用於抗腫瘤藥物的靛玉紅類化合物的製作方法
2023-05-17 20:53:41
專利名稱：用於抗腫瘤藥物的靛玉紅類化合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一類用於抗腫瘤藥物的靛玉紅類化合物，可以在製備治療腫瘤 的藥物中應用，屬於醫藥化工技術領域。
背景技術：
靛玉紅與其類似物甲異靛在臨床上用於治療慢性粒細胞白血病。公開號為 CN101074229A的中國發明專利公布了7-氮雜靛玉紅衍生物，國際專利 W02003051900 Al公布了靛玉紅衍生物，這些衍生物可以抑制細胞周期蛋白依賴 性激酶(CDKs)，進而可以治療因細胞生長紊亂而導致的各種疾病，其中包括惡 性腫瘤。國際專利W02007099402-A2中公布l位和7位具有取代基的靛玉紅衍生物 可以用來治療結腸癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌等惡性腫瘤。公開號為CM763005A 的中國發明專利中公布了#(1)-烴基-3'-肟基靛玉紅衍生物具有抗腫瘤活性， 該衍生物在體外對激素依賴性前列腺癌LNCaP細胞和激素非依賴性前列腺癌 PC-3和DU-145細胞的增殖有明顯的抑制作用，在體內亦能明顯抑制小鼠Lewis肺 癌細胞增殖。Bradbury J. (Bradbury J. ， From Chinese medicine to anticancer drugs, AK^/W"01M5W; 2005， 10 (17)， 1131-1132)介紹，靛玉紅及其衍 生物參與抑制腫瘤細胞生成的多種作用途徑，所以具有廣泛的抗腫瘤特性。
但因合成方法的局限，到目前為止，這些研究只對靛玉紅結構式中的5位、 6位、7位、5'位、6'位和7'位以不同的取代基進行修飾，4位和4'位因空 間位阻的影響而很難合成。
不斷尋找或改進新的合成方法，在靛玉紅結構式中引入新類型取代基，合 成一系列全新的化合物，具有積極的意義。
發明內容
本發明的目的在於針對現有技術的不足，提供一類用於抗腫瘤藥物的靛玉
3紅類化合物，可利用其抑制或殺滅腫瘤細胞，具有抗腫瘤活性的特性，製備治 療腫瘤的藥物，以擴充抗腫瘤藥物庫。
為實現上述目的，本發明在具有抗腫瘤作用的化合物靛玉紅母核結構基礎 上，通過對合成方法的改進，在靛玉紅的4位或6位引入取代基，合成了一系 列全新的化合物，得到具有抗腫瘤活性的全新的4-取代靛玉紅衍生物及6-取代 靛玉紅衍生物。
本發明所涉及的一類用於抗腫瘤藥物的4-取代靛玉紅衍生物及6-取代靛玉 紅衍生物，結構通式如下
上述通式中的取代基可以為下述中的一個
(1) R=0， R^CF:" R2=H;
(2) R=0， R,二F， R2=H;
(3) R二0， R,=Br， R2=H;
(4) R=0， R，2， R2=H;
(5) R=0， R,=H， R2=CF3;
(6) R=N0H， R屍H， R2=CF3。 本發明所涉及的化合物具有抗腫瘤作用，可以抑制或殺滅腫瘤細胞。 本發明所涉及的化合物可以用作製備抗腫瘤的藥物。
本發明所涉及的化合物可以用作但不限於製備治療宮頸癌、胃癌、肝癌或 肺癌的抗腫瘤藥物。
本發明的新型靛玉紅類化合物的合成路線如下本發明所涉及的化合物的製備方法是將4-取代吲哚醌或6-取代吲哚醌與3-吲哚乙酸酯縮合，得到目標化合物4-取代靛玉紅或6-取代靛玉紅。6-取代靛玉 紅與鹽酸羥胺反應，得到目標化合物6-取代靛玉紅-3' -肟。
實驗驗證，本發明所涉及的化合物具有的抑制或殺滅腫瘤細胞的作用，可 以用於製備抗腫瘤的藥物，應用於治療各種腫瘤。本發明所涉及的化合物在治 療腫瘤藥物中的應用包括但不限於在治療宮頸癌、胃癌、肝癌或肺癌的藥物中 應用。
具體實施例方式
以下通過具體的實施例對本發明的技術方案作詳細說明。本實施例在本發 明技術方案的前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但 本發明的保護範圍不限於下述的實施例。
本發明實施例中表示的化合物均為本發明合成的新化合物。所有實施例中 表示的化合物的結構經多種方法鑑定，其中主要包括'H-麗R、 "C-羅R、 MS和IR。 一.化合物的製備
實施例化合物包括(1) R=0
Ri=CF" R2二H;
(2) R=0
R產F， R2=H;
(3) R=0
R屍Br， R2=H;
(4) R=0
