噻唑並吲哚滿酮類化合物的製作方法

2023-04-29 11:03:51

專利名稱：噻唑並吲哚滿酮類化合物的製作方法
技術領域：
本發明一般涉及可用作依賴於細胞周期蛋白的激酶II抑制劑的噻唑並吲哚滿酮類化合物，特別是用於預防/減輕由於化療和/或放療而產生的上皮細胞毒的嚴重影響(比如脫髮、蹠-掌綜合症、黏膜炎等)。本發明還涉及這類化合物的合成，並涉及含有此類化合物作為預防/減輕進行相應的化療和/或放療的病人受上皮細胞毒嚴重影響的藥物組合物的製劑。
本發明的背景蛋白激酶在控制細胞生長和分化方面起著關鍵的作用，是導致產生生長因子和細胞因子的細胞信號的關鍵傳遞介質。請見比如Schlessinger和Ullrich在《神經元》(Neuron)1992，9，383中的敘述。這種激酶的部分非限定性的列表包括abl、ARaf、ATK、ATM、bcr-abl、Blk、BRaf、Brk、Btk、CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8、CDK9、cfms、c-fms、c-kit、c-met、cRaf1、CSF1R、CSK、c-src、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、ERK、ERK1、ERK2、Fak、fes、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、FGFR5、Fgr、FLK-4、Fps、Frk、Fyn、GSK、gsk3a、gsk3b、Hck、IGF-1R、IKK、IKK1、IKK2、IKK3、INS-R、整合素鏈節的激酶、Jak、JAK1、JAK2、JAK3、JNK、JNK、Lck、Lyn、MEK、MEK1、MEK2、p38、PDGFR、PIK、PBK1、PKB2、PKB3、PKC、PKCa、PKCb、PKCd、PKCe、PKCg、PKCl、PKCm、PKCz、PLK1、類Polo激酶、PYK2、tie1、tie2、TrkA、TrkB、TrkC、UL13、UL97、VEGF-R1、VEGF-R2、Yes和Zap70。在中樞神經系統疾病中，蛋白激酶被看作是影響的目標，這些疾病有比如早老性痴呆症(Mandelkow，E.M.等人的FEBS Lett. 1992，314，315、Sengupta，A等人的Mol.Cell.Biochem.1997，167，99)、疼痛感(Yashpal，K.的J.Neurosci.1995，15，3263～72)、炎症，如關節炎(Badger的J.Pharm.Exp.Ther.1996，279，1453)、牛皮癬(Dvir等人的J.Cell Biol.1991，113，857)以及慢性阻塞性肺部疾病、骨疾病如骨質疏鬆症(Tanaka等人的Nature，1996，383，528)、癌症(Hunter和Pines的Cell，1994，79，573)、動脈粥樣硬化(Hajjar和Pomerantz的FASEB J.1992，6，2933)、血栓形成(Salari，FEBS 1990，263，104)、代謝疾病如糖尿病(Borthwick，A.C.等人的Biochem.Biophys.Res.Commun.1995，210，738)、血管增生性疾病如血管生成(Strawn等人的Cancer Res.1996，56，3540；Jackson等人的J.Pharm.Exp.Ther.1998，284，687)、再狹窄(Buchdunger等人的Proc，Nat.Acad.Sci.USA 1991，92，2258)、自身免疫和移植排斥(Bolen和Brugge，Ann.Rev.Immunol.1997，15，371)和感染性疾病如病毒感染(Littler，E的Nature 1992，358，160)和真菌感染(Lum，R.T.的PCT國際專利申請WO 98/05335A1 980212)。
化療技術和放療技術在治療各種類型的腫瘤疾病時已被很好地確立。作為進行化療和/或放療時伴生的副作用，病人可能經歷嚴重的宿主上皮細胞毒。由化療所誘發的增生上皮損害的結果包括失去頭髮(脫髮)、蹠-掌綜合症、黏膜炎等，也知道這些副作用，特別是黏膜炎是因放療而發生的。這些副作用的嚴重性可隨所涉及的化療和/或放療各自的類型、劑量和劑量投放時間表來變化。
本發明概述本發明涉及在下文作更充分敘述的一種或多種不同形式的如下化合物 一方面，本發明提供一種通過給予受試體有效量的一種或多種不同形式的上述噻唑並吲哚滿酮化合物來預防/減輕接受化療和/或放療的受試體由這些治療所引起的上皮細胞毒副作用嚴重性的新方法，下文進行更充分地敘述。
能夠用此種方式預防/減輕其嚴重性的上皮細胞毒副作用包括由化療和/或放療所誘發的脫髮、蹠-掌綜合症和/或黏膜炎。
不同的噻唑並吲哚滿酮化合物包括在下文的討論中敘述的各種形式，其特徵是要參考其熔點、X-射線衍射結晶學光譜、在溶劑介質中的溶解度和合成的方法。 另一方面本發明還涉及各種形式的噻唑並吲哚滿酮化合物的製備方法。
