用於治療豬致病性大腸桿菌病的飼料及中藥組合物的製作方法

2023-05-18 10:25:16 2

用於治療豬致病性大腸桿菌病的飼料及中藥組合物的製作方法
【專利摘要】本發明提供了一種用於治療豬致病性大腸桿菌病的中藥組合物，其原料藥包括穿心蓮、黃芩、白芍、側柏葉、牡荊葉、白頭翁、黨參、柴胡、茜草、烏梅、鵝不食草、山楂、陳皮、黃精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙參、芡實、延胡索、銀杏葉、瞿麥和萊菔子。本發明提供的中藥組合物其抗菌、抗病毒、副作用小、無殘留、無耐藥性，是抗生素的良好替代品，在治療豬致病性大腸桿菌病方面具有廣闊的發展前景。
【專利說明】用於治療豬致病性大腸桿菌病的飼料及中藥組合物
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及中醫藥【技術領域】，尤其涉及一種用於治療豬致病性大腸桿菌病的飼料及中藥組合物。
[0002]
【背景技術】
[0003]豬致病性大腸桿菌病是由豬致病性大腸桿菌病引起的一種急性傳染病，臨床主要引起豬腹瀉，主要表現為腸炎、腸毒血症等多種臨床症狀，本病在世界各地均有發生，在我國特別是養豬業發達的廣東地區造成了新生仔豬的大批死亡或生長發育不良，已經成為發展養豬業的嚴重障礙之一，也是造成養豬業者經濟損失最大的疾病之一。它一年四季均可發生，無季節性，寒冬和炎夏潮溼多雨季節發病多。豬集約化飼養發病嚴重，分散飼養的豬發病少。豬致病性大腸桿菌病呈散發或地方流行性，發病率、致死率均很高。
[0004]該病的防治主要依靠抗生素等化學藥物。然而，抗生素等藥物的大量使用引起藥物殘留和細菌、病毒產生耐藥性，進一步加大疾病控制的難度。由於抗菌藥的長期使用，還會使病原菌產生耐藥性。此外，長期的用藥所造成的藥物殘留給人類健康也帶來了危害。
[0005]中獸醫學有著悠久的歷史和豐富的應用經驗，在抗生素使用以前，對保障家畜健康起著重要作用。隨著畜牧業規模化、集約化的發展，以及抗生素長期濫用而造成的病原菌抗藥性日趨增強和藥物殘留問題顯現時，中藥以抗菌、抗病毒、副作用小、無殘留、無耐藥性等特點，已經成為替代抗生素解決耐藥性和藥殘的重要方案。
[0006]本發明提供一種用於治療豬致病性大腸桿菌病的中藥組合物，其抗菌、抗病毒、副作用小、無殘留、無耐藥性，是抗生素的良好替代品，具有廣闊的發展前景。
[0007]

【發明內容】

[0008]本發明所要解決的技術問題是提供一種用於治療豬致病性大腸桿菌病的中藥組合物，其抗菌、抗病毒、副作用小、無殘留、無耐藥性，是抗生素的良好替代品，具有廣闊的發展前景。
[0009]為解決上述技術問題，本發明提供了一種用於治療豬致病性大腸桿菌病的飼料，原料包括玉米、麩皮、花生柏、菜柏、魚粉、磷酸氫鈣、食鹽、蛋氨酸、蘇氨酸、維生素和用於治療豬致病性大腸桿菌病中藥組合物添加劑。
[0010]其中，所述飼料中各原料的重量分別為玉米7kg?9kg、麩皮2kg?3kg、花生柏
0.5kg ?0.7kg、菜柏 0.8kg ?1.2kg、魚粉 0.5kg ?0.7kg、憐酸氧隹丐 0.05kg ?0.15kg、食鹽 0.05kg ?0.15kg、蛋氨酸 0.0lkg ?0.03kg、蘇氨酸 0.0lkg ?0.03kg、維生素 0.1kg ?
