用於治療或預防眼部紊亂的角膜或基質內給藥試劑的製作方法

2023-04-29 13:05:46

專利名稱：用於治療或預防眼部紊亂的角膜或基質內給藥試劑的製作方法
技術領域：
本發明大體上涉及藥物製劑和醫學治療方法，特別的是用於治療或預防特定眼部紊亂的單獨或相互(或與其他試劑)組合使用的試劑(即脲、脲衍生物、非甾類消炎藥物及抗代謝藥物)。
背景技術：
脲在眼科學中的現有用途美國專利5,629,344(Charlton)和5,470,881(Charlton)描述了脲製劑對眼睛的特定治療應用。這些現有專利具體描述了用於眼睛部的脲非水軟膏和其他非水製劑，指出脲水溶液對於眼部治療是不切實際的。例如，這些現有專利有如下陳述「脲尚未用於治療眼部紊亂的一個原因是其在水溶性載體中會發生水解，從而產生副產物氨。氨對眼睛是有毒的，因而脲的水溶液用作眼部藥劑是不切實際的。」因此，在本申請人的發明之前，一直認為脲或脲衍生物水溶液不穩定，並且對眼睛具有潛在的毒性。
角膜的解剖學和物理學特性角膜是眼部視覺系統的第一也是最有力的屈光表面。視網膜受體上清晰影象的產生要求角膜必須透明並且具有合適的屈光力。年齡25歲以下人群正常角膜的平均角膜厚度是0.56mm，這個厚度會隨年齡緩慢增長，對年齡超過65歲以上人群會增至0.57mm。角膜外周厚度往往大於中心厚度。睡眠後閉眼一段時間，角膜厚度會達到最大，而當眼睛睜開並且暴露於空氣脫水效應後，該厚度會略微減少。
角膜由六層組成a)上皮，b)基膜，c)Bowman氏膜，d)基質，e)後彈性膜(Descemet′s membrane)，f)內皮。
a)上皮上皮由5-6層細胞組成。最表層的細胞是扁平重疊鱗狀細胞。隨著往更深層接近，中間層由變得更象柱狀的細胞組成。最內層(基底的)由相互排列很緊密的柱狀細胞組成。所有的細胞通過一種粘合質緊密結合。同樣，細胞表面形成與鄰近細胞的對應凹入相吻合的細胞突起，並且在適當位置通過稱為橋粒的連接體進行連接。基底細胞通過半橋粒連接至基膜。上皮佔了角膜總溼重的10％。上皮中水佔了溼重的70％。
雖然上皮由5-6層細胞組成，健康的上皮能通過橋粒相互緊密連接並通過半橋粒與基膜緊密連接。
b)基膜柱狀上皮細胞和Bowman氏膜之間是60-65nm厚的基膜。已通過組織化學法檢測了基膜並發現所述基膜與其它基膜類似。
c)Bowman氏膜通過光學顯微鏡可以看到Bowman氏層是約12μm厚的看不出結構的透明組織薄片。在電子顯微鏡下可以看出它是由可能為膠原材料的均一纖絲組成，平行延伸直至表面。Bowman氏層對任何病理過程幾乎沒有抵抗力，很容易被破壞，並且永無再生能力。
d)基質基質構成整個角膜的約90％。基質由多個片層組成，每一層延至角膜的全長；雖然各束之間相互交錯，但他們與表面幾乎平行。稱為角膜細胞的細胞體是展平的，因此他們不與表面平行，並且他們之間的細胞突起彼此交錯。這種纖維排列使角膜具有視覺均一性。基質構成整個角膜的約90％。基質由含有以溼重計75％至80％水的分化結締組織組成。剩餘20％至25％的固體是膠原、其它蛋白質，並且糖胺聚糖或粘多糖構成主要部分。膠原纖絲組織均勻，並且呈現出彼此由基質隔離的64-66nm的周期性膠原纖絲。纖維結構的尺寸、規格和精確間距是角膜透明性的重要物理特性。
糖胺聚糖(GAG，粘多糖)佔有角膜乾重的4％-4.5％。GAG局限於纖絲間或間質區域，可能連接於角膜膠原纖絲或可溶性蛋白上。GAG通過於電解質和水的相互作用而在角膜水合作用中起作用。在角膜基質中發現有三個主要的GAG部分硫酸角質素(50％)，軟骨素(25％)，以及硫酸軟骨素A(25％)。GAG的三個部分在維持角膜水合作用水平和透明度上起作用。
e)後彈性膜由IV型膠原構成，不同於角膜基質的是在後彈性膜中沒有顯著量的硫酸化GAG。所述膜中的膠原除在強鹼或強酸中外是不溶性的並且對膠原酶的抵抗力強於角膜基質膠原。Jakus2通過電子顯微鏡發現該膜具有規律性很強的類似於膠原的結構。後彈性膜具有很高的彈性並在深層角膜潰瘍形成穿孔時起屏障作用。
f)內皮內皮是作為後彈性膜襯裡的單細胞層。它的內表面浸於玻璃體液中。在人體內，內皮細胞層具有有限的(若有的話)繁殖能力。衰老會引起細胞損失，剩餘的細胞則增大並延伸從而維持後彈性膜被完全覆蓋，6因而以單位面積細胞數表示的內皮細胞密度將隨年齡增長而減少。類似地，由損傷、發炎或手術引起的細胞損失會通過增加的細胞尺寸和減少的細胞密度得以補償。
角膜新陳代謝包含一系列化學過程，由此獲得能量並利用能量以維持角膜的正常功能。在角膜內，需要能量維持其透明度和脫水作用。通過葡萄糖降解成乳酸並且降解成二氧化碳和水(即三羧酸循環)而產生ATP形式的能量。角膜主要從玻璃體液中得到葡萄糖。眼淚和角膜緣毛細管可能對角膜新陳代謝貢獻了極微量的葡萄糖和氧。
角膜消耗的大部分氧通過上皮和內皮攝入。上皮和內皮的氧消耗量幾乎是基質的26倍。角膜內皮從玻璃體液中得到其所需的大部分氧，而角膜上皮所得到的大部分氧則來自於角膜緣毛細管或前角膜薄膜中的溶解氧。