本發明的再一方面涉及一種藥物組合物，該組合物含有(a)至少一種上述形式的噻唑並吲哚滿酮化合物，其含量能夠有效地預防/減輕由於進行了化療和/或放療而誘發的上皮細胞毒副作用的嚴重性，和(b)一種或多種可藥用的載體、賦形劑或稀釋劑。
由後面的公開和所附的權利要求，本發明的其它方面、特徵和優點將會更加明了。
本發明的詳細敘述及其優選的實施方案本發明提供一種噻唑並吲哚滿酮化合物，它具有的各種形式可以用作依賴於細胞周期蛋白的激酶抑制劑。
該噻唑並吲哚滿酮化合物具有如下的通式
可以製備成不同的形式，即A型、B型和C型，這將在下面充分敘述。
下面給出本發明噻唑並吲哚滿酮化合物的一般合成方案(方案1)，在隨後的各個實施例中進行更充分敘述。 此合成得到的產物，即4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)苯磺醯胺可以從合成反應系統中回收，然後用特殊種類的溶劑進行重結晶，得到相應的所需形式的化合物，用於最終的使用，這將在後面敘述。
然後可以將得到形式的化合物作為活性組分配製成可藥用組合物，用於給受試體(比如哺乳類受試體，如人受試者)進行局部或其它非系統給藥，用來預防/減輕給該受試體進行化療和/或放療所誘發的上皮細胞毒副作用(比如脫髮、蹠-掌綜合症、黏膜炎等)的嚴重性。
為了預防/減輕接受這些治療的受試體由化療和/或放療所誘發的脫髮的嚴重性，優選將以適當不同形式存在的本發明噻唑並吲哚滿酮化合物局部給藥到發生脫髮的身體部分，比如頭部(如頭皮、眉毛區、鬍鬚區等)。
對於此局部塗敷，可以將CDK2抑制劑化合物與選擇的可藥用載體(載體、稀釋劑或賦形劑)合併以配製成局部給藥的製劑，當以適當設計的治療方案給藥時，其化合物的量足以預防或減輕脫髮副作用的嚴重性。製劑可以是用於相應給藥方式的任何劑量單位形式。
可以以任何其它適當的方式製備噻唑並吲哚滿酮化合物的製劑並給藥，比如可以噴霧氣溶膠化的液體製劑給藥到經受化療誘發脫髮的受試體的頭部區，或者用含有可釋放形式CDK2抑制劑製劑的皮膚貼劑或敷料，定位在頭部，與罹患區相接觸。
另外，可將製劑配製成洗劑、藥膏、凝膠、泡沫、糊劑、油、乳脂或其它適當的形式，以將藥物投送到身體適當的部位，比如頭皮或頭部的其它區域，來預防/減輕脫髮的嚴重性，並在開始給藥後，要進行按摩、塗刷或擦拭，以將該製劑均勻地分布在頭皮上達到治療的一致性。
作為可以將本發明CDK2抑制劑局部給藥到接受化療和/或放療的受試體身體部位上的組合物的一個例子，可以使用Tata，S.等人在《乙醇和丙二醇共溶劑對在皮膚上沉積敏樂定的相對影響》(Relative Influence of Ethanol and Propylene GlycolCosolvents on Deposition of Minoxidil into the Skin)載《藥物科學雜誌》(Journal of Pharmaceutical Sciences)，83卷，No.10，1994年10月，pp.1508～1510中敘述的製劑，其全部公開的內容在此引作參考。這樣的製劑可以是在60％的乙醇、20％的丙二醇和20％的水組成的溶劑中含有2％的活性組分，用於將此溶液在頭皮上局部給藥。
還有一些可用於本發明CDK2抑制劑局部給藥的製劑，包括在美國專利5,849,733、5,807,698、5,625,031和5,486,509中規定的製劑，這些專利在此整體引作參考。
可以用於本發明的CDK2抑制劑局部給藥的說明性製劑例子包括Hoffman，R.M.等人的《能夠特異性地把黑色素定向地俘獲進入組織培養皮膚毛囊的脂質體》(Liposomes Can Specifically TargetEntrapped Melanin To Hair Follicles in Histocultured Skin，In Vivo Cell)，《發生生物學》(Dev.Bio1.)卷29A192～194，1993年3月和Niemiec，S.M.等人的《非離子脂質組合物對肽類藥物向毛囊皮脂單元給藥的影響用倉鼠耳模型進行的體內研究》(Influence of Nonionic Liposomal Composition on TopicalDelivery of Peptide Drugs into Pilosebaceous UnitsAn in VivoStudy Using the Hamster Ear Model)，《藥物學研究》(Pharmaceutical Research)卷12，No.8，1995，pp.1184～1188中敘述的脂質製劑，和Rolland，A.等人的《用聚合物微球向毛囊皮脂結構進行部位特異性藥物的給藥》(Site-Specific Drug Deliveryto Pilosebaceous Structures Using Polymeric Microspheres)，《藥物學研究》(Pharmaceutical Research)卷10，No.12，1993，pp.1738～1744中敘述的聚合物微球製劑。
