近紅外透射光譜法測定丹酚酸提取物中丹酚酸b的含量的製作方法

2023-05-21 03:46:51

專利名稱：近紅外透射光譜法測定丹酚酸提取物中丹酚酸b的含量的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥提取物的含量測定方法，特備涉及一種丹酚酸提取物中丹酚酸B的含量測定精方法。
背景技術：
丹參為唇形科植物丹參(Salvia miltiorrhiza Bge)的乾燥根及根莖,性苦、微寒，歸心、肝經，具有祛瘀止痛、活血通經、清心除煩之功效，是常用的活血化淤中藥。丹酚酸提取物是丹參藥材經提取後的水溶性部分，主要活性成分是以丹酚酸B為主的酚酸類物質，具有具有改善微循環、在抗肝臟損傷。[I 2]。目前，丹酚酸提取中主要成分丹酚酸B的含量測定主要用高效液相色譜法，高效液相色譜法具有定量準確，重現性好，但是一般需要進行複雜的前處理，分析周期長，難以在生產過程中對丹酚酸提取物進行有效的在線檢測。近紅外光譜法是近年來發展迅速的綠色技術，它無需對樣品進行複雜的預處理，能 同時測定多種成分，具有方便、快速、無汙染的特點，大大提高了分析效率，節約了分析成本[3 4]。本研究建立了近紅外透射射光譜技術測定丹酚酸提取物中丹酚酸B含量的模型，建立了一種中藥活性成分的快速、簡便的定量分析方法，同時也為生產過程中的在線監控奠定了基礎。

發明內容
本發明利用近紅外光譜儀透射光譜技術對丹酚酸提取物中丹酚酸B含量進行檢測分析。利用42份樣品的原始光譜經一階導數技術預處理，選取9746. 9 7498. 2cm-K6101. 9 5774. Icm-I及4601. 5 4424. Icm-I波段，並結合偏最小二乘回歸法(PLS)對丹酚酸B建立定量校正模型並分析，結果R2為98.43，內部交叉驗證均方差(RMSECV)為O. 0725，最佳維數為8。用建立的校正模型對17份樣品中的丹酚酸B進行了預測，預測誤差均方差(RMSEP)為O. 0847。該方法分析快速、簡便，結果準確可靠，同時也為近紅外技術應用於生產過程中的在線監控奠定了基礎。本發明提供一種測定丹酚酸提取物中丹酚酸B含量的方法，其特徵在於，用近紅外透射光譜法。本發明的方法，其特徵在於，包括以下步驟配置供試品，用近紅外透射光譜法進行測定，對測定結果進行處理，計算丹酚酸B含量。優選的本發明的方法包括以下步驟配置供試品，對近紅外透射光譜儀進行預熱30min,等儀器穩定，開始測量，即基線平穩和幹涉圖能量幅度達到8000左右，測量溫度26°C，溼度在30%左右，利用最小偏二乘法(PLS)進行實驗結果的處理。其中近紅外透射光譜的光譜條件為在基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，掃描波長範圍為4000 12000cm—1，掃描次數32次，解析度ScnT1光譜條件下進行測定進行圖譜掃描。
其中所述配置供試品，步驟如下取丹酚酸提取物適量，精密稱定，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。其中所述丹酚酸提取物可以根據現有技術製備，如以下中國專利中的方法
200410014137 丹參總酚酸的提取方法及其在藥學上的應用 200810136813 高純度丹酚酸B、製備方法及互雨 200810143644 一種中藥丹參有效成分的提取方法 200910233836 一種從新鮮丹參中提取丹酚酸B的方法也可以從市場上購買得到，如寶雞市虹源生物科技有限公司生產的丹酚酸提取 物，武漢市昌恒生物醫藥製品有限公司生產的丹酚酸提取物，以及來自天津天士力之驕藥業有限公司丹酚酸提取物。其中，最小偏二乘法(PLS)進行實驗結果的處理，採用以下方法運用近紅外透射色譜儀器自動優化系統自動優化，以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的預處理方法。優選的本發明的方法如下步驟1，配置樣品溶液，取丹酚酸提取物樣品適量，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得，步驟2，測定，將樣品供試液裝入Imm比色皿中，在近紅外液體透射光譜儀器以及在基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，掃描波長範圍為4000 UOOOcnf1，掃描次數32次，解析度ScnT1光譜條件下進行測定進行圖譜掃描，得到近紅外透射光譜數據，步驟3，對近紅外透射光譜數據數據進行處理，處理方法如下運用近紅外透射色譜儀器自動優化系統自動優化，以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的預處理方法，步驟4，結果計算，用偏最小二乘法(PLS)對處理結果進行計算，得到如下結果一階導數預處理後，運用偏最小二乘法(PLS)校正集樣品的NIR光譜與高效液相法測得的丹酚酸B含量進行回歸關聯，建立丹酚酸B的最優近紅外定量校正模型，選擇波段在9746. 