用於治療心血管疾病的作為可溶性鳥苷酸環化酶刺激物的咪唑並[1,2‑a]吡啶類的製作方法

2023-05-01 16:16:11 2

哺乳動物細胞中最重要的細胞傳輸系統之一是環單磷酸鳥苷(cGMP)。其與從內皮中釋放並傳遞激素和機械信號的一氧化氮(NO)一起形成NO/cGMP系統。鳥苷酸環化酶催化三磷酸鳥苷(GTP)而生物合成cGMP。迄今已知的這一家族的代表可以根據結構特徵或根據配體類型分成兩類：可被鈉尿肽刺激的顆粒狀鳥苷酸環化酶和可被NO刺激的可溶性鳥苷酸環化酶。可溶性鳥苷酸環化酶由兩個亞單元組成且很有可能每個異二聚體含有一個血紅素，其是調節中心的一部分。這對於活化機理是非常重要的。NO能夠結合至血紅素的鐵原子並因此顯著增加酶的活性。相比之下，不含血紅素的製劑不能由NO激發。一氧化碳(CO)也能結合到血紅素的中心鐵原子，但由CO帶來的激發作用遠小於NO。

通過形成cGMP以及由此產生磷酸二酯酶、離子通道和蛋白激酶的調節，鳥苷酸環化酶在多種生理學過程中起重要作用，特別是在平滑肌細胞的舒張和增殖、血小板聚集和血小板粘附、神經元的信號傳送中以及在基於上述過程的中斷而引起的疾病中起重要作用。在病理生理學狀況下，NO/cGMP系統可被抑制，這可導致例如高血壓、血小板活化、增加的細胞增殖、內皮功能紊亂、動脈粥樣硬化、心絞痛、心力衰竭、心肌梗死、形成血栓、中風和性功能障礙。

由於預期的高效率和低水平的副作用，因此通過以生物體內cGMP信號通路的影響為靶標的用於這些疾病的可能的NO非依賴性治療是一種有前景的方法。

迄今，為了治療性刺激可溶性鳥苷酸環化酶，僅使用其作用基於NO的化合物如有機硝酸鹽。NO由生物轉化形成並通過攻擊血紅素的中心鐵原子而活化可溶性鳥苷酸環化酶。除副作用之外，耐受性的發展也是該治療方法的關鍵缺點之一。

近年來，已經描述了直接(即，無需NO的預先釋放)刺激可溶性鳥苷酸環化酶的一些物質，例如3-(5'-羥基甲基-2'-呋喃基)-1-苄基吲唑[YC-1；Wu等人，Blood 84(1994)，4226；Mülsch等人，Brit.J.Pharmacol.120(1997)，681]、脂肪酸[Goldberg等人，J.Biol.Chem.252(1977)，1279]、六氟磷酸二苯基碘鎓[Pettibone等人，Eur.J.Pharmacol.116(1985)，307]、異甘草素[Yu等人，Brit.J.Pharmacol.114(1995)，1587]以及各種取代的吡唑衍生物(WO 98/16223)。

尤其在EP 0 266 890-A1、WO 89/03833-A1、JP 01258674-A[參見Chem.Abstr.112：178986]、WO 96/34866-A1、EP 1 277 754-A1、WO 2006/015737-A1、WO 2008/008539-A2、WO 2008/082490-A2、WO 2008/134553-A1、WO 2010/030538-A2、WO 2011/113606-A1和WO 2012/165399-A1中描述了可用於治療疾病的各種咪唑並[1,2-a]吡啶衍生物。

本發明的目的是提供用作可溶性鳥苷酸環化酶的刺激物並適用於治療和/或預防疾病的新的物質。

本發明提供通式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，

其中

R1代表(C3-C7)環烷基、吡啶基或苯基，

其中(C3-C7)環烷基可以被1至4個彼此獨立地選自氟、三氟甲基和(C1-C4)烷基的取代基取代，

且

其中苯基可以被1至4個彼此獨立地選自滷素、氰基、單氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)烷基、(C3-C5)環烷基、(C1-C4)烷氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基的取代基取代，

其中吡啶基可以被1至4個彼此獨立地選自氟、氯、單氟甲基、二氟甲基、三氟甲基和(C1-C4)烷基的取代基取代，

R2代表氫、氯、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、環丙基、環丁基、單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，

其中(C1-C4)烷基可被(C1-C4)烷氧基取代，

其中環丙基和環丁基可最多被氟二取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氫、氟或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R8代表氫、氟、甲基或乙基，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

其中(C1-C6)烷基可被三甲基甲矽烷基取代，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫或(C1-C3)烷基，

R12代表氫或(C1-C3)烷基，

R16代表氫、(C1-C6)烷基或5元雜芳基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

其中5元雜芳基被甲基、二氟甲基或三氟甲基取代，

R17代表氫或甲基，

R18代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R19代表氫或(C1-C4)烷基，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、(C1-C4)烷基、(C2-C4)炔基、(C3-C5)環烷基、二氟甲氧基、三氟甲氧基或者5元或6元雜芳基，

其中(C1-C4)烷基可被(C1-C4)烷氧基取代，

R6代表氫。

本發明提供通式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，

其中

A代表CH2、CD2或CH(CH3)，

R1為(C3-C7)環烷基、吡啶基或苯基，

其中(C3-C7)環烷基可以被1至4個彼此獨立地選自氟、三氟甲基和(C1-C4)烷基的取代基取代，

且

其中苯基可以被1至4個彼此獨立地選自滷素、氰基、單氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)烷基、(C3-C5)環烷基、(C1-C4)烷氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基的取代基取代，

其中吡啶基可以被1至4個彼此獨立地選自氟、氯、單氟甲基、二氟甲基、三氟甲基和(C1-C4)烷基的取代基取代，

R2代表氫、(C1-C4)烷基、環丙基、環丁基、單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，

其中(C1-C4)烷基可被(C1-C4)烷氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氫、氟或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R8代表氫、氟、甲基或乙基，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫或(C1-C3)烷基，

R12代表氫或(C1-C3)烷基，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、(C1-C4)烷基、(C2-C4)炔基、(C3-C5)環烷基、二氟

甲氧基、三氟甲氧基或者5元或6元雜芳基，

其中(C1-C4)烷基可被(C1-C4)烷氧基取代，

R6代表氫。

本發明的化合物是式(I)化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，被式(I)所包括且具有在下文中提及的式的化合物及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，以及被式(I)所包括且在下文中被提及作為工作實施例的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，只要被式(I)所包括且在下文中被提及的化合物不是已經為鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物。

本發明的上下文中優選的鹽是本發明的化合物的生理學上可接受的鹽。還包括其本身不適於製藥應用但可用於例如本發明化合物的分離或純化的鹽。

本發明化合物的生理學上可接受的鹽包括無機酸、羧酸和磺酸的酸加成鹽，例如，鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、富馬酸、馬來酸和苯甲酸的鹽。

本發明化合物的生理學上可接受的鹽還包括常規鹼的鹽，例如且優選鹼金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)、鹼土金屬鹽(例如鈣鹽和鎂鹽)和銨鹽，該銨鹽衍生自氨或具有1-16個碳原子的有機胺，例如且優選乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二異丙胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二環己胺、二甲基氨基乙醇、普魯卡因、二苄胺、N-甲基嗎啉、精氨酸、賴氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。

在本發明的上下文中，溶劑合物被描述為本發明化合物的這樣的形式：其以固態或液態通過與溶劑分子配位形成配合物。水合物是溶劑合物的一種具體形式，其中所述配位作用是與水進行的。在本發明的上下文中，優選的溶劑合物為水合物。

本發明的化合物——根據它們的結構——可以不同的立體異構形式存在，即，以構型異構體的形式或者，如果合適，作為構象異構體(對映異構體和/或非對映異構體，包括在阻轉異構情況下的那些)存在。因此，本發明包括對映異構體和非對映異構體以及它們各自的混合物。可將立體異構均一成分以已知的方式從所述對映異構體和/或非對映異構體的混合物中分離；優選色譜方法用於此目的，尤其是在非手性或手性相上的HPLC色譜法。

如果本發明的化合物可以互變異構的形式存在，則本發明包括所有的互變異構形式。

本發明還包括本發明化合物的所有合適的同位素變體。本發明化合物的同位素變體在本文中應理解為是指這樣的化合物：其中本發明的化合物中至少一個原子已被替換為相同原子序數、但具有與自然界中通常或主要存在的原子質量不同的原子質量的另一個原子。可以引入本發明化合物中的同位素的實例是：氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，例如2H(氘)、3H(氚)、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129I和131I。本發明化合物的特定同位素變體(尤其是其中已經引入一種或多种放射性同位素的那些)可能是有用的，例如，用於檢查體內的作用機理或活性化合物分布；由於相對容易的可製備性和可檢測性，尤其是用3H或14C同位素標記的化合物適用於該目的。此外，由於化合物的更大代謝穩定性，同位素(例如氘)的引入可以產生特定的治療益處，例如體內半衰期的延長或所需的活性劑量的降低；因此，本發明化合物的這種改性在某些情況下還可以構成本發明的優選實施方案。本發明化合物的同位素變體可通過本領域技術人員已知的方法，例如通過以下進一步描述的方法和在工作實施例中描述的步驟，通過使用各自的試劑和/或起始材料的相應的同位素改性來製備。

此外，本發明還包括本發明化合物的前藥。術語「前藥」在本上下文中是指這樣的化合物：其本身可在生物學上有活性或無活性，但是它們在體內的保留時間期間反應(例如代謝或水解)以得到本發明的化合物。

在本發明的上下文中，除非另外說明，所述取代基定義如下：

烷基在本發明上下文中為具有給出的特定碳原子數的直鏈或支鏈烷基。例如且優選地可提及下列基團：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、1-甲基丙基、叔丁基、正戊基、異戊基、1-乙基丙基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基。

碳環或環烷基在本發明上下文中為具有各自給出的環碳原子數和最高達3個雙鍵的單環或雙環的飽和和部分不飽和的碳環。例如且優選地可提及下列基團：環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環戊烯基、環己烯基、環己二烯基、環庚烯基、環庚二烯基、二氫化茚基、四氫化萘基。

烯基在本發明上下文中為具有2至6個碳原子和1或2個雙鍵的直鏈或支鏈烯基。優選的是具有2至4個碳原子和1個雙鍵的直鏈或支鏈烯基。例如且優選地可提及下列基團：乙烯基、烯丙基、異丙烯基和正丁-2-烯-1-基。

炔基在本發明上下文中為具有2至6個碳原子和1個三鍵的直鏈或支鏈炔基。例如且優選地可以提及下列基團：乙炔基、正丙-1-炔-1-基、正丙-2-炔-1-基、正丁-2-炔-1-基和正丁-3-炔-1-基。

鏈烷二基在本發明上下文中為具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈二價烷基。例如且優選地可提及下列基團：亞甲基、1,2-亞乙基、乙烷-1,1-二基、1,3-亞丙基、丙烷-1,1-二基、丙烷-1,2-二基、丙烷-2,2-二基、1,4-亞丁基、丁烷-1,2-二基、丁烷-1,3-二基和丁烷-2,3-二基。

烷氧基在本發明上下文中為具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基。例如且優選地可提及下列基團：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、1-甲基丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。

烷氧基羰基在本發明上下文中為具有1至4個碳原子和與氧原子連接的羰基的直鏈或支鏈烷氧基。例如且優選地可提及下列基團：甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、異丙氧基羰基和叔丁氧基羰基。

烷基磺醯基在本發明上下文中為具有1至4個碳原子且通過磺醯基鍵合的直鏈或支鏈烷基。優選的實例包括：甲基磺醯基、乙基磺醯基、正丙基磺醯基、異丙基磺醯基、正丁基磺醯基和叔丁基磺醯基。

4至7元雜環在本發明上下文中為具有總共4至7個環原子的單環飽和雜環，其含有一個或兩個選自N、O、S、SO和SO2的環雜原子並通過環碳原子或任何環氮原子連接。例如可提及下列基團：氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、吡咯烷基、吡唑烷基、四氫呋喃基、硫雜環戊烷基(thiolanyl)、哌啶基、哌嗪基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、嗎啉基、硫代嗎啉基、六氫氮雜卓基和六氫-1,4-二氮雜環卓基(diazepinyl)。優選的是氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、吡咯烷基、四氫呋喃基、哌啶基、哌嗪基、四氫吡喃基和嗎啉基。

雜芳基在本發明上下文中為總共具有5或6個環原子的單環芳族雜環(雜芳族)，其含有最多三個相同或不同的選自N、O和S的環雜原子並通過環碳原子或通過任何環氮原子連接。例如且優選地可提及下列基團：呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、異噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基和三嗪基。

滷素在本發明上下文中包括氟、氯、溴和碘。優選的是氯或氟。

在R3或R1可代表的基團的式中，用符號*或#標記的線的端點不代表碳原子或CH2基團，而是與連接R3或R1的各原子鍵合的一部分。

當本發明化合物中的基團被取代時，除非另外說明，否則該基團可被單取代或多取代。在本發明的上下文中，出現超過一次的所有基團彼此獨立地定義。優選被一個、兩個或三個相同或不同的取代基取代。

在本發明上下文中，術語「治療」包括抑制(inhibition)、阻滯、檢查、緩解、減弱、限制、降低、遏制(suppressing)、抵制或治癒疾病、病症、紊亂、損傷和健康問題，或者所述狀態的發生、過程或進展和/或所述狀態的症狀。術語「療法」在本文中應理解為與術語「治療」同義。

在本發明上下文中，術語「防止(prevention)」、「預防(prophylaxis)」或「阻止(preclusion)」同義地使用並且是指避免或降低感染、經歷、患有或具有疾病、病症、紊亂、損傷或健康問題，或者所述狀態的發生或推進和/或所述狀態的症狀的風險。

可部分或完全治療或預防疾病、病症、紊亂、損傷或健康問題。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表吡啶基，

其中吡啶基可被1至3個彼此獨立地選自氟、二氟甲基、三氟甲基和甲基的取代基取代，

R2代表氫、(C1-C4)烷基、環丙基、環丁基、單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，

其中(C1-C4)烷基可被(C1-C4)烷氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氫、氟或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R8代表氫、氟、甲基或乙基，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、甲基、乙基、乙炔基、環丙基、二氟甲氧基、三氟甲氧基或5元或6元雜芳基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的吡啶基

其中

#代表與A的連接點，

R2代表甲基，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或甲烷二基，

R7代表氫或氟，

R8代表氫或氟，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、甲基、乙基、環丙基、二氟甲氧基、吡啶基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的吡啶基

其中

#代表與A的連接點，

R2代表甲基，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵，

R7代表氫，

R8代表氫，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、甲基或環丙基，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1為環己基、吡啶基或苯基，

其中苯基可被1至4個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

且

其中吡啶基可被1至3個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

R2代表氯、(C1-C4)烷基、甲氧基或環丁基，

其中(C1-C4)烷基被(C1-C4)烷氧基取代，

其中環丁基被氟二取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氫或氟，

R8代表氫或氟，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、甲基、乙基、乙炔基、環丙基、二氟甲氧基或5元或6元雜芳基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基或氯，

其中甲基被甲氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或甲烷二基，

R7代表氫或氟，

R8代表氫或氟，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氯、甲基、乙基、環丙基、二氟甲氧基、吡啶基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基或氯，

其中甲基被甲氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵，

R7代表氫，

R8代表氫，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氯、甲基或環丙基，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1為環己基、吡啶基或苯基，

其中苯基可被1至4個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

且

其中吡啶基可被1至3個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

R2代表(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基被(C1-C4)烷氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氫或氟，

R8代表氫或氟，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、甲基、乙基、乙炔基、環丙基、二氟甲氧基或者5元或6元雜芳基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽和N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基，

其中甲基被甲氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或甲烷二基，

R7代表氫或氟，

R8代表氫或氟，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氯、甲基、乙基、環丙基、二氟甲氧基、吡啶基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基，

其中甲基被甲氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵，

R7代表氫，

R8代表氫，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氯、甲基或環丙基，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表環己基、吡啶基或苯基，

其中苯基可被1至4個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

其中吡啶基可被1至3個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

R2代表氫、氯、(C1-C4)烷基、甲氧基、環丙基、環丁基、單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，

其中(C1-C4)烷基可被(C1-C4)烷氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

其中(C1-C6)烷基可被三甲基甲矽烷基取代，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R16代表氫、(C1-C6)烷基或5元雜芳基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

其中5元雜芳基被甲基、二氟甲基或三氟甲基取代，

R17代表氫或甲基，

R18代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R19代表氫或(C1-C4)烷基，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、甲基、乙基、乙炔基、環丙基、二氟甲氧基或者5元或6元雜芳基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基或甲氧基，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表甲烷二基或乙烷二基，

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R16代表丁基，

其中丁基可被氟取代最高達五次，

R17代表氫，

R18代表氫或甲基，

R19代表氫或甲基，

R4代表氫，

R5代表氯、甲基、乙基、環丙基、二氟甲氧基、吡啶基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表環己基、吡啶基或苯基，

其中苯基可被1至4個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

其中吡啶基可被1至3個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

R2代表氫、(C1-C4)烷基、環丙基、環丁基、單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，

其中(C1-C4)烷基可被(C1-C4)烷氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、甲基、乙基、乙炔基、環丙基、二氟甲氧基或者5元或6元雜芳基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表甲烷二基或乙烷二基,

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氯、甲基、乙基、環丙基、二氟甲氧基、吡啶基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表甲烷二基或乙烷二基,

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氯、甲基或環丙基，

其中甲基可被甲氧基取代基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表環己基、吡啶基或苯基，

其中苯基可被1至4個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

且

其中吡啶基可被1至3個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

R2代表氫、(C1-C4)烷基、環丙基、環丁基、單氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，

其中(C1-C4)烷基可被(C1-C4)烷氧基取代，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氫、氟或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R8代表氫、氟、甲基或乙基，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氫、氯、甲基、乙炔基、環丙基、二氟甲氧基、吡啶基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

其中甲基被甲氧基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或甲烷二基，

R7代表氫或氟，

R8代表氫或氟，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表氯、甲基、環丙基、二氟甲氧基、吡啶基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

其中甲基被甲氧基取代，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟，

R2代表甲基，

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵，

R7代表氫，

R8代表氫，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R4代表氫，

R5代表環丙基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

R6代表氫。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽和N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽和N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

A代表CH2，

R1代表吡啶基或苯基，

其中苯基可被1至4個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代，

且

其中吡啶基可被1至3個彼此獨立地選自氟、氯、溴和甲基的取代基取代。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽和N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R1代表吡啶基，

其中吡啶基可被1至3個彼此獨立地選自氟、二氟甲基、三氟甲基和甲基的取代基取代。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R1代表下式的吡啶基

其中

#代表與A的連接點。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫或氟，

R14和R15代表氟。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R1代表下式的苯基

其中

#代表與A的連接點，

且

R13代表氫，

R14和R15代表氟。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R2代表(C1-C4)烷基

其中(C1-C4)烷基被(C1-C4)烷氧基取代。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R2代表甲基，

其中甲基被甲氧基取代。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R2代表甲基。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R2代表氯。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R2代表甲氧基。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽和N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表甲烷二基或乙烷二基，

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫或(C1-C4)烷基，

其中(C1-C4)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫，

R16代表丁基，

其中丁基可被氟取代最高達五次，

R17代表氫，

R18代表氫或甲基，

R19代表氫或甲基。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R3代表下式的基團

其中

R16代表丁基，

其中丁基可被氟取代最高達五次，

R17代表氫，

R18代表氫或甲基，

R19代表氫或甲基。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵或(C1-C4)鏈烷二基，

R7代表氫或氟，

R8代表氫或氟，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或(C1-C4)烷基，

R11代表氫，

R12代表氫。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表鍵，

R7代表氫，

R8代表氫，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽和N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表甲烷二基或乙烷二基,

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表甲烷二基，

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫或(C1-C6)烷基，

其中(C1-C6)烷基可被氟取代最高達五次，

R10代表氫或甲基，

R11代表氫，

R12代表氫。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R3代表下式的基團

其中

*代表與羰基的連接點，

L1代表甲烷二基，

R7代表氟，

R8代表氟，

R9代表氫，

R10代表氫，

R11代表氫，

R12代表氫。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R5代表氯、甲基、乙基、環丙基、二氟甲氧基、三氟甲氧基或者5元或6元雜芳基，

其中甲基被甲氧基取代。

在本發明的上下文中，還優選的是式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R5代表氯、甲基、環丙基、二氟甲氧基、吡啶基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基，

其中甲基被甲氧基取代。

在本發明的上下文中，還優選式(I)的化合物以及它們的N-氧化物、鹽、溶劑合物、N-氧化物的鹽及N-氧化物和鹽的溶劑合物，其中

R5代表環丙基、1H-吡唑-1-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基或1,3-噁唑-5-基。

