一種治療腎病的中藥提取物和製備方法
2023-05-16 08:19:56
專利名稱：一種治療腎病的中藥提取物和製備方法
技術領域：
本發明屬於中藥現代化領域，涉及一種中藥及其提取物的新用途，具體涉及一種治療腎病的中藥提取物及其製備方法。
背景技術：
土大黃在民間又名金不換，牛耳大黃，牛西西等，為寥科酸模屬(Rumex)中多種能夠藥用植物根及根莖。主要有羊蹄、巴天酸模、尼泊爾酸模等，民間以草藥使用，具有清熱解毒，涼血止血，殺蟲止癢等功效。土大黃資源豐富，但目前國內外對於土大黃的研究還很匱乏，尚待我們進一步去挖掘。文獻對土大黃的主要藥物作用歸納如下(I)止血作用土大黃具有促進血液凝固、降低血管脆性，加強毛細血管收縮性作用。本品煎劑可使小鼠血凝時間明顯縮短，通過毛細血管法試驗，證明它能使毛細血管收縮，通透性降低。蟾蜍全身灌流試驗表明它可使血管收縮。紅絲酸模中止血成份血當歸甲素，其止血作用系由直接使小動脈收縮，促進生物蛋白成份的生成，並可能與促進孕激素作用有關。網果酸模中木槲皮素和木槲皮苷尚具良好的增強毛細血管抵抗力的作用。(2)祛痰、止咳及平喘作用土大黃根水煎劑去蛋白後水煎液給小鼠灌胃均有明顯的祛痰止咳作用；大黃素、大黃酸止咳作用明顯；總蒽醌給豚鼠灌胃有較明顯的平喘作用，資料表明提取出大黃素、大黃酚及大量酸後的殘餘部分也有平喘作用。(3)抗細菌作用；本品根中的大黃素、大黃酸、大黃酚在試管中對甲型鏈球菌、肺炎球菌、流感桿菌及卡他球菌有不同程度的抑制作用。此外，文獻報導大黃素體外試驗還對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌有不同程度抑制作用。毛脈酸模水浸液對金黃色葡萄球菌的抑制作用僅次於土黴素，對乙型鏈球菌、白喉桿菌的抑制效果與土黴素相同。網果酸模葉的乙醇提取物及鮮葉汁對施米茨氏痢疾桿菌及甲型副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌均有較強抑制作用。(4)抗真菌，抗病毒作用土大黃根中的酸模素作用於紅色毛髮癬菌、趾間髮癬菌及真菌感染的皮膚病效果良好。文獻報導根酊劑在沙泊氏培養劑上對大小孢子黴菌有抑制作用，最低有效濃度為1.56-3. 12%。木槲皮苷與亞洲甲型流感病毒注入雞胚，有預防感染作用。(5)抗腫瘤作用皺葉酸模提取物，實驗發現對腫瘤有防害作用，酸性藥物效力更強。
(6)其它作用資料表明蒽醌衍生物具緩瀉作用，維生素BI可用作健胃劑，強壯劑；本品還有一定的解疼、鎮靜、利尿、殺蟲之功效。煎劑酒精濃縮提取對急性淋巴細胞白血病、急性單核細胞型白血病和亞急型白血病患者血細胞脫氫酶具有抑制作用，分析發現其對白細胞呼吸有抑制作用。除此，本品還可以增加食慾、改善睡眠、提高機體抗病能力。目前，未有文獻報導土大黃提取物用於治療腎病的用途。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種治療效果好、用藥量少、副作用少的治療腎
病的藥物。本發明所述的藥物為中藥土大黃提取物。
本發明所述土大黃提取物中含有有效成分土大黃總蒽醌，其在提取物中的質量百分比含量為50-90%。本發明所述土大黃的提取方式選自回流提取法、水蒸汽蒸餾法、超臨界萃取法、煎煮法、浸潰法、滲漉法、醇提、水提製成。本發明所述提取物由中藥土大黃經醇提和水提製成。本發明所述的醇為乙醇。
本發明的土大黃提取物，優選的製備方法如下(I)取土大黃藥材或飲片，用4-8倍量60-95%乙醇提取2_3次，每次1_3小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用6-10倍量水提取2-3次，每次1-3小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積1-5倍量的水和樹脂床體積2-7倍量的5-20%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積8-12倍量70-95%乙醇洗脫，收集70-95%乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ；(5)再用適量5-10%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至1-4,10°C以下放置12-24小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。進一步優選的，本發明的土大黃提取物，製備方法如下(I)取土大黃藥材或飲片，用6倍量90%乙醇提取2次，每次2小時，濾過；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用8倍量水提取2次，每次I. 5小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積2. 5倍量的水和樹脂床體積5倍量的15%乙醇洗脫，最後用樹脂床體積10倍量的95%的乙醇洗脫，收集95 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量6%氫氧化鈉溶液溶解，濾過，濾液調pH值至2. 5,10 °C以下放置12-16小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。本發明其他優選的製備方法在實施例中。本發明的另一個目的在於提供一種用以上方法製備的土大黃提取物。本發明的另一個目的在於提供一種含有土大黃提取物的藥物組合物。本發明的藥物組合物，根據需要可以含有藥物可接受的載體，其中以土大黃提取物作為藥物活性成分，其在製劑中所佔重量百分比可以是0. 1-99.9%，其餘為藥物可接受的載體。本發明的藥物製劑組合物，以單位劑量形式存在，所述單位劑量形式是指製劑的單位，如片劑的每片，膠囊的每粒膠囊，口服液的每瓶，顆粒劑每袋，注射劑的每支等。本發明的藥物組合物可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、糖漿劑、口含劑、顆粒劑、衝劑、丸劑、滴丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴劑、貼劑。優選的，本發明的組合物為口服製劑或注射劑。其中，所述口服製劑選自膠囊劑、片劑、滴丸劑、顆粒劑、濃縮丸、口服液和合劑中的一種。其中，所述注射劑選自注射液、凍乾粉針劑和水針劑中的一種。