0.2kg、中藥組合物添加劑Ikg?1.5kg。
[0011]其中，所述飼料中各原料的重量分別為玉米8kg、麩皮2.5kg、花生柏0.6kg、菜柏1kg、魚粉0.6kg、磷酸氫I丐0.1kg、食鹽0.1kg、蛋氨酸0.02kg、蘇氨酸0.02kg、維生素0.15kg、中藥組合物添加劑1.2kg。
[0012]其中，所述中藥組合物添加劑中的原料藥包括穿心蓮、黃芩、白芍、側柏葉、牡荊葉、白頭翁、黨參、柴胡、茜草、烏梅、鵝不食草、山楂、陳皮、黃精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙參、芡實、延胡索、銀杏葉、瞿麥和萊菔子。
[0013]其中，所述中藥組合物添加劑中各原料藥的重量分別為穿心蓮20g?30g、黃芩55g?65g、白苟25g?35g、側柏葉25g?35g、牡荊葉20g?30g、白頭翁35g?45g、黨參30g?40g、柴胡20g?30g、菌草30g?40g、烏梅25g?35g、鵝不食草20g?30g、山楂25g?35g、陳皮15g?25g、黃精35g?45g、山柰20g?30g、忍冬藤30g?40g、高良姜20g?30g、南沙參25g?35g、芡實20g?30g、延胡索15g?25g、銀杏葉30g?40g、瞿麥25g?35g和萊菔子25g?35g。
[0014]本發明還提供了一種用於治療豬致病性大腸桿菌病的中藥組合物，其原料藥包括穿心蓮、黃芩、白芍、側柏葉、牡荊葉、白頭翁、黨參、柴胡、茜草、烏梅、鵝不食草、山楂、陳皮、黃精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙參、芡實、延胡索、銀杏葉、瞿麥和萊菔子。
[0015]其中，所述中藥組合物中各原料藥的重量分別為穿心蓮20g?30g、黃芩55g?65g、白芍25g?35g、側柏葉25g?35g、牡荊葉20g?30g、白頭翁35g?45g、黨參30g?40g、柴胡20g?30g、菌草30g?40g、烏梅25g?35g、鵝不食草20g?30g、山楂25g?35g、陳皮15g?25g、黃精35g?45g、山柰20g?30g、忍冬藤30g?40g、高良姜20g?30g、南沙參25g?35g、芡實20g?30g、延胡索15g?25g、銀杏葉30g?40g、瞿麥25g?35g和萊菔子25g?35g。
[0016]所述中藥組合物中各原料進一步優選為穿心蓮25g、黃芩60g、白芍30g、側柏葉30g、牡荊葉25g、白頭翁40g、黨參35g、柴胡25g、茜草35g、烏梅30g、鵝不食草25g、山楂30g、陳皮20g、黃精40g、山柰25g、忍冬藤35g、高良姜25g、南沙參30g、芡實25g、延胡索20g、銀杏葉35g、瞿麥30g和萊菔子30g。
[0017]本發明還提供了上述中藥組合物的製備方法，具體為:
將各原料藥組分按重量混合，獲得混合物，加醇濃度為50%?70%的乙醇溶液進行加熱回流提取2次，每次回流提取2h?3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量為3L?5L，獲得的提取液合併並過濾，靜置24h，回收乙醇並濃縮，濃縮成稠膏，乾燥，粉碎成細粉，獲得中藥組合物。
[0018]本發明還提供了上述飼料的製備方法，其包括:
第一步，將所述中藥組合物添加劑中的各原料藥組分按重量混合，獲得混合物，加醇濃度為50%?70%的乙醇溶液進行加熱回流提取2次，每次回流提取2h?3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量為3L?5L，獲得的提取液合併並過濾，靜置24h，回收乙醇並濃縮，濃縮成稠膏，乾燥，粉碎成細粉，獲得所述中藥組合物添加劑；