本發明還提供製備本發明式(I)的化合物的方法，其特徵在於，

[A]在惰性溶劑中、在合適的鹼或酸的存在下，將式(II)的化合物反應以得到式(III)的羧酸

其中A、R1、R2、R4和R6各自如以上所定義的，

R5A具有對R5所給出的含義或代表溴，

且

T1代表(C1-C4)烷基或苄基，

其中A、R1、R2、R4和R6各自如以上所定義的，

且

R5A具有對R5所給出的含義或代表溴，

且隨後在惰性溶劑中、在醯胺偶聯條件下，式(III)的羧酸與式(IV)的胺反應

其中L1、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自具有以上所給出的含義，

且，如果

R5A代表溴，

則在惰性溶劑中、在合適的過渡金屬催化劑的存在下、任選地在合適的鹼的存在下，將這些化合物與式(IV-A)的化合物反應

其中

R5具有以上所給出的含義

且

T2代表氫或(C1-C4)烷基，或者兩個T2基團一起形成-C(CH3)2-C(CH3)2-橋，

或者

[B]在惰性溶劑中、在醯胺偶聯條件下，將式(III-A)的化合物用式(IV)的胺轉化成式(I-A)的化合物，

其中R2、R4、R5和R6各自具有以上所給出的含義，

其中L1、R2、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自具有以上所給出的含義，

且隨後通過本領域技術人員已知的方法將苄基從中分離出，並且在惰性溶劑中、在合適的鹼的存在下，將得到的式(V)的化合物與式(VI)的化合物反應，

其中L1、R2、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自具有以上所給出的含義，

其中A和R1具有以上所給出的含義，且

X1代表合適的離去基團，特別是氯、溴、碘、甲磺酸根、三氟甲磺酸根或甲苯磺酸根，

然後，分離出存在的任何保護基團，並將得到的式(I)的化合物任選地用適當的(i)溶劑和/或(ii)酸或鹼轉化成它們的溶劑合物、鹽和/或鹽的溶劑合物。

式(I-A)化合物構成本發明的式(I)的化合物的一個子集。

可以通過下列合成方案(方案1)以示例性的方式說明所述的製備方法：

方案1：

[a)：氫氧化鋰，THF/甲醇/H2O，RT；b)：HATU，4-甲基嗎啉或N,N-二異丙基乙胺，DMF；c)：HCl，Et2O或TFA，CH2Cl2]。

式(IV)和(VI)的化合物是市售可得的、文獻中已知的或者可以以類似於文獻的方法製備。

例如使用酸(例如鹽酸和三氟乙酸)在合適的溶劑(例如二乙醚、二氯甲烷、1,4-二噁烷、水、甲醇、乙醇及其混合物)中，可將(IV)的游離鹼分別從任選地具有氨基保護基團的化合物(IV)中釋放。

用於方法步驟(III)+(IV)→(I)和(III-A)+(IV)→(I-A)的惰性溶劑為，例如醚，如二乙醚、二噁烷、四氫呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚；烴，如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環己烷或礦物油餾分；滷代烴，如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯；或其他溶劑，如丙酮、乙酸乙酯、乙腈、吡啶、二甲基亞碸、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、N,N'-二甲基丙撐脲(DMPU)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)。也可以使用所述溶劑的混合物。優選的是二氯甲烷、四氫呋喃、二甲基甲醯胺或這些溶劑的混合物。

適用於在方法步驟(III)+(IV)→(I)和(III-A)+(IV)→(I-A)中用作醯胺形成的縮合劑為，例如碳二亞胺，如N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二異丙基-、N,N'-二環己基碳二亞胺(DCC)或N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)；光氣衍生物，如N,N'-羰基二咪唑(CDI)；1,2-噁唑鎓化合物，如2-乙基-5-苯基-1,2-噁唑鎓-3-硫酸鹽或2-叔丁基-5-甲基異噁唑鎓高氯酸鹽；醯氨基化合物，如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氫喹啉；或氯甲酸異丁酯、丙烷膦酸酐(T3P)、1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺、氰基膦酸二乙酯、雙-(2-氧代-3-噁唑烷基)磷醯氯、苯並三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)膦六氟磷酸鹽、苯並三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)膦六氟磷酸鹽(PyBOP)、O-(苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸鹽(TBTU)、O-(苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)、2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸鹽(TPTU)、O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)或O-(1H-6-氯苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸鹽(TCTU)，任選地與其他助劑組合，如1-羥基苯並三唑(HOBt)或N-羥基琥珀醯亞胺(HOSu)，以及作為鹼的鹼金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉或碳酸鉀或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀，或有機鹼，如三烷基胺，例如三乙胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶或N,N-二異丙基乙胺。優選的是使用與N-甲基嗎啉組合的TBTU、與N,N-二異丙基乙胺或1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺組合的HATU。

縮合(III)+(IV)→(I)和(III-A)+(IV-A)→(I-A)通常在-20℃至+100℃、優選在0℃至+60℃的溫度範圍內進行。所述轉化可以在常壓、高壓或減壓(例如0.5至5巴)下進行。通常，所述反應在常壓下進行。

或者，也可以將式(III)的羧酸首先轉化為相應的碳醯氯，且隨後可將所述碳醯氯直接或以與式(IV)的胺單獨反應的方式轉化為本發明的化合物。由羧酸形成碳醯氯是通過本領域技術人員已知的方法而實現的，例如在合適鹼的存在下(例如在吡啶存在下)，且任選地加入二甲基甲醯胺，任選地在合適的惰性溶劑中，通過用亞硫醯氯、硫醯氯或乙二醯氯進行處理。

式(II)化合物中酯基T1的水解是通過常規方法、通過在惰性溶劑中用酸或鹼處理該酯而實現的，其中在後一種情況下，所形成的鹽首先通過用酸處理而轉化為游離羧酸。在叔丁酯的情況下，所述酯水解優選用酸來實現。在苄酯的情況下，所述酯水解優選通過用負載在活性炭上的鈀或雷尼鎳氫解來實現。適用於此反應的惰性溶劑是水或常用於酯水解的有機溶劑。這些優選包括醇，如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或叔丁醇；或醚，如二乙醚、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、二噁烷或乙二醇二甲醚；或其他溶劑，如丙酮、二氯甲烷、二甲基甲醯胺或二甲基亞碸。還可以使用所述溶劑的混合物。在鹼性酯水解的情況下，優選的是使用水與二噁烷、四氫呋喃、甲醇和/或乙醇的混合物。

適用於酯水解的鹼是常規的無機鹼。這些優選包括鹼金屬或鹼土金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化鉀或氫氧化鋇；或者鹼金屬或鹼土金屬碳酸鹽，如碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸鈣。特別優選的是氫氧化鈉或氫氧化鋰。

適用於酯裂解的酸通常是硫酸、氯化氫/鹽酸、溴化氫/氫溴酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、甲苯磺酸、甲磺酸或三氟甲磺酸，或者其混合物，任選地加入水。在叔丁酯的情況下，優選的是氯化氫或三氟乙酸，且在甲酯的情況下，優選的是鹽酸。

酯水解通常在0℃至+100℃、優選在+0℃至+50℃的溫度範圍內進行。

這些轉化可以在常壓、高壓或減壓(例如0.5至5巴)下進行。通常，所述反應在各自情況下在常壓下進行。

與(IV-A)的偶聯在溶劑中進行，所述溶劑在反應條件下呈惰性。合適的溶劑為，例如醇，如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚，例如二乙醚、二噁烷、四氫呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚；或其他溶劑，例如1,2-二甲氧基乙烷(DME)、二甲基甲醯胺(DMF)、二甲基亞碸(DMSO)、N,N'-二甲基丙撐脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶、乙腈、甲苯或水。還可以使用所述溶劑的混合物。優選的是乙醇、二甲氧基乙烷、二噁烷、乙腈、甲苯和水以及這些溶劑的混合物。

與(IV-A)的轉化可任選在合適的鈀和/或銅催化劑的存在下進行。合適的鈀催化劑為，例如，乙酸鈀(II)、四(三苯基膦)鈀(0)、雙(三-叔丁基膦)鈀(0)、雙(三苯基膦)氯化鈀(II)、雙(乙腈)氯化鈀(II)和[1,1』-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)，以及任選地與其他磷烷(phosphane)配體結合的相應的二氯甲烷絡合物，所述磷烷配體例如(2-聯苯)二-叔丁基膦、2-二環己基膦基-2』,6』-二甲氧基聯苯(SPHOS)、二環己基[2',4',6'-三(1-甲基乙基)聯苯-2-基]磷烷(XPHOS)、2-二環己基膦基-2′,6′-二異丙氧基聯苯(RuPhos)、雙(2-苯基膦基苯基)醚(DPEphos)或4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧雜蒽(Xantphos)[參見，例如，Hassan J.等人，Chem.Rev.102，1359-1469(2002)]。

與(IV-A)的轉化任選地在合適的鹼的存在下進行。用於此轉化的合適的鹼為常規的無機鹼或有機鹼。這些鹼優選包括鹼金屬氫氧化物，如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀；鹼金屬或鹼土金屬碳酸鹽，如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鈣或碳酸銫；鹼金屬醇鹽，如甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇鈉或乙醇鉀或叔丁醇鈉或叔丁醇鉀；鹼金屬氫化物，如氫化鈉或氫化鉀；氨基化合物，如氨基鈉、雙(三甲基甲矽烷基)氨基鋰、雙(三甲基甲矽烷基)氨基鈉或雙(三甲基甲矽烷基)氨基鉀或二異丙基氨基鋰；或有機胺，如三乙胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙胺、吡啶、1,5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)或1,4-二氮雜二環[2.2.2]辛烷或磷酸鉀。優選的是使用磷酸鉀。

與(IV-A)的反應通常在0℃至+200℃、優選在+80℃至+150℃的溫度範圍內進行。該轉化可以在常壓、高壓或減壓(例如0.5至5巴)下進行。通常，該反應在常壓下進行。

用於方法步驟(V)+(VI)→(I)的惰性溶劑是，例如，滷代烴，如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、三氯乙烯或氯苯；醚，如二乙醚、二噁烷、四氫呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚；烴，如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環己烷或礦物油餾分；或其他溶劑，如丙酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯、乙腈、N,N-二甲基甲醯胺、N,N-二甲基乙醯胺、二甲基亞碸、N,N'-二甲基丙撐脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)或吡啶。還可以使用所述溶劑的混合物。優選的是使用二甲基甲醯胺或二甲基亞碸。

適用於方法步驟(V)+(VI)→(I)的鹼是常規的無機鹼或有機鹼。這些優選包括鹼金屬氫氧化物，例如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀，鹼金屬或鹼土金屬碳酸鹽，如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鈣或碳酸銫，任選地加入鹼金屬碘化物，例如碘化鈉或碘化鉀；鹼金屬醇鹽，如甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇鈉或乙醇鉀或者叔丁醇鈉或叔丁醇鉀；鹼金屬氫化物，如氫化鈉或氫化鉀；氨基化物，如氨基鈉、雙(三甲基甲矽烷基)氨基鋰或雙(三甲基甲矽烷基)氨基鉀或二異丙基氨基鋰；或有機胺，如三乙胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙胺、吡啶、4-(N,N-二甲基氨基)吡啶(DMAP)、1,5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)或1,4-二氮雜二環[2.2.2]辛烷優選的是使用碳酸鉀、碳酸銫或甲醇鈉。

所述反應通常在0℃至+120℃、優選在+20℃至+80℃的溫度範圍內，任選地在微波中進行。所述反應可以在常壓、高壓或減壓(例如0.5至5巴)下進行。

所用的氨基保護基團優選為叔丁氧基羰基(Boc)或苄氧基羰基(Z)。用於羥基或羧基官能的保護基團優選為叔丁基或苄基。通過常規方法、優選通過在惰性溶劑(例如，二噁烷、二乙醚、二氯甲烷或乙酸)中與強酸(例如，鹽酸、氫溴酸或三氟乙酸)反應而分離出保護基團；任選地，還可以在沒有額外的惰性溶劑的情況下實現該分離。在苄基和苄氧基羰基作為保護基團的情況下，這些保護基團也可以通過在鈀催化劑存在下的氫解來移除。所述保護基團的分離可任選地同時在一勺燴反應中進行或在單獨的反應步驟中進行。

在本文中，反應步驟(I-A)→(V)中苄基的移除是通過保護基化學中已知的常規方法，優選通過在惰性溶劑(例如，乙醇或乙酸乙酯)中、在鈀催化劑(例如，負載在活性炭上的鈀)的存在下的氫解來進行的[還可參見，例如，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，Wiley，New York，1999]。

式(II)的化合物是文獻中已知的或可通過以下製得：將式(VII)的化合物

其中R4、R5和R6具有以上所給出的含義，

在惰性溶劑中、在合適的鹼的存在下，與式(VI)的化合物反應，以得到式(VIII)的化合物，

其中R1、R4、R5和R6各自具有以上所給出的含義，

然後在惰性溶劑中，將式(VIII)的化合物與式(IX)的化合物反應

其中R2和T1各自為如以上所定義的。

通過下列方案(方案2)以示例性的方式說明所述方法：

方案2：

[a)：i)NaOMe，MeOH，RT；ii)DMSO，RT；b)：EtOH，分子篩，回流]。

可以修改所示的合成順序，從而使各反應步驟以不同的順序進行。這種修改的合成順序的實例示於方案3中。

方案3：

[a)：EtOH，分子篩，回流；b)：b)Cs2CO3，DMF，50℃]。

用於閉環以得到咪唑並[1,2-a]吡啶基礎骨架(VIII)+(IX)→(II)或(VII)+(IX)→(X)的惰性溶劑是常規的有機溶劑。這些有機溶劑優選包括，如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、正戊醇或叔丁醇；或醚，如二乙醚、四氫呋喃、2-甲基四氫呋喃、二噁烷或乙二醇二甲醚；或其他溶劑，如丙酮、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、乙腈、二甲基甲醯胺或二甲基亞碸。還可以使用所述溶劑的混合物。優選的是使用乙醇。

所述閉環通常在+50℃至+150℃、優選在+50℃至+100℃的溫度範圍內，任選在微波中進行。

所述閉環(VIII)+(IX)→(II)或(VII)+(IX)→(X)任選地在脫水反應添加劑的存在下(例如，在分子篩(孔徑為)的存在下)，或使用水分離器來進行。反應(VIII)+(IX)→(II)或(VII)+(IX)→(X)使用過量的式(IX)的試劑(例如，用1至20當量的試劑(IX))、任選地加入鹼(例如碳酸氫鈉)——在此情況下所述加入可一次性全部或以幾個部分的方式進行——來進行。

作為通過化合物(V)、(VII)或(X)與式(VI)化合物的反應而引入R1(如方案1至3中所示)的替代方案，同樣可以——如方案4中所示——在Mitsunobu反應的條件下將這些中間體與式(XI)的醇反應。

方案4：

酚與醇的此類Mitsunobu縮合的典型反應條件可在相關文獻中找到，例如Hughes，D.L.Org.React.1992，42，335；Dembinski，R.Eur.J.Org.Chem.2004，2763。通常，所述反應在惰性溶劑(例如THF、二氯甲烷、甲苯或DMF)中、在0℃至所用溶劑的沸點之間的溫度下，使用活化試劑(例如，偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)或偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD))和膦試劑(例如，三苯基膦或三丁基膦)來進行。

本發明的其他化合物還可任選地通過以下製備：由上述方法所獲得的式(I)的化合物開始，將各個取代基的官能團——尤其是對R3所列的那些——進行轉化。這些轉化是通過本領域技術人員已知的常規方法進行的，並且包括，例如，親核取代反應和親電取代反應、氧化反應、還原反應、氫化反應、過渡金屬催化的偶聯反應、消除反應、烷基化反應、胺化反應、酯化反應、酯水解反應、醚化反應、醚水解反應、形成碳醯胺的反應以及引入和移除臨時保護基團的反應。

本發明的化合物具有有價值的藥理學特性並且可用於預防和治療人類和動物的疾病。本發明的化合物提供了另一種治療選擇，並因此擴大了藥學的領域。

本發明的化合物引起血管舒張並抑制血小板聚集，且導致血壓降低和冠脈血流量升高。這些作用由可溶性鳥苷酸環化酶的直接刺激和細胞內cGMP的升高介導。此外，本發明的化合物增強提高cGMP水平的物質——例如EDRF(內皮衍生舒張因子)、NO供體、原卟啉IX、花生四烯酸或苯基肼衍生物——的作用。

本發明的化合物適用於治療和/或預防心血管疾病、肺病、血栓栓塞疾病和纖維化疾病。

因此，本發明的化合物可在用於以下的藥物中使用：用於治療和/或預防心血管疾病，例如高血壓(高血壓)、急性和慢性心力衰竭、冠心病、穩定型和不穩定型心絞痛、外周和心臟血管疾病、心律失常、房性和室性心律失常，以及傳導紊亂，例如I-III度房室傳導阻滯(AB阻滯I-III)、室上性快速心律失常、心房顫動、心房撲動、心室顫動、心室撲動、室性快速心律失常、尖端扭轉型室性心動過速、房性和室性早搏、房室交界期外收縮(AV-junction Extrasystolen)、病竇症候群、暈厥、房室結性心動過速、Wolff-Parkinson-White症候群、急性冠脈症候群(ACS)、自身免疫性心臟病(心包炎、心內膜炎、心瓣炎、主動脈炎、心肌病)、休克(如心源性休克、敗血性休克和過敏性休克)、動脈瘤、拳師犬心肌病(室性期前收縮(PVC))；用於治療和/或預防血栓栓塞疾病和缺血，如心肌缺血、心肌梗死、中風、心肌肥厚、短暫性缺血發作、先兆子癇、炎性心血管疾病、冠狀動脈和外周動脈的痙攣、水腫形成(例如肺水腫、腦水腫、腎水腫或因心力衰竭而造成的水腫)、外周循環障礙、再灌注損傷、動脈和靜脈血栓形成、微量白蛋白尿、心肌機能不全、內皮功能障礙；預防再狹窄，如在溶栓治療、經皮腔內血管成形術(PTA)、冠狀動脈腔內成形術(PTCA)、心臟移植和搭橋手術，以及微血管和大血管損傷(血管炎)後，纖維蛋白原和低密度脂蛋白(LDL)的水平升高及纖溶酶原激活物抑制劑1(PAI-1)的濃度升高；以及用於治療和/或預防勃起功能障礙和女性性功能障礙。

在本發明的上下文中，術語「心力衰竭」包括心力衰竭的急性和慢性兩種形式，以及更具體或相關類型的疾病，如急性代償失調的心力衰竭、右心衰竭、左心衰竭、全心衰竭、缺血性心肌病、擴張型心肌病、肥厚型心肌病、特發性心肌病、先天性心臟病、與心瓣膜缺損相關的的心力衰竭、二尖瓣狹窄、二尖瓣閉鎖不全、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣關閉不全、三尖瓣狹窄、三尖瓣關閉不全、肺動脈瓣狹窄、肺動脈瓣閉鎖不全、組合性心臟瓣膜缺損、心肌炎症(心肌炎)、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病性心力衰竭、酒精性心肌病、心臟貯積(storage)病、舒張性心力衰竭和收縮性心力衰竭，以及現有慢性心力衰竭的惡化急性期(惡化的心力衰竭)。

此外，本發明的化合物還可用於治療和/或預防動脈硬化、脂質代謝紊亂、低脂蛋白血症(hypolipoproteinaemias)、血脂異常、高甘油三酯血症、高脂血症、高膽固醇血症、血內β-脂蛋白血症(abetelipoproteinaemia)、谷固醇血症、黃瘤病、丹吉爾病、肥胖症、肥胖以及混合型高脂血症和代謝症候群。

本發明的化合物還可用於治療和/或預防原發性和繼發性雷諾現象、微循環障礙、跛行、外周和自主神經病、糖尿病性微血管病變、糖尿病性視網膜病變、四肢上的糖尿病性潰瘍、壞疽、CREST症候群、紅斑狼瘡、甲癬、風溼病，以及用於促進傷口癒合。

本發明的化合物還適用於治療泌尿疾病，例如良性前列腺症候群(BPS)、良性前列腺增生(BPH)、良性前列腺增大(BPE)、膀胱出口梗阻(BOO)、下尿路症候群(LUTS，包括貓泌尿症候群(FUS))、包括神經性膀胱過度活動(OAB)和(IC)、失禁(UI)的泌尿生殖系統疾病，例如混合性尿失禁、急迫性尿失禁、壓力性尿失禁或充溢性尿失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆痛、男性和女性泌尿生殖系統的器官的良性和惡性疾病。

本發明的化合物還適用於治療和/或預防腎臟疾病，特別是急性和慢性腎機能不全以及急性和慢性腎衰竭。在本發明的上下文中，術語「腎機能不全」包括腎機能不全的急性和慢性表現，以及潛在的或相關的腎病，如腎灌注不足、透析中低血壓、梗阻性尿路病、腎小球病、腎小球腎炎、急性腎小球腎炎、腎小球硬化症、腎小管間質性疾病、腎病，如原發性和先天性腎臟疾病、腎炎、免疫性腎臟疾病，如腎移植排斥、免疫複合物誘發的腎臟疾病、有毒物質誘發的腎病、造影劑誘發的腎病、糖尿病性和非糖尿病性腎病、腎盂腎炎、腎囊腫、腎硬化、高血壓性腎硬化以及可通過以下進行診斷性表徵的腎病症候群：例如肌酸酐和/或水排洩的異常減少，尿素、氮、鉀和/或肌酸酐的血濃度的異常升高、腎臟酶(例如穀氨醯合成酶)的活性改變，尿液滲透壓或尿量的改變，微量白蛋白尿的增加、大量白蛋白尿(macroalbuminuria)，腎小球和小動脈的病變，腎小管擴張(tubular dilatation)，高磷血症和/或需要透析。本發明還包括本發明的化合物用於治療和/或預防腎機能不全後遺症——例如肺水腫、心力衰竭、尿毒症、貧血症、電解質紊亂(例如高鉀血症、低鈉血症)以及骨和碳水化合物代謝紊亂——的用途。

此外，本發明的化合物還適用於治療和/或預防哮喘病、肺動脈性高壓(PAH)和其他形式的肺動脈高血壓(PH)(包括與左心室病、HIV、鐮狀細胞貧血、血栓栓塞(CTEPH)、結節病、COPD或肺纖維化相關的肺動脈高血壓)、慢性阻塞性肺病(COPD)、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、急性肺損傷(ALI)、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)、肺纖維化、肺氣腫(例如，由吸菸誘發的肺氣腫)和囊性纖維化(CF)。

本發明中所述的化合物也是用於控制以NO/cGMP系統的紊亂為特徵的中樞神經系統疾病的活性成分。它們特別適用於在如特別與境遇/疾病/症候群伴隨出現的那些認知障礙之後，改善感知、注意力、學習或記憶，所述認知障礙例如，輕度認知障礙、與年齡相關的學習和記憶障礙、與年齡相關的記憶喪失、血管性痴呆、顱腦創傷、中風、中風後出現的痴呆(中風後痴呆)、創傷後顱腦損傷、一般性注意力集中障礙、有學習和記憶問題的兒童的注意力集中障礙、阿爾茨海默氏病、路易體痴呆、伴隨著額葉退化的痴呆，包括Pick症候群、帕金森氏病、漸進性核性麻痺，伴隨著皮質基底節變性的痴呆、肌萎縮性側索硬化症(amyolateral sclerosis)(ALS)、亨廷頓氏病、脫髓鞘、多發性硬化症、丘腦退化、Creutzfeldt-Jakob痴呆、HIV痴呆、伴隨著痴呆的的精神分裂症或Korsakoff精神病。它們還適用於治療和/或預防中樞神經系統疾病，如焦慮狀態、緊張狀態和抑鬱狀態、CNS相關的性功能障礙和睡眠障礙，以及用於控制攝入食物、刺激物和成癮物質的病理性紊亂。

