含芒果苷的藥用組合物及其製備方法
2023-05-16 21:53:01
專利名稱：含芒果苷的藥用組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種含芒果苷的藥用組合物及其製備方法。
背景技術：
芒果苷(mangiferin)，又名芒果素、知母寧，是從漆樹科植物芒果葉或百合科植物知母等植物中提取的天然多酚類化合物，分子式C19H18O11，分子量422。其化學結構如下 芒果苷的藥理研究表明其具有多種生物活性，如抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、降糖、抗炎、利膽、免疫調節等等。但因本品幾乎不溶於水，溶解性差，生物利用度低，而一定程度上限制了其作為新藥的研發。
為此，我們通過大量的研究，發明了一種含芒果苷的藥用組合物，該組合物可以有效地增加芒果苷的溶解性，提高生物利用度，並可將其製成注射劑等各種劑型，從而更好地使該化合物發揮藥效。
發明內容
本發明的目的是提供一種含芒果苷的藥用組合物及其製備方法，在不改變芒果苷結構的前提下，增加芒果苷水溶性，克服芒果苷溶解性差之缺陷，並增加其生物利用度。其特徵是選擇環糊精衍生物作為包合材料，將芒果苷製成包合物，以此增加芒果苷在水中的溶解度。環糊精與芒果苷的比例可以是3g-30g∶1g範圍的任何一種比例。所說的環糊精衍生物包括各種取代基的α-環糊精衍生物、β-環糊精衍生物、羥丙基-γ-環糊精衍生物及磺丁基醚-β-環糊精衍生物等。
本發明的技術解決方案是將芒果苷加入適量的有機溶劑溶解，在攪拌情況下，滴加到水溶解的環糊精衍生物溶液中，繼續攪拌混合溶液，使環糊精衍生物將芒果苷包合完全。由此製備具有較好水溶性的製劑。
具體工藝如下取1重量份的芒果苷，用約150重量份60％乙醇加熱溶解；取3-30重量份的環糊精衍生物，加兩倍環糊精衍生物量的水攪拌溶解，至環糊精衍生物溶液呈粘稠狀。
將兩份溶液放入水浴中，高速攪拌情況下，將芒果苷溶液滴加到環糊精衍生物溶液中。繼續攪拌溶液，直至呈粘稠狀。得到芒果苷環糊精混合物。
本發明提供的芒果苷包合物用作化療增效藥的大鼠有效劑量範圍為15-30mg/日，按照不同種類動物間劑量換算公式折到人體為150-300mg/日/人。給藥途徑為口服，每日3次。因動物與人體之間的差異，故允許實際臨床應用劑量有所調整。亦可採用其它給藥途徑。
本發明提供的藥用組合物加入一種或多種藥用輔料製成任何一種藥劑學上的劑型。
具體實施例方式下列實施例旨在進一步舉例描述本發明，而不是以任何方式限制本發明，在不背離本發明的精神和原則的前提下，對本發明所做的本領域普通技術人員容易實現的任何改動都將落入本發明的待批權利要求範圍之內。
製備例1芒果葉用95％乙醇滲漉提取，減壓回收乙醇，稠膏依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，回收溶劑得到石油醚提取部、乙酸乙酯提取部、水層沉澱物。其中水層沉澱物用55％乙醇熱提冷卻得到黃色針狀結晶，經反覆純化處理得到芒果苷。HPLC測定芒果苷含量為90％。
製備例2知母飲片水煎煮兩次，每次1小時，水煎液濃縮，80％乙醇沉澱，取上清液，減壓回收乙醇，上大孔吸附樹脂吸附，水洗至清，30％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，減壓乾燥，即得。HPLC測定芒果苷含量為88％。
實施例1取芒果苷100mg，用60％乙醇約15mL加熱使之溶解；稱取羥丙基-β-環糊精3.0g，加水5mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓乾燥，即得。
實施例2取芒果苷100mg，用70％乙醇約15mL加熱使之溶解；稱取羥丙基-β-環糊精0.3g，加水15mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓乾燥，即得。
