一種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法
2023-04-29 14:31:26 2
一種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法
【專利摘要】本發明涉及一種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法，以現有技術製備的鹽黴素發酵液為原料，通過氫氧化鈉調節pH值使鹽黴素生成為鈉鹽，通過板框壓濾去除發酵液中的水分，然後用甲醇將鹽黴素鈉從菌絲體中提取出來，再經過濃縮、結晶、精製、烘乾一系列工藝步驟製得鹽黴素鈉精品。本發明的製備方法可將鹽黴素有效成份從生產過程中的發酵液中提取出來，能夠有效去除生產過程中剩餘的培養基殘留、水及其他可能的雜質，提高了產品的收率和純度，減少產品使用過程中由於其他雜質存在可能產生的毒性反應，提高了用藥的安全性。
【專利說明】一種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物發酵製藥產品生產領域，特別涉及一種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法。
【背景技術】
[0002]鹽黴素鈉為單價聚醚類離子載體型抗球蟲藥，具有廣譜抗球蟲作用。其殺球蟲作用機理是通過幹擾球蟲細胞內K+、Na+的正常滲透，使大量的Na+進入細胞內。為了平衡滲透壓，大量的水分進入球蟲細胞，引起腫脹而死亡。它對雞的毒害、柔嫩、巨型、和緩、堆型、布氏等艾美耳球蟲均有作用，尤其對巨型及布氏艾美耳球蟲效果最強。對雞球蟲的子孢子、第一、二代裂殖子都有明顯作用。此外，鹽黴素能促進動物生長，小於4月齡仔豬餵30-60mg/kg藥料，4?6月齡仔豬餵15_30mg/kg藥料，可明顯增加體重和提高飼料利用率。臨床上主要用於防治畜禽的球蟲病，近年來亦用作牛、豬的促生長劑。
[0003]雞內服鹽黴素在胃腸道吸收很少。在肝、胃、小腸內含量較高，其他組織中含量極微。進入體內的藥物，在肝臟內迅速代謝，並由小腸分泌經糞便排出體外，給藥後48小時內排出量達給藥劑量的94.6%,72小時超過97%。
[0004]鹽黴素易溶於甲醇、乙醇、丙酮、氯仿和乙醚，不溶於水。
[0005]鹽黴素是通過生物發酵法，利用豆油、白砂糖、豆餅粉及硫酸銨、磷酸二氫鉀、氯化鉀等糧食化工類原材料，通過生產菌的次級代謝作用合成而得，代謝完成後，由於鹽黴素不溶於水，其是存在於生產菌的菌絲中，與菌絲體、殘存培養基等混合在一起，無法直接得到鹽黴素產品。
[0006]鹽黴素鈉產品的主要應用劑型為預混劑，現在行業主要採用發酵結束後直接將發酵液處理得到含鹽黴素的預混劑，不採取提取鹽黴素精品再進行混合的方式生產，所以過程中沒有鹽黴素鈉的生產，該方式雖然有環保等方面的優勢，但在安全用藥、產品純度控制等方面存在隱患，且無法滿足對該產品需要純品時的其他使用要求。
【發明內容】
[0007]針對現有技術的不足，本發明提供一種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法。
[0008]本發明以現有技術製備的鹽黴素發酵液為原料，通過氫氧化鈉調節pH值使鹽黴素生成為鈉鹽，通過板框壓濾去除發酵液中的水分，然後用甲醇將鹽黴素鈉從菌絲體中提取出來，再經過濃縮、結晶、精製、烘乾一系列工藝步驟製得鹽黴素鈉精品。
[0009]本發明的技術方案如下:
