含有吡格列酮和肝素或低分子肝素的藥物組合物的新用途的製作方法
2023-05-04 23:08:26
專利名稱：含有吡格列酮和肝素或低分子肝素的藥物組合物的新用途的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥領域，具體涉及含有吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽 或它們的衍生物，在製備一種藥物組合物中的應用，特別是在製備一種預防或治療脂肪肝 的藥物中的應用。
背景技術：
脂肪肝是指由於各種原因引起的肝細胞內脂肪堆積過多的病變。脂肪性肝病正嚴 重威脅國人的健康，成為僅次於病毒性肝炎的第二大肝病，已被公認為隱蔽性肝硬化的常 見原因。脂肪肝是一種常見的臨床現象，而非一種獨立的疾病。其臨床表現輕者無症狀，重 者病情兇猛。一般而言，脂肪肝屬可逆性疾病，早期診斷並及時治療常可恢復正常。正常人 的肝內總脂肪量，約佔肝重的5%，內含磷脂、甘油三酯、脂酸、膽固醇及膽固醇脂。脂肪量超 過5 %為輕度脂肪肝，超過10 %為中度脂肪肝，超過25 %為重度脂肪肝。當肝內總脂肪量 超過30%時，用B超才能檢查出來，被B超檢查確診為「脂肪肝」。而脂肪肝患者，總脂量可 達40% -50%，有些達60%以上，主要是甘油三酯及脂酸，而磷脂、膽固醇及膽固醇脂只少 量增加。根據脂肪肝的發病原因，脂肪肝分為酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪性肝病 (NAFLD)，後者是臨床常見肝病之一，其發病機制目前尚不明確，有研究認為胰島素抵抗 (IR)是導致NAFLD的重要病因之一。隨著生活方式及膳食結構的改變，NAFLD的發病率明 顯增高。近十年來，亞太地區非酒精性脂肪性肝病發病率迅速增長。我國富裕地區的成人 NAFLD患病率與日本、韓國接近(12% 24% )，並已取代B型肝炎病毒慢性感染(患病率 <7.0%)成為慢性肝病的首要病因。關於脂肪肝的藥物治療，臨床用於脂肪肝治療的藥物主要有調血脂藥、護肝去脂 藥和中醫中藥三大類。常用的調血脂藥有的在降低血脂時肝脂未見減少，甚至有的藥物在 降低血脂的同時，肝脂反而增加。因此對於血脂正常的脂肪肝患者來說，原則上不用降脂 藥。護肝去脂藥中較早應用的是膽鹼，其為卵磷脂的組成成分，可促進磷脂合成，加速肝內 脂肪運轉而去除肝脂。同類藥物還有蛋氨酸，可在體內提供甲基合成膽鹼，具有促進肝內脂 肪代謝及保肝解毒作用。因人類幾乎不存在膽鹼缺乏現象，故膽鹼不但不能防治人類高脂 飲食誘發的脂肪肝，並因其有一定程度的肝毒性，反可致肝損傷。目前認為此類藥物僅適用 於營養缺乏、胃腸外營養導致膽鹼缺乏或某些藥物誘發的脂肪肝。具有護肝去脂作用的藥 物還有水飛薊素、肉毒鹼乳清酸鹽、熊去氧膽酸、甜菜鹼、牛黃酸、還原型穀胱甘肽等，它們 通過抗氧化、改善肝臟微循環，促進VLDL合成，促進線粒體代謝活性，抗肝細胞壞死等環節 發揮作用。總而言之，目前臨床上尚無十分有效的針對脂肪肝的治療藥物，因此，尋找有效 的幹預藥物有著非常重要的理論意義和應用價值。
發明內容
本發明的目的是提供一種藥物組合物的新用途，特別是吡格列酮和肝素或低分子
3肝素或其可藥用鹽或它們的衍生物，在製備一種預防或治療脂肪肝的藥物中的應用。本發明在實驗過程中發現，口服給予吡格列酮和肝素或低分子肝素對大鼠非酒精 性脂肪肝模型的治療十分有利，取得了十分理想的、意想不到的效果。基於上述發現，本發明對吡格列酮聯合肝素或其可藥用鹽、低分子肝素或其可藥 用鹽做了進一步的研究，並得到如下發明結果本發明通過動物試驗研究，證實了吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽在 治療大鼠肝細胞脂肪沉積的活性，也就是對脂肪肝的預防和治療作用。具體地，本發明通過 對大鼠進行靜脈注射四環素和灌胃高脂乳來製備脂肪肝的動物試驗模型，同時，在脂肪肝 模型的製備過程中，每天定時灌胃吡格列酮和肝素，經過8周的動物試驗後，麻醉大鼠並解 剖，腹主靜脈取血測定生化指標，取肝臟進行稱重。