第二步，取所述飼料中除所述中藥組合物添加劑的各原料先進行粉碎，然後將粉碎後的原料放入混合機進行混合，再加入第一步製備的中藥組合物添加劑進一步混合，混合後的物料進入調製器，調製溫度為70°C，調製時間10秒，經調製後，送入熟化罐進行熟化，熟化時間為5分鐘，熟化溫度70°C，最後進入制粒器進行制粒，得到成品飼料。
[0019]本發明的有益效果:
本發明提供的中藥組合物其抗菌、抗病毒、副作用小、無殘留、無耐藥性，是抗生素的良好替代品，在治療豬致病性大腸桿菌病方面具有廣闊的發展前景。
[0020]
【具體實施方式】
[0021]本發明以清熱解毒、利水消腫、澀腸止瀉為治療原則，提供一種用於治療豬致病性大腸桿菌病的中藥組合物，其原料藥包括穿心蓮、黃芩、白芍、側柏葉、牡荊葉、白頭翁、黨參、柴胡、茜草、烏梅、鵝不食草、山楂、陳皮、黃精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙參、芡實、延胡索、銀杏葉、瞿麥和萊菔子。
[0022]進一步,所述中藥組合物僅由上述原料藥構成。
[0023]所述中藥組合物中各原料藥的重量分別為穿心蓮20g?30g、黃芩55g?65g、白芍25g?35g、側柏葉25g?35g、牡荊葉20g?30g、白頭翁35g?45g、黨參30g?40g、柴胡20g?30g、菌草30g?40g、烏梅25g?35g、鵝不食草20g?30g、山楂25g?35g、陳皮15g?25g、黃精35g?45g、山柰20g?30g、忍冬藤30g?40g、高良姜20g?30g、南沙參25g?35g、突實20g?30g、延胡索15g?25g、銀杏葉30g?40g、瞿麥25g?35g和萊菔子 25g ?35g。
[0024]所述中藥組合物中各原料進一步優選為穿心蓮25g、黃芩60g、白芍30g、側柏葉30g、牡荊葉25g、白頭翁40g、黨參35g、柴胡25g、茜草35g、烏梅30g、鵝不食草25g、山楂30g、陳皮20g、黃精40g、山柰25g、忍冬藤35g、高良姜25g、南沙參30g、芡實25g、延胡索20g、銀杏葉35g、瞿麥30g和萊菔子30g。
[0025]本發明還提供了上述中藥組合物的製備方法，具體為:
將各原料藥組分按重量混合，獲得混合物，加醇濃度為50%?70%的乙醇溶液進行加熱回流提取2次，每次回流提取2h?3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量為3L?5L，獲得的提取液合併並過濾，靜置24h，回收乙醇並濃縮，濃縮成稠膏，乾燥，粉碎成細粉，獲得中藥組合物。
[0026]所述中藥組合物中各原料藥的藥理如下:
穿心蓮:味苦，性寒，歸心、肺、大腸、膀胱經，具有清熱解毒，涼血，消腫，燥溼的功效，主治感冒發熱，咽喉腫痛，口舌生瘡，頓咳勞嗽，洩瀉痢疾，熱淋澀痛，癰腫瘡瘍，毒蛇咬傷等證。
[0027]黃芩:味苦、性寒，入心、肺、胃、膽、大腸經，有清熱燥溼，瀉火解毒，安胎，止血的作用，主要用於溼熱所致之腹瀉、痢疾、黃疸、熱淋；肺熱咳嗽，口渴咽痛，還可用於胎熱不安，熱毒火邪侵淫皮膚之瘡癰毒腫之證。
[0028]白芍:味苦、酸，性涼，入肝、脾經，具有養血柔肝，緩中止痛，斂陰收汗的功效，主治胸腹脅肋疼痛，瀉痢腹痛，自汗盜汗，陰虛發熱，月經不調，崩漏，帶下等證。
[0029]側柏葉:味苦、澀，性寒，入心、肝、大腸經，具有涼血止血，祛風溼，散腫毒的功效，主治吐血、衄血、尿血、血痢、腸風、崩漏，風溼痺痛，細菌性痢疾，高血壓，咳嗽，丹毒，痄腮，燙傷等證。
[0030]牡荊葉:味辛；苦；性平，歸肺經，具有解表化溼，祛痰平喘；解毒，祛風解表，除溼,殺蟲,止痛的功效,主治傷風感冒，咳嗽哮喘；胃痛；腹痛；暑溼瀉痢；腳氣腫脹；風疹瘙癢；腳癬；乳癰腫痛；蛇蟲咬傷等證。[0031]白頭翁:味苦，性寒，入胃、大腸經，有清熱解毒、涼血止痢的作用，主要用於腸胃有溼熱積滯之發熱腹痛，下痢膿血，裡急後重等證。
