+H]+;HRMS根據C6H"N303(M+H)的計算值176.1035;實測值176.1005。[a〗D25+24,0(cU'H20)實施例39:L-DAPA-GlvNH7.2HClHNMR(300MHz,D20)54，43(t,/=5,9Hz,1H),4'0(m,2H)，3,52(d，/=5,913CNMR(75MHz,D20)5173,1,166,7,50,6,42,1,39,4;MS(ESI)m々161[M+H〗+;HRMS根據C5H13N402(M+H)的計算值161.1039;實測值161.1042。oc]d25+38,6(c0，23,H20)實施例40:D-DAPA-D-Asp.2HClHz，2H);&NMR(300MHz,D20)S4,75(m，1H),4,38(dd，/=6,3，5,3Hz，1H),3,50(dd,/=14,4'5,3Hz,1H)，3,42(dd，/=14,4,6,4Hz，1H)>2，93(d,/=6,3Hz,2H);13CNMR_(75MHz,D20)S174，2,173,2，165,9,50，6，49，4,39，4,35,1;MS(ESI)m々220M+H]+;HRMS根據C7H14N305(M+H)的計算值220.0933;實測值220.0卯3。ocD25-32，4(c0,7，H2O)實施例41:D-DAPA-L-Phe.2HCl41工HNMR(300MHz,D20)S7,25(m,5H),4,72(dd，8,7，5,6Hz,1H),4,28(dd/=6,1，5，7Hz,1H),3,49(dd，/=14,3，6,2Hz，IH)，3,43(dd,/=14,3，5,7Hz，IH)，3'22(dd，/=14,3,5'6Hz'1H),3,03(dd,/=14,3，8,7Hz,1H);13CNMR(75MHz,DzO)S174,4，165,8'I36，3,129,2，I28'8,127，3,66,6，54，6>50,4'39，6;MS卿)"'々252IM+H]+HRMS根據C12H18N303(M+H)的計算值252.1348;實測值252.1357'[a]D25-42,3(c1,0,H20)實施例42:D-DAPA-D-Phg.2HClformulaseeoriginaldocumentpage5242工HNMR(300MHz'D20)S7，32(s,5H)，5,43(s，1H),4,38(m,IH)，3,52(d,/=5，9Hz，2H);13CNMR(75MHz，D20)8173,2，165,5,134,4，129,3,127,8,57,6,50,4,39,6;MS(ESI)m々238[M+H]+;HRMS根據CuH16N303(M+H)的計算值238.1192;實測值238.11卯。[a]D25-81,4(c1,0，H20)實施例43:L-DAPA-L-Nle.2HCl工HNMR(300MHz,D20)S4,35(m,2H),3,48(d，/=5，9Hz,2H),1'70(m,1H)1,60(m,IH)，1，20(m，4H),0,72(t，/=7,2Hz,3H);13CNMR(75MHz'D20)S175,6，166,1,57,1，53,6，50,4，39，6，29'9,27,0，21,5,13'0;MS(ESI)m/z218[M+H]+;HRMS根據C9H20N3O3(M+H)的計算值218.1505;實測值218.1518。D25+6,8(c0，5，H2O)實施例44:D-DAPA-D-L-Nle.2HCl實施例45:D-DAPA-L-LVS.3HC14薩(300MHz,D20)84,42(dd，/=6，6，5,1Hz,1H),4,28(dd，/=8,0,5,8Hz，1H),3,52(m，2H)'2，90(t，/=7,6Hz，2H)，1,82(m，2H)，1,60(m，2H),1,37(m，2H);13CNMR(75MHz,D20)5174,9,166,1，53,5，50,7,39,5,39,2，29,7，26,3，22,1;MS(ESI)w々233[M+H]+;HRMS根據C9H1N403(M+H)的計算值233.1614;實測值233.1624。