評價黏膜給藥的疫苗的治療潛力的方法
2023-05-14 06:06:16 1
專利名稱：評價黏膜給藥的疫苗的治療潛力的方法
技術領域：
本發明涉及評價黏膜給藥的疫苗的治療潛力的方法，該疫苗包含一種或多種抗原。
背景技術：
變態反應是適應西方生活方式國家中的主要健康問題。而且，過敏性疾病的發病率在這些國家日益增加。儘管通常不認為變態反應是威脅生命的疾病，但哮喘每年導致相當大數量的死亡。青少年中約30％的異常發病率導致生活質量、工作日和金錢的重大損失，並使其成為西方世界的一類主要健康問題。
變態反應是一種複雜的疾病。許多因素促成了致敏事件。這些中有由尚不充分理解的幾個基因之間的相互作用限定的個體易感性。另一個重要的因素是過敏原暴露超過特定閾值。在致敏過程中，幾個環境因素可能是重要的，包括汙染，孩童時期的感染，寄生蟲感染，腸微生物等。一旦個體致敏並建立了過敏免疫應答，只需微量過敏原的存在就能有效地轉變成症狀。
過敏性疾病的自然病程通常伴隨在兩個水平上的加重惡化。首先，症狀和疾病嚴重性的進展，以及疾病進展，例如從花粉熱變成哮喘。其次，侵犯過敏原的播散時常發生，導致過敏多重反應性。慢性炎症導致黏膜防禦機制的全面削弱，導致非特異性的刺激並最終破壞黏膜組織。嬰兒可能主要對食物即奶變得敏感，導致溼疹或胃腸道病症；然而，他們常常自發地不再有這些症狀。這些嬰兒在他們日後的生命中處於發生吸入變態反應的風險中。
在我們呼吸的空氣中特定大小的最普遍顆粒中發現了最重要的過敏原來源。這些來源非常普遍並包括草花粉和屋塵蟎排洩物顆粒，它們總共引起了全部變態反應的約50％。全球重要的還有動物毛髮皮屑，即貓和狗的毛髮皮屑，其他花粉，如艾蒿花粉，和微真菌，如鏈格孢屬。以地域性為基礎，還有其他花粉可能是佔優勢的，如北歐和中歐的樺樹花粉，美國東部和中部的豚草，和日本的日本杉花粉。昆蟲即蜜蜂和胡蜂毒液以及食物各自佔全部變態反應的約2％。
變態反應，即I型超敏反應，由對外來非致病物質不適當的免疫反應引起。變態反應的重要臨床表現包括哮喘，花粉熱，溼疹和胃腸道病症。過敏反應是特異性的，理解為特定個體對特定過敏原敏感，而該個體不必定顯示出對其他已知導致過敏疾病的物質的過敏反應。過敏表型的特徵在於靶器官黏膜的明顯炎症和循環中以及肥大細胞和嗜鹼細胞表面上IgE類過敏原特異性抗體的存在。
當抗體結合肥大細胞和嗜鹼細胞表面上的高親和性IgE特異性受體時，外來過敏原和過敏原特異性IgE抗體的反應啟動過敏性攻擊。肥大細胞和嗜鹼細胞含有預先形成的介質，即組胺、類胰蛋白酶和其他物質，它們在兩個或多個受體結合的IgE抗體交聯時得到釋放。IgE抗體通過同時結合一個過敏原分子而交聯。肥大細胞表面上受體結合的IgE的交聯還導致信號分子的釋放，這些信號分子引起嗜曙紅細胞、過敏原特異性的T細胞和其他類型的細胞吸引至過敏應答的位點。這些細胞與過敏原、IgE和效應細胞相互作用，導致遭遇過敏原後12-24小時發生的症狀的重新閃現(晚期反應)。
過敏性疾病控制包括診斷和治療，包括預防性治療。變態反應的診斷涉及過敏原特異性IgE的證實和過敏原來源的鑑定。許多情況中，仔細的既往病史可足以用於變態反應的診斷和對侵犯過敏原來源物質的鑑定。然而，常見的是，通過客觀測量來支持診斷，如皮膚單刺試驗(skin prick test)，驗血或激發試驗。
治療選擇落入三個主要的種類。第一種機會是避免過敏原或減少暴露。儘管避免過敏原是顯而易見的，例如在食物過敏原的情況中，但這可能是困難的或昂貴的，如對於屋塵蟎過敏原，或可能是不可能的，如對於花粉過敏原。第二種和最廣泛使用的治療選擇是開處經典症狀藥物，如抗組胺藥和類固醇。症狀藥物是安全而有效的；然而，它們不改變疾病的自然病因，也不控制疾病播散。第三種治療可替換方案是特異性的變態反應疫苗接種，其在大多數情況中減輕或緩解了由問題過敏原引起的變態反應症狀。
常規特異性變態反應疫苗接種是對過敏疾病的病因治療。其幹預基礎免疫學機制，導致患者免疫狀態持久改善。因此，與症狀藥物治療相比，特異性變態反應疫苗接種的保護性效果延長超過治療階段。一些接受治療的患者得以治癒，此外，大部分患者會有疾病嚴重程度和所經歷症狀的緩解，或至少疾病惡化的停止。因此，特異性變態反應疫苗接種具有預防性效果，降低了花粉熱發展成哮喘的風險，並降低了產生新敏感性的風險。
成功的變態反應疫苗接種潛在的免疫學機制具體不得而知。特異性免疫應答，如對抗特定病原體抗體的產生，稱為適應性免疫應答。這種應答可區別於先天性免疫應答，後者是針對病原體的非特異性反應。變態反應疫苗旨在致力於適應性免疫應答，其包括具有抗原特異性的細胞和分子，如T-細胞和產生抗體的B-細胞。沒有相應特異性T細胞的幫助，B細胞不能成熟為產生抗體的細胞。參與過敏性免疫應答刺激的T細胞主要是Th2型。已經提出Th1和Th2細胞之間新平衡的建立對於特異性變態反應疫苗接種的免疫學機制是有益的和重要的。這是由Th2細胞減少，Th2至Th1細胞的轉換，或是Th1細胞上調而引起的是有爭議的。最近，已經提出調控T-細胞對於變態反應疫苗接種的機制是重要的。根據該模式，調控T-細胞，即Th3或Trl細胞，下調相應抗原特異性的Th1和Th2細胞。儘管這些不明確性，通常認為活性疫苗必須具有刺激過敏原特異性T-細胞的能力。
儘管其功效，特異性變態反應疫苗接種沒有廣泛使用，主要是因為兩個原因。一個原因是與傳統接種疫苗程序相關的不方便性，包括重複接種，特別是在幾個月內重複注射。另一個原因更重要，是過敏性副反應的風險。對抗感染因子的普通接種使用單個或幾個高劑量免疫來有效進行。然而，該策略不能用於變態反應疫苗接種，因為病理性免疫應答已在進行中。
因此使用在延長的時間段內應用的多次皮下免疫來進行常規特異性變態反應疫苗接種。該過程分成兩個階段，上調給藥劑量和維持階段。在上調給藥劑量階段中，應用提高的劑量，通常歷經16周的時間，開始於微量。當達到推薦的維持劑量時，對於維持階段應用該劑量，通常每六周進行注射。每次注射後，由於過敏副反應的風險，患者必須處於醫療監護之下30分鐘，儘管其原則上極為罕見但仍可危及生命。此外，必須將診所裝備起來以支持緊急治療。毫無疑問的是基於不同給藥途徑的疫苗將消除或減少目前基於皮下疫苗固有的過敏副反應的風險，以及將促進更廣泛的使用，甚至可能能在家裡自己接種疫苗。
改善特異性變態反應疫苗接種的努力已經進行了超過30年，並包括各種各樣的方法。幾種方法通過對IgE反應性的改變致力於過敏原自身。其他方法致力於製劑和疫苗的給藥途徑。