[0032]黨參:味甘，性平，入肺、脾經，有補氣益脾，養血生津的作用，主要用於脾肺氣虛或氣血兩虛之倦怠乏力、氣短，咳嗽自汗等證。
[0033]柴胡:味苦，性微寒，歸肝、膽經，具有疏散退熱，昇陽舒肝的功效，主治感冒發熱、寒熱往來、瘧疾，肝鬱氣滯，胸肋脹痛，脫肛，子宮脫落，月經不調等證。
[0034]茜草:性寒，味苦，歸肝經,功效:涼血止血；活血化瘀,主治血熱咯血、吐血、衄血、尿血、便血、崩漏、經閉、產後瘀阻腹痛、跌打損傷、風溼痺痛、黃疸、瘡癰、痔腫等證。
[0035]烏梅:味苦、酸、潘，性溫，入肝、肺、脾、大腸經，具有斂肺，澀腸，止血，生津的作用，用於治療久痢不止，溼熱瀉痢，便血、尿血、雪崩等證。
[0036]鵝不食草:味辛，性溫，入肺、肝經，具有祛風寒，通鼻鸞，止咳祛痰，散瘀消腫的作用，用於風寒表證，鼻塞流涕及鼻淵，咳嗽痰多，百日咳，瘡癰腫痛等證。
[0037]山楂:味酸、甘，性微溫，歸脾、胃、肝經，用於消食健胃，行氣散瘀，主要用來治療食積不化，洩瀉，痢疾，山楂為治療消化不良之常用品，山楂能增加胃消化酶的分泌，促進消化；對痢疾桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌等具有明顯的抑制作用。
[0038]陳皮:性溫，味辛、苦；歸脾、肺經，辛散通溫，氣味芳香，長於理氣，能入脾肺，故既能行散肺氣壅遏，又能行氣寬中，用於肺氣擁滯、胸膈痞滿及脾胃氣滯、脘腹脹滿等證。
[0039]黃精:味甘，性平，入肺、脾、腎經，具有養氣養陰，健脾潤肺，益腎填精的功效，用於脾胃氣陰虧虛，食少無力，陰虛肺燥，乾咳少痰，陰虛內熱之消渴，腎虛精虧、陽痿遺精、頭暈耳鳴、目昏眼花等證。
[0040]山柰:味辛、性溫，歸胃經，具有行氣溫中，消食止痛的功效，主治胸膈脹滿，脘腹冷痛，飲食不消等證。
[0041]忍冬藤:味甘，性寒，歸肺、胃經，具有清熱解毒，疏風通絡的功效，主治溫病發熱，熱毒血痢，癰腫瘡瘍，風溼熱痺，關節紅腫熱痛等證。
[0042]高良姜:味辛，性熱，歸脾、胃經，具有溫胃散寒，消食止痛的功效。用於脘腹冷痛，胃寒嘔吐，噯氣吞酸等證。
[0043]南沙參:味甘、微苦，性微寒，入肺、胃經，有潤肺止咳，養胃生津的作用，主要用於陰虛肺燥、乾咳少痰、勞嗽痰血，胃陰不足、口感咽燥、大便秘結、舌紅少苔等證。
[0044]芡實:味甘，澀，性平。歸脾、腎經。具有益腎固精，補脾止瀉，祛溼止帶的功能，主治夢遺滑精，脾虛洩瀉，脾虛白濁，帶下等證。
[0045]延胡索:味苦、辛，性溫，歸肝、心、胃經，具有善行走散，可升可降，具有活血散瘀，行氣止痛的功效，主治胸痺心痛，脅肋、脘腹諸痛，頭痛、腰痛、疝氣痛、筋骨痛、痛經、經閉，產後瘀腹痛，跌打損傷等證。
[0046]銀杏葉:味甘、苦、澀，性平，入心、肺經，具有斂肺平喘，活血養心、澀腸止瀉的功效，用於肺虛咳喘，胸悶心痛，頭暈頭痛，洩瀉，痢疾等證。
[0047]瞿麥:味苦，性寒，歸心、小腸經，具有利尿通淋，破血通經的功效，用於熱淋，血淋，石淋，小便不通，淋浙澀痛，月經閉止等證。
[0048]萊菔子:性平，味辛、甘，歸肺、脾、胃經，消具有食除脹，降氣化痰的功效，主治飲食停滯、脘腹脹痛、大便秘結、積滯瀉痢、痰壅喘咳等證。[0049]本發明還提供了一種治療豬致病性大腸桿菌病的飼料，原料包括玉米、麩皮、花生柏、菜柏、魚粉、磷酸氫鈣、食鹽、蛋氨酸、蘇氨酸、維生素和上述的中藥組合物添加劑。
[0050]所述飼料中各原料的重量分別為玉米7kg?9kg、麩皮2kg?3kg、花生柏
0.5kg ?0.7kg、菜柏 0.8kg ?1.2kg、魚粉 0.5kg ?0.7kg、憐酸氧隹丐 0.05kg ?0.15kg、食鹽 0.05kg ?0.15kg、蛋氨酸 0.0lkg ?0.03kg、蘇氨酸 0.0lkg ?0.03kg、維生素 0.1kg ?
