血液凝固測試的標準品/參比品/對照品的製作方法

2023-04-29 04:10:26

專利名稱：：血液凝固測試的標準品/參比品/對照品的製作方法血液凝固測試的標準品/參比品/對照品
背景技術：
：1.發明領域本發明涉及人血液測試的材料和試劑領域。2.現有技術描述測定血液凝固速度的測試可用於診斷出血異常和監測正經歷治療或服藥以防止血液凝塊形成的患者的血液凝固行為。凝血酶通過涉及一系列血液凝固因子的連續反應作用於血纖蛋白原(正常血液的一種可溶性組分)形成血纖蛋白，進而導致血液凝固。凝血酶本身通過兩種基礎途徑，外來途徑和固有途徑由凝血酶原形成，不同凝固檢驗檢測這些途徑的一種或兩種的活力。通過本領域已知的測定方法，例如凝血酶原時間(PT)檢測外來途徑的活力，而內在途徑的活力通過本領域已知的測定方法，例如活化部分促凝血酶原激酶時間(APTT)測試。PT和APTT通過它們各自的方法用作發生血液凝固所需時間長度的標誌。凝血酶原時間(PT)測試提供凝血酶原(也稱為第II因子)以及四種其它凝固因子-第I、V、VII和X因子存在和活性的標誌。當一種或多種這些因子的水平或活性異常地低，或者其活性被對象血液中的異常物質阻斷時，PT值(以秒表示)較高。在一些病例中，其是疾病情形的標誌，而在其它病例中，高數值是成功治療的標誌。例如，通過給予專門阻止或延遲血液凝塊形成的藥物，例如肝素和華法林治療某些醫學情形。例如，經歷華法林治療的對象的PT值可以是健康對象獲得的結果的約1.5-2.5倍。未經歷這種藥物治療的健康對象的PT值通常是約10-約13秒。通常先進行活化部分促凝血酶原激酶時間(APTT)測試，再進行外科手術以證實該對象具有正常的血液凝固行為。與PT相似，APTT也用於監測血液稀釋藥物，例如肝素的給藥，一般通過每兩小時實施該測試並修正藥物劑量直至獲得最佳劑量。對於凝固行為正常的對象，APTT值為約25-約39秒。臨床實驗室可從商業供應商處獲得用於PT和APTT測定的各種分析物和試劑。一種這樣的供應商是美國新澤西州帕西帕尼的DS公司(DiagnosticaStago，Inc.，Parsippany，NewJersey,USA),其產品包括用於APTT測試的STA-PPT[A]⑧試劑，用於PT測試的STA-NeoplastineCI+試劑。STA-PPT[A]⑧試劑用於涉及有標準量的腦磷脂(用作血小板替代品)和特定激活物存在下血漿再鈣化的測試。STA-NeoplastineCI+試劑與促凝血酶原激酶鈣(calciumthromboplastin)聯用。另一供應商是美國加利福尼亞州聖何塞的HS公司(HemoSense，Inc.,SanJose，California,USA)，其INRatio計量儀是檢測PT和國際標準化比率(INR)的測試裝置，所述比率是患者PT與某群體的正常平均PT之比。INRatio⑧計量儀利用重組人促凝血酶原激酶試劑從一滴手指針刺新鮮毛細血管血獲得這些數值並測定血纖蛋白原向血纖蛋白轉變後樣品阻抗的變化。另一種測試裝置是美國新澤西州東溫莎的i-STAT公司(i-STATCorporation,EastWindsor,NewJersey,USA)出售的i-STAT⑧分析儀。該i-STAT⑧分析儀是含有人工凝血酶底物的手提式裝置，該底物含有類似於血纖蛋白原上位點的連接鍵，而凝血酶通常切割該連接鍵以形成血纖蛋白凝塊。血液樣品中的凝血酶切割底物並釋放電流計檢測的電活性化合物。還可利用i-STAT⑧分析儀檢測活化凝血時間(ACT)，該時間是凝血連鎖完全活化所需的時間。可採用ACT測定，通過分析動脈和靜脈血液樣品來監測中等和高水平肝素治療。當有活化凝血酶存在時血纖蛋白原轉化成血纖蛋白導致大量或局部凝塊形成時，表明完全活化。用作血液樣品替代品的組合物通常與這些各種測試聯用作為標準品、參比品和對照品。