早孕檢測試紙條及其檢測方法

2023-04-29 14:11:01

專利名稱：早孕檢測試紙條及其檢測方法
技術領域：
本發明屬於醫學檢驗領域，特別是涉及一種早孕檢測試紙條及其檢測方法。
背景技術：
多數婦女懷孕6 8周以後可能出現頭暈、乏力、嗜睡、唾液分泌增多、食欲不振、噁心嘔吐等現象，嘔吐多在清晨或空腹時發生。有些孕婦特別喜好吃酸性和生冷食物。上述這些現象稱為早孕反應，多在懷孕後12周左右自行消失。少數人的早孕反應比較嚴重，持續時間也較長。目前市面上大多數早孕檢測試紙是採用膠體金方法進行檢測的，但均只能告知被檢者有或沒有懷孕，不能知道大概的懷孕時間。而對於一些意外懷孕的女性在6 8周之 前是沒有明顯的早孕反應，此時需要一種經濟簡單的方法知道懷孕多久，以備對自己後期身體健康等起到提示作用。

發明內容
基於此，本發明提供了一種能得知大概懷孕時間的早孕檢測試紙條。一種早孕檢測試紙條，所述試紙條由樣品墊、標記墊、硝酸纖維素膜、吸水紙順次搭接粘貼在底板上構成，所述標記墊上塗覆有膠體金標記的鼠抗β -HCG單克隆抗體，所述硝酸纖維素膜包括包被有鼠抗a-HCG單克隆抗體的檢測區和包被有抗鼠IgG多克隆抗體的控制區，在所述檢測區和控制區之間設置有包被有毒品抗原的對比區，所述標記墊上還塗覆有膠體金標記的所述毒品的抗體。本發明在現有的早孕檢測試紙條的基礎上，在檢測區和控制區之間設置包被有毒品抗原的對比區，並在標記墊上塗覆了膠體金標記的所述毒品的抗體。利用雙抗夾心法檢測人體尿液中的HCG抗原，如懷孕了，則尿液中含有人體HCG激素，該抗原將與鼠抗β -HCG單克隆抗體及鼠抗a -HCG單克隆抗體結合，並在檢測區顯色。尿液中含有的人體HCG越多，檢測區顯色越深。採用競爭抑制法，當尿液標本中沒有毒品時，標記的毒品抗體和對比區的毒品抗原結合反應，在對比區顯色，而對比區顏色是通過內控控制的(由毒品抗原和毒品抗體的濃度和量所確定)，是固定不變，表示人懷孕6周的顯色程度。比較對比區與檢測區的顏色深淺，從而實現預測懷孕時間的目的。在其中一些實施例中，所述對比區包被的毒品抗原為DOA抗原。DOA抗原是指濫用藥品抗原，範圍較廣，一般是由濫用藥物小分子添加上一個大分子的蛋白構成。一般說的DOA抗原包括了如THC抗原、MET抗原、氯胺酮抗原等濫用藥品類別的抗原。在其中一些實施例中，所述對比區包被的毒品抗原為THC抗原、MET抗原或氯胺酮抗原，所述抗原的包被濃度為O. 1-0. 5mg/mlo在其中一個實施例中，所述抗原的包被濃度為O. lmg/ml。在其中一些實施例中，所述標記墊上塗覆的膠體金標記的毒品的抗體的濃度為
O.5 2ug/ml,塗覆量為 10cm*12cm/ml。
在其中一個實施例中，所述標記墊上塗覆的膠體金標記的毒品的抗體的濃度為lug/ml,塗覆量為 10cm*12cm/ml。在其中一些實施例中，所述標記墊上塗覆的膠體金標記的鼠抗β-HCG單克隆抗體的濃度為I. ο-l. 5mg/ml，塗覆量為O. 15-0. 2 μ Ι/cm。所述檢測區包被的鼠抗a -HCG單克隆抗體的濃度為I. 0-1. 5mg/ml，包被參數為O. 15-0. 2 μ Ι/cm ;所述控制區包被的抗鼠IgG多克隆抗體的濃度為I. 0-1. 5mg/ml，包被參數為O. 15-0. 2 μ 1/cm。在其中一個實施例中，所述標記墊上塗覆的膠體金標記的鼠抗β-HCG單克隆抗體的濃度為I. 2mg/ml，塗覆量為O. 17 μ Ι/cm。所述檢測區包被的鼠抗a -HCG單克隆抗體的濃度為I. 2mg/ml，包被參數為O. 17 μ Ι/cm ;所述控制區包被的抗鼠IgG多克隆抗體的濃度為I. 3mg/ml,包被參數為O. 18 μ 1/cm。在其中一些實施例中，所述檢測區與控制區之間的間隔為7. 0mm。