0.2kg、中藥組合物添加劑Ikg?1.5kg。
[0051]進一步，所述飼料中各原料的重量分別為玉米8kg、麩皮2.5kg、花生柏0.6kg、菜柏1kg、魚粉0.6kg、磷酸氫I丐0.1kg、食鹽0.1kg、蛋氨酸0.02kg、蘇氨酸0.02kg、維生素
0.15kg、中藥組合物添加劑1.2kg。
[0052]所述維生素可以為維生素A、維生素D3、維生素E、維生素K3、維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12、煙酸、泛酸、葉酸等多種維生素的混合，也可以為維生素預混料，如優維素(北京優利保生物技術有限責任公司提供)。
[0053]本發明還提供了上述飼料的製備方法，具體為取除所述中藥組合物添加劑以外的上述各原料先進行粉碎，然後將粉碎後的原料放入混合機進行混合，加入所述中藥組合物添加劑，混合後的物料進入調製器，調製溫度為70°C，調製時間10秒，經調製後，送入熟化罐進行熟化，熟化時間為5分鐘，熟化溫度70°C，最後進入制粒器進行制粒，得到成品飼料。
[0054]以下採用實施例來詳細說明本發明的實施方式，藉此對本發明如何應用技術手段來解決技術問題，並達成技術效果的實現過程能充分理解並據以實施。
[0055]實施例1中藥組合物I
將穿心蓮25g、黃芩60g、白芍30g、側柏葉30g、牡荊葉25g、白頭翁40g、黨參35g、柴胡25g、茜草35g、烏梅30g、鵝不食草25g、山楂30g、陳皮20g、黃精40g、山柰25g、忍冬藤35g、高良姜25g、南沙參30g、芡實25g、延胡索20g、銀杏葉35g、瞿麥30g和萊菔子30g混合，獲得混合物，加醇濃度為60%的乙醇溶液進行加熱回流提取2次，每次回流提取3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量為4L，獲得的提取液合併並過濾，靜置24h，回收乙醇並濃縮，濃縮成稠膏，乾燥，粉碎成細粉，獲得中藥組合物I。
[0056]實施例2中藥組合物2
將穿心蓮20g、黃芩55g、白芍25g、側柏葉25g、牡荊葉20g、白頭翁35g、黨參30g、柴胡20g、茜草30g、烏梅25g、鵝不食草20g、山楂25g、陳皮15g、黃精35g、山柰20g、忍冬藤30g、高良姜20g、南沙參25g、芡實20g、延胡索15g、銀杏葉30g、瞿麥25g和萊菔子25g混合，獲得混合物，加醇濃度為60%的乙醇溶液進行加熱回流提取2次，每次回流提取3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量為4L，獲得的提取液合併並過濾，靜置24h，回收乙醇並濃縮，濃縮成稠膏，乾燥，粉碎成細粉，獲得中藥組合物2。
[0057]實施例3中藥組合物3
將穿心蓮30g、黃芩65g、白芍35g、側柏葉35g、牡荊葉30g、白頭翁45g、黨參40g、柴胡30g、茜草40g、烏梅35g、鵝不食草30g、山楂35g、陳皮25g、黃精45g、山柰30g、忍冬藤40g、高良姜30g、南沙參35g、芡實30g、延胡索25g、銀杏葉40g、瞿麥35g和萊菔子35g混合，獲得混合物，加醇濃度為60%的乙醇溶液進行加熱回流提取2次，每次回流提取3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量為4L，獲得的提取液合併並過濾，靜置24h，回收乙醇並濃縮，濃縮成稠膏，乾燥，粉碎成細粉，獲得中藥組合物3。[0058]實施例4毒理學試驗 急性毒性試驗