本發明的藥物組合物，其口服給藥的製劑可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充齊U、稀釋劑、壓片劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、調味劑和溼潤劑，必要時可對片劑進行包衣。適用的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑。適宜的崩解劑包括澱粉、聚乙烯吡咯烷酮和澱粉衍生物，例如羥基乙酸澱粉鈉。適宜的潤滑劑包括，例如硬脂酸鎂。適宜的藥物可接受的溼潤劑包括十二烷基硫酸鈉。
本發明的藥物組合物可通過混合，填充，壓片等常用的方法製備固體口服組合物。進行反覆混合可使活性物質分布在整個使用大量填充劑的那些組合物中。口服液體製劑的形式例如可以是水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或者可以是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復配的乾燥產品。這種液體製劑可含有常規的添加劑，諸如懸浮劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(它們可以包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、諸如甘油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對羥基苯甲酯或對羥基苯甲酸丙酯或山梨酸，並且如果需要，可含有常規的香味劑或著色劑。對於注射劑，製備的液體單位劑型含有本發明的活性物質和無菌載體。根據載體和濃度，可以將此化合物懸浮或者溶解。溶液的製備通常是通過將活性物質溶解在一種載體中，在將其裝入一種適宜的小瓶或安瓿前過濾消毒，然後密封。輔料例如一種局部麻醉齊U、防腐劑和緩衝劑也可以溶解在這種載體中。為了提高其穩定性，可在裝入小瓶以後將這種組合物冰凍，並在真空下將水除去。本發明的藥物組合物，在製備成藥劑時可選擇性的加入適合的藥物可接受的載體，所述藥物可接受的載體選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、EDTA 二鈉、EDTA鈣鈉，一價鹼金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、胺基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、澱粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、矽衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性齊IJ、聚乙二醇、環糊精、3 -環糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。本發明的另一個目的在於提供中藥原料土大黃或其提取物在製備治療腎病的藥物中的應用。本發明還提供了一種含有土大黃或其提取物的藥物組合物在製備治療腎病的藥物中的應用。本發明所述腎病包括慢性腎小球腎炎、急性腎小球腎炎、隱匿性腎炎、紫癜性腎炎、腎病症候群、糖尿病腎病、狼瘡性腎病、腎功能衰竭、IgA腎病和非IgA腎病。本發明的還提供了土大黃總蒽醌的含量測定方法。本發明的土大黃提取物中有效成分土大黃總蒽醌的質量百分比含量為50-90%。本發明所述的土大黃提取物中總蒽醌含量測定方法取提取物適量，置燒瓶中，力口入8%的鹽酸溶液10ml，超聲處理2min，再加入三氯甲烷10ml，加熱回流I小時，放冷，置分液漏鬥中，用少量三氯甲烷洗滌容器，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷萃取3次，每次10ml，合併三氯甲烷液，減壓回收溶劑至幹，殘渣加甲醇使溶解，轉移至IOml量瓶中，加甲醇置刻度，搖勻，微孔濾膜濾過得供試品溶液；以一定濃度的大黃酚、大黃素、大黃素甲醚對照品溶液為對照，在254nm波長下，HPLC法測定供試品溶液中三者的含量，三者含量之和即為提取物中總蒽醌的含量。我們對本發明的土大黃或其提取物做了藥效試驗，研究結果顯示，本發明的土大黃或其提取物在對腎小球腎炎的治療方面具有很好的效果，在利尿、改善蛋白尿、改善血尿方面均表現出很好的活性，試驗結果還顯示，本發明的藥物治療效果顯著，用藥量少，見效快，副作用少，穩定性好，製備工藝簡單，成本低廉，適合大規模生產。
具體實施例方式通過以下具體實施例更加詳細的說明本發明，但不作為本發明的限制。實施例I、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用6倍量90%乙醇提取2次，每次2小時，濾過；
(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用8倍量水提取2次，每次I. 5小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積2. 5倍量的水和樹脂床體積5倍量的15%乙醇洗脫，最後用樹脂床體積10倍量的95%乙醇洗脫，收集95 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A，(5)再用適量6%氫氧化鈉溶液溶解，濾過，濾液調pH值至2. 5,10 °C以下放置12-16小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為80. 1%。