9 7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1 及 4601. 5 4424. Icm-1,維數為 8，R2 為 O. 9843，內部交叉驗證均方差(RMSECV)為O. 0725，將建立的校正模型預測驗證集，結果相關係數為O. 9823，模型的外部驗證均方差(RMSEP)為O. 0847。本發明是的測定方法是經過篩選試驗獲得的，篩選試驗如下實驗部分2. I實驗儀器和材料Matrix-F (SFDA版)型傅立葉變換近紅外光譜儀(德國布魯克公司)，定量分析軟體為0PUS6. 5 ;高效液相色譜儀(化學工作站，四元泵，恆溫箱，檢測器，美國安捷倫科技有限公司)；Mettler XS105電子天平(上海梅特勒託利多儀器有限公司)；丹酚酸B標準品(中國藥品生物製品檢定所，批號111562-200605，供含量測定用)；乙腈(色譜純)，其它試劑(分析純)，水為超純水。丹酚酸提取物(來自天津天士力之驕藥業有限公司)。2. 2實驗方法2. 2. I高效液相色譜法測定丹酚酸B的含量2.2.11丹酚酸B標準品的製備取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加流動相使成ImL含O. 2mg的溶液，即可。2. 2. I. 2供試品的製備取每份丹酚酸提取物適量，精密稱定，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。 2. 2. 1.3高效液相色譜條件以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑(150·ιΧ4·6πιπι，5μ 柱)；以乙腈-水-磷酸(23. 5 76. 5 O. 02)為流動相；檢測波長為288nm，柱溫30°C ;流速為lmL/min ;進樣量為 10 μ L。2. 2. I. 4樣品的測定供試品溶液用O. 45 μ m微孔濾膜過濾，濾液和丹酚酸B對照品溶液按照「2. 2. I. 3液相色譜條件下」進行測定。2. 2. 2近紅外光譜的採集供試品溶液裝入Imm的石英比色皿中，採用儀器的液體透射檢測器掃描圖譜，掃描波長範圍為4000 12000CHT1，掃描次數32次，解析度8CHT1，每份樣品掃描3張，取其平均光譜，見圖I。採集的光譜數據，採用運用OPUS 6. 5數據分析軟體，進行數據處理和計算。3結果與討論3. I丹酚酸B定量分析模型的建立的方法根據丹酚酸B的含量測定結果，從收集到的59份樣品中，選取前42份有代表性的樣品做為校正集，採用偏最小二乘法建立校正模型；剩餘的17份樣品為驗證集，檢測校正模型的預測性能。校正集和驗證集中的丹酚酸B的含量分布情況見表I。以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的建模參數以獲得最優的校正模型，R2越大、RMSEC越小、表明校正模型建立越合理，RMSEP越小，表明模型的預測性能越好。表I校正集和驗證集中丹酚酸B的含量分布範圍表(mg/mL)
組成樣品數最小值最大值平均值校正集 42 0.2592 2.3481 1.0263
驗證集 17 0.3184 1.8637 1.05683. 2光譜波段選擇由於不同樣品的近紅外透射光譜圖十分接近，且樣品間的濃度差異不大，無法直接判斷丹酚酸B的含量與個別波長點的吸光度之間的相關性，不可能從某一個波長點來確定其含量。儘管PLS法允許處理全譜信息，但是建模波段過寬，必然含有大量的冗餘信息，由於各成分分子結構存在差異，使得各自對應的最優建模波段不相同，所以必須在一定的區間內建立數學模型來確定近紅外光譜和含量的關係，因此波段的選擇，有利於提高模型的預測準確性[5]。在近紅外透射光譜中，水分子在NIR圖譜中的7000CHT1和5100CHT1附近有一個很強的倍頻和合頻吸收帶，對其他分子吸收峰有幹擾，所以建模時要除去這兩個吸收譜段 7498. 2 6101. 9cm_1 和 5774. I 4601. 5cnT1[6] ；4424. I 4000cm-1 吸收譜段噪音較大，可能影響模型的預測能力；12000 7498. 2CHT1吸收譜段曲線光滑，沒有明顯吸收峰，並且噪音也較大，而 9746. 9 7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1 及 4601. 5 4424. IcnT1 區間譜段最豐富，能反映樣品的性質和組成間有關聯。3. 3光譜預處理方法的選擇在近紅外透射光譜採集過程中，光譜中會含有基線漂移、光散射以及儀器噪音等