[ab25-41;0(c0,6,H20)實施例46:D-DAPA-L-Leu.2HCl力NMR(300MHz,D20)S4,37(dd，/=6,8,4，9Hz，1H)，4，28(dd,/=8,0,6，5Hz，IH)，3,49(m,2H),1,7-1,5(m,3H),0,85(d，/=6,2Hz,3H)，0,81(d，/=6,2Hz,3H);13CNMR(75MHz,D20)5176,0，166,0，52,4,50,7,39,6,39,1，24，5,22,0'20，9;MS卿)W7々218[M+H]+;HRMS根據C9H20N3O3(M+H)的計算值218.1505;實測值218.1506。[CX]D25-2，5(cl,4，H20)實施例47:L-DAPA-(CH，〕-L-Val.2TFA^NMR(300MHz,CD3OD)53,74(quintet,J=6,2Hz,IH),3,42(d,4,3Hz,1H),3,36(dd,J=6,2Hz,2H),3,12-3,10(m,2H),2,25-2,14(m,IH),1,05(d,7,0Hz,IH);13CNMR(62,5固z,CD3OD)$175,9，68,3,49,7,49,1,41,6，32,1，18,9，18,8;MS(ESI)附々190[M+H]+;HRMS根據C8H19N302(M+H)的計算值1卯.1556;實測值1卯.1552。[a〗D26+3,0(cl,0，MeOH)實施例48:L-DAPA-L-Asp,2TFA工HNMR(300MHz,CD3OD)S4,86(dd,J-6,3，4,8Hz，1H),4,42(t,J-5,7Hz,m)，3,57(dd,■/=13,9,5,8Hz'1H),3,52(dd，13,9，5,8Hz,IH)，2,99(dd，J=17,2，6,2Hz'1H),2，91(dd,/=17,2,4，6Hz,1H);13CNMR(62,5MHz,D20)5174,5,173,8,167,1，51,8，50，8，41,2，36,2;MS(ESI)220[M+H〗+;HRMS根據C7H14N305(M+H)的計算值220.0933;實測值220.0950。[a]D26+36,6(cl'O,MeOH)實施例49:0-0人？入丄-(4-三氟甲基)孑116.011.211(:1工H麗(300MHz,D20)S7,58(d,/-7,9Hz,2H)，7,35(d，/=8,1Hz,2H),4,69(m，1H),4,25(t,6,0Hz,IH)，3,27(dd,■/=13,9,5,8Hz,!H),3,17(d,/-6,0Hz，2H)，3,04(dd，/=14,0,9，3Hz,1H);13CNMR(75MHz,D20)8174,1，165,7,140,7,130,0,129,6(q,32,9Hz),125,5,125,0(q,J-271,1Hz),54,3,50,7,39,5,36,3;MS(ESI)加/z320[M+H]+,;,甘HOHRMS根據C13H17F3N303(M+H)的計算值320.1222;實測值320.1236.實施例50:0~0人？入丄-￡-三氟甲基-1\16.011,211(:1H2N2'、、2HCIHHO、CF350實施例51:D-DAPA-L-Nle.2HClH2N、2HCl，v麵51工H薩(300MHz,D20)54,43(dd,/=6,6,5，1Hz，iH),4,33(dd，《/-8,1，5,7Hz,1H),3,60(dd'14,5,5,1Hz,1H),3,53(dd,J-14,5'6,6Hz'1H),1,82(m,2H)'1,34(m,4H)，0,86(t,7,2Hz，3H);13CNMR(75MHz,D20)S175,6,166,0,53,8,50,6,39,4'&,9,27,1，21,6,13,0;MS(ESI)'"/z218[M+H〗+;HRMS根據C9H20N3O3(M+H)的計算值218.1505;實測值218.1506。