可以製備製劑以便為所需的劑量時間表提供適當的劑量。基於使用的化療和/或放療的特性，對於給定的受試體技術人員很容易確定劑量和劑量時間表。
類似的考慮應用於用來預防/減輕蹠-掌綜合症嚴重性的CDK2抑制劑的製劑和給藥。這涉及到向作為化療和/或放療的副作用而使手足罹患綜合症的區域進行局部給藥。
為了預防/減輕黏膜炎的嚴重性，可以將依賴於細胞周期蛋白的激酶II抑制劑配為適當的局部用製劑，用於口腔黏膜。抵抗黏膜炎所使用的本發明依賴於細胞周期蛋白的激酶II抑制劑的說明性給藥系統包括在Cullinan的於1996年3月5日公開的美國專利5,496,828《潰瘍性黏膜炎的抑制方法》中敘述的製劑和給藥技術。有用的製劑可以包括活性組分和賦形劑、稀釋劑或載體，製成片劑、膠囊、噴霧劑、漱口劑、錠劑、糖劑、貼劑、棒棒糖劑、懸浮劑、粉劑等，應用於口腔黏膜。用於預防/減輕化療和或放療所誘發的上皮細胞毒副作用嚴重性的CDK2抑制劑的可接受的日劑量可以為大約0.1～大約1000mg/d，優選為大約50～大約200mg/d。
在本發明的優選實例中的依賴於細胞周期蛋白的激酶II抑制劑與化療和/或放療的治療同時給藥(即與化療和/或放療同時或與其時間足夠接近，使得對不存在此CDK2抑制劑時會出現的治療所誘發的上皮細胞毒副作用有預防或改善的效果)。此處的化療和/或放療可以是用於被治療病人的腫瘤，或其它疾病或症狀的任何合適種類的治療方法。作為說明性的例子，化療可以包括服用化療藥物，包括循環特異性的藥物(如胞嘧啶阿拉伯糖苷ARA-C)和非循環特異性藥物(如環磷醯胺)，它們單獨使用或相互組合一起使用。
在本發明的一個實施方案中的依賴於細胞周期蛋白的激酶II抑制劑是在一個化療周期中給藥的1～4次，作為預防/減輕接受化療和/或放療受試體的上皮細胞毒副作用如脫髮、蹠-掌綜合症和/或黏膜炎嚴重性的細胞保護組合物。
在預防/減輕化療誘發脫髮嚴重性的特定應用中，依賴於細胞周期蛋白的激酶II抑制劑，通過抑制依賴於細胞周期蛋白的激酶II的活性來實現所希望的毛囊細胞循環的暫時的中止。為此目的，配成適於局部給藥製劑的抑制劑可在化療前或化療當中使用1～2次或更多次/化療周期。
在本發明的一個優選方面，基於下面的特徵對局部給藥來預防/減輕化療誘發的脫髮嚴重性的依賴於細胞周期蛋白的激酶II抑制劑進行效果評價和使用選擇(1)對抗CDK2的IC50值小於2.5nmol，優選小於20nmol；(2)在G1控制點試驗中的IC50值小於1.5μmol，優選小於5μmol；(3)在用至少兩種不同細胞毒治療方案的幼鼠脫髮模型中顯現出可重現的保護作用，其中的一種包括烷化劑(如涉及阿黴素/環磷醯胺(蒽環類抗生素/烷化劑)、鬼臼乙叉甙(拓撲異構酶II抑制劑)、紫杉酚等治療方案)；(4)每kg受試體體重10mg的局部給藥劑量得到小於15nmol的血漿濃度，優選系統地曝露在小於0.01的保護HT29腫瘤細胞系的IC50濃度下；(5)可接受的皮膚刺激性；以及(6)待使用的特定局部製劑的適用性(在相容性、生物利用度等方面)。
適當不同形式的本發明化合物可以相應地被配製，用於局部給藥，以適當的劑量和治療方案來預防/減輕接受化療和/或放療病人的蹠掌綜合症的嚴重性。
為了預防/減輕接受化療和/或放療病人黏膜炎的嚴重性，本發明的化合物優選以漱口液、錠劑或棒棒糖等適當的形式配製用於局部給予口腔黏膜。
本發明的噻唑並吲哚滿酮化合物能夠以多於一種的形式進行結晶，這個特性已知叫做多晶型現象，而且所有這些多晶型形式(「多晶型物」)都包括在本發明的範圍內。多晶型的存在一般是作為對溫度或壓力，或者兩者同時變化的反響，也可以由結晶過程的改變而得到。可以以各種物理特性來區分這些多晶型物，典型地化合物的X射線衍射類型、溶解性和熔點被用來區分多晶型物。
在本文中使用的「附近」一詞在用於規定的熔點值時，指的是按攝氏度測定的溫度在規定值±2℃的範圍內。
在後面的敘述中，在本發明合成中使用的試劑都是可購得的或者是按照文獻的方法來製備的。對於舉例化合物所給出的物理數據都符合於這些化合物的所指定的結構。1H NMR波譜得自300MHz或400MHz的Varian Unity Plus NMR分光光度計。質譜數據得自Micromass公司，Altrincham，UK的Micromass Platform II型質譜儀，使用大氣化學離子化(APCI)或電子霧化離子化(ESI)。使用分析薄層色譜(TLC)來檢驗某些不能分離或對充分鑑定過度不穩定的中間體的純度，並追蹤反應的進程。除非另有說明，都是用矽膠(MerckSilica Gel 60 F254)進行的。除非另有說明，提純化合物用的柱狀色譜都使用Merck Silica Gel 60(230～400目)，而且所述的溶劑系統都在壓力下。
用型號TA 2910的差熱掃描熱量計測量本發明各種形式的噻唑並吲哚滿酮化合物的熔點。每次的試樣量是1～3mg。每個試樣都裝在鋁的卷邊盤子中，保持在40ml/min流速的氮氣流吹掃下。加熱速度是10℃/min。
每次都是將化合物溶解於所選擇的溶劑中並儲存於室溫下(比如25℃)直至溶劑蒸發來進行各自形式的重結晶過程。然後用X射線衍射分析固體殘留物。