眼睛屈光矯正的方法放射狀角膜切開術(RK)是通過改變角膜曲率而改善近視的一個手術過程。這可通過以放射模式在角膜中切開幾個深切口而實現。眼睛手術通常切開4、8或16個切口從而使中心角膜的曲率變平，以達到矯正患者視力的目的。RK的主要缺點包括a)它只能用來矯正低度近視，b)這種手術操作不能矯正遠視，c)RK操作嚴重削弱角膜，並產生角膜斑痕，d)這種角膜曲率的改變是暫時的，隨時間會頻繁繼續改變。
屈光角膜切開術(PRK)是採用計算機控制的受激準分子雷射器進行的手術操作。通過PRK操作，受激準分子雷射器對角膜表面進行切除和塑型至所需形狀，從而矯正患者視力。雷射器和計算機控制相結合能可靠的治療近視，遠視，以及散光。由於PRK是一個手術操作，因而它可以導致併發症。感染是角膜上皮大面積切除所導致的最嚴重併發症。另外由於沒有角膜上皮引起的角膜癒合延遲，角膜簿翳(cornealhaze)，角膜斑痕，過度矯正或矯正不足，以及發展成散光是PRK的其它併發症。這些併發症必須通過藥物或進一步的手術進行治療。
雷射原位角膜磨鑲術(LASIK)是由PRK變化而來的手術操作，包含一個受激準分子雷射器以及一個稱為微型角膜刀的精確切割工具。微型角膜刀用來在角膜上製造150-175微米的環形瓣。環形瓣翻轉過來如同在折葉上以露出角膜基質層。環形瓣摺疊過來後，屈光眼科醫生即切除基質，並用受激準分子雷射器進行屈光矯正。環形角膜瓣復位於切除後的角膜上從而完成手術操作。隨著對角膜瓣的精確雷射治療，以及正常的復置和癒合，可很快達到具有良好視力矯正的屈光效果。然而，LASIK過程也會伴有一系列顯著的潛在併發症和風險失敗的微型角膜切割會在角膜瓣第一個切口留下折葉，手術操作后角膜瓣受損，角膜瓣的滑移和偏離中心的癒合，第一個切口太深或太淺，角膜上皮內長入基質，角膜感染，角膜擴張，由於斑痕導致的視敏度受損以及基質膠原結構的視覺變形。
雷射上皮角膜磨鑲術(LASEK)是由PRK變換而來的一種手術過程，包含一個受激準分子雷射器，所述雷射器結合了PRK和LASIK的優點，摒棄了PRK和LASIK的缺點。以瞳孔為中心在其上用Hoffer環鋸標記一個7.0mm的上皮環形區域。通過採用鈍刮刀移去角膜上皮，或暴露於使該角膜上皮剝離的20％異丙醇溶液中。醫生採用受激準分子雷射器對角膜表面進行切除並塑型至所需形狀，以矯正患者視力。手術過程最後，將通過醇溶液剝離出來的角膜上皮復位於切除後的角膜上，並在矯正後的眼睛上施用一滴抗生素，一滴非甾類消炎劑和一種治療用隱形鏡片。刮除角膜上皮或應用醇溶液剝離上皮導致的上皮缺損幾天後即可完全閉合。通過精確雷射治療以及角膜上皮的正常癒合，可很快達到具有良好視力矯正的屈光效果。然而，LASEK過程也會伴有一些潛在的併發症和風險由上皮刮除所致上皮缺損引起的角膜感染，醇溶液的使用引起剝離角膜上皮的廣泛受損，從而使再次使用的角膜上皮的用處降至最低。
熱角膜成形術是另一種角膜重塑方法。在該過程中，將55℃-58℃的熱施用於角膜膠原纖維，以誘導出無組織破壞的皺縮。膠原纖維的皺縮會引起角膜力學屬性的改變並使角膜變平，從而達到屈光矯正效果。美國專利4,881,543描述了採用微波電磁能量使角膜膠原皺縮，美國專利5,779,696描述了採用光能使角膜重塑。所有這些熱角膜成形術體系都有一個缺點，即治療的角膜在治療後具有不穩定性。
角膜塑型術是一種用以矯正屈光誤差的非手術操作，其通過將角膜塑型至所需的角膜曲率從而達到正常視眼。這可通過採用一系列改變角膜曲率的硬質隱形鏡片而實現，直至達到所需曲率。然而一旦產生所需曲率，必須配戴維持性硬質隱形鏡片以穩定效果，否則可能會發生倒退。
酶角膜塑型術與傳統角膜塑型術有關，因為主要定義為一種通過角膜重塑至正常視眼所需曲率以矯正眼睛屈光誤差的隱形鏡片操作。該體系通過酶作用軟化角膜而得以增強，並可在更短時間內達到重塑，並且在摘除隱形鏡片後無需配戴維持性鏡片即可達到較好的視敏度，不會發生倒退問題。
化學角膜塑型術與傳統角膜塑型術有關，因為主要定義為一種通過角膜重塑至正常視眼所需曲率以矯正眼睛屈光誤差的接觸鏡片操作。該體系通過採用局部或基質內注射一種非酶類化學試劑軟化角膜而得以增強，並可在更短時間內達到重塑，並且在摘除接觸鏡片後無需配戴維持性鏡片即可達到較好的視敏度，並且不會發生倒退問題。
