一種複合食用菌多糖的提取方法
2023-05-04 21:26:56
一種複合食用菌多糖的提取方法
【專利摘要】一種複合食用菌多糖的提取方法，所述的提取方法的具體步驟為：步驟1、材料預處理；步驟2、微波提取；步驟3、熱水浸提；步驟4、超聲提取；步驟5、製備洗脫液；步驟6、製備截留液；步驟7、濃縮；步驟8、醇沉；步驟9、離心；步驟10、乾燥。本發明採用熱水浸提、超聲提取和微波提取三種方法對複合食用菌多糖進行提取，更好的保留了多糖的結構，且使多糖的提取率與現有方法相比達到最大。
【專利說明】一種複合食用菌多糖的提取方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種多糖提取方法，特別是一種複合食用菌多糖的提取方法。
【背景技術】
[0002]食用菌是指子實體碩大、可供食用的蕈菌(大型真菌)，通稱為蘑菇。中國已知的食用菌有350多種，其中多屬擔子菌亞門，常見的有:香菇、草菇、蘑菇、木耳、銀耳、猴頭、竹蓀、鬆口蘑(松茸)、口蘑、紅菇和牛肝菌等。
[0003]食用菌不僅味美，而且營養豐富，常被人們稱作健康食品。食用菌中含有生物活性物質如:高分子多糖、β —葡萄糖和RNA複合體、天然有機鍺、核酸降解物、cAMP和三萜類化合物等對維護人體健康有重要的利用價值，食用菌的藥用保健價值有:①抗癌作用:食用菌的多糖體，能刺激抗體的形成，提高並調整機體內部的防禦能力。能降低某些物質誘發腫瘤的發生率，並對多種化療藥物有增效作用。此外慄蘑中富含的有機硒，可作補硒食品，若長期食用，幾乎可以防止一切癌變。②抗菌、抗病毒作用。③降血壓、降血脂、抗血栓、抗心律失常、強心等。④健胃、助消化作用。⑤止咳平喘、祛痰作用。⑥利膽、保肝、解毒。⑦降血糖。⑧通便利尿。⑨免疫調節。
[0004]食藥用菌多糖是繼核酸和蛋白質之後的另一種有待深入研究的生物大子，食藥用真菌多糖是主要存在於菌絲體細胞內分泌到細胞外的大分子化合物，是很好的免疫調節增強劑，可以從根本上提高人體免疫功能，起到扶正固本強身保健的功能。
[0005]本發明選取常見且營養豐富、多糖含量高的猴頭菇、香菇、黑木耳、姬松茸四種食用菌為原料，進行多糖的提取，這四種食用菌多糖是作為保健食品原料的熱門選擇，本發明同時進行多糖的提取，避免了單獨提取的繁瑣工序，也使提取的多糖結構類型豐富、達到複合功能強大的作用。
[0006]本發明採用熱水浸提、超聲提取和微波提取三種方法對複合食用菌多糖進行提取，更好的保留了多糖的結構，且使多糖的提取率與現有方法相比達到最大。
【發明內容】
[0007]本發明提供了一種複合食用菌多糖的提取方法。
[0008]本發明的目的通過以下技術方案來實現:一種複合食用菌多糖的提取方法，所述的提取方法的具體步驟為:
步驟1、材料預處理:取猴頭菇、香菇、黑木耳、姬松茸子實體，分別使用粉碎機粉碎，粉碎後過70-90目篩，按1:1:1:1的比例稱重混合，得到食用菌混合體；
步驟2、微波提取:取步驟I中食用菌混合體，按食用菌混合體與水1:10-20的重量配t匕，加水浸泡2-4小時，然後對浸泡過的食用菌混合體進行微波處理5-20min，調節微波發生器的功率為600-1000?，然後進行固液分離，得到固形物、提取液；
步驟3、熱水浸提:取步驟2中固形物，按固形物與水1:10- 20的重量配比，將固形物置於80-90°C的熱水中浸提2-6小時，進行固液分離，得到固形物、提取液； 步驟4、超聲提取:取步驟3中固形物，按固形物與水1:10- 20的重量配比，將固形物置於20-40°C的熱水中，超聲提取10-60分鐘，進行固液分離，提取液備用；
