咖啡飲料組合物的製造方法

2023-04-29 08:18:11 2

專利名稱：咖啡飲料組合物的製造方法
技術領域：
本發明涉及一種即使長期飲用也能夠抑制在體內的過氧化氫的產生的咖啡飲料 組合物。
背景技術：
據報導，活性氧之一的的過氧化氫不僅與變異原性、癌原性等密切相關，此外還與
動脈硬化、缺血性心臟病等循環系統疾病，消化器官疾病、變應性疾病、眼部疾病等多種疾
病密切相關(非專利文獻l)。另一方面，咖啡中含有由於焙煎而自然產生的過氧化氫(非
專利文獻2)，並且，已經報導有通過添加過氧化氫酶、過氧化物酶、抗氧化劑來除去咖啡中
的過氧化氫的技術(專利文獻1 4)。 非專利文獻1 :營養_評價和治療19， 3 (2002) 非專利文獻2 :Mutat. Res. 16， 308 (2) (1994) 專利文獻1 :特公平4-29326號公報 專利文獻2 :特開平3-127950號公報 專利文獻3 :特開平11-266842號公報 專利文獻4 :特開2003-81824號公報

發明內容
本發明提供一種羥基氫醌含量為0 0. 00005質量％的咖啡飲料組合物及其製造 方法。 此外，本發明還提供一種羥基氫醌含量為0 0. 001質量％的可溶性咖啡組合物
及其製造方法。 進一步，本發明還提供填充了羥基氫醌含量為0 0. 00005質量％的咖啡飲料組 合物的容器裝飲料。 此外，本發明提供咖啡飲料組合物以及填充它的容器裝飲料，其特徵在於，在高效 液相色譜分析中，當以五倍子酸(沒食子酸)作為標準物時，相對於五倍子酸的相對保留時 間為0. 54 0. 61的時間區域內，實質上沒有峰。


〔圖1〕焙煎咖啡對體內過氧化氫的影響(人)的示意圖。
〔圖2〕除去過氧化氫的咖啡對體內過氧化氫量的影響的示意圖。
〔圖3〕表示在體內生成過氧化氫的咖啡中的成分的圖。
〔圖4〕表示羥基氫醌對體內過氧化氫的生成所波及的作用的圖。
〔圖5〕表示咖啡Q的HPLC圖(檢測波長為258nm)。 [OO19]〔圖6〕表示咖啡Q的HPLC圖(檢測波長為288nm)。〔圖7〕表示活性碳處理的咖啡對大鼠體內過氧化氫的量的影響的圖。** :相對於 蒸餾水組的顯著水平在1%以下，具有顯著誤差；〔圖8〕活性碳處理的咖啡對人體內過氧化氫的量的影響的示意圖。* :相對於活性 碳處理的咖啡的飲用組的顯著水平在5%以下，具有顯著誤差； ** :相對於活性碳處理的咖啡的飲用組的顯著水平在1%以下，具有顯著誤差。
具體實施例方式
本發明者們明確了以下事實將除去了過氧化氫的咖啡給大鼠引用時，在體內生 成過氧化氫，尿中過氧化氫的濃度上升。即，根據現有的除去咖啡飲料中的過氧化氫的技 術，不能抑制飲用咖啡後在體內的過氧化氫的生成。 因此，本發明提供一種飲用後在體內不會生成過氧化氫的咖啡飲料組合物。
因此，本發明人基於是不是咖啡中的某種成分在生物體內生成過氧化氫的假設， 進行了各種研究，其結果發現了以下事實咖啡中所含的羥基氫醌在生物體內具有生成過 氧化氫作用；以及，如果將羥基氫醌的含量控制為遠小於通常的含量0 0. 00005質量％， 就能得到在生物體內不增加氧化氫的生成的咖啡飲料組合物。 即使飲用本發明的咖啡飲料組合物也不會在體內生成過氧化氫。因此，本發明的 咖啡飲料組合物作為安全性高的飲料是有用的。 本發明的咖啡飲料組合物的特徵在於，羥基氫醌的含量被調整到0 0. 00005 質量％ ;本發明的可溶性咖啡組合物的特徵在於，羥基氫醌的含量被調整到0 0. 001質 量％ 。羥基氫醌含量處於上述範圍內的情況下，飲用這些組合物時，在生物體內過氧化氫的 產生得到抑制。咖啡飲料組合物中的羥基氫醌的含量優選為0 0. 