[aD25-43，0(c1,4，H20)實施例52:D-DAPA-DL-對-氟-Phe.2HCl52工HNMR(300MHz,D20)S7,20-7,15(m,2H)，7,03-6,95(m，2H)，4,66-4,59(m，1H),4，27(t,/=5,7Hz，0，5H)，4,25(t，/=5,8Hz，0，5H),3,43(d,/=6,2Hz，0，5H),3,42(d，/=5'7Hz,0,5H)'3,20-3,10(m,1H),3,17(d，/=6,0Hz，1H),2,97(dd,/=14,1,8,6Hz,0，5H)'2,94(dd,/=14,1,9,2Hz,0，5H);13CNMR(75MHz,D20)8174,3，174,2，165，8,165,7，162,8(d，■/=243，7Hz),133,0'132,8，131,7，131,6，116,3,l歸，54,7,54,5,50,7，50,4,39,5,35,7，35,5;MS(ESI)m々270[M+HJ+;HRMS根據C12H17FN303(M+H)的計算值270.1254;實測值270.1255。實施例53:生物化學和生物學結果通過以下方式說明根據本發明的新化合物的有效性f差乙二磬對鍵^,時發謬和根薦本發銀W必合參W^^/^應這些,參^觀才戎4^命辨浙^化較將人胰島素(Ins)與甲基乙二醛(MG)在生理條件下孵育。24小時後，胰島素完全被修飾，結果見圖1(Ins+MG)。另一方面，在等摩爾量的根據本發明的AGE抑制劑存在下，於生理條件下將胰島素與甲基乙二醛孵育。24小時後，通過MG對胰島素的修飾顯著減少，結果見圖1。圖2舉例證明一些已知的活性二羰基清除劑抑制通過MG對胰島素修飾的有效性。HPLC分析清楚地證實根據本發明的一些AGE抑制劑清除能修飾胰島素的甲基乙二醛(圖3)。根據本發明的AGE抑制劑對促生長素抑制素-14(含有2Lys)和RNA酶A(含有10Lys和4Arg)的作用的一些實例分別見圖4和圖5。旅凝本Jt坊的新化合遊-拔爿GE清餘浙W押浙雜力^逸^f《在甲基乙二醛(10mM)存在下或在甲基乙二醛和等摩爾量的根據本發明的抑制劑之一存在下，於37X:孵育RNA酶A和溶菌酶(10mg/ml)。孵育48小時後，通過聚丙烯醯胺^^電泳(8%-16%SDSPAGE蒯歐)分析蛋白質。對結果的分析表明，在甲基乙二搭存在下，RNA酶A和溶菌酶表現出廣泛的^務飾，這通過蛋白質二聚體形式的出現而被指出。添加根據本發明的抑制劑之一，即L-DAPA-L-Leu(實施例1)、L國DAPA-L-IIe(實施例18)、L-DAPA-L-Val(實施例23)、D-DAPA-D-Ala(實施例8)、(2S，3S)-DASA-L-Leu(實施例29)、L-DAPA-L-Gly(實施例17)、或L-DABA-L-Leu(實施例12)，提供保護避免甲基乙二醛引起的這些結構修飾。根據本發明的抑制劑的存在通過清除甲基乙二醛大大地防止了交聯蛋白質的形成。在以甲基乙二醛和根據本發明的各種抑制劑處理後，使用Greiner-SWeffele等人的亞甲基藍RNA染色技術測定RNA酶A的酶活性(Anal.Biochem.(1996)240，24))。結果總結於下表l中。表ltableseeoriginaldocumentpage58通過分光光度法在688nm處測定的酶動力學表明，在根據本發明的抑制劑存在下，由甲基乙二醛引起的酶活性抑制被顯著地降低。使用M胍(AG)作為抑制劑，對RNA酶A或溶菌酶進行了比較分析(通過電泳和通過酶活性測定)。結果清楚地表明根據本發明的抑制劑明顯地比AG更有效。對於溶酶體(含有6Lys和11Arg),在採用與RNA酶A同樣條件進行的試驗期間，也觀察到同樣的趨勢。MG與蛋白質的賴氨酸和精氨酸殘基反應，由此改變被修飾肽的電荷。此點通過在非變性條件下以MG處理過的乙二醛酶I的電泳而證實。乙二醛酶I與MG(10mM)接觸24小時增加了蛋白質向正電極的遷移率，此變化與從s-M和胍基的正電荷丟失以及負電荷的獲得相一致。當根據本發明的抑制劑(L-DAPA-L-Leu(實施例1)或L-DAPA-L-Ile(實施例18))包含在孵育混合物中時，這些化合物的存在抑制負電荷的獲得。在甲基乙二醛存在下，乙二醛酶I的孵育使該蛋白質被修飾，所述乙二醛酶I是oc-醛酮解毒系統的關鍵蛋白質。與對照相比，這種修飾引起電荷的變化和酶活力降低50%。添加才艮據本發明的化合物(L-DAPA-L-Leu或L-DAPA-L-Ile)阻止甲基乙二搭施加的抑制作用並避免結構修飾。通過電泳得到的比較結果表明，在這些化合物對抗由MG誘導的RNA酶A結構修飾的保護作用方面，氨基胍(AG)遠沒有(根據本發明的)AGE抑制劑有效。根據本發明的AGE抑制劑，即L-DAPA-L-Leu(實施例1)和L-DAPA-L-Ile(實施例18),或AG(10mM)與MG和RNA酶A在37"C孵育40小時。