這些組合物可用於監測儀器或裝置的精密度和準確性，監測儀器或裝置所用任何試劑的狀況和將患者樣品與其它樣品或固定值比較。當將具體裝置、儀器或方法介紹給新用戶時，樣品替代品也可用於培訓目的。配製樣品替代品(為方便起見，本文稱為對照品)的目的之一是獲得一種組合物，其對可能遇到的所有分析偏差與實際患者樣品一樣靈敏並能讀取該測定的醫學決定點(medicaldecisionpoint)範圍內的數值。最佳組合物也可以是製備或重建後能穩定數小時或數天的組合物。其它所需特徵是成本低，易於製備和批次之間有再現性。目前可用的一種對照品是StagoSTA-Coag對照品(DS公司目錄號00679)，其是一種兩水平凍幹對照品，含有分別代表正負水平的檸檬酸化正常和異常人血漿。以商品名LYPHOCHEK⑧凝固對照品出售的三水平對照品可購自美國加利福尼亞州赫拉克勒斯的生物輻射實驗室公司(Bio-RadLaboratories,Inc.,Hercules,California,USA)(目錄號744，745和746)，其用加工的人血漿和防腐劑製備。因為StagoSTA-凝固對照品和LYPHOCHEK凝固對照品均不含紅細胞材料，這些對照品均不是全血凝固對照品。這是不利的，因為任何全血凝固測試的最佳對照材料，特別是設計用於床邊檢驗(point-of-caretesting)的那些材料的構成應類似於檢驗的實際樣品，而由於缺乏紅細胞和紅細胞組分，基於血漿的對照品缺乏衍生自全血的樣品中存在的主要組分類別。分析對照系統公司(AnalyticalControlSystems,Inc.)的Speck，R.E.等在1999年8月17日授權的美國專利號5,939,325中公開了穩定全血凝固對照品的配方。Speck對照品包含非靈長類衍生的凝固因子與靈長類衍生的凝固因子的組合以彌補更不穩定的靈長類衍生因子的活性隨時間喪失。發明概述現已發現通過溶解從全血分離並經洗滌除去了血小板、白細胞和殘留血漿的紅細胞並將溶胞產物與人源無血小板緩衝血漿及抗微生物劑混合可製備凝固試驗的穩定全血對照品。如果將得到的組合物凍幹並用鹽水重建，重建的對照品在打開小瓶及封閉小瓶的保存條件下可保留其凝固活性幾小時，在許多情形中可保留幾天。可通過各種方式，包括利用消除了凝固因子的血漿或這種血漿與選擇比例的含天然水平凝固因子的血眾的組合，或通過調節紅細胞溶胞產物與血漿之比將給定對照品的凝固活性調節至所需水平。發明詳述與優選實施方式用於製備本發明對照品的紅細胞可以是各種來源，例如人、豬、牛、馬、鳥、山羊或綿羊，但優選靈長類來源，最優選人來源。可通過常規方法，例如離心從全血收集紅細胞，可用等滲緩衝洗滌溶液洗滌使收集的紅細胞不含白細胞、血小板(包括血小板膜組分)和殘留的血漿。一旦分離，可通過常規溶解技術溶解紅細胞。雖然可通過冷凍紅細胞然後融化實現溶胞，但該過程不是必需的，優選方法不是凍融。這些方法包括超聲處理、滲透壓休克和溶解細胞膜的化學處理。將紅細胞懸浮在低滲溶液，例如去離子水中充足時間以使細胞膜破裂來實施滲透壓休克。化學處理通常包括將紅細胞與導致膜破裂的洗滌劑或表面活性劑接觸。適合溶胞的洗滌劑和表面活性劑的例子是NP-40和其它乙氧基壬基酚(nonylphenolethoxylates)(陶氏化學品公司(DowChemicalCompany),米德蘭，密西根州，美國)，浣基芳基聚醚醇，例如TRITONX-IOO、BRIJ58(聚氧乙烯十六垸基醚)、CHAPS(磺基甜菜鹼型兩性離子洗滌劑)和十二垸基硫酸鈉。當利用洗滌劑或表面活性劑時，本領域技術人員不難知道合適濃度。例如，NP-40的合適濃度是約0.1重量°/。-約3.0重量％。一旦溶胞發生，可通過常規技術，例如過濾或離心除去溶胞產物的細胞碎片和任何其它固體物質。在本發明的某些實施方式中，為進一步控制組合物和最終對照組合物的特性，將溶胞產物調節至選擇的血紅蛋白濃度。