一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法
2023-05-21 01:36:41 1
一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法
【專利摘要】本發明涉及一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法，其特徵在於它的載藥脂蛋白-殼聚糖納米粒子的製備方法包括如下步驟：（1）稱取一定量的脂蛋白和蛇六穀提取物，加入到超純水中，攪拌1-3小時；（2）緩慢攪拌脂蛋白和提取物溶液，滴加殼聚糖溶液，配製脂蛋白與殼聚糖質量比為8:1-1:2的混合液，該混合液在室溫下攪拌1-5小時；（3）調體系pH值至2-7，將其密封加熱15-60分鐘；（4）待體系冷卻，過濾除雜即得載藥納米粒子懸浮液。本發明改納米藥物可被細胞內吞，在胞內將負載的藥物緩慢釋放從而提高藥物利用率，且抑制乳腺癌細胞遷移。
【專利說明】一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法
[0001]【技術領域】
本發明屬於納米材料及藥物載體領域，具體涉及一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法。利用本發明製備的蛇六穀提取物納米粒子可有效抑制乳腺癌細胞遷移。
[0002]【背景技術】
乳腺癌是婦女常見惡性腫瘤之一，發病率較高，在我國佔惡性腫瘤的10%左右，幾年的調查表明，我國乳腺癌發病率呈迅速上升趨勢，每年的新增病例達3%-4%，且發病年齡逐漸年輕化。乳腺癌治療有手術治療、內分泌治療、化療、放療、免疫治療等，但這些方法扔不能很好的解決乳腺癌術後癌細胞的轉移問題，如外科手術是治療乳腺癌的主要方法，但是術後轉移並不少見，有50%-70%的患者在單純根治及改良根治術後10年內發生全身轉移，既使原發灶較小，腋窩淋巴結清掃陰性的臨床早期乳腺癌，術後也可能早期發生局部及遠處轉移，影響預後。目前有資料報導乳腺癌術後轉移者到30%-40%，其中約有76%的患者在復發轉移後2年內死亡。降低復發轉移已成為提高乳腺癌患者生存率亟待解決的問題之一。
[0003]
【發明內容】
本發明所用蛇六穀提取物製備方法包括如下步驟:
取一定量的蛇六穀全粉，加 4-6倍量的溶劑(水，乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇)回流提取兩次，每次2-4小時，合併兩次提取液，過濾，濾液採用旋轉蒸發進行濃縮。真空乾燥得蛇六穀提取物。
[0004]本發明的載藥脂蛋白-殼聚糖納米粒子的製備方法包括如下步驟:
(1)稱取一定量的脂蛋白和蛇六穀提取物，加入到超純水中，攪拌1-3小時；
(2)緩慢攪拌脂蛋白和提取物溶液，滴加殼聚糖溶液，配製脂蛋白與殼聚糖質量比為8:1-1:2的混合液，該混合液在室溫下攪拌1-5小時；
(3)調體系pH值至2-7，將其密封加熱15-60分鐘；
(4)待體系冷卻，過濾除雜即得載藥納米粒子懸浮液。
[0005]所述脂蛋白來源於雞蛋黃，經提取凍幹獲得；
所述藥物為蛇六穀提取物；
所述殼聚糖溶液用質量分數為0.1%-0.5%的冰醋酸溶液配製，在室溫下攪拌過夜溶解殼聚糖。
[0006]本發明的有益效果是:
1、根據上述方法製備的載藥納米粒子呈球型，平均粒徑為150-200nm且分布較窄，表面電勢為+ 48.3mV。在長達三個月的貯存期內，此納米藥物不發生解離和團聚，具備良好的貯存穩定性。
[0007]2、改納米藥物可被細胞內吞，在胞內將負載的藥物緩慢釋放從而提高藥物利用率，且抑制乳腺癌細胞遷移。
【具體實施方式】[0008]實施例1
用質量分數為0.5%的冰醋酸溶液配製得到5.0mg/mL的殼聚糖(購自國藥集團化學試劑有限公司)溶液，在室溫下攪拌過夜溶解殼聚糖。
[0009](1)稱取IOmg脂蛋白，加入9mL超純水，以120rpm攪拌I小時；
(2)緩慢攪拌脂蛋白水溶液，滴加ImL殼聚糖溶液，配製脂蛋白與殼聚糖質量比為2:1的混合液，該混合液在室溫下攪拌2小時；
(3)將其密封后加熱60分鐘；
(4)待體系冷卻，過濾除雜即得納米粒子懸浮液。
[0010]本實施例中製備出的脂蛋白-殼聚糖納米粒子平均粒徑為385nm，多分散係數為0.342。
[0011]實施例2
用質量分數為0.5%的冰醋酸溶液配製得到5.0mg/mL的殼聚糖(購自浙江金殼生物化學有限公司)溶液，在室溫下攪拌過夜溶解殼聚糖。
