從澤漆中提取的一種葡萄糖苷及其製備方法
2023-04-23 15:46:16
專利名稱：從澤漆中提取的一種葡萄糖苷及其製備方法
技術領域：
本發明涉及從澤漆中提取的一種葡萄糖苷及其製備方法。
二背景技術：
澤漆是大戟屬(Euphorbia)植物澤漆(Euphorbia helioscopia L.)的乾燥全草，別名貓兒眼睛草、五鳳靈芝等，分布於除新疆、西藏以外的全國各地。長期以來澤漆一直作為民間草藥，味苦，性微寒，有毒，歸肺、小腸、大腸經。據《本草綱目》記載，澤漆有利水消腫、消痰退熱、散結殺蟲等功效。臨床用於治療腹水、水腫、肺結核、頸淋巴結核、痰多喘咳、癬瘡，民間還用於治療宮頸癌、食道癌等，並具有一定療效。澤漆在我國分布廣泛，資源十分豐富，並且具有顯著和多樣的臨床作用和藥理活性。目前對其化學成分的研究報導有二萜酯類，多酚類和黃酮類等；藥理作用方面，發現其具有抗腫瘤，平喘止咳，抑制蘑菇酪氨酸酶活性等作用。澤漆為何具有藥用價值，其活性成分如何提取，至今未見有公開報導。
三
發明內容
針對上述情況，為克服現有技術缺陷，本發明的目的就是提供一種從澤漆中提取的一種葡萄糖苷及其製備方法，可有效解決從澤漆中提取葡萄糖苷的問題，該提取的葡萄糖苷為313 ，713 ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二鵬烷_5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷，分子式是C26H4。01Q，結構式為
HO 其熔點為167 168°C，比旋光度為[a ]D2Q+46. 3(c，0. 21， MeOH)，其製備方法是將乾燥澤漆全草，室溫15-25t:下在閃式提取器(常用提取設備)中用50%丙酮組織破碎提取三次，每次15-20分鐘，合併提取液，於45t:減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，乾粉用水溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂DiaionHP-20柱，依次用水衝柱至洗脫液流出無色、用10%甲醇衝柱至洗脫液流出無色、用20%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，最後用30%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，收集30%甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，用水溶解，離心，上清液上凝膠Toyopearl冊-40C柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板(薄層板為公知常用試劑板)上展開，展開後用三氯化鐵-鐵氰化鉀顯色劑(三氯化鐵-鐵氰化鉀顯色劑為公知常用顯色劑)噴霧，得顯藍色的流分(即當展開後的洗脫液，在顯色劑噴霧後，顯示藍色時的液體，以下同)，收集該流分得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl HW-40C柱、凝膠S印hadex LH-20柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20柱，最後經製備液相純化，得到無色固體的313 ，713 ，15P-三羥基-2a氫，4 a氫，9 P氫，11 P氫-千金二萜烷_5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷。 本發明是一種新的化合物，其製備方法新穎獨特，先進、科學，操作方便，經對河南、雲南、廣西、湖南及浙江的澤漆樣品按上述方法經反覆應用製備，均取得了相同或相近似的結果，表明本發明可靠性強，有效解決了對各地從澤漆中提取的3|3，7|3，15|3-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二萜烷_5E， 12E-雙烯_14_酮-16_0_ P _D_葡萄糖苷，為澤漆的應用提供了有利的技術手段和藥用價值，經濟和社會效益巨大。
四
圖1為30，70，15 3-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖2為30，70，15 0-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖3為30，70，15 0-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖4為30，70，15 3-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖5為30，70，15 3-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖6為30，70，15 3-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖7為30，70，15 3-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖8為30，70，15 3-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖9為30，70，15 0-12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖10為3P，7e，15e12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖ll為3P，7e，15P12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