在一些情形中，調節包括降低血紅蛋白濃度，在其它情形中，調節包括提高血紅蛋白濃度。用緩衝鹽水稀釋可降低濃度，通過過濾或透析可提高濃度。在大多數情形中，目標血紅蛋白濃度是約1g/dL-約25g/dL，優選約1g/dL-約15g/dL，最優選約10g/dL-約15g/dL。用於實施本發明的血槳是人源的，當需要消除或缺乏凝固因子的血漿時，可通過常規技術從正常血槳製備這種血漿。一種這樣的技術是用二乙基氨基乙基陰離子交換樹脂進行離子交換。本領域技術人員知道其它合適的離子交換樹脂。可根據血漿的PT值表示凝固因子的消除程度。因此，雖然正常血漿的PT值為約13-約18秒，凝固因子水平降低的血漿的PT值可以是約200秒或更高。用於實施本發明的血漿不含血小板，最終的組合物缺乏血小板膜組分。本文用術語"不含血小板"和"缺乏"包括絕對缺乏這些物質的血漿和組合物以及含有非常少量血小板物質的那些血漿和組合物，其含量非常少以致於存在這些物質的作用不比它們完全不存在時高。通過適當過濾，採用本領域技術人員已知的過濾方式不難獲得不含血小板的血漿。此外，可先將紅細胞洗滌足夠次數以除去血小板物質再溶胞，當通過離心分離紅細胞與全血時，可先從壓實的紅細胞中除去血沉棕黃層再重懸和溶胞以進一步確保除去血小板物質。以紅細胞為例，不含白細胞、血小板和殘留血漿的紅細胞的限定作相同解釋。通過向血漿中加入緩衝液，優選將本發明對照品的pH維持在約6.5-約7.5的範圍內。可利用能調節至該範圍的常規緩衝劑。例子是HEPES(4-(2-羥乙基)-l-哌嗪乙磺酸)、二甲砷酸鹽、檸檬酸鹽、MES(2-嗎啉代乙磺酸)、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、組氨酸、二-三(2-二(2-羥乙基)氨基-2-(羥甲基)-l，3-丙二醇)、磷酸鹽、乙醇胺、ADA(N-(氨甲醯基甲基)亞氨基雙乙酸)、碳酸鹽、ACES(N-(2-乙醯氨基)-2-氨基乙磺酸)、PIPES(哌嗪-N,N，-二(乙磺酸))、MOPSO(3-嗎啉代-2-羥基丙磺酸)、咪唑、BES(N,N-二(2-羥乙基)牛磺酸)、MOPS(3-嗎啉代丙磺酸)、TES(N-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸)、MOBS(4-(N-嗎啉代)丁磺酸)、DIPSO(3-[N,N-二(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸)、TAPSO(3-[N-三(羥甲基)甲基氨基]-2-羥基丙磺酸)、三乙醇胺、焦磷酸鹽、HEPPSO(N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-(2-羥基丙磺酸))和POPSO(哌嗪^"-二(2-羥基丙磺酸))。可利用各種常規抗微生物劑作為本發明組合物的抗微生物組分。例子是環丙沙星、兩性黴素B、阿米卡星、氯黴素、疊氮鈉和苯甲酸鈉。抗微生物劑的最佳含量可以是具有抗微生物作用並且不幹擾組合物中諸組分活性的任何量。在大多數情形中，約311^/1^(每升總組合物中抗微生物劑的毫克數)-約100mg/L，優選約10mg/L-約50mg/L的含量可獲得最佳結果。合適含量通常隨抗微生物劑而變，對於任何具體的抗微生物劑，熟知這些試劑及其用途的技術人員不難知道合適含量。通過改變溶胞產物與血漿之比，改變血漿的組成(特別是根據各種凝固因子的水平)，或該兩種方法可獲得在各種凝固測試中產生具體數值的組合物。以產生所需濃度的比例混合含有天然水平的凝固因子的血槳與缺乏或除去了凝固因子的血漿，血漿中凝固因子的水平可調節至任何所需水平。在許多情形中，在具體的凝固測試中製備一組兩種或更多種組合物以涵蓋凝固速度範圍是有用的。當製備一組兩種組合物時，一種宜在給定測試的正常範圍內，而另一種在代表異常緩慢凝固速度的升高範圍內。