發明概述本發明提供了治療或預防人體或牲畜病患眼部紊亂的方法，所述方法通過將治療用有效劑量的水溶液進行眼睛局部給藥或注射入眼睛(例如玻璃體內，基質內或結膜下)進行，所述水溶液含有選自如下的試劑脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨或其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物及其這些試劑的任一可能組合。採用本方法所包含的治療目的有去除角膜上皮，溶解角膜蛋白聚糖，屈光LASIK矯正中角膜基質的界面封閉和有組織的癒合，蛋白質和胺基酸的溶解以壓縮膠原纖絲以得到更好的視敏度和更好的視覺質量，在使用隱形鏡片或角膜重塑模板前或使用時軟化角膜以用於近視、老花眼、遠視、散光和圓錐形角膜的非手術屈光矯正，溶解新合成的蛋白聚糖從而減少或去除角膜簿翳(corneal haze)和/或角膜渾濁，溶解前房中的蛋白聚糖從而增加液體流出以降低某些綠內障患者的眼內壓，引成纖維細胞的溶解作用，抑制成纖維細胞，抑制或預防角膜纖維化和斑痕形成，抑制眼部組織成纖維細胞的增生，通過抗血管生成作用抑制角膜和虹膜中的VEGF活性，從而消除角膜新血管和虹膜新血管的前行和退行。通過這些中的一種或多種治療效果和/或其它仍有待闡明的作用機制，本發明方法可用於治療各種眼部紊亂。本發明申請中使用的術語「治療」並不局限於僅僅治療現有的疾病或紊亂，也指預防、制止、停止、治療或減緩這些紊亂的進展。可以通過本發明方法治療的眼部紊亂包括但不局限於屈光紊亂，視敏度減弱或視覺質量減弱，近視，老花眼，遠視，散光，圓錐形角膜，角膜纖維化，斑痕形成，角膜渾濁，pterigiums，角膜新血管生成，虹膜新血管生成，綠內障。
此外根據本發明，可將該試劑與諸如下列的抗代謝化合物一起施用絲裂黴素，氨甲蝶呤，硫脲，羥基脲，6-巰基嘌呤，硫代鳥嘌呤，5-氟尿嘧啶，阿糖胞苷和5-氮雜胞苷。
進一步的根據本發明，可將該試劑與諸如下列的抗腫瘤試劑結合施用放線菌素D，道諾紅菌素，阿黴素，去甲氧柔紅黴素，博萊黴素或普卡黴素也可與這些抗代謝物結合使用。
更進一步地，對可閱讀和理解如下本發明詳述和此後陳述的具體實施例的本領域技術人員來說，本發明的目的和優點是顯而易見的。
發明詳述下面的詳細描述和其中提及的實施例目的僅在於描述用於本發明的特定實施方案或實施例，不應以任何方式解釋為對本發明範圍的限制。
角膜上皮的去除本發明方法的一個應用實例是用於角膜上皮的去除。如上述所解釋，角膜上皮細胞通過粘合質緊密結合。另外，細胞表面形成與相鄰細胞的相應凹入吻合的突起，並通過稱為橋粒的連接體相互連接。另外，上皮基底細胞通過半橋粒與基膜相連。當角膜上皮由於化學或物理手段而受損時，就會引起隨後的基質腫脹。角膜磨損或任何引起上皮損傷的條件都可能產生局部面積的角膜腫脹和渾濁，並可導致微生物侵入和細菌感染。幸運的是，角膜上皮再生很快，如沒有細菌感染過度水合和傷口封閉是細微並且瞬間的。
保持上皮完整並且不受損傷的完成機械學或化學去上皮(清創術)不是一件容易的工作。目前有一些使用的方法，但是所有這些方法和材料都引起對角膜上皮的嚴重損傷。
機械去上皮通常是在上皮用7.0mm Hoffer環鋸在瞳孔中心上進行標記後用局部麻醉劑的局部麻醉條件下用鈍刮刀進行的。所生成的角膜傷口通常需要幾天以重新生成上皮。在此期間任何暴露的角膜切口或傷口都易受細菌汙染和感染。
採用醇類的化學移除上皮通常也在用局部麻醉劑進行局部麻醉的條件下進行。上皮用7.0mm Hoffer環鋸在瞳孔中心上進行標記，並通過環鋸上的小凹槽切出一個環形切口。當環鋸還在角膜上時，將5-10滴20％異丙醇滴入環鋸並與上皮接觸幾分鐘。用幹海綿去除醇溶液，將環鋸從角膜上移開。用鈍刮刀將上皮完整切除。該過程是去除角膜上皮的簡單方法，然而由於暴露於醇溶液中導致50％-70％的上皮細胞受損。而且20％醇溶液對眼睛具有刺激和致發炎作用。手術操作後，所形成的角膜傷口用原先由醇移除的單塊上皮覆蓋。所形成的傷口暫時性覆蓋上角膜上皮，還需幾天後才能重新形成上皮。在此傷口癒合期間，角膜較不易受細菌汙染和感染。
根據本發明，還提供了一種利用選自如下的試劑化學去除角膜上皮的新方法脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨或其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物及其這些試劑的任一可能組合。該方法可在用局部麻醉劑進行局部麻醉的條件下進行操作。首先，上皮用7.0mm Hoffer環鋸在瞳孔中心上進行標記，並通過環鋸上的小凹槽切出一個環形切口。當環鋸還在角膜上時，將5-10滴藥劑(例如，0.01％-20％水溶性脲溶液)滴入環鋸並與上皮接觸幾分鐘。用幹海綿去除試劑(例如，水溶性脲溶液)，將環鋸從角膜上移除。用鈍刮刀將上皮以整塊完整切除。該過程是去除角膜上皮的簡單方法，並對上皮細胞無損害。手術操作後，所形成的角膜傷口以脲移除的單塊上皮覆蓋。所形成的傷口暫時性的覆蓋上角膜上皮，1-2天後即可有上皮的重新生成。在此傷口癒合期間，角膜較不易受細菌汙染和感染。這種採用本發明試劑(例如脲溶液)進行的化學法去角膜上皮可用作眼部手術的輔助手段，以治療皰疹上皮角膜炎，以及採用雷射上皮角膜磨鑲術(LESEK)進行視力屈光矯正。