幹擾信號，並且樣品的狀態和測量條件的差異都會給實驗結果帶來影響。所以選擇合適的光譜預處理技術能剔除幹擾信號，提取關鍵的有用信息，從而減少儀器基線不穩、儀器噪音等因素帶來的影響，提高模型建立穩定性和預測的準確性[卜8]。本實驗採用0PUS6. 5數據分析軟體，選擇在9746. 9 7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1及4601. 5 4424. IcnT1譜段內，進行數據分析，參考儀器自動優化功能，通過不斷調整進行優化選擇預處理方法。實驗過程中主要以模型的決定因子(R2)和內部驗證均方差(RMSECV)為指標進行檢測，R2越接近於100，RMSECV越小說明模型越好。最終發現一階導數預處理方法在其所有預處理方法中RMSECV最小，結合模型的決定因子R2。液體樣本採用透射近紅外色譜法採集光譜，選擇預處理方法時通常重點考慮的是如何消除儀器變異所引起的偏差和測量時間有關的光譜的漂移引起的誤差，這兩個方面也是模型失效的主要原因。而一階導數可以部分消除應用中儀器性能的變化對測量光譜的影響，強化譜帶特徵、克服譜帶重疊[9]。3. 3模型維數的確定採用偏最小二乘法建立校正模型，維數大小的選擇對模型的預測能力有很大的影響。在校正集樣本一定的情況下，維數太多，包含過多的測量噪音，出現過擬合現象；維數過少，光譜中一些有用信息未被包含而導致模型預測能力差。採用內部交叉驗證法，根據RMSECV值隨維數的變化見圖2，其最小的RMSECV值，對應的即為最佳維數，如圖所示，實驗最佳維數為8。3. 4模型的建立與評價樣品近紅外光譜經過一階導數預處理後，在9746.9 7498. 2(^^6101. 9 5774. IcnT1及4601. 5 4424. IcnT1波段內，選擇維數為8，運用偏最小二乘法(PLS)將42份校正集樣品的NIR光譜與高效液相法測得的丹酚酸B含量進行回歸關聯，建立丹酚酸B的最優近紅外定量校正模型，圖3為丹酚酸B預測值和測定值的相關圖。在建模過程中，運用軟體自動優化功能以及比較原始光譜圖剔除了 3個異常點(28、29和30號)，並剔除了偏離結果的樣品(40號)。3. 5丹酚酸B定量分析模型的檢驗將17份驗證集樣品的近紅外光譜輸入校正模型，預測丹酚酸B的含量，並與高效液相法測定值進行比較，驗證校正模型的準確性。模型的外部驗證均方差(RMSEP)為O. 0847，17份樣品的預測值和真實值相關係數為O. 9823，平均相對誤差為10. 55%，說明預測值和真實值相對吻合，可以看出模型有較好的預測能力，圖4為17個樣品的預測值和真實值之間的相關圖。3. 6實驗結果分析與討論近紅外技術分析樣品時預測準確度主要取決於建立模型時所採用的測定方法的準確度，還與儀器，測量環境、建模樣品的多少及代表性有關。對於常規的近紅外定量分析而言，本次實驗的樣品量偏少，同時模型的校正集樣品的濃度也不是均勻分布，可能導致部分結果也存在較大的預測誤差，所以在驗證集中預測值和真實值不是完全吻合的，其中有3個樣品相對偏差較大，都大於10%。分析其原因是可能是由於建立模型的校正集樣品較少，代表性不夠；有些樣品中丹酚酸B中的濃度相對較低，通過NIR檢測含量可能會產生很大的誤差，而且液體樣品受環境溫度溼度影響很大，溶液的顏色也會實驗結果產生影響。4.結論
中藥提取物是很複雜的物質，但通過近紅外建模方法對數據的擬合，可以較準確的預測中藥提取物中已知成分的含量，指導提取工藝的優化。該方法相對高效液相色譜法而言，既不需要進行複雜的樣品前處理、也不破壞樣品，更簡單，節省時間，同時作為在生產過程中在線檢測的前期研究，對中藥提取物的工藝優化和生產工藝過程中的質量控制具有很好的應用前景。本發明首次使用近紅外透射法測定丹酚酸提取物中丹酚酸B的含量，不需要複雜的前處理，操作簡便，可以用於丹酚酸B含量的快速測定。同時為以後生產過程中對丹酚酸提取物進行有效的在線檢測提供了前期研究，對中藥提取物的工藝優化和生產工藝過程中的質量控制具有很好的應用前景。


圖I.樣品近紅外透射光譜2RMSECV值隨維數的變化3校正集預測值和真值相關4外部驗證預測值和真實值之間的相關圖