在確定各自的反溶劑時，在25℃下將該化合物溶解於選擇的溶劑中，加入水或醇使固體沉澱。用X射線衍射分析該固體。
在進行粉末X射線衍射分析的過程中，在石英零背景板上噴灑粉末狀化合物，用Scintag PADV或XDS2000以5～40°的2θ角進行掃描。
為了便於描述，下文舉例敘述的本發明噻唑並吲哚滿酮化合物的特定形式分別被稱之為A型、B型和C型。
A型A型是具有下式的噻唑並吲哚滿酮化合物 它可以用下面的性能進行各式各樣的表徵熔點、X-射線衍射的晶體光譜特徵、在溶劑介質中的溶解度、反溶劑特徵和合成方法。
用前面敘述的熔點測定方法測定的A型的熔點是235℃。
當本發明的噻唑並吲哚滿酮化合物溶解於乙酸乙酯中並把溶液冷卻到5℃時，就沉澱出A型晶體。
A型化合物在聚乙二醇400、transcutol和甲醇溶劑中的溶解度(mg/ml)如下溶劑 溶解度PEG400 4.76mg/mltranscutol 3.15mg/ml甲醇0.30mg/ml當把A型化合物加入到丙酮、正丁醇或二氯甲烷中在25℃下進行漿液平衡形成平衡懸浮液並用粉末X射線衍射進行分析時，未因平衡而使形式變化。
在反溶劑表徵中，本發明的噻唑並吲哚滿酮化合物從二甲基亞碸中用水或醇作為反溶劑產生A型化合物的沉澱。
A型化合物的X射線衍射特徵顯示，這樣的多晶型物具有如

圖1顯示的X射線衍射譜(譜線A1和曲線A2)，其中由不同組的化合物產生各自的曲線。A型的X射線衍射值匯總在下面的表I中。
表I由A型得到的X射線衍射特徵2-θ和相對強度值
B型B型是下式的噻唑並吲哚滿酮化合物
該化合物用其熔點、X射線衍射結晶學光譜特徵、在溶劑介質中的溶解度和合成方法來表徵。
用前面敘述的熔點測定方法測定的B型的熔點是247℃。
B型化合物在聚乙二醇400、transcutol和甲醇溶劑中的溶解度(mg/ml)如下溶劑 溶解度PEG4004.5mg/mltranscutol 2.77mg/ml甲醇 0.08mg/mlB型化合物的X射線衍射特徵顯示，這樣的聚合物具有如圖1顯示的X射線衍射譜(譜線B)。B型的X射線衍射值匯總在下面的表II中。
表II由B型得到的X射線衍射特徵2-θ和相對強度值
C型C型是下式的噻唑並吲哚滿酮化合物
該化合物用其熔點、X射線衍射結晶學光譜特徵、反溶劑特徵和合成方法來表徵。
用前面敘述的熔點測定方法測定的B型的熔點是243℃。
在反溶劑表徵中，本發明的噻唑並吲哚滿酮化合物從N-甲基吡咯烷酮中用水或醇作為反溶劑產生C型化合物的沉澱。
C型化合物的X射線衍射特徵顯示，這樣形式的化合物具有如圖2顯示的X射線衍射譜(曲線C)。C型的X射線衍射值匯總在下面的表III中。
表III由C型得到的X射線衍射特徵2-θ和相對強度值
本發明的特徵用下面的非限定性實施例作出更充分的體現。
實施例1製備4-氨基-N-(4-氨基甲基吡啶基)苯磺醯胺在250ml的圓底燒瓶中加入50ml無水吡啶、4-(氨基甲基)吡啶(10.4g，50.0mmol)和磁力攪拌棒。在氮氣下攪拌混合物並冷卻到0℃，然後加入N-乙醯基氨基苯磺醯氯(12.8g，55.0mmol)。在0℃和氮氣下攪拌5分鐘得到的混合物，讓反應物溫熱至室溫並攪拌16小時。將反應混合物濃縮至稠厚的殘液，倒入大約500g冰水混合物中。用25ml甲醇將燒杯中的殘液漂洗到冰水混合物中，使N-乙醯基氨基苯磺醯胺沉澱。過濾並用過量的水洗滌得到的沉澱，在50℃下真空乾燥。將此固體懸浮在75ml的1N鹽酸中並加熱到100℃，直至耗盡所有的原料。冷卻反應混合物，用氫氧化銨中和。過濾沉澱在50℃下真空乾燥，得到5.78g的43.9％的化合物1H NMR(DMSO-d)δ8.42(d，2H)、7.76(t，1H)、7.39(d，2H)、7.22(d，2H)、6.56(d，2H)、5.91(s，2H)、3.89(d，2H)；APCI-MS m/z 264(MH)+。
實施例2製備6，8-二氫-7H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮在一個2升的三頸圓底燒瓶上裝上內部溫度計、250ml的加料漏鬥、磁力攪拌棒和隔片。在燒瓶中加入氮氣、200ml無水四氫呋喃和6-氨基苯並噻唑(15.2g，0.100mol)。攪拌混合物並在乾冰-丙酮浴中冷卻到內溫-74℃。在15分鐘的時間內加入次氯酸叔丁酯(11.0g，0.103mol)在50ml二氯甲烷中的溶液。在乾冰-丙酮浴的溫度下將得到的溶液再攪拌3小時。然後在反應物中緩慢滴加甲基硫代乙酸乙酯(13.8g，0.103mol)在50ml二氯甲烷中的溶液。在乾冰-丙酮浴的溫度下將得到的溶液再攪拌3小時。在乾冰-丙酮浴的溫度下，加入三乙胺(25.3g，0.250mol)和50ml二氯甲烷的溶液並將此溶液攪拌0.5小時。除去冷卻浴，讓反應物溫熱至室溫。然後將反應物濃縮為稠的殘留物。將此稠的油狀物再次懸浮在200ml乙醚和600ml 0.25M的鹽酸中。讓混合物攪拌24小時。從混合物中過濾得到的固體，用水和乙醚研製。