此外，本發明的化合物還適用於控制腦血流量並且是用於控制偏頭痛的有效藥劑。它們還適用於預防和控制腦梗死(腦中風)——如中風、腦缺血和腦外傷——的後遺症。本發明的化合物同樣可用於控制疼痛和耳鳴的狀態。

此外，本發明的化合物具有抗炎作用並因此可被用作用於治療和/或預防敗血症(SIRS)、多器官功能衰竭(MODS、MOF)、腎臟的炎症疾病、慢性腸炎(IBD、克羅恩氏病、UC)、胰腺炎、腹膜炎、類風溼性疾病、炎症性皮膚病和炎症性眼病的抗炎劑。

此外，本發明的化合物也可用於治療和/或預防自身免疫疾病。

本發明的化合物還適用於治療和/或預防內臟器官——例如肺、心臟、腎臟、骨髓且特別是肝臟——的纖維化疾病，以及皮膚纖維化和纖維化眼病。在本發明的上下文中，術語纖維化疾病特別包括下列術語：肝纖維化、肝硬化、肺纖維化、心內膜心肌纖維化、腎病、腎小球腎炎、腎間質纖維化、由糖尿病引起的纖維化損傷、骨髓纖維化及類似的纖維化疾病、硬皮病、硬斑病、瘢痕疙瘩、增生性瘢痕(還在外科手術後)、痣、糖尿病性視網膜病變、增殖性玻璃體視網膜病變及結締組織疾病(例如結節病)。

本發明的化合物還適用於控制術後瘢痕形成，例如由青光眼手術導致的瘢痕。

本發明的化合物還可在美容上用於老化和角質化的皮膚。

此外，本發明的化合物適用於治療和/或預防肝炎、腫瘤、骨質疏鬆症、青光眼和胃輕癱。

本發明還提供本發明的化合物用於治療和/或預防疾病、特別是上述疾病的用途。

本發明還提供本發明的化合物用於治療和/或預防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動脈高壓、局部缺血、血管疾病、腎機能不全、血栓栓塞疾病、纖維化疾病和動脈硬化的用途。

本發明還提供本發明的化合物用於治療和/或預防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動脈高壓、局部缺血、血管疾病、腎機能不全、血栓栓塞疾病、纖維化疾病和動脈硬化的方法中。

本發明還提供本發明的化合物用於製備治療和/或預防疾病、尤其是上述疾病的藥物的用途。

本發明還提供本發明的化合物用於製備治療和/或預防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動脈高壓、局部缺血、血管疾病、腎機能不全、血栓栓塞疾病、纖維化疾病和動脈硬化的藥物的用途。

本發明還提供一種治療和/或預防疾病、特別是上述疾病的方法，所述方法使用有效量的至少一種本發明的化合物。

本發明還提供一種治療和/或預防心力衰竭、心絞痛、高血壓、肺動脈高壓、局部缺血、血管疾病、腎機能不全、血栓栓塞疾病、纖維化疾病和動脈硬化的方法，所述方法使用有效量的至少一種本發明的化合物。

本發明的化合物可以單獨使用或者——如果需要——可與其他活性化合物組合使用。本發明還提供藥物，其包含至少一種本發明的化合物和一種或多種其他活性化合物，尤其用於治療和/或預防上述疾病。適於組合的活性成分的優選實例包括：

●有機硝酸酯和NO供體，例如硝普鈉、硝酸甘油、單硝酸異山梨酯、二硝酸異山梨酯、嗎多明或SIN-1，以及吸入性NO；

●抑制環磷酸鳥苷(cGMP)降解的化合物，例如磷酸二酯酶(PDE)1、2和/或5的抑制劑，尤其是PDE 5抑制劑，如西地那非(sildenafil)、伐地那非(vardenafil)和他達拉非(tadalafil)；

●抗血栓形成劑，例如且優選選自血小板聚集抑制劑、抗凝血劑或促纖維蛋白溶解的物質(profibrinolytic substance)；

●降血壓的活性化合物，例如且優選選自鈣拮抗劑、血管緊張素AII拮抗劑、ACE抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-受體阻斷劑、β-受體阻斷劑、鹽皮質激素受體拮抗劑，以及利尿劑；和/或

●改變脂類代謝的活性化合物，例如且優選選自甲狀腺受體激動劑、膽固醇合成抑制劑，例如且優選，HMG-CoA-還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑、ACAT抑制劑、CETP抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ和/或PPAR-δ激動劑、膽固醇吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑及脂蛋白(a)拮抗劑。

抗血栓形成劑優選應理解為意指選自血小板聚集抑制劑、抗凝血劑或促纖維蛋白溶解的物質。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與血小板聚集抑制劑——例如且優選阿司匹林、氯吡格雷(clopidogrel)、噻氯匹定(ticlopidin)或雙嘧達莫(dipyridamole)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與凝血酶抑制劑——例如且優選希美加群(ximelagatran)、達比加群(dabigatran)、美拉加群(melagatran)、比伐盧定(bivalirudin)或克賽(clexane)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與GPIIb/IIIa拮抗劑——例如且優選替羅非班(tirofiban)或阿昔單抗(abciximab)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與因子Xa抑制劑——例如且優選利伐沙班(rivaroxaban)(BAY 59-7939)、DU-176b、阿哌沙班(apixaban)、奧米沙班(otamixaban)、非地沙班(fidexaban)、雷扎沙班(razaxaban)、磺達肝素(fondaparinux)、艾卓肝素(idraparinux)、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV803、SSR-126512或SSR-128428——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與肝素或低分子量(LMW)肝素衍生物組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與維生素K拮抗劑——例如且優選香豆素——組合給藥。

降血壓劑優選應理解為意指選自以下的化合物：鈣拮抗劑、血管緊張素AII拮抗劑、ACE抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-受體阻斷劑、β-受體阻斷劑、鹽皮質激素受體拮抗劑和利尿劑。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與鈣拮抗劑——例如且優選硝苯地平(nifedipine)、氨氯地平(amlodipine)、維拉帕米(verapamil)或地爾硫卓(diltiazem)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與α-1-受體阻斷劑——例如且優選哌唑嗪(prazosin)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與β-受體阻斷劑——例如且優選普萘洛爾(propranolol)、阿替洛爾(atenolol)、噻嗎洛爾(timolol)、吲哚洛爾(pindolol)、阿普洛爾(alprenolol)、氧烯洛爾(oxprenolol)、噴布洛爾(penbutolol)、布拉洛爾(bupranolol)、美替洛爾(metipranolol)、納多洛爾(nadolol)、甲吲洛爾(mepindolol)、卡拉洛爾(carazalol)、索他洛爾(sotalol)、美託洛爾(metoprolol)、倍他洛爾(betaxolol)、塞利洛爾(celiprolol)、比索洛爾(bisoprolol)、卡替洛爾(carteolol)、艾司洛爾(esmolol)、拉貝洛爾(labetalol)、卡維地洛(carvedilol)、阿達洛爾(adaprolol)、蘭地洛爾(landiolol)、奈必洛爾(nebivolol)、依泮洛爾(epanolol)或布新洛爾(bucindolol)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與血管緊張素AII拮抗劑——例如且優選氯沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、纈沙坦(valsartan)、替米沙坦(telmisartan)或恩布沙坦(embusartan)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與ACE抑制劑——例如且優選依那普利(enalapril)、卡託普利(captopril)、賴諾普利(lisinopril)、雷米普利(ramipril)、地拉普利(delapril)、福辛普利(fosinopril)、奎諾普利(quinapril)、培哚普利(perindopril)或群多普利(trandopril)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與內皮素拮抗劑——例如且優選波生坦(bosentan)、達盧生坦(darusentan)、安倍生坦(ambrisentan)或西他生坦(sitaxsentan)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與腎素抑制劑——例如且優選阿利克侖(aliskiren)、SPP-600或SPP-800——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與鹽皮質激素受體拮抗劑——例如且優選安體舒通(spironolactone)或依普利酮(eplerenone)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與袢利尿劑、保鉀利尿劑、醛固酮拮抗劑以及噻嗪類利尿劑組合給藥，所述袢利尿劑例如速尿靈(furosemide)、託拉塞米(torasemide)、布美他尼(bumetanide)和吡咯他尼(piretanide)，所述保鉀利尿劑例如阿米洛利(amiloride)和氨苯蝶啶(triamterene)，所述醛固酮拮抗劑例如安體舒通(spironolactone)、坎利酸鉀(potassium canrenoate)和依普利酮(eplerenone)，所述噻嗪類利尿劑例如氫氯噻嗪(hydrochlorothiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、希帕胺(xipamide)和吲達帕胺(indapamide)。

脂類代謝調節劑優選應理解為意指選自以下的化合物：CETP抑制劑、甲狀腺受體激動劑、膽固醇合成抑制劑(如HMG-CoA還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑)、ACAT抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α激動劑、PPAR-γ激動劑和/或PPAR-δ激動劑、膽固醇吸收抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑和脂蛋白(a)拮抗劑。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與CETP抑制劑——例如且優選達塞曲匹、BAY60-5521、安塞曲匹(anacetrapib)或CETP疫苗(CETi-1)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與甲狀腺受體激動劑——例如且優選D-甲狀腺素、3,5,3'-三碘甲狀腺原氨酸(T3)、CGS 23425或阿昔替羅(axitirome)(CGS 26214)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與選自他汀類的HMG-CoA還原酶抑制劑——例如且優選洛伐他汀((lovastatin))、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿託伐他汀(atorvastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)或匹伐他汀(pitavastatin)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與角鯊烯合成抑制劑——例如且優選BMS-188494或TAK-475——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與ACAT抑制劑——例如且優選阿伐麥布(avasimibe)、甲亞油醯胺(melinamide)、帕替麥布(pactimibe)、依魯麥布(eflucimibe)或SMP-797——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與MTP抑制劑——例如且優選英普他派(implitapide)、BMS-201038、R-103757或JTT-130——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與PPAR-γ激動劑——例如且優選吡格列酮(pioglitazone)或羅格列酮(pioglitazone)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與PPAR-δ激動劑——例如且優選GW 501516或BAY 68-5042——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與膽固醇吸收抑制劑——例如且優選依澤替米貝(ezetimibe)、替奎安(tiqueside)或帕馬苷(pamaqueside)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與脂肪酶抑制劑——例如且優選奧利司他(orlistat)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與聚合膽汁酸吸附劑——例如且優選消膽胺(cholestyramine)、考來替泊(colestipol)、colesolvam、考來膠(CholestaGel)或考來替蘭(colestimide)——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與膽汁酸再吸收抑制劑——例如且優選ASBT(＝IBAT)抑制劑，例如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635——組合給藥。

在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與脂蛋白(a)拮抗劑——例如且優選吉卡賓鈣(gemcabene calcium)(CI-1027)或煙酸——組合給藥。

本發明還提供包含至少一種本發明的化合物、通常連同一種或多種惰性、非毒性、藥學上合適的賦形劑的藥物，並提供所述藥物用於上述目的的用途。

本發明的化合物可全身和/或局部地作用。為此，它們可以合適的方式給藥，例如通過口服、腸胃外、肺、鼻、舌下、舌、頰、直腸、真皮、透皮、結膜或耳的途徑給藥，或作為植入物或支架。

本發明的化合物可以適合於這些給藥途徑的給藥形式進行給藥。

用於口服給藥的合適給藥形式為這樣的給藥形式，即所述給藥形式根據現有技術發揮功能、快速和/或以經修飾的方式釋放本發明化合物，並且含有呈結晶和/或無定形和/或溶解形式的本發明化合物，例如片劑(未包衣或包衣片劑，例如具有耐胃液包衣或延緩溶解的包衣或不溶性包衣的片劑，所述包衣控制本發明化合物的釋放)、在口腔中快速崩解的片劑或膜劑/扁片劑(oblate)、膜劑/凍幹劑、膠囊(例如，硬明膠或軟明膠膠囊)、糖衣片劑、顆粒劑、丸劑、粉劑、乳劑、懸液劑、氣霧劑或溶液劑。

腸胃外給藥可在避免吸收步驟(例如，靜脈內、動脈內、心臟內、脊柱內或腰內途經)的情況下完成，或在包括吸收(例如，肌肉、皮下、皮內、經皮或腹膜內途經)的情況下完成。適用於腸胃外給藥的給藥形式包括溶液劑、懸液劑、乳劑、凍幹劑或無菌粉劑形式的注射劑和輸注劑。

對於其他的給藥途徑，合適的實例為可吸入的藥劑形式(包括粉末吸入劑、噴霧劑)、滴鼻劑、溶液劑或噴霧，用於經舌、舌下或頰給藥的片劑、膜劑/扁片劑或膠囊劑，栓劑、耳部或眼部製劑、陰道膠囊劑、水性懸液劑(洗劑、振蕩合劑(shaking mixture))、親脂性懸液劑、軟膏劑、霜劑、透皮治療系統(例如貼劑)、乳劑、糊劑、泡沫劑、灑粉劑(dusting powder)、植入物或支架。

優選的是口服或腸胃外給藥，尤其是口服給藥。

本發明的化合物可轉化為所述的給藥形式。這可用本身已知的方式，通過與惰性的、非毒性的、藥學上合適的賦形劑混合來完成。這些賦形劑包括載體(例如，微晶纖維素、乳糖、甘露醇)、溶劑(例如，液體聚乙二醇)、乳化劑和分散劑或潤溼劑(例如，十二烷基硫酸鈉、聚氧脫水山梨糖醇油酸酯)、粘合劑(例如，聚乙烯基吡咯烷酮)、合成和天然聚合物(例如，白蛋白)、穩定劑(例如，抗氧化劑，如抗壞血酸)、著色劑(例如，無機顏料，如氧化鐵)，以及風味和/或氣味的矯正劑。

通常，已發現有利的是，在腸胃外給藥的情況下，給予量為約0.001至1mg/kg、優選約0.01至0.5mg/kg體重，以實現有效的結果。在口服給藥的情況下，所述劑量為約0.001至2mg/kg、優選約0.001至1mg/kg體重。

然而，在某些情況下，可能有必要偏離所述用量，特別是根據體重、給藥途徑、個體對活性化合物的響應、製劑的性質及進行給藥的時間或間隔。因此，在某些情況下，用低於上述最低量處理可能是足夠的，而在其他情況下，必須超過所述的上限。當給予較大的量時，建議可將其分成一天內幾個單獨的劑量。

下列工作實施例說明了本發明。本發明並不限於這些實施例。

除非另有說明，在下列試驗和實施例中的百分比為重量百分比；份為重量份。液體/液體溶液的溶劑比、稀釋比和濃度數據在各自情況下基於體積計。

A.實施例

縮寫和首字母縮略詞：

aq. 水溶液

calc. 計算的

br. 寬信號(NMR耦合模式)

CAS No. 化學文摘服務編號

δ NMR譜中的位移(表示為)

d 雙重峰(NMR耦合模式)

TLC 薄層色譜法

DCI 直接化學電離(在MS中)

DMAP 4-N,N-二甲基氨基吡啶

DMF 二甲基甲醯胺

DMSO 二甲基亞碸

EDCI N-[3-(二甲基氨基)丙基]-N』-乙基碳二亞胺

eq. 當量

ESI 電噴霧電離(在MS中)

Et 乙基

ent 對映純的

h 小時

HATU N-[(二甲基氨基)(3H-[1,2,3]三唑並[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亞

甲基]-N-甲基甲銨六氟磷酸鹽

HOBT 1H-苯並三唑-1-醇

HPLC 高壓、高效液相色譜法

HRMS 高分辨質譜法

conc. 濃

LC-MS 液相色譜-質譜聯用

LiHMDS 六甲基二矽基氨基鋰

m 多重峰

Me 甲基

min 分鐘

MS 質譜法

NMR 核磁共振譜法

Pd2dba3 三(二亞苄基丙酮)二鈀

Ph 苯基

q 四重峰(NMR耦合模式)

quint. 五重峰(NMR耦合模式)

rac 外消旋的

RF 保留因子(在薄層色譜中)

RuPhos 2-二環己基膦基-2′,6′-二異丙氧基聯苯

RT 室溫

Rt 保留時間(在HPLC中)

s 單峰(NMR耦合模式)

t 三重峰(NMR耦合模式)

TFA 三氟乙酸

THF 四氫呋喃

TBTU (苯並三唑-1-基氧基)雙二甲基氨基甲基鎓氟硼酸鹽

UV 紫外光譜法

v/v (溶液的)體積比

Xantphos 4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧雜蒽

XPHOS 二環己基-(2',4',6'-三異丙基聯苯-2-基)膦

LC-MS和HPLC方法：

LC-MS方法(分析型)：

方法A：

MS儀器類型：Waters ZMD；HPLC儀器類型：Waters 1525；柱：Phenomenex Luna 3μC18(2)30mm x 4.6mm；流動相A：水0.1％甲酸，流動相B：乙腈0.1％甲酸；梯度：0.0min 95％A->0.5min 95％A->4.5min 5％A->5.5min 5％A；流速：2ml/min；UV檢測：DAD。

方法B：

MS儀器類型：Waters Micromass ZQ2000；HPLC儀器類型：Waters Acquity UPLC系統；柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7Mikron100mm x 2.1mm；流動相A：水0.1％甲酸，流動相B：乙腈0.1％甲酸；梯度：0.0min 95％A->0.4min 95％A->6.0min 5％A->6.8min 5％A；流速：0.4ml/min；UV檢測：PDA。

方法C：

MS儀器類型：Waters ZQ；HPLC儀器類型：HP1100系列；柱：Phenomenex Luna 3μC18(2)30mm x 4.6mm；流動相A：水0.1％甲酸，流動相B：乙腈0.1％甲酸；梯度：0.0min 95％A->0.5min 95％A->4.5min 5％A->5.5min 5％A；流速：2ml/min；UV檢測：PDA。

方法D：

儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC系統；柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ50x 1mm；流動相A：1L水+0.25ml 99％濃度甲酸；流動相B：1L乙腈+0.25ml 99％濃度甲酸；梯度：0.0min 90％A→1.2min 5％A→2.0min 5％A柱溫箱：50℃；流速：0.40ml/min；UV檢測：210–400nm。

方法E：

儀器：具有Waters UPLC Acquity的Micromass Quattro Premier；柱：Thermo Hypersil GOLD 1.9μ50x 1mm；流動相A：1L水+0.5ml50％濃度甲酸；流動相B：1L乙腈+0.5ml 50％濃度甲酸；梯度：0.0min 90％A→0.1min 90％A→1.5min 10％A→2.2min 10％A；柱溫箱：50℃；流速：0.33ml/min；UV檢測：210nm。

LC-MS方法(製備型)：

方法F：

MS儀器類型：Agilent 1260Infinity純化系統。Agilent 6100系列單四極杆LC/MS；柱：XSEELECT CSH Prep C18 5μm OBD，30x 150mm；流動相A：0.1％濃度甲酸水溶液，流動相B：0.1％甲酸在乙腈中；梯度：10％-95％，22min，以一個特定集中的梯度為中心；流速：60ml/min。樣品：注射20-60mg/ml的於DMSO(+任選的甲酸和水)中的溶液。

方法G

MS儀器類型：Agilent 1260Infinity純化系統。Agilent 6100系列單四極杆LC/MS；柱：XBridge Prep C18 5μm OBD，30x 150mm；流動相A：0.1％氨水，流動相B：0.1％氨水於乙腈中；梯度：10％-95％，22min，以一個特定集中的梯度為中心；流速：60ml/min。樣品：注射20-60mg/ml的於DMSO(+任選的甲酸和水)溶液。

方法H(GC-MS)

儀器：Thermo Scientific DSQII，Thermo Scientific Trace GC Ultra；柱：Restek RTX-35MS，15m x 200μm x 0.33μm；氦氣恆定流速：1.20ml/min；柱溫箱：60℃；入口：220℃；梯度：60℃，30℃/min→300℃(保持3.33min)。

方法I(LC-MS)：

儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC體系；柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ30x 2mm；流動相A：1L水+0.25ml 99％甲酸，流動相B：1L乙腈+0.25ml 99％濃度甲酸；梯度：0.0min 90％A→1.2min 5％A→2.0min 5％A柱溫箱：50℃；流速：0.60ml/min；UV檢測：208–400nm。

方法J：

儀器：Thermo Fisher-Scientific DSQ；化學電離；反應氣體NH3；源溫度：200℃；電離能70eV。

方法K(LC-MS)：

MS儀器：Waters(Micromass)QM；HPLC儀器：Agilent 1100系列；柱：Agilent ZORBAX Extend-C18 3.0x 50mm 3.5微米；流動相A：1L水+0.01mol碳酸銨，流動相B：1L乙腈；梯度：0.0min 98％A→0.2min 98％A→3.0min 5％A→4.5min 5％A；柱溫箱：40℃；流速：1.75ml/min；UV檢測：210nm。

方法L(LC-MS)：

儀器：具有Waters UPLC Acquity的Micromass Quattro Premier；柱：Thermo Hypersil GOLD 1.9μ50x 1mm；流動相A：1L水+0.5ml50％甲酸，流動相B：1L乙腈+0.5ml 50％濃度甲酸；梯度：0.0min97％A→0.5min 97％A→3.2min 5％A→4.0min 5％A；柱溫箱：50℃；流速：0.3ml/min；UV檢測：210nm。

方法M(LC-MS，分析型)：

MS儀器：Waters(Micromass)Quattro Micro；儀器Waters UPLC Acquity；柱：Waters BEH C18 1.7μ50x 2.1mm；流動相A：1L水+0.01mol甲酸銨，流動相B：1L乙腈；梯度：0.0min 95％A→0.1min95％A→2.0min 15％A→2.5min 15％A→2.51min 10％A→3.0min10％A；柱溫箱：40℃；流速：0.5ml/min；UV檢測：210nm。