00003質量％，更優選 0 0. 00001質量％。可溶性咖啡組合物中的羥基氫醌含量優選為0 0. 0003質量％，更 優選0 0. 0001質量％。 該羥基氫醌的含量可以通過高效液相色譜(HPLC)來測定。關於HPLC的檢測手段， 通常採用UV檢測，但是，通過CL(化學發光)檢測、EC(電化學)檢測、LC-Mass檢測等，可 以進行靈敏度更高的檢測。而且，通過HPLC進行的羥基氫醌含量的測定，還可以在濃縮咖 啡飲料之後進行。 此外，儘管羥基氫醌的含量通過HPLC直接測定，但是，也可以從咖啡飲料組合物
或可溶性咖啡飲料組合物通過各種色譜濃縮羥基氫醌，然後通過測定該濃縮組分來進行定
量。而且，在進行羥基氫醌量的測定時，在容器裝飲料的情況下，優選開封之後立即加入例
如0. 1N(規定)的鹽酸將其調整為pH3以下的酸性溶液之後進行測定。 人如果飲用普通市售的速溶咖啡2杯(280g)，尿中的過氧化氫量將顯著增加(圖
1)。另一方面，攝取普通的咖啡和除去過氧化氫的咖啡的大鼠的尿中的過氧化氫的增加程
度相同(圖2)。由此可知以下事實不是由於咖啡中含有的過氧化氫而增加了飲用後尿中
的過氧化氫的量，而是咖啡中含有的某種成分在生物體內生成過氧化氫。 因此，本發明人對咖啡中含有的各種成分在體內生成過氧化氫的能力進行了研
究。其結果，明確了如下事實儘管在普通的市售咖啡中含羥基氫醌0.2 3mg/190g，但是，即使攝取極少量的羥基氫醌，它也具有在體內增加過氧化氫的生成的作用(圖3、4)，而在 攝取羥基氫醌的含量調整為0. 00005質量％以下的咖啡的情況下，則在體內抑制過氧化氫 的生成(圖7)。 本發明的咖啡飲料組合物和可溶性咖啡飲料組合物，除了減少羥基氫醌的含量之 外，優選含有相同程度的通常的咖啡成分。 以100g咖啡飲料組合物作為基準的情況下，本發明的咖啡飲料組合物優選含有 鉀30 300mg/100g、更優選40 250mg/100g、特別優選50 200mg/100g。而且，考慮到 咖啡本來的風味，以lg可溶性咖啡組合物作為基準的情況下，本發明的可溶性咖啡組合物 中優選含有鉀20 200mg/lg、更優選30 180mg/lg，特別優選40 150mg/lg。鉀濃度的 測定，例如可以使用原子吸光光度法來測定。為了使鉀的含量處於上述範圍內，優選在咖啡 飲料組合物的製造過程中不進行積極地除去鉀的操作。 此外，考慮到咖啡本來的風味，以100g咖啡飲料組合物作為基準的情況下，本發 明的咖啡飲料組合物的灰分的量優選為280mg以下，更優選250mg以下，進一步更優選 220mg以下，特別優選200mg以下。灰分的測定是按照日本食品標準成分表第四次修訂(昭 和57年發行，科學技術廳資源調查委員會編集，28頁)記載的方法，採用在55(TC下加熱直 到沒有殘餘的碳成為恆量為止的灰化方法來測定。為了使灰分的量處於上述範圍內，在咖 啡飲料組合物的製造過程中，優選不進行用強鹼處理之後用酸等使其回到中性區域等的， 使灰分的量增多的操作。 此外，考慮到咖啡本來的風味，本發明的咖啡飲料組合物的H202 (過氧化氫)的含 量優選為lppm以下，更優選為0. lppm以下，特別優選為0. Olppm以下。過氧化氫的測定可 以用通用的過氧化氫計來進行，例如，可以使用CENTRAL KAGAKU公司制的高靈敏度過氧化 氫計SUPER ORITECTOR MODEL 5。 在本發明的咖啡飲料組合物中使用的咖啡豆的種類沒有特別的限定，可以舉出例 如巴西、哥倫比亞、坦尚尼亞、穆哈等產的咖啡豆。作為咖啡的種類，有阿拉比卡種、羅布斯 塔種。咖啡豆可以使用l種，也可以混合多種使用。