例如，對於製備成用於凝血酶原時間凝固測試的對照品的組合物，一種組合物宜顯示凝固時間在約9秒到約18秒的範圍內，而另一種宜顯示凝固時間大於24秒。例如，對於製備成用於活化部分促凝血酶原激酶時間凝固測試的對照品的組合物，一種組合物宜顯示凝固時間在約20秒到約40秒的範圍內，而另一種宜顯示凝固時間大於60秒。通常，用作凝血酶原時間凝固測試的對照品的組合物宜顯示凝血酶原時間測試值為約9秒到約100秒，而用作活化部分促凝血酶原激酶時間凝固測試的對照品的組合物宜顯示凝血酶原時間測試值為約25秒到約120秒。出於保存好運輸的目的，通常將本發明組合物凍幹，一旦要使用，通過溶解於合適的重建液體中重建。在凍幹狀態下，組合物優選是密封的並維持在冷凍環境中。優選通過溶解於去離子水或蒸餾水中重建。在某些情形中，特別是對於床邊分析，例如i-STAT分析儀，當重建液體是氯化鈣水溶液時可獲得最佳結果。在這種溶液中，優選的CaCl2濃度是約8mM-約16mM。提供以下實施例只是出於說明目的。實施例lA.製備溶血產物2-8。C以3000RPM離心人全血15分鐘獲得壓實的人紅細胞(RBC)。離心後，吸出殘留的血漿以及之前加入全血中的抗凝劑，除去壓實細胞上的血沉棕黃層。然後將細胞重懸在等體積等滲鹽溶液中，再於2-8。C以3000RPM離心15分鐘。離心後，抽出懸浮液體，將細胞重懸在等滲鹽溶液中至RBC計數為4-5x106RBCL。利用美國康乃狄克州丹伯裡布蘭森超聲公司(BransonUltrasonicsCorporation,Danbury，Connecticut,USA)的布蘭森超聲儀150超聲細胞破碎機或勻漿器以20瓦超聲處理1分鐘得到的RBC懸液(100mL)。超聲處理後，2-8。C以10,000RPM離心30分鐘以除去細胞碎片。然後利用分子量截斷值為10,000道爾頓的透析過濾設備將溶血產物濃縮至血紅蛋白濃度為15g/dL。B.製備缺乏凝固因子的血漿在設置於30-35。C的水浴中融化不含血小板的正常人血漿單位。融化後，合併諸單位，將11.9g/LHEPES和30mg/L環丙沙星加入合併的血漿中。攪拌得到的組合30分鐘，將pH調節至6.8。然後將lllmL二乙基氨基乙基陰離子交換樹脂(DEAE瓊脂糖凝膠，阿姆山姆法瑪西亞生物技術公司(AmershamPharmaciaBiotech),皮斯卡塔韋(Piscataway)，新澤西州，美國)加入1000mL該混合物使雙方接觸，從而消除了凝固因子混合物。然後在2-8。C繼續攪拌，利用DS壓實凝固分析儀(DiagnosticaStagoCompactcoagulationanalyzer)每15分鐘測試樣品的PT直至測得PT值為200秒以上。然後將血漿與陰離子交換樹脂的懸液經0.8卞m非玻璃濾器過濾以除去樹脂。C.製備正常血漿在設置於30-35。C的水浴中融化不含血小板的正常人血漿單位。融化後，合併諸單位，將11.9g/LHEPES和30mg/L環丙沙星加入合併血漿。將添加物混合30分鐘後，將合併血漿的pH調節至6.8。然後得到的混合物經0.8卞m非玻璃濾器過濾。D.製備產物混合不同比例的過濾溶血產物、缺乏因子的血漿和正常血漿以製備各種組合物，依據PT和APTT這些組合物具有不同凝固時間。混合各組合物，然後採用42小時的凍幹周期(在34小時內從-4(TC逐漸升溫至3(TC)凍幹。然後給各小瓶加蓋，作標記並於2-8'C保存。然後在去離子水中重建凍幹的組合物，對於從凍幹前l.OOmL組合物得到的固體體積用lmL水。第一組4種組合物和它們在StagoSTA壓實分析儀上的PT及APTT測量值見下表I。表Itableseeoriginaldocumentpage13然後在i-STAT分析儀上測試組合物1和2的PT、ACT(活化凝血時間)和INR(PT與平均正常PT之比)，結果見下表II。