R產亂，R2=H;
(5) R=0
R屍H， R2=CF3;
(6) R=N0H， R產H， R2=CF3。
實施例l. 4-三氟甲基靛玉紅(1)
在25mL二頸瓶中依次加入6mL無水乙醇、4-三氟甲基吲哚醌(108mg， 0.5mmol)、 3-吲哚乙酸酯(88mg， 0.5鵬o1)，加熱至70。C攪拌至固體完溶，加 入對甲基苯磺酸(20mg， 0. 12mmo1)，在65-7(TC反應3小時冷卻至室溫，過濾， 得到紫紅色固體粗產物。粗產物經矽膠柱層析分離2次，分別以乙酸乙酯-環己 烷(1 : 5)和二氯甲垸-甲醇(100 : 1)為洗脫劑，得紫紅色固體32mg，反應收 率19.4%,熔點〉300°C。 隨R (300Hz， DMSO，《卯m): 11.22 (1H， br， 1' -N-H)， 11. 02 (1H， s， 1-N-H)， 7. 54-7. 61 (2H， m， 4' -H， 6' -H)， 7. 33-7. 38 (2H， m， 6-H， 7' -H)， 7.19-7.21 (1H， d， ,7. 6Hz， 5-H)， 7. 00-7. 07 (2H， m， H-5' ， 7-H)。 "C-NMR (300Hz， DMSO， 5ppm): 187.1， 170.6， 152.4， 142.5， 140.2， 138.0， 130.3， 128.9， 125.5， 123.0， 120.5， 119.7， 119.1， 114.3， 113.0, 103.6， 29.8。 MS (MM-ES+APCI) /ff/z: 330.1。 實施例2. 4-氟靛玉紅(2)
由4-氟吲哚醌和3-吲哚乙酸酯製得。
方法同實施例1。
紫紅色固體；反應收率2. 6%;熔點>300°C 。 'H-NMR (300Hz， DMSO， 5卯m): 11.17(1H， s， 1' -N-H)， 11.01(1H， s， 1-N-H)， 7. 62-7. 65 (1H， d， ,7. 4Hz， 4' -H)， 7.55-7.61 (1H， t，力8眉z， 6' -H)， 7.37-7.40 (1H， d， ^8.0Hz， 7' -H)， 7. 22—7. 29(1H， m， 6—H)， 7. 02—7. 07(1H， t，力6. 9Hz， 5' -H)， 6. 78-6.87 (1H， m， 5-H)， 6.73-6.76 (1H， d， ,7. 7Hz， 7-H)。 WC-NMR (300Hz， DMSO，
6《ppm): 183.2， 171.0, 152.1， 141.9， 138.7， 137.4， 130.8， 130.3， 124.9， 122.4， 120.4， 119.8， 114.0， 109.6， 109.4， 106.3。 MS (ESI)歷/z: 282[M]+。 IR (cnf1， KBr): 3224， 2922， 2851， 1677， 1619， 1578， 1466， 1303， 1248， 1206， 1139， 988， 951， 765， 584。 實施例3. 4-溴靛玉紅(3)
由4-溴吲哚醌和3-吲哚乙酸酯製得。 方法同實施例1。
紫紅色固體；反應收率7.6%;熔點289_292°C。 'H-麗R (300Hz， DMS0， ^ppm): 11.24 (1H， s， 1' -N-H)， 10.95 (1H， s， 1-N-H)， 7.67-7.69 (1H， d， ^7. 7Hz， 4' -H)， 7.57-7,63 (1H， t， ,8.0Hz， 6' -H)， 7.37-7.40 (1H， d， ,8. 0Hz， 7' -H)， 7.20-7.23 (1H， dd，戶8. 2Hz， 5-H)， 7.11-7.16 (1H， t，戶7.7Hz， 6-H)， 7.05-7.10 (1H， t， ,7.4Hz， 5' -H)， 6.89-6.92 (1H， dd，力7.4Hz， 7-H)。 't-NMR (300Hz， DMS0，《卯m): 186.2， 170.4， 151.2， 142.9， 137.7， 136.8， 129.1， 125.9， 124.4， 122.1， 122.1， 119.4， 119.1， 113.5， 108.3， 104.7。 MS (ESI) /n/z: 342[M] + 。 IR (cm 1， KBr): 3293, 3222， 2922， 2851， 1671, 1610， 1583， 1462， 1383， 1293， 1199， 1137， 1000， 911， 757。