方法N(LC-MS，分析型)：

儀器：Agilent MS Quad 6150；HPLC：Agilent 1290；柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ50x 2.1mm；流動相A：1L水+0.25ml 99％甲酸，流動相B：1L乙腈+0.25ml 99％濃度甲酸；梯度：0.0min 90％A→0.3min 90％A→1.7min 5％A→3.0min 5％A；柱溫箱：50℃；流速：1.20ml/min；UV檢測：205-305nm。

方法O(LC/MS，分析型)：

MS儀器類型：Thermo Scientific FT-MS；UHPLC+儀器類型：Thermo Scientific UltiMate 3000；柱：Waters，HSST3，2.1x 75mm，C18 1.8μm；流動相A：1L水+0.01％甲酸；流動相B：1L乙腈+0.01％甲酸；梯度：0.0min 10％B→2.5min 95％B→3.5min 95％B；柱溫箱：50℃；流速：0.90ml/min；UV檢測：210nm/最佳積分路徑210-300nm。

方法P(LC/MS，分析型)：

MS儀器類型：HP 6130MSD；HPLC儀器類型：Agilent 1290系列；UV DAD；柱：Waters Acquity HSS T3 1.8μm 2.1mm x 75mm；流動相A：乙酸銨(10mM)+水/甲醇/乙腈(9.0:0.6:0.4)，流動相B：乙酸銨(10mM)+水/甲醇/乙腈(1.0:5.4:3.6)，梯度：A/B：80/20(0.0min)→(1.5min)→0/100(1.5min)；流速：0.6ml/min；柱溫箱：35℃；UV檢測：215和238nm。

下列段落中所報導的1H NMR譜中質子信號的多重性表示在各自情況下所觀察到的信號形式，且不考慮任何更高階的信號現象。在所有的1H NMR譜數據中，化學位移δ以ppm表示。

此外，起始材料、中間體和工作實例可作為水合物的形式存在。沒有定量測定水含量。在某些情況下，水合物可能會影響1H NMR譜並且可能改變和/或顯著加寬1H NMR中的水信號。

除非另有說明，否則在下列試驗和實施例中的百分比為重量百分比；份為重量份。液體/液體溶液的溶劑比例、稀釋比和濃度數據在各自情況下基於體積計。

下列段落中所報導的1H NMR譜中質子信號的多重性表示在各自情況下所觀察到的信號形式，且不考慮任何更高階的信號現象。在所有的1H NMR譜數據中，化學位移δ以ppm表示。

當本發明的化合物通過上述方法——其中流動相含有添加劑(例如，三氟乙酸、甲酸或氨)——用製備型HPLC純化時，若本發明的化合物含有足夠的鹼性或酸性官能團，則本發明的化合物可以鹽——例如三氟乙酸鹽、甲酸鹽或銨鹽——的形式獲得。這些鹽可通過本領域技術人員已知的各種方法轉化為相應的游離鹼或酸。

在下文所述的本發明的合成中間體和工作實施例的情況中，指定為相應鹼或酸的鹽的形式的任何化合物通常為具有未知確切化學計量組成的鹽，如通過各自的製備方法和/或純化方法所獲得的。除非更詳細地說明，對諸如「鹽酸鹽」、「三氟乙酸鹽」、「鈉鹽」或「x HCl」、「x CF3COOH」、「x Na+」的名稱和結構式的補充，因此不應理解為在這些鹽的情況下的化學計量意義，而僅具有關於其中所存在的成鹽組分的描述性特徵。

這相應地適用：如果合成中間體或工作實施例或其鹽通過所述的製備和/或純化方法以具有未知化學計量組成(如果他們為所定義的烈性)的溶劑合物(例如水合物)的形式獲得。

起始材料和中間體：

實施例1A

3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺

在室溫下，將51g(953mmol，1.05當量)甲醇鈉溶解於1000ml甲醇中，加入100g(908mmol，1當量)的2-氨基-3-羥基吡啶，並將混合物在室溫下再攪拌15min。將反應混合物在減壓下濃縮，將殘餘物溶於2500ml二甲基亞碸，並加入197g環己基甲基溴(953mmol，1.05當量)2,6-二氟苄基溴。在室溫下4h後，向反應混合物中倒入20L水並攪拌15min，並濾出固體。將固體用1L水、100ml異丙醇和500ml石油醚洗滌，並在高真空下乾燥。這得到171g標題化合物(理論值的78％)。

1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝5.10(s，2H)；5.52(br，s，2H)，6.52(dd，1H)；7.16–7.21(m，3H)；7.49–7.56(m，2H)。

實施例2A

5-溴-3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺

將32.6g(138mmol，1當量)3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺(實施例1A)懸浮於552ml 10％濃度硫酸水溶液中，並將混合物冷卻至0℃。將8.5ml(165mmol，1.2當量)溴溶解於85ml乙酸中，然後在90min的時間內，逐滴加入冰冷卻的反應溶液中。將反應混合物在0℃下再攪拌90min，然後將內容物用600ml乙酸乙酯稀釋，並分離出水相。將水相用乙酸乙酯萃取。將有機相合併，用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌，乾燥並濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷中並在矽膠上色譜分離(石油醚/乙酸乙酯梯度作為流動相)。這得到24g(理論值的55％)的標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0,96min

MS(ESpos)：m/z＝315.1/317.1(M+H)+

1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝5.14(s，2H)；5.83(br.s，2H)；7.20(t，2H)；7.42(d，1H)；7.54(q，1H)；7.62(d，1H)。

實施例3A

6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

將16g粉末狀分子篩和52.7ml(380.8mmol；5當量)2-氯乙醯乙酸乙酯加入到24g(76.2mmol；1當量)在400ml乙醇中的5-溴-3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺(實施例2A)中，並將混合物在回流下加熱過夜。再加入8g的分子篩，並將混合物在回流下再加熱24h。將反應混合物冷卻並在減壓下濃縮，將殘餘物溶於二氯甲烷並在矽膠上色譜分離(二氯甲烷/甲醇20:1作為流動相)。將含產物的級分濃縮並將殘餘物在100ml二乙醚中攪拌30min。將產物濾出，用少量的二乙醚洗滌並乾燥。這得到15g(理論值的45％)標題化合物。

LC-MS(方法E)：Rt＝1.43min

MS(ESpos)：m/z＝414.9/416.8(M+H)+

1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.36(t，3H)；2.54(s，3H；被二甲基亞碸信號掩蓋)；4.37(q，2H)；5.36(s，2H)；7.25(t，2H)；7.42(d，1H)；7.61(q，1H)；9.00(d，1H)。

實施例4A

6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸

將12.0ml(12.0mmol)1M氫氧化鈉水溶液加入5.0g(11.8mmol)在30ml乙醇和70ml四氫呋喃中的6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯(實施例3A)溶液中。將混合物在回流下加熱並攪拌18h。然後將混合物在減壓下濃縮，並將殘餘物在水和乙酸乙酯之間分配。將水相分離出，並加入1M鹽酸水溶液直到pH達到3。將得到的水性混合物過濾，並將沉澱物用乙酸乙酯洗滌並在高真空下乾燥。這得到4.7g目標產物(理論值的100％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝2.94和3.02min；m/z＝397.399(M+H)+

實施例5A

外消旋-{1-[({6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將870mg(6.4mmol)1-羥基-7-氮雜苯並三唑和1.22g(6.4mmol)的1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺加入2.1g(5.3mmol)6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸(實施例4A)、2.7ml(15.7mmol)二異丙基乙胺和1.28g(6.4mmol)的外消旋-(1-氨基-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯(實施例18A)於30ml四氫呋喃的溶液中。將混合物在室溫下攪拌18h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物在水和乙酸乙酯之間分配。將有機相移除並用水和飽和的氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(120g矽膠柱，流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至100％)。這得到2.9g目標產物(理論值的94％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝4.14min；m/z＝581.583(M+H)+

實施例6A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(吡啶-3-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將100mg(0.17mmol)外消旋-{1-[({6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例5A)、42mg(0.21mmol)3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)吡啶、14mg(0.017mmol)1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)/二氯甲烷絡合物和166mg(0.51mmol)碳酸銫於0.5ml水和2ml二噁烷中的混合物用氬氣脫氣5min，並在100℃下在封閉的管中攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫，並將殘餘物在水和乙酸乙酯之間分配。將有機相分離出，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至50％)。這得到90mg目標產物(理論值的90％)。

LC-MS(方法C)：Rt＝3.11min；m/z＝580(M+H)+

1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ[ppm]＝0.95(t，3H)，1.24(s，3H)，1.42(s，9H)，1.61(dd，1H)，1.69(s，1H)，1.83(dd，1H)，2.77(s，3H)，3.76(ddd，2H)，4.58(s，1H)，5.44(s，2H)，6.95(t，2H)，7.04(d，1H)，7.31–7.40(m，2H)，7.92(ddd，1H)，8.63(dd，1H)，8.87(dd，1H)，9.33(d，1H)。

實施例7A

外消旋-{1-[({6-環丙基-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將100mg(0.17mmol)外消旋-{1-[({6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例5A)、38μl(0.21mmol)2-環丙基-4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧雜硼雜環戊烷、14mg(0.017mmol)1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)/二氯甲烷絡合物和166mg(0.51mmol)碳酸銫於0.5ml水和2ml二噁烷中的混合物用氬氣脫氣5min，並在100℃下在封閉的管中攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫，並且將殘餘物在水和乙酸乙酯之間分配。將有機相分離出，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至50％)。這得到56mg目標產物(理論值的60％)。

LC-MS(方法C)：Rt＝3.22min，m/z＝543(M+H)+

1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ[ppm]＝0.70–0.74(m，2H)，0.92–0.97(m，5H)，1.24(s，3H)，1.42(s，9H)，1.56–1.65(m，1H)，1.81(td，1H)，1.89–1.95(m，1H)，2.70(s，3H)，3.71(dd，1H)，3.78(dd，1H)，4.57(s，1H)，5.32(s，2H)，6.56(d，1H)，6.89–6.96(m，2H)，7.08(s，1H)，7.29-7.37(m，1H)，8.87(s，1H)。

實施例8A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1H-吡唑-1-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將100mg(0.17mmol)外消旋-{1-[({6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例5A)、18mg(0.26mmol)1H-吡唑、1.3mg(0.009mmol)氧化亞銅(I)、4.7mg(0.034mmol)2-羥基苯甲醛肟和112mg(0.34mmol)碳酸銫於1ml乙腈中的混合物用氬氣脫氣5min，並在82℃下在封閉的管中攪拌18h。將反應混合物濃縮，並且將殘餘物在二氯甲烷和水之間分配。將有機相移除並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至100％)。這得到15mg目標產物實施例8A(理論值的13％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝3.76min，m/z＝569(M+H)+

實施例9A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-(甲氧基甲基)-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將100mg(0.17mmol)外消旋-{1-[({6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例5A)、29mg(0.19mmol)(甲氧基甲基)三氟硼酸鉀、1.9mg(0.008mmol)乙酸鈀(II)、8.0mg(0.017mmol)RuPhos和168mg(0.52mmol)碳酸銫於0.1ml水和1ml二噁烷中的混合物用氬氣脫氣5min，並在100℃下在封閉的管中攪拌18h。將反應混合物濃縮，並將殘餘物在水和乙酸乙酯之間分配。將有機相分離出，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至50％)。這得到60mg目標產物(理論值的64％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝3,08min；m/z＝547,1(M+H)+

1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ[ppm]＝0.95(t，3H)，1.42(s，9H)，1.43(s，3H)，1.60(dd，1H)，1.66(s，1H)，1.81(dd，1H)，2.73(s，3H)，3.38(s，3H)，3.75(ddd，2H)，4.45(s，2H)，4.57(s，1H)，5.33(s，2H)，6.86(d，1H)，6.93(dd，2H)，7.29–7.38(m，1H)，9.03(d，1H)。

實施例10A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將434mg(0.75mmol)外消旋-{1-[({6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例5A)、228mg(0.90mmol)雙(頻哪醇)二硼、30mg(0.037mmol)1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)/二氯甲烷絡合物和220mg(2.2mmol)乙酸鉀於4ml二噁烷中的混合物用氬氣脫氣5min，並在80℃下在封閉的管中攪拌18h。將反應混合物冷卻至室溫，並將殘餘物在水和乙酸乙酯之間分配。將有機相移除，並用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到563mg粗目標產物。

LC-MS(方法A)：Rt＝2.72min；m/z＝547.1(M+H)+

實施例11A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-羥基-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將100mg(0.16mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例10A)、0.16ml的30％濃度過氧化氫水溶液和1ml 1M氫氧化鈉水溶液於2ml四氫呋喃中的混合物在0℃下攪拌30min。將所得的混合物在乙酸乙酯和1％濃度檸檬酸水溶液之間分配。將有機相分離出，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(12g矽膠柱，流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至100％)。這得到50mg目標產物(理論值的60％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝2.79min；m/z＝519(M+H)+

實施例12A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-(二氟甲氧基)-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將50mg(0.10mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-羥基-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例11A)、71mg(0.47mmol)氯二氟乙酸鈉和226mg(0.69mmol)碳酸銫於1ml二甲基甲醯胺中在80℃下攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫，並將殘餘物在乙酸乙酯和水之間分配。將有機相分離出，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(12g矽膠柱，流動相：乙酸乙酯/環己烷，梯度0％至50％)。這得到13mg目標產物(理論值的24％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝3.86min；m/z＝569(M+H)+

1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ[ppm]＝0.95(t，3H)，1.24(s，3H)，1.42(s，9H)，1.60(dd，1H)，1.63(s，1H)，1.82(dd，1H)，2.73(s，3H)，3.73(ddd，2H)，4.56(s，1H)，5.33(s，2H)，6.52(t，1H)，6.75(d，1H)，6.94(dd，1H)，7.30–7.46(m，2H)，9.10(d，1H)。

實施例13A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1,3-噁唑-5-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將100mg(0.17mmol)外消旋-{1-[({6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例5A)、40mg(0.21mmol)5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)噁唑、14mg(0.017mmol)1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)/二氯甲烷絡合物和166mg(0.51mmol)碳酸銫於0.5ml水和2ml二噁烷中的混合物用氬氣脫氣5min，並在100℃下在封閉的管中攪拌2h。將反應混合物冷卻至室溫，並將殘餘物在乙酸乙酯和水之間分配。將有機相分離出，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至50％)。這得到43mg目標產物(理論值的44％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝3,54min；m/z＝570(M+H)+

1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ[ppm]＝0.95(t，3H)，1.25(s，3H)，1.42(s，9H)，1.55–1.67(m，2H)，1.78–1.88(m，1H)，2.75(s，3H)，3.76(ddd，2H)，4.58(s，1H)，5.43(s，2H)，6.95(t，2H)，7.04(d，1H)，7.30–7.40(m，2H)，7.92(s，1H)，9.46(d，1H)。

實施例14A

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(甲氧基甲基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸甲酯

將0.5ml(2.87mmol)二異丙基乙胺加入390mg(2.17mmol)2-氯-4-甲氧基-3-氧代丁酸甲酯和450mg(1.80mmol)3-[(2,6-二氟苄基)氧基]-5-甲基吡啶-2-胺於5ml 1,2-二甲氧基乙烷中的溶液中，並將混合物在回流下攪拌18h。將反應混合物濃縮，並將殘餘物在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。將有機相移除，用水和飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(40g矽膠柱，流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至100％)。這得到280mg目標產物(理論值的41％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝2,46min；m/z＝377(M+H)+

實施例15A

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(甲氧基甲基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸

將0.75ml(0.75mmol)1M氫氧化鈉水溶液加入270mg(0.745mmol)8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(甲氧基甲基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸甲酯(實施例14A)於10ml甲醇的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌18h。將0.75ml(0.75mmol)1M氫氧化鈉水溶液加入該混合物中，並在室溫下再繼續攪拌5h。將所得的混合物冷卻至5℃，並通過加入1.5ml1M鹽酸水溶液進行中和。將所得的混合物濃縮至乾燥，並將殘餘物用甲苯共沸蒸餾，得到350mg目標化合物(理論值的100％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝2.30min；m/z＝363(M+H)+

實施例16A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(甲氧基甲基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將118mg(0.87mmol)1-羥基-7-氮雜苯並三唑和166mg(0.87mmol)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺加入261mg(0.72mmol)8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(甲氧基甲基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸(實施例15A)、372μl(2.14mmol)二異丙基乙胺和174mg(0.86mmol)外消旋-(1-氨基-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯(實施例18A)於10ml四氫呋喃中的溶液中。將混合物在室溫下攪拌2天並在減壓下濃縮。將殘餘物在二氯甲烷和水之間分配。將有機相移除，用水和飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法純化(40g矽膠柱，流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至100％)。這得到258mg目標產物(理論值的66％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝2.76min；m/z＝547(M+H)+

1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ[ppm]＝0.78(dd，3H)，1.11(s，3H)，1.28(s，9H)，1.59–1.48(m，1H)，1.72–1.63(m，1H)，2.33(d，3H)，3.26(dd，1H)，3.48(dd，1H)，3.73(s，2H)，3.97(s，3H)，4.70(s，1H)，5.29(s，2H)，6.46(d，1H)，6.94(dd，2H)，7.40–7.33(m，2H)，7.46(s，1H)。

實施例17A

外消旋-(2-氰基丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在室溫(最高溫度30℃)下，將30g(305.7mmol)外消旋-2-氨基-2-甲基丁腈緩慢地加入73.38g(336.2mmol)二甲酸二叔丁基酯中。將混合物在室溫下攪拌過夜。加入二氯甲烷並將該混合物用1N氫氧化鈉水溶液洗滌兩次。將有機相分離出，經硫酸鈉乾燥並濃縮(最高溫度30℃)。這得到44.2g目標產物(理論值的73％)。

GC-MS(方法H)：Rt：4.04min，m/z：98(M-Boc)+

實施例18A

外消旋-(1-氨基-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯

將44.2g(222.93mmol)外消旋-(2-氰基丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯(實施例17A)溶解於500ml 7M氨於甲醇中的溶液，並加入45g雷尼鎳(50％在水中的懸浮液)。將反應混合物在高壓釜中、在室溫下和在30bar的氫氣壓力下保持18小時。將反應混合物通過一層硅藻土過濾，用甲醇洗滌，並將合併的濾液在減壓(最高溫度：40℃)下濃縮。這得到45g目標產物(理論值的100％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.18min

MS(ESpos)：m/z＝203(M+H)+

實施例19A

3-(苄氧基)-5-溴吡啶-2-胺

首先將200g(1mol)2-氨基-3-苄氧基吡啶加入4L二氯甲烷中，並在0℃下，在30min內加入62ml(1.2mol)溴於620ml二氯甲烷中的溶液。在加入結束後，將反應溶液在0℃下攪拌60min。然後，將約4L飽和碳酸氫鈉水溶液加入該混合物中。將有機相移除並濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法(石油醚/乙酸乙酯6:4)純化，並將產物級分濃縮。這得到214g(理論值的77％)標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.92min

MS(ESpos)：m/z＝279(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝5.16(s，2H)，5.94-6.00(m，2H)，7.26-7.29(m，1H)，7.31-7.36(m，1H)，7.37-7.43(m，2H)，7.47-7.52(m，2H)，7.57-7.59(m，1H)。

實施例20A

8-(苄氧基)-6-溴-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

在氬氣下，將200g(0.72mol)來自實施例19A的3-(苄氧基)-5-溴吡啶-2-胺、590g(3.58mol)2-氯代乙醯乙酸乙酯和436g的3A分子篩懸浮於6L乙醇中，並將該懸浮液在回流下攪拌72h。將反應混合物通過矽膠過濾並濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法(石油醚:乙酸乙酯9:1，然後6:4)純化，並將產物級分濃縮。這得到221g(理論值的79％)目標化合物。

LC-MS(方法I)：Rt＝1.31min

MS(ESpos)：m/z＝389(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.36(t，3H)，2.58(s，3H)，4.32-4.41(m，2H)，5.33(s，2H)，7.28-7.32(m，1H)，7.36-7.47(m，3H)，7.49-7.54(m，2H)，8.98(d，1H)。

實施例21A

8-(苄氧基)-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

在氬氣下，將105g(270mmol)來自實施例20A的8-(苄氧基)-6-溴-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯懸浮於4.2L 1,4-二噁烷中，並依次加入135.4g(539mmol，純度50％)三甲基環硼氧烷、31.2g(27mmol)四(三苯基膦)鈀(0)和78.3g(566mmol)碳酸鉀，並將該混合物在回流下攪拌8h。將反應混合物的沉澱物冷卻至室溫，並通過矽膠過濾移除，並將濾液濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，並通過矽膠色譜法(二氯甲烷:乙酸乙酯＝9:1)純化。這得到74g(理論值的84.6％)目標化合物。

LC-MS(方法I)：Rt＝1.06min

MS(ESpos)：m/z＝325(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.35(t，3H)，2.34(br.s，3H)，2.56(s，3H)，4.31-4.38(m，2H)，5.28(br.s，2H)，6.99-7.01(m，1H)，7.35-7.47(m，3H)，7.49-7.54(m，2H)，8.68-8.70(m，1H)。

實施例22A

8-羥基-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

首先將74g(228mmol)來自實施例21A的8-(苄氧基)-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯加入1254ml二氯甲烷和251ml乙醇中，並在氬氣下加入20.1g 10％負載在活性碳上的鈀(用水潤溼，50％)。將反應混合物在室溫下和在標準壓力下氫化過夜。將反應混合物通過矽膠過濾並濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法(二氯甲烷:甲醇＝95:5)純化。這得到50.4g(理論值的94％)目標化合物。

DCI-MS：(方法J)(ESpos)：m/z＝235.2(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.35(t，3H)，2.27(s，3H)，2.58(s，3H)，4.30-4.38(m，2H)，6.65(d，1H)，8.59(s，1H)，10.57(br.s，1H)。