然後將固體再次懸浮在冷甲醇中，過濾並在真空下乾燥16小時，得到18.7g(79％)的8-(甲基磺醯基)-6，8-二氫-7H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7酮1H NMR(DMSO-d6)δ10.8(s，1H)、9.2(s，1H)、8.0(d，1H)、7.1(d，1H)、1.8(s，3H)；APCI-MSm/z 235(M-H)-。在一個500ml的Erlenmeyer燒瓶中加入攪拌棒、8.1g(0.034mol)8-(甲基磺醯基)-6，8-二氫-7H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7酮和100ml冰醋酸。攪拌混合物直至所有的原料都溶解。然後用100ml四氫呋喃稀釋反應混合物。然後加入金屬鋅粉(16g，325目)。然後攪拌此非均相的混合物並在60℃下加熱2.5小時。通過一個0.5英寸厚的硅藻土墊真空過濾此混合物。再用四氫呋喃洗滌過濾墊上的殘渣。合併過濾液，濃縮得到溼的固體。用甲醇研製此固體，過濾並用空氣乾燥，得到4.51g(70％)的可自由流動固體的化合物1H NMR(DMSO-d6)δ10.5(s，1H)、9.1(s，1H)、7.9(d，1H)、7.0(d，1H)、3.6(s，2H)；APCI-MS m/z 191(M+H)+。
實施例3製備8-[乙氧基亞甲基]-6H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮在一個250ml的圓底燒瓶中加入攪拌棒、6，8-二氫-7H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮(4.0g，0.021mol)、40ml冰醋酸和醋酸二乙氧基甲酯(17.0g，0.105mol)。在燒瓶上安裝回流冷凝器和充入氮氣。將反應物加熱回流8小時。然後冷卻燒瓶，取出攪拌棒，並將反應物濃縮為潮溼的固體。用乙醚和乙醇溶液研製此固體。過濾混合物，用乙醇-乙醚溶液洗滌此固體，在真空下乾燥，得到標題化合物1H NMR(DMSO-d6)δ10.5(s，1H)、9.1(s，1H)、7.8(d，1H)、7.7(s，1H)、7.0(d，1H)、4.5(q，2H)、1.4(t，3H)；APCI-MS m/z245(M-H)-。
實施例4A型化合物-製備4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺a)將6.91g(28.0mmol)8-[乙氧基亞甲基]H＝[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮和7.52g(28.0mmol)4-氨基-N-(4-吡啶基甲基)苯磺醯胺在150ml乙醇中的混合物加熱回流22小時。趁熱過濾此混合物，將固體進行空氣乾燥，並用300ml熱乙醇洗滌。在室溫和高真空下乾燥濾餅48hr，得到黃色固體狀噻唑並吲哚滿酮化合物(11.0g，85％)1H NMR(DMSO-d6)δ4.02(d，J＝6.4Hz，2H)、7.11(d，J＝8.4Hz，1H)、7.24(d，J＝5.7Hz，2H)、7.56(d，J＝8.8Hz，2H)、7.77(d，J＝8.6Hz，2H)、7.81(d，J＝8.4Hz，1H)、8.05(d，J＝12.1Hz，1H)、8.24(t，J＝6.3Hz，1H)、8.44(d，J＝5.8Hz，2H)、9.26(s，1H)、10.92(s，1H)、11.15(d，J＝12.1Hz，1H)；分析計算＝C22H17N5S2O3·0.25H2O；C，56.46；H，14.96；S，13.70；實測C，56.41；H，3.72；N，14.89；S，13.77。
b)在一個裝有葉片攪拌器、溫度探頭和冷凝器的三頸圓底燒瓶中加入329g(1.25mol)8-[乙氧基亞甲基]-6H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮、293g(1.19mmol)4-氨基-N-(4-吡啶基甲基)苯磺醯胺和15540ml無水乙醇。將淡橘紅色的漿液在微回流狀態(77～78℃)下加熱27小時，得到深磚紅色的漿液。用1500ml熱乙醇幫助，過濾分離此磚紅色固體。用刮刀攪拌此固體餅，並用3份各1000ml的沸騰乙醇洗滌。將此固體轉移到一個乾燥的碟中，在50～60℃的真空下乾燥12小時。緩和地攪拌此固體，再在60℃的真空烘箱中乾燥20小時。分析計算C22H17N5O3S2·0.20C2H6O；C，56.91；H，3.88；N，14.81；S，13.57；實測C，56.22；H，3.87；N，14.77；S，13.77。