實施例2、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用4倍量60%乙醇提取2次，每次I小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用6倍量水提取2次，每次I小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積I倍量的水和樹脂床體積2倍量的5%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積8倍量70%乙醇洗脫，收集70 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量5%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至I, IO0C以下放置12小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為50. 4%。實施例3、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用8倍量95%乙醇提取3次，每次3小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用10倍量水提取3次，每次3小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積5倍量的水和樹脂床體積7倍量的20%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積12倍量95%乙醇洗脫，收集95 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量5%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至4,10°C以下放置14小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為90. 0%。
實施例4、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用4倍量85%乙醇提取2次，每次I小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用6倍量水提取2次，每次2小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積I倍量的水和樹脂床體積2倍量的5%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積8倍量70%乙醇洗脫，收集70 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏 ，加入上述沉澱A ;(5)再用適量5%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至1,10°C以下放置16小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為65. 5%。實施例5、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用8倍量75%乙醇提取3次，每次3小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用10倍量水提取3次，每次3小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積5倍量的水和樹脂床體積7倍量的20%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積12倍量95%乙醇洗脫，收集95 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量5%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至4,10°C以下放置18小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為61. 3%。實施例6、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用6倍量85%乙醇提取2次，每次2小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用8倍量水提取2次，每次2小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積3倍量的水和樹脂床體積4倍量的10%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積10倍量85%乙醇洗脫，收集85 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量7%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至2,10°C以下放置20小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為72. 6%。實施例7、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用6倍量85%乙醇提取2次，每次2小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用8倍量水提取2次，每次2小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積3倍量的水和樹脂床體積4倍量的10%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積10倍量85%乙醇洗脫，收集85 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量7%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至3,10°C以下放置24小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。
