一種從秦艽中提取龍膽苦苷的方法
2023-05-25 19:06:26 1
專利名稱：一種從秦艽中提取龍膽苦苷的方法
技術領域：
本發明涉及一種從秦艽中提取龍膽苦苷的方法，尤其是涉及一種用樹脂柱和生物膜手段分離龍膽苦苷的方法。
背景技術：
龍膽苦苷，環烯醚萜苷類物質。分子式=C16H2tlO9；理化性質白色針狀結晶(乙酸乙酯)，含結晶水熔點121°C。無結晶水熔點 191°C。溶於水、乙醇、乙酸乙酯，不溶於乙醚、石油醚。在酸鹼條件下或受熱易分解。龍膽苦苷具有保護肝臟、抗氧化、抗炎、鎮痛及抗腫瘤等作用。藥理研究表明，龍膽苦苷對化學性及免疫性肝損傷具有保護作用。因此，對於這樣一種有效部位明確、藥理活性明顯的中藥，對其運用現代化的方法進行分離純化具有一定的實際意義。天然龍膽苦苷主要從龍膽科植物秦艽根部得來，也有從葉或花中提取。秦艽龍膽科植物秦艽Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽Gentiana straminea Maxim.、粗蓮秦充 Gentiana cras-sicaulis Duthie ex Burk.或小秦充 Gentiana dahurica Fisch.的乾燥根。性味辛、苦，平。主要用於祛風溼，清溼熱，止痺痛。納濾膜是允許溶劑分子或某些低分子量溶質或低價離子透過的一種功能性的半透膜。它是一種特殊而又很有前途的分離膜品種，它因能截留物質的大小約為納米而得名。 納濾膜濃縮無需加熱，適合受熱易分解的物質。是近幾年在製藥領域得到了認可和運用。目前，提取龍膽苦苷多是有機試劑提取，再大孔樹脂分離或矽膠柱分離，隨著科技的進展，分離方法也有運用逆流色譜分離和超臨界萃取。如專利(申請號CN200810176032. 1) 「一種從白花龍膽花中提取龍膽苦苷的工藝」，該專利公開的方法是將乾燥的白花龍膽花粉碎後，在室溫下利用乙醇作為提取溶劑進行冷浸提取，經濃縮、大孔樹脂吸附、乾燥後得到純度較高的龍膽苦苷。再如專利「一種製備高純度龍膽苦苷的方法」，該專利公開的方法是採用逆流色譜製備龍膽苦苷。還有專利「一種龍膽苦苷的製備方法」，該專利公開的方法是取條葉龍膽根及根莖粉末，加入到超臨界萃取器中，甲醇作為夾帶劑，得萃取物，通過大孔吸附樹脂吸附，乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇並濃縮，加入乙酸乙酯-水-甲醇結晶。一些文獻還採用了微波和超聲加速提取效率，還有一些文獻只詳細比較了不同大孔樹脂吸附量及解析率。如上所述現有提取工藝存在工藝不完整性、生產成本高或處理量小等問題。
發明內容
本發明要解決技術問題是提供一種操作簡便、生產成本低的提取龍膽苦苷的方法。
發明人經三年實驗摸索，為進一步降低成本，減少能耗和汙染，以現有工藝為基礎，優化出本發明技術方案。本發明採用技術方案如下一種從秦艽中提取龍膽苦苷的方法，其特徵在於包含以下步驟1)提取取秦艽藥材粉碎10-60目，加入10-15倍量水加熱攪拌提取2_3小時，提取2-3次，濾過合併得提取液；2)大孔樹脂吸附把上述提取液加入大孔樹脂柱吸附，水洗無糖色，40-60%乙醇洗脫龍膽苦苷，得洗脫液；3)膜濃縮上述洗脫液，加入納濾膜系統納濾，至無醇，得濃縮液；4)聚醯胺分離把上述濃縮液，加入聚醯胺柱吸附，收集下柱液；5)萃取將上述下柱液加入乙酸乙酯萃取3-4次，減壓回收乙酸乙酯至1/5-1/8體積，放置結晶；6)重結晶將上述重結晶濾出，用乙酸乙酯回流溶解結晶，濾出真空低溫乾燥即得龍膽苦苷。所述步驟1)中加熱溫度不超過60°C。所述步驟2)中大孔樹脂型號可選S-8、ADS-7、HZ806或SPD-800中的一種，洗脫劑用量5-7倍柱體積。