結果發現，經過長期灌胃給藥吡格列酮 和肝素、低分子肝素可藥用鹽，可以預防或治療大鼠非酒精性脂肪肝。特別的，20 835IU/ kg · d劑量的肝素、低分子肝素可藥用鹽(換算為人用劑量為3 140IU/kg · d)，聯合1 20mg/kg ·(!劑量的吡咯列酮(換算為人用劑量為0. 2 4mg/kg -d)，經過長期灌胃治療，對 高脂乳所致的大鼠脂肪肝模型具有很好的療效。優選地，肝素、低分子肝素可藥用鹽的劑量 為52 480IU/kg · d (換算為人用劑量為9 80IU/kg · d)，吡格列酮的劑量為3 12mg/ kg · d (換算為人用劑量為0. 5 2mg/kg · d)。本發明所述的鹽酸吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽在降低大鼠肝細 胞中脂肪沉積的用途，其中所述低分子肝素效價以104.4IU/mg計，吡格列酮與低分子肝素 的重量比為0.1 100 1。優選地，所述低分子肝素效價以104. 4IU/mg計，吡格列酮與 低分子肝素的重量比為0.5 25 1。進一步優選地，所述低分子肝素效價以104.4IU/mg 計，吡格列酮與低分子肝素的重量比為2.5 6 1。本發明所述的鹽酸吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽在降低大鼠肝細 胞中脂肪沉積的用途，其中所述肝素效價以179IU/mg計，鹽酸吡格列酮與肝素的重量比為 0.1 100 1。優選地，所述低分子肝素效價以179IU/mg計，鹽酸吡格列酮與低分子肝素 的重量比為0.5 25 1。進一步優選地，所述低分子肝素效價以179IU/mg計，鹽酸吡格 列酮與肝素的重量比為2. 5 6 1。上述所有涉及的肝素、低分子肝素可藥用鹽包括其鈣鹽、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鐵鹽 等，優選其鈣鹽和鈉鹽。上述所有涉及的肝素、低分子肝素的衍生物包括其不同程度的硫酸 化產物、脫硫酸化產物。上述所有涉及的肝素、低分子肝素可藥用鹽或其衍生物可以根據肝 素的物理性質，通過常規製劑技術製成固體口服製劑，包括片劑、膠囊。本發明與現有技術相比，具有如下突出的實質性特點和顯著的進步1)在肝功能、血脂、肝指數的結果統計中，複方組與模型組相比具有極顯著性差 異，與吡格列酮組或肝素組相比有顯著性差異或極顯著性差異，這表明吡咯列酮和肝素、低 分子肝素複方對大鼠脂肪肝的預防或治療有協同作用。2)本發明為尋找降低肝細胞內脂肪沉積藥物、治療臨床上脂肪肝等脂質代謝紊亂 引起的疾病提供了新的候選藥物，豐富了現有技術。3)現有文獻認為，肝素的分子量較高，屬於粘多糖類化合物，口服是不被人體吸收 的，而我們通過實驗證實，口服肝素卻產生了顯著的效果。可見，本發明克服了現有技術的 技術偏見。
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如將吡格列酮肝素、低分子肝素可藥用鹽或其衍生物開發成脂肪肝治療藥物，可 以豐富治療脂肪肝的藥物，給脂肪肝患者帶來福音。
具體實施例通過以下實施例來對本發明做進一步具體說明，但本發明並不限於以下實施例。 另外，以下實施例1-7所涉及的肝素或其可藥用鹽的效價均按179U/mg計算，低分子肝素或 其可藥用鹽的效價均按104. 4IU/mg計算。實施例1、2為藥效學實施例，旨在通過藥效學實 驗來進一步描述本發明藥物組合物在治療脂肪肝方面的積極效果。實施例3-7為製劑實施 例。實施例1吡格列酮和低分子量肝素對非酒精性脂肪肝的治療1非酒精性脂肪肝模型的製備SD大鼠，雄性，體重220 士 20g，採用灌胃高脂乳劑聯合腹腔注射四環素的方法造 模。除正常對照組外，其餘各組在造模第1天予以腹腔注射四環素150mg/kg，後每隔6d腹 腔注射四環素110mg/kgl次，共6次。除正常組外，每組於每天上午9:30灌胃高脂乳劑，劑 量IOml · kg-1 · cf1。高脂乳劑配方豬油20g，膽固醇10g，果糖5g，蔗糖5g，膽鹽lg，穀氨 酸鈉lg，丙二醇15ml，少許土溫80，蒸餾水定容至100ml。