對於焙煎咖啡豆的焙煎方法沒有特別 限制，對於焙煎溫度、焙煎環境也沒有任何限制，可以採用通常的方法。並且，對於從該豆的 提取方法也沒有任何限制，例如可以舉出對焙煎咖啡豆及其粉碎物使用冷水 熱水(0 IO(TC )提取10秒 30分鐘的方法。提取方法可以舉出沸騰式、蒸餾式、虹吸式、滴落式 (紙、法蘭絨等)等。 本發明的咖啡飲料組合物，是指其每100g使用了換算成生豆時的lg以上的咖啡 豆的組合物。優選使用2.5g以上的咖啡豆。更優選使用5g以上的咖啡豆。將本發明的咖 啡飲料組合物作為容器裝飲料時，優選為單份濃度(single strength)。此處，所謂"單份 濃度"，是指將容器裝飲料開封後，作為常態無需稀釋而直接能夠飲用的濃度。
本發明的咖啡飲料組合物或可溶性咖啡組合物，是通過用吸附劑處理焙煎咖啡 豆提取物，使羥基氫醌的含量降低而得到的。關於吸附劑，可以舉出活性碳、反相載體等。 更具體地說，在焙煎咖啡豆提取液或焙煎咖啡豆提取液的乾燥品的水溶液中加入吸附劑， 在0 IO(TC攪拌10分鐘 5小時後，除去吸附劑即可。此處，吸附劑的使用量為，相對 於焙煎咖啡豆的重量，活性碳的情況下優選為0. 02 1. 0倍，反相載體的情況下優選為 2 IOO倍。此處，作為活性碳，可以舉出通過氯化鋅法或者水蒸氣活化法使之活化的活
5性碳，優選通過水蒸氣活化法使之活化的活性碳。關於活性碳的種類，優選椰子殼活性 碳、更優選水蒸氣活化的椰子殼活性碳。作為活性碳的市售品，可以使用白鷺WH2c (Japan EnviroChemicals)、太閤CW( 二村化學)、Kurary CoalGW(Kurary Chemical)。作為反相載 體，可以舉出YMC 0DS-A(YMC) 、C18(GL Siences Inc.)。 這些吸附劑處理法中，從不降低綠原酸類的量的情況下能夠選擇性地減少羥基氫 醌的含量、工業上有利、並且不會降低鉀含量(以質量比計為1/5以上，特別是保持1/2以 上)的觀點出發，優選使用活性碳的吸附劑處理法。 此外，本發明的咖啡飲料組合物或可溶性咖啡組合物中的羥基氫醌的量，可以在 高效液相色譜分析中，以五倍子酸作為標準物的情況下，能夠在相對於五倍子酸的相對保 留時間為0.54 0.61的時間區域內檢出峰。因此，本發明的咖啡飲料組合物可以被規定 為，其特徵在於在高效液相色譜分析中，當以五倍子酸作為標準物時，在相對於五倍子酸 的相對保留時間為0.54 0.61的時間區域內，實質上沒有峰。並且，本發明的可溶性咖啡 組合物可以被規定為，其特徵在於在高效液相色譜分析中，當以五倍子酸作為標準物時， 在相對於五倍子酸的相對保留時間為0.54 0.61的時間區域內，實質上沒有峰。並且，該 規定相關的高效液相色譜的分析條件為後述的分析條件B。 為了確認以下事實，S卩，本發明的咖啡組合物在高效液相色譜分析中，當以五倍子 酸作為標準物時，在相對於五倍子酸的相對保留時間為0. 54 0. 61的時間區域內，實質 上沒有峰，可以使用一般的HPLC，例如，作為洗提液使用0. 05M醋酸水溶液和0. 05M醋酸 100%乙腈溶液的梯度，使用ODS柱，通過紫外線吸光光度計檢測來以確認。