性試驗觀察，因無法測出LD5tl，故進行了最大給藥量的測定。將實施例1製備的中藥組合物溶解在蒸餾水中，配置成溶液灌胃小鼠，結果顯示，以藥物最大給藥濃度11.1lg生藥/ml,最大給藥體積40ml/kg於24小時內給小鼠灌胃給藥兩次,小鼠最大給藥量為888.8g生藥/kg，動物未出現不良反應及死亡。解剖觀察各臟器未見異常。
[0059]長期毒性試驗
本試驗應用SD大鼠80隻，將實施例1製備的中藥組合物溶解在蒸餾水中，配置成溶液灌胃，設對照組及14.5g、29g、58g生藥/kg劑量組，連續灌胃給藥4周，觀察本發明的中藥組合物對動物各項指標的影響。試驗結果表明，連續給藥4周，本發明的中藥組合物對大鼠的體重、攝食量、外周血象、凝血時間、心電圖、臟器指數等均無明顯影響；血液生化十二項指標測定結果，給藥4周低劑量組BiLi值高於對照組(P < 0.05)，可能與其中三個血清樣本溶血有關；低劑量組、中劑量組TP值高於對照組(P < 0.05)，但均在正常生理範圍之內，其它指標與對照組比較無明顯差異。恢復期各給藥組各項指標測定值與對照組比較均無明顯差異。各組各臟器大體觀察未見異常。
[0060]綜上所述，該藥的小鼠急性毒性試驗未見毒性反應，大鼠長期毒性試驗亦未見明顯毒性反應。
[0061]實施例5飼料
取玉米8kg、麩皮2.5kg、花生柏0.6kg、菜柏1kg、魚粉0.6kg、磷酸氫隹丐0.1kg、食鹽
0.1kg、蛋氨酸0.02kg、蘇氨酸0.02kg、維生素0.15kg先進行粉碎,然後將粉碎後的原料放入混合機進行混合，加入實施例1製備的中藥組合物添加劑1.2kg進一步混合，混合後的物料進入調製器，調製溫度為70°C，調製時間10秒，經調製後，送入熟化罐進行熟化，熟化時間為5分鐘，熟化溫度70°C，最後進入制粒器進行制粒，得到成品飼料。
[0062]實施例6體外抑菌試驗 培養基
普通營養肉湯、普通營養瓊脂、麥康凱營養瓊脂(由北京奧博星生物技術責任有限公司生產)。
[0063]受試菌株
豬源致病性大腸桿菌02(|、O48和O161來自山東農業大學實驗室，從臨床患病仔豬屍體中分離經中監所鑑定並保存的優勢菌株各I株。
[0064]主要儀器設備
隔水式恆溫培養箱、光學顯微鏡、超低溫冰箱、數顯恆溫水浴鍋、電子天平。
[0065]培養基製備
普通營養肉湯、普通營養瓊脂培養基、麥康凱瓊脂培養基均按廠家說明書配製，4°C冰箱保存待用。
[0066]致病性大腸桿菌的培養
將菌種接種於麥康凱瓊脂培養基上，37°C培養24h，挑取典型菌落接種於普通肉湯培養基中，置37°C培養24h後，取各菌液0.5 mL接種於普通營養瓊脂平板上培養8?12h後，用L棒刮取菌苔，用滅菌生理鹽水稀釋至含菌量5X IO4?5X IO5 CFU/mL備用。[0067]抑菌試驗
藥液
將實施例1製備的中藥組合物溶解在蒸餾水中，獲得生藥濃度為lg/ml的藥液。
[0068]抑菌試驗
最小抑菌濃度(MIC)測定
取滅菌試管10支,依次編號,每管先加入滅菌肉湯培養基1.0 mL,然後於第一管中加入製備好的中藥水提液1.0 mL，混勻後取出1.0 mL放入第二管，依此類推至第9管，棄掉ImL,第10管不加藥物，作為陽性對照，重複製備三套管，取一套重複管不加細菌稀釋液用於陰性對照管，另二套重複管一套備用一套做重複實驗用。取製備好的細菌稀釋液0.1 mL分別加入上述1至10管中混勻，使第1管至第9管藥物濃度(mg/mL)分別為500、250、125、62.50,31.25、15.60,7.80,3.90、1.95。置各管於恆溫培養箱中37°C培養24h，觀察結果。陽性對照細菌生長，呈均勻渾濁狀，陰性對照管無細菌生長呈澄清、透明狀時，試驗成立，觀察其它各管情況。