具體實施例方式以下通過實施例進一步說明本發民，但不作為對本發明的限制。實施例I以來自天津天士力之驕藥業有限公司丹酚酸提取物作為樣品，測定其中的丹酚酸B的含量，測定方法如下步驟I配置樣品溶液，取丹酚酸提取物樣品適量，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。步驟2測定，將樣品供試液裝入1_比色皿中，在近紅外液體透射光譜儀器以及在基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，掃描波長範圍為4000 UOOOcnT1，掃描次數32次，解析度ScnT1光譜條件下進行測定進行圖譜掃描，得到近紅外透射光譜數據。步驟3，對近紅外透射光譜數據數據進行處理，處理方法如下運用近紅外透射色譜儀器自動優化系統自動優化，以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的預處理方法。步驟4，結果計算，用偏最小二乘法(PLS)對處理結果進行計算，得到如下結果一階導數預處理後，運用偏最小二乘法(PLS)校正集樣品的NIR光譜與高效液相法測得的丹酚酸B含量進行回歸關聯，建立丹酚酸B的最優近紅外定量校正模型，選擇波段在9746. 9 7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1 及 4601. 5 4424. Icm-1,維數為 8，R2 為 O. 9843，內部交叉驗證均方差(RMSECV)為O. 0725。將建立的校正模型預測驗證集，結果相關係數為O. 9823，模型的外部驗證均方差(RMSEP)為O. 0847。實施例2對比例，實施例I的樣品用HPLC法測定，方法如下
步驟I丹酚酸B標準品的製備取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加流動相使成ImL含O. 2mg的溶液，即可。步驟2供試品的製備取每份丹酚酸提取物適量，精密稱定，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。步驟3高效液相色譜條件色譜柱waters symmetry C18(150mmX4. 6mm, 5μηι 柱)；以乙臆-水-憐酸(23. 5 76. 5 O. 02)為流動相；檢測波長為288nm，柱溫30°C ;流速為lmL/min ;進樣量為 10 μ L。步驟4樣品的測定供試品溶液用O. 45 μ m微孔濾膜過濾，濾液和丹酚酸B對照品溶液按照液相色譜條件下進行測定。步驟5,結果計算通過液相圖譜可以得到樣品和丹酚酸B對照品的峰面積，採用外標一點法算出丹酚酸B的濃度。實施例3以來自寶雞市虹源生物科技有限公司生產的丹酚酸提取物作為樣品，測定其中的丹酚酸B的含量，測定方法如下步驟I配置樣品溶液，取丹酚酸提取物樣品適量，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。步驟2測定，將樣品供試液裝入Imm比色皿中，在近紅外液體透射光譜儀器以及在基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，掃描波長範圍為4000 12000CHT1，掃描次數32次，解析度ScnT1光譜條件下進行測定進行圖譜掃描，得到近紅外透射光譜數據。步驟3，對近紅外透射光譜數據數據進行處理，處理方法如下運用近紅外透射色譜儀器自動優化系統自動優化，以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的預處理方法。步驟4，結果計算，用偏最小二乘法(PLS)對處理結果進行計算，得到如下結果一階導數預處理後，運用偏最小二乘法(PLS)校正集樣品的NIR光譜與高效液相法測得的丹酚酸B含量進行回歸關聯，建立丹酚酸B的最優近紅外定量校正模型，選擇波段在9746. 9 7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1 及 4601. 5 4424. Icm-1,維數為 8，R2 為 O. 9843，內部交叉驗證均方差(RMSECV)為O. 0725。將建立的校正模型預測驗證集，結果相關係數為O. 9823，模型的外部驗證均方差(RMSEP)為O. 0847。實施例4以來自武漢市昌恒生物醫藥製品有限公司生產的丹酚酸提取物作為樣品，測定其中的丹酚酸B的含量，測定方法如下步驟I配置樣品溶液，取丹酚酸提取物樣品適量，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。