經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為70. 8%。實施例8、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用5倍量95%乙醇提取3次，每次2小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用7倍量水提取2次，每次2小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積3倍量的水和樹脂床體積5倍量的15%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積11倍量95%乙醇洗脫，收集95 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量7%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至I, IO0C以下放置14小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。 經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為85. 6%。實施例9、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用5倍量95%乙醇提取3次，每次2. 5小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用7倍量水提取2次，每次2. 5小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積3倍量的水和樹脂床體積5倍量的15%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積11倍量85%乙醇洗脫，收集85 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量9%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至1,10°C以下放置14小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為80. 2%。實施例10、本發明的提取物(I)取土大黃藥材或飲片，用5倍量95%乙醇提取3次，每次I. 5小時；(2)醇提藥渣揮去乙醇後，用9倍量水提取2次，每次I. 5小時，合併水提液；(3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A，(4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積3倍量的水和樹脂床體積6倍量的15%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積11倍量95%乙醇洗脫，收集95 %乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ;(5)再用適量5%氫氧化鈉溶液溶解,濾過,濾液調pH值至2,10°C以下放置16小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。經測定，提取物中土大黃總蒽醌的含量為83. I %。實施例11、本發明的膠囊取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入適量的乳糖製成膠囊。實施例12、本發明的片劑取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入適量的糊精製成片劑。實施例13、本發明的顆粒劑取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入適量的羧甲基纖維素，60°C鼓風乾燥，制粒，整粒，即得顆粒劑。實施例14、本發明的滴丸
取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入適量的聚乙二醇，混合均勻，熔融，上滴丸機，製成滴丸實施例15、本發明的口腔崩解片取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入5%交聯聚維酮，0. 1%的硬脂酸鎂，50%的微晶纖維素，用適量乙醇溶液製成軟材，制粒，60°C鼓風乾燥，制粒，整粒，壓製成片，即得口腔崩解片。實施例16、本發明的膠囊劑取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入適量澱粉，蔗糖和硬脂酸鎂，制粒，裝入膠囊，即得膠囊劑。實施例17、本發明的片劑取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入適量澱粉，羧甲基纖維素鈉、滑石粉混合均勻，制粒，壓片即得片劑。實施例18、本發明的口服液取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入適量糖漿4g、溶於IOOml的純淨水中，均質，過濾，經過高溫瞬時滅菌(135°C，4s)。無菌灌裝、分裝，製得口服液。實施例19、本發明的粉針劑取本發明實施例1-10中任意I個土大黃提取物，加入適量葡萄糖4. 5g、硫代硫酸鈉0. 9g和蒸餾水1ml，上述組分混合均勻後，冷凍乾燥，分裝，即得粉針劑。實施例20、本發明提取物的藥效學實驗動物實驗實驗一土大黃提取物對正常大鼠尿量的影響實驗材料I.實驗動物SPF級SD大鼠70隻，雄性，體重180 220g。購於北京維通利華公司。飼養條件在有空調的動物室飼養，溫度為20°C 25°C，相對溼度60 %，每籠5隻，照明時間12小時，定時定量添加飼料，食用鼠專用飼料(北京科澳協飼料有限公司生產)，自由飲水，每日更換墊料2.