[0010]一種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法，步驟如下:
[0011](I)調pH:將鹽黴素發酵液用氫氧化鈉調pH值至6.5-8.0，使鹽黴素生成為鈉鹽；
[0012](2)過濾:板框過濾步驟(I)處理好的發酵液，將發酵液中的水分除去，得到含有鹽黴素鈉的濾餅；
[0013](3)浸提:按4-8m3甲醇/噸鹽黴素鈉濾餅的比例向浸提罐中加入甲醇，然後投入濾餅，攪拌30-60分鐘，過濾，收集甲醇浸提液；向浸提罐中加入等體積的甲醇溶液，再次浸提20-40分鐘，過濾，收集甲醇浸提液，與第一次甲醇浸提液混合，用於下步濃縮；
[0014]第三次浸提:用同體積的甲醇溶液再浸提濾餅一次，檢測濾餅中鹽黴素含量應低於300u/mL，停止浸提，得到的浸提液用於下批產品的生產；
[0015](4)濃縮:將步驟(3)前兩次浸提得到的浸提液在溫度55— 65°C，真空度不小於0.03MPa下濃縮至原體積的1/5，停止濃縮；
[0016](5)結晶:常溫攪拌狀態下，按純化水/濃縮液體積比1:2的比例向濃縮液中加入純化水，即可得到鹽黴素鈉的結晶，離心將鹽黴素鈉從液體中分離出來，即得鹽黴素鈉粗品;
[0017](6)精製:常溫下，將步驟(5)得到的粗品用丙酮溶解，粗品:丙酮=l:3-4(w/v,千克/升)；再按1-3% (w/v，千克/升)的比例向溶解液中加入活性炭，然後攪拌15-30分鐘，過濾得到濾液，然後將濾液濃縮至粗品重量的2倍量體積；攪拌狀態下，按純化水/濃縮液體積比1:10的比例加入純化水得到結晶液，降溫結晶，離心分離，即得鹽黴素鈉溼品；
[0018](7)烘乾:將鹽黴素溼品烘乾乾燥，即得鹽黴素鈉精品。
[0019]按照該產品現在的中國獸藥典(2010)標準檢測，得到的精品中鹽黴素鈉的含量為890u/mg以上。
[0020]優選的，
[0021]上述步驟(I)中用氫氧化鈉調節pH值至7.5;所用氫氧化鈉配製成質量百分比20-30%的水溶液。
[0022]優選的，上述步驟(3)中甲醇的用量為5_8m3甲醇/噸鹽黴素鈉濾餅，進一步優選的，甲醇的用量為4.8m3甲醇/噸鹽黴素鈉濾餅。
[0023]優選的，上述步驟(6)中活性炭的加入比例為3.0% (w/v，千克/升)。
[0024]優選的，上述步驟(6)中所述的離心分離過程中每次離心用20-50升甲醇淋洗在離心機轉鼓內壁上的鹽黴素鈉結晶。
[0025]優選的，上述步驟(7)中所述的烘乾乾燥是指放置於60_70°C，真空度彡0.06MPa的烘箱中烘乾6-8小時。
[0026]優選的，上述步驟(3)中所述的第三次浸提液用於下一批產品生產是指下一批生產時替代部分新甲醇用來浸提，直接加到浸提罐中浸提濾餅。
[0027]優選的，上述步驟(I)中所述的鹽黴素發酵液，化學效價為75000-80000u/mL。
[0028]本發明所使用的原料莫能菌素髮酵液是按照現有技術製備得到的。其他原料及設備沒有特別說明的均按照現有技術。
[0029]本發明重量和體積的關係為:千克/升。
[0030]本發明的有益效果:
[0031]本發明的製備方法可將鹽黴素有效成份從生產過程中的發酵液中提取出來，能夠有效去除生產過程中剩餘的培養基殘留、水及其他可能的雜質，提高了產品的收率和純度，減少產品使用過程中由於其他雜質存在可能產生的毒性反應，提高了用藥的安全性。
【具體實施方式】
[0032]以下實施例用於對本發明做出進一步的說明，但不限於此。實施例中所使用的設備均按照現有技術。