灌胃給高脂乳持續8W。2分組與給藥模型大鼠適應性飼養1周後，隨機分成正常組、模型組以及給藥組，具體分組情況 見下表，每組10隻。每天下午14:30時灌胃藥物，劑量如下正常對照組同體積的羧甲基纖維素鈉；模型對照組同體積的羧甲基纖維素鈉；吡格列酮組1. 5mg/ (kg. d)鹽酸吡格列酮；低分子量肝素組6mg/ (kg. d)低分子肝素鈣；低劑量組0. 5mg/ (kg. d)吡格列酮+3mg/ (kg. d)低分子肝素鈣；中劑量組1. 5mg/ (kg. d)吡格列酮+6mg/ (kg. d)低分子肝素鈣；高劑量組4. 8mg/ (kg. d)吡格列酮+12mg/ (kg. d)低分子肝素鈣。3檢測指標末次給藥後，戊巴比妥鈉麻醉大鼠，解剖，腹主靜脈取血測定生化指標，取肝臟進 行稱重。3. 1.肝功能試驗結果表明(詳見表1)，脂肪肝模型組大鼠血清ALT、AST含量與正常組相比大 幅度升高，各給藥組的大鼠血清ALT、AST含量與模型組相比明顯下降，尤其是，複方各劑量 組與模型組相比具有極顯著性差異，與吡組或低分子肝素組相比有極顯著性差異，這說明 吡咯列酮低分子肝素在對大鼠脂肪肝的預防或治療上取得了協同性的作用。表1複方對大鼠模型肝功能的影響
與模型組比較，*P < 0. 05 ；與模型組比較，**P <0.01；與吡格列酮組比較，flP < 0. 05 ；與吡格列酮組比較，##P < 0. 01 ；與低分子肝素組比較，TP<0. 05 ；與低分子肝素組比較，TTP<0. 013. 2 血脂試驗結果表明(詳見表2)，複方各劑量組的總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽 固醇和低密度脂蛋白膽固醇的水平與大鼠脂肪肝模型組相比有顯著性差異或極顯著性差 異，與吡咯列酮組或低分子量肝素組相比也具有顯著性差異或極顯著性差異(高密度脂蛋 白水平除外)，這說明吡咯列酮組與低分子量肝素聯合應用，在大鼠脂肪肝模型上，在降低 TG、TC和LDL-C上取得了很好的協同作用。表2複方對大鼠血脂的影響 與模型組比較，*P < 0. 05 ；與模型組比較，**P <0.01；與吡格列酮組比較，flP < 0. 05 ；與吡格列酮組比較，##P < 0. 01 ；與低分子肝素組比較，TP<0. 05 ；與低分子肝素組比較，"P<0. 01
3. 3.肝指數試驗結果表明(詳見表3)，脂肪肝模型組大鼠肝指數與正常組相比有極顯著性差 異，各給藥組的大鼠的肝指數與模型組相比有極顯著性差異，尤其是，複方各劑量組與吡組 或低分子肝素組相比有顯著性差異或極顯著性差異，這說明吡咯列酮低分子肝素複方在大 鼠脂肪肝模型上，在降低肝臟指數這個指標上取得了很好的協同作用。表3複方對大鼠臟器指數的影響 與正常組比較，yP <0.05;與正常組比較，yyP <0.01;與模型組比較，*P < 0. 05 ；與模型組比較，**P <0.01；與吡格列酮組比較，flP < 0. 05 ；與吡格列酮組比較，##P < 0. 01 ；與低分子肝素組比較，TP<0.05 ；與低分子肝素組比較，」P<0. 01實施例2吡格列酮和肝素對非酒精性脂肪肝的治療1非酒精性脂肪肝模型的製備同實施例1。2分組與給藥模型大鼠適應性飼養1周後，隨機分成正常組、模型組以及給藥組，具體分組情況 見下表，每組10隻。每天下午14:30時灌胃藥物，劑量如下正常對照組同體積的羧甲基纖維素鈉；模型對照組同體積的羧甲基纖維素鈉；吡格列酮組1. 5mg/ (kg. d)鹽酸吡格列酮；肝素組6mg/ (kg. d)肝素鈉；複方組1.5mg/ (kg. d)吡格列酮 +6mg/ (kg. d)肝素鈉；3檢測指標末次給藥後，戊巴比妥鈉麻醉大鼠，解剖，腹主靜脈取血測定生化指標，取肝臟進 行稱重。