在本發明中，所謂"在相對於五倍子酸的相對保留時間為O. 54 0. 61的時間區域 內，實質上沒有峰"意味著，將分析五倍子酸的lppm溶液時的面積值計為Sl，在相同條件下 分析咖啡飲料組合物時的來自前述特定區域內溶出成分的峰面積的總和計為S2時，有S2/ Sl < 0. 01。 本發明的咖啡飲料組合物中可以根據需要而添加蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、果糖 葡萄糖液、糖醇等糖分、乳成分、抗氧化劑、pH調節劑、乳化劑、香料等。關於乳成分，可以舉 出生鮮奶、牛奶、全脂奶粉、脫脂奶粉、鮮奶油、濃縮奶、脫脂奶、部分脫脂奶、煉奶等。關於本 發明的咖啡飲料組合物的pH，考慮到飲料的穩定性，優選為3 7. 5、更優選4 7、特別優 選5 7。 所述可溶性咖啡組合物為粉體狀速溶咖啡粉體等粉體食品。速溶咖啡粉體可通 過常規方法來製備。例如，可以通過以下方法來得到乾燥粉體從噴嘴將咖啡提取液噴出， 使其在約210 31(TC的熱風中落下，從而使其成為多孔質的水溶性咖啡粉末的噴霧乾燥 (spray-dry)方法或者，將咖啡提取物在液氮或冰箱等中冷凍、粉碎、篩分之後，在真空條 件下使水分升華，使水分達到3%以下的冷凍乾燥(freeze-dry)方法。
本發明的咖啡飲料組合物或可溶性咖啡可以裝入PET瓶、罐(鋁、鋼)、紙、殺菌袋、 瓶(玻璃)等容器中。該情況下，本發明的咖啡飲料組合物可直接作為50 2500mL的容器 裝飲料。容器裝飲料的PH優選為5 7.5，特別優選5.4 7。從防止咖啡中的成分的變 化的觀點出發，容器優選為非氧透過性的容器，例如，使用鋁或鋼等制的罐、玻璃制的瓶等。 罐或瓶的情況，還包括能夠重蓋(rec即)的類型和重封(reseal)型。此處，"氧非透過性" 指的是在2(TC、相對溼度為50%的環境下測定的氧透過率(cc mm/m2 day atm)為5以下的情況，更優選為3以下，特別優選在1以下。 此外，本發明的可溶性咖啡，可以將其每lg溶解在25 500mL的冷水或熱水中後 飲用。 在製造容器裝飲料的情況下，通常進行殺菌處理。在填充在金屬罐等容器中後能
夠進行加熱殺菌的情況下，在食品衛生法中規定的殺菌條件下進行殺菌處理。而對於PET 瓶、紙容器等不能進行蒸餾殺菌的情況，則採用以下方法g卩，在與食品衛生法中規定的條
件相同的殺菌條件下——例如通過板式熱交換器在高溫下進行短時間的殺菌之後，冷卻至 一定溫度，再向容器內填充。此外，也可以進行如下操作在無菌條件下加熱殺菌後，在無菌 條件下使PH回復到中性；或在中性狀態下加熱殺菌後，在無菌條件下使pH回復到酸性等。
實施例 實施例1(焙煎咖啡對體內過氧化氫量的影響)
(a)焙煎咖啡的調製 將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡(Nescafe caffeine less))4g溶解於礦泉水 280mL。此時，280mL咖啡中的綠原酸量為210mg、HHQ量為2. 6mg。 (b)將所得280mL咖啡給6名健康男性飲用，在隨後的1 5小時後測定尿中的 過氧化氫的量。並且，尿中的過氧化氫的量是通過FOX法(氧化鐵-二甲酚橙法，ferrous ion oxidation-xylenol orange assay)來測定的。 其結果，如圖1所示，由於飲用焙煎咖啡，人尿中的過氧化氫的量增加了。
實施例2(除去過氧化氫的咖啡對體內過氧化氫量的影響) [OO56] (a)焙煎咖啡 將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)10g溶解在26mL的蒸餾水中。