表IIi-STAT分析儀上測得的凝固速度值，以PT、ACT和INR表示tableseeoriginaldocumentpage14表i和n所示結果表明可用不同測試方案的各種方式設定對照品的反應水平。E.穩定性測試結果釆用加速穩定性模型進行非重建組合物的封閉小瓶穩定性測試來預測產物儲存期。與2-8"C的推薦保存溫度相反，該過程包括在升溫(25'C)下保存產物小瓶預定時期。然後重建小瓶中的樣品並測定PT和APTT以檢査分解或降解。當外推至保存溫度2-8t:時，結果表明產物在該溫度範圍內保存在封閉小瓶中可穩定至少1年。通過模擬實際使用條件測定開瓶穩定性。通過以下步驟測定將含有重建形式的組合物1和2的小瓶置於2-8"C冰箱中，每8小時從冰箱中取出小瓶，將小瓶在室溫平衡15分鐘，打開小瓶並將它們的內含物接觸實驗室環境15分鐘，然後取樣小瓶內含物，重新蓋上小瓶並將小瓶放回冰箱。在StagoSTA壓實分析儀上測定小瓶樣品的PT和APTT，結果分別見表III和IV。結果表明產物在2-8'C重建、打開和保存時能穩定至少8小時。表IIIStagoSTA壓實分析儀上測得的開瓶穩定性測試結果，以2-8'C的PT表示tableseeoriginaldocumentpage14表IVStagoSTA壓實分析儀上測得的開瓶穩定性測試結果，以2-8'C的APTT表示"""..................APTT(秒)..................時間(小時)1號組合物2號組合物832.366.72432.868,7表III和IV證明重建形式的兩種組合物在正常使用條件下能穩定24小時以上。提供以上描述主要是為了說明目的。雖然本文未述及，但本領域技術人員應明白利用本發明基本概念的其它改變和改進屬於隨附權利要求書表達的本發明範圍內。權利要求1.一種用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的已知凝固特性的組合物，所述組合物包含通過溶解不含血漿、白細胞和血小板及血小板膜組分的紅細胞獲得的紅細胞溶胞產物；緩衝至pH約6.5-約7.5的不含血小板的人源血漿，所述不含血小板的血漿是(i)消除了凝固因子的血漿，(ii)含天然水平的凝固因子的血漿，或(iii)(i)和(ii)的組合；和抗微生物劑；所述組合物缺乏血小板膜組分。2.如權利要求1所述的組合物，其特徵在於，所述紅細胞是靈長類來源的。3.如權利要求1所述的組合物，其特徵在於，所述紅細胞是人源的。4.如權利要求1所述的組合物，其特徵在於，所述紅細胞溶胞產物的血紅蛋白濃度是約1g/dL-約25g/dL。5.如權利要求1所述的組合物，其特徵在於，所述紅細胞溶胞產物的血紅蛋白濃度是約1g/dL-約15g/dL。6.如權利要求1所述的組合物，其特徵在於，所述紅細胞溶胞產物的血紅蛋白濃度是約10g/dL-約15g/dL。7.—種第一組合物和第二組合物的組合，所述各組合物如權利要求1所述，其中所述紅細胞溶胞產物和所述不含血小板的血漿具有選擇的溶胞產物:血漿比例，所述第一組合物的所述溶胞產物:血漿比例不同於所述第二組合物的所述溶胞產物:血漿比例，從而通過凝血酶原時間凝固測試檢測到所述第一組合物顯示凝固時間範圍是約9-約18秒，而所述第二組合物顯示凝固時間約24秒或更高。8.—種第一組合物和第二組合物的組合，所述各組合物如權利要求1所述，其中所述不含血小板的血漿由選擇比例的消除了凝固因子的血漿與含天然水平凝固因子的血漿構成，所述第一組合物的所述比例不同於所述第二組合物的所述比例，從而通過凝血酶原時間凝固測試檢測到所述第一組合物顯示凝固時間範圍是約9-約18秒，而所述第二組合物顯示凝固時間約24秒或更高。9.