在屈光LASIK矯正中增強的角膜界面封閉和有組織的角膜基質癒合本發明同樣提供了LASEK手術後增強角膜癒合的方法。在該方法中，LASIK操作後在角膜上施用一種選自如下的試劑脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidiniumchloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨或其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物及其這些試劑的任一可能組合。例如，在將角膜上皮切瓣復位於雷射切除後的角膜上之前，可將幾滴試劑(例如0.01％-20％水溶性脲溶液)滴於受激準分子雷射器切除後的基質表面上。置於角膜上皮和基質界面上的脲溶液可以導致基質蛋白聚糖的局部增溶作用，並且能壓縮膠原纖絲填充物以形成更好的視覺效果，而仍保持正常透明度。
雷射原位角膜磨鑲術(LASIK)屈光矯正的成功完成帶來角膜精密切割，受激準分子雷射器對基質的切除和環形瓣在切除後的角膜上的復位。角膜瓣的正常復置和癒合對良好的視力矯正和快速癒合是非常重要的參數。微型角膜刀切除的環形瓣置於受激準分子雷射器切除後的基質表面可導致基質內基質上部和下部之間出現一個界面缺口。這種界面缺口會干擾最優視力矯正，另外界面缺口永不會完全合併成單個基質，意味著角膜傷口不能完全癒合。
在本發明增強的角膜界面封閉和LASIK屈光矯正角膜的有組織的癒合中，將角膜上皮切瓣復位於雷射切除後的角膜上之前，可將幾滴本發明試劑(例如0.01％-20％水溶性脲溶液)置於受激準分子雷射器切除後的基質表面上。置於兩個角膜瓣之間界面上的脲溶液可導致基質蛋白聚糖的局部增溶，並消除界面缺口，這樣可形成最優的視力矯正。另外，基質蛋白聚糖的局部增溶可導致膠原纖絲填充物的壓縮，從而形成更好的視覺效果，而仍保持正常透明度。
通過局部或基質內施用使角膜基質軟化，用於非手術屈光矯正近視，老花眼，遠視，散光和圓錐形角膜本發明還提供了通過對角膜施用選自如下的試劑軟化角膜的方法脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨或其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物及其這些試劑的任一可能組合，施用量有效引起角膜暫時軟化，從而可從第一構型重塑至所希望的屈光正常的第二構型。角膜軟化可在患者配戴具有使得眼睛屈光正常所需第二構型的凹面形狀的剛性隱形鏡片時進行。其后角膜即可在鏡片影響下塑型至所需第二構型。由於角膜軟化是蛋白聚糖局部增溶作用的結果，而非蛋白聚糖分子的化學損壞，因而在存在或沒有成形剛性鏡片情況下，試劑的角膜軟化效果可能會消散的更快。
角膜形狀基於基質膠原纖絲，膠原纖絲平行處於相互之間距離幾乎確定的適當位置，這些膠原纖絲之間是粘多糖粘合層。脲和脲衍生物具有增溶粘多糖和各種蛋白質的能力。由此基質被軟化並且變得更加柔順，易於塑型至更渴望的形狀。
在優選實施方案中，角膜軟化劑含有脲或脲衍生物以及可作藥用載體和添加劑。該製劑可以液體或凍幹劑型提供。根據本發明的角膜軟化劑可以多種方式施用於角膜。典型地，該試劑可以滴眼液的形式施用，或者通過使用可包括含脂質體的角膜軟化劑輸送載體，持續釋放凝膠和可植入固體劑型以及隱形鏡片和生物可降解角膜膠原屏蔽物的形式施用。
非手術治療和角膜簿翳(corneal haze)及角膜渾濁的去除視敏度減少和失明可由角膜創傷，角膜斑痕或任何其它引起角膜渾濁的原因所導致的角膜澄明度缺乏而形成。由於角膜渾濁而引起的視敏度減少的患者預計有300萬。當前治療角膜渾濁的方法是角膜移植，採用人體角膜捐獻組織進行的一種稱為穿透板角膜成形術的手術進行。該手術方法認為是安全和有效的，然而其中風險之一包括移植排斥和通過捐獻的角膜組織傳播的病毒與細菌感染。可進行的移植手術操作總數受到用於移植的捐獻角膜可行性的限制。
本發明提供了改善角膜澄明度或治療角膜斑痕、角膜渾濁和包含角膜簿翳(corneal haze)的視覺偏差的方法，所述方法通過對眼部施用選自如下的試劑進行脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨或其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物及其這些試劑的任一可能組合，施用量為有效加速角膜蛋白聚糖、粘聚糖和各種其它蛋白質的增溶作用，以及導致角膜膠原的重新組織。所導致的重新組織可清除角膜斑痕，角膜渾濁和角膜簿翳(cornealhaze)。例如，該試劑(例如脲或其衍生物的水溶液)可以進行局部施用或注射能減少角膜膠原結構破壞的量，通過化學修飾或角膜基質糖蛋白和蛋白聚糖溶解進行。
角膜糖蛋白和蛋白聚糖在確立和維持角膜透明度中的作用仍不十分明了。已有假設認為角膜蛋白聚糖在調節膠原纖絲間隙上起作用。雖然蛋白聚糖的確切作用仍不清楚，然而普遍認為它們可影響角膜的水合作用、厚度和澄明度。角膜中的透明質，除發育過程和某些角膜異常之外，其功能意義仍然未知。