[0069]抑菌試驗結果的判斷
用重複對照管與試驗管和重複實驗管的相應各管進行比較，如2組試管內液體全部澄清、透明，則判定無菌生長。如1組澄清另1組渾濁，則用渾濁管中的液體移取0.1 mL進行傳代接種到相應管的重複備用管中，如在第二代管內液體澄清、透明，則判定無菌生長，如渾濁則判定有菌生長。以無菌生長的最低稀釋度即為最小抑菌濃度。MIC〈7.82 mg/mL，為高度敏感，介於7.82mg/mL~250 mg/mL,為中度敏感，>250 mg/mL,為不敏感。
[0070]最小殺菌濃度(MBC)測定
將上述MIC測定中各管培養物分別畫線接種於普通營養瓊脂平板，37°C恆溫培養24~48h觀察結果。菌落數少於3個視為無菌生長，以無細菌生長的藥物最低濃度，作為該種藥物對該菌的最小殺菌濃度(MBC)。
[0071]抑菌圈直徑測定
用滅菌棉籤拭子蘸取菌液，在普通瓊脂平板表面均勻塗片接種。用孔徑6 mm滅菌金屬打孔器打孔，每孔加入藥液0.05 mL左右以加滿而不溢出孔外為宜。做5個重複板，結果求平均值。置於37°C培養24h，然後用遊標卡尺測量抑菌圈直徑，判斷藥液對大腸桿菌的抑菌效果，抑菌圈直徑〈8 mm，為不敏感，抑菌圈直徑8~13 mm之間，為低度敏感，抑菌圈直徑在13~19 mm之間，為中度敏感，抑菌圈直徑在>19 mm，為高度敏感。
[0072]結果，見表1和表2。
[0073]表1中藥組合物對豬源大腸桿菌的MIC和MBC (mg/mL)
【權利要求】
1.一種用於治療豬致病性大腸桿菌病的飼料，其特徵在於:其原料包括玉米、麩皮、花生柏、菜柏、魚粉、磷酸氫鈣、食鹽、蛋氨酸、蘇氨酸、維生素和用於治療豬致病性大腸桿菌病中藥組合物添加劑。
2.如權利要求1所述的飼料，其特徵在於:所述飼料中各原料的重量分別為玉米7kg~9kg、麩皮2kg~3kg、花生柏0.5kg~0.7kg、菜柏0.8kg~1.2kg、魚粉0.5kg~0.7kg、磷酸氫鈣 0.05kg ~0.15kg、食鹽 0.05kg ~0.15kg、蛋氨酸 0.01kg ~0.03kg、蘇氨酸0.01kg~0.03kg、維生素0.1kg~0.2kg、中藥組合物添加劑Ikg~1.5kg。
3.如權利要求1或2所述的飼料，其特徵在於:所述飼料中各原料的重量分別為玉米8kg、麩皮2.5kg、花生柏0.6kg、菜柏1kg、魚粉0.6kg、磷酸氫鈣0.1kg、食鹽0.1kg、蛋氨酸0.02kg、蘇氨酸0.02kg、維生素0.15kg、中藥組合物添加劑1.2kg。
4.如權利要求1至3所述的飼料，其特徵在於:所述中藥組合物添加劑中的原料藥包括穿心蓮、黃芩、白芍、側柏葉、牡荊葉、白頭翁、黨參、柴胡、茜草、烏梅、鵝不食草、山楂、陳皮、黃精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙參、芡實、延胡索、銀杏葉、瞿麥和萊菔子。