(b)除去過氧化氫的咖啡 將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)10g溶解在23mL的蒸餾水中，添加3mL的過氧 化氫酶溶液(CENTRAL KAGAKU)。 (c)將上述(a)以及(b)中得到的咖啡強制經口給藥(10mL/kg)給6周齡的SD系 雄性大鼠(11 = 4)。給藥後第3小時採集尿，測定尿中的過氧化氫的量。並且，尿中的過氧 化氫的量是通過FOX法(氧化鐵-二甲酚橙法，ferrous ion oxidation-xylenol orange assay)來測定的。 其結果，如圖2所示，由於攝取焙煎咖啡，尿中的過氧化氫的量增加了。但是，即使 除去了焙煎咖啡的過氧化氫，其增加率基本也沒有發生變化。由此可知，由於攝取焙煎咖 啡，在體內生成了新的過氧化氫。
實施例3(在體內生成過氧化氫的成分)
(a)焙煎咖啡 將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)溶解在下述洗提液A中，製作了 20mg/mL的咖 啡溶液。
對該焙煎咖啡中的羥基氫醌的量進行了定量分析，其結果為0.0013質量％。在 這裡，對焙煎咖啡中的羥基氫醌的分析方法如下。將以下分析條件作為分析條件A。分析 儀器使用HPLC(島津製作所(株))。裝置的結構單元的型號如下。檢測器SPD-M10A、烘 箱CT0-10AC、泵LC-10AD、自動進樣器SIL-10AD、柱Inertsil 0DS-2內徑4. 6mmX長度 250mm。 分析條件如下。樣品注入量10ii L、流量1. OmL/min、紫外線吸光光度計檢測波 長290nm、洗提液A :0. 05M醋酸3%乙腈溶液、洗提液B :0. 05M醋酸100%乙腈溶液
濃度梯度條件
洗提液B 0% 20% 20% 100% 100% 0% 0%
時間 o分
20分 35分 45分 60分 70分 120分
洗提液A 100% 80% 80% 0% 0% 100% 100%







來求出質量％。 此外，咖啡組合物中的羥基氫醌還可以根據以下的分析法進行測定。將以下的分 析條件作為分析條件B。分析儀器使用HPLC(日立製作所(株))。裝置的結構單元的型號 如下。檢測器L-7455、烘箱L-7300、泵L-7100、自動進樣器L-7200、柱:Inertsil 0DS-2 內徑4. 6mmX長度250mm。 分析條件如下。樣品注入量10ii L、流量1. OmL/min、紫外線吸光光度計檢測波 長258或288nm、洗提液A :0. 05M醋酸水溶液、洗提液B :0. 05M醋酸100%乙腈溶液
濃度梯度條件
羥基氫醌的保留時間5.5分鐘。由此，將羥基氫醌作為標準物質，從求得的面積 時間 洗提液A 洗提液B 0分 100% 0% 15分 100% 0% 15. 1分 0% 100% 25分 0% 100% 25. 1分 100% 0% 30分 100% 0% 羥基氫醌的保留時間6. 8分鐘。由此，將羥基氫醌作為標準物質，從求得的面積
來求出質量％。同樣的條件下測定的五倍子酸的保留時間為11.5分鐘。 (b)將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)2. 4g/kg(以羥基氫醌計為1. 6mg/kg)、羥基
氫醌1. 6mg/kg強制經口給藥給7周齡的SD系雄性大鼠(n = 4)。在給藥前和給藥後的第
3小時、第6小時採集尿，與實施例2同樣地測定尿中的過氧化氫的量。 其結果，如圖3所示，羥基氫醌和焙煎咖啡攝取組在攝取後的第3小時的尿中的過
氧化氫的量顯著地增加了，並且，所增加的尿中的過氧化氫的量在羥基氫醌和焙煎咖啡攝
8取組中的程度是相同的。由此可知，咖啡中的在體內生成過氧化氫的物質為羥基氫醌。