步驟2測定，將樣品供試液裝入Imm比色皿中，在近紅外液體透射光譜儀器以及在 基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，掃描波長範圍為4000 12000CHT1，掃描次數32次，解析度ScnT1光譜條件下進行測定進行圖譜掃描，得到近紅外透射光譜數據。步驟3，對近紅外透射光譜數據數據進行處理，處理方法如下運用近紅外透射色譜儀器自動優化系統自動優化，以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的預處理方法。步驟4，結果計算，用偏最小二乘法(PLS)對處理結果進行計算，得到如下結果一階導數預處理後，運用偏最小二乘法(PLS)校正集樣品的NIR光譜與高效液相法測得的丹酚酸B含量進行回歸關聯，建立丹酚酸B的最優近紅外定量校正模型，選擇波段在9746. 9 7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1 及 4601. 5 4424. Icm-1,維數為 8，R2 為 O. 9843，內部交叉驗證均方差(RMSECV)為O. 0725。將建立的校正模型預測驗證集，結果相關係數為
O.9823，模型的外部驗證均方差(RMSEP)為O. 0847。參考文獻[I],陳向榮，陸京伯，石漢平.丹參的藥理作用新進展[J].中國醫院藥學雜誌，2001，21 (I) 44 45.[2],李朝霞，王地.丹參水溶性成分的研究進展[J].北京中醫雜誌，2004，23 (3)176 178.[3],陸婉珍，袁洪福，徐廣通等.現代近紅外光譜分析技術[M].北京中國石油化工出版社，2000 :105 109.[4],高榮，範世福.現代近紅外光譜分析技術的原理及應用[J].分析儀器，2002，
(3)9 12.[5],柳豔雲，胡昌勤.近紅外分析中光譜波長選擇方法進展與應用[J].藥物分析雜誌，2010，30 (5) :968 973.[6],逄煥歡，馮豔春，胡昌勤等.不同生產廠家注射用頭孢哌酮鈉含量測定的近紅外定量模型的建立[J].光譜學與光譜分析.2006，26 (12) :2214 2218.[7],尼珍，胡昌勤.近紅外光譜分析中光譜預處理方法的作用及其發展[J].藥物分析雜誌，2008，28 (5) :824 828.[8],褚小立，袁洪福，陸婉珍.近紅外分析中光譜預處理及波長選擇方法進展與應用[J].化學進展，2004，16 (4) :528 542.[9],胡昌勤，馮豔春.近紅外光譜法快速分析藥品.第I版[M].北京化工工業出版社，2010 :128 133.
權利要求
1.一種測定丹酚酸提取物中丹酚酸B含量的方法，其特徵在於，所述方法採用近紅外透射光譜法。
2.根據權利要求I的方法，其特徵在於，包括以下步驟配置供試品，用近紅外透射光譜法進行測定，對測定結果進行處理，計算丹酚酸B含量。
3.根據權利要求I的方法，其特徵在於，包括以下步驟配置供試品，對近紅外透射光譜儀進行預熱30min，等儀器穩定，開始測量，即基線平穩和幹涉圖能量幅度達到8000左右，測量溫度26°C，溼度在30%左右，利用最小偏二乘法進行實驗結果的處理。
4.根據權利要求3的方法，其特徵在於，其中所述配置供試品，步驟如下取丹酚酸提取物適量，精密稱定，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。
5.根據權利要求I的方法，其特徵在於，包括以下步驟 步驟1，配置樣品溶液，取丹酚酸提取物樣品適量，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得， 步驟2，測定，將樣品供試液裝入Imm比色皿中，在近紅外液體透射光譜儀器以及在基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，掃描波長範圍為4000 12000CHT1，掃描次數32次，解析度ScnT1光譜條件下進行測定進行圖譜掃描，得到近紅外透射光譜數據， 步驟3，對近紅外透射光譜數據數據進行處理，處理方法如下運用近紅外透射色譜儀器自動優化系統自動優化，以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的預處理方法， 步驟4，結果計算，用偏最小二乘法(PLS)對處理結果進行計算，得到如下結果一階導數預處理後，運用偏最小二乘法(PLS)校正集樣品的NIR光譜與高效液相法測得的丹酚酸B含量進行回歸關聯，建立丹酚酸B的最優近紅外定量校正模型，選擇波段在9746. 9 7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1 及 4601. 5 4424. Icm-1,維數為 8，R2 為 O. 9843，內部交叉驗證均方差(RMSECV)為O. 0725，將建立的校正模型預測驗證集，結果相關係數為O. 9823，模型的外部驗證均方差(RMSEP)為O. 0847。