[0012](I)稱取IOmg脂蛋白，加入18mL超純水，以120rpm攪拌I小時；
(2)緩慢攪拌脂蛋白水溶液，滴加2mL殼聚糖溶液，配製脂蛋白與殼聚糖質量比為2:1的混合液，該混合液在室溫下攪拌2小時；
(3)將其密封后加熱30分鐘；
(4)待體系冷卻，過濾除雜即得納米粒子懸浮液。
[0013]本實施例中製備出的脂蛋白-殼聚糖納米粒子平均粒徑為260nm，多分散係數為0.189。
[0014]實施例3
用質量分數為0.5%的冰醋酸溶液配製得到5.0mg/mL的殼聚糖(購自浙江金殼生物化學有限公司)溶液，在室溫下攪拌過夜溶解殼聚糖；
用超純水配製濃度為lmol/L的鹽酸溶液。
[0015](I)稱取9mg脂蛋白，加入17.7mL超純水,以120rpm攪拌I小時；
(2)緩慢攪拌脂蛋白水溶液，滴加0.3mL殼聚糖溶液，配製脂蛋白與殼聚糖質量比為6:1的混合液，該混合液在室溫下攪拌2小時；
(3)用lmol/L的鹽酸調節體系pH至2.5，密封加熱45分鐘；
(4)待體系冷卻，過濾除雜即得納米粒子懸浮液。
[0016]本實施例中製備出的脂蛋白-殼聚糖納米粒子平均粒徑為160nm，多分散係數為0.171。
[0017]實施例4
用質量分數為0.5%的冰醋酸溶液配製得到5.0mg/mL的殼聚糖(購自浙江金殼生物化學有限公司)溶液，在室溫下攪拌過夜溶解殼聚糖；
用超純水配製濃度為lmol/L的鹽酸溶液；
稱取IOmg鹽酸阿黴素,製成濃度為lmg/mL的鹽酸阿黴素水溶液。
[0018](I)稱取9mg脂蛋白，加入1.8mL上述鹽酸阿黴素水溶液和15.9mL超純水，以120rpm攪拌2小時；
(2)緩慢攪拌脂蛋白水溶液，滴加0.3mL殼聚糖溶液，該混合液在室溫下攪拌2小時；(3)用lmol/L的鹽酸調節體系pH至2.5，密封加熱45分鐘；
(4)待體系冷卻，過濾除雜即得載藥納米粒子懸浮液。
[0019]本實施例中製備出的脂蛋白-殼聚糖納米粒子平均粒徑為166nm，表面電勢為+48.3mV。載藥後，納米載體粒徑沒有發生明顯變化，依然保持小粒徑窄分布。細胞毒性實驗顯示，納米藥物與單純麼蛇`六穀提取物具有相似的抑制癌細胞遷移的效果。
【權利要求】
1.一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法，其特徵在於它的載藥脂蛋白-殼聚糖納米粒子的製備方法包括如下步驟: (1)稱取一定量的脂蛋白和蛇六穀提取物，加入到超純水中，攪拌1-3小時； (2)緩慢攪拌脂蛋白和提取物溶液，滴加殼聚糖溶液，配製脂蛋白與殼聚糖質量比為8:1-1:2的混合液，該混合液在室溫下攪拌1-5小時； (3)調體系pH值至2-7，將其密封加熱15-60分鐘； (4)待體系冷卻，過濾除雜即得載藥納米粒子懸浮液。
2.根據權利要I所述的一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法，它的載藥脂蛋白-殼聚糖納米粒子的製備方法中所述脂蛋白來源於雞蛋黃，經提取凍幹獲得。
3.根據權利要I所述的一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法，它的載藥脂蛋白-殼聚糖納米粒子的製備方法中所述藥物為蛇六穀提取物。
4.根據權利要I所述的一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法，它的載藥脂蛋白-殼聚糖納米粒子的製備方法中所述殼聚糖溶液用質量分數為0.1%-0.5%的冰醋酸溶液配製，在室溫下攪拌過夜溶解殼聚糖。
5.根據權利要3所述的一種可抑制乳腺癌細胞遷移的納米藥物的製備方法，它的載藥脂蛋白-殼聚糖納米粒子的製備方法中所述藥物為蛇六穀提取物，蛇六穀提取物製備方法包括如下步驟:取一定量的蛇六穀全粉，加4-6倍量的溶劑(7jC，乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇)回流提取兩次，每 次2-4小時，合併兩次提取液，過濾，濾液採用旋轉蒸發進行濃縮，真空乾燥得蛇六穀提取物。
【文檔編號】A61K9/10GK103751455SQ201410015592
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2014年1月14日 優先權日:2014年1月14日
【發明者】李斌, 洪峰 申請人:湖北吉登豐生物技術有限公司