實施例4 將羥基氫醌(0. 1、0. 3、 1和3mg/kg)強制經口給藥給7周齡的SD系雄性大鼠(n =3)。在給藥前和給藥後的第3小時、第6小時採集尿，與實施例2同樣地測定尿中的過氧 化氫的量。 其結果，如圖4所示，明確了以下事實由於攝取0. 3mg/kg以上的羥基氫醌，體內 的過氧化氫的量增加了 ，且其程度依賴於羥基氫醌的用量。
實施例5 如下所述地製造了本發明的咖啡飲料組合物。將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖 啡)2. 5g用於填充有500g0DS填充劑(YMC GEL 0DS-A細孔徑6nm、粒徑150 y m)的柱中，用 0. 5%的醋酸水6L將含有羥基氫醌的組分溶出，用甲醇6L將不含有羥基氫醌的組分溶出。 不含有羥基氫醌的組分A通過冷凍乾燥法完全去除甲醇。從速溶咖啡2. 5g得到的組分A 為0. 933g。對組分A按照實施例3所示的方法進行了分析，結果未能檢測出在組分A中的 羥基氫醌。通過將組分AO. 75g溶解在140mL的水中，製作了本發明的咖啡飲料組合物。
並且，用高靈敏度過氧化氫計測定了本發明的咖啡飲料組合物中的過氧化氫的 量，其結果，過氧化氫的量在檢測限以下，未檢測出過氧化氫。過氧化氫的分析法如下所述。 用高靈敏度過氧化氫計SUPER0RITECT0R M0DEL5 (CENTRAL KAGAKU (株))進行了測定。用 定量移液管精密地量取試料2mL，注入到該裝置本體的反應槽中。密封反應槽後，選擇測定 範圍，按下測定開關開始測定。在確認告知測定準備完成的發信音之後，迅速用微量注射器 注入0RITECT0R用過氧化氫酶20 y L，讀取輸出值。 裝置的校正用0. 1、1和5mg/L的過氧化氫標準液進行。調製過氧化氫標準液時， 將過氧化氫(30%水溶液，特級，和光純藥工業(株))用離子交換水稀釋為1000mg/L的液 體作為原液使用。用提取用溶液稀釋原液，調製成5mg/L的過氧化氫標準液。此外，用提取 用溶液稀釋5mg/L的過氧化氫標準液，調製成lmg/L和0. lmg/L。 提取用溶液(含有0.5X溴酸鉀的0.2M磷酸緩衝液，pH7.0)，是將磷酸二氫鉀(特 級)11. Og、磷酸氫二鈉12水合物(特級)44. 8g和溴酸鉀(特級)5. Og用離子交換水溶解 後，定容至1L而調製的。使用時，預先在冰點以下通氮氣1小時以上。
實施例6 本發明的可溶性咖啡是通過將在實施例5中得到的組分A粉碎而製作的。
實施例7 本發明的咖啡飲料組合物還通過如下方法來製造。
活性碳處理的咖啡的製造 將市售速溶咖啡(Nescafe Gold Blend Red Label) 20g溶解在1400mL蒸餾水中 之後(該咖啡稱作"咖啡P")，加入活性碳白鷺WH^ 28/42 (J即an EnviroChemicals) 30g， 攪拌1小時後，用薄膜濾器(0. 45 m)過濾，得到濾液(該咖啡稱作"咖啡Q")。將所得濾 液冷凍乾燥後得到15. 8g褐色粉末。將該褐色粉末溶解於蒸餾水中，通過與實施例1相同 的HPLC分析，對綠原酸和HHQ進行定量的結果，含有綠原酸4. 12質量％， HHQ在檢測限以 下(根據分析條件B)。此外，根據ICP發光分光分析法測定鉀含量的結果，在原料速溶咖 啡和活性碳處理咖啡的兩者中均為約4. 2質量％ 。用HPLC分析咖啡P、咖啡Q和五倍子酸得到圖5和圖6所示的圖。關於咖啡Q，在6. 8分鐘的保留時間附近的峰消失，實質上沒有 峰。圖5中示出的a為咖啡P的圖，b為咖啡Q的圖，c為五倍子酸的圖。圖6中示出的b 為咖啡P的圖，c為咖啡Q的圖，a為五倍子酸的圖。 此外，也通過以下方法進行了本發明的咖啡飲料組合物中的羥基氫醌(HHQ)的量 的測定。 羥基氫醌的測定 咖啡飲料組合物的羥基氫醌的分析法如下。