一種第一組合物和第二組合物的組合，所述各組合物如權利要求1所述，其中所述紅細胞溶胞產物和所述不含血小板的血漿具有選擇的溶胞產物:血漿比例，所述第一組合物的所述溶胞產物:血槳比例不同於所述第二組合物的所述溶胞產物血漿比例，從而通過促凝血酶原激酶時間凝固測試檢測到所述第一組合物顯示凝固時間範圍是約25-約40秒，而所述第二組合物顯示凝固時間約60秒或更高。10.—種第一組合物和第二組合物的組合，所述各組合物如權利要求1所述，其中所述不含血小板的血漿由選擇比例的消除了凝固因子的血漿與含天然水平凝固因子的血漿構成，所述第一組合物的所述比例不同於所述第二組合物的所述比例，從而通過活化部分促凝血酶原激酶時間凝固測試檢測到所述第一組合物顯示凝固時間範圍是約25-約40秒，而所述第二組合物顯示凝固時間約60秒或更高。11.一種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的已知凝固特性的組合物的方法，所述方法包括(A)溶解不含血漿、白細胞和血小板及血小板膜組分的紅細胞以形成溶胞產物；(B)合併所述溶胞產物與(a)緩衝至pH約6.5-約7.5的不含血小板的人源血漿，所述不含血小板的血漿是(i)消除了凝固因子的血漿，(ii)含天然水平的凝固因子的血漿，或(iii)(i)和(ii)的組合，和(b)抗微生物劑。12.如權利要求11所述的方法，其特徵在於，通過除凍融所述紅細胞以外的方法進行(A)所述的溶胞。13.如權利要求ll所述的方法，其特徵在於，通過超聲處理進行(A)所述的溶胞。14.如權利要求ll所述的方法，其特徵在於，通過滲透壓休克進行(A)所述的溶胞。15.如權利要求11所述的方法，其特徵在於，通過用化學溶解劑處理所述紅細胞來進行(A)所述的溶胞。16.如權利要求11所述的方法，其特徵在於，所述紅細胞是靈長類來源的。17.如權利要求ll所述的方法，其特徵在於，所述紅細胞是人源的。18.如權利要求11所述的方法，其特徵在於，還包括凍幹步驟(B)的產物。19.如權利要求ll所述的方法，其特徵在於，還包括(A')通過用鹽水稀釋所述溶胞產物來處理所述溶胞產物以改變其中的血紅蛋白濃度，再進行步驟(B)。20.如權利要求ll所述的方法，其特徵在於，還包括(A')通過濃縮所述溶胞產物來處理所述溶胞產物以改變其中的血紅蛋白濃度，再進行步驟(B)。21.如權利要求ll所述的方法，其特徵在於，步驟(B)之前所述溶胞產物的血紅蛋白濃度是約1g/dL-約25g/dL。22.如權利要求ll所述的方法，其特徵在於，步驟(B)之前所述溶胞產物的血紅蛋白濃度是約1g/dL-約15g/dL。23.如權利要求ll所述的方法，其特徵在於，步驟(B)之前所述溶胞產物的血紅蛋白濃度是約10g/dL-約15g/dL。24.—種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的已知凝固特性的第一和第二組合物的方法，所述方法包括通過權利要求11所述的方法形成第一和第二組合物，其中步驟(B)包括以選擇的溶胞產物:血漿比例合併所述溶胞產物與所述不含血小板的人源血漿，所述第一和第二組合物的所述選擇的溶胞產物:血漿比例不同，從而通過凝血酶原時間凝固測試檢測到所述第一組合物顯示凝固時間範圍是約9-約18秒，而所述第二組合物顯示凝固時間約24秒或更高。25.—種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的己知凝固特性的第一和第二組合物的方法，所述方法包括通過權利要求11所述的方法形成第一和第二組合物，其中步驟(B)的所述不含血小板的人源血漿由選擇比例的消除了凝固因子的血漿與含天然水平凝固因子的血漿構成，所述第一和第二組合物的所述選擇比例不同，從而通過凝血酶原時間凝固測試檢測到所述第一組合物顯示凝固時間範圍是約9-約18秒，而所述第二組合物顯示凝固時間約24秒或更高。26.