在其中一些實施例中，所述檢測區與對比區之間的間隔為3. 5mm。本發明還提供了一種早孕檢測方法，採用上述試紙條，包括以下步驟將尿液滴加到樣品墊上，尿液依次流經標記墊、檢測區、對比區、控制區而顯色。若檢測區、對比區、控制區顯色，則表明已懷孕，比較檢測區和對比區的顏色，若檢測區顏色比對比區顏色深，則懷孕6周以上；若檢測區顏色比對比區顏色淺，則懷孕6周以下。若檢測區不顯色，控制區、對比區顯色，則表明未懷孕；若控制區不顯色，則表明測試失敗。本發明在現有的早孕檢測試紙條的基礎上，在檢測區和控制區之間設置包被有毒品抗原的對比區，並在標記墊上塗覆了膠體金標記的所述毒品的抗體。利用雙抗夾心法檢測人體尿液中的HCG抗原，從而在檢測區顯色，採用競爭抑制法檢測尿液標本，當標記的毒品抗體和對比區的毒品抗原結合反應時，在對比區顯色，而對比區顏色是通過內控控制的，是固定不變，表示人懷孕6周的顯色程度。比較對比區與檢測區的顏色深淺，顏色較之深，則懷孕6周以上，較之淺則懷孕不足6周，從而實現預測懷孕時間的目的。同時，本發明試紙條在檢測懷孕與否以及懷孕周期的同時，可以檢測是否有濫用藥物，進而可以提示是否適合妊娠，達到避免畸形胎兒的目的。本發明檢測方法簡單，適於廣泛推廣。


圖I為本發明實施例I的試紙條的結構示意圖；附圖標記1、樣品墊；2、標記墊；3、底板；4、硝酸纖維素膜；5、檢測區；6、對比區；
7、控制區；8、吸水紙。
具體實施例方式以下結合附圖和具體實施例來詳細說明本發明。實施例I 一種早孕檢測試紙條如圖I所示，為本發明的一種早孕檢測試紙條的結構示意圖，所述試紙條由樣品墊I、標記墊2、硝酸纖維素膜4、吸水紙8順次搭接粘貼在底板3上構成，所述標記墊2上塗覆有膠體金標記的鼠抗β-HCG單克隆抗體,所述硝酸纖維素膜4包括包被有鼠抗a-HCG單克隆抗體的檢測區5和包被有抗鼠IgG多克隆抗體的控制區7，在所述檢測區5和控制區7之間還設置有包被有毒品抗原的對比區6，所述標記墊2上還塗覆有膠體金標記的所述毒品的抗體。在該實施例中，所述毒品為THC(大麻)。對比區包被的毒品抗原為THC抗原，抗原的包被濃度為O. lmg/ml，包被參數為O. 15ul/cm。所述標記墊上塗覆的膠體金標記的THC的抗體的濃度為lug/ml，Iml塗布面積為10cm*12cm ;所述標記墊上塗覆的膠體金標記的鼠抗β-HCG單克隆抗體的濃度為I. 2mg/ml，塗覆量為O. 17 μ Ι/cm。所述檢測區包被的鼠抗a -HCG單克隆抗體的濃度為I. 2mg/ml,包被參數為O. 17 μ Ι/cm ;所述控制區包被的抗鼠IgG多克隆抗體的濃度為I. 3mg/ml，包被參數為 O. 18 μ 1/cm。在該實施例中，所述檢測區與控制區之間的間隔為7. 0mm。所述檢測區與對比區之間的間隔為3. 5mm。該實施例中的試紙條的製備方法如下I、硝酸纖維素膜的製備用包被緩衝液(O. 05M pH9. 