步驟5、製備洗脫液:合併三次提取液，用稀鹽酸調節混合提取液pH為4.0?4.5，上層析柱，柱內填充介質為HD-3樹脂，4?5BV/h流速下層析脫色脫蛋白，收集6?7BV洗脫液；
步驟6、製備截留液:調節洗脫液pH為6.5?7.5，在0.1?0.25Mpa壓力條件下，用50KD的超濾膜和1KD的陶瓷膜進行超濾，兩次收集截留液；
步驟7、濃縮:將步驟6得到的截留液混合，然後置於旋轉蒸發儀內，在50-60°C下進行減壓濃縮，濃縮至原體積的1/4，得到濃縮液；
步驟8、醇沉:採用80-90%的食用乙醇，按濃縮液與乙醇1:2的比例進行攪拌混合，多糖沉澱於容器基部；
步驟9、離心:將加入乙醇後的濃縮液置1-4 °C的低溫下靜置18-30小時後，以2500-4000r/min的轉速離心20-30min,收集離心杯底部多糖；
步驟10、乾燥:將收集的多糖置於電熱真空乾燥箱內，在40-70°C的溫度條件下真空乾燥，得到一種複合食用菌多糖。
[0009]本發明的有益效果:
(I)本發明採用熱水浸提、超聲提取和微波提取三種方法法對複合食用菌多糖進行提取，此種方法快速高效。
[0010](2)應用樹脂層析柱進行脫色脫蛋白，除去了蛋白質等分子雜質，使提取的多糖含量更高、更純。
[0011](3)本發明同時提取猴頭菇、香菇、黑木耳、姬松茸四種食用菌的多糖物質，避免單獨提取的複雜工序，使獲得的多糖含量高，種類全。
【具體實施方式】
[0012]實施例1
1)材料預處理:取猴頭菇、香菇、黑木耳、姬松茸子實體，分別經粉碎，過80目篩，按1:1:1:1比例稱重混合，待提取；
2)微波提取:取步驟I)中食用菌混合體，按重量配比1:10加水浸泡4小時，調節微波發生器的功率為600w，對上述浸泡過的食用菌混合體進行微波處理1min後進行固液分離，固形物進行後續提取，液體待用；
3)熱水浸提:取步驟2)中固形物，按重量配比1:10加入到80-90°C的熱水內浸提2小時，進行固液分離，固形物進行後續提取，液體待用；
4)超聲提取:取步驟3)中固形物，按重量配比1:10加入到20-40°C的熱水中，超聲提取20分鐘；進行固液分尚，液體待用；
5)製備洗脫液:合併三次提取液，用稀鹽酸調節濾液pH為4.0?4.5，上層析柱，柱內填充介質為HD-3樹脂，4?5BV/h流速下層析脫色脫蛋白，收集6?7BV洗脫液；
6)製備截留液:調節洗脫液pH為6.5?7.5，在0.1?0.25Mpa壓力下，用超濾膜為50KD和1KD的陶瓷膜進行超濾，收集中間截留液；
7)濃縮:將上述步驟6)得到的混合液混合後置旋轉蒸發儀內，在50-60°C進行減壓濃縮，濃縮至原體積的1/4即可；
8)醇沉:採用80-90%的食用乙醇，按濃縮液與乙醇1:2的比例進行攪拌混合，多糖沉澱於容器基部；
9)離心:將加入乙醇後的濃縮液置1-4°C的低溫下靜置18-30小時後，以4000r/min的轉速離心20-30min，收集離心杯底部多糖；
10)乾燥:將收集的多糖置電熱真空乾燥箱內，在40-70°C以下真空乾燥，得到複合食用菌多糖。
[0013]提取的複合食用菌多糖得率25.68%。
[0014]實施例2
1)材料預處理:取猴頭菇、香菇、黑木耳、姬松茸子實體，分別經粉碎，過80目篩，按比例稱重混合，待提取；
2)微波提取:取步驟I)中食用菌混合體，按重量配比1:10加水浸泡3小時，調節微波發生器的功率為600w，對上述浸泡過的食用菌混合體進行微波處理15min後進行固液分離，固形物進行後續提取，液體待用；