圖12為3P，7e，15P12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-
三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的結構三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的主要HMBC相關三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的力-NMR圖譜；
三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的13C_NMR圖譜；
三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的DEPT135圖譜；
三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的HSQC圖譜；
三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的HMBC圖譜；
三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的力」H COSY圖譜；
三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的N0ESY圖譜；
-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的IR圖譜；
-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的HR-ESI-MS圖譜；
-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二鵬烷-5E，葡萄糖苷的UV圖譜。
五具體實施例方式
以下結合實施例對本發明的具體實施方式
作詳細說明。 本發明所用的澤漆經鑑定為大戟科(Euphorbiaceae)大戟屬(Euphorbia)植物澤漆(Euphorbia helioscopia L.)。柱層析填料Diaion HP_20、 MCI Gel CHP-20為日本三菱化學公司生產，Toyopearl HW-40為日本TOSOH公司生產，S印hadexLH-20為Parmacia
5Biotech公司生產，柱層析所用矽膠H由青島海洋化工廠生產(160-200目)，薄層層析矽膠為青島海洋化工廠生產(顆粒範圍10-40iim)，以0.5XCMC-Na制板，陰乾，105t:活化0. 5h。 實施例1 將河南產乾燥澤漆全草1. Okg，室溫2(TC下在閃式提取器中用50%丙酮組織破碎提取三次，每次18分鐘，合併提取液，於45t:減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，乾粉用水溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂Diaion HP-20柱，依次用水衝柱至洗脫液流出無色、用10%甲醇衝柱至洗脫液流出無色、用20%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，最後用30%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，收集30%甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉8. 9g，用水溶解，離心，上清液上凝膠Toyopearl HW-40C柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開後用三氯化鐵_鐵氰化鉀顯色劑噴霧，得顯藍色的流分，收集該流分得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl冊-40C柱、凝膠S印hadexLH-20柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20柱，得到，7P ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二萜烷-5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0- P -D-葡萄糖苷19mg。
實施例2 將雲南或廣西產乾燥澤漆全草2. 0kg，室溫23t:下在閃式提取器中用50%丙酮組織破碎提取三次，每次20分鐘，合併提取液，於45t:減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，乾粉用水溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂Diaion HP-20柱，依次用水衝柱至洗脫液流出無色、用10%甲醇衝柱至洗脫液流出無色、用20%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，最後用30%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，收集30%甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉18. lg，用水溶解，離心，上清液上凝膠Toyopearl HW-40C柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開後用三氯化鐵_鐵氰化鉀顯色劑噴霧，得顯藍色的流分，收集該流分得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl HW-40C柱、凝膠S印hadexLH-20柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20柱，得到3P ，7P ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千金二萜烷-5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷40mg。
