地瑞那韋乙醇鹽在製備預防或治療內毒素血症和膿毒症的藥物中的應用的製作方法
2023-05-23 22:36:41
地瑞那韋乙醇鹽在製備預防或治療內毒素血症和膿毒症的藥物中的應用的製作方法
【專利摘要】本發明提供了地瑞那韋乙醇鹽的藥物新用途，具體涉及地瑞那韋乙醇鹽通過抑制高遷移率族蛋白B1(highmobility?groupprotein，HMGB1)的表達從而抑制內毒素血症和膿毒症的發生發展，以致於預防或治療內毒素血症和膿毒症。在上述應用中，其注射使用劑量範圍是50mg～2000mg；優選50～1000mg；口服使用劑量範圍是100mg～6000mg；優選200～3000mg。
【專利說明】地瑞那韋乙醇鹽在製備預防或治療內毒素血症和膿毒症的 藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及地瑞那韋乙醇鹽抑制膿毒症的發生發展從而預防或治療內毒素血症 和膿毒症；具體涉及地瑞那韋乙醇鹽通過抑制高遷移率族蛋白B1 (high mobility group protein，HMGB1)的表達，以致於預防或治療內毒素血症和膿毒症。
【背景技術】
[0002] 膿毒症（sepsis)，即膿毒血症。是一種由感染引起的臨床症候群。化膿性病原菌 侵入血流並在其中大量的繁殖，並隨血流向全身擴散，在組織器官引起的新的多發性化膿 性病灶。膿毒症常伴有下列徵象：體溫高於或低於正常，白細胞增多或減少、心動過速、呼吸 急促或每分鐘通氣量異常升高，如臨床上出現其中兩項或兩項以上症狀，即可診斷膿毒血 症；當伴發器官功能衰竭，即稱為重症膿毒血症（severe sepsis)。美國每年有50萬名膿 毒血症患者，存活率僅55 %?65%。
[0003] 膿毒症是嚴重創傷、燒傷、休克、大手術後常見的併發症，也是外科危重患者重要 的死亡原因之一。目前研究認為HMGB-1在膿毒症中也起著關鍵作用[Wang H，Bloom 0， Zhang M,Vishnubhakat JM,Qmbrellino M,Che J. HMG-las a late mediator of endotoxin lethality in mice. Sciencel999,285 (5425) :248-251；Andersson U,Tracey KJ. HMGBlin sepsis. Scand J Infect Dis2003,35 (9) :577-584.]。
[0004] 地瑞那韋乙醇鹽（darunavir ethalolate，又稱"達如那韋"，商品名prezista)適 用於與小劑量利託那韋或其它抗HIV藥合用治療其它抗HIV藥治療無效的成人HIV感染， 是一種新的HIV-1蛋白酶抑制藥，其作用機制是選擇性抑制感染細胞內的編碼Gag-Pol多 蛋白HIV卵裂，繼而抑制形成成熟的病毒粒，但地瑞那韋乙醇鹽在預防或治療內毒素血症 和膿毒症的藥理作用未見報導。本發明人通過大量的研究發現地瑞那韋乙醇鹽可以通過抑 制脂多糖刺激的人腹腔巨噬細胞HMGB1的表達從而在預防或治療內毒素血症和膿毒症有 明顯的作用。基於此，本發明人發明了地瑞那韋乙醇鹽通過抑制巨噬細胞HMGB1的的表達 從而抑制膿毒症的發生發展，以致於預防或治療內毒素血症和膿毒症。
【發明內容】
[0005] 本發明提供了地瑞那韋乙醇鹽在製備預防或治療內毒素血症和膿毒症的藥物中 的應用。
[0006] 本發明提供了地瑞那韋乙醇鹽在抑制內毒素血症和膿毒症中HMGB1的藥物中的 應用。
[0007] 本發明提供了地瑞那韋乙醇鹽在製備預防或治療內毒素血症的藥物中的應用。
[0008] 本發明提供了地瑞那韋乙醇鹽在製備預防或治療膿毒症的藥物中的應用。
[0009] 發明提供的地瑞那韋乙醇鹽在用於膿毒症時，其注射使用劑量範圍是50mg? 2000mg ;優選50?lOOOrng ;其口服使用劑量範圍是100mg?6000mg ;優選200?3000mg。
[0010] 本發明還提供的地瑞那韋乙醇鹽可以和藥學上可接受的載體或輔料組成的藥物， 該藥物可以以藥學常規方法製備成注射液、凍乾粉針、片劑、膠囊劑、薄膜包衣片，優選以凍 乾粉針和薄膜包衣片形式存在。
【具體實施方式】