新過敏原、過敏原製劑和治療方案的測試是艱巨且費時費力的，因為需要動物和/或人的體內測試，包括臨床試驗。尤其是，測試新疫苗或治療方案的治療效用的臨床試驗是費時費力的，因為按照慣例其要包括大量患者，長期的治療階段(例如對於花粉過敏，要包括花粉季和花粉季之前的階段)，以及大範圍的劑量。此外，臨床試驗需要政府對待進行臨床研究的批准和招募合適的測試人員。此外，疫苗例如變態反應疫苗的臨床試驗依賴於臨床症狀的監測和評價，這是高度主觀性的參數，因此這樣的測試結果包含一定程度的不確定性。
本發明的目的是提供評價接種疫苗的方案或用於黏膜給藥的疫苗的治療潛力的改良方法，例如用於口黏膜(oromucosal)特別是舌下給藥的疫苗。
發明概述通過本發明實現了該目的，其特別包括以下方面評價疫苗接種程序的治療潛力的方法，該疫苗接種程序包括用於黏膜給藥的包含一種或多種抗原的疫苗和接種疫苗方案，該方法包括a)使至少一個測試個體接受疫苗接種程序，b)測量測試個體生物樣品中生物標記抗體的水平，該生物標記抗體選自對所述抗原特異性的IgA，IgG，IgE和IgX，和c)使用所獲得的測量值來評價疫苗接種程序的治療潛力。
可根據權利要求1-35任一項的方法獲得的疫苗。
評價黏膜特異性變態反應疫苗接種(SAV)對個體的效果的方法，該方法包括a)使個體接受黏膜SAV，b)測量測試個體生物樣品中生物標記抗體的水平，該生物標記抗體選自抗原特異性的IgA，IgG，IgE和IgX，和c)使用所獲得的測量值來評價SAV的效果。
本發明是基於令人驚訝的實驗發現變態反應疫苗黏膜給藥後對所關注過敏原特異性的IgE，IgG，IgA和IgX血液流體濃度明顯的和可靠的提高，而對於免疫系統應答的多種其他可測量標記，疫苗的黏膜給藥不引起任何改變。實驗結果表明抗原特異性IgE，IgG，IgA和IgX的體液濃度對於疫苗的治療效果是強有效的標記。因此本發明通過體外測試來自測試動物或個體的生物樣品，提供了測試新過敏原候選物、新疫苗製劑以及新接種方案的可能性。例如在臨床試驗之前通過進行這樣的體外測試，可以在開始臨床試驗之前排除無效的接種方案、疫苗和劑量，並因此縮小臨床試驗的範圍，從而使得新疫苗的研發變得更可行。
此外，本發明已經提供了評價疫苗或接種方案治療潛力的新的另外的參數，該參數容易測量和定量，且因此非常可靠。特別地，該方法可以結合臨床試驗使用來獲得另外的信息或獲得可替換其他參數如臨床症狀的信息，並因此使得臨床試驗更可靠。
從以上可明顯看出，該方法可以用於疫苗研發的任何階段，從新過敏原候選物例如重組和重組修飾的過敏原的篩選，至為獲得疫苗上市許可對疫苗的臨床試驗。
附圖簡述
圖1顯示了用安慰劑治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgE水平。
圖2顯示了用2500SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgE水平。
圖3顯示了用25000SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgE水平。
圖4顯示了用75000SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgE水平。
圖5顯示了用安慰劑治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgA水平。
圖6顯示了用2500SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgA水平。
圖7顯示了用25000SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgA水平。
圖8顯示了用75000SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgA水平。
圖9顯示了用安慰劑治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgG水平。
圖10顯示了用2500SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgG水平。
圖11顯示了用25000SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgG水平。
圖12顯示了用75000SQ劑量治療的患者組在給藥階段的四個時間點的IgG水平。
圖13顯示了用安慰劑治療的患者組在治療階段開始時和治療階段後1-2周時的IgE水平。
圖14顯示了用1000000SQ劑量治療的患者組在治療階段開始時和治療階段後1-2周時的IgE水平。
圖15顯示了治療組1-4意向治療(Intention-To-Treat)(ITT)群在治療階段過程中三個時間點的I gE水平。
圖16顯示了治療組1，5和6意向治療(ITT)群在治療階段過程中三個時間點的IgE水平。
圖17顯示了治療組1-4按照方案(Per-Protocol)(PP)群在治療階段過程中三個時間點的IgE水平。
圖18顯示了治療組1，5和6按照方案(PP)群在治療階段過程中三個時間點的IgE水平。
圖19顯示了治療組1-4意向治療(ITT)群在治療階段過程中三個時間點的IgX水平。
圖20顯示了治療組1，5和6意向治療(ITT)群在治療階段過程中三個時間點的IgX水平。
圖21顯示了治療組1-4按照方案(PP)群在治療階段過程中三個時間點的IgX水平。
圖22顯示了治療組1，5和6按照方案(PP)群在治療階段過程中三個時間點的IgX水平。
發明詳述疫苗接種程序治療潛力的評價疫苗接種程序治療潛力的評價可以基於1)IgE，IgA，IgG或IgX單獨的測量，2)四種生物標記抗體中兩種的測量，3)四種生物標記抗體中三種的測量，或4)全部四種生物標記抗體的測量。
通過與參照時間生物標記抗體水平曲線相比較來進行對所獲得測量結果的評價，例如，通過製備生物標記抗體水平對時間的曲線圖來產生時間曲線。將所獲得的測量值用於評價給定的待測試疫苗接種方案的治療潛力。疫苗接種程序具有兩個主要組成部分，即疫苗接種方案和疫苗，每個具有多個參數，其可以是本發明方法中的測試主體。疫苗接種方案包括這樣的參數，例如篩選和選擇用於研究的人員，發生疫苗給藥的情況，給藥途徑，所用抗原的劑量，給藥頻率和持續時間等。疫苗包括的參數有一種或多種抗原，佐劑(如果存在)，和疫苗的配製，即製劑的賦形劑。