在一些不透明的人體角膜斑痕中，已發現斑痕含有直徑反常的大膠原纖絲和不規則纖絲間空隙。然而，在大鼠角膜傷口癒合過程中，早期不透明的斑痕含有不規則分隔於組織中的普遍正常直徑的膠原纖絲。癒合一年之後膠原纖絲直徑並沒有明顯改變，但是纖絲間空隙回復正常，並且伴隨有斑痕不透明性的減少。
1983年Hassell等為作者的一篇論文表明，含有較大纖絲間空隙的不透明斑痕也含有帶有正常尺寸糖胺聚糖側鏈的異乎尋常大的硫酸軟骨素蛋白聚糖。這些不透明斑痕也缺乏硫酸角質素蛋白聚糖，但是含有透明質酸。對大鼠角膜傷口中的角膜斑痕內的蛋白聚糖進行生物化學分析，並與斑痕附近的正常角膜進行比較表明該部位蛋白聚糖的合成彼此具有可測定程度上的不同。
Hassell等對手術過程中從帶有斑狀角膜萎縮患者身上獲得的角膜標本進行了分析。Hassell等發現正常角膜上的細胞合成了類似於猴子和牛角膜中的硫酸軟骨素蛋白聚糖和硫酸角質素蛋白聚糖。斑狀角膜萎縮區域的細胞合成了正常的硫酸軟骨素蛋白聚糖，但既沒合成硫酸角質素也沒合成成熟的硫酸角質素蛋白聚糖。作為替代，該區域細胞合成了帶有異乎尋常大寡糖側鏈的糖蛋白。
角膜透明度可以以比上述角膜創傷中更微妙的方式發生改變。在某些條件下，視覺表象、單色象差可減少受試者眼睛的視敏度(VA)。在視網膜鑲嵌結構的基礎上，人眼睛的視敏度可以到20/10或更好，然而這麼好的視敏度是很少達到的。用於解釋視敏度達不到最優水平的兩個視覺條件是由於瞳孔尺寸而致的衍射及單色象差。由衍射引起的視敏度限制可隨著瞳孔直徑增加而減少，並且只在瞳孔小於2mm時起重要作用。然而，人眼睛的高階視覺誤差(象差)，則具有相反行為並隨瞳孔直徑增大而增長。
人體角膜和鏡片的形狀通常設計成使得這種象差最小化的形式。據我們所知，目前人眼睛的單色象差還沒有進行大量個體的系統研究。因而，還沒有得到用於標準人群的平均數值。然而，伴隨著屈光矯正手術的出現，通過視覺色差而致的視敏度受損有可能具有臨床相關性。
用於近視和散光的屈光手術，例如放射狀角膜切開術(RK)，屈光性角膜切除術(PRK)，以及雷射原位角膜磨鑲術(LASIK)誘導了一個非生理學的角膜形狀，即帶有一個平面中心區域並且沿外周力量增大。這種形狀誘導了視覺象差的增長，以及可在低照明條件下通過低對比度視敏度測試檢測出的視覺受損。這些角膜屈光手術副作用是仍然未知的討論中的潛在公眾健康問題。
PRK和LASIK后角膜波前象差的對比通過22名雙眼近視患者的預期隨機研究進行比較，這些患者一隻眼接受PRK手術，另一隻眼接受LASIK手術。手術前，通過3mm-7mm的模擬乳頭擴張引起總象差增長5-6倍。手術後，通過相同的擴張術使PRK組中的總象差增長25-32倍，LASIK組中的總象差增長28-46倍。屈光性角膜切除術和雷射原位角膜磨鑲術均可增加總波前象差，並且在12個月的跟蹤階段該數值沒有退回至手術前水平。
大鼠LASIK手術後的1、2和9個月進行了LASIK后角膜傷口癒合研究，以用於評估角膜傷口癒合過程。對大鼠角膜的定期病理組織學評估表明，甚至在LASIK手術後9個月沿角膜瓣界面仍顯示有無組織的膠原纖維。該結果表明由LASIK手術誘導的角膜象差和傷口癒合過程在LASIK手術後9個月仍有繼續。本發明在此公開的方法和組合物提供了克服當前屈光手術法引起的視覺象差的副作用。
不受限於任何特定的作用機理，已經得出理論表明由RK、PRK、LASIK、LASEK和其它手術操作所致的各種角膜象差都是由癒合過程出現的膠原纖絲組織破壞所引起。例如，LASIK操作後，將角膜瓣置於覆蓋手術操作部位後，角膜膠原將會生成並封閉切口。隨著這種膠原的形成，其將以某種構象進行排列，即較之位於不受手術影響的角膜區域的膠原而言，其組織程度較低。這種材料的重組會導致由這些手術引起的最優象差的降低。
因此，本發明提供了一種新的化學方法用於去除由意外角膜外傷或近視、遠視和散光的屈光手術，諸如放射性角膜切開術(RK)，屈光性角膜切除術(PRK)，和雷射原位角膜磨鑲術(LASIK)，雷射上皮角膜磨鑲術(LASEK)所引起的角膜象差和角膜膠原纖絲組織破壞，以改善視敏度和視力質量。
Pterigium的非手術治療本發明提供了一種通過對角膜施用一種選自如下的試劑用於治療角膜pterigia的新方法脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨或其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物及其這些試劑的任一可能組合，施用劑量為可有效抑制成纖維細胞MMP-1和MMP-3的表達。例如，可以對角膜pterigium施用治療有效量的脲或其衍生物水溶液，以阻止或延緩角膜中成纖維細胞MMP-1和MMP-3的表達。脲及其衍生物具有使表達的MMP’s酶失活的能力。並且已確認和證明脲及其衍生物通過其對蛋白質的增溶能力可以改變蛋白質的二級和三級結構，從而使這些蛋白質失活。由脲及其衍生物所致的蛋白質增溶作用可以清除角膜pteriga，阻止Bowman氏層溶解並且產生角膜新生血管的消退。