實施例4. 4-硝基靛玉紅(4)
由4-硝基吲哚醌和3-吲哚乙酸酯製得。 方法同實施例1。
藍黑色固體；反應收率8. 1%;熔點>300°C。 'H-NMR(300Hz， DMS0， ^卯m): 11.42 (1H， s， 1' -N-H)， 11.23 (1H， s， 1-N-H)， 7.57-7.62 (2H， m， 4' -H， 6' -H)， 7.51-7.54 (1H， dd'力6. 3Hz' 7' -H)' 7.36-7.40 (2H， m， 5-H， 6-H)， 7.19—7.21 (1H， dd， ,5.7Hz， 7-H)， 7.04—7.07 (1H， t， ,5.4Hz， 5' —H)。 13C-腿(300Hz， DMSO， 5ppm): 188.1， 170.4， 152.4， 145.6， 143.3， 139.9， 138.3， 128.9， 125.7， 123.3， 119.4， 117.2， 114.9， 114,8， 114.5， 101.5。 IR (cnT1， KBr): 3364， 3318， 2924， 2853， 1675， 1593， 1531， 1462， 1354，1289， 1193， 1142, 988， 953， 751。 實施例5. 6-三氟甲基靛玉紅(5)
在10mL 二頸瓶中依次加入3mL無水乙醇、6-三氟甲基吲哚醌(10mg，
0. 046ramo1)、 3-口引哚乙酸酉旨(10mg， 0.057腿o1)，加熱至70。C，攪拌直至固體 全溶。加入對甲基苯磺酸(微量)，回流3小時，冷卻至室溫，過濾。依次用無 水乙醇和水洗滌濾餅，得紫紅色固體14mg，反應收率91.2%，熔點〉30(TC。 !H-NMR (300Hz， DMSO，《卯m): 11.22(1H， s， 1' -N-H)， 11. 12 (1H， s， 1-N-H)， 8.85-8.87 (1H， d， ,6.甜z， 4-H)， 7.63-7.65 (1H， d， ,6.3Hz， 4' -H)， 7.55-7.59 (1H， t， ,8.2Hz， 6' -H)， 7.40-7.42 (1H， d， ,8.0Hz， 7' -H)， 7.34-7.36 (1H， dd， /=8. 2Hz， 5-H)， 7.07 (1H， s， 7-H)， 7.04-7.00 (1H， t， 力7. 2Hz， 5' -H)。
實施例6. 6-三氟甲基靛玉紅-3'-肟(6)
在10mL 二頸瓶中依次加入5mL吡啶、6-三氟甲基靛玉紅(50呢，0. 15mmo1)、 鹽酸羥胺(104mg， 1.5mmo1)。回流1小時，冷卻至室溫。減壓旋蒸除去吡啶， 依次用環己垸和水洗滌殘留物，得紅色固體26mg，反應收率50.2%，熔點 251-255°C。 'H-NMR (300Hz， DMS0， 5ppm): 13.78 (1H， s， 3' -N-0H)， 11.95
(1H， s， 1' —N-H)， 10,10 (1H， s， 1—N—H)， 8.74-8.76 (1H， d， ,8.4Hz， 4-H)， 8. 21-8. 23 (1H， d， /二7. 6Hz， 4' -H)， 7. 40-7. 47 (2H， m， 6' -H， 7' -H)， 7.22-7.24 (1H， d，戶8. 8Hz， 5-H)， 7.10 (1H， s， 7-H)， 7.05-7.09 (1H， t， 力7. 2Hz， 5' -H)。 't-NMR (300Hz， DMS0， Jppm): 171.4， 152.0， 148.2， 145.2， 145.2， 138.8， 132.9， 128.6， 123.2， 123.0， 117.6， 117.1， 112.8， 105.5， 97.8。 IR (cm—'， KBr): 3559， 3098， 2957， 2925， 2854， 1674， 1617， 1568， 1464， 1315， 1250， 1148， 1107， 1058， 1016， 754， 700， 633， 619。 二.抗腫瘤活性測試
1. 材料與儀器 (1)細胞株
人肺癌細胞(A549)、人胃癌細胞(SGC-7901)、人肝癌細胞(QGY)、人宮