本發明的方法可以用於評價以下各項的治療潛力1)使用常規疫苗的疫苗接種方案，2)使用常規疫苗接種方案的疫苗，或3)疫苗接種方案和疫苗的組合。
本發明方法的一實施方案中，生物標記抗體是IgE。與疫苗接種程序開始時的水平相比較，優選IgE水平提高超過50％，優選超過100％，更優選超過200％，更優選超過300％，更優選超過400％。進一步優選的是，IgE水平的提高在從疫苗接種程序開始十二周內發生，優選十周內，更優選八周內，更優選六周內，最優選四周內。
本發明的特定實施方案中，IgE水平具有一個最大值，接著是降低。優選IgE水平的最大值出現在從疫苗接種程序開始十二周內，優選十周內，更優選八周內，更優選六周內，和更優選四周內。優選IgE水平降低至低於最大值的90％的水平，優選低於最大值的80％，更優選低於70％，更優選低於60％，和最優選低於50％。優選IgE水平降低在從最大值之時起26周內發生，優選20周內，更優選16周內，更優選12周內，更優選8周內，和最優選4周內。
本發明的另一實施方案中，一旦達到最佳值，IgE水平將保持在大約最佳值。
本發明進一步的優選實施方案中，生物標記抗體是IgA。與疫苗接種程序開始時的水平相比較，優選IgA水平提高超過50％，優選超過100％，更優選超過200％，更優選超過300％，且最優選超過400％。優選IgA水平的提高在從給藥開始20周內發生，優選16周內，更優選12周內，且最優選8周內。
本發明的再一優選實施方案中，生物標記抗體是IgG。與疫苗接種程序開始時的水平相比較，優選IgG水平提高超過50％，優選超過100％，更優選超過200％，更優選超過300％，和最優選超過400％。優選IgG水平的提高在從給藥開始20周內發生，優選16周內，更優選12周內，和最優選8周內。
本發明進一步優選的實施方案中，生物標記抗體是IgX。本發明優選的實施方案中，將IgX表示為有生物樣品中其他成分競爭的免疫測定中所測量的IgE水平與無競爭免疫測定中所測量的IgE水平的比例。本發明的這個實施方案中，與疫苗接種程序開始時的水平相比較，優選IgX的水平降低超過4％，優選超過6％，更優選超過8％，更優選超過10％，更優選超過12％，和最優選超過14％。進一步優選的是IgX水平的降低在從給藥開始24周內發生，優選16周內，更優選12周內，和最優選8周內。
以上所用的表述「IgE水平」，「IgA水平」，「IgG水平」和「IgX水平」可指單個測試個體的水平，或者，當一組個體接受疫苗接種程序時，指該組或組的一部分的加權水平，如其平均水平。通常IgA，IgE，IgG和IgX的水平在一個個體與另一個體之間是不同的，因此優選使用兩個或多個個體的組，優選五個或更多，更優選十個或更多個體，用於測試疫苗接種程序。
疫苗接種方案本發明的一實施方案中，疫苗接種方案包括將疫苗每日施用於測試個體。本發明的另一實施方案中，疫苗接種方案包括每兩天，每三天或每四天施用疫苗。例如，疫苗接種方案包括疫苗施用長於4周，優選長於8周，更優選長於12周，更優選長於16周，更優選長於20周，更優選長於24周，更優選長於30周，和最優選長於36周。
給藥階段可以是連續階段。或者，給藥階段是由一個或多個非給藥階段間斷的不連續階段。優選，非給藥的(總)階段短於給藥的(總)階段。
本發明進一步的實施方案中，將疫苗一天一次給藥於測試個體。或者，將疫苗一天兩次給藥於測試個體。疫苗可以是單劑量(uni-dose)疫苗。
IgE、IgA、IgG和IgX的測量本發明的一實施方案中，通過ELISA來進行生物樣品中抗原特異性的IgA，IgE和/或IgG水平的測量，包括步驟1)將過敏原包被到Elisa板上並洗滌，2)加入生物樣品，溫育並洗滌，3)加入酶和抗-IgA/IgG/IgE抗體的綴合物，溫育並洗滌，4)加入酶底物，溫育並停止反應，和5)測量反應過的底物的水平。
本發明的另一實施方案中，通過雙位點免疫測定(競爭免疫測定)來進行生物樣品中抗原特異性的IgA，IgE和/或IgG水平的測量，包括步驟(a)提供液相和四種成分固相複合物的混合物，這四種成分固相複合物由以下組成(i)樣品的抗體，(ii)與固相結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體，(iii)抗原、抗體或半抗原形式的配體，和(iv)標記化合物，來形成四種成分固相複合物。
(b)將四種成分固相複合物與液相分離，(c)洗滌分離的四種成分固相來除去非複合物結合的化合物，(d)進行對洗滌過的標記的四種成分複合物的檢測/測量。
可以以多種不同的程序來進行雙位點免疫測定。任選地，可在混合試劑(i)和(ii)之後加入試劑(iii)和(iv)之前和/或在混合試劑(i)、(ii)和(iii)之後，進行洗滌步驟。固相可以是例如顆粒載體，如順磁顆粒。標記化合物可以是例如化學發光化合物，如吖啶(acridinium)酯。配體可以結合生物素或其功能衍生物，且標記化合物可以是共價結合抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白或其功能衍生物的化學發光化合物，在該情況中，通過引發複合物中的化學發光反應並檢測/測量所得到的化學發光(如果有的話)來進行對洗滌過的標記的四種成分複合物的檢測/測量。例如可以使用ADVIACentaur(Bayer)來進行免疫測定。
雙位點免疫測定的特定實施方案(非競爭免疫測定)包括步驟(a)混合(i)生物樣品和(ii)與固相結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體來形成液相和兩種成分固相複合物的混合物，(b)將兩種成分固相複合物與液相分離並洗滌分離的兩種成分固相複合物來除去非複合物結合的化合物，(c)加入(iii)抗原、抗體或半抗原形式的配體，和(iv)標記化合物，來形成四種成分固相複合物，(d)將四種成分固相複合物與液相分離，(e)洗滌分離的四種成分固相來除去非複合物結合的化合物，(f)進行對洗滌過的標記的四種成分複合物的檢測/測量。