在根凝本尤坊和現^T戎^的ikTG淨餘浙和/4f差乙二搭存在敘敏^^長用於此試驗的細胞來自EA.hy926細胞系，其為通過Ajf靜脈內皮細胞(HUVEC)與肺癌細胞(A549)雜交得到的內皮細胞。將EA.hy926內皮細胞培養於添加10%胎牛血清的Dulbecco，s改良的Eagle's培養基(DMEM)中。所述細胞在12孔板中孵育。每一孑L起初包含100,000個細胞。在添加或不添加各種潛在抑制劑(lmM)和/或甲基乙二醛(600fiM)後，通過在2ml培養基中於37C在含5。/。C02的潮溼氣氛中孵育48小時而獲得細胞的生長。通過下面的方法評價細胞的數目使用溴化(4，5-二甲基痿唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)分析法對細胞進行染色。MTT在其被轉變為曱臢時滲入細胞。形成的曱臢量與活細胞的數目成比例。結果以處理後細胞數目與未處理的對照細胞數目相比的相對百分數表示[10(FOD(處理細胞)/OD(對照細胞)。通過UV/可見分光光度法在570nm進行檢測。原理MTT(黃色)滲透細胞並通過由活細胞線粒體脫氫酶切割其四氮唑環而轉變為不溶性的藍色化合物甲臢。將曱臢以異丙醇溶解。細胞數目與所形成的曱臢量及其吸光度成比例。如圖6所示，甲基乙二醛(MG)抑制細胞生長。結果總結於以下表2中。表2:在MG和MG清除劑存在或不存在下的細胞生長tableseeoriginaldocumentpage613次試驗的平均值添加M胍(AG)以一種特別的方式抑制此過程，M胍是一種已知的MG清除劑。同樣的趨勢也可用根據本發明的化合物觀察到，尤其是L誦DAPA-L-Val(實施例23)、L-DAPA-L-Leu(實施例l)和L-DAPA-L-Ile(實施例18)。其它已知的MG清除劑，例如肌肽和二曱雙胍在此試驗中被證明有效性較差。與MG對細胞生長的抑制作用相比，根據本發明化合物的抑制作用的其它實例示於圖7中。這些結果表明根據本發明的化合物對EA細胞是無毒的。對於以下化合物尤其如此L-DAPA-L-Val.2HC1(實施例23)、L-DAPA-L-Leu.2HCl(實施例1)、L-DAPA-L-Ile'2HCl(實施例18)、(2S，3S)-DASA-L-Val.2HCl(實施例29)和L-DAPA-L-Leu'2TFA(實施例3)，對這些化合物而言，與沒有加入任何產物的對照細胞生長的數目相比，細胞數量降低小於15%。分子中二氨基部分的組成不涉及毒性，其相關的鹽也不涉及毒性。實際上，L-DAPA、(2S,3S)-DASA和D-DAPA，以及HC1和TFA鹽見於毒性和無毒性的產品中。可以注意到，與單獨只用MG的細胞生"M目比，所述化合物的無毒性增強了其MG清除活性。與被分析化合物一起生長的細胞數和在MG和被分析化合物存在下生長的細胞數的相對值之間的差值使得有可能評價所述產物作為MG清除劑的作用。根據本發明的八種化合物特別具有這種活性，即L-DAPA-L-Val'2HCl(-3)(實施例23)、L-DAPA-L-Leu2HCl(-13)(實施例1)、L-DAPA-L-Ile.2HCl(-9)(實施例18)、(2S，3S)畫DASA匪L-Val.2HCl(15)(實施例29)、L-DAPA-L隱Leu2TFA(-18)(實施例3)、L-DABA-L-Leu.2HCl(-4)(實施例12)和L-DAPA-L-Phe.2HCl(-6)(實施例21)。兩個另外的化合物也表現出清除活性，即D-DAPA-D-Ala.2HCl(+1)(實施例8)和L畫DAPA-Gly.2HCl(+3)(實施例17)。另一方面，其細胞毒性較高(分別為39%和43%)。可以注意到，二甲雙胍是一種弱的清除劑，儘管此分子在此濃度下具有非常低的毒性。旅拔本發^W兩個必合參i:-iX4/M-丄-2:gf/f荽滋^^々丄-2X4/M-i:-Kfi/f其^試發對人肝臟S9級分和對七種沙門氏菌林，單獨採用L-DAPA-L-Leu(實施例l)和L-DAPA-L-Val(實施例23)及與曱基乙二醛聯用進行Ames試驗。用於Ames試驗的濃度如下-單獨L-DAPA-L-Leu或單獨L-DAPA-L-Val:10jiM、1和0.1jiM。