[0033]實施例1:
[0034]—種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法，步驟如下:
[0035](I)調pH:收集75000u/mL鹽黴素發酵液10噸，用氫氧化鈉調pH值至7.5 ;使鹽黴素生成為鈉鹽；
[0036](2)過濾:板框過濾步驟(I)處理好的發酵液，將發酵液中的水分除去，得到含有鹽黴素鈉的濾餅5噸；
[0037](3)浸提:按4.Sm3甲醇/噸鹽黴素鈉濾餅的比例向浸提罐中加入24m3甲醇，然後投入步驟(2)得到的濾餅5噸，攪拌40分鐘，過濾，收集甲醇浸提液，再向浸提罐中加入等體積的甲醇溶液，浸提40分鐘，過濾，收集甲醇浸提液，與第一次甲醇浸提液混合，用於下步濃縮；
[0038]第三次浸提，用同體積的甲醇溶液再浸提濾餅一次，檢測濾餅中鹽黴素含量低於300u/mL,停止浸提，得到的浸提液用於下批產品的生產；
[0039](4)濃縮:將步驟(3)前兩次浸提得到的浸提液在溫度55— 65°C，真空度不小於
0.03MPa下濃縮至9.6m3,停止濃縮；
[0040](5)結晶:常溫下，在攪拌狀態下，按純化水/濃縮液體積比1:2的比例向濃縮液中加入4.Sm3純化水，即可得到鹽黴素鈉的結晶，離心將鹽黴素鈉從液體中分離出來，即得1200千克鹽黴素鈉粗品；
[0041](6)精製:常溫下，將得到的粗品用3.6m3丙酮溶解，按1.5% (w/v，千克/升)的比例向溶解液中加入54千克活性炭，然後攪拌15分鐘，過濾得到濾液，然後將濾液濃縮至2.4m3 ;攪拌狀態下，按純化水/濃縮液體積比1:10的比例加入240升純化水得到結晶液，自然降溫結晶，離心將鹽黴素鈉從液體中分離出來，每次離心用20-50升純化水淋洗在離心機轉鼓內壁上的鹽黴素結晶，即得770公斤鹽黴素鈉溼品。
[0042](7)烘乾:將鹽黴素溼品在60_70°C，真空度彡0.06MPa的條件下烘乾5小時，即得660公斤鹽黴素鈉精品，收率88.0%，含量為892u/mg。
[0043]實施例2:
[0044]—種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法，步驟如下:
[0045](I)調pH:收集80000u/mL鹽黴素發酵液5噸，用氫氧化鈉調pH值至7.8 ;使鹽黴素生成為鈉鹽；
[0046](2)過濾:板框過濾步驟(I)處理好的發酵液，將發酵液中的水分除去，得到含有鹽黴素鈉的濾餅2.6噸；
[0047](3)浸提:按6.0m3甲醇/噸鹽黴素鈉濾餅的比例向浸提罐中加入16m3甲醇，然後投入步驟(2)得到的濾餅2.6噸，攪拌35分鐘，過濾，收集甲醇浸提液，再向浸提罐中加入等體積的甲醇溶液，浸提40分鐘，過濾，收集甲醇浸提液，與第一次甲醇浸提液混合，用於下步濃縮；
[0048]第三次浸提，用同體積的甲醇溶液再浸提濾餅一次，檢測濾餅中鹽黴素含量低於300u/mL,停止浸提，得到的浸提液用於下批產品的生產；
[0049](4)濃縮:將步驟(3)前兩次浸提得到的浸提液在溫度55— 65°C，真空度不小於
0.03MPa下濃縮至6.4m3,停止濃縮；
[0050](5)結晶:常溫下，在攪拌狀態下，按純化水/濃縮液體積比I '2的比例向濃縮液中加入3m3純化水，即可得到鹽黴素鈉的結晶，離心將鹽黴素鈉從液體中分離出來，即得640千克鹽黴素鈉粗品；