雙位點免疫測定的另一特定實施方案(競爭免疫測定)包括對於抗體的雙位點免疫測定，使用化學發光標記和結合生物素的配體，所述方法包括步驟(a)將生物樣品與結合生物素或其功能衍生物的配體抗原、抗體或半抗原，與順磁顆粒結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體和結合抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白或其功能衍生物的化學發光吖啶化合物混合，來形成四種成分固相複合物，(b)將四種成分固相與液相磁性分離，(c)洗滌分離的四種成分固相來除去非複合物結合的化合物，(d)引發分離的固相中的化學發光反應(如果有的話)，並檢測/測量所得到的化學發光(如果有的話)。
雙位點免疫測定進一步的特定實施方案(非競爭免疫測定)包括步驟(a)混合(i)生物樣品和(ii)與順磁顆粒結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體，來形成液相和兩種成分固相複合物的混合物，(b)將兩種成分固相複合物與液相磁性分離，並洗滌分離的兩種成分固相複合物來除去非複合物結合的化合物，(c)加入(iii)結合生物素或其功能衍生物的抗原、抗體或半抗原形式的配體，和(iv)結合抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白或其功能衍生物的化學發光吖啶化合物，來形成四種成分固相複合物，(d)將四種成分固相複合物與液相磁性分離，(e)洗滌分離的四種成分固相來除去非複合物結合的化合物，(f)引發洗滌過的固相中的化學發光反應(如果有的話)，並檢測/測量所得到的化學發光(如果有的話)。
優選，將IgX表示為有生物樣品中其他成分競爭的免疫測定中所測量的IgE水平與無競爭免疫測定中所測量的IgE水平的比例。這種情況下，無競爭免疫測定可以是如上所述的雙位點非競爭免疫測定實施方案之一，其中在生物樣品和與固相結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體混合後進行洗滌步驟，即在加入過敏原之前進行洗滌，以避免生物樣品中非IgE抗體競爭樣品IgE抗體與過敏原的結合。競爭免疫測定可以是上述雙位點競爭免疫測定實施方案之一。
優選，生物樣品選自血液，血漿，血清，尿液，唾液和鼻分泌物。
疫苗製劑和給藥途徑本發明的優選實施方案中，疫苗選自配製成適於通過口黏膜，呼吸系統的黏膜，消化系統的黏膜，直腸黏膜和生殖器黏膜給藥的疫苗。優選將疫苗配製成適於通過口黏膜(oromucosa)給藥。
本發明特定的實施方案中，疫苗選自配製成溶液，懸浮液，分散體，乳液，快速分散劑型，滴劑，錠劑，噴霧，氣溶膠，片劑，咀嚼片，顆粒，粉末，凝膠，糊劑，糖漿，霜劑，膏劑，棒劑，植入物，陰道栓劑(vagitory)，栓劑或子宮栓劑(uteritory)的疫苗。優選將疫苗配製成快速分散劑型。製劑可以是適於黏膜給藥的任何常規製劑，尤其是製劑可包含常規賦形劑和佐劑。
抗原根據本發明方法評價的疫苗的抗原可以是暴露於個體時引發免疫應答的任何抗原。本發明的優選實施方案中，抗原選自呼吸道抗原，消化道抗原，微生物抗原和昆蟲抗原。本發明的特定實施方案中，抗原是呼吸道抗原。
特定實施方案中，抗原是過敏原，例如吸入過敏原或昆蟲過敏原。抗原的其他實例是類變應原(allergoid)，肽，半抗原，碳水化合物，肽核酸(PNA，一種合成的遺傳模擬物)，和感染性抗原如病毒或細菌物質，及其類似物或衍生物。營養物的實例是維生素，酶，微量元素和微量礦物質及其類似物或衍生物。藥物的實例是抗體，抗生素，肽，鹽，激素，溶血劑，止血劑，酶，酶抑制劑，psycopharmica，阿片製劑和巴比妥酸鹽，及其類似物或衍生物。
過敏原本發明的優選實施方案中，過敏原是已經報導的重複暴露於個體時能誘導過敏性即IgE介導的反應的任何天然存在的蛋白質。天然存在的過敏原的實例包括花粉過敏原(樹-，草藥-，雜草-和草-花粉過敏原)，昆蟲過敏原(吸入物，唾液和毒液過敏原，惻如蟎過敏原，蟑螂和蠓過敏原，hymenopthera毒液過敏原)，動物毛髮和皮屑過敏原(來自例如狗，貓，馬，大鼠，小鼠等)和食物過敏原。來自樹，草和草藥的重要花粉過敏原是來自分類學目山毛櫸目，Oleales，松目和懸鈴木料，包括，特別是，樺樹(樺屬)，榿木(榿木屬)，榛樹(榛屬)，鵝耳櫪(鵝耳櫪屬)和橄欖樹(齊墩果屬)，雪松(柳杉屬和檜屬)，懸鈴木(懸鈴木屬)，Poales目，包括特別是黑麥草屬，梯牧草屬，早熟禾屬，狗牙根屬，Dactylis，絨毛草屬，Phalaris，黑麥屬和高梁屬的草，Asterales和Urticales目，包括特別是豚草屬，蒿屬和Parietaria屬的草藥。其他重要的吸入過敏原是來自表皮蟎屬和Euroglyphus屬的屋塵蟎，存儲蟎，例如Lepidoglyphys，甜食蟎屬和食酪蟎屬，來自蟑螂、蠓和跳蚤的那些，例如小蠊屬，大蠊屬，搖蚊和Ctenocepphalides，和來自哺乳動物如貓、狗和馬的那些，毒液過敏原包括源自有針剌的昆蟲或叮咬昆蟲，如來自分類學膜翅目的那些，包括蜜蜂(超家族蜜蜂科)，黃峰(超家族胡蜂科)和螞蟻(超家族蟻總科)。來自真菌的重要吸入過敏原特別是源自鏈格孢屬和枝孢菌屬的這些。
本發明更優選的實施方案中，過敏原是Bet v1，Aln g1，Cor a1和Car b1，Que a1，Cry j1，Cry j2，Cup a1，Cup s1，Juna1，Jun a2，jun a3，Ole e1，Lig v1，Pla l1，Pla a2，Amb a1，Amb a2，Amb t5，Art v1，Art v2，Par j1，Par j2，Par j3，Sal k1，Ave e1，Cyn d1，Cyn d7，Dac g1，Fes p1，Hol l1，Lol p1和5，Pha a1，Pas n1，Phl p1，Phl p5，Phlp6，Poa p1，Poa p5，Sec c1，Sec c5，Sor h1，Der f1，Der f2，Der p1，Der p2，Der p7，Der m1，Eur m2，Gly d1，Lep d2，Blo t1，Tyr p2，Bla g1，Bla g2，Per a1，Fel d1，Can f1，Can f2，Bos d2，Equ c1，Equ c2，Equ c3，Mus m1，Rat n1，Apis m1，Api m2，Ves v1，Ves v2，Ves v5，Dol m1，Dil m2，Dol m5，Pol a1，Pol a2，Pol a5，Sol i1，Soli2，Sol i3和Sol i4，Alt a1，Cla h1，Asp f1，Bos d4，Mal d1，Gly m1，Gly m2，Gly m3，Ara h1，Ara h2，Ara h3，Ara h4，Ara h5或這些中任何過敏原分子育種的改組雜交體。