c)在一個試管(20mm×150mm)中加入磁力攪拌棒、0.123g(0.5mol)8-[乙氧基亞甲基]-6H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮、0.132g(0.5mmol)4-氨基-N-(4-吡啶基甲基)苯磺醯胺和5ml 95％的乙醇。用橡膠隔膜(14/22)將反應混合物密封，用3英寸的18號皮下針排氣。將反應容器放入室溫下的油浴中，同時攪拌，然後將油浴的溫度升到78℃，並在此溫度下保持大約24小時。從油浴中取出反應容器並讓其冷卻，直至可以觸及的溫熱狀態。虹吸過濾收集得到的沉澱。用過量95％乙醇洗滌固體並經虹吸過濾收集。在40℃的真空下乾燥得到的固體2小時。讓固體冷卻，得到52mg(11％)標題化合物。MS(M+H)＝464。
實施例5B型化合物—製備4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺a)將51.0g(207mmol)8-[乙氧基亞甲基]-6H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮和57.1g(217mmol)4-氨基-N-(4-吡啶基甲基)苯磺醯胺在1.2升乙醇中的混合物加熱回流22小時。蒸出乙醇濃縮此混合物幾乎至幹。用800ml乙醇稀釋濃縮的殘液，並溫熱至80℃1小時。過濾溫熱的混合物，將固體用乙醇洗滌。在室溫和高真空下乾燥濾餅，得到黃色固體狀噻唑並吲哚滿酮化合物(88.9g，93％)1HNMR(DMSO-d6)δ4.02(d，J＝6.4Hz，2H)、7.11(d，J＝8.4Hz，1H)、7.24(d，J＝5.7Hz，2H)、7.56(d，J＝8.8Hz，2H)、7.77(d，J＝8.6Hz，2H)、7.81(d，J＝8.4Hz，1H)、8.05(d，J＝12.1Hz，1H)、8.24(t，J＝6.3Hz，1H)、8.44(d，J＝5.8Hz，2H)、9.26(s，1H)、10.92(s，1H)、11.15(d，J＝12.1Hz，1H)；分析計算C22H17N5S2O3·0.25H2O·0.02C2H6OC，56.45；H，3.79；N，14.93；S，13.68；實測C，56.47；H，3.78；N，14.71；S，13.80。
b)在一個250ml的圓底燒瓶中加入磁力攪拌棒、1.98g(8.05mmol)8-[乙氧基亞甲基]-6H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮、2.16g(8.2mmol)4-氨基-N-(4-吡啶基甲基)苯磺醯胺和80ml 95％的乙醇。在此圓底反應燒瓶上安裝水冷回流冷凝器。在攪拌下將此反應容器放入在室溫下的油浴中，將油浴的溫度升至緩和的回流狀態，在此溫度下保持大約36小時。從油浴中取出反應容器，過濾熱的混合物，通過虹吸過濾收集固體。用過量的95％乙醇洗滌得到的固體，並用虹吸過濾收集此固體。然後在室溫下真空乾燥此固體2天，得到2.785g(74.7％)噻唑並吲哚滿酮化合物。MS(M+H)＝464。
實施例6製備A型和B型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的混合物在一個250ml的圓底燒瓶中加入磁力攪拌棒、4.11g(17.12mmol)8-[乙氧基亞甲基]-6H-[1，3]噻唑並[5，4-e]吲哚-7-酮、4.62g(17.55mmol)4-氨基-N-(4-吡啶基甲基)苯磺醯胺和150ml95％的乙醇。在此圓底反應燒瓶上安裝水冷回流冷凝器。在攪拌下將此反應容器放入在室溫下的油浴中，將油浴的溫度升至緩和的回流狀態，在此溫度下保持大約48hr。從油浴中取出反應容器，過濾熱的混合物，通過虹吸過濾收集固體。用過量的95％乙醇洗滌得到的固體，並用虹吸過濾收集此固體。然後在室溫下真空乾燥此固體2天，得到5.143g(64.8％)噻唑並吲哚滿酮化合物。MS(M+H)＝464。
實施例7使用如在下面表IV中所述的各種溶劑和結晶方法對化合物4-(((7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基)氨基)-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺進行結晶測定。
表IV 結晶測定
在表IV中，DMSO＝二甲基亞碸；DMF＝二甲基甲醯胺；PEG400＝分子量400的聚乙二醇；PXRD＝粉末X-射線衍射。
在使用相對非揮發性溶劑(DMSO、DMF)的情況下，在25℃下很難達到完全蒸發。在PXRD花樣中的無定形峰證實了溶劑的存在。在5℃下冷卻比其它的結晶方法成功率低，因為在此條件下4-(((7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基)氨基)-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的的溶解度很低。
雖然在本文中就各個說明性的方面、特徵和實施方案對本發明進行了敘述，應該理解，本發明能夠接受具有各種變化、改進的實施方案和其特徵已經公開的特定實施例。因此，意味著只要在後面權利要求的精神和範圍內，本發明可以進行更廣泛的解釋和分析，包括所有的這些變化、改進以及其它的實施方案。