實施例23A

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

首先將20.00g(85.38mmol)來自實施例22A的8-羥基-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯、19.44g(93.91mmol)2,6-二氟苄基溴和61.20g(187.83mmol)碳酸銫於1.18L DMF中在60℃下攪拌5h。然後將反應混合物倒入6.4L 10％濃度的氯化鈉水溶液中，然後用乙酸乙酯萃取兩次。將合併的有機相用854ml 10％濃度氯化鈉水溶液洗滌、乾燥、濃縮，並在室溫下、在高真空下乾燥過夜。這得到28.2g(理論值的92％；純度約90％)標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.05min

MS(ESpos)：m/z＝361.1(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.38(t，3H)；2.36(s，3H)；4.35(q，2H)；5.30(s，2H)；7.10(s，1H)；7.23(t，2H)；7.59(q，1H)；8.70(s，1H)。

實施例24A

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸

將220mg 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯(實施例23A；0.524mmol，1當量)溶解於7ml THF/甲醇(1:1)中，加入2.6ml 1N氫氧化鋰水溶液(2.6mmol，5當量)，並將混合物在室溫下攪拌16h。將混合物在減壓下濃縮，並將殘餘物用1N鹽酸水溶液酸化並攪拌15min。將固體濾出，並用水洗滌，並在減壓下乾燥。這得到120mg標題化合物(理論值的60％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.68min

MS(ESpos)：m/z＝333.1(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝2.34(s，3H)；5.28(s，2H)；7.09(s，1H)；7.23(t，2H)；7.58(q，1H)；8.76(s，1H)；13.1(br.s，1H)，[其他信號隱藏在DMSO信號下]。

實施例25A

8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

將15.78g(86.7mmol)2-(氯甲基)-3-氟吡啶鹽酸鹽(市售可得，還記載於US5593993A1，1997；WO2007/2181A2，2007中)和94.06g(288.9mmol)碳酸銫加入16.92g(72.2mmol)來自實施例22A的8-羥基-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯於956ml DMF中。將反應混合物在60℃下攪拌過夜。將冷卻至室溫的反應混合物過濾，將濾餅用乙酸乙酯洗滌，並且將濾液濃縮。將約500ml水加入殘餘物中，並且將沉澱的固體濾出並在高真空下乾燥。這得到24.1g(理論值的93％)目標化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.84min

MS(ESpos)：m/z＝344(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.35(t，3H)，2.35(s，3H)，2.54(s，3H，hidden by the DMSO signal)，4.35(q，2H)，5.40(s，2H)，7.08(s，1H)，7.55-7.62(m，1H)，7.82-7.89(m，1H)，8.48-8.52(m，1H)，8.70(s，1H)。

實施例26A

8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸鹽酸鹽

首先將24.06g(70.1mmol)來自實施例25A的8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯加入1.5L THF/甲醇(5:1)中，並加入350.4ml(350.4mmol)1N氫氧化鋰水溶液，並且將反應混合物在40℃下攪拌2.5h。冷卻後，使用1N鹽酸水溶液將pH調節至約4，並且在減壓下除去溶液中的THF/甲醇。將殘餘物冷卻，將沉澱的固體濾出並在減壓下乾燥。這得到22.27g(理論值的100％)標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.55min

MS(ESpos)：m/z＝316(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝2.34(s，3H)，2.53(s，3H，hidden by the DMSO signal)，5.38-5.42(m，2H)，7.06(s，1H)，7.56-7.62(m，1H)，7.82-7.89(m，1H)，8.48-8.52(m，1H)，8.74(s，1H)，13.02(br.s，1H)。

實施例27A

5-氯-2-硝基吡啶-3-醇

在冰冷卻下，將30g 5-氯吡啶-3-醇(232mmol，1當量)溶解於228ml濃硫酸中，並在0℃下緩慢加入24ml濃硝酸。將反應溫熱至室溫並攪拌過夜。將該混合物攪拌至冰/水混合物中並攪拌30min。將固體濾出，用冷水洗滌並用空氣乾燥。這得到33g(理論值的82％)無需進一步純化用於下一反應的標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.60min

MS(ESneg)：m/z＝172.9/174.9(M-H)-

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝7.71(d，1H)；8.10(d，1H)；12.14(br.1H)。

實施例28A

5-氯-3-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-硝基吡啶

首先將20.0g(114.6mmol)來自實施例27A的5-氯-2-硝基吡啶-3-醇和56.0g(171.9mmol)碳酸銫加入319ml DMF中。加入17.51g(120.3mmol)2-(氯甲基)-3-氟吡啶(市售可得；另外記載於：K.Weidmann等人，Journal of Medicinal Chemistry 1992，35，438-450；US5593993，1997；WO2007/2181A2，2007)，並將反應混合物在室溫下攪拌過夜。加入6.0g(41.2mmol)2-(氯甲基)-3-氟吡啶，並將混合物在室溫下攪拌24h。隨後，再加入6.0g(41.2mmol)2-(氯甲基)-3-氟吡啶和5.0g(15.3mmol)碳酸銫，並將該混合物在60℃下攪拌12h。將反應混合物小心地加入2.3L 0.5M鹽酸水溶液中。將該混合物萃取三次，每次用500ml乙酸乙酯。將合併的有機相用500ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，乾燥並在減壓下濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度：9/1至7/3)純化。這得到29.8g(理論值的92％)目標化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.94min.

MS(ESIpos)：m/z＝284(M+H)+.

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝5.59(d，2H)，7.53-7.60(m，1H)，7.80-7.87(m，1H)，8.26(d，1H)，8.40-8.47(m，2H)。

實施例29A

5-氯-3-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]吡啶-2-胺

在氬氣下，首先將29.8g(105.1mmol)來自實施例28A的5-氯-3-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-硝基吡啶加入317ml乙醇中。加入18.2g(325.7mmol)鐵粉，並將反應混合物加熱至回流。緩慢逐滴加入80.4ml濃鹽酸，並將混合物在回流下再加熱6h。使用33％濃度氨水溶液而使反應混合物為鹼性，然後在減壓下濃縮。通過矽膠色譜法(流動相：二氯甲烷/甲醇，梯度95/5至90/10)純化，得到25.0g(理論值的94％)目標化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.70min

MS(ESIpos)：m/z＝254(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝5.27(d，2H)，5.87(br.s，2H)，7.32-7.35(m，1H)，7.51–7.58(m，2H)，7.77-7.85(m，1H)，7.45-7.50(m，1H)。

實施例30A

6-氯-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

將3.00g(11.83mmol)來自實施例29A的5-氯-3-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]吡啶-2-胺和9.73g(59.13mmol)2-氯-3-氧代丁酸乙酯溶解於72ml乙醇中，並且與4.5g分子篩一起在回流下攪拌6天。將混合物冷卻並過濾，將濾液在減壓下濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度＝4/1至2/1)純化。這得到2.0g(理論值的46％)目標化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.07min

MS(ESIpos)：m/z＝364(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.36(t，3H)，2.56(s，3H；與溶劑峰重疊)，4.37(q，2H)，5.48(d，2H)，7.36(d，1H)，7.57-7.63(m，1H)，7.83-7.90(m，1H)，8.50(d，1H)，8.92(d，1H)。

實施例31A

6-氯-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸

將28.1ml(28.1mmol)1M氫氧化鋰水溶液加入2.0g(5.62mmol)來自實施例30A的6-氯-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯於110ml THF/甲醇(5:1)中，並將該混合物在40℃下攪拌2.5h。使用6N鹽酸水溶液，將已冷卻至室溫的反應混合物調節至約pH 4，將溶劑濃縮至其原體積的一半，將沉澱的固體抽濾，並在減壓下乾燥。這得到1.97g(理論值的102％)目標化合物(其中的一些可能為鹽酸鹽的形式)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.65min

MS(ESIpos)：m/z＝336(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝5.43-5.51(m，2H)，7.32(d，1H)，7.57-7.63(m，1H)，7.83-7.91(m，1H)，8.48-8.54(m，1H)，8.96-9.00(m，1H)，13.36(br.s，1H)，[其他的信號在溶劑峰下]。

實施例32A

外消旋-2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊腈

首先將8.0g(57.1mmol)5,5,5-三氟戊-2-酮[CAS登記號：1341078-97-4；市售可得，或甲基酮可以通過本領域技術人員已知的文獻方法製得，例如通過a)根據Y.Bai等人，Angewandte Chemie 2012，51，4112-4116；K.Hiroi等人，Synlett 2001，263-265；K.Mikami等人，1982Chemistry Letters，1349-1352，由4,4,4-三氟丁醛的兩步法；b)或根據A.A.Wube等人，Bioorganic and Medicinal Chemistry 2011，19，567-579；G.M.Rubottom等人，Journal of Organic Chemistry 1983，48，1550-1552；T.Chen等人，Journal of Organic Chemistry 1996，61，4716-4719，由4,4,4-三氟丁酸製得。產物可以通過蒸餾或色譜分離]加入47.8ml 2N在甲醇中的氨中，在室溫下加入3.69g(75.4mmol)氰化鈉和4.03g(75.4mmol)氯化銨，並將該混合物在回流下攪拌4小時。將反應混合物冷卻，加入二乙醚，將存在的固體濾出。在標準壓力下將溶劑從濾液中蒸餾出。得到作為殘餘物的8.7g標題化合物(理論值的92％)，其無需進一步純化用於隨後的階段。

GC-MS(方法H)：Rt＝1.90min

MS(ESpos)：m/z＝151(M-CH3)+

實施例33A

外消旋-(2-氰基-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸苄酯

向實施例32A的8.7g(52.36mmol)外消旋-2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊腈於128ml四氫呋喃/水＝9/1中的初始進料中加入22.43g(162.3mmol)碳酸鉀。在0℃下，緩慢地逐滴加入8.93g(52.36mmol)氯甲酸苄酯。然後，將混合物逐漸溫熱至室溫並在室溫下攪拌過夜。潷析出上層溶劑，將殘餘物攪拌兩次，每次用100ml四氫呋喃，然後每次都潷析出上層溶液。將合併的有機相濃縮，並將粗產物通過矽膠色譜法(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度9/1至4/1)純化。得到11.14g標題化合物(理論值的68％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.01min

MS(ESpos)：m/z＝301(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d[ppm]＝1.58(s，3H)，2.08-2.21(m，2H)，2.24-2.52(m，2H)，5.09(s，2H)，7.29-7.41(m，5H)，8.17(br.s，1H)。

實施例34A

對映異構-(2-氰基-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體A)

將11.14g來自實施例33A的外消旋-(2-氰基-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸苄酯通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Daicel Chiralpak AZ-H，5μm，SFC，250x 50mm，流動相：94％二氧化碳，6％甲醇，流速：200ml/min，溫度：38℃，壓力：135bar；檢測：210nm]。

對映異構體A：4.12g(約79％ee)

Rt＝1.60min[SFC，Daicel Chiralpak AZ-H，250x 4.6mm，5μm，流動相：90％二氧化碳，10％甲醇，流速：3ml/min，溫度：30℃，檢測：220nm]。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.01min

MS(ESpos)：m/z＝301(M+H)+

實施例35A

對映異構-(2-氰基-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)

將11.14g來自實施例33A的外消旋-(2-氰基-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸苄酯通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Daicel Chiralpak AZ-H，5μm，SFC，250x 50mm，流動相：94％二氧化碳，6％甲醇，流速：200ml/min，溫度：38℃，壓力：135bar；檢測：210nm]。

對映異構體B：4.54g(約70％ee，純度約89％)

Rt＝1.91min[SFC，Daicel Chiralpak AZ-H，250x 4.6mm，5μm，流動相：90％二氧化碳，10％甲醇，流速：3ml/min，溫度：30℃，檢測：220nm]。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.01min

MS(ESpos)：m/z＝301(M+H)+

實施例36A

對映異構-(1-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體A)

將4.12g(13.17mmol)來自實施例34A的對映異構-(2-氰基-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體A)溶解於39ml 7N氨的甲醇溶液，並且在氬氣下加入4g雷尼鎳(50％含水漿液)。將反應混合物在高壓釜中、在20-30bar下氫化過夜。再加入1g雷尼鎳(50％含水漿液)，並將反應混合物在高壓釜中、在20-30bar下氫化5h。將反應混合物通過硅藻土過濾，用甲醇衝洗並濃縮。得到3.35g(理論值的56％；純度約67％)標題化合物，其無需進一步純化用於隨後的階段。

LC-MS(方法I)：Rt＝1.68min

MS(ESpos)：m/z＝305(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d[ppm]＝1.13(s，3H)，1.40(br.s，2H)，1.70-1.80(m，1H)，1.83-1.95(m，1H)，2.08-2.2(m，2H)，4.98(s，2H)，6.85(br.s，1H)，7.28-7.41(m，5H)。

實施例37A

對映異構-(1-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)

將4.54g(13.45mmol；純度約89％)來自實施例35A的對映異構-(2-氰基-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)溶解於39ml 7N氨的甲醇溶液，並且在氬氣下加入5g雷尼鎳(50％含水漿液)。將反應混合物在高壓釜中、在20-30bar下氫化3h。將反應混合物通過硅藻土過濾，用甲醇衝洗並濃縮。得到4.20g(理論值的97％；純度約95％)目標化合物，其無需進一步純化用於隨後的階段。

LC-MS(方法K)：Rt＝2.19min

MS(ESpos)：m/z＝305(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d[ppm]＝1.13(s，3H)，1.40(br.s，2H)，1.69-1.80(m，1H)，1.83-1.96(m，1H)，2.07-2.22(m，2H)，4.98(s，2H)，6.85(br.s，1H)，7.27-7.40(m，5H)。

實施例38A

對映異構-{5,5,5-三氟-1-[({8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

首先將70mg(0.20mmol)來自實施例26A的8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸鹽酸鹽、93mg(0.24mmol)HATU和129mg(1.00mmol)N,N-二異丙基乙胺加入1.4ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌20min。隨後，加入100mg(0.31mmol；純度約95％)來自實施例37A的對映異構-(1-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)，並將該混合物在室溫下攪拌過夜。將反應溶液與水混合併在室溫下攪拌45min。將存在的固體濾出，用水很好地洗滌並在高真空下乾燥。將粗產物通過製備型HPLC(RP-C18，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。這得到98mg(理論值的68％)標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.93min

MS(ESpos)：m/z＝602(M-TFA+H)+

實施例39A

對映異構-{1-[({6-氯-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

首先將70mg(0.21mmol)來自實施例31A的6-氯-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸、87mg(0.23mmol)HATU和80mg(0.63mmol)N,N-二異丙基乙胺加入1.3ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌20min。隨後，加入94mg(0.29mmol；純度約95％)來自實施例37A的對映異構-(1-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)，並將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入乙腈、水和TFA，並將反應溶液通過製備型HPLC(RP-C18，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。這得到103mg(理論值的66％)標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.13min

MS(ESpos)：m/z＝622(M-TFA+H)+

實施例40A

{3-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2,2-二氟苄基}氨基甲酸叔丁酯三氟乙酸鹽

首先將100mg(0.30mmol)來自實施例24A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸、149mg(0.39mmol)HATU和117mg(0.90mmol)N,N-二異丙基乙胺加入1.0ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌20min。然後加入82mg(0.39mmol)(3-氨基-2,2-二氟丙基)氨基甲酸叔丁酯，並將該混合物在室溫下攪拌0.5h。加入乙腈、水和TFA，並且將反應溶液通過製備型HPLC(RP-C18，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。這得到93mg(理論值的79％；純度93％)標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.98min

MS(ESpos)：m/z＝525(M-TFA+H)+

實施例41A

外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯

將100mg(0.17mmol)外消旋-{1-[({6-溴-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例5A)、43mg(0.21mmol)1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-1H-吡唑、14mg(0.017mmol)1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)/二氯甲烷絡合物和166mg(0.51mmol)碳酸銫於0.5ml水和2ml二噁烷中的混合物用氬氣脫氣5min，並在封閉的管中在100℃下攪拌18h。將反應混合物冷卻至室溫，並將殘餘物在乙酸乙酯和水之間分配。將有機相分離出，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度0％至50％)純化。這得到50mg目標產物(理論值的50％)。

LC-MS(方法A)：Rt＝3.11min；m/z＝583(M+H)+

1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ[ppm]＝0.95(t，3H)，1.24(s，3H)，1.42(s，9H)，1.57–1.66(m，2H)，1.77–1.86(m，1H)，2.74(s，3H)，3.69–3.82(m，2H)，3.95(s，3H)，4.58(s，1H)，5.30(s，1H)，5.41(s，2H)，6.94(dd，3H)，7.20–7.24(m，1H)，7.34(ddd，1H)，7.67(s，1H)，7.77(s，1H)，9.21(d，1H)。

實施例42A

外消旋-2-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁腈

首先將13.0g(90.10mmol)4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-酮[市售可得或根據R.Acerete等人，Journal of Organic Chemistry 2011，76，10129-10139合成可得]加入25ml 7N氨的甲醇溶液中，在室溫下加入5.83g(118.93mmol)氰化鈉和6.36g(118.93mmol)氯化銨，並將該混合物在回流下攪拌3小時。將反應混合物冷卻，並且將存在的固體濾除。濾液無需進一步純化用於下一步驟。

實施例43A

外消旋-[2-氰基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯

將來自實施例42A的外消旋-2-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁腈粗品溶液加入16ml水中，加入37.36g(270.35mmol)碳酸鉀。在0℃下緩慢地滴加23.06g(135.18mmol)氯甲酸苄酯。然後，將混合物逐漸溫熱至室溫並在室溫下攪拌過夜。將反應混合物過濾，並用四氫呋喃重複洗滌殘餘物。將濾液濃縮，並將粗產物通過矽膠色譜法(流動相：環己烷/乙酸乙酯＝9/1)純化。這得到11.60g標題化合物(經過兩個步驟為理論值的42％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.23min

MS(ESpos)：m/z＝305(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d[ppm]＝-0.01(s，9H)，0.45-0.67(m，2H)，1.52(s，3H)，1.73-1.90(m，2H)，2.24-2.52(m，2H)，5.08(s，2H)，7.29-7.44(m，5H)，7.94(br.s，1H)。

實施例44A

對映異構-[2-氰基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)

將10.0g來自實施例43A的外消旋-[2-氰基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Daicel Chiralpak AY-H，5μm，250x 20mm，流動相：15％乙醇，85％異己烷，流速：20ml/min，溫度：30℃，檢測：220nm]。

對映異構體A：4.19g(>99％ee)

Rt＝5.24min[Daicel Chiralpak AY-H，250x 4.6mm，5μm，流動相：10％乙醇，90％異己烷，流速：1ml/min，溫度：45℃，檢測：220nm]。

實施例45A

對映異構-[2-氰基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)

將10.0g來自實施例43A的外消旋-[2-氰基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Daicel Chiralpak AY-H，5μm，250x 20mm，流動相：15％乙醇，85％異己烷，流速：20ml/min，溫度：30℃，檢測：220nm]。

對映異構體B：4.24g(>99％ee)

Rt＝6.89min[Daicel Chiralpak AY-H，250x 4.6mm，5μm，流動相：10％乙醇，90％異己烷，流速：1ml/min，溫度：45℃，檢測：220nm]。

實施例46A

對映異構-[1-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)

將2.0g(6.57mmol)來自實施例44A的對映異構-[2-氰基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)溶解於31ml 7N氨的甲醇溶液，並在氬氣下加入2.44g雷尼鎳(50％含水漿液)。將反應混合物在高壓釜中、在20-30bar下氫化3h。將反應混合物通過硅藻土過濾，用甲醇衝洗並濃縮。這得到1.80g(理論值的87％；純度98％)目標化合物，其無需進一步純化用於下一步。

LC-MS(方法M)：Rt＝1.66min

MS(ESpos)：m/z＝309(M+H)+

實施例47A

對映異構-[1-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)

將2.0g(6.57mmol)來自實施例45A的對映異構-[2-氰基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)溶解於31ml 7N氨的甲醇溶液，並在氬氣下加入2.44g雷尼鎳(50％含水漿液)。將反應混合物在高壓釜中、在20-30bar下氫化3h。將反應混合物通過硅藻土過濾，用甲醇衝洗並濃縮。這得到1.72g(理論值的83％；純度98％)目標化合物，其無需進一步純化用於下一步。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.78min

MS(ESpos)：m/z＝309(M+H)+

實施例48A

對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體A)

將100mg(0.30mmol)8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同149mg(0.39mmol)HATU和157μl(0.90mmol)N,N-二異丙基乙胺於0.99ml DMF中的初始進料在室溫下攪拌20min。然後加入123mg(0.39mmol，純度98％)來自實施例46A的對映異構-[1-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)，並將反應溶液在室溫下攪拌2小時。然後加入19mg(0.06mmol)來自實施例46A的對映異構-[1-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)，並將該混合物在室溫下再攪拌2小時。將反應溶液溶於乙腈、水和TFA中，並通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併、濃縮並在高真空下乾燥。這得到151mg目標化合物(理論值的66％，純度97％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.30min

MS(ESpos)：m/z＝623(M-TFA+H)+

實施例49A

對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

將100mg(0.30mmol)8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同149mg(0.39mmol)HATU和157μl(0.90mmol)N,N-二異丙基乙胺於0.99ml DMF中的初始進料在室溫下攪拌20min。然後加入123mg(0.39mmol，純度98％)來自實施例47A的對映異構-[1-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)，並將反應溶液在室溫下攪拌2小時。然後加入19mg(0.06mmol)來自實施例47A的對映異構-[1-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)，並將該混合物在室溫下再攪拌2小時。將反應溶液溶於乙腈、水和TFA中，並通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併、濃縮並在高真空下乾燥。這得到168mg目標化合物(理論值的75％，純度99％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.28min

MS(ESpos)：m/z＝623(M-TFA+H)+

實施例50A

外消旋-2-氨基-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊腈

首先將24.8g(156.6mmol)5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-酮加入45ml 7N氨的甲醇溶液中，在室溫下加入10.1g(206.8mmol)氰化鈉和10.9g(203.6mmol)氯化銨，並將該混合物在回流下攪拌3小時。將反應溶液冷卻，加入100ml THF，將固體濾出，並用THF洗滌兩次。濾液無需進一步純化用於下一步。