主要試劑和藥品2. I試劑生理鹽水天津津藍藥業有限公司，批號091109042. 2 藥品I.受試藥物土大黃提取物(本發明實施例I製備得到的提取物)2.陽性藥氫氯噻嗪；天津力生製藥股份有限公司；批號07110183.實驗儀器代謝籠蘇州市馮氏實驗動物設備有限公司實驗方法I.預選取180g_200g SD健康雄性大鼠，適應飼養I天，實驗前禁食不禁水24小時，灌胃給予25ml/kg生理鹽水後，收集2小時尿量，以排尿量達到灌胃量的40%以上者選入實驗。2.分組取預選合格的大鼠按體重隨機分組，分別為空白對照組，土大黃提取物高、低劑量組，以及氫氯噻嗪組(陽性對照組)，每組10隻。給藥劑量按照土大黃及氫氯噻嗪片的臨床給藥劑量換算得來，分別為各製劑高劑量組1000mg/kg，各製劑低劑量組500mg/kg，氫氯噻嗪組16mg/kg，空白組灌胃生理鹽水。3.利尿實驗於實驗前灌胃給予50ml/kg包含受試藥物的生理鹽水負荷，用手壓迫大鼠下腹部使其排盡餘尿，正常對照組(即空白組)給予相應的生理鹽水，放入代謝籠中，每籠一隻,每小時收集尿液一次,連續5小時，記錄每小時尿量及總尿量。4 統計方法在原始數據整理時，以95%置信區間定義異常數據，即將數值超過i ±2s範圍外的數據予以剔除。採用SPSS11. 5軟體進行統計分析。計量資料以7 土s表示各藥物組與模型組相比較，採用單因素方差分析，以評價藥物的作用。P < 0. 05為差異有顯著性意義。實驗結果I.與空白組比較，陽性藥氫氯噻嗪能顯著增加大鼠尿量(P < 0. 01) ;土大黃提取物高劑量組能明顯增加大鼠5小時的排尿量，且差異有統計學意義(P < 0. 01);低劑量組大鼠尿量雖與空白組比較均有所增加，但差異沒有統計學意義。具體結果詳見表I表I 土大黃提取物對正常大鼠排尿量的影響(X ±^)
權利要求
1.一種中藥土大黃提取物在製備治療腎病的藥物中的應用，其中，所述土大黃提取物中含有有效成分土大黃總蒽醌，其在提取物中的質量百分比含量為50-90%。
2.權利要求I所述的應用，其特徵在於，所述土大黃的提取方式選自水提、醇提、回流提取法、水蒸汽蒸餾法、超臨界萃取法、煎煮法、浸潰法、滲漉法。
3.權利要求I所述的應用，其特徵在於，所述提取物由中藥土大黃經醇提和水提製成。
4.權利要求3所述的應用，其特徵在於，所述醇為乙醇。
5.權利要求I所述的應用，其特徵在於，所述土大黃提取物的製備方法如下 (1)取土大黃藥材或飲片，用4-8倍量60-95%乙醇提取2-3次，每次1_3小時； (2)醇提藥渣揮去乙醇後，用6-10倍量水提取2-3次，每次1-3小時，合併水提液； (3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A; (4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積1-5倍量的水和樹脂床體積2-7倍量的5-20%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積8-12倍量70-95%乙醇洗脫，收集70-95%乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ； (5)再用適量5-10%氫氧化鈉溶液溶解，濾過，濾液調pH值至1-4,IO0C以下放置12-24小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。
6.根據權利要求I所述的應用，其特徵在於，所述土大黃提取物的製備方法如下 (1)取土大黃藥材或飲片，用6倍量90%乙醇提取2次，每次2小時，濾過； (2)醇提藥渣揮去乙醇後，用8倍量水提取2次，每次I.5小時，合併水提液； (3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A， (4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積2.5倍量的水和樹脂床體積5倍量的15%乙醇洗脫，最後用樹脂床體積10倍量的95%的乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A，(5)再用適量6%氫氧化鈉溶液溶解，濾過，濾液調PH值至2. 5，IO0C以下放置12-16小時，濾過，得沉澱乾燥，即得。
7.根據權利要求I所述的應用，其特徵在於，所述腎病包括慢性腎小球腎炎、急性腎小球腎炎、隱匿性腎炎、紫癜性腎炎、腎病症候群、糖尿病腎病、狼瘡性腎病、腎功能衰竭、IgA腎病或非IgA腎病。
8.一種治療腎病的土大黃提取物，其製備方法如下 (1)取土大黃藥材或飲片，用4-8倍量60-95%乙醇提取2-3次，每次1_3小時； (2)醇提藥渣揮去乙醇後，用6-10倍量水提取2-3次，每次1-3小時，合併水提液； (3)合併醇提取液，濾過，濾液濃縮至無醇味，加入適量的水沉澱，濾過，得沉澱A; (4)上清液與水提液合併過濾，濾液過聚醯胺層析柱，依次用樹脂床體積1-5倍量的水和樹脂床體積2-7倍量的5-20%的乙醇洗脫，最後用樹脂床體積8-12倍量70-95%乙醇洗脫，收集70-95%乙醇洗脫液，濃縮至稠浸膏，加入上述沉澱A ； (5)再用適量5-10%氫氧化鈉溶液溶解，濾過，濾液調pH值至1-4,IO0C以下放置12-24小時以上，濾過，得沉澱乾燥，即得。
9.一種含有權利要求8所述的土大黃提取物的藥物組合物。
10.根據權利要求9所述的藥物組合物，其特徵在於由活性成分和藥學可接受的輔料組成，所述活性成分土大黃提取物在製劑中所佔重量百分比為0. 1-99. 9%。
全文摘要
本發明公開了一種治療腎病的中藥提取物及製備方法，屬於中藥現代化領域。一種治療腎病的中藥提取物，該土大黃提取物由土大黃藥材或飲片經提取獲得。本發明研究結果顯示，土大黃提取物對腎小球腎炎的治療，在利尿、改善蛋白尿、改善血尿方面均表現出很好的活性。
文檔編號A61P13/12GK102641342SQ20111003808
公開日2012年8月22日 申請日期2011年2月15日 優先權日2011年2月15日
發明者劉景 , 周桂榮, 周水平, 夏忠庭, 張蘭蘭, 張莉華, 馬曉慧 申請人:天士力製藥集團股份有限公司