本發明的最優選實施方案中，過敏原是草花粉過敏原或塵蟎過敏原或豚草過敏原或雪松花粉或貓過敏原或樺樹過敏原。
本發明的另一實施方案中，快速分散固體劑型包含至少兩種不同類型的過敏原，源自相同過敏性來源或源自不同的過敏原來源，例如分別來自不同蟎蟲和草物種的草組1和草組5過敏原或蟎組1和組2過敏原，雜草抗原如短和巨大豚草過敏原，不同的真菌過敏原如鏈格孢屬和枝孢菌屬，樹過敏原如樺樹，榛樹，鵝耳櫪，橡樹和榿木過敏原，食物過敏原如花生，大豆和奶過敏原。
摻入快速分散固體劑型的過敏原可以是提取物，純化的過敏原，修飾的過敏原，重組過敏原或重組過敏原突變體的形式。過敏原提取物可以天然含有相同過敏原的一種或多種異構體，而重組過敏原通常只表示過敏原的一種異構體。優選實施方案中，過敏原是提取物的形式。另一優選實施方案中，過敏原是重組過敏原。進一步優選的實施方案中，過敏原是天然存在的低IgE結合突變體或重組低IgE結合突變體。
過敏原可以以等摩爾量存在或過敏原存在的比例可以變化優選高至1∶20。
本發明進一步的實施方案中，低IgE結合過敏原是根據WO99/47680，WO02/40676或WO 03/096869的過敏原。
感染性抗原本發明的優選實施方案中，微生物劑是病毒，細菌，真菌，寄生蟲或其任何部分。
微生物劑的實例是弧菌屬的菌種，沙門氏菌屬的菌種，博爾德氏桿菌屬的菌種，嗜血菌屬的菌種，弓形蟲，巨細胞病毒，衣原體屬的物種，鏈球菌屬的菌種，諾沃克病毒，大腸桿菌，幽門螺桿菌，貓螺桿菌，輪狀病毒，淋病奈瑟氏球菌，腦膜炎奈瑟氏球菌，腺病毒，EB病毒，日本腦炎病毒，卡氏肺孢子蟲，單純皰疹，梭菌菌種，呼吸道合胞體病毒，克雷伯氏菌屬菌種，志賀氏菌屬菌種，銅綠假單胞菌，細小病毒，空腸彎曲桿菌屬菌種，立克次氏體屬物種，水痘帶狀皰疹，耶爾森氏菌屬菌種，羅斯河病毒，J.C.病毒，馬紅球菌，黏膜炎莫拉氏菌，布氏疏螺旋體，溶血巴斯德氏菌，脊髓灰質炎病毒，流感病毒，霍亂弧菌和腸沙門氏菌傷寒血清型。
微生物劑的更多實例是防止或減輕以下疾病的症狀的那些流感，結核病，腦膜炎，肝炎，百日咳，脊髓灰質炎，破傷風，白喉，瘧疾，霍亂，皰疹，傷寒，HIV，AIDS，麻疹，萊姆病，旅行者腹瀉，A肝，B肝和C肝，中耳炎，登革熱，狂犬病，副流感，風疹，黃熱病，痢疾，軍團病，弓形體病，Q-熱，出血熱，阿根廷出血熱，齲齒，查格斯病，由大腸桿菌引起的尿道感染，肺炎球菌病，腮腺炎和切昆貢亞熱。
評價SAV對個體效果的方法本發明進一步涉及評價特異性變態反應疫苗接種(SAV)對個體效果的方法，該方法包括a)使個體接受SAV，b)測量個體生物樣品中生物標記抗體的水平，該生物標記抗體選自抗原特異性的IgA，IgG，IgE和IgX，和c)使用獲得的測量值來評價SAV的效果。
以有關評價疫苗接種程序治療潛力的方法所述的相同方式來進行SAV效果的評價。
定義結合本發明，使用以下的表述「生物樣品」意思是任何體液，如血液，血漿，血清，尿液和唾液，其是生物有機體內排洩的，分泌的或轉運的。
表述「變態反應/過敏」意思是針對抗原的任何1，2，3或4型超敏變態反應。
表述「消化道抗原(digestive antigen)」意思是接觸消化系統黏膜的任何抗原劑，尤其是口腔，咽，喉，胃和腸的黏膜。
表述「呼吸道抗原(respiratory antigen)」意思是接觸呼吸系統黏膜的任何抗原劑，尤其是鼻，口腔，咽，喉，氣管和肺的黏膜。
表述「抗原」意思是個體可能暴露於的任何抗原，並表示已經報導或可顯示當暴露於個體時能誘導免疫應答的任何天然存在的或合成的化合物或物質，或其部分或片段。
表述「過敏原」是個體可能暴露於的任何過敏原，並表示已經報導當重複暴露於個體時能誘導過敏性即IgE介導的反應的任何天然存在的蛋白質或蛋白質混合物。所評價的過敏原可以是過敏原提取物，純化的過敏原，修飾的過敏原，重組過敏原，重組突變過敏原，超過10個胺基酸的任何過敏原片段或其任意組合的形式。
表述「快速分散劑型」指的是在口腔中在少於約90秒內崩解的劑型，優選少於60秒，優選少於30秒，更優選少於20秒，甚至更優選少於10秒，甚至更優選放入口腔中少於5秒，最優選少於約2秒內崩解。
術語「口黏膜」意思是患者口腔和咽的黏膜。
表述「呼吸系統的黏膜」意思是鼻，口腔，咽，喉，氣管和肺的黏膜。
表述「消化系統的黏膜」意思是口腔，咽，喉，胃和腸的黏膜。
表述「生殖器黏膜」意思是陰道和尿道(urinal)黏膜。
術語「治療潛力」意思是能夠部分或完全預防或治療抗原介導的免疫疾病，或能夠部分或全部緩解抗原介導的免疫疾病的症狀或抑制其症狀成因。
術語「IgX」意指直接或間接表示生物樣品中存在的過敏原特異性非IgE抗體如IgG4水平的參數，該抗體可以與IgE競爭過敏原的結合。IgX可以是例如絕對的IgX水平或有生物樣品中其他成分競爭(幹擾)的免疫測定中所測量的IgE與無競爭免疫測定中所測量的IgE水平的比例。
實施例實施例1用快速分散的非壓縮舌下片劑來治療草花粉過敏患者背景已知使用梯牧草(Phleum pratense)提取物作為過敏原活性物質的對抗草花粉變態反應的疫苗在皮下給藥的製劑中是有效的，其中將過敏原和作為佐劑的氫氧化鋁凝膠一起配製。
目的為了測試用於舌下給藥的快速分散非壓縮凍乾片劑形式的梯牧草提取物新製劑的治療潛力(效力)，片劑不含有佐劑。片劑含有魚膠作為基質成形劑。效力研究構成臨床I期研究的一部分，後者還包括安全性研究。
疫苗接種方案測試人員48名在草花粉季節患有中度至嚴重過敏性鼻結膜炎且在季節外沒有症狀的18至65歲的成人測試人員。入選標準是1)測試人員的臨床病史，2)陽性皮膚單刺試驗(＞3mm SoluprickSQ-U HEP梯牧草)，和3)對抗梯牧草的特異性IgE陽性(CAP類別2或更高)。
劑量和給藥程序將48名測試者分成四組A，B，C和D，每組包括12名人員。組A(2,500SQ-U)用一片含有2,500SQ-U的片劑和兩片安慰劑來治療。組B(25,000SQ-U)用一片含有25,000SQ-U的片劑和兩片安慰劑來治療。組C(75,000SQ-U)用三片含有25,000SQ-U的片劑來治療。組D用三片安慰劑來治療。三片片劑每天一次給藥，給藥8周。8周治療後的10周沒有治療，然後將在最初8周中進行的相同治療繼續15周。