實施例51A

外消旋-[2-氰基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯

首先將來自實施例50A的外消旋-2-氨基-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊腈的粗品溶液加入50ml水中，並加入64.95g(469.95mmol)碳酸鉀。在0℃下，緩慢逐滴加入33.55ml(234.98mmol)氯甲酸苄酯。然後將混合物逐漸溫熱至室溫，並在室溫下攪拌過夜。濾出反應混合物，用THF重複洗滌殘餘物。將濾液濃縮，並將殘餘物通過矽膠色譜法(流動相：環己烷/乙酸乙酯＝20/1)純化。這得到29.0g標題化合物(理論值的58％)。

LC-MS(方法H)：Rt＝7.16min

MS(ESpos)：m/z＝183(M-C6H5CH2CO2[Cbz])

實施例52A

對映異構-[2-氰基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)

將8.49g來自實施例51A的外消旋-[2-氰基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Chiralcel OD-H 5μm 250x 50mm；流動相：94％二氧化碳，6％異丙醇，流速：175ml/min，溫度：38℃，檢測：210nm]。

對映異構體A：3.53g(>99％ee)

Rt＝1.21min[Chiralcel OD-3，100x 4.6mm，5μm，流動相：90％二氧化碳，10％異丙醇，流速：3ml/min，溫度：40℃，檢測：210nm]。

實施例53A

對映異構-[2-氰基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)

將8.49g來自實施例51A的外消旋-[2-氰基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Chiralcel OD-H 5μm 250x 50mm；流動相：94％二氧化碳，6％異丙醇，流速：175ml/min，溫度：38℃，檢測：210nm]。

對映異構體B：3.53g(>98％ee)

Rt＝1.35min[Chiralcel OD-3，100x 4.6mm，5μm，流動相：90％二氧化碳，10％異丙醇，流速：3ml/min，溫度：40℃，檢測：210nm]。

實施例54A

對映異構-[1-氨基-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)

將2.50g(7.61mmol，純度97％)來自實施例52A的對映異構-[2-氰基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)溶解於36ml 7N氨的甲醇溶液中，並在氬氣下加入2.83g雷尼鎳(50％含水漿液)。將反應混合物在高壓釜中、在25bar下氫化3h。將反應混合物通過硅藻土過濾，用甲醇洗滌並濃縮。這得到1.14g(理論值的45％，純度98％)目標化合物。

LC-MS(方法O)：Rt＝1.42min

MS(ESpos)：m/z＝323(M+H)+

實施例55A

對映異構-[1-氨基-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)

將2.50g(7.61mmol，純度97％)來自實施例53A的對映異構-[2-氰基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)溶解於36ml 7N氨的甲醇溶液中，並在氬氣下加入2.83g雷尼鎳(50％含水漿液)。將反應混合物在高壓釜中、在20-30bar下氫化3h。將反應混合物通過硅藻土過濾，用甲醇洗滌並濃縮。這得到2.34g(理論值的84％；純度88％)目標化合物。

LC-MS(方法O)：Rt＝1.41min

MS(ESpos)：m/z＝323(M+H)+

實施例56A

對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)-氨基]-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體A)

首先將100mg(0.30mmol)來自實施例24A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同120mg(0.32mmol)HATU和262μl(1.51mmol)N,N-二異丙基乙胺加入1.0ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌10min。然後加入107mg(0.33mmol)來自實施例54A的對映異構-[1-氨基-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體A)，將反應溶液在室溫下攪拌過夜。然後將混合物用乙腈和水稀釋，加入TFA，並將該混合物通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。這得到149mg目標化合物(理論值的65％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.29min

MS(ESpos)：m/z＝637(M-TFA+H)+

實施例57A

對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)-氨基]-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

首先將100mg(0.30mmol)來自實施例24A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同120mg(0.32mmol)HATU和262μl(1.51mmol)N,N-二異丙基乙胺加入1.0ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌10min。然後加入121mg(0.33mmol，純度88％)來自實施例55A的對映異構-[1-氨基-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基]氨基甲酸苄酯(對映異構體B)，並將反應溶液在室溫下攪拌過夜。然後將混合物用乙腈和水稀釋，加入TFA，並將該混合物通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。這得到189mg目標化合物(理論值的83％)。

LC-MS(方法O)：Rt＝2.58min

MS(ESpos)：m/z＝637(M-TFA+H)+

實施例58A

3-氧代環丁腈

首先將25.0g(268.4mmol)3-亞甲基環丁腈和1.23g(5.91mmol)氯化釕(III)加入500ml二氯甲烷、500ml乙腈和800ml水中。然後在冰冷卻下，以每次少量的方式將235.4g(1100.6mmol)高碘酸鈉加入，且將該混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物過濾並用二氯甲烷萃取水相。將合併的有機相通過用少量二氯甲烷/甲醇(20/1)洗滌的短矽膠玻璃料進行洗脫，並將濾液濃縮。將殘餘物用200ml二氯甲烷稀釋，並且先用飽和硫酸鈉水溶液洗滌，然後再用飽和氯化鈉水溶液洗滌。將有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將油性殘餘物用100ml冷的二乙醚攪拌，並且將沉澱的固體濾除並用少量冷的二乙醚洗滌。這得到13.61g(理論值的53％)標題化合物。將母液濃縮並冷卻，並且將沉澱的固體抽濾出並使用少量的二乙醚洗滌。這再得到0.96g(理論值的4％)標題化合物。

GC-MS(方法H)：Rt＝2.76min

MS(ESpos)：m/z＝95(M)+

實施例59A

3,3-二氟環丁腈

在氬氣下，首先將14.57g(153.2mmol)來自實施例58A的3-氧代環丁腈加入200ml無水二氯甲烷中，在0℃下，加入40.48ml(306.4mmol)溶解於50ml二氯甲烷的二乙基氨基三氟化硫，並將該混合物在室溫下攪拌過夜。然後以每次少量的方式，將反應混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中，冷卻至0℃，並攪拌30分鐘。將有機相分離出，水相用200ml二氯甲烷萃取。將合併的有機相用水洗滌兩次，經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到15.2g(理論值的85％)的標題化合物。

GC-MS(方法H)：Rt＝1.43min

MS(ESpos)：m/z＝98(M-F)+

實施例60A

3-(3,3-二氟環丁基)-3-氧代丙酸乙酯

在氬氣下，首先將0.208ml(3.20mmol)甲磺酸加入80ml無水THF中，加入20.93g(320.2mmol)鋅，並將該混合物在回流下攪拌10min。加入15.0g(128.1mmol)來自實施例59A的3,3-二氟環丁腈，並將該混合物在回流下再攪拌10min。將加熱浴關掉，在2.5小時內逐滴加入28.41ml(256.2mmol)溴代乙酸乙酯於30ml無水THF中的溶液。將混合物在回流下攪拌15min，然後使其在室溫下靜置過夜。在冰冷卻下，逐滴加入100ml 10％濃度鹽酸水溶液，並且將該混合物攪拌過夜並使其溫熱至室溫。加入500ml水，並將混合物萃取三次，每次用150ml乙酸乙酯。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。在高真空下乾燥後，將殘餘物通過矽膠色譜法(環己烷/乙酸乙酯＝9/1)純化。這得到4.37g(理論值的12％，純度約76％)標題化合物。

GC-MS(方法H)：Rt＝3.43min

MS(ESpos)：m/z＝206(M)+

實施例61A

2-氯-3-(3,3-二氟環丁基)-3-氧代丙酸乙酯

在氬氣下，將4.37g(16.1mmol，純度約76％)來自實施例60A的3-(3,3-二氟環丁基)-3-氧代丙酸乙酯溶解於30.2ml無水二氯甲烷中，並加入1.94ml(24.2mmol)磺醯氯。然後將該混合物在室溫下攪拌過夜。將反應溶液用100ml乙酸乙酯稀釋，並且先用50ml水洗滌，然後再用50ml飽和氯化鈉水溶液洗滌。將有機相經硫酸鈉乾燥、過濾，並將濾液濃縮。在高真空下短暫乾燥後，將殘餘物通過矽膠色譜法(環己烷/乙酸乙酯＝10/1)純化。這得到3.25g(理論值的68％，純度81％)標題化合物。

GC-MS(方法H)：Rt＝3.75min

MS(ESpos)：m/z＝240(M)+

實施例62A

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(3,3-二氟環丁基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3甲酸乙酯

將400mg(1.60mmol)3-[(2,6-二氟苄基)氧基]-5-甲基吡啶-2-胺溶解於15ml乙醇中，並加入950mg(3.12mmol，純度81％)來自實施例61A的2-氯-3-(3,3-二氟環丁基)-3-氧代丙酸乙酯和636mg 3A分子篩。然後將反應混合物在微波中、150℃下攪拌4小時。加入475mg(1.60mmol，純度81％)來自實施例61A的2-氯-3-(3,3-二氟環丁基)-3-氧代丙酸乙酯，並將該混合物在微波中、150℃下再攪拌2小時。將反應懸浮液用50ml環己烷稀釋並過濾。將濾液濃縮、在高真空下乾燥，並且通過矽膠色譜法(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度：50/1至5/1)純化。這得到127mg目標化合物(理論值的18％，純度99％)。將過濾殘餘物用乙酸乙酯萃取兩次並濾除，並且將濾液濃縮且在高真空下乾燥。這再得到206mg目標化合物(理論值的29％，純度99％)。

LC-MS(方法N)：Rt＝1.67min

MS(ESpos)：m/z＝437(M+H)+

實施例63A

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(3,3-二氟環丁基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸

將330mg(0.75mmol)來自實施例62A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(3,3-二氟環丁基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯溶解於4ml THF中，加入54mg(2.25mmol)在2.2ml水中的氫氧化鋰，將混合物在室溫下攪拌過夜。再加入54mg(2.25mmol)在2.2ml水中的氫氧化鋰，並將該混合物在50℃下攪拌一小時。加入1.87ml 2N氫氧化鈉水溶液和4ml二噁烷/甲醇(1:1)，並將該混合物在50℃下攪拌2.5小時。將反應混合物稍微濃縮，並用1N鹽酸水溶液酸化。將形成的固體濾出，用少量的水和二乙醚洗滌，並在高真空下乾燥。這得到219mg(理論值的69％，純度97％)標題化合物。

LC-MS(方法N)：Rt＝1.31min

MS(ESpos)：m/z＝409(M+H)+

實施例64A

對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(3,3-二氟環丁基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

首先將30mg(0.071mmol，純度97％)來自實施例63A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(3,3-二氟環丁基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同30mg(0.078mmol)HATU和62μl(0.36mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.3ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌20min。將30mg(0.086mmol；純度88％)來自實施例37A的對映異構-(1-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)加入反應溶液中，並將該混合物在室溫下攪拌2h。加入乙腈、水和TFA，並將反應溶液通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的甲醇/水梯度)純化。將產物級分合併並濃縮。這得到55mg目標化合物(理論值的89％，純度93％)。

LC-MS(方法N)：Rt＝1.64min

MS(ESpos)：m/z＝695(M-TFA+H)+

實施例65A

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-異丙基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

在氬氣下，首先將1.50g(5.99mmol)3-[(2,6-二氟苄基)氧基]-5-甲基吡啶-2-胺加入30ml乙醇中，加入9.24g(47.95mmol)2-氯-4-甲基-3-氧代戊酸乙酯[已知於文獻，例如WO2006/91506，實施例N，步驟1]和0.30g分子篩3A，並將該混合物在回流下攪拌5天。將反應溶液濃縮，並加入100ml水和100ml乙酸乙酯。將水相用乙酸乙酯再萃取，並且將合併的有機相干燥並濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法(流動相：環己烷/乙酸乙酯，梯度＝95/5至9/1至8/2)純化。這得到0.60g(理論值的26％)標題化合物。

LC-MS(方法L)：Rt＝2.64min

MS(ESpos)：m/z＝389(M+H)+

實施例66A

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-異丙基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸

將0.60g(1.54mmol)來自實施例65A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-異丙基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯溶解於28.2ml THF、5.64ml甲醇和7.56ml水中，加入0.324g(7.72mmol)氫氧化鋰一水合物，並將該混合物在室溫下攪拌16小時。然後將反應混合物在40℃下攪拌4小時。在旋轉蒸發器上除去有機溶劑，並使用半濃縮的鹽酸水溶液將水溶液調節至pH 2。然後用二氯甲烷/甲醇萃取混合物，將合併的有機相干燥、過濾，並將濾液濃縮。這得到170mg(理論值的31％)標題化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.86min

MS(ESpos)：m/z＝361(M+H)+

實施例67A

對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-異丙基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

首先將50mg(0.139mmol)來自實施例66A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-異丙基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同58mg(0.153mmol)HATU和73μl(0.416mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.41ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌10min。將51mg(0.166mmol)來自實施例37A的對映異構-(1-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)加入反應溶液中，並將混合物在室溫下攪拌過夜。加入TFA和甲醇，並將反應溶液通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併、濃縮和凍幹。這得到37mg目標化合物(理論值的35％)。

LC-MS(方法N)：Rt＝1.47min

MS(ESpos)：m/z＝647(M-TFA+H)+

實施例68A

8-((2,6-二氟苄基)氧基)-2-羥基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙基

將2.7g(32.0mmol)碳酸氫鈉加入4.0g(16.0mmol)3-[(2,6-二氟苄基)氧基]-5-甲基吡啶-2-胺[記載於WO2014/068099，實施例編號323A]和13.6ml(9.0mmol)2-溴丙二酸二乙酯於30ml乙腈中的混合物中，並將反應混合物在80℃下攪拌4小時。冷卻至室溫後，除去溶劑，並加入水和二乙醚。將該混合物過濾，將所得固體用水和二乙醚洗滌並在減壓下乾燥。這得到4.33g目標化合物(理論值的75％)。

1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝8.79(s，1H)，7.62-7.52(m，1H)，7.24-7.18(m，3H)，5.30(s，2H)，4.23(q，2H)，2.35(s，3H)，1.27(t，3H)。

實施例69A

2-氯-8-((2,6-二氟苄基)氧基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

將7.7ml(82.8mmol)磷醯氯加入3g(8.3mmol)來自實施例68A的8-[(2,6-二氟苯基)甲氧基]-2-羥基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯中，並將反應混合物在110℃下、在壓力管中加熱6天。冷卻至室溫後，在減壓下蒸發磷醯氯，並向殘餘物中緩慢地加入水，反應混合物在冰浴中冷卻。將有機組分用乙酸乙酯萃取，並將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法(流動相：二氯甲烷)純化。這得到840mg目標產物(理論值的24％)。

1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝8.71(s，1H)，7.61-7.55(m，1H)，7.25-7.19(m，3H)，5.31(s，2H)，4.36(q，2H)，2.38(s，3H)，1.34(t，3H)。

實施例70A

8-((2,6-二氟苄基)氧基)-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯

將3.62g(13.1mmol)碳酸銀和0.90ml(14.4mmol)碘甲烷加入4.76g(13.1mmol)來自實施例68A的8-[(2,6-二氟苯基)甲氧基]-2-羥基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯於95ml DMF中的懸浮液中，並將反應混合物在室溫下、在黑暗中攪拌16小時。加入水，並將有機組分用二氯甲烷萃取。將合併的有機相用水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物在矽膠上通過色譜法(流動相：二氯甲烷)純化。這得到2.6g目標產物(理論值的52％)。

1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝8.73(s，1H)，7.60-7.55(m，1H)，7.26-7.15(m，3H)，5.29(s，2H)，4.27(q，2H)，3.95(s，3H)，2.35(s，3H)，1.27(t，3H)。

實施例71A

2-氯-8-((2,6-二氟苄基)氧基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸

將8.6ml(8.6mmol)1M氫氧化鈉水溶液逐滴加入820mg(2.2mmol)來自實施例69A的2-氯-8-[(2,6-二氟苯基)甲氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯於8ml甲醇和8ml THF混合物中的懸浮液中，並將該反應混合物在室溫下攪拌24小時。將溶劑蒸發，然後加入水。通過加入1M鹽酸溶液將水相酸化至pH 2，並用乙酸乙酯萃取產物。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到480mg目標化合物(理論值的63％)。

LC-MS(方法P)：Rt＝1.31min；m/z＝353(M+H)+

1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝8.76(s，1H)，7.63-7.53(m，1H)，7.26-7.20(m，3H)，5.30(s，2H)，2.37(s，3H)。

實施例72A

8-((2,6-二氟苄基)氧基)-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸

將10.6ml(10.63mmol)1M氫氧化鈉水溶液加入2.0g(5.31mmol)來自實施例70A的8-[(2,6-二氟苯基)甲氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯於25ml DMSO中的懸浮液中，並將反應混合物在60℃下攪拌10小時。冷卻至室溫後，緩慢地加入1M鹽酸溶液以將混合物的pH調節至1-2。將形成的固體濾除，用水洗滌並乾燥。這得到1.72g目標化合物(理論值的93％)。

LC-MS(方法P)：Rt＝1.32min；m/z＝349(M+H)+

1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝12.44(br.s，1H)，8.75(s，1H)，7.60-7.52(m，1H)，7.25-7.17(m，2H)，7.11(s，1H)，5.29(s，2H)，3.93(s，3H)，2.34(s，3H)。

實施例73A

對映異構-{1-[({2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

首先將50mg(0.142mmol)來自實施例71A的2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同70mg(0.184mmol)HATU和123μl(0.709mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.47ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌20min。將59mg(0.184mmol；純度95％)來自實施例37A的對映異構-(1-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)加入反應溶液中，並將該混合物在室溫下攪拌45分鐘。加入乙腈、水和TFA，並將反應溶液通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。這得到72mg目標化合物(理論值的67％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.30min

MS(ESpos)：m/z＝639(M-TFA+H)+

實施例74A

對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

首先將60mg(0.064mmol，純度37％)來自實施例72A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同29mg(0.076mmol)HATU和33μl(0.191mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.40ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌20min。將38mg(0.159mmol)對映異構-(1-氨基-2-甲基丁-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)[記載於WO2014/068099，實施例編號275A]加入反應溶液中，並將該混合物在60℃下攪拌30分鐘。將反應溶液通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。這得到34mg目標化合物(理論值的78％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.33min

MS(ESpos)：m/z＝567(M-TFA+H)+

實施例75A

對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)

首先將50mg(0.144mmol)來自實施例72A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同71mg(0.187mmol)HATU和125μl(0.718mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.48ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌20min。將60mg(0.187mmol；純度95％)來自實施例37A的對映異構-(1-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基)氨基甲酸苄酯(對映異構體B)加入反應溶液中，並將該混合物在室溫下攪拌45分鐘。加入乙腈、水和TFA，並將反應溶液通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。這得到50mg目標化合物(理論值的46％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.31min

MS(ESpos)：m/z＝635(M-TFA+H)+

工作實施例：

實施例1

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(吡啶-3-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺

將1ml三氟乙酸加入90mg(0.15mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(吡啶-3-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例6A)於4ml二氯甲烷中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物通過在SCX-2矽膠上的色譜法(流動相：甲醇，然後20％(2M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液)純化。這得到51mg目標產物(理論值的69％)。

LC-MS(方法B)：Rt＝2.47min；m/z＝480.2(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.82(t，3H)，0.94(s，3H)，1.26–1.37(m，2H)，1.48(s，2H)，2.53(s，3H)，3.12(d，1H)，3.19(d，1H)，5.41(s，2H)，7.21(t，2H)，7.37(d，1H)，7.49(ddd，1H)，7.55(ddd，1H)，7.70(s，1H)，8.10(ddd，1H)，8.58(dd，1H)，8.90–8.93(m，2H)。

實施例2

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-6-環丙基-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺鹽酸鹽

將1ml三氟乙酸加入56mg(0.10mmol)外消旋-{1-[({6-環丙基-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例7A)於4ml二氯甲烷中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1h並在減壓下濃縮。將殘餘物通過在SCX-2矽膠上的色譜法(流動相：甲醇，然後20％(2M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液)純化。這得到目標產物的游離鹼。將其溶於乙腈(0.5ml)和0.1N鹽酸水溶液(2ml)中並凍幹，得到20mg(理論值的40％)目標產物。

LC-MS(方法B)：Rt＝2.71min；m/z＝443.2(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.81–0.85(m，2H)，0.90(t，3H)，0.98–1.03(m，2H)，1.22(s，3H)，1.58-1.68(m，2H)，2.05–2.12(m，1H)，2.58(s，3H)，3.36–3.50(m，2H)，5.43(s，2H)，7.17–7.25(m，3H)，7.52–7.60(m，1H)，8.08(s，3H)，8.52(s，1H)，8.87(s，1H)。

實施例3

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1H-吡唑-1-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺鹽酸鹽

將將1ml三氟乙酸加入15mg(0.10mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1H-吡唑-1-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例8A)於4ml二氯甲烷中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物通過在SCX-2矽膠上的色譜法(流動相：甲醇，然後20％(2M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液)並通過製備型LC-MS(方法G)純化。這得到目標產物的游離鹼。將其溶於乙腈(0.5ml)和0.1N鹽酸水溶液(2ml)並凍幹，得到3mg(理論值的23％)目標產物。

LC-MS(方法B)：Rt＝2.92min；m/z＝469.2(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.91(t，3H)，1.22(s，3H)，1.58–1.70(m，2H)，2.59(s，3H)，3.39–3.60(m，2H)，5.47(s，2H)，6.60(t，1H)，7.23(t，2H)，7.58(ddd，1H)，7.79(d，1H)，7.82(s，1H)，7.97(s，3H)，8.39(s，1H)，8.61(d，1H)。

實施例4

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-(甲氧基甲基)-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺鹽酸鹽

將1ml三氟乙酸加入60mg(0.11mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-(甲氧基甲基)-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例9A)於4ml二氯甲烷中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1h並在減壓下濃縮。將殘餘物通過在SCX-2矽膠上的色譜法(流動相：甲醇，然後20％(2M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液)並通過製備型LC-MS(方法G)純化。將殘餘物溶於乙腈(0.5ml)和0.1N鹽酸水溶液(2ml)並凍幹，得到28mg目標產物(理論值的53％)。

LC-MS(方法B)：Rt＝2.50min；m/z＝447.2(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.91(t，3H)，1.21(s，3H)，1.63(dd，2H)，2.60(s，3H)，3.32(s，3H)，3.42–3.55(m，2H)，4.49(s，2H)，5.37(s，2H)，7.21(t，2H)，7.38(s，1H)，7.56(ddd，1H)，8.08(s，3H)，8.59(s，1H)，8.65(s，1H)。