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3. 1.肝功能試驗結果表明(詳見表4)，脂肪肝模型組大鼠血清ALT、AST含量與正常組相比大 幅度升高，各給藥組的大鼠血清ALT、AST含量與模型組相比明顯下降，尤其是，複方組與模 型組相比具有極顯著性差異，與吡組或肝素組相比有極顯著性差異，這說明吡咯列酮肝素 複方在大鼠脂肪肝模型上，其保護肝臟的的作用起到了協同性的效果。表4複方對大鼠模型肝功能的影響 與模型組比較，*P < 0. 05 ；與模型組比較，**P <0.01；與吡格列酮組比較，flP < 0. 05 ；與吡格列酮組比較，##P < 0. 01 ；與肝素組比較，TP<0. 05 ；與肝素組比較，」Ρ<0. 013. 2 血脂試驗結果表明(詳見表5)，複方組的總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇和 低密度脂蛋白膽固醇的水平與大鼠脂肪肝模型組相比有極顯著性差異，與吡咯列酮組或肝 素組相比也具有顯著性差異或極顯著性差異(高密度脂蛋白水平除外)，這說明吡咯列酮 組與肝素聯合應用，在大鼠脂肪肝模型上，在降低TG、TC和LDL-C上取得了很好的協同作用。表5複方對大鼠血脂的影響 與模型組比較，*P < 0. 05 ；與模型組比較，**P <0.01；與吡格列酮組比較，flP < 0. 05 ；與吡格列酮組比較，##P < 0. 01 ；與肝素組比較，TP<0. 05 ；與肝素組比較，」P<0. 01
3.3.肝指數試驗結果表明(詳見表6)，脂肪肝模型組大鼠肝指數與正常組相比有極顯著性差 異，各給藥組的大鼠的肝指數與模型組相比有極顯著性差異，尤其是，複方組與吡組或肝素 組相比有顯著性差異或極顯著性差異，這說明吡咯列酮肝素複方在大鼠脂肪肝模型上，在 降低肝臟指數這個指標上取得了很好的協同作用。表6複方對大鼠臟器指數的影響 與正常組比較，yP <0.05;與正常組比較，yyP <0.01;與模型組比較，*P < 0. 05 ；與模型組比較，**P <0.01；與吡格列酮組比較，flP < 0. 05 ；與吡格列酮組比較，##P < 0. 01 ；與肝素組比較，TP<0. 05 ；與肝素組比較，」P<0. 01實施例3複方膠囊的製備肝素鈣2g鹽酸吡格列酮20g預膠化澱粉180g甘露醇160g乳糖80g6 % PVP的95 %乙醇溶液適量微粉矽膠4. 5g製備工藝將處方中的肝素鈣、鹽酸吡格列酮、預膠化澱粉、甘露醇、乳糖和微粉矽 膠分別過100目篩，混勻，加6% PVP的95%乙醇溶液適量制粒，60°C烘乾，18目篩整粒，膠
囊充填即可。本實施例中的肝素鈣也可用低分子肝素鈣或低分子肝素鈉代替。實施例4複方緩釋片的製備處方低分子肝素鈣50g鹽酸吡格列酮0. 5g交聯羧甲基澱粉鈉180g0104]微晶纖維素IlOg
0105]乙基纖維素5g
0106]維生素EIOg
0107]硬脂酸鎂3.5g
0108]製備工藝按緩釋片的製備工藝製備成緩釋片即可。
0109]本實施例中的低分子肝素鈣也可用肝素鈣或肝素鈉代替。
0110]實施例5複方單層片的製備
0111]處方
0112]肝素鈉7. 5g0113]鹽酸吡格列酮15g0114]交聯羧甲基澱粉鈉150g0115]微晶纖維素120g0116]維生素E12g0117]硬脂酸鎂3. 5g0118]製備工藝肝素鈉、鹽酸吡咯列酮經過粉碎、過篩工序，與處方量的其他輔料混勻，
然後按常規片劑的製備工藝製備成所需片劑即可。本實施例中的肝素鈉也可用低分子肝素鈣或低分子肝素鈉代替。實例6複方雙層片的製備
0121]a、鹽酸吡格列酮Ig
0122]羧甲基纖維素鈉15g
0123]處理瓊脂IOg
0124]微晶纖維素95g
0125]6% PVP的無水乙醇溶液適量
0126]硬脂酸鎂1.5g 製備工藝鹽酸吡格列酮過100目篩，羧甲基纖維素鈉、微晶纖維素、處理瓊脂過 80目篩，稱取處方量的吡格列酮和羧甲基纖維素鈉、微晶纖維素、處理瓊脂混合均勻，加入 6% PVP無水乙醇溶液適量制粒，60°C乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。b、低分子肝素鈉25g羥丙基纖維素45g維晶纖維素20g6% PVP的無水乙醇溶液適量山榆酸甘油酯2g製備工藝低分子肝素鈉過100目篩，羥丙基纖維素、維晶纖維素過80目篩，稱取 處方量的低分子肝素和羥丙基纖維素、維晶纖維素混合均勻，加入6% PVP的無水乙醇溶液 適量制粒，60°C乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。本實施例中的低分子肝素鈉也可用肝素鈉或肝素鈣代替。C、將上述a，b兩種組分採用雙層壓片機衝壓片即得雙層片。實例7複方雙層片