在效力測試之前，45名人員參與了安全性研究，其中對30名人員給予了2500至1,125,000SQ-U的遞增劑量，對15名人員給予了安慰劑。
測量在8周治療階段的0，3-5和7-8周後以及在15周治療階段結束後2周時獲得血清樣品。使用以下列出的測定來測量IgE，IgA和IgG的水平。
測量IgE的測定程序在ADVIA Centaur(Bayer)上使用雙位點免疫測定來測量IgE，使用以下的程序(a)將液體樣品與針對待檢測抗體的與順磁顆粒結合的類別特異性抗體混合來形成第一固相複合物，
(b)洗滌，(c)加入結合生物素的梯牧草過敏原來形成第二固相複合物，(d)加入結合鏈黴抗生物素蛋白的化學發光吖啶化合物來形成第三固相複合物，(e)將固相與液相磁性分離，(f)洗滌，(g)引發所分離固相中的化學發光反應(如果有的話)，和(h)測量發射的化學發光，其表明樣品中所述抗體存在。
測量IgA和IgG的測定程序1.包被。將100μl Phl p(10μg/ml)提取物加入ELISA板(NUNCMaxisorp 439454)的孔中。將平板在2-8℃靜置直至第二天。
2.洗滌。用緩衝液洗滌經包被的平板。
3.封閉。將200μl 2％酪蛋白緩衝液加入每個孔中並在搖床上室溫溫育一小時。溫育後，除去酪蛋白緩衝液。
4.血清。稀釋血清樣品，並將100μl稀釋的樣品加入平板的孔中並在搖床上室溫溫育兩小時。
5.洗滌。
6.綴合物。將100μl以1∶1000稀釋於0.5％酪蛋白緩衝液中的HRP小鼠抗人IgG/IgA加入每個孔中並在搖床上室溫放置一小時。
7.洗滌。
8.底物100μl TMP(3，3』，5，5』-四甲基聯苯胺，Kem-En-Tec TMBONE)加入每個孔中並溫育20分鐘。
9.停止。將100μl的0.5M H2SO4加入每個孔中來停止反應。
10.測量。將所得到的反應混合物接受450nm終點的分光光度測量(Bio Kinetics Reader EL-340)。
結果結果顯示於圖1-12中，其中圖1-4各自顯示了組A，B，C和D的IgE水平，圖5-8各自顯示了組A，B，C和D的IgA水平，圖9-12各自顯示了組A，B，C和D的IgG水平，且其中每幅圖表示四個測量時間點(0周，4周(3-5周獲得的樣品)，8周(7-8周獲得的樣品)和結束(15周治療階段結束後兩周))的抗體水平(對於IgE為kU/L，對於IgA和IgG為與過敏患者的參照血清相比較的相對滴度)。抗體水平是治療組的平均值。
由圖1-4可見在治療組A(安慰劑)中在整個給藥階段沒有記錄到IgE水平提高。對於治療組B(2500SQ)，在整個階段內記錄到IgE水平從29至58的連續提高。對於治療組C(25000SQ)，觀察到從31至94的連續提高。最後，對於治療組D(75000SQ)，IgE水平從0周的34急劇地升高至4周的最大值168，然後在8周跌至159並進一步在結束時跌至86。認為組D的時間曲線代表了理想的曲線，其意味著有效的特異性變態反應疫苗接種。
圖5-8顯示出對於治療組A和B沒有記錄到IgA水平提高。對於治療組C和D，IgA水平在給藥階段內穩定提高。
圖9-12顯示出對於治療組A和B沒有記錄到IgG水平提高。對於治療組C和D，IgG水平在給藥階段內穩定提高。
圖1-12中所示的結果進一步列於表1中。
表1
實施例2用快速分散的非壓縮舌下片劑來治療草花粉過敏患者背景已知使用梯牧草提取物作為過敏原活性物質的對抗草花粉變態反應的疫苗在皮下給藥的製劑中是有效的，其中將過敏原和作為佐劑的氫氧化鋁凝膠一起配製。
目的為了測試用於舌下給藥的快速分散非壓縮凍乾片劑形式的梯牧草提取物新製劑的治療潛力(效力)，片劑不含有佐劑。片劑含有魚膠作為基質成形劑。效力研究構成臨床I期研究的一部分，後者還包括安全性研究。
疫苗接種方案測試人員9名在草花粉季節患有中度至嚴重過敏性鼻結膜炎且在季節外沒有症狀的18至65歲的成人測試人員。入選標準是1)測試人員的臨床病史，2)陽性皮膚單刺試驗(＞3mm SoluprickSQ-U HEP梯牧草)，和3)對抗梯牧草的特異性IgE陽性(CAP類別2或更高)。
劑量和給藥程序用對應於1.000.000SQ-U日劑量的多個片劑來治療6名測試人員，持續28天，用安慰劑治療3名人員相同的時間段。
測量在治療開始時和治療最後一天後1-2周時獲得生物樣品。使用實施例1中所述的測定來測量IgE水平。
結果結果顯示於圖13-14中，其中圖13顯示了用安慰劑治療的患者組在治療開始時和治療階段後1-2周時的IgE水平，其中圖14顯示了用1000000SQ劑量治療的患者組在治療階段開始時和治療階段後1-2周時的IgE水平。
由圖13可見，對於安慰劑組，在治療階段過程中IgE水平沒有改變，而(對於治療組)IgE水平從約0.31提高至約1.79。
實施例3用快速分解的非壓縮舌下片劑來治療草花粉過敏患者背景已知使用梯牧草提取物作為過敏原活性物質的對抗草花粉變態反應的疫苗在皮下給藥的製劑中是有效的，其中將過敏原和作為佐劑的氫氧化鋁凝膠一起配製。
目的為了測試用於舌下給藥的快速分散非壓縮凍乾片劑形式的梯牧草提取物新製劑的治療潛力(效力)，片劑不含有佐劑。片劑含有魚膠作為基質成形劑。效力研究構成臨床IIb-III期研究的一部分。
疫苗接種方案測試人員855名在草花粉季節患有中度至嚴重過敏性鼻結膜炎且在季節外沒有症狀的18至65歲的成人測試人員。入選標準是1)測試人員的臨床病史，2)陽性皮膚單刺試驗(＞3mm SoluprickSQ-U HEP梯牧草)，和3)對抗梯牧草的特異性IgE陽性(CAP類別2或更高)。測試人員生活在丹麥，德國，瑞典，挪威，比利時，奧地利，英格蘭，瑞士和加拿大。
劑量和給藥程序將855名測試人員分成六組1，2，3，4，5和6，各自包括136，136，139，141，150和153人。
組1用安慰劑和活性抗組胺藥來治療。
組2用2500SQ的過敏原劑量和活性抗組胺藥來治療。
組3用25000SQ的過敏原劑量和活性抗組胺藥來治療。
組4用75000SQ的過敏原劑量和活性抗組胺藥來治療。
組5用安慰劑和安慰劑抗組胺藥來治療。
組6用75000SQ的過敏原劑量和安慰劑抗組胺藥來治療。
在預期的梯牧草花粉季開始之前(預治療階段)，整個花粉季節和花粉季節後1周(後治療階段)，每日進行治療，持續約8周。花粉季的持續時間變化，從在Trondheim(挪威)為12天，到在卡爾斯魯厄(Karlsruhe)(德國)為86天。