實施例5

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-(二氟甲氧基)-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺

將1ml三氟乙酸加入13mg(0.02mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-(二氟甲氧基)-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例12A)於4ml二氯甲烷中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1h並在減壓下濃縮。將殘餘物通過在SCX-2矽膠上的色譜法(流動相：甲醇，然後20％(2M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液)並通過製備型LC-MS(方法G)純化。這得到7mg標題化合物(理論值的65％)。

LC-MS(方法B)：Rt＝3.05min；m/z＝469(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.82(t，3H)，0.92(s，3H)，1.24–1.40(m，4H)，2.51(s，3H)，3.16(dd，2H)，5.29(s，2H)，7.06(d，1H)，7.19(t，1H)，7.20(t，2H)，7.51–7.69(m，2H)，8.66(d，1H)。

實施例6

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺

將1ml三氟乙酸加入57mg(0.10mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例41A)於4ml二氯甲烷中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1h並在減壓下濃縮。將殘餘物通過在SCX-2矽膠上的色譜法(流動相：甲醇，然後20％(2M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液)純化。這得到20mg目標產物(理論值的40％)。

LC-MS(方法B)：Rt＝2.51min；m/z＝483(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.83(t，3H)，0.95(s，3H)，1.29–1.37(m，2H)，1.63-1.64(m，2H)，2.50(s，3H)，3.11–3.21(m，2H)，3.84(s，3H)，5.35(s，2H)，7.17–7.22(m，3H)，7.55(ddd，1H)，7.63(s，1H)，7.83(s，1H)，8.16(s，1H)，8.80(d，1H)。

實施例7

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1,3-噁唑-5-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺

將1ml三氟乙酸加入43mg(0.08mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基-6-(1,3-噁唑-5-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例13A)於4ml二氯甲烷中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌1h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物通過在SCX-2矽膠上的色譜法(流動相：甲醇，然後20％(2M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液)並通過製備型LC-MS(方法G)純化。這得到11mg目標產物(理論值的31％)。

LC-MS(方法B)：Rt＝2.73min；m/z＝470(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.83(t，3H)，0.94(s，3H)，1.28–1.40(m，4H)，2.52(s，3H)，3.18(dd，2H)，5.37(s，2H)，7.21(dd，2H)，7.37(d，1H)，7.51–7.61(m，1H)，7.67(s，1H)，7.74(s，1H)，8.45(s，1H)，9.00(d，1H)。

實施例8

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(甲氧基甲基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺鹽酸鹽

將258mg(0.47mmol)外消旋-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(甲氧基甲基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸叔丁酯(實施例16A)於2ml三氟乙酸和8ml二氯甲烷中的溶液在室溫下攪拌18h，然後在減壓下濃縮。將殘餘物通過在SCX-2矽膠上的色譜法(流動相：甲醇，然後20％(2M氨的甲醇溶液)的二氯甲烷溶液)並通過製備型LC-MS(方法G)純化，並轉化成相應的鹽酸鹽。這得到150mg目標產物(理論值的70％)。

LC-MS(方法B)：Rt＝2.43min；m/z＝447(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.82(t，3H)，1.13(s，3H)，1.55(tdd，2H)，2.37(s，3H)，3.19-3.28(m，2H)，3.73(s，2H)，4.02(s，3H)，5.35(s，2H)，7.22(t，2H)，7.58(ddd，1H)，8.06(s，4H)，8.53(s，1H)。

實施例9

對映異構-N-(2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊基)-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將98mg(0.14mmol)來自實施例38A的對映異構-{5,5,5-三氟-1-[({8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)和4.4mg10％負載於活性碳上的鈀於3.5ml乙醇中的混合物在室溫和標準壓力下氫化45min。再加入15mg 10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在室溫和標準壓力下再氫化1h。隨後，將混合物通過微孔濾器過濾並用乙醇洗滌，並將濾液濃縮。將粗產物通過製備型HPLC(RP-C18，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分溶於二氯甲烷中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到18mg標題化合物(理論值的28％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.58min

MS(ESpos)：m/z＝468(M+H)+

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：d[ppm]＝1.03(s，3H)，1.49-1.59(m，2H)，1.78(br.s，2H)，2.26-2.48(m，5H)，2.50(s，3H；overlapped by solvent peak)，3.18-3.32(m，2H)，5.39(s，2H)，6.89(s，1H)，7.57-7.61(m，1H)，7.74-7.88(m，2H)，8.40(s，1H)，8.50(d，1H)。

實施例10

對映異構-N-(2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊基)-6-氯-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將103mg(0.14mmol)來自實施例39A的對映異構-{1-[({6-氯-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)和4.4mg 10％負載在活性碳上的鈀於3.5ml乙醇中的混合物在室溫和標準壓力下氫化45min。隨後，將混合物通過微孔濾器過濾並用乙醇洗滌，並將濾液濃縮。將粗產物通過製備型HPLC(RP-C18，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分溶於二氯甲烷和少量的甲醇中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並通過蒸發濃縮。這得到16mg標題化合物(理論值的23％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.65min

MS(ESpos)：m/z＝488(M+H)+

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：d[ppm]＝1.02(s，3H)，1.48-1.57(m，2H)，1.63(br.s，2H)，2.27-2.47(m，2H)，2.50(s，3H；被溶劑峰重疊)，3.18-3.31(m，2H)，5.48(s，2H)，7.18(s，1H)，7.57-7.62(m，1H)，7.83-7.92(m，2H)，8.51(d，1H)，8.69(s，1H)。

實施例11

對映異構-N-(2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊基)-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將103mg(0.14mmol)來自實施例39A的對映異構-{1-[({6-氯-8-[(3-氟吡啶-2-基)甲氧基]-2-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)和4.4mg 10％負載在活性碳上的鈀於3.5ml乙醇中的混合物在室溫和標準壓力下氫化45min。隨後，將混合物通過微孔濾器過濾並用乙醇洗滌，並將濾液濃縮。將粗產物通過製備型HPLC(RP-C18，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分溶於二氯甲烷和少量甲醇中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並通過蒸發濃縮。這得到11mg標題化合物(理論值的17％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.50min

MS(ESpos)：m/z＝454(M+H)+

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：d[ppm]＝1.02(s，3H)，1.48-1.57(m，2H)，1.63(br.s，2H)，2.26-2.47(m，2H)，2.56(s，3H；與溶劑峰部分地重疊)，3.19-3.31(m，2H)，5.42(s，2H)，6.90(t，1H)，6.99(d，1H)，7.56-7.62(m，1H)，7.77-7.87(m，2H)，8.48(d，1H)，8.58(d，1H)。

實施例12

N-(3-氨基-2,2-二氟丙基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺

將163mg(0.24mmol，純度93％)來自實施例40A的{3-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2,2-二氟丙基}氨基甲酸叔丁酯三氟乙酸鹽溶解於1.0ml二乙醚中，並加入1.2ml 2N氯化氫的二乙醚溶液。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物濃縮、溶解於乙腈/水中，加入TFA，並將產物通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將濃縮的產物級分溶解於二氯甲烷中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到96mg目標化合物(理論值的94％)。

LC-MS(方法L)：Rt＝1.49min

MS(ESpos)：m/z＝425(M+H)+

1H-NMR(600MHz，DMSO-d6)：d[ppm]＝1.78(br.s，2H)，2.31(s，3H)，2.50(s，3H；與溶劑峰重疊)，2.91(t，2H)，3.79-3.86(m，2H)，5.29(s，2H)，6.94(s，1H)，7.20-7.25(m，2H)，7.56-7.62(m，1H)，8.19(t，1H)，8.40(s，1H)。

實施例13

對映異構-N-[2-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁基]-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體A)

將151mg(0.20mmol，純度97％)來自實施例48A的對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體A)溶解於5.2ml乙醇中，在氬氣下加入77μl(0.99mmol)TFA和6.3mg(0.006mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化2小時。將反應溶液用微孔濾器過濾並用乙醇洗滌，並且將濾液濃縮。將殘餘物溶於乙腈、水和TFA中，並通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。隨後，將殘餘物溶於二氯甲烷和少量甲醇中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將水相用二氯甲烷重複萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到83mg目標化合物(理論值的84％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.78min

MS(ESpos)：m/z＝489(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d＝-0.04(s，9H)，0.45-0.56(m，2H)，0.97(s，3H)，1.26-1.34(m，2H)，1.42(br.s，2H)，2.30(s，3H)，3.15-3.30(m，2H)，5.29(s，2H)，6.91(s，1H)，7.18-7.28(m，2H)，7.54-7.64(m，2H)，8.47(s，1H)，[其他信號隱藏在溶劑信號下]。

實施例14

對映異構-N-[2-氨基-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁基]-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將168mg(0.23mmol，純度99％)來自實施例49A的對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基-4-(三甲基甲矽烷基)丁-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)溶解於5.9ml乙醇中，並且在氬氣下加入87μl(1.13mmol)TFA和7.2mg(0.007mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化2小時。將反應溶液用微孔濾器過濾並用乙醇洗滌，並將濾液濃縮。將反應溶液溶於乙腈、水和TFA中，並通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。隨後，將殘餘物溶於二氯甲烷和少量甲醇中，並用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到88mg目標化合物(理論值的78％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.75min

MS(ESpos)：m/z＝489(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d＝-0.04(s，9H)，0.45-0.58(m，2H)，0.98(s，3H)，1.25-1.39(m，2H)，1.90(br.s，2H)，2.30(s，3H)，3.17-3.30(m，2H)，5.29(s，2H)，6.91(s，1H)，7.19-7.27(m，2H)，7.54-7.64(m，2H)，8.47(m，1H)，[其他信號隱藏在溶劑信號下]。

實施例15

對映異構-N-[2-氨基-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊基]-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體A)

將149mg(0.20mmol)來自實施例56A的對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體A)溶解於6.7ml乙醇中，並且在氬氣下加入76μl(0.98mmol)TFA和2mg(0.002mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化2小時。將反應溶液用微孔濾器過濾並用乙醇洗滌，並將濾液濃縮。將反應溶液溶於乙腈、水和TFA中，並通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。隨後，將殘餘物溶於二氯甲烷和少量甲醇中，並用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到69mg目標化合物(理論值的69％)。

LC-MS(方法O)：Rt＝1.41min

MS(ESpos)：m/z＝503(M+H)+

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：d＝-0.03(s，9H)，0.41-0.48(m，2H)，0.99(s，3H)，1.29-1.42(m，4H)，1.53(br.s，2H)，2.30(s，3H)，3.16-3.24(m，2H)，5.29(s，2H)，6.91(s，1H)，7.19-7.27(m，2H)，7.53-7.63(m，2H)，8.48(s，1H)，[其他信號隱藏在溶劑信號下]。

實施例16

對映異構-N-[2-氨基-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊基]-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將189mg(0.25mmol)來自實施例57A的對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基-5-(三甲基甲矽烷基)戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)溶解於8.5ml乙醇中，並且在氬氣下加入96μl(1.25mmol)TFA和2.7mg(0.002mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化2小時。將反應溶液用微孔濾器過濾並用乙醇洗滌，並將濾液濃縮。將反應溶液溶於乙腈、水和TFA中，並通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。隨後，將殘餘物溶於二氯甲烷和少量甲醇中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到93mg目標化合物(理論值的74％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.84min

MS(ESpos)：m/z＝503(M+H)+

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：d＝-0.03(s，9H)，0.41-0.48(m，2H)，0.99(s，3H)，1.29-1.42(m，4H)，1.48(br.s，2H)，2.31(s，3H)，3.16-3.23(m，2H)，5.29(s，2H)，6.91(s，1H)，7.19-7.27(m，2H)，7.54-7.63(m，2H)，8.48(s，1H)，[其他信號隱藏在溶劑信號下]。

實施例17

對映異構-N-(2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(3,3-二氟環丁基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將48mg(0.059mmol)來自實施例64A的對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-(3,3-二氟環丁基)-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)溶解於7ml乙醇中，並且在氬氣下加入14μl(0.178mmol)TFA和2mg(0.002mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化2小時。將反應溶液通過硅藻土過濾，並將濾液濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮和凍幹。這得到29mg目標化合物(理論值的87％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.83min

MS(ESpos)：m/z＝561(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d＝1.06(s，3H)，1.53-1.62(m，2H)，2.31(s，3H)，2.32-2.46(m，2H)，2.87-3.01(m，5H)，3.76-3.87(m，1H)，5.34(s，2H)，6.97(s，1H)，7.20-7.28(m，2H)，7.54-7.64(m，1H)，7.99(t，1H)，8.30(s，1H)，[其他信號隱藏在溶劑信號下]。

實施例18

對映異構-N-(2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-異丙基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將37mg(0.048mmol)來自實施例67A的對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-異丙基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)溶解於5ml乙醇中，並且在氬氣下加入13μl(0.172mmol)TFA和2mg(0.002mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化2小時。將反應溶液通過硅藻土過濾，並將濾液在旋轉蒸發器上濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮和凍幹。將殘餘物溶解於二氯甲烷中，並與碳酸氫鈉水溶液攪拌過夜。然後將有機相經硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮和凍幹。將殘餘物通過製備型HPLC(柱：XBridge C18 5μm 75x 30mm，流動相：水、乙腈、乙腈/水80/20+1％氨溶液)純化。這得到8mg(理論值的33％)目標化合物。

LC-MS(方法K)：Rt＝2.63min

MS(ESpos)：m/z＝513(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d＝1.03(s，3H)，1.20-1.27(m，6H)，1.48-1.57(m，2H)，1.68(s br.，2H)，2.29(s，3H)，2.32-2.47(m，2H)，3.18-3.29(m，2H)，3.39-3.48(m，1H)，5.30(s，2H)，6.89(s，1H)，7.20-7.28(m，2H)，7.54-7.64(m，1H)，7.92(t，1H)，8.22(s，1H).

實施例19

對映異構-N-(2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將67mg(0.089mmol)來自實施例73A的對映異構-{1-[({2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)溶解於5ml TFA中，並將該混合物在室溫下攪拌4天。將反應溶液通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。將殘餘物溶於二氯甲烷中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到39mg(理論值的86％)目標化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.76min

MS(ESpos)：m/z＝505(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d＝1.03(s，3H)，1.51-1.60(m，2H)，1.82(br.s，2H)，2.23-2.47(m，5H)，3.18-3.29(m，2H)，5.31(s，2H)，7.11(s，1H)，7.19-7.28(m，2H)，7.54-7.64(m，1H)，7.95(t，1H)，8.60(s，1H)。

實施例20

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺

首先將40mg(0.11mmol)來自實施例71A的2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同47mg(0.13mmol)HATU和59μl(0.34mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.4ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌10min。然後將13mg(0.13mmol)外消旋-2-甲基丁烷-1,2-二胺加入反應溶液中，並將該混合物在室溫下攪拌4.5h。然後將混合物用乙腈和水稀釋，加入TFA，並且將該混合物通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。將殘餘物溶於二氯甲烷中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到31mg目標化合物(理論值的61％)。

LC-MS(方法O)：Rt＝1.27min

MS(ESpos)：m/z＝437(M+H)+

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：d＝0.86(t，3H)，0.98(s，3H)，1.31-1.42(m，2H)，1.49(br.s，2H)，2.35(s，3H)，3.15-3.27(m，2H)，5.32(s，2H)，7.12(s，1H)，7.19-7.28(m，2H)，7.55-7.64(m，1H)，7.80(br.s，1H)，8.72(s，1H)。

實施例21

對映異構-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體A)

將25mg來自實施例20的外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Daicel Chiralpak IF，5μm，250x20mm，流動相：35％異己烷，65％乙醇+0.2％二乙胺，流速：15ml/min，溫度：40℃，檢測：220nm]。將產物收集於乾冰上，並在旋轉蒸發器上濃縮。

對映異構體A：9mg(>99％ee)

Rt＝6.10min[Daicel Chiralpak AZ-H，250x 4.6mm，5μm，流動相：30％異己烷，70％乙醇+0.2％二乙胺，流速：1ml/min，溫度：40℃，檢測：220nm]。

實施例22

對映異構-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將25mg來自實施例20的外消旋-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Daicel Chiralpak IF，5μm，250x20mm，流動相：35％異己烷，65％乙醇+0.2％二乙胺，流速：15ml/min，溫度：40℃，檢測：220nm]。將產物收集於乾冰上，並在旋轉蒸發器上濃縮。

對映異構體B：11mg(94％ee)

Rt＝7.33min[Daicel Chiralpak AZ-H，250x 4.6mm，5μm，流動相：30％異己烷，70％乙醇+0.2％二乙胺，流速：1ml/min，溫度：40℃，檢測：220nm]。

實施例23

外消旋-N-(2-氨基-2-甲基戊基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺

首先將75mg(0.21mmol)來自實施例71A的2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同89mg(0.23mmol)HATU和111μl(0.64mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.7ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌10min。然後將27mg(0.23mmol)外消旋-2-甲基戊烷-1,2-二胺加入反應溶液中，並將該混合物在室溫下攪拌4.5h。然後將混合物用乙腈和水稀釋，加入TFA，並且將混合物通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。將殘餘物溶於二氯甲烷中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到36mg目標化合物(理論值的37％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.76min

MS(ESpos)：m/z＝451(M+H)+

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：d＝0.82-0.90(m，3H)，1.00(s，3H)，1.26-1.39(m，4H)，1.55(br.s，2H)，2.35(s，3H)，3.14-3.26(m，2H)，5.32(s，2H)，7.11(s，1H)，7.20-7.27(m，2H)，7.55-7.64(m，1H)，7.81(br.s，1H)，8.71(s，1H)。

實施例24

對映異構-N-(2-氨基-2-甲基戊基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體A)

將32mg來自實施例23的外消旋-N-(2-氨基-2-甲基戊基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Daicel Chiralpak IF，5μm，250x 20mm，流動相：50％異己烷，50％乙醇+0.2％二乙胺，流速：15ml/min，溫度：40℃，檢測：220nm]。將產物收集於乾冰上，並在旋轉蒸發器上濃縮。

對映異構體A：15mg(>99％ee)

Rt＝6.77min[Daicel Chiralpak AZ-H，250x 4.6mm，5μm，流動相：50％異己烷，50％乙醇+0.2％二乙胺，流速：1ml/min，溫度：40℃，檢測：220nm]。

實施例25

對映異構-N-(2-氨基-2-甲基戊基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將32mg來自實施例23的外消旋-N-(2-氨基-2-甲基戊基)-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺通過製備型分離在手性相上分離成對映異構體[柱：Daicel Chiralpak IF，5μm，250x20mm，流動相：50％異己烷，50％乙醇+0.2％二乙胺，流速：15ml/min，溫度：40℃，檢測：220nm]。將產物收集於乾冰上，並在旋轉蒸發器上濃縮。

對映異構體B：15mg(98.8％ee)

Rt＝9.05min[Daicel Chiralpak AZ-H，250x 4.6mm，5μm，流動相：50％異己烷，50％乙醇+0.2％二乙胺，流速：1ml/min，溫度：40℃，檢測：220nm]。

實施例26

對映異構-N-(2-氨基-2-甲基丁基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將50mg(0.073mmol)來自實施例74A的對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-2-甲基丁-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)溶解於2.5ml乙醇中，並且在氬氣下加入0.8mg(0.001mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化3.5小時。將反應溶液通過微孔濾器過濾，並將濾液濃縮。將殘餘物溶解於2.5ml乙醇中，並且在氬氣下加入28μl(0.367mmol)TFA和0.8mg(0.001mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化1.5小時。將反應溶液通過微孔濾器過濾，並將濾液濃縮。將氨的甲醇溶液加入殘餘物中，並將產物通過厚層色譜法(流動相：二氯甲烷/2N氨的甲醇溶液20/1.5)純化。這得到24mg(理論值的72％)目標化合物。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.74min

MS(ESpos)：m/z＝433(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d＝0.84(t，3H)，0.94(s，3H)，1.23-1.38(m，2H)，1.42(br.s，2H)，2.34(s，3H)，3.10-3.23(m，2H)，4.05(s，3H)，5.30(s，2H)，7.07(s，1H)，7.21-7.30(m，3H)，7.54-7.64(m，1H)，9.02(s，1H)。

實施例27

對映異構-N-(2-氨基-5,5,5-三氟-2-甲基戊基)-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體B)

將49mg(0.065mmol)來自實施例75A的對映異構-{1-[({8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-基}羰基)氨基]-5,5,5-三氟-2-甲基戊-2-基}氨基甲酸苄酯三氟乙酸鹽(對映異構體B)溶解於7ml乙醇中，並且在氬氣下加入25μl(0.327mmol)TFA和2.1mg(0.002mmol)10％負載在活性碳上的鈀，並將該混合物在標準壓力下氫化1小時。將反應溶液通過微孔濾器過濾，並用乙醇洗滌，並且將濾液在減壓下濃縮。將乙腈、水和TFA加入殘餘物中，並且將產物通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分合併且濃縮。將殘餘物溶於二氯甲烷中，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。這得到31mg目標化合物(理論值的91％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝0.82min

MS(ESpos)：m/z＝501(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d＝0.99(s，3H)，1.51(t，2H)，1.92(br.s，2H)，2.24-2.44(m，5H)，3.14-3.29(m，2H)，4.05(s，3H)，5.31(s，2H)，7.08(s，1H)，7.19-7.30(m，3H)，7.54-7.64(m，1H)，8.98(s，1H)。

實施例28

對映異構-2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基-N-(6,6,7,7,7-五氟-2-羥基-2-甲基庚-3-基)咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺(對映異構體A)

首先將40mg(0.113mmol)來自實施例71A的2-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同47mg(0.125mmol)HATU和99μl(0.567mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.4ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌10min。然後將34mg(0.125mmol)對映異構-3-氨基-6,6,7,7,7-五氟-2-甲基庚-2-醇鹽酸鹽(對映異構體A)[記載於WO2014/068104，實施例編號138A]加入反應溶液中，並將混合物在室溫下攪拌4.5小時。加入乙腈、水和TFA，並將反應溶液通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分濃縮，並將殘餘物溶解於二氯甲烷中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮和凍幹。這得到47mg目標化合物(理論值的72％)。