實施例3取芒果苷100mg，用65％乙醇約15mL加熱使之溶解；稱取α-環糊精1.0g，加水10mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓乾燥，即得。
實施例4取芒果苷100mg，用丙酮約5mL加熱使之溶解；稱取β-環糊精1.0g，加水5mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓乾燥，即得。
實施例5取芒果苷100mg，用無水乙醇約15mL加熱使之溶解；稱取羥丙基-γ-環糊精1.0g，加水5mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓乾燥，即得。
實施例6取芒果苷100mg，用甲醇約15mL加熱使之溶解；稱取磺丁基醚-β-環糊精1.0g，加水20mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓乾燥，即得。
製劑製備例1芒果苷環糊精包合物注射液的製備取芒果苷羥丙基-β-環糊精包合物10g，加入1000ml重蒸餾水中，溶解，過0.22um濾膜，120℃滅菌15min，即得。
製劑製備例2芒果苷羥丙基-β-環糊精包合物膠囊的製備芒果苷羥丙基-β-環糊精包合物200g，過80目篩，加入微晶纖維素100克作為稀釋劑組成配方，混勻，裝膠囊，即得，含藥量為100mg/粒。
試驗例1芒果苷環糊精包合物溶解度測定分別精密稱取研成細粉芒果苷5mg和芒果苷羥丙基-β-環糊精包合物500mg，置於25±2℃50ml蒸餾水中，每隔5分鐘強力振搖30秒鐘；觀察30分鐘內的溶解情況。芒果苷仍有可見溶質顆粒，其水溶解度小於0.1mg/ml，屬水幾乎不溶物質；芒果苷羥丙基-β-環糊精則完全溶解。另精密稱取研成細粉芒果苷羥丙基-β-環糊精包合物1000mg，置於25℃±2℃30ml蒸餾水中，每隔5分鐘強力振搖30秒鐘；觀察30分鐘內的溶解情況，芒果苷羥丙基-β-環糊精有少量可見溶質顆粒。因此芒果苷羥丙基-β-環糊精水溶解度大於10mg/ml，屬水略溶物質。
試驗例2芒果苷羥丙基-β-環糊精包合物與芒果苷口服生物利用度比較。
1.藥液配製稱取芒果苷羥丙基-β-環糊精包合物適量，加去離子水溶解，配成濃度為5mg/mL溶液，為樣A；稱取芒果苷適量，加1％羧甲基纖維素鈉溶液混懸，製成5mg/mL混懸液，為樣B。
2.灌胃給藥方案大鼠禁食16h，自由飲水，分別灌胃給藥樣A和樣B，劑量分別為50mg/kg。分別於給藥前5min和給藥後15min、30min、45min、60min、90min、120min、180min、240min、300min、、360min、480min取血，分離血清。
3.樣品處理血漿樣品的處理精密吸取血漿便樣品0.2mL，精密加入冷藏的10％三氯乙酸40μL，渦旋3min，12000r/min離心10min，吸取上清液約120μL置於尖底進樣瓶中，HPLC自動進樣。
4樣品的測定4.1儀器1100系列高效液相色譜儀(美國Agilent公司)；包括G1312A二元泵，G1313A自動進樣器，4.2血漿樣品測定的色譜條件色譜柱島津Shim packCLC ODS柱(150mm×6mm，5μm)；流動相甲醇 乙腈1.2％KH2PO4水溶液(24∶2∶74)；流速0.8mL/min檢測波長254nm柱溫40℃。
4.3結果表1芒果苷包合物與芒果苷的生物利用度比較
上述結果顯示口服芒果苷羥丙基-β-環糊精包合物血藥濃度(Cmax)遠高於口服芒果苷血藥濃度(Cmax)，表明芒果苷包合物生物利用度有較大提高。試驗例3芒果苷包合物腫瘤增效作用研究1.藥物按照製劑製備例2製備的芒果苷包合物。順鉑由山東省德州製藥廠生產。
2.動物Wistar大鼠，SPF級，雌雄各半，150～180g，室溫18～25℃，溼度40～60％。由昆明醫學院實驗動物中心提供。飼料由廣東省醫學動物實驗中心提供，自由攝食和飲水，每日更換飲水瓶一次。