-L-DAPA-L-Leu/甲基乙二醛混合物或L-DAPA-L-Val/甲基乙二醛混合物10nM、IiliM和O.IhMo-甲基乙二醛10pM。結果總結於下表3中。表3tableseeoriginaldocumentpage63tableseeoriginaldocumentpage64在測試濃度下，單獨或與甲基乙二醛聯合進行測試，兩種物質(L-DAPA-L-Leu或L-DAPA-L-Val)對TA98、混合菌林或AJf髒S9級分均不是致突變的。由人肝臟S9級分產生的代謝物在測試濃度下不是致突變的。權利要求1.以下通式I的化合物或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物其中X代表CH2、C＝O、C＝S或CHOH，R1代表胺基酸，任選地被一個或多個滷原子所取代，所述滷原子優選氟，或被一個或多個CF3基團取代，且n＝0、1或2或X代表CH2、C＝O、C＝S或CHOH，R1代表含有兩個胺基酸的肽，每個胺基酸任選地被一個或多個滷原子所取代，所述滷原子優選氟，或被一個或多個CF3基團取代，且n＝0或1或XR1代表PO3H或SO3H且n＝0、1或2；R2代表H、XR1、C1-C6烷基、C1-C6芳烷基或芳基，所述烷基、芳烷基和芳基能被氨基(NH2)、羧基(COOH)、一個或多個滷原子或一個或多個CF3基團所取代，所述滷原子優選氟；下述化合物除外-其中R2代表氫原子，X代表C＝O，R1代表-NH-(CH2)m-COOH且m＝1、2或3且n＝0、1或2；-由以下各式所代表的化合物和以及化合物L-鳥氨醯-牛磺酸、L-二氨基丁醯-牛磺酸和L-二氨基丙醯-牛磺酸。2.根據權利要求l的化合物，其中X代表C-O、CH2或C-S。3.根據前述權利要求中任一項的化合物，其中R2代表XI^或H。4.根據前述權利要求中任一項的化合物，其中Ri代表胺基酸，有利地選自丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、苯丙氨酸或叔亮氨酸，且11=0、l或2。5.根據前述權利要求中任一項的化合物，其中所述化合物由以下通式II所代表或是其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物其中:Ri代表匿NH畫R3-(C-0)R4或COR4,R3代表-d-d2烷基，有利地為d-C6烷基，任選地被一個或多個選自下述的基團取代滷原子，優選氟，-CF3,苯基，苯酚，-COOH，M或者被一個或多個卣原子優選氟或被一個或多個CF3基團取代的苯基；-苯基，任選地被氨基、OH基、一個或多個滷原子或一個或多個CF3基團取代，所述卣原子優選氟；和R4代表OH、NH2、d畫C3o烷IL&,有利地為d-C2。烷lL^;R2代表H、COA或d-C6烷基，其任選地被一個或多個卣原子或一個或多個CFs基團取代，所述滷原子優選氟；n=0、l或2;Y代表氧或硫原子，有利地為氧原子。6.根據前述權利要求中任一項的化合物，其中n=0。7.根據前述權利要求中任一項的化合物，其中所述化合物選自下式的化合物、或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物formulaseeoriginaldocumentpage4formulaseeoriginaldocumentpage5formulaseeoriginaldocumentpage6formulaseeoriginaldocumentpage6formulaseeoriginaldocumentpage6formulaseeoriginaldocumentpage78.根據權利要求1至7中任一項的化合物用於預防食物中蛋白質變質的用途。9.包含根據權利要求1至7中任一項的化合物和藥物或化妝品可接受賦形劑的藥物或化妝品組合物。10.用作藥物的以下通式I的化合物或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物formulaseeoriginaldocumentpage7其中X代表CH2、C=0、C-S或CHOH，Ri代表^J^酸，任選地被一個或多個卣原子所取代，所述卣原子優選氟，或被一個或多個CF3基團取代，且n=0、l或2或X代表CH2、C=0、C-S或CHOH，Ri代表含有兩個胺基酸的肽，每個M酸任選地被一個或多個卣原子或一個或多個CF3基團所取代，所述卣原子優選氟，且n-0或l或代表P03H或S03H且n=0、1或2;R2代表H、XR"Q-C6烷基、d-C6芳烷基或芳基，所述烷基、芳烷基和芳基能被氨基(NH2)、羧基(COOH)、一個或多個滷原子、或一個或多個CF3基團取代，所述卣原子優選氟；11.