[0051](6)精製:常溫下，將得到的粗品用2.0m3丙酮溶解，按2.0% (w/v，千克/升)的比例向溶解液中加入40千克活性炭，然後攪拌15分鐘，過濾得到濾液，然後將濾液濃縮至
1.3m3 ;攪拌狀態下，按純化水/濃縮液體積比1:10的比例加入130升純化水得到結晶液，自然降溫結晶，離心將鹽黴素鈉從液體中分離出來，每次離心用20-50升純化水淋洗在離心機轉鼓內壁上的鹽黴素結晶，即得430千克鹽黴素鈉溼品；
[0052](7)烘乾:將鹽黴素溼品在60_70°C，真空度彡0.06MPa的條件下烘乾5小時，即得360公斤鹽黴素鈉精品，收率90.0%，含量為897u/mg。
【權利要求】
1.一種高純度鹽黴素鈉精品的製備方法，特徵在於，步驟如下: (1)調pH:將鹽黴素發酵液用氫氧化鈉調pH值至6.5-8.0,使鹽黴素生成為鈉鹽； (2)過濾:板框過濾步驟(I)處理好的發酵液，將發酵液中的水分除去，得到含有鹽黴素鈉的濾餅； (3)浸提:按4-8m3甲醇/噸鹽黴素鈉濾餅的比例向浸提罐中加入甲醇，然後投入濾餅，攪拌30-60分鐘，過濾，收集甲醇浸提液；向浸提罐中加入等體積的甲醇溶液，再次浸提20-40分鐘，過濾，收集甲醇浸提液，與第一次甲醇浸提液混合，用於下步濃縮； 第三次浸提:用同體積的甲醇溶液再浸提濾餅一次，檢測濾餅中鹽黴素含量應低於300u/mL,停止浸提，得到的浸提液用於下批產品的生產； (4)濃縮:將步驟(3)前兩次浸提得到的浸提液在溫度55—65 °C，真空度不小於0.03MPa下濃縮至原體積的1/5，停止濃縮； (5)結晶:常溫攪拌狀態下，按純化水/濃縮液體積比1:2的比例向濃縮液中加入純化水，即可得到鹽黴素鈉的結晶，離心將鹽黴素鈉從液體中分離出來，即得鹽黴素鈉粗品； (6)精製:常溫下，將步驟(5)得到的粗品用丙酮溶解，粗品:丙酮=1:3-4(?八，千克/升)；再按1-3% (w/v，千克/升)的比例向溶解液中加入活性炭，然後攪拌15-30分鐘，過濾得到濾液，然後將濾液濃縮至粗品重量的2倍量體積；攪拌狀態下，按純化水/濃縮液體積比1:10的比例加入純化水得到結晶液，降溫結晶，離心分離，即得鹽黴素鈉溼品； (7)烘乾:將鹽黴素溼品烘乾乾燥，即得鹽黴素鈉精品。
2.根據權利要求1所述的製備方法，特徵在於，步驟(I)中用氫氧化鈉調節PH值至7.5 ;所用氫氧化鈉配製成質量百分比20-30%的水溶液。
3.根據權利要求1所述的製備方法，特徵在於，步驟(3)中甲醇的用量為5-8m3甲醇/噸鹽黴素鈉濾餅。
4.根據權利要求3所述的製備方法，特徵在於，步驟(3)中甲醇的用量為4.Sm3甲醇/噸鹽黴素鈉濾餅。
5.根據權利要求1所述的製備方法，特徵在於，步驟￠)中活性炭的加入比例為3.0%(w/v，千克/升)。
6.根據權利要求1所述的製備方法，特徵在於，步驟(6)中所述的離心分離過程中每次離心用20-50升甲醇淋洗在離心機轉鼓內壁上的鹽黴素鈉結晶。
7.根據權利要求1所述的製備方法，特徵在於，步驟(7)中所述的烘乾乾燥是指放置於60-70°C，真空度彡0.06MPa的烘箱中烘乾6-8小時。
8.根據權利要求1所述的製備方法，特徵在於，步驟(I)中所述的鹽黴素發酵液，化學效價為 75000-80000u/mL。
【文檔編號】C07D493/20GK104447789SQ201410778805
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月15日 優先權日:2014年12月15日
【發明者】丁新仁, 張效軍, 李家雲, 田文, 王佩 申請人:山東齊發藥業有限公司