實施例3 將湖南或浙江產的乾燥澤漆全草1. 5kg，室溫25t:下在閃式提取器中用50%丙酮組織破碎提取三次，每次20分鐘，合併提取液，於45t:減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，乾粉用水溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂Diaion HP-20柱，依次用水衝柱至洗脫液流出無色、用10%甲醇衝柱至洗脫液流出無色、用20%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，最後用30%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，收集30%甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉13. 5g，用水溶解，離心，上清液上凝膠Toyopearl HW-40C柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開後用三氯化鐵_鐵氰化鉀顯色劑噴霧，得顯藍色的流分，收集該流分得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl冊-40C柱、凝膠S印hadexLH-20柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20柱，得到，7P ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二萜烷-5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷29mg。
對上述產品經分析研究，本發明的3P ，713 ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11 P氫-千金二萜烷_5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷的有關情況解析如下
，7P ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二萜烷_5E， 12E-雙
6烯-14-酮-16-0-P-D-葡萄糖苷，無色固體，其熔點為mp 167 168t:，比旋光度為[a] D2°+46. 3(c，0. 21，MeOH);易溶於甲醇。FeCl3_K3 [Fe (CN) 6]試劑噴霧後加熱顯淡藍色，提示該 化合物中含有羥基。茴香醛-濃硫酸噴霧後加熱顯灰紫色(105°C ) 。HR-ESI-MS(圖ll)m/z : 535. 2523[M+Na] + (計算值535. 2519)，提示分子式為C26H4。01Q (不飽和度為7) 。 UV(圖12): 入隨Me。Hnm(log e ) :280. lnm ;IR(KBr)(圖10) u隨cm—1 :3411， 2922， 1612， 1066。力-NMR(圖 3)譜中，低場區，S 7. 47(1H， d， J = 7. 5Hz， H_12)和S 6. 07(1H， d， J = 10. 8Hz， H_5)為 兩個三取代的雙鍵上的氫質子信號；高場區，有四個甲基的信號，分別位於S :1.77,1.48， 1. 20， 1. 11 (each 3H， s)。另外，在S 4. 28_1. 11之間有19個氫質子信號，包括一個糖的端 基氫的信號S4. 28(lH，d， J = 7.8Hz，H-l' )。 13C_NMR(圖4)譜中，共出現26個碳信號， 推測可能為二萜苷類化合物，其中20個為母核上的碳信號，6個為糖上的碳信號。
結合13C-NMR和DEPT-135 (圖5)譜可知該化合物含有4個CH3， 4個CH2， 13個CH 和5個季碳。SH:4. 28和S c :104. 7，78. 0，77. 9，75. 2，71. 7，62. 9提示含有一個葡萄糖，由 H-l'的J值可知為P構型;SH:1. 17(lH，m)，l. 53(lH，m)，l. 20(3H， s)和1. 11(3H， s)和 S c :32. 9， 30. 8， 25. 8， 29. 3， 16. 5提示含有一個順式偕二甲基取代的環丙烷結構片段，這種 結構片段廣泛存在於大戟科植物含有的二萜類化合物中。由力」H COSY譜(圖8)可推測 出兩個片段-CH2-CH(CH20R)-CH0R' —CH—CH—(A)禾P—CHOR' -CH2-CH-CH_CH-(B) [R = Glc，R' 二H]，是典型的千金二萜烷型二萜中的結構片段。HMBC譜(圖7)中，Se:92.2(C-15)與 S H :2. 52 (H-l a ) ， 1. 92 (H_l P ) ， 4. 11 (H_3)有遠程相關，說明結構中包含了 一個五元環。 Sc :72. 9 (C-16)與SH:4.28(H-1' ) ; SC:104.7(C-1')與S H :3. 56 (H-16 P )有遠程相 關，推測葡萄糖與二萜母核的C-16相連。另外，C-5， C-6， C-7與17-Me ;C_12， C_13， C-14 與20-Me有遠程相關，說明兩個甲基分別與C-6， C-13相連，C-14為酮羰基碳。