已確認了原發和復發ptegria的幾個重要臨床和病理學特性。包括如下幾點a)紫外線-B輻射似為pterigia和結膜緣瘤的病因。
b)pterigia從結膜緣上皮處，而非結膜上皮開始生長。
c)結膜緣上皮及後續的結膜上皮片段向中心侵入角膜。
d)不同類型的角膜細胞在pterigia組織的前沿進行發育。
e)Bowman氏層在pterigia的前沿處溶解。
f)臨近pterigia的結膜出現血管生成。
g)Pterigia具有很高的復發率。
最通常地，休止組織，結膜-結膜緣-角膜上皮組織表達的MMP’s量非常少，用免疫組織化學法幾乎無法檢測。然而，最近已證明，類似於其它侵入性腫瘤，改變的pterigia緣基底上皮(limbal basalepithelial)細胞可表達6種不同類型的MMP’s。推測這些MMP’s可能是該腫瘤的角膜入侵的促進劑，並有助於Bowman氏層的溶解。已知MMP-2和MMP-9表達的提高可溶解諸如半橋粒的基膜組分，導致腫瘤細胞的遷移和入侵。另外，在pterigia中已鑑定出四組不同的成纖維細胞。這些成纖維細胞主要表達MMP-1和一些MMP-3。
Pterigia是改變的緣基底細胞(limbal basal cells)腫瘤，可分泌TGF-β並產生與其它入性侵腫瘤類似的各種類型的MMP’s。該腫瘤細胞蛋白酶可降解其基膜組分，從而有利於入侵。越過Bowman氏層的Pterigium入侵細胞可產生表達量提高的MMP-1，MMP-2和MMP-9，這些物質有助於Bowman氏層的完全溶解。局部成纖維細胞被TGF-β和bFGF細胞因子途徑活化，從而有助於Bowman氏層由MMP-1完全溶解。
角膜和虹膜新血管生成的治療本發明提供一種通過對角膜施用一種選自如下的試劑治療角膜pterigia的新方法脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨或其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物及其這些試劑的任一可能組合，所用劑量為可有效抑制角膜和/或虹膜的新血管生成。
在代謝或損傷相關壓力的條件下，角膜可被白細胞和纖維細胞侵入，使營養物供給和代謝儲備不充分，其結果是使新血管從膜緣叢萌芽並內長入基質，從而導致角膜血管生成。刺激血管內長的性質與損傷及其導致的角膜水腫相關的組織鬆弛有關。然而角膜新血管生成的初始因素與具有藥理學活性的血管生成素類化合物例如VEGF和FGF的集結和釋放有關，所述化合物引起了新血管的生成，從而提供角膜所需物質。角膜中新血管的存在使角膜充滿了血管並幹擾了患者的視敏度。類似地，眼睛靠後部位的損傷和視網膜與視神經中氧氣供給量的減少使得VEGF血管生成素因子在玻璃體中釋放。其結果是虹膜中新血管生成，引起出血和失明。
綠內障的治療本發明提供了通過對眼睛局部施用或注射入眼睛(例如，玻璃體內，基質內或結膜下注射)治療用有效量的含有一種如下試劑的水溶液治療綠內障的方法脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨或其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物及其這些試劑的任一可能組合。
除作為綠內障存在和進展中的一種重要標誌物外，視神經乳頭的結構還在綠內障的發病機理上起作用。有兩個主要理論用於解釋綠內障中的視神經損傷機理。首先，機械IOP相關原理認為，壓頭直接作用於lamina cribosa。在視神經乳頭盤的lamina cribosa上部和下部得不到很好支撐，並且此時開始出現損傷出現特有的弓形缺陷。視神經乳頭盤支撐的神經節細胞的變異可以解釋帶有類似IOP’s個體間的IOP敏感性差異。第二種是血管機制理論，其假設認為視神經乳頭盤毛細管微循環的改變引起了綠內障變化，至於這對IOP是初級血管還是次級則沒有闡明。
本發明提供了可局部施用或注射入眼睛的含脲溶液(例如含脲、脲衍生物(如羥基脲)和/或其混合物的溶液)。另外，本發明的一些局部施用或注射用的含脲溶液可進一步的含有抗代謝物(如絲裂黴素C、氨甲蝶呤、6-巰基嘌呤、硫代鳥嘌呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷和5-氮雜胞苷。
調至pH約4.0-8.0的脲或羥基脲溶液，當其局部施用或通過玻璃體內、基質內或結膜注射1次、2次或更多次每次使用施用體積15-200微升，劑量為含脲0.001％-4.0％及0.001％-20.0％時基本上無毒且具有良好的耐受性。
穩定的脲製劑水溶液實施例以下是本發明可使用的含脲溶液的實施例實施例1.