所述步驟3)納濾膜為截留分子量200的中空複合膜。所述步驟4)中的聚醯胺為120-200目。本發明採用水提取龍膽苦苷，溫度低充分攪拌，也可以提取出有效成分，這樣可以降低醇提成本，同時也無需濃縮可以直接上柱，節約能源，減少Sh汙染，大孔樹脂純化後，膜濃縮濃縮溫度低，有效的減少了龍膽苦苷的分解，再加聚醯胺柱分離，和單純樹脂柱分相比，含量可以提高50-80%，在後續只需結晶即可得到高含量產品，和超臨界萃取及逆流色譜分離比較，具有生產量大、工藝操作簡單的優勢。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式
具體實施例方式實施例1 秦艽藥材粉碎10目，取10千克，投入200L中試提取罐中，加入IOOkg水加熱50°C，攪拌提取3小時，抽取上清液，再加同樣條件提取2次，合併提取液過濾，常溫加入IOL S-8大孔樹脂柱吸附，流速15L/H，吸附結束後，水洗樹脂柱無糖色，50L60%乙醇洗脫龍膽苦苷，得洗脫液，加入截留分子量200的納濾膜濃縮，進口壓力保持0. 5mpa，至無醇，加入2L聚醯胺樹脂柱，流速控制為lL/h，收集下柱液，轉入分離器中加入等體積的乙酸乙酯攪拌萃取4次，收集乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯至原體積的1/8，放置結晶，濾出結晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重結晶，得針狀結晶物，低溫真空乾燥，得龍膽苦苷110g，含量98. 2 %。實施例2 秦艽藥材粉碎60目，取10千克，投入200L中試提取罐中，加入150kg水加熱60°C，攪拌提取2小時，抽取上清液，再加同樣條件提取2次，合併提取液過濾，常溫加入10LADS-7大孔樹脂柱吸附，流速20L/H，吸附結束後，水洗樹脂柱無糖色，70L40%乙醇洗脫龍膽苦苷， 得洗脫液，加入截留分子量200的納濾膜濃縮，進口壓力保持0. 6mpa，至無醇，加入2L聚醯胺樹脂柱，流速控制為1.5L/h，收集下柱液，轉入分離器中加入2倍體積的乙酸乙酯攪拌萃取3次，收集乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯至原體積的1/5，放置結晶，濾出結晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重結晶，得針狀結晶物，低溫真空乾燥，得龍膽苦苷108g，含量98.7%。實施例3 秦艽藥材粉碎20目，取10千克，投入200L中試提取罐中，加入IOOkg水加熱 400C，攪拌提取3小時，抽取上清液，再加同樣條件提取2次，合併提取液過濾，常溫加入 IOL HZ806大孔樹脂柱吸附，流速10L/H，吸附結束後，水洗樹脂柱無糖色，60L50 %乙醇洗脫龍膽苦苷，得洗脫液，加入截留分子量200的納濾膜濃縮，進口壓力保持0. 4mpa，至無醇， 加入2L聚醯胺樹脂柱，流速控制為lL/h，收集下柱液，轉入分離器中加入等體積的乙酸乙酯攪拌萃取4次，收集乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯至原體積的1/6，放置結晶，濾出結晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重結晶，得針狀結晶物，低溫真空乾燥，得龍膽苦苷115g，含量 95%。