6.根據權利要求I的方法，其特徵在於，包括以下步驟 以來自寶雞市虹源生物科技有限公司生產的丹酚酸提取物作為樣品，測定其中的丹酚酸B的含量，測定方法如下 步驟1，配置樣品溶液，取丹酚酸提取物樣品適量，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得， 步驟2，測定，將樣品供試液裝入1_比色皿中，在近紅外液體透射光譜儀器以及在基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，掃描波長範圍為4000 12000CHT1，掃描次數32次，解析度ScnT1光譜條件下進行測定進行圖譜掃描，得到近紅外透射光譜數據， 步驟3，對近紅外透射光譜數據數據進行處理，處理方法如下運用近紅外透射色譜儀器自動優化系統自動優化，以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的預處理方法， 步驟4，結果計算，用偏最小二乘法(PLS)對處理結果進行計算，得到如下結果一階導數預處理後，運用偏最小二乘法(PLS)校正集樣品的NIR光譜與高效液相法測得的丹酚酸B含量進行回歸關聯，建立丹酚酸B的最優近紅外定量校正模型，選擇波段在9746. 9 .7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1 及 4601. 5 4424. Icm-1,維數為 8，R2 為 O. 9843，內部交叉驗證均方差(RMSECV)為O. 0725，將建立的校正模型預測驗證集，結果相關係數為O. 9823，模型的外部驗證均方差(RMSEP)為O. 0847。
7.根據權利要求I的方法，其特徵在於，包括以下步驟 以來自武漢市昌恒生物醫藥製品有限公司生產的丹酚酸提取物作為樣品，測定其中的丹酚酸B的含量，測定方法如下 步驟1，配置樣品溶液，取丹酚酸提取物樣品適量，置50mL容量瓶中，加超純水溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml容量瓶，加超純水稀釋至刻度，搖勻，即得， 步驟2，測定，將樣品供試液裝入1_比色皿中，在近紅外液體透射光譜儀器以及在基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，掃描波長範圍為4000 12000CHT1，掃描次數32次，解析度ScnT1光譜條件下進行測定進行圖譜掃描，得到近紅外透射光譜數據， 步驟3，對近紅外透射光譜數據數據進行處理，處理方法如下運用近紅外透射色譜儀器自動優化系統自動優化，以決定係數(R2)，校正均方差(RMSEC)和預測均方差(RMSEP)作為模型評價指標，選擇合適的預處理方法， 步驟4，結果計算，用偏最小二乘法(PLS)對處理結果進行計算，得到如下結果一階導數預處理後，運用偏最小二乘法(PLS)校正集樣品的NIR光譜與高效液相法測得的丹酚酸B含量進行回歸關聯，建立丹酚酸B的最優近紅外定量校正模型，選擇波段在9746. 9 .7498. 2cm_\6101. 9 5774. IcnT1 及 4601. 5 4424. Icm-1,維數為 8，R2 為 O. 9843，內部交叉驗證均方差(RMSECV)為O. 0725，將建立的校正模型預測驗證集，結果相關係數為O. 9823，模型的外部驗證均方差(RMSEP)為O. 0847。
全文摘要
本發明涉及一種近紅外透射光譜法測定丹酚酸提取物中丹酚酸B的含量，該方法包括以下步驟首先配置供試品，對儀器進行預熱30min，等儀器穩定，開始測量。即基線平穩和幹涉圖能量幅度達到30000左右，將供試品溶液裝入1mm的石英比色皿中，採用儀器的液體透射檢測器掃描圖譜，掃描波長範圍為4000～12000cm-1，掃描次數32次，解析度8cm-1，每份樣品掃描3張，取其平均光譜，利用最小偏二乘法(PLS)進行實驗結果的處理。
文檔編號G01N21/35GK102879351SQ201110199609
公開日2013年1月16日 申請日期2011年7月15日 優先權日2011年7月15日
發明者葉正良, 劉君動, 李德坤, 嶽洪水, 李兵, 周大錚 申請人:天津天士力之驕藥業有限公司