此敘述和後面的權利要求形成其一部分的此申請書可以用作任何後來申請的優先權基礎。這些後來申請的權利要求可以涉及結合了在本文中所敘述的特徵的任何特徵。它們可以採取產品、製劑、方法或用途權利要求的形式，以舉例和非限定性方式包括了如下中的一項或幾項。
權利要求
1.下式的噻唑並吲哚滿酮化合物
其特徵在於其熔點約為235℃。
2.如在權利要求1中所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，該化合物的X-射線衍射光譜為圖1的光譜(A1和A2)。
3.如在權利要求1中所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，其溶解度的特徵是溶劑 溶解度PEG400 4.76mg/mltranscutol 3.15mg/ml甲醇0.30mg/ml
4.如在權利要求1中所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，該化合物具有如下的X-射線衍射特徵
5.通過將如在權利要求1中所定義的化合物溶解在結晶溶劑中並在環境溫度下蒸掉該溶劑產生晶態固體的所述噻唑並吲哚滿酮化合物而形成的噻唑並吲哚滿酮化合物，其中的結晶溶劑選自二甲基甲醯胺、二甲基亞碸、吡啶、乙酸乙酯和四氫呋喃。
6.通過將如在權利要求1中所定義的化合物溶解在二甲基亞碸中並在得到的溶液裡加入有效量的選自水和醇的試劑以沉澱所述化合物而形成的化合物。
7.通過將如在權利要求1中所定義的化合物溶解在乙酸乙酯中並冷卻所得的溶液形成所述噻唑並吲哚滿酮化合物沉澱而形成的化合物。
8.A型的4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺。
9.含有A型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的藥物組合物。
10.含有A型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的藥物組合物，當所述組合物被局部塗敷到具有上皮細胞毒的上皮部位時，其中的所述化合物有效地預防/減輕由於化療和/或放療誘發的上皮細胞毒的嚴重性。
11.含有如權利要求1～8中任何一項的噻唑並吲哚滿酮化合物和一種或多種可藥用載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。
12.如權利要求1所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，其特徵在於，其熔點約為近247℃。
13.如權利要求1所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，該化合物具有圖1(B)所示的X-射線衍射光譜。
14.如權利要求1所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，該化合物具有如下的溶解度特徵溶劑 溶解度PEG4004.5mg/mltranscutol 2.77mg/ml甲醇 0.08mg/ml
15.如權利要求1所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，該化合物具有如下的X-射線衍射特徵
16.B型的4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺。
17.含有B型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的藥物組合物。
18.含有B型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的藥物組合物，當所述組合物被局部塗敷到具有上皮細胞毒的上皮部位時，其中的所述化合物有效地預防/減輕由於化療和/或放療誘發的上皮細胞毒的嚴重性。
19.含有如權利要求12～16中任何一項的噻唑並吲哚滿酮化合物和一種或多種可藥用載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。
20.如權利要求1所定義的通式的噻唑並吲哚滿酮化合物，其特徵在於，其熔點約為243℃。
21.如權利要求1所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，該化合物具有圖2(C)所示的X-射線衍射光譜。
22.如權利要求1所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物，該化合物具有如下的X-射線衍射特徵
23.通過將如權利要求1所定義的化合物溶解於N-甲基吡咯烷酮形成溶液，並在得到的溶液裡加入足量的選自水和醇的反溶劑以產生所述噻唑並吲哚滿酮化合物沉澱而形成的噻唑並吲哚滿酮化合物。
24.C型的4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺。
25.含有C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的藥物組合物。