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a、鹽酸吡格列酮IOg交聯羧甲纖維素鈉15g羧甲基澱粉鈉30g微晶纖維素18g6% PVP的無水乙醇溶液適量硬脂酸鎂1.5g 製備工藝鹽酸吡格列酮過100目篩，交聯羧甲纖維素鈉、羧甲基澱粉鈉、微晶纖 維素過80目篩，稱取處方量的吡格列酮和交聯羧甲纖維素鈉、羧甲基澱粉鈉、微晶纖維素 混合均勻，加入6% PVP無水乙醇溶液適量制粒，60°C乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入
處方量的硬脂酸鎂。b、低分子肝素鈣50g羥丙基纖維素25g微晶纖維素30g6% PVP的無水乙醇溶液適量山榆酸甘油酯2g製備工藝低分子肝素鈣過100目篩，羥丙基纖維素、微晶纖維素過80目篩，稱取 處方量的低分子肝素和羥丙基纖維素、微晶纖維素混合均勻，加入6% PVP的無水乙醇溶液 適量制粒，60°C乾燥，16目篩整幹顆粒，幹顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。本實施例中的低分子肝素鈣也可用肝素鈣或肝素鈉代替。C、將上述a，b兩種組分採用雙層壓片機衝壓片即得雙層片。
權利要求
一種含有鹽酸吡格列酮和肝素或低分子肝素的藥物組合物，其在製備治療脂肪肝的藥物中的用途。
2.如權利要求1所述的用途，其特徵在於，所述低分子肝素效價以104.4IU/mg計，低分 子肝素與鹽酸吡格列酮的重量比為0. 1 100 1。
3.如權利要求1所述的用途，其特徵在於，所述低分子肝素效價以104.4IU/mg計，低分 子肝素與鹽酸吡格列酮的重量比為0.5 25 1。
4.如權利要求1所述的用途，其特徵在於，所述低分子肝素效價以104.4IU/mg計，低分 子肝素與鹽酸吡格列酮的重量比為2. 5 6 1。
5.如權利要求1所述的用途，其特徵在於，所述肝素效價以179IU/mg計，肝素與鹽酸吡 格列酮的重量比為0. 1 100 1。
6.如權利要求1所述的用途，其特徵在於，所述肝素效價以179IU/mg計，肝素與鹽酸吡 格列酮的重量比為0.5 25 1。
7.如權利要求1所述的用途，其特徵在於，所述肝素效價以179IU/mg計，肝素與鹽酸吡 格列酮的重量比為2. 5 6 1。
8.如權利要求1-7任一所述的用途，其特徵在於，所述肝素或低分子肝素的可藥用鹽 為鈣鹽、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鐵鹽。
9.如權利要求1-7任一所述的用途，其特徵在於，所述藥物組合物為口服固體製劑。
10.如權利要求9所述的用途，其特徵在於，所述口服固體製劑為普通片劑、膠囊、雙層 片或緩釋片。
全文摘要
本發明具體涉及吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽或它們的衍生物，在製備一種藥物組合物中的應用，特別在製備一種預防或治療脂肪肝的藥物中的應用。通過動物試驗研究證實了吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽在降低大鼠肝細胞中脂肪沉積的用途，也證實了吡咯列酮和肝素、低分子肝素複方對大鼠脂肪肝的預防或治療有協同作用，為尋找降低肝細胞內脂肪沉積藥物、治療臨床上脂肪肝等脂質代謝紊亂引起的疾病提供了新的候選藥物，豐富了現有技術。
文檔編號A61K31/727GK101884643SQ200910136329
公開日2010年11月17日 申請日期2009年5月11日 優先權日2009年5月11日
發明者趙志全, 陳凱 申請人:魯南製藥集團股份有限公司