分析儀器使用HPLC-電化學檢測 器(庫侖測定型)的庫侖陣列系統(5600A型，開發製造美國ESA公司，進口 銷售MC Medical, Inc.)。裝置的結構單元的名稱 型號如下。 分析池5010型；庫侖陣列管理器(CoulArray Organizer);庫侖陣列電子組 件*軟體(CoulArray Electronics Module .Software) :5600A型；溶劑送液組件582型； 梯度混合器(Gradient Mixer);自動進樣器542型；脈衝阻尼器(pulse damper);脫氣裝 置:Degasys UltimateDU3003 ;柱溫箱505。柱:CAPCELL PAK C18 AQ內徑4. 6mmX長度 250mm粒徑5iim(株)資生堂)。
分析條件如下。 樣品注入量10iiL、流量1.0mL/min、電化學檢測器的外加電壓0mV、柱溫箱設 定溫度40。C、洗提液0. 1(W/V) %磷酸、0. lmM l-羥基乙烷-l， 1_二膦酸、5 (V/V) %甲醇溶 液、洗提液B :0. 1(W/V)X磷酸)、0. lmM 1_羥基乙烷_1， 1_ 二膦酸、50 (V/V) %甲醇溶液。
調製洗提液A和B時使用高效液相色譜用蒸餾水(關東化學(株))、高效液相色 譜用甲醇(關東化學(株))、磷酸(特級，和光純藥工業(株))、l-羥基乙烷-l，l-二膦酸 (60%水溶液，東京化成工業(株))。 濃度梯度條件 時間 洗提液A 洗提液B O.O分 100% 0% 10. 0分 100% 0% 10. 1分 0% 100% 20. 0分 0% 100% 20. 1分 100% 0% 50. 0分 100% 0% 調製分析試料時，首先準確稱量試料2g後，用洗提液A混合為10mL，再通過薄 膜濾器(HLC-DISK25溶劑體系，孔徑為0.45ym，高效液相色譜用，關東化學(株))進行 過濾。將所得濾液約2. 5mL向固相萃取柱SCX(固相填充量500mg，存儲容量3mL， Gl Sciences (株))通液，將除去約0. 5mL的初通過液的通過液立即用於分析。
根據上述條件進行分析時，羥基氫醌的保留時間為6.38分。以羥基氫醌(和光純 藥工業(株))作為標準物，從所得峰的面積值求得質量％。 而且，用高靈敏度過氧化氫計測定本發明的發明的咖啡飲料組合物中的過氧化氫 的量的結果，過氧化氫的量在檢測限以下，沒有檢測出過氧化氫。此外，通過前述測定法測 定的結果，以每100g咖啡飲料的量表示，咖啡P的灰分量為186mg/100g，咖啡Q的灰分量為 176mg/100g。
實施例8 焙煎咖啡和實施例7中製造的活性碳處理咖啡(本發明的咖啡飲料組合物)對大
鼠體內過氧化氫的量的影響 (a)焙煎咖啡的調製 將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)8g溶解在12mL的蒸餾水中。
(b)活性碳處理咖啡的調製 將在實施例7中製造的活性碳處理的咖啡8g溶解在12mL的蒸餾水中。(c)將在 上述(a)和(b)中所得的咖啡強制經口給藥(10mL/kg)給7周齡的SD系雄性大鼠(n = 8)。在給藥前和給藥後第3小時、第6小時採集尿，與實施例2同樣地測定尿中的過氧化氫 的量。 其結果，如圖7所示，可知在攝取後第3小時的尿中的過氧化氫的量，焙煎咖啡的 攝取組相比於蒸餾水攝取組顯著增加，而活性碳處理咖啡的攝取組與蒸餾水攝取組相等。
實施例9 焙煎咖啡和活性碳處理咖啡(本發明的咖啡飲料組合物)對人體內過氧化氫量的 影響 (a)焙煎咖啡的調製 將速溶咖啡(無咖啡因雀巢咖啡)4. 5g溶解在280mL的礦泉水中。