[0011] 實施例1地瑞那韋乙醇鹽凍乾粉針製備
[0012] 取地瑞那韋乙醇鹽50. 0g，加注射用水2000ml使其溶解，加甘露醇8g，攪拌溶解， 超濾，得到無熱源的澄清液，灌入l〇ml西林瓶中，2ml/只，按凍乾粉針工藝凍幹，製成每支 含地瑞那韋乙醇鹽50. Omg的凍乾粉針。
[0013] 實施例2地瑞那韋乙醇鹽薄膜包衣片製備
[0014] 稱取100. 0g地瑞那韋乙醇鹽、和100. 0g羧甲基澱粉鈉充分混合均勻後過100目 篩，加入適量的3% PVPK3(I水溶液適量制軟材，20目篩制粒，60°C乾燥3小時，18目篩整粒， 加入2. 0g硬脂酸鎂，混合均勻後壓片。製備包衣液，在不鏽鋼容器中加入純水，後加入物 料，持續攪拌，脫泡。包衣將壓好的片子裝入包衣鍋中，預熱後進行噴霧包衣，待噴霧結束後 繼包衣鍋至片子乾燥。將乾燥的片子進行冷卻，加入巴西棕擱蠟進行打光，片重約200mg。
[0015] 具體實施例
[0016] 試驗例1地瑞那韋乙醇鹽對脂多糖刺激的人腹腔巨噬細胞HMGB1表達的影響
[0017] 1.1實驗材料
[0018] DMEM培養基為Gibco公司產品，新生牛血清為杭州四季青公司產品
[0019] 脂多糖（LPS)購自sigma公司，批號：20130412
[0020] 人腹腔巨噬細胞株購自中國典型培養物保藏中心，用含10%胎牛血清（Hyclone 公司）的低糖DMEM培養基（GIBC0公司），常規培養於5%的C02, 37°C人工培養箱中，細胞 呈貼壁生長。HMGB1 -抗購買於sigma公司。
[0021] 地瑞那韋乙醇鹽（純度99. 5%，購買於上海翰香生物科技有限公司）
[0022] 1. 2試驗方法
[0023] 當細胞生長融合至70% -80%，用無血清培養基飢餓24h，換新鮮培養液，將傳代 的人腹腔巨噬細胞分為：（1)陰性對照組；（2)LPS處理組（2μ g/L作用時間24h) ; (3)LPS 處理組（2 μ g/L作用時間24h) +地瑞那韋乙醇鹽0. 3 μ Μ ; (4) LPS處理組（2 μ g/L作用時間 24h) +地瑞那韋乙醇鹽1 μ Μ ; (5) LPS處理組（2 μ g/L作用時間24h) +地瑞那韋乙醇鹽3 μ Μ ; (6) LPS處理組（2 μ g/L作用時間24h) +地瑞那韋乙醇鹽10 μ Μ。培養的細胞進行裂解，BCA 蛋白測定試劑盒（Pierce公司）測定蛋白濃度後，取50 μ g樣品蛋白進行10%的十二烷基 磺酸鈉-聚丙烯醯胺（SDS-PAGE)凝膠變性電泳、然後轉至聚偏二氟乙烯（PVDF)膜，加入 HMGB1 -抗，β -actin作內參，Western blot檢測細胞HMGB1蛋白的表達。以LPS未刺激 組作為對照，計為相應蛋白的100 %，分析各濃度藥物與單純LPS刺激組對HMGB1蛋白的表 達差異。組間進行T檢驗。
[0024] 表1地瑞那韋乙醇鹽對脂多糖刺激的人腹腔巨噬細胞HMGB1表達影響（η = 5)
[0025]
【權利要求】
1. 本發明提供了地瑞那韋乙醇鹽在製備預防或治療內毒素血症和膿毒症的藥物中的 應用。
2. 根據權利要求1所述的應用，地瑞那韋乙醇鹽是通過抑制HMGB1表達達到預防或治 療內毒素血症和膿毒症。
3. 根據權利要求2所述的應用，地瑞那韋乙醇鹽可預防或治療內毒素血症。
4. 根據權利要求2所述的應用，地瑞那韋乙醇鹽預防或治療膿毒症。
5. 根據權利要求3和4所述的應用，地瑞那韋乙醇鹽用於內毒素血症和膿毒症時，其 注射使用劑量範圍是50mg?2000mg ;優選50?lOOOmg ;其口服使用劑量範圍是lOOmg? 6000mg ;優選 200 ?3000mg。
6. 根據權利要求5所述的應用，地瑞那韋乙醇鹽和藥學上可接受的載體或輔料組成的 藥物，該藥物可以以藥學常規方法製備成注射液、凍乾粉針、片劑、膠囊劑、薄膜包衣片，優 選以凍乾粉針和薄膜包衣片形式存在。
【文檔編號】A61P31/04GK104095862SQ201410379496
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年7月26日 優先權日:2014年7月26日
【發明者】蔣王林, 亢澤春 申請人:濱州醫學院