測量在預治療階段開始時(圖15-22中的預治療)，花粉季開始時(圖15-22中的治療)，和後治療階段結束時(圖15-22中的後治療)，採取血樣。使用實施例1中所述的測定來測量I gE水平。以IgE水平(競爭)/IgE水平(非競爭)來測定IgX參數。使用實施例1中所述的測定來測量IgE水平(非競爭)。使用以下的測定程序來測量IgE水平(競爭)(a)將液體樣品與針對待檢測抗體的與順磁顆粒結合的類別特異性抗體混合來形成第一固相複合物，(b)加入結合生物素的梯牧草過敏原來形成第二固相複合物，(c)加入結合鏈黴抗生物素蛋白的化學發光吖啶化合物來形成第三固相複合物，(d)將固相與液相磁性分離，(e)洗滌，(f)引發所分離固相中的化學發光反應(如果有的話)，和(h)測量所發射的化學發光，其表明樣品中所述抗體存在。
結果IgE結果顯示於圖15-18以及表2和3中，其中圖15顯示了組1-4對於ITT-群的IgE水平，圖16顯示了組1，5和6對於ITT-群的IgE水平，圖17顯示了組1-4對於PP-群的IgE水平，和圖18顯示了組1，5和6對於PP-群的IgE水平。ITT意思是意向治療並包括研究開始時的所有人員，PP意思是按照方案並包括根據所計劃的方案治療的所有人員。表2包含圖15和16的所有值，表3包括圖17和18的所有值。
從圖15-18以及表2和3可以看出，對於組1和5，沒有記錄到從預治療至治療IgE水平提高，記錄到IgE水平從治療至後治療有少許提高。對於組2，記錄到IgE水平適度的穩定提高。對於組3，4和6，記錄到IgE水平從預治療至治療急劇提高，接著是從治療至後治療的平臺階段。對於組4，IgE水平在平臺階段中略微降低。認為組3，4和6特別是組4的時間曲線代表了理想的曲線，其表明有效的特異性變態反應疫苗接種。
IgX結果顯示於圖19-22以及表4和5中，其中圖19顯示了組1-4對於ITT群的IgX水平，圖20顯示了組1，5和6對於ITT-群的IgX水平，圖21顯示了組1-4對於PP-群的IgX水平，和圖22顯示了組1，5和6對於PP-群的IgX水平。ITT意思是意向治療並包括研究開始時的所有人員，PP意思是按照方案並包括根據所計劃的方案治療的所有人員。表4包含圖19和20的所有值，表5包括圖21和22的所有值。
從圖19-22以及表4和5可以看出，對於組1和5，沒有記錄到從預治療至治療IgX水平降低，記錄到IgX水平從治療至後治療有少許降低。對於組2和3，記錄到IgX水平適度的穩定降低。對於組4和6，記錄到IgX水平從預治療至治療急劇降低，接著是從治療至後治療不那麼強的降低。對於組4，大部分IgX水平降低發生在預治療至治療的階段中。認為組4和6特別是組4的時間曲線代表了理想的曲線，其表示有效的特異性變態反應疫苗接種。
表2.對於ITT群的草特異性IgE(kU/L)
表3.對於PP-群的草特異性IgE(kU/L)
表4.對於ITT-群的草特異性IgX
表5.對於PP-群的草特異性IgX
權利要求
1.評價疫苗接種程序的治療潛力的方法，該程序包括含有一種或多種抗原的用於黏膜給藥的疫苗和疫苗接種方案，該方法包括a)使至少一個測試個體接受疫苗接種程序，b)測量測試個體生物樣品中生物標記抗體的水平，該生物標記抗體選自對所述抗原特異性的IgA，IgG，IgE和IgX，和c)使用所獲得的測量結果來評價該疫苗接種程序的治療潛力。
2.根據權利要求1的方法，其中通過與參照的時間生物標記抗體水平曲線相比較來進行對所獲得測量結果的評價。
3.根據權利要求1或2的方法，其中生物標記抗體是IgE。
4.根據權利要求2或3的方法，其中與疫苗接種程序開始時的水平相比較，IgE水平提高超過50％，優選超過100％，更優選超過200％，更優選超過300％，和更優選超過400％。
5.根據權利要求4的方法，其中I gE水平提高在自疫苗接種程序開始十二周內發生，優選十周內，更優選八周內，優選四周內。
6.根據權利要求2-5任一項的方法，其中IgE水平具有最大值，然後降低。
7.根據權利要求6的方法，其中IgE水平的最大值出現在自疫苗接種方案開始十二周內，優選十周內，更優選八周內，和更優選四周內。
8.根據權利要求6或7的方法，其中IgE水平降低至低於最大值的90％的水平，優選低於80％，更優選低於70％，更優選低於60％，和最優選低於50％。
9.根據權利要求8的方法，其中IgE水平降低在自最大值之時起26周內發生，優選20周內，更優選16周內，更優選12周內，更優選8周內，和最優選4周內。
10.根據之前任一項權利要求的方法，其中生物標記抗體是IgA。
11.根據權利要求10的方法，其中與疫苗接種程序開始時的水平相比較，IgA水平提高超過50％，優選超過100％，更優選超過200％，更優選超過300％，和最優選超過400％。
12.根據權利要求11的方法，其中IgA水平提高在從給藥開始20周內發生，優選16周內，更優選12周內，和最優選8周內。
13.根據之前任一項權利要求的方法，其中生物標記抗體是IgG。
14.根據權利要求13的方法，其中與疫苗接種程序開始時的水平相比較，IgG水平提高超過50％，優選超過100％，更優選超過200％，更優選超過300％，和最優選超過400％。
15.根據權利要求14的方法，其中IgG水平提高在從給藥開始20周內發生，優選16周內，更優選12周內，和最優選8周內。
16.根據之前任一項權利要求的方法，其中生物標記抗體是IgX。
17.根據權利要求16的方法，其中IgX表示為有生物樣品中其他成分競爭的免疫測定中所測量的IgE水平與無競爭的免疫測定中所測量的IgE水平的比例。
18.根據權利要求17的方法，其中與疫苗接種程序開始時的水平相比較，IgX水平降低超過4％，優選超過6％，更優選超過8％，更優選超過10％，更優選超過12％，和最優選超過14％。
19.根據權利要求18的方法，其中IgX水平降低在從給藥開始24周內發生，優選16周內，更優選12周內，和最優選8周內。
20.根據之前任一項權利要求的方法，其中疫苗接種方案包括每天，每兩天，每三天或每四天將疫苗給藥於測試個體。
21.根據權利要求20的方法，其中疫苗接種方案包括給藥疫苗持續時間段長於4周，優選長於8周，更優選長於12周，更優選長於16周，更優選長於20周，更優選長於24周，更優選長於30周，和最優選長於36周。