實施例4 秦艽藥材粉碎40目，取10千克，投入200L中試提取罐中，加入150kg水加熱 500C，攪拌提取2小時，抽取上清液，再加同樣條件提取1次，合併提取液過濾，常溫加入 IOL SPD-800大孔樹脂柱吸附，流速10L/H，吸附結束後，水洗樹脂柱無糖色，60L55 %乙醇洗脫龍膽苦苷，得洗脫液，加入截留分子量200的納濾膜濃縮，進口壓力保持0. 6mpa，至無醇，加入2L聚醯胺樹脂柱，流速控制為lL/h，收集下柱液，轉入分離器中加入等體積的乙酸乙酯攪拌萃取4次，收集乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯至原體積的1/5，放置結晶，濾出結晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重結晶，得針狀結晶物，低溫真空乾燥，得龍膽苦苷102g，含量 98%。實施例5 秦艽藥材粉碎20目，取100千克，投入3000L提取罐中，加入1500kg水加熱50°C， 攪拌提取3小時，抽取上清液，再加同樣條件提取2次，合併提取液過濾，常溫加入100L S-8大孔樹脂柱吸附，流速130L/H，吸附結束後，水洗樹脂柱無糖色，600L50 %乙醇洗脫龍膽苦苷，得洗脫液，加入截留分子量200的納濾膜濃縮，進口壓力保持0. 6mpa,至無醇，加入20L聚醯胺樹脂柱，流速控制為25L/h，收集下柱液，轉入萃取罐中加入等體積的乙酸乙酯攪拌萃取3次，收集乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯至原體積的1/6，放置結晶，濾出結晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重結晶，得針狀結晶物，低溫真空乾燥，得龍膽苦苷1076g，含量 98. 5%。
權利要求
1.一種從秦艽中提取龍膽苦苷的方法，其特徵在於包含以下步驟1)提取取秦艽藥材粉碎10-60目，加入10-15倍量水加熱攪拌提取2-3小時，提取2-3次，濾過合併得提取液；2)大孔樹脂吸附把上述提取液加入大孔樹脂柱吸附，水洗無糖色，40-60%乙醇洗脫龍膽苦苷，得洗脫液；3)膜濃縮上述洗脫液，加入納濾膜系統納濾，至無醇，得濃縮液；4)聚醯胺分離把上述濃縮液，加入聚醯胺柱吸附，收集下柱液；5)萃取將上述下柱液加入乙酸乙酯萃取3-4次，減壓回收乙酸乙酯至1/5-1/8體積，放置結晶；6)重結晶將上述重結晶濾出，用乙酸乙酯回流溶解結晶，濾出真空低溫乾燥即得龍膽苦苷。
2.如權利要求1所述從秦艽中提取龍膽苦苷的方法，其特徵在於所述步驟1)中加熱溫度不超過60°C。
3.如權利要求1所述從秦艽中提取龍膽苦苷的方法，其特徵在於所述步驟幻中大孔樹脂型號可選S-8、ADS-7、HZ806或SPD-800中的一種，洗脫劑用量5_7倍柱體積。
4.如權利要求1所述從秦艽中提取龍膽苦苷的方法，其特徵在於所述步驟3)納濾膜為 截留分子量200的中空複合膜。
5.如權利要求1所述從秦艽中提取龍膽苦苷的方法，其特徵在於所述步驟4)中的聚醯胺為120-200目。
全文摘要
本發明公開了一種從秦艽中提取龍膽苦苷的方法，方法是把秦艽粉碎，加入10-15倍水溶液加熱提取2-3次，提取液加入大孔樹脂吸附，洗脫液採用納濾膜濃縮，濃縮液過聚醯胺樹脂柱純化，下柱液乙酸乙酯萃取濃縮結晶，重結晶，真空低溫乾燥得產品。採用本發明生產龍膽苦苷，生產量大、成本低，工藝易操作。本發明適合工業化生產。
文檔編號C07H17/04GK102372752SQ201010263070
公開日2012年3月14日 申請日期2010年8月26日 優先權日2010年8月26日
發明者劉東鋒, 李法慶, 楊成東 申請人:蘇州寶澤堂醫藥科技有限公司