5.如權利要求1至4所述的飼料，其特徵在於:所述中藥組合物添加劑中各原料藥的重量分別為穿心蓮20g~30g、黃芩55g~65g、白芍25g~35g、側柏葉25g~35g、牡荊葉20g~30g、白頭翁35g~45g、黨參30g~40g、柴胡20g~30g、菌草30g~40g、烏梅25g~35g、鵝不食草20g~30g、山楂25g~35g、陳皮15g~25g、黃精35g~45g、山柰20g~30g、忍冬藤30g~40g、高良姜20g~30g、南沙參25g~35g、芡實20g~30g、延胡索15g~25g、銀杏葉30g~40g、瞿麥25g~35g和萊菔子25g~35g。
6.一種 用於治療豬致病性大腸桿菌病的中藥組合物，其特徵在於:其原料藥包括穿心蓮、黃芩、白芍、側柏葉、牡荊葉、白頭翁、黨參、柴胡、茜草、烏梅、鵝不食草、山楂、陳皮、黃精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙參、芡實、延胡索、銀杏葉、瞿麥和萊菔子。
7.如權利要求6所述的中藥組合物，其特徵在於:各原料藥的重量分別為穿心蓮20g~30g、黃芩55g~65g、白芍25g~35g、側柏葉25g~35g、牡荊葉20g~30g、白頭翁35g~45g、黨參30g~40g、柴胡20g~30g、菌草30g~40g、烏梅25g~35g、鵝不食草20g~30g、山楂25g~35g、陳皮15g~25g、黃精35g~45g、山柰20g~30g、忍冬藤30g~40g、高良姜20g~30g、南沙參25g~35g、芡實20g~30g、延胡索15g~25g、銀杏葉30g~40g、瞿麥25g~35g和萊菔子25g~35g。
8.如權利要求6或7所述的中藥組合物，其特徵在於:各原料藥的重量分別為穿心蓮25g、黃芩60g、白芍30g、側柏葉30g、牡荊葉25g、白頭翁40g、黨參35g、柴胡25g、茜草35g、烏梅30g、鵝不食草25g、山楂30g、陳皮20g、黃精40g、山柰25g、忍冬藤35g、高良姜25g、南沙參30g、芡實25g、延胡索20g、銀杏葉35g、瞿麥30g和萊菔子30g。
9.權利要求6至8所述中藥組合物的製備方法，其特徵在於: 將各原料藥組分按重量混合，獲得混合物，加醇濃度為50%~70%的乙醇溶液進行加熱回流提取2次，每次回流提取2h~3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量為3L~5L，獲得的提取液合併並過濾，靜置24h，回收乙醇並濃縮，濃縮成稠膏，乾燥，粉碎成細粉，獲得中藥組合物。
10.權利要求1至5所述飼料的製備方法，其特徵在於，包括: 第一步，將所述中藥組合物添加劑中的各原料藥組分按重量混合，獲得混合物，加醇濃度為50%~70%的乙醇溶液進行加熱回流提取2次，每次回流提取2h~3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量為3L~5L，獲得的提取液合併並過濾，靜置24h，回收乙醇並濃縮，濃縮成稠膏，乾燥，粉碎成細粉，獲得所述中藥組合物添加劑； 第二步，取所述飼料中除所述中藥組合物添加劑的各原料先進行粉碎，然後將粉碎後的原料放入混合機進行混合，再加入第一步製備的中藥組合物添加劑進一步混合，混合後的物料進入調製器，調製溫度為70°C，調製時間10秒，經調製後，送入熟化罐進行熟化，熟化時間 為5分鐘，熟化溫度70°C，最後進入制粒器進行制粒，得到成品飼料。
【文檔編號】A23K1/10GK103815134SQ201410078818
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2014年3月6日 優先權日:2014年3月6日
【發明者】郝智慧 申請人:郝智慧