3)熱水浸提:取步驟2)中固形物，按重量配比1:10加入到80-90°C的熱水內浸提3小時，進行固液分離，固形物進行後續提取，液體待用；
4)超聲提取:取步驟3)中固形物，按重量配比1:10加入到20-40°C的熱水中，超聲提取30分鐘；進行固液分尚，液體待用；
5)製備洗脫液:合併三次提取液，用稀鹽酸調節濾液pH為4.0?4.5，上層析柱，柱內填充介質為HD-3樹脂，4?5BV/h流速下層析脫色脫蛋白，收集6?7BV洗脫液；
6)製備截留液:調節洗脫液pH為6.5?7.5，在0.1?0.25Mpa壓力下，用超濾膜為50KD和1KD的陶瓷膜進行超濾，收集中間截留液；
7)濃縮:將上述步驟6)得到的混合液混合後置旋轉蒸發儀內，在50-60°C進行減壓濃縮，濃縮至原體積的1/4即可；
6)醇沉:採用80-90%的食用乙醇，按濃縮液與乙醇1:2的比例進行攪拌混合，多糖沉澱於容器基部；
7)離心:將加入乙醇後的濃縮液置1-4°C的低溫下靜置18-30小時後，以4000r/min的轉速離心20- 30min，收集離心杯底部多糖；
8)乾燥:將收集的多糖置電熱真空乾燥箱內，在40-70°C以下真空乾燥，得到複合食用菌多糖。
[0015]提取的複合食用菌多糖得率29.65%。
【權利要求】
1.一種複合食用菌多糖的提取方法，其特徵在於:所述的提取方法的具體步驟為:步驟1、材料預處理:取猴頭菇、香菇、黑木耳、姬松茸子實體，分別使用粉碎機粉碎，粉碎後過70-90目篩，按1:1:1:1的比例稱重混合，得到食用菌混合體； 步驟2、微波提取:取步驟1中食用菌混合體，按食用菌混合體與水1:10-20的重量配比，加水浸泡2-4小時，然後對浸泡過的食用菌混合體進行微波處理5-20011調節微波發生器的功率為600-1000^然後進行固液分離，得到固形物、提取液； 步驟3、熱水浸提:取步驟2中固形物，按固形物與水1:10- 20的重量配比，將固形物置於80-901的熱水中浸提2-6小時，進行固液分離，得到固形物、提取液； 步驟4、超聲提取:取步驟3中固形物，按固形物與水1:10- 20的重量配比，將固形物置於20-401的熱水中，超聲提取10-60分鐘，進行固液分離，提取液備用； 步驟5、製備洗脫液:合併三次提取液，用稀鹽酸調節混合提取液邱為4.0?4.5，上層析柱，柱內填充介質為冊-3樹脂，4?58^/1！流速下層析脫色脫蛋白，收集6?78乂洗脫液； 步驟6、製備截留液:調節洗脫液邱為6.5?7.5，在0.1?0.251%壓力條件下，用50X0的超濾膜和101(0的陶瓷膜進行超濾，兩次收集截留液； 步驟7、濃縮:將步驟6得到的截留液混合，然後置於旋轉蒸發儀內，在50-601下進行減壓濃縮，濃縮至原體積的1/4，得到濃縮液； 步驟8、醇沉:採用80-90%的食用乙醇，按濃縮液與乙醇1:2的比例進行攪拌混合，多糖沉澱於容器基部； 步驟9、離心:將加入乙醇後的濃縮液置1-41的低溫下靜置18-30小時後，以2500-40001-/111111的轉速離心20-30111111，收集離心杯底部多糖； 步驟10、乾燥:將收集的多糖置於電熱真空乾燥箱內，在40-701的溫度條件下真空乾燥，得到一種複合食用菌多糖。
【文檔編號】C08B37/00GK104403019SQ201410700116
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年11月28日 優先權日:2014年11月28日
【發明者】戴路 申請人:哈爾濱墨醫生物技術有限公司