一種製備濃縮血小板的方法及裝置的製作方法

2023-05-23 08:08:01

專利名稱：一種製備濃縮血小板的方法及裝置的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種血液的成分製備，具體地說是一種製備濃縮血小板的方法及裝置。
經湖南省衛生廳99048號醫藥衛生科技項目查新報告書查新，目前國內外製備濃縮血小板(PC)的手工方法主要有兩種，即富血小板血漿(PRP)法和白膜(BC)法(以下簡稱PRP法和BC法)。PRP法製得的PC單位血小板含量低。PC的原國家標準為Pt≥4.8×1010/2u，WBC≤5.0×106/2u，RBC≤2.0×109/2u，因成份工作者在實際操作中發現富血小板血漿法製備PC的Pt含量難達到原國家標準，所以衛生部衛醫發184號文件將PC的標準調整為Pt≥4.0×1010/2u，WBC≤5.0×106/2u，RBC≤2.0×109/2u。PRP法製得的PC中RBC和WBC殘存大。WBC殘存是衡量PC輸注安全性的一個重要指標。PRP法製得的PC常會導致一次輸入患者體內的WBC過多，多次反覆輸用可誘發血小板輸注無效，甚至可以誘發不可治死亡率達90％和輸血相關的移植物抗宿主病(TA-GVDH)。PRP法製備過程會破壞血小板的結構和功能，產生細胞因子，且操作耗時，製備前血液要復甦一個小時，製備後要再懸浮一個小時，不利於急診病人的治療。BC法製得的PC減小了PC中RBC和WBC的殘存量，輸血安全性較PRP法製得的PC有了大幅提高，簡化了操作，但BC法製得的PC的單位Pt含量比PRP法製得的PC還要低，成年人每次輸注進入體內的WBC數約為2×107個/次，還可以進一步降低。BC法製備PC只可以200ml作為製備單位，臨床輸血不方便。
本發明的目的是提供一種能克服傳統手工血小板製備方法存在的缺陷和不足，減小製備過程對Pt結構和功能的破壞，提高單位濃縮血小板懸液的血小板含量，降低PC中WBC和RBC的殘存量，降低PC的治療成本，增加血小板輸注安全性的濃縮血小板的製備方法及裝置。
本發明是採用以下技術方案來實現其發明目的的本發明採用新的Pt收集技術，即對原料血進行輕離心，輕離心後收集上層富血小板血漿和白膜層製成混懸液；然後對混懸液進行無聚集重離心，即對混懸液進行變速離心，分出混懸液中多餘的血漿得濃縮混懸液；將濃縮混懸液搖勻後靜置；為減小RBC和WBC的沉降阻力，用懸掛器對濃縮混懸液懸掛輕離心，收集上層富血小板血漿，即濃縮血小板PC，懸掛器呈「 」形，上端為懸掛鉤，下端為平衡尾。為方便操作，本發明採用了雙通道多聯血袋，即在現有的樹枝血袋上，在與抗凝劑袋相鄰的轉移袋上加設有一根與主管道相連的管道。
本發明所述的輕離心條件為離心力RCF 720-1120g，離心時間t 6-l5min，溫度T 20-24度。
本發明所述的變速離心的條件為初始離心條件為離心力RCF1800-4050g，離心時間t 3-10min，溫度T 20-24度，後離心條件為離心力RCF 1500-1800g，離心時間t 10-20min，溫度T 20-24度，其變速過程在20-120S內完成。
本發明所述的懸掛輕離心的條件為離心力RCF 160-320g，離心時間t 5-12min，溫度T 20-24度。
由於採用以上技術方案，本發明完美地實現了其發明目的，創造性的採用三步離心製備濃縮血小板PC，即輕離心，收集到全血中86.6％±4.9％的全血小板，提高了Pt的初收集率；變速離心， 有效解決了Pt在少RBC狀態下重離心易發生聚集的難題，保持了Pt結構和功能的完整性；懸掛離心，減小了RBC和WBC的沉降阻力，使之與富血小板血漿有效分離。為了方便操作，還採用了雙通道多聯血袋。本發明具有以下優點①Pt濃度高。在我們的測試組中，本發明所製得的PC的Pt濃度為(1080±484)×1010/L，PRP法製得的PC為(898±238)×1010/L，BC法製得的PC為(564±196)×1010/L。②單位血小板含量大。每兩單位PC，本發明製得的PC含Pt(7.65±3.10)×1010/2u，PRP法製得的PC含Pt(4.49±1.49)×1010/2u，BC法製得的PC含Pt(4.27±1.20)×1010/2u，經t檢驗本發明製得的PC血小板單位含量同BC法製得的PC和PRP法製得的PC存在著顯著性差異。本發明製得的PC血小板濃度高，符合成份輸血的原則，有利於提高療效；單位Pt含量大，可以節省血源，降低治療費用。③輸注安全性好。WBC的殘存是衡量PC輸注安全性的一個重要指標。PRP法製得的PC常會導致一次輸入患者體內的WBC過多，多次反覆輸用可誘發血小板輸注無效。BC法的輸血安全性好，輸用BC法製得的PC每次進入受血者體內的WBC數約為2×107個，因而輸用BC法製得的PC比輸用PRP法製得的PC輸血反應少，輸血效果好。輸用本發明製得的PC進入患者體內的WBC數為1×107個左右，比BC法製得的PC降低了1倍，因而具有更好的輸血安全性。④血小板結構功能完整。本發明採用了少紅細胞狀態下Pt的不凝集成膜技術，保持了Pt結構和功能的完整性，因而本發明製得的PC的細胞因子水平低，血小板活性強。⑤方便快捷。本發明不像PRP法，原料血要靜置一個小時後才可以開始PC製備。本發明在製備PC過程中沒有血小板的凝集，無需再懸浮(需1-2h)。⑥本發明最後一步採用的是懸掛離心，由於該離心方法RBC和WBC的沉降阻力小，所以用一個很小的離心力就可以使RBC、WBC沉降乾淨，並且沉降物中富血小板血漿殘存少。