8頸癌細胞(HELA)。
(2) 試劑
RPMI 1640培養液(吉諾生物醫藥技術有限公司)、DMEM (高糖)培養液(吉 諾生物醫藥技術有限公司)、優等胎牛血清(杭州四季青工程公司)、磺醯羅丹 明B (SRB， Sig腿公司)、Tris鹼(Sigma公司)、二甲基亞碸(DMS0，上海鈺森 生物技術有限公司)、青-鏈黴素溶液(100X) (biowest公司)、無鈣、鎂磷酸 緩衝液(PBS,吉諾生物醫藥技術有限公司)、0.25M胰酶溶液+0.02y。EDTA (吉 諾生物醫藥技術有限公司)、三氯乙酸(TCA，國藥集團化學試劑有限公司)。
(3) 對照品
靛玉紅，自製，經結構鑑定。
(4) 試劑的配製
SRB溶液以SRB、 1%冰醋酸配製成0.4% SRB溶液，避光，4。C保存； TCA溶液以TCA、雙重蒸餾水配製成5(T/。TCA溶液；
Tris鹼溶液以Tris鹼、雙重蒸餾水配製成10咖ol/L Tris鹼溶液，以NaOH 溶液調節pH二10.0;
被測樣品(實施例1一6所述化合物)、對照品用DMS0配製成2mg/mL的原始溶 液保存，實驗時用培養基配製成所需濃度。
(5) 主要儀器
C(U咅養箱(Thermo Forma Series 11)、淨化工作檯(上海新苗醫療器械制 造有限公司)、酶聯免疫監測儀(Thermo MK3)、倒置生物顯微鏡(Oly即us 1X71)、 電子天平(Mettler Toledo AL204)、離心機(飛鴿TDL80-23)。 2.方法
(1) 細胞培養
細胞接種於含有10%胎牛血清、1%青-鏈黴素溶液的培養基中，置於37。C、 5%0)2培養箱中，每2-3天傳代一次，實驗時取對數生長期細胞。
(2) SRB法測定IC印值 以配製好的新鮮培養基將對數生長期細胞調整為5X 1Q4個/mL細胞懸液，接種到96孔板中，每孔190nL，設藥物處理組、平行對照組、空白對照組。在 37°C、 5%0)2培養箱中培養12小時後，加入不同濃度的10uL化合物，實驗設 置雙復孔。平行對照組培養30分鐘、藥物處理組培養48小時後，加入50。/。TCA 溶液50 u L固定，靜置5分鐘後，將96孔板移置4'C放置30分鐘。棄去固定液， 水洗5次，空氣中乾燥。每孔加入0. 4%SRB溶液100 u L，室溫放置1小時。棄 去SRB溶液，1%冰醋酸洗5次，空氣中乾燥。每孔加入200yL10mmol/L非緩衝 tris鹼溶液(pH=10.0)，在570nm波長下用酶聯免疫監測儀測定光密度(OD) 值，運用非線性回歸分析計算ICs。值。
表-1新型靛玉紅化合物的抗腫瘤活性
化合物序號IC50 (nM)QGYA549HELASGC-7901
靛玉紅50. 0136.22011. 1224. 9
13. 722. 041. 631. 0
22. 553.4225.032. 0
317. 069. 8321. 0219. 2
48. 517. 123. 123. 0
522. 959. 748. 0117. 1
68. 341. 6114. 715. 5
本發明所涉及的新型靛玉紅類化合物可以抑制或殺滅腫瘤細胞，具有抗腫 瘤活性，可以在治療腫瘤的藥物中應用。
10
權利要求
1、一類靛玉紅類化合物，其特徵在於具備如下通式中的結構通式中的取代基為(1)R＝O，R1＝CF3，R2＝H；或(2)R＝O，R1＝F，R2＝H；或(3)R＝O，R1＝Br，R2＝H；或(4)R＝O，R1＝NO2，R2＝H；或(5)R＝O，R1＝H，R2＝CF3；或(6)R＝NOH，R1＝H，R2＝CF3。
2、 權利要求l所述的化合物的應用，其特徵在於所述的化合物用作製備抗 腫瘤的藥物。
3、 根據權利要求2所述的化合物的應用，其特徵在於所述的化合物用作制 備治療宮頸癌、胃癌、肝癌或肺癌的抗腫瘤藥物。
全文摘要
本發明涉及一類用於抗腫瘤藥物的靛玉紅類化合物，在具有抗腫瘤作用的化合物靛玉紅母核結構基礎上，通過對合成方法的改進，在靛玉紅的4位或6位引入取代基，合成一系列具有抗腫瘤活性的全新的4-取代靛玉紅衍生物及6-取代靛玉紅衍生物，可以在治療腫瘤的藥物中應用。其結構通式如上。
文檔編號C07D209/00GK101492410SQ20091004705
公開日2009年7月29日 申請日期2009年3月5日 優先權日2009年3月5日
發明者劉增路, 張愛英, 毛振民 申請人:上海交通大學