26.含有C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的藥物組合物，當所述組合物被局部塗敷到具有上皮細胞毒的上皮部位時，其中的所述化合物有效地預防/減輕由於化療和/或放療誘發的上皮細胞毒的嚴重性。
27.含有如權利要求20～24中任何一項的噻唑並吲哚滿酮化合物和一種或多種可藥用載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。
28.如權利要求1所定義的噻唑並吲哚滿酮化合物的製備方法，該方法為進行本文中敘述的合成方案1的至少一個合成步驟，得到4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺作為合成反應的產物；將所述合成反應產物處理，得到A型、B型和C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺的一種；回收所述的噻唑並吲哚滿酮化合物。
29.如權利要求28的方法，其中所述的處理包括將所述合成反應產物溶解於溶劑形成溶液，蒸發所述溶劑以回收噻唑並吲哚滿酮化合物。
30.如權利要求29的方法，其中的溶劑選自二甲基甲醯胺、二甲基亞碸、吡啶、乙酸乙酯和四氫呋喃，而且所述的噻唑並吲哚滿酮化合物是A型化合物。
31.如權利要求28的方法，其中所述的處理包括將所述合成反應產物溶解於溶劑中形成溶液，再將所述溶液冷卻到足夠的程度，沉澱出所述的噻唑並吲哚滿酮化合物。
32.如權利要求31的方法，其中所述溶劑是乙酸乙酯，而所述噻唑並吲哚滿酮化合物是A型化合物。
33.如權利要求28的方法，其中所述的處理包括將所述合成反應產物溶解於溶劑中形成溶液，並加入選自水和乙醇的反溶劑，使所述噻唑並吲哚滿酮化合物沉澱。
34.如權利要求33的方法，其中的溶劑是二甲基亞碸，而所述噻唑並吲哚滿酮化合物是A型化合物。
35.如權利要求33的方法，其中的溶劑是N-甲基吡咯烷酮，所述的反溶劑是水，而所述噻唑並吲哚滿酮化合物是C型化合物。
36.如權利要求28的方法，其中所述的噻唑並吲哚滿酮化合物是A型化合物。
37.如權利要求28的方法，其中所述的噻唑並吲哚滿酮化合物是B型化合物。
38.如權利要求28的方法，其中所述的噻唑並吲哚滿酮化合物是C型化合物。
39.預防/減輕接受化療和/或放療的受試體由於這些治療引起的上皮細胞毒副作用的方法，該方法是通過將有效量的A型、B型和C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺中的一種或多種給予所述受試體。
40.如權利要求39的方法，其中給予所述受試體A型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺。
41.如權利要求39的方法，其中給予所述受試體B型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺。
42.如權利要求39的方法，其中給予所述受試體C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺。
43.如權利要求39的方法，其中上皮細胞毒副作用包括脫髮。
44.如權利要求39的方法，其中上皮細胞毒副作用包括蹠-掌綜合症。
45.如權利要求39的方法，其中上皮細胞毒副作用包括黏膜炎。
46.如權利要求39的方法，其中在頭皮上局部給予有效量的一種或多種A型、B型和C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺以預防/減輕化療誘發的脫髮的嚴重性。
47.如權利要求39的方法，其中在手和/或足上局部給予有效量的一種或多種A型、B型和C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺以預防/減輕化療誘發的蹠-掌綜合症的嚴重性。
48.如權利要求39的方法，其中在口腔黏膜上局部給予有效量的-種或多種A型、B型和C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺以預防/減輕化療誘發的黏膜炎的嚴重性。
49.如權利要求39的方法，其中以製劑形式在經受化療和/或放療誘發的上皮細胞毒影響的身體部位局部塗敷有效量的一種或多種A型、B型和C型4-{[(7-氧代-6，7-二氫-8H-[1，3]噻唑並[5，4-e]亞吲哚-8-基)甲基]氨基}-N-(4-吡啶基甲基)-苯磺醯胺。
全文摘要
噻唑－吲哚化合物作為依賴於細胞周期蛋白的激酶II抑制劑,用於預防/減輕接受化療和/或放療的病人由於這些治療方法所誘發的上皮細胞毒的副作用(比如脫髮、蹠－掌綜合症、黏膜炎等)。
文檔編號A61P17/00GK1355807SQ00804616
公開日2002年6月26日 申請日期2000年3月1日 優先權日1999年3月4日
發明者A·弗雅斯 申請人:葛蘭素集團有限公司