6碳酸鹽緩衝液，置4°C備用，下同)稀釋鼠抗a -HCG單克隆抗體(檢測區T線的包被材料)(廠商=ARISTA)，稀釋後鼠抗a -HCG單克隆抗體濃度為lmg/ml ;用包被緩衝液稀釋THC抗原(對比區的包被材料)(廠商ARISTA)，稀釋後的濃度為O. lmg/ml ;用包被緩衝液稀釋抗鼠IgG多克隆抗體(控制區C線的包被材料)(廠商=ARISTA)，稀釋後抗鼠IgG多克隆抗體的濃度為lmg/ml。控制檢測線和控制線兩線間隔3. 5mm，調試噴膜機，按噴液量(包被參數)為O. 15 μ Ι/cm進行噴膜包被，包被好後，室溫晾乾二十分鐘後轉移至50°C烘箱乾燥過夜。2、標記墊的製備按常規的標記方法將鼠抗β -HCG單克隆抗體(廠商ARISTA)標記到膠體金上形成金標結合物，均勻地塗覆在無紡布上，膠體金標記的鼠抗β -HCG單克隆抗體的濃度為
I.Omg/ml,塗覆量為O. 15μ 1/cm。37°C乾燥房乾燥過夜,封袋,置室溫密封保存備用。按常規的標記方法將THC抗體標記到膠體金上形成金標結合物,均勻地塗覆在無紡布上,膠體金標記的THC抗體的濃度為I. Oug/ml, Iml塗布面積為10cm*12cm。3、樣品墊的製備用樣品墊處理液(O.5%卵清蛋白，O. 01% Tween-20，0. 01MPH7. 0PBS，0. 02%疊氮化鈉(防腐劑)，置4°C備用)塗布玻璃纖維，塗布參數為lcm2/ml，37°C乾燥房乾燥過夜，封袋，置室溫密封保存備用。4、試紙條的製備把硝酸纖維素膜、吸水紙、標記墊、樣品墊粘貼在塑料底板上，組成大板。用切條機將大板切成單條，寬度為4mm。實施例2 —種早孕檢測試紙條該實施例的試紙條的結構與實施例I的試紙條結構相同，除了毒品為MET(冰毒)。對比區包被的毒品抗原為MET抗原,抗原的包被濃度為O. 25mg/ml。標記墊上塗覆的膠體金標記的鼠抗β-HCG單克隆抗體的濃度、檢測區包被的鼠抗a-HCG單克隆抗體的濃度、控制區包被的抗鼠IgG多克隆抗體的濃度均為I. Omg/ml，塗覆量均為O. 15 μ 1/cm。實施例3 —種早孕檢測試紙條該實施例的試紙條的結構與實施例I的試紙條結構相同，除了毒品為氯胺酮。對比區包被的毒品抗原為氯胺酮抗原，抗原的包被濃度為O.5mg/ml。標記墊上塗覆的膠體金標記的鼠抗β-HCG單克隆抗體的濃度、檢測區包被的鼠抗a-HCG單克隆抗體的濃度、控制區包被的抗鼠IgG多克隆抗體的濃度均為1.5mg/ml，塗覆量均為O.2μ 1/cm。實施例4利用實施例I的試紙條進行早孕檢測包括以下步驟①將尿液滴加到樣品墊上，尿液依次流經標記墊、檢測區、對比區、控制區而顯色。②若檢測區、對比區、控制區顯色，則表明已懷孕，此時比較檢測區和對比區的顏色，若檢測區顏色比對比區顏色深，則懷孕6周以上；若檢測區顏色比對比區顏色淺，則懷孕6周以下。③若檢測區不顯色，控制區、對比區顯色，則表明未懷孕。④若控制區不顯色，則表明測試失敗。實施例5實施例I的試紙條的靈敏度、特異性對實施例I的試紙條進行了靈敏度和特異性方面試驗，試驗結果見表I和表2所
/Jn ο表I實施例I的試紙條的靈敏度試驗
權利要求
1.一種早孕檢測試紙條，所述試紙條由樣品墊、標記墊、硝酸纖維素膜、吸水紙順次搭接粘貼在底板上構成，其特徵在於，所述標記墊上塗覆有膠體金標記的鼠抗β -HCG單克隆抗體，所述硝酸纖維素膜包括包被有鼠抗a -HCG單克隆抗體的檢測區和包被有抗鼠IgG多克隆抗體的控制區，在所述檢測區和控制區之間設置有包被有毒品抗原的對比區，所述標記墊上還塗覆有膠體金標記的所述毒品的抗體。