LC-MS(方法O)：Rt＝2.30min

MS(ESpos)：m/z＝570(M+H)+

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：d＝1.14(s，3H)，1.21(s，3H)，1.67-1.77(m，1H)，2.00-2.10(m，1H)，2.12-2.31(m，2H)，2.35(s，3H)，3.97-4.04(m，1H)，4.75(s，1H)，5.32(s，2H)，7.12(s，1H)，7.20-7.27(m，2H)，7.55-7.63(m，1H)，7.69(d，1H)，8.55(s，1H)。

實施例29

8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-N-[(2R)-1-羥基己-2-基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲醯胺

首先將50mg(0.144mmol)來自實施例72A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲氧基-6-甲基咪唑並[1,2-a]吡啶-3-甲酸連同71mg(0.187mmol)HATU和125μl(0.718mmol)N,N-二異丙基乙胺加入0.50ml DMF中，並將該混合物在室溫下攪拌20min。然後將22mg(0.187mmol)(2R)-2-氨基己-1-醇加入反應溶液中，並將該混合物在室溫下攪拌2小時。加入乙腈、水和TFA，並將反應溶液通過製備型HPLC(RP18柱，流動相：加入0.1％TFA的乙腈/水梯度)純化。將產物級分濃縮，並將殘餘物溶解於二氯甲烷中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次。將合併的水相用二氯甲烷再萃取兩次。將合併的有機相經硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮和凍幹。這得到22mg標題化合物(理論值的33％)。

LC-MS(方法D)：Rt＝1.14min

MS(ESpos)：m/z＝448(M+H)+

1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：d＝0.86(t，3H)，1.22-1.35(m，4H)，1.40-1.52(m，1H)，1.54-1.65(m，1H)，2.34(s，3H)，3.38-3.53(m，2H)，3.90-4.00(m，1H)，4.05(s，3H)，4.82(t，1H)，5.30(s，2H)，6.91(d，1H)，7.08(s，1H)，7.20-7.28(m，2H)，7.54-7.64(m，1H)，9.02(s，1H)。

B.藥理學效力的評估

使用下列簡寫：

ATP 三磷酸腺苷

Brij35 聚氧乙烯(23)十二烷基醚

BSA 牛血清白蛋白

DTT 二硫蘇糖醇

TEA 三乙醇胺

本發明化合物的藥理學作用可以在下列測定中得以證明：

B-1.通過PPi檢測測量sGC酶活性

可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)在刺激下將GTP轉化成cGMP和焦磷酸鹽(PPi)。藉助於WO 2008/061626中描述的方法檢測PPi。在該測定中產生的信號隨著反應進行而增加並且作為sGC酶活性的量度。藉助於PPi參考曲線，可以以已知的方式表徵該酶，例如用轉化率、刺激性或米氏常數來表徵。

試驗的實施

為了進行該試驗，首先將29μl酶溶液(0-10nM可溶性鳥苷酸環化酶(根據等人，Journal of Molecular Medicine 77(1999)14-23製備)，於50mM TEA、2mM氯化鎂、0.1％BSA(級分V)、0.005％Brij35中，pH 7.5)加入微孔板中，並加入1μl刺激物溶液(0-10μM 3-嗎啉代斯德酮亞胺(morpholinosydnonimine)、SIN-1、Merck在DMSO中)。將微孔板在室溫下培養10分鐘。然後加入20μl檢測混合物(1.2nM熒火蟲螢光素酶(Photinus pyralis Luziferase，Promega)、29μM脫氫螢光素(根據Bitler&McElroy，Arch.Biochem.Biophys.72(1957)358製備)、122μM螢光素(Promega)、153μM ATP(Sigma)和0.4mM DTT(Sigma)於50mM TEA、2mM氯化鎂、0.1％BSA(級分V)、0.005％Brij 35中，pH 7.5)。酶反應通過加入20μl底物溶液(1.25mM鳥苷5'-三磷酸(Sigma)於50mM TEA、2mM氯化鎂、0.1％BSA(級分V)、0.005％Brij 35中，pH 7.5)而開始，並且在光度計中連續地進行分析。

B-2.對重組鳥苷酸環化酶報告細胞系的作用

使用重組鳥苷酸環化酶報告細胞系測定本發明化合物的細胞活性，如F.Wunder等人，Anal.Biochem.339，104-112(2005)中所描述的。

本發明化合物的代表性MEC值(MEC＝最低有效濃度)示於下表中(在一些情況下作為個體測定的平均值)：

表A：

B-3.體外血管舒張作用

通過敲擊頸部而將兔子打昏並進行放血。移除主動脈，除去粘附的組織並分成寬度為1.5毫米的環，在預應力下在37℃下將其分別置於5ml具有碳合氣(Carbogen)噴洗的Krebs-Henseleit溶液的器官浴槽中，該Krebs-Henseleit溶液具有以下組成(各自為mM)：氯化鈉：119；氯化鉀：4.8；氯化鈣二水合物：1；硫酸鎂七水合物：1.4；磷酸二氫鉀：1.2；碳酸氫鈉：25；葡萄糖：10。收縮力用Statham UC2細胞測定，使用A/D換能器(DAS-1802HC，Keithley Instruments慕尼黑)擴增和數位化，並且在線性記錄儀上平行記錄。為了獲得收縮，將苯腎上腺素以增加的濃度累積加入浴中。在幾個控制循環之後，在每個進一步運行中，每次以增加的劑量加入待研究的物質，並且將收縮的量與在上一運行中獲得的收縮的量進行比較。由此計算將對照值的量減少50％所需的濃度(IC50值)。標準給藥體積為5μl，浴溶液中的DMSO含量對應於0.1％。

B-4.麻醉大鼠的血壓測量

用硫噴妥鈉(100mg/kg i.p.)麻醉體重為300-350g的雄性Wistar大鼠。在氣管切開術後，將導管引入股動脈中以測量血壓。將待測試的物質作為溶液給藥，通過管飼法口服或通過股靜脈靜脈內給藥(Stasch等人Br.J.Pharmacol.2002；135：344-355)。

B-5.無線電遙法測量清醒的、自發性高血壓大鼠的血壓

將由DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI，USA市售可得的遙測系統用於以下所述的清醒大鼠的血壓測量。

該系統由3個主要部件組成：

可植入發射器(遙測發射器)

接收器(接收器)，其通過多路轉接器(DSI數據交換矩陣)連接到

數據採集計算機。

該遙測系統能夠連續地記錄清醒的動物在它們通常棲息地中的血壓、心率和身體活動。

動物材料

對體重>200克的成年雌性、自發性高血壓大鼠(SHR Okamoto)進行研究。來自Okamoto Kyoto School of Medicine，1963年的SHR/NCrl是具有極大升高的血壓的雄性Wistar Kyoto大鼠和具有略微升高的血壓雌性大鼠的雜交種，並且在F13移交給美國國立衛生研究院(U.S.National Institutes of Health)。

在發射器植入後，將實驗動物單獨飼養在3型Macrolon籠中。它們可隨意獲得標準飼料和水。

在上午6:00和在下午7:00通過室內照明改變實驗室中的晝/夜節律。

發射器植入

在第一次實驗使用前至少14天，將所用的TA11PA-C40遙測發射器在無菌條件下通過手術植入實驗動物中。以這種方式安裝有儀器的動物可以在傷口癒合且植入物穩定之後重複使用。

為了植入，用戊巴比妥(Nembutal，Sanofi：50mg/kg i.p.)麻醉禁食的動物，並對其腹部的較大面積進行剃毛和消毒。在沿白線打開腹腔後，將系統的填充液體的測量導管在分叉點上方沿顱骨方向插入降主動脈並用組織膠(VetBonD TM，3M)固定。將發射器外殼在腹膜內固定到腹壁肌肉上，並且將傷口逐層閉合。

手術後給予抗生素(Tardomyocel COMP，Bayer，1ml/kg，皮下)以防止感染。

物質和溶液

除非另有說明，否則待研究的物質在每種情況下通過管飼法口服給予一組動物(n＝6)。根據5ml/kg體重的給藥體積，將測試物質溶解在合適的溶劑混合物中或懸浮在0.5％甲基纖維素中。

溶劑處理的動物組用作對照。

實驗綱要

所存在的遙測測量單元被配置為24隻動物。在實驗編號(V年月日)下記錄各實驗。

每個在系統中存活的安裝有儀器的大鼠分配有單獨的接收天線(1010Receiver，DSI)。

植入的發射器可通過內置的磁性開關在外部激活。在試驗開始前，將它們切換至傳輸。所發射的信號可由數據採集系統(Dataquest TM A.R.T.for WINDOWS，DSI)在線檢測並相應地處理。數據在每種情況下被儲存在為此目的創建的並帶有實驗號的文件夾中。

在標準程序中，在每種情況下將下列這些測量持續10秒：

收縮血壓(SBP)

舒張血壓(DBP)

平均動脈壓(MAP)

心率(HR)

活性(ACT)。

在計算機控制下以5分鐘為間隔重複測量值的採集。將作為絕對值獲得的源數據在圖中用當前測量的氣壓(環境壓力參考監測器；APR-1)校正，並作為單獨數據存儲。其他技術細節在製造商公司(DSI)的大量文件中給出。

除非另有描述，否則實驗物質在實驗當天的上午9:00給予。在給藥後，在24小時內測量上述參數。

評估

在實驗結束後，將所獲得的各個數據用分析軟體(DATAQUEST TM A.R.T.TM ANALYSIS)進行分類。空白值在此假定為給藥前2小時，因此所選數據集包含從實驗當天上午7:00到次日上午9:00的時間段。

數據通過確定平均值(15分鐘平均值)在可預先給定的時間段中平滑並且作為文本文件傳輸到存儲介質。將以這種方式預分類和壓縮的測量值傳輸到Excel模板並制表。對於每天的實驗，將所獲得的數據存儲在具有實驗號的專用文件夾中。將結果和測試方案以按數字分類的紙件形式存儲在文件夾中。

文獻：

Klaus Witte，Kai Hu，Johanna Swiatek，Claudia Müssig，Georg Ertl andLemmer：Experimental heart failure in rats：effects on cardiovascular circadian rhythms and on myocardialβ-adrenergic signaling.Cardiovasc Res 47(2)：203-405，2000；Kozo Okamoto：Spontaneous hypertension in rats.Int Rev Exp Pathol 7：227-270，1969；Maarten van den Buuse：Circadian Rhythms of Blood Pressure，Heart Rate，and Locomotor Activity in Spontaneously Hypertensive Rats as Measured With Radio-Telemetry.Physiology&Behavior 55(4)：783-787，1994.

B-6.靜脈內和口服給藥後的藥代動力學參數的測定

在雄性CD-1小鼠、雄性Wistar大鼠和雌性小獵犬中測定本發明化合物的藥代動力學參數。在小鼠和大鼠的情況下，藉助物種特異性的血漿/DMSO製劑進行靜脈內給藥，且在狗的情況下，藉助水/PEG400/乙醇製劑進行靜脈內給藥。在所有物種中，基於水/PEG400/乙醇製劑，通過管飼法進行溶解物質的口服給藥。通過在物質給藥之前將矽膠導管插入右頸外靜脈中而使從大鼠中採血得以簡化。該手術在實驗前至少一天用異氟烷麻醉並給予止痛劑(阿託品/rimadyl(3/1)0.1ml皮內)來進行。在包括物質給藥後至少24小時至最多72小時的終端時間點的時間範圍內採集血液(通常大於10個時間點)。將血液移入肝素化管中。然後通過離心獲得血漿；如果需要，其可以被儲存在-20℃直至進一步處理。

將內標(其也可以是化學無關的物質)加入到本發明化合物的樣品、校準樣品和限定物(qualifier)中，然後藉助過量的乙腈沉澱蛋白質。加入與LC條件相匹配的緩衝溶液，隨後渦旋後，然後以1000g離心。通過LC-MS/MS使用C18反相柱和可變流動相混合物分析上清液。通過由特定選擇的離子監測實驗的提取離子色譜圖的峰高度或面積將物質量化。

藉助經驗證的藥代動力學計算程序，將所測定的血漿濃度/時間曲線圖用於計算藥代動力學參數，如AUC、Cmax、t1/2(終末半衰期)、F(生物利用度)、MRT(平均保留時間)和CL(清除率)。

由於物質量化在血漿中進行，因此必需確定物質的血液/血漿分布，以便能夠相應地調節藥代動力學參數。為此，將限定量的物質以在搖擺輥混合器(rocking roller mixer)中在所討論物質的肝素化全血中培養20分鐘。在以1000g離心後，測量(藉助LC-MS/MS；參見上文)並通過計算C血液/C血漿值的比率來確定血漿濃度。

B-7.代謝研究

為了測定本發明化合物的代謝分布圖，將它們與來自多種動物物種(例如大鼠、狗)以及人類來源的重組人細胞色素P450(CYP)酶、肝微粒體或初級新鮮肝細胞一起孵育，以獲得和比較關於基本上完整的肝期I和肝期II代謝以及關於參與代謝的酶的信息。

將本發明的化合物以約0.1-10μM的濃度培養。為此，製備在乙腈中濃度為0.01-1mM的本發明化合物的儲備溶液，然後以1:100稀釋度移液至孵育混合物中。將肝微粒體和重組酶在37℃下、在pH 7.4的具有和不具有由1mM NADP+、10mM葡萄糖-6-磷酸和1單位葡萄糖-6-磷酸脫氫酶組成的NADPH產生系統的50mM磷酸鉀緩衝液中培養。將原代肝細胞同樣在37℃下在Williams E培養基中的懸浮液中培養。在0-4小時培養時間後，用乙腈(最終濃度約30％)終止培養混合物，並以約15 000x g離心出蛋白質。將如此終止的樣品直接分析或儲存在-20℃直至分析。

通過具有紫外和質譜檢測的高效液相色譜法(HPLC-UV-MS/MS)進行分析。為此，將培養樣品的上清液用合適的C18反相柱和乙腈與10mM甲酸銨水溶液或0.05％甲酸的可變流動相混合物進行色譜分離。UV色譜圖與質譜數據結合用於代謝物的鑑別、結構闡明和定量估測，以及用於在培養混合物中本發明化合物的定量代謝減少。

B-8.Caco-2滲透性試驗

藉助Caco-2細胞系確定試驗物質的滲透性，所述Caco-2細胞系是用於胃腸屏障滲透性預測而建立的體外模型(Artursson，P.和Karlsson，J.(1991)Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial(Caco-2)cells.Biochem.Biophys.175(3)，880-885)。將CaCo-2細胞(ACC No.169，DSMZ，Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen，Braunschweig，德國)播種在具有插入物的24孔板中，並培養14至16天。對於滲透性研究，將試驗物質溶解於DMSO中，並用轉移緩衝液(Hanks緩衝鹽溶液，Gibco/Invitrogen，具有19.9mM葡萄糖和9.8mM HEPES)稀釋至最終試驗濃度。為了測定試驗物質的頂端至基底外側的滲透性(PappA-B)，將包含試驗物質的溶液施加至Caco-2細胞單層的頂側，並將轉移緩衝液施加至基底外側。為了測定試驗物質的基底外側至頂端的滲透性(PappB-A)，將包含試驗物質的溶液施加至Caco-2細胞單層的基底外側，並將轉移緩衝液施加至頂側。在實驗開始時，從各自的供體隔室中取樣以確保質量平衡。在37℃下培養2小時後，從兩個隔室中取樣。通過LC-MS/MS分析樣品，並計算表觀滲透係數(Papp)。對於各細胞單層，測定螢光黃的滲透性以確保細胞層完整性。在各試驗中，還測定了阿替洛爾(低滲透性的標記物)和柳氮磺胺吡啶(主動排洩的標記物)的滲透性作為質量對照。

B-9.hERG鉀電流測定

hERG(人類ether-a-go-go相關基因)鉀電流對人類心臟動作電位的復極化作出了重要貢獻(Scheel等人，2011)。在極少的情況下，藥物對該電流的抑制可導致潛在的致命性心率失常，因此在藥物開發的早期階段進行研究。

本文所用的功能性hERG測定是基於穩定表達KCNH2(HERG)基因的重組HEK293細胞系(Zhou等人，1998)。在自動化系統(PatchlinerTM；Nanion，Munich，Germany)中藉助「全細胞電壓鉗(whole-cell voltage-clamp)」技術(Hamill等人，1981)——控制膜電壓並在室溫下測量hERG鉀電流——來研究這些細胞。PatchControlHTTM軟體(Nanion)控制Patchliner系統，數據捕獲和數據分析。電壓由被PatchMasterProTM軟體控制的2EPC-10四通道放大器(二者為：HEKA Elektronik，Lambrecht，Germany)控制。具有中等電阻(～2MΩ；Nanion)的NPC-16晶片用作電壓鉗實驗的平面基板。

NPC-16晶片填充有細胞內和細胞外溶液(參見Himmel，2007)及細胞懸浮液。在形成千兆歐姆密封和建立全細胞模式(包括若干自動質量控制步驟)後，在-80mV保持電壓下鉗住細胞膜。隨後的電壓鉗方案(protocol)改變指令電壓為+20mV(持續1000ms)、-120mV(持續500ms)，並返回到-80mV保持電壓；該過程每12s重複一次。在初始穩定期(約5-6分鐘)後，將實驗物質通過移液管以升高的濃度(例如0.1、1和10μmol/l)引入(每個濃度暴露約5-6分鐘)，然後進行幾次洗滌步驟。

由電位從+20mV至-120mV的變化產生的向內「尾」電流的幅度用於量化hERG鉀電流，並且被描述為時間的函數(IgorProTM軟體)。在各個時間間隔(例如試驗物質之前的穩定期，試驗物質的第一/第二/第三濃度)結束時的電流幅度用於建立濃度/效應曲線，由該曲線計算試驗物質的半數最大抑制濃度IC50。

Hamill OP,Marty A,Neher E,Sakmann B,Sigworth FJ.Improved patch-clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches.Pfluegers Arch 1981；391:85-100.

Himmel HM.Suitability of commonly used excipients for electrophysiological in-vitro safety pharmacology assessment of effects on hERG potassium current and on rabbit Purkinje fiber action potential.J Pharmacol Toxicol Methods 2007；56:145-158.

Scheel O,Himmel H,Rascher-Eggstein G,Knott T.Introduction of a modular automated voltage-clamp platform and its correlation with manual human ether-a-go-go related gene voltage-clamp data.Assay Drug Dev Technol 2011；9:600-607.

Zhou ZF,Gong Q,Ye B,Fan Z,Makielski JC,Robertson GA,January CT.Properties of hERG channels stably expressed in HEK293cells studied at physiological temperature.Biophys J 1998；74:230-241.

B-10.肝細胞體外清除率測定

新鮮原代肝細胞的培養在37℃下、在1.5ml的總體積中用改進的機器人(Perkin Elmer)來進行，同時進行搖動。培養液通常含有1百萬個活的肝細胞/ml、約1μM底物和0.05M磷酸鉀緩衝液(pH＝7.4)。培養液中的最終乙腈濃度為≤1％。

在2、10、20、30、50、70和90min後從培養液中取出125μl等份試樣，並轉移至96孔濾板(0.45μm弱結合的親水性PTFE；微孔：MultiScreen Solvinert)。這些試樣各含有250μl乙腈以終止反應。在離心之後，通過MS/MS(通常為API 3000)分析濾液。

使用以下等式，由物質降解的半衰期計算體外清除率：

CL'內源性[ml/(min·kg)]＝(0.693/體外t1/2[min])·(肝臟重量[g肝臟/kg體重])x(細胞數[1.1·10^8]/肝臟重量[g])/(細胞數[1·10^6]/培養液體積[ml])

在不考慮游離級分(「無限制性攪拌良好模型」)的情況下，CL血液通過以下等式計算：

CL血液攪拌良好[l/(h·kg)]＝(QH[l/(h·kg)]x CL'內源性[l/(h·kg)])/(QH[l/(h·kg)]+CL'內源性[l/(h·kg)])

用於計算的物種特異性外推因子總結於下表中：

描述基於肝提取的最大可能生物利用度的Fmax值計算如下：

Fmax攪拌良好[％]＝(1-(CL血液攪拌良好[l/(h·kg)]/QH[l/(h·kg)]))x 100

C.藥物組合物的工作實施例

本發明的化合物可被轉化為如下的藥物製劑：

片劑：

組成：

100mg本發明的化合物、50mg乳糖(一水合物)、50mg玉米澱粉(天然的)、10mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25)(BASF，Ludwigshafen，德國)及2mg硬脂酸鎂。

片劑重量212mg，直徑8mm，曲率半徑12mm。

製備：

將本發明的化合物、乳糖和澱粉的混合物用5％(w/w)的PVP水溶液制粒。將所述顆粒乾燥，然後與硬脂酸鎂混合5分鐘。用常規壓片機將該混合物壓縮(對於片劑的形式參見上文)。用於壓片的指導值為15kN的壓力。

用於口服給藥的混懸液：

組成：

1000mg本發明的化合物、1000mg乙醇(96％)、400mg(購自FMC，Pennsylvania，USA的黃原膠)及99g水。

10ml口服混懸液相當於100mg本發明化合物的單次劑量。

製備：

將Rhodigel懸浮於乙醇中；將本發明的化合物加入該懸浮液中。在攪拌下加入水。將所述混合物攪拌約6h直到Rhodigel完全膨脹。

用於口服給藥的溶液劑：

組成：

500mg本發明的化合物、2.5g聚山梨酸酯和97g聚乙二醇400。20g口服液相當於100mg本發明化合物的單次劑量。

製備：

在攪拌下，將本發明的化合物懸浮於聚乙二醇和聚山梨酸酯的混合物中。持續攪拌操作直到本發明的化合物完全溶解。

i.v.溶液：

將本發明的化合物以低於飽和溶解度的濃度溶解於生理學上可接受的溶劑(例如等滲鹽水溶液、5％葡萄糖溶液和/或30％PEG 400溶液)中。將所得的溶液進行無菌過濾並分裝到無菌且無熱原的注射容器中。