22.根據權利要求21的方法，其中給藥的時間段是連續的時間段。
23.根據權利要求21的方法，其中給藥的時間段是由一個或多個非給藥時間段間斷的不連續時間段。
24.根據權利要求23的方法，其中非給藥時間段短於給藥時間段。
25.根據權利要求20-24任一項的方法，其中將疫苗每天一次給藥於測試個體。
26.根據權利要求20-25任一項的方法，其中將疫苗每天兩次給藥於測試個體。
27.根據權利要求20-26任一項的方法，其中疫苗是單劑量疫苗。
28.根據權利要求1-27任一項的方法，其中疫苗選自配製成適於通過口黏膜，呼吸系統的黏膜，消化系統的黏膜，直腸黏膜和生殖器黏膜給藥的疫苗。
29.根據權利要求28的方法，其中將疫苗配製成適於通過口黏膜給藥。
30.根據之前任一項權利要求的方法，其中疫苗選自配製成溶液，懸浮液，快速分散劑型，滴劑和錠劑的疫苗。
31.根據權利要求30的方法，其中將疫苗配製成快速分散劑型。
32.根據之前任一項權利要求的方法，其中抗原選自呼吸道抗原，消化道抗原，微生物抗原和昆蟲抗原。
33.根據權利要求32的方法，其中抗原是呼吸道抗原。
34.根據權利要求32或33的方法，其中抗原是過敏原。
35.根據權利要求34的方法，其中過敏原是吸入過敏原。
36.根據之前任一項權利要求的方法，其中通過ELISA來進行生物樣品中抗原特異性的生物標記抗體IgA，IgG和/或IgE水平的測量，包括步驟1)將過敏原包被到Elisa板上並洗滌，2)加入生物樣品，溫育並洗滌，3)加入酶和抗生物標記抗體的綴合物，溫育並洗滌，4)加入酶底物，溫育並停止反應，和5)測量已反應底物的水平。
37.根據權利要求1-35任一項的方法，其中通過雙位點免疫測定來進行生物樣品中抗原特異性IgA，IgE和/或IgG水平的測量，包括步驟(a)混合(i)生物樣品和(ii)與固相結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體來形成液相和兩種成分固相複合物的混合物，(b)將兩種成分固相複合物與液相分離並洗滌分離的兩種成分固相複合物來除去非複合物結合的化合物，(c)加入(iii)抗原、抗體或半抗原形式的配體，和(iv)標記化合物，來形成四種成分固相複合物，(d)將四種成分固相複合物與液相分離，(e)洗滌分離的四種成分固相來除去非複合物結合的化合物，(f)進行對洗滌過的經標記的四種成分複合物的檢測/測量。
38.根據權利要求37的方法，其中雙位點免疫測定包括對抗體的雙位點免疫測定，使用化學發光標記物和生物素結合的配體，所述方法包括步驟(a)混合(i)生物樣品和(ii)與順磁顆粒結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體來形成液相和兩種成分固相複合物的混合物，(b)將兩種成分固相複合物與液相磁性分離並洗滌分離的兩種成分固相複合物來除去非複合物結合的化合物，(c)加入(iii)結合生物素或其功能衍生物的抗原、抗體或半抗原形式的配體，和(iv)結合抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白或其功能衍生物的化學發光吖啶化合物，來形成四種成分固相複合物，(d)將四種成分固相複合物與液相磁性分離，(e)洗滌分離的四種成分固相來除去非複合物結合的化合物，(f)引發洗滌過的固相中如果有的化學發光反應，並檢測/測量所得到的化學發光，如果有的話。
39.根據之前任一項權利要求的方法，其中以有生物樣品中其他成分競爭的免疫測定中所測量的IgE水平與無競爭免疫測定中所測量的IgE水平的比例來測定IgX。
40.根據權利要求39的方法，其中在免疫測定中來測量競爭免疫測定中所測量的IgE，包括步驟(a)混合生物樣品和結合生物素或其功能衍生物的配體抗原、抗體或半抗原，與順磁顆粒結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體，和結合抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白或其功能衍生物的化學發光吖啶化合物，來形成四種成分固相複合物，(b)將四種成分固相與液相磁性分離，(c)洗滌分離的四種成分固相來除去非複合物結合的化合物，(d)引發所分離固相中如果有的化學發光反應，並檢測/測量所得到的化學發光，如果有的話。
41.根據權利要求39或40的方法，其中在免疫測定中來測量無競爭免疫測定中所測量的IgE，包括步驟(a)混合(i)生物樣品和(ii)與順磁顆粒結合的針對待檢測抗體的類別特異性抗體來形成液相和兩種成分固相複合物的混合物，(b)將兩種成分固相複合物與液相磁性分離並洗滌分離的兩種成分固相複合物來除去非複合物結合的化合物，(c)加入結合生物素或其功能衍生物的抗原、抗體或半抗原形式的配體，和(iv)結合抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白或其功能衍生物的化學發光吖啶化合物，來形成四種成分固相複合物，(d)將四種成分固相複合物與液相磁性分離，(e)洗滌分離的四種成分固相來除去非複合物結合的化合物，(f)引發洗滌過的固相中如果有的化學發光反應，並檢測/測量所得到的化學發光，如果有的話。
42.根據之前任一項權利要求的方法，其中生物樣品選自血液，血漿，血清，尿液，唾液和鼻分泌物。
43.可根據權利要求1-42任一項方法獲得的疫苗。
44.評價黏膜特異性變態反應疫苗接種(SAV)對個體的效果的方法，該方法包括a)使個體接受黏膜SAV，b)測量個體生物樣品中生物標記抗體的水平，該生物標記抗體選自抗原特異性的IgA，IgG，IgE和IgX，和c)使用所獲得的測量結果來評價SAV的效果。
全文摘要
本發明涉及評價疫苗接種程序的治療潛力的方法，該疫苗接種程序包括含有一種或多種抗原的用於黏膜給藥的疫苗和接種方案，該方法包括a)使至少一個測試個體接受疫苗接種程序，b)測量測試個體生物樣品中生物標記抗體的水平，該生物標記抗體選自抗原特異性的IgA，IgG，IgE和IgX，和c)使用所獲得的測量結果來評價疫苗接種程序的治療潛力。
文檔編號A61K39/00GK1942766SQ200580011627
公開日2007年4月4日 申請日期2005年2月24日 優先權日2004年2月26日
發明者H-H·伊普森, L·倫德梅爾克達爾, H·H·雅各比 申請人:阿爾克-阿貝洛有限公司