NOESY譜(圖9)中，以H_4為參考，假定為a構型(或者以C_15上的含氧取代基 為參考，假定為P構型)，H-3與H-4， H-2 ;H-16 a和H_l a ， H_2 ;H_12與H_5， H_9， H_19， H-8P ;H-5與H-8P ， H-12 ;H_7與H_8 a ， Me_20， Me_17之間有交叉峰，提示3_0H， 7_0H， 15-0H，H-9和H-11是P構型，而H-2，H-3，Me-17和Me-20是a構型。另外，H_5與Me_17 ; H-12與Me-20之間沒有交叉峰，同時，H_7與Me_17， H_8 a ， Me_20之間有交叉峰，說明兩 個雙鍵都是E型的。綜上，並結合參考文獻，確定該化合物的結構為3 13 ， 7 13 ， 15 13 -三羥 基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二萜烷_5E， 12E_雙烯_14_酮-16-0-P _D_葡萄 糖苷(3 P ， 7 P ， 15 P -trihydroxy-2 a H， 4 a H， 9線11 P H-lathyra-5E， 12E-diene-14-one -16-0-P -D-glucopyranoside.)。經文獻檢索未見報導，確定其為一新化合物。
下表為化合物313 ，713 ，1513-三羥基_2a氫，4a氫，9P氫，11P氫-千 金二萜烷_5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-P -D-葡萄糖苷的"H-NMR (400MHz ， CD30D) 和13C-NMR(100MHz， CD30D)數據
No.Sc( DEPT )sH
la IP40.1(CH2)2.52(1H， m) 1.92(1H, (!，■/= 6.3 Hz)
247.6(CH)2.52(1H， m)
378.7(CH)4.11(1H， (!(!,■/= 3.5， 6.9 Hz)
450.7 (CH)2.48 (1H, nO
5123.3(CH)6.07(1H， d,/= 10.8 Hz)
6144.2(C)
776.4(CH)3.93(1H, m)
8a sp37.0(CH2)2.26(1H, m) 1.80(lH,m)
932.9(CH)L17(lH，m)
1025.8(C)
1130.8(CH)1.53(1H,m)
12152.6(CH;)7.47(1 H， d,/= 11.9 Hz)
13133.3(C)
14201.7(C)
1592.2(C)
16a 16P72.9(CH2)楊(1H, m) 3.56(1H，dd,^6.0，6.4 Hz)
1719.3(CH3)1.48(3H, s)
1829.3(CH3)1.20(3H，s)
1916.5(CH3)1.11(3H, s)
2012.4(CH3)1.77(3H, s)
glc
1，io4.7(ch; 4.28(1H, (1,7= 7.8 Hz)
2,75.2(CH)3,17(1H,t,8.0, 8.9 Hz)
3,77.9(CH)
4,71.7(CH)3.38-3.26(3H， m)
5'78.0(CH)3.88(lH,d，/= 11.6 Hz)
6162.9(CH2)3.66(1H， dt,J-4.1，9.3 Hz) 注該表給出了該化合物的碳氫歸屬，證明結構解析的正確性。
8
權利要求
一種從澤漆中提取的葡萄糖苷，其特徵在於，該葡萄糖苷為3β，7β，15β-三羥基-2α氫，4α氫，9β氫，11β氫-千金二萜烷-5E，12E-雙烯-14-酮-16-O-β-D-葡萄糖苷，分子式是C26H40O10，結構式為F200910065908XC00011.tif
2. 權利要求1所述的一種從澤漆中提取的葡萄糖苷的製備方法，其特徵在於，將乾燥 澤漆全草，室溫15-25t:下在閃式提取器中用50%丙酮組織破碎提取三次，每次15-20分 鍾，合併提取液，於45t:減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，乾粉用水溶解，離心，上清液 上大孔吸附樹脂Diaion HP-20柱，依次用水衝柱至洗脫液流出無色、用10%甲醇衝柱至洗 脫液流出無色、用20%甲醇衝柱至洗脫液流出無色、最後用30%甲醇衝柱至洗脫液流出無 色，收集30 %甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，用水溶解，離心，上清液上 凝膠Toyopearl HW-40C柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開後用 三氯化鐵-鐵氰化鉀顯色劑噴霧，得顯藍色的流分，收集該流分得到組分A，組分A依次通過 凝膠Toyopearl HW-40C柱、凝膠S印hadex LH-20柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20柱，最後經 製備液相純化，得到無色固體的313 ，713 ，1513-三羥基-2a氫，4 a氫，9 P氫，11 P氫-千 金二萜烷_5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷。