脲USP/NF 0.001-4.0％氯化鈉USP/NF 0.1％-0.9％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例2脲USP/NF 0.001-4.0％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％氯化鈉USP/NF 0.1％-0.9％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例3脲USP/NF 0.001-4.0％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)
實施例4脲USP/NF 0.01-20.0％氯化鈉USP/NF 0.1％-0.9％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例5脲USP/NF 0.01-20.0％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％氯化鈉USP/NF 0.1％-0.9％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例6脲USP/NF 4.0％磷酸氫二鉀USP/NF 5.0毫摩爾注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例7脲USP/NF 4.0％磷酸氫二鉀USP/NF 50.0毫摩爾注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0
(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例8(凍乾粉末)脲USP/NF 0.01％-20.0％山梨醇USP/NF 0.10％-0.50％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例9脲USP/NF 4.0％山梨醇USP/NF 0.10％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)檸檬酸鹽、磷酸鹽或其它緩衝液可選擇性用於上述實施例1-7中所列製劑中。同樣氯化鈉、葡萄糖或其它供選擇的填充劑可用於這些製劑中。
含有醇類和嵌段聚合多元醇的脲水溶液的實施例實施例10脲USP/NF 0.01％-20.0％異丙醇(90％) 0.5％-20％氯化鈉USP/NF 0.1％-0.9％
檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例11脲USP/NF 0.01％-20.0％異丙醇(90％) 0.5％-20％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例12脲USP/NF 0.01％-20.0％異丙醇(90％) 0.5％-20％丙二醇 0.10-50.0％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例13脲USP/NF 0.01％-20.0％丙二醇 0.10-50.0％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0
(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例14脲USP/NF 0.01％-20.0％聚乙二醇 0.10％-50.0％氯化鈉USP/NF 0.1％-0.9％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)羥基脲的水溶液的實施例以下是本發明可使用的含羥基脲製劑的實施例實施例15羥基脲USP/NF 4.0％氯化鈉USP/NF 0.10％-0.90％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例16羥基脲USP/NF 4.0％氯化鈉USP/NF 0.10％-0.90％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調
pH)實施例17羥基脲USP/NF 0.01％-15.0％氯化鈉USP/NF 0.10％-0.90％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例18羥基脲USP/NF 4.0％磷酸氫二鉀USP/NF 5.0-50.0毫摩爾注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例19羥基脲USP/NF 4.0％山梨醇USP/NF 0.10％-0.50％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)含抗代謝製劑水溶液製劑的實施例以下是根據本發明可使用的抗代謝物溶液製劑實施例。為了用抗代謝物與脲或本發明其它試劑結合使用治療患者眼睛，這些抗代謝物溶液可與脲或其它試劑水溶液相結合，或者抗代謝物溶液與脲或其它試劑水溶液分開局部施用或注射施用。
實施例20羥基脲USP/NF 0.01％-15.0％氯化鈉USP/NF 0.10％-0.90％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例21絲裂黴素C 100μg-200mg氯化鈉USP/NF 0.10％-0.90％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)實施例22硫脲USP/NF 0.010％-10.0％氯化鈉USP/NF 0.10％-0.90％檸檬酸USP/NF 0.00007％-0.02％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)