圖1為雙通道多聯血袋的連接示意圖；圖2為另一種雙通道多聯血袋的連接示意圖；圖3為懸掛器的示意圖。
下面結合附圖對本發明作進一步說明。
實施例1一種製備濃縮血小板懸液的方法，它包括原料血採集，為方便操作，本發明採用了雙通道多聯血袋，如圖1所示，即在現有的四聯樹枝血袋上，在與抗凝劑袋3相鄰的轉移袋A上加設有一根與主管道相連的管道，其技術特點是採用新的Pt收集技術，即對抗凝劑袋3中的原料血(400ml)進行輕離心，離心力RCF720g，離心時間t15min，溫度T22度，輕離心後收集上層富血小板血漿和50g白膜層通過管道分離到轉移袋A中製成混懸液，將代漿液袋4中的代漿液通過管道送入抗凝劑袋3；然後對混懸液進行無聚集重離心，即對混懸液進行變速離心，變速離心的初始離心條件為離心力RCF1800g，離心時間t10min，溫度T20度，後離心條件為離心力RCF1500g，離心時間t20min，溫度T20度，變速過程在90S內完成，將混懸液中上層貧血小板血漿通過管道分離到轉移袋B中得濃縮混懸液；將濃縮混懸液搖勻後靜置；為減小RBC和WBC的沉降阻力，用懸掛器對濃縮混懸液懸掛輕離心，如圖3所示，懸掛器呈「 」形，上端為懸掛鉤1，下端為平衡尾2，懸掛離心為離心力RCF160g，離心時間t12min，溫度T20度，收集上層富血小板血漿，分離至代漿液袋中，即濃縮血小板PC。
實施例2其輕離心力RCF1120g，離心時間t6min，溫度T24度；變速離心的初始離心條件為離心力RCF4050g，離心時間t3min，溫度T24度，後離心條件為離心力RCF1800g，離心時間t10min，溫度T24度，變速過程在20S內完成； 懸掛離心為離心力RCF320g，離心時間t5min，溫度T24度，餘同實施例1。
實施例3本發明採用的雙通道多聯血袋的連接如圖2所示，其輕離心力RCF900g，離心時間t10min，溫度T22度；變速離心的初始離心條件為離心力RCF2600g，離心時間t5min，溫度T22度，後離心條件為離心力RCF1600g，離心時間t12min，溫度T22度，變速過程在30S內完成；懸掛離心為離心力RCF200g，離心時間t8min，溫度T22度，餘同實施例1。
權利要求
1.一種製備濃縮血小板的方法，它包括原料血，其特徵是對原料血進行輕離心，輕離心後收集上層富血小板血漿和白膜層製成混懸液；對混懸液進行變速離心，分出混懸液中多餘的血漿得濃縮混懸液；將濃縮混懸液搖勻後靜置；然後對濃縮混懸液懸掛輕離心，收集上層富血小板血漿，即濃縮血小板PC。
2.根據權利要求1所述的一種製備濃縮血小板的方法，其特徵是所述的輕離心條件為離心力RCF 720-1120g，離心時間t 6-15min，溫度T 20-24度。
3.根據權利要求1所述的一種製備濃縮血小板的方法，其特徵是所述的變速離心的條件為初始離心條件為離心力RCF 1800-4050g，離心時間t 3-10min，溫度T 20-24度，後離心條件為離心力RCF 1500-1800g，離心時間t 10-20min，溫度T 20-24度，其變速過程在20-120S內完成。
4.根據權利要求1所述的一種製備濃縮血小板的方法，其特徵是所述的懸掛輕離心的條件為離心力RCF 160-320g，離心時間t 5-12min，溫度T 20-24度。
5.一種用於實施權利要求1所述方法的裝置懸掛器，其特徵是它呈「 」形，上端為懸掛鉤[2]，下端為平衡尾[1]。
6.一種用於實施權利要求1所述方法的裝置雙通道多聯血袋，它包括抗凝劑袋[3]、轉移袋、代漿液袋[4]，抗凝劑袋[3]、轉移袋、代漿液袋[4]上分別設有一根管道與主管道相連，成樹枝狀，其特徵是在轉移袋上加設有一根與主管道相連的管道。
7.根據權利要求6所述的一種用於製備濃縮血小板懸液的雙通道多聯血袋，其特徵是所述的轉移袋與抗凝劑袋[3]相鄰。
全文摘要
本發明公開了一種製備濃縮血小板的方法及裝置,它包括原料血,其特徵是對原料血進行輕離心,輕離心後收集上層富血小板血漿和白膜層製成混懸液,對混懸液進行變速離心,分出混懸液中多餘的血漿得濃縮混懸液,將濃縮混懸液搖勻後靜置,然後用懸掛器對濃縮混懸液懸掛輕離心,收集上層富血小板血漿,即濃縮血小板PC,為方便操作採用了雙通道多聯血袋,本發明具有Pt濃度高、單位血小板含量大、輸血安全性好、血小板結構功能完整等特點。
文檔編號B01D17/02GK1383831SQ0111444
公開日2002年12月11日 申請日期2001年4月28日 優先權日2001年4月28日
發明者陳文峰, 吳建軍, 孫麗娜, 鄧群英 申請人:益陽市中心血站