—種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的已知凝固特性的第一和第二組合物的方法，所述方法包括通過權利要求11所述的方法形成第一和第二組合物，其中步驟(B)包括以選擇的溶胞產物:血漿比例合併所述溶胞產物與所述不含血小板的人源血漿，所述第一和第二組合物的所述選擇的溶胞產物:血漿比例不同，從而通過活化部分促凝血酶原激酶時間凝固測試檢測到所述第一組合物顯示凝固時間範圍是約25-約40秒，而所述第二組合物顯示凝固時間約60秒或更高。27.—種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的己知凝固特性的第一和第二組合物的方法，所述方法包括通過權利要求11所述的方法形成第一和第二組合物，其中步驟(B)的所述不含血小板的人源血漿由選擇比例的消除了凝固因子的血漿與含天然水平凝固因子的血漿構成，所述第一和第二組合物的所述選擇比例不同，從而通過活化部分促凝血酶原激酶時間凝固測試檢測到所述第一組合物顯示凝固時間範圍是約25-約40秒，而所述第二組合物顯示凝固時間約60秒或更高。28.—種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的己知凝固特性的多種組合物的方法，所述方法包括通過權利要求11所述的方法形成多種組合物，其中步驟(B)包括以選擇的溶胞產物:血漿比例合併所述溶胞產物與所述不含血小板的人源血漿，所述多種組合物的所述選擇的溶胞產物:血漿比例不同，從而通過凝血酶原時間凝固測試檢測到所述組合物之一顯示凝固時間範圍是約9-約18秒，而所述組合物中其它的顯示凝固時間不在所述範圍內。29.—種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的已知凝固特性的多種組合物的方法，所述方法包括通過權利要求11所述的方法形成多種組合物，其中步驟(B)包括以選擇的溶胞產物血漿比例合併所述溶胞產物與所述不含血小板的人源血漿，所述多種組合物的所述選擇的溶胞產物血漿比例不同，從而通過活化部分促凝血酶原激酶時間凝固測試檢測到所述組合物之一顯示凝固時間範圍是約25-約40秒，而所述組合物中其它的顯示凝固時間不在所述範圍內。30.—種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的已知凝固特性的多種組合物的方法，所述方法包括通過權利要求11所述的方法形成多種組合物，其中步驟(B)包括以選擇的溶胞產物:血漿比例合併所述溶胞產物與所述不含血小板的人源血漿，所述多種組合物在消除了凝固因子的血漿與含天然水平凝固因子的血漿的所述選擇比例中不同，從而通過凝血酶原時間凝固測試檢測到所述組合物之一顯示凝固時間範圍是約9-約18秒，而所述組合物中其它的顯示凝固時間不在所述範圍內。31.—種製備用於血液凝固速度測定的具有基本不隨時間變化的已知凝固特性的多種組合物的方法，所述方法包括通過權利要求11所述的方法形成多種組合物，其中步驟(B)包括以選擇的溶胞產物:血漿比例合併所述溶胞產物與所述不含血小板的人源血漿，所述多種組合物在消除了凝固因子的血漿與含天然水平凝固因子的血漿的所述選擇比例中不同，從而通過活化部分促凝血酶原激酶時間凝固測試檢測到所述組合物之一顯示凝固時間範圍是約25-約40秒，而所述組合物中其它的顯示凝固時間不在所述範圍內。全文摘要通過合併不含血漿、白細胞和血小板的紅細胞溶胞產物與不含血小板的人源血漿及抗微生物劑製備可在凝固測定中用作標準品、參比品、對照品、校驗品、線性檢驗品或訓練材料的基於全血的替代組合物。文檔編號G01N33/86GK101535814SQ200780035219公開日2009年9月16日申請日期2007年7月24日優先權日2006年8月4日發明者A·艾布拉赫姆,J·科勒,T·霍申請人:生物輻射實驗室股份有限公司