3.實驗方法3.1造模Walker256細胞系引自上海醫藥工業研究院藥理室，將細胞系在1640培養基中培養，把細胞濃度調成約1×106，無菌下將0.5ml細胞注射到剛斷奶的Wistar大鼠腹腔中，6-8天長成腹水瘤。再將腹水瘤鼠處死，收集腹水於無菌小瓶中，取0.5ml細胞於消毒皮膚後行皮下注射到斷奶大鼠腋下製成實體瘤，8-10天將動物處死，無菌下取瘤組織置於盛有1640培養基的平皿中，將腫瘤切成1mm3大小的瘤塊備用。另取大鼠，雌雄不拘，分模型組、順鉑組、芒果苷包合物高中低劑量組、芒果苷包合物高中低劑量組與順鉑合用組，共8組。將動物於2％戊巴比妥鈉靜脈注射麻醉下切開腹腔，暴露肝臟，用眼科手術鑷輕輕在肝上打一遂道，將瘤塊植入，壓迫止血，關腹後靜脈注射1ml生理鹽水放回籠中飼養。
3.2分組將肝癌大鼠按體重隨機分為8組，每組10隻。分別為模型組、順鉑組、芒果苷包合物高中低劑量組、芒果苷包合物高中低劑量組與順鉑合用組。按表2所示劑量和給藥方式每日給藥一次，連續給藥14天。
4.檢測指標末次給藥24小時後處死，取血，剝取瘤組織。
5.1瘤重與抑瘤率抑瘤率％＝(1-給藥組平均瘤重/模型組平均瘤重)×100％根據各組抑瘤率，按Burgi修正公式對聯合用藥組進行療效判斷。即Q＝聯合用藥組抑瘤率/(順鉑組抑瘤率+芒果苷組抑瘤率-順鉑組抑瘤率×芒果苷組抑瘤率)若q值為0.85～1.15為單純相加，q＞1.15為增強，q＜0.85為拮抗。
5.結果芒果苷溶液對順鉑抑瘤的增效作用表2芒果苷對肝癌大鼠抑瘤率的影響
與模型組比較*，P＜0.05；**，P＜0.01。與相應化療藥組比較#，P＜0.05；##，P＜0.01。與相同劑量芒果苷溶液組比較△，P＜0.05；△△，P＜0.01。
結果表明，較低劑量的順鉑(0.5mg/kg)肝癌的抑瘤活性較低，抑瘤率只達24.3％。芒果苷包合物只在30mg/kg劑量下表現出較明顯的抑瘤活性，抑瘤率為23.4％。當芒果苷包合物與順鉑聯合應用時，抑瘤活性明顯提高，各組與模型組比較具有顯著性差異。芒果苷包合物15mg/kg和30mg/kg與順鉑合用時q值為1.41和1.79，大於1.15，表明芒果苷包合物對順鉑的抑瘤有一定的增效作用。
7結論芒果苷包合物與順鉑聯用可明顯增強順鉑的抑瘤活性。
權利要求
1.一種含芒果苷和環糊精衍生物的藥物組合物，其特徵在於芒果苷被包含在環糊精衍生物中，二者配比為芒果苷1g、環糊精衍生物3g-30g。
2.權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於芒果苷被包含在環糊精衍生物中，二者配比為芒果苷1g、環糊精衍生物3g-10g。
3.權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於環糊精衍生物可以選自各種取代基的α-環糊精衍生物、β-環糊精衍生物、羥丙基-γ-環糊精衍生物及磺丁基醚-β-環糊精衍生物等。
4.權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於環糊精衍生物優選為羥丙基-β-環糊精。
5.權利要求1的藥物組合物的製備方法，其特徵在於取芒果苷，用適當溶劑溶解；取環糊精衍生物，加適量的水攪拌溶解，高速攪拌情況下，將芒果苷溶液滴加到環糊精衍生物溶液中。繼續攪拌溶液，直至呈粘稠狀。得到芒果苷環糊精混合物。
6.權利要求1的藥用組合物加入一種或多種藥用輔料製成任何一種藥劑學上的劑型。
全文摘要
一種含芒果苷的藥用組合物及其製備方法，具體為芒果苷被包含在環糊精衍生物中，且二者配比為芒果苷1g、環糊精衍生物3g－30g範圍內，可有效增加芒果苷的溶解度與生物利用度。
文檔編號A61P37/00GK1977855SQ20061016684
公開日2007年6月13日 申請日期2006年12月7日 優先權日2005年12月9日
發明者滕厚雷, 於翠翠, 邵萌, 翟大偉, 李子香, 劉軍鋒 申請人:海南盛科天然藥物研究院有限公司