2.根據權利要求I所述的早孕檢測試紙條，其特徵在於，所述對比區包被的毒品抗原為DOA抗原,所述抗原的包被濃度為O. 1-0. 5mg/mL·
3.根據權利要求2所述的早孕檢測試紙條，其特徵在於，所述DOA抗原為THC抗原、MET抗原或氯胺酮抗原，所述抗原的包被濃度為O. lmg/ml。
4.根據權利要求I所述的早孕檢測試紙條，其特徵在於，所述標記墊上塗覆的膠體金標記的毒品的抗體的濃度為O. 5 2ug/ml,塗覆量為10cm*12cm/ml。
5.根據權利要求4所述的早孕檢測試紙條，其特徵在於，所述標記墊上塗覆的膠體金標記的毒品的抗體的濃度為lug/ml,塗覆量為10cm*12cm/ml。
6.根據權利要求I所述的早孕檢測試紙條，其特徵在於，所述標記墊上塗覆的膠體金標記的鼠抗β -HCG單克隆抗體的濃度為I. 0-1. 5mg/ml，塗覆量為O. 15-0. 2 μ Ι/cm ;所述檢測區包被的鼠抗a -HCG單克隆抗體的濃度為I. 0-1. 5mg/ml，包被參數為O. 15-0. 2 μ 1/cm ；所述控制區包被的抗鼠IgG多克隆抗體的濃度為I. 0-1. 5mg/ml，包被參數為O. 15-0. 2 μ I/cm。
7.根據權利要求6所述的早孕檢測試紙條，其特徵在於，所述標記墊上塗覆的膠體金標記的鼠抗β -HCG單克隆抗體的濃度為I. 2mg/ml，塗覆量為O. 17 μ 1/cm ;所述檢測區包被的鼠抗a -HCG單克隆抗體的濃度為I. 2mg/ml，包被參數為O. 17 μ Ι/cm ;所述控制區包被的抗鼠IgG多克隆抗體的濃度為I. 3mg/ml，包被參數為O. 18 μ 1/cm。
8.根據權利要求1-7任一項所述的早孕檢測試紙條，其特徵在於，所述檢測區與控制區之間的間隔為7. 0mm。
9.根據權利要求1-7任一項所述的早孕檢測試紙條，其特徵在於，所述檢測區與對比區之間的間隔為3. 5mm。
10.一種早孕檢測方法，其特徵在於，採用權利要求1-9任一項所述的試紙條，包括以下步驟將尿液滴加到樣品墊上4-5min後，比較檢測區和對比區的顏色，若檢測區顏色比對比區顏色深，則懷孕6周以上；若檢測區顏色比對比區顏色淺，則懷孕6周以下。
全文摘要
本發明公開了一種早孕檢測試紙條及其檢測方法，所述試紙條由樣品墊、標記墊、硝酸纖維素膜、吸水紙順次搭接粘貼在底板上構成，所述標記墊上塗覆有膠體金標記的鼠抗β-HCG單克隆抗體，所述硝酸纖維素膜包括包被有鼠抗α-HCG單克隆抗體的檢測區和包被有抗鼠IgG多克隆抗體的控制區，在所述檢測區和控制區之間設置有包被有毒品抗原的對比區，所述標記墊上還塗覆有膠體金標記的所述毒品的抗體。本發明在現有的早孕檢測試紙條的基礎上，通過在檢測區和控制區之間設置對比區，從而根據對比區與檢測區的顏色深淺比較，來實現預測懷孕時間的目的。檢測方法簡單，適於廣泛推廣。
文檔編號G01N33/577GK102879576SQ201210408690
公開日2013年1月16日 申請日期2012年10月23日 優先權日2012年10月23日
發明者王繼華, 張亮, 唐時幸, 郭詩靜 申請人:廣州萬孚生物技術股份有限公司