3. 根據權利要求2所述的從澤漆中提取的葡萄糖苷的製備方法，其特徵在於，將河南 產乾燥澤漆全草1.0kg，室溫2(TC下在閃式提取器中用50%丙酮組織破碎提取三次，每次 18分鐘，合併提取液，於45t:減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，乾粉用水溶解，離心，上 清液上大孔吸附樹脂Diaion HP-20柱，依次用水衝柱至洗脫液流出無色、用10%甲醇衝柱 至洗脫液流出無色、用20%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，最後用30%甲醇衝柱至洗脫液流 出無色，收集30%甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉8. 9g，用水溶解，離心， 上清液上凝膠Toyopearl HW-40C柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開， 展開後用三氯化鐵_鐵氰化鉀顯色劑噴霧，得顯藍色的流分，收集該流分得到組分A，組分 A依次通過凝膠Toyopearl冊-40C柱、凝膠S印hadexLH-20柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20 柱，得到313 ，713 ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二鵬烷_5E， 12E-雙 烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷19mg。
4. 根據權利要求2所述的從澤漆中提取的葡萄糖苷的製備方法，其特徵在於，將雲南或廣西產乾燥澤漆全草2. 0kg，室溫23t:下在閃式提取器中用50%丙酮組織破碎提取三次，每次20分鐘，合併提取液，於45t:減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，乾粉用水溶解，離心，上清液上大孔吸附樹脂Diaion HP-20柱，依次用水衝柱至洗脫液流出無色、用10%甲醇衝柱至洗脫液流出無色、用20%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，最後用30%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，收集30%甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉18. lg，用水溶解，離心，上清液上凝膠Toyopearl冊-40C柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開後用三氯化鐵_鐵氰化鉀顯色劑噴霧，得顯藍色的流分，收集該流分得到組分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl冊-40C柱、凝膠S印hadexLH-20柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20柱，得到，7P ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二鵬烷-5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷40mg。
5.根據權利要求2所述的從澤漆中提取的葡萄糖苷的製備方法，其特徵在於，將湖南 或浙江產的乾燥澤漆全草1. 5kg，室溫25t:下在閃式提取器中用50%丙酮組織破碎提取三 次，每次20分鐘，合併提取液，於45t:減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉，乾粉用水溶解， 離心，上清液上大孔吸附樹脂Diaion HP-20柱，依次用水衝柱至洗脫液流出無色、用10% 甲醇衝柱至洗脫液流出無色、用20%甲醇衝柱至洗脫液流出無色，最後用30%甲醇衝柱至 洗脫液流出無色，收集30%甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，真空乾燥後得到乾粉13. 5g，用水 溶解，離心，上清液上凝膠Toyopearl冊-40C柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層 板上展開，展開後用三氯化鐵_鐵氰化鉀顯色劑噴霧，得顯藍色的流分，收集該流分得到組 分A，組分A依次通過凝膠Toyopearl冊-40C柱、凝膠S印hadexLH-20柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20柱，得到，7P ，15P-三羥基-2a氫，4a氫，9P氫，11P氫_千金二鵬烷-5E， 12E-雙烯-14-酮-16-0-13 -D-葡萄糖苷29mg。
全文摘要
本發明涉及從澤漆中提取的一種葡萄糖苷及其製備方法，有效解決從澤漆中提取葡萄糖苷的問題，葡萄糖苷為3β，7β，15β-三羥基-2α氫，4α氫，9β氫，11β氫-千金二萜烷-5E，12E-雙烯-14-酮-16-O-β-D-葡萄糖苷，將乾燥澤漆全草用丙酮組織破碎提取三次，提取液減壓乾燥得乾粉，乾粉用水溶解，離心，上清液上樹脂柱，依次用水、甲醇分別衝柱至洗脫液流出無色，收集甲醇洗脫液，減壓回收溶劑，乾燥得乾粉，用水溶解，離心，上清液上凝膠柱，用水衝柱，得洗脫液，將洗脫液點滴在薄層板上展開，展開後用三氯化鐵-鐵氰化鉀顯色劑噴霧，得顯藍色的流分，該流分依次通過凝膠柱、矽膠柱、MCI Gel CHP-20柱，經製備液相純化，即得，其製備方法操作方便，可靠性強，經濟和社會效益巨大。
文檔編號C07H1/08GK101709070SQ200910065908
公開日2010年5月19日 申請日期2009年8月24日 優先權日2009年8月24日
發明者馮衛生, 王小蘭, 鄭曉珂, 高麗 申請人:河南中醫學院