根據權利要求10的化合物，其中所述化合物由以下通式II所代表或是其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物R代表NH-R3-(C=0)R4或C0R4,R3代表-d-d2烷基，有利地為d-C6烷基，任選地被一個或多個選自下述的基團取代卣原子，優選氟，-CF3,苯基，苯酚，-COOH,M或者被一個或多個優選氟的卣原子或一個或多個CF3基團取代的苯基；-苯基，任選地被氨基、OH基、一個或多個滷原子或一個或多個CF3基團取代，所述卣原子優選氟；和R4代表OH、NH2、d-C3o烷lL&,有利地為C廣C2o烷H^;R2代表H、CO&或d-C6烷基，其任選地被一個或多個卣原子或一個或其中:多個CF3基團取代，所述滷原子優選氟；n=0、l或2;Y代表氧或硫原子，有利地為氧原子。12.根據權利要求10或11的化合物，其中所述化合物選自以下化合物或其藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體、以及其混合物formulaseeoriginaldocumentpage9formulaseeoriginaldocumentpage10formulaseeoriginaldocumentpage1113.根據權利要求10至12任一項的化合物，其中所述藥物為活性羰基化合物的清除劑，有利地為高,基化終產物形成的抑制劑。14.根據權利要求10至13任一項的化合物，其中所述藥物用於預防和/或治療由於高,基化終產物形成或蛋白質交聯而導致的病況或疾病，用於預防和/或治療機體衰老的有害效應，所述效應為高^Mt基化終產物形成或蛋白質交聯，或用於減緩或停止患者中由糖尿病導致的併發症的進展，所述併發症由高,基化終產物形成或蛋白質交聯引起。15.根據權利要求10至14中任一項的化合物，其中所述藥物意在治療、預防和/或減緩患者中選自以下疾病的選艮類風溼性多關節炎、阿爾茲海默氏病、尿毒症、神經退行性疾病、動脈粥樣硬化、糖尿病的^j6i管併發症和大血管併發症包括糖尿病性視網膜病和由糖尿病性腎病引起的腎衰竭、微血管病變和大血管病變、白內障、與透析或阿爾茲海默氏病相關的澱粉樣變性、帕金森氏病、牙齦炎、齲齒、口腔-牙齒病症、糖尿病性潰瘍、慢性腎衰竭、慢性腎透析、炎性疾病、年齡相關的風溼性疾病和卟啉病，以及意在治療早期癌症。16.根據權利要求10至15中任一項的化合物，其中所述藥物意在通過口服途徑施用。17.根據權利要求1至7中任一項的化合物作為表皮和乳頭真皮的抗衰老和重塑活性成分和/或作為抗皺活性成分的化妝品用途。全文摘要本發明涉及具有通式I的化合物，或所述化合物的藥學可接受的加成鹽、異構體、對映異構體和非對映異構體，其混合物，以及含有其的藥物或化妝品組合物，和其作為捕獲活性羰基化合物的AGE抑制劑藥物的用途，其中X代表CH2、C＝O、C＝S或CHOH，X代表CH2、C＝O、C＝S或CHOH，R1代表被一個和多個滷原子優選氟或被一個或多個CF3基團任選取代的胺基酸，且n＝0、1或2，或X代表CH2、C＝O、C＝S、CHOH，R1代表含有兩個胺基酸的肽，每個胺基酸任選被一個或多個滷原子優選氟或被一個或多個CF3基團取代，且n＝0或1，或XR1代表PO3H或SO3H且n＝0、1或2；R2代表H、XR1、C1-C6烷基、C1-C6芳烷基或芳基，其中所述烷基、芳烷基和芳基基團可被氨基NH2、羧基COOH、一個或多個滷原子優選氟或一個或多個CF3基團取代。文檔編號C07K5/08GK101268093SQ200680014917公開日2008年9月17日申請日期2006年3月30日優先權日2005年3月31日發明者N-A·薩薩克,利烏米拉·葉爾莫連科,吉塞勒·弗蘭克,奈馬·巴克裡姆·希裡,王朱謙,皮埃爾·波捷,約安娜·巴卡拉,馬裡亞·康塞普西翁·阿查布·加西亞·阿爾瓦雷斯申請人:法馬門斯公司;國家科學研究中心