實施例23硫脲USP/NF 0.010％-10.0％注射用無菌水USP足量100％溶液pH 4.0-8.0(用0.1N HCl或0.1N NaOH調pH)
權利要求
1.一種治療人或牲畜病患眼部紊亂的方法，所述方法包含如下步驟A.通過眼部局部施用或通過眼部基質內、結膜下注射而遞送含有治療有效量的選自下列試劑的水溶液 脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨和其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物。
2.根據權利要求1的方法，其中所述試劑通過局部施用遞送到角膜。
3.根據權利要求1的方法，其中所述試劑通過基質內注射、注射入前房和結膜下注射而遞送到角膜。
4.根據權利要求1的方法，其中步驟A中遞送的試劑含有選自如下的脲衍生物羥基脲；硫脲；以及其可能的組合。
5.根據權利要求1的方法，其中步驟A中遞送的試劑是能至少引起如下現象之一的試劑使角膜去上皮；軟化角膜；壓縮膠原纖絲排列；治療pterigiums，治療角膜新血管生成，治療虹膜新血管生成以及治療綠內障，所述試劑選自脲；脲衍生物；羥基脲；硫脲；核苷；核苷酸；；腺嘌呤；腺苷；胞嘧啶；cytadine；鳥嘌呤；胍；guanidinium chloride；guanidinium鹽；guanitadine；胸苷；Thymitadine；Uradine；尿嘧啶；半胱氨酸；還原硫辛酸；尿酸；乙醯基水楊酸鈣；硫酸銨；異丙醇；乙醇；聚乙二醇；聚丙二醇；以及泊洛沙姆嵌段聚合物。
6.根據權利要求1的方法，其中步驟A遞送的試劑每50微升到100μL溶液含有30微克-7500微克的脲。
7.根據權利要求1的方法，其中步驟A遞送的溶液每50微升溶液含有約300微克的脲。
8.根據權利要求1的方法，其中步驟A將劑量為0.01％-15.0％的脲遞送到眼部角膜上。
9.根據權利要求1的方法，其中步驟A遞送的溶液包括含有至少一種選自如下試劑的溶液脲；羥基脲；硫脲；絲裂黴素C；聚乙二醇；聚丙二醇；以及泊洛沙姆。
10.根據權利要求1的方法，其中步驟A包括將治療有效量的溶液遞送到眼部前段，所述溶液包含i)脲和/或脲衍生物或其混合物以及ii)至少一種抗代謝試劑。
11.根據權利要求1的方法，其中步驟A包含將治療有效量的溶液遞送到眼部前段，所述溶液包含i)脲和/或脲衍生物或其混合物以及ii)至少一種聚乙二醇試劑。
12.根據權利要求1的方法，其中的試劑是選自如下的抗代謝物絲裂黴素C；氨甲蝶呤；6-巰基嘌呤；硫代鳥嘌呤；5-氟尿嘧啶；阿糖胞苷；5-氮雜胞苷；羥基脲；硫脲；以及其可能的組合。
13.根據權利要求1的方法，其中步驟A中遞送的試劑每50微升溶液含有2000微克脲和2000微克抗代謝物羥基脲，或者0.5微克絲裂黴素C。
14.根據權利要求1的方法，其中步驟A中遞送的試劑每50微升溶液含有約300微克脲和約2000微克羥基脲，或者10微克絲裂黴素C。
15.根據權利要求1的方法，其中步驟A重複多次，步驟A的每次操作遞送2000微克劑量的脲和5.0微克劑量的抗代謝物絲裂黴素C或抗代謝物。
16.根據權利要求1的方法，其中實施所述方法的目的選自引起角膜上皮非毒性的機械/化學去上皮，以用於屈光LASEK矯正；在屈光LASIK矯正中，引起角膜蛋白聚糖的非毒性溶解和角膜基質的界面閉合及有組織的癒合；引起其它蛋白和胺基酸的非毒性溶解以壓縮膠原纖絲，以得到更好的視敏度和更好的視力質量；引起角膜軟化，以用於近視、老花眼、遠視、散光和圓錐形角膜的非手術屈光矯正，並對軟化角膜施用隱形鏡片；引起負責角膜簿翳和角膜渾濁的新合成蛋白聚糖的溶解；引起前房中蛋白聚糖的溶解並治療綠內障，所述蛋白聚糖通過增加外流而引起眼球內壓的降低；引起成纖維細胞的溶解作用；抑制成纖維細胞；抑制或預防角膜纖維化和斑痕形成；抑制成纖維細胞在眼部組織的增生；以及通過其抗血管生成作用的效力抑制角膜和虹膜中VEGF的活性，從而消除角膜新血管和虹膜新血管的發展和消退。
17.根據權利要求1的方法，其中首先給藥所述試劑於眼部前段，以足以使治療有效量的試劑分布於前段的劑型和劑量通過局部施用，基質內注射及角膜下注射而遞送試劑到眼部前段。
18.一種選自如下的化合物在製備通過局部施用於眼部或通過基質內或結膜下注射到眼睛而遞送的用於治療眼部紊亂的水溶液中的應用脲，脲衍生物，非酶類蛋白脲，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidinium chloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨和其它能引起蛋白聚糖非酶法溶解的化合物。
全文摘要
本發明提供了用於治療眼部紊亂和/或引起角膜蛋白聚糖溶解以及角膜基質有組織的癒合，角膜軟化用於非手術屈光矯正視力，去除角膜簿翳(corneal haze)和渾濁，抑制成纖維細胞及預防角膜纖維化和斑痕形成，治療pterigiums及治療角膜新血管生成和虹膜新血管生成的方法和製劑。本發明還提供了將含有如下成分的製劑以有效治療劑量施用於眼部a)脲，b)脲衍生物(例如羥基脲、硫脲)，c)抗代謝物，e)脲，脲衍生物，非酶類蛋白質，核苷，核苷酸及其衍生物(例如，腺嘌呤，腺苷，胞嘧啶，cytadine，鳥嘌呤，guanitadine，胍，guanidiniumchloride，guanidinium鹽類，胸苷，thymitadine，uradine，尿嘧啶，半胱氨酸)，還原硫辛酸，尿酸，乙醯基水楊酸鈣，硫酸銨，異丙醇，乙醇，聚乙二醇，聚丙三醇或其它能引起角膜蛋白聚糖非酶法溶解的化合物或f)這些試劑的任一可能組合。
文檔編號A61K31/407GK1642536SQ03805968
公開日2005年7月20日 申請日期2003年3月14日 優先權日2002年3月14日
發明者維克恩·卡拉傑奧齊安, 戴維·卡斯蒂列霍斯, 約翰·帕克, 加布裡埃爾·阿瑟羅·卡皮奧·阿拉貢, 喬斯·路易斯·古鐵雷斯·弗洛雷斯 申請人:玻璃體－視網膜技術公司