(b)活性碳處理咖啡的調製 將在實施例7中製造的活性碳處理的咖啡4. 5g溶解在280mL的礦泉水中。
(c)使7名健康男性飲用在上述(a)和(b)中所得到的咖啡280mL，之後，在第1 5小時之後測定尿中的過氧化氫的量。另外，進行交叉實驗。與實施例2同樣地測定尿中的 過氧化氫的量。 其結果，如圖8所示，可知人尿中的過氧化氫的量，雖然飲用焙煎咖啡時會增加， 但是，引用本發明咖啡組合物的活性碳處理咖啡時不增加。
實施例11 將中等程度煎熬的(L = 22) *粉碎(中等程度磨碎)的無咖啡因的哥倫比亞咖啡 豆400g投入萃取機中後，加入95t:的熱水得到3200g萃取液。相對於該萃取液的固形物的 量，添加50% (w/w)的活性碳WH2C(Japan EnviroChemicals公司制)，攪拌30分鐘後，進 行離心過濾，除去活性碳，得到脫HHQ的咖啡萃取液。在該脫HHQ的咖啡萃取液中加入離子 交換水和碳酸氫鈉使其成為pH6. 3，得到調合液。往金屬罐中填充該混合液190g並進行密 封后，在118. rC進行蒸餾殺菌10分鐘，得到罐裝咖啡。殺菌後的pH為5. 8。
實施例12 將在實施例7中所得的冷凍乾燥品直接作為粉末咖啡。
權利要求
一種咖啡飲料組合物的製造方法，其特徵在於，在焙 煎咖啡豆提取液或焙煎咖啡豆提取液的乾燥品的水溶液中，加入吸附劑並攪拌10分鐘～5小時，然後除去所述吸附劑，從而降低羥基氫醌的含量，所述吸附劑是活性碳或反相載體，吸附劑的使用量為，相對於焙煎咖啡豆的重量，活性碳的情況下為0.02～1.0倍，反相載體的情況下為2～100倍，所述咖啡飲料組合物中的羥基氫醌的含量為0～0.00005質量％。
2. 如權利要求1所述的咖啡飲料組合物的製造方法，其特徵在於， 在高效液相色譜分析中，當以五倍子酸作為標準物質時，在相對於五倍子酸的相對保留時間為0. 54 0. 61的時間區域內，所述咖啡飲料組合物實質上沒有峰。
3. —種咖啡飲料組合物的製造方法，其特徵在於，將焙煎咖啡豆提取物置於填充有吸附劑的柱中，在將含有羥基氫醌的組分溶出之後， 將不含羥基氫醌的組分溶出，所述咖啡飲料組合物中的羥基氫醌的含量為0 0. 00005質量％。
4. 如權利要求3所述的咖啡飲料組合物的製造方法，其特徵在於， 在高效液相色譜分析中，當以五倍子酸作為標準物質時，在相對於五倍子酸的相對保留時間為0. 54 0. 61的時間區域內，所述咖啡飲料組合物實質上沒有峰。
5. 根據權利要求1 4中任意一項所述的咖啡飲料組合物的製造方法，其特徵在於， 所述吸附劑是活性碳。
6. 根據權利要求5所述的製造方法，其特徵在於， 所述活性碳是通過氯化鋅法或水蒸氣活化法而被活化的活性碳。
全文摘要
本發明提供一種咖啡飲料組合物的製造方法，其特徵在於，在焙煎咖啡豆提取液或焙煎咖啡豆提取液的乾燥品的水溶液中，加入吸附劑並攪拌10分鐘～5小時，然後除去所述吸附劑，從而降低羥基氫醌的含量，所述吸附劑是活性炭或反相載體，吸附劑的使用量為，相對於焙煎咖啡豆的重量，活性炭的情況下為0.02～1.0倍，反相載體的情況下為2～100倍，所述咖啡飲料組合物中的羥基氫醌的含量為0～0.00005質量％。按照本發明的製造方法所製造的咖啡飲料組合物，即使長期飲用也不會在體內生成過氧化氫。
文檔編號A23F5/24GK101711543SQ200910221900
公開日2010年5月26日 申請日期2005年1月27日 優先權日2004年1月30日
發明者大南英雄, 山崎良惠, 渋谷祐輔, 落合龍史, 藤井明彥 申請人:花王株式會社