一種二氧化硫殘留量檢測試劑盒及其製備方法和應用的製作方法
2023-05-15 07:18:36 2
一種二氧化硫殘留量檢測試劑盒及其製備方法和應用的製作方法
【專利摘要】本發明提供了一種用於檢測二氧化硫殘留量的試劑盒，所述試劑盒包括檢測試紙和標準比色卡；本發明還提供了所述試劑盒的製備方法和使用方法，以及上述檢測試劑盒、其製備方法在檢測中藥材或中藥材飲片中二氧化硫殘留量的應用。與現有技術相比，本申請所使用的藥均對人體無毒副作用的試劑，反應產物也無毒；使用方便，無需實驗室專業測試人員和檢測設備，適宜日常檢測；穩定性好，溶液中添加了碘化鉀後單質碘就和碘化鉀形成碘配離子，使碘不易揮發，並且增加了碘的溶解度；顏色變化明顯，實驗前後顏色變化明顯。因此，本申請的試劑盒和檢測方法在普通商品的檢測中有很大的應用前景。
【專利說明】一種二氧化硫殘留量檢測試劑盒及其製備方法和應用
【技術領域】
[0001]本發明屬於中藥檢測領域，涉及一種中藥材及飲片中二氧化硫殘留量的檢測，尤其涉及一種用於檢測中藥材及飲片中二氧化硫殘留量的試紙及其製備方法。
【背景技術】
[0002]為了方便運輸和提高儲藏質量，很多中藥材必須經過嚴格的乾燥，但是常規乾燥方法成本高、效果差。硫磺燃燒生成的二氧化硫具有漂白作用，具有很好的防蟲、防黴和防腐等效果；而且方法簡便，成本低。因此，硫磺燻蒸被廣泛應用於中藥材或食品的加工中。硫磺燻蒸產生的二氧化硫會以游離型和結合型的SO廣形式殘留在藥材或食品中，從而產生一系列的食用安全問題。但是，由於缺乏更加有效、廉價的藥材保存方法，目前還不能完全禁止硫磺在中藥材中的使用。因此，為了解決中藥材加工過程中濫用硫磺燻蒸的問題，保證中藥的食用安全性，在2010年版《中國藥典》第二增補本(2013年)中，國家藥典委員會規定了二氧化硫殘留限量標準:山藥、牛膝、粉葛、天麻、天冬、天花粉、白及、白芍、白朮、黨參等10種傳統習用硫磺燻蒸的中藥材及其飲片，亞硫酸鹽殘留量(以二氧化硫計)不得超過400mg/kg ;其他中藥材及飲片(礦物來源的中藥材除外，下同)中亞硫酸鹽殘留量(以二氧化硫計)不得過150mg/kg。上述限量標準均在世界衛生組織(WHO)認可的安全標準範圍內。
[0003]現在不僅是中藥材或食品生產者、加工者和經銷者需要監控二氧化硫的殘留量，而且普通消費者也需要了解商品的安全性，因此，二氧化硫的檢測方法就顯得非常重要了。對於有條件的中藥材生產者、加工者和經銷者，可以完全依照《中國藥典》(2010年版)「附錄IX U 二氧化硫殘留量測定法」進行檢測，但是這種檢測方法的裝置很複雜，操作過程很繁瑣，待測物的處理需要氮氣瓶、回流裝置、電爐、鹽酸、處理時間長，雖然定量準確。但是只適用於檢測機構使用。已公開的中國專利，如CN2015619 33U公開了一種檢測二氧化硫殘留的裝置，其中待測物的處理需要窄口容器，瓶口塞上帶有導氣孔的導氣塞，導氣塞上方緊貼碘化鉀澱粉試紙，試紙上方用帶有導氣孔的上壓蓋固定密封。CN202126407U公開了一種二氧化硫殘留量限量的快速檢測裝置，待測物的處理需要錐形瓶、導氣管、旋塞、旋塞蓋，導氣管通過磨口連接在錐形瓶上；旋塞的中央有圓孔，導氣管套入旋塞的圓孔內；旋塞蓋中央有圓孔，置於旋塞上，並與旋塞吻合。CN102590193A以魯米諾作為發光劑，空氣中的氧氣作為氧化劑，亞硫酸根作為敏化劑，硫酸鈷作為魯米諾-空氣-亞硫酸根離子化學發光體系的催化劑，通過測定加入亞硫酸鹽溶液前後體系的發光總強度的變化，與標準系列比較，可確定亞硫酸鹽的濃度，進而確定食品中二氧化硫含量。需要用到化學發光測量儀暗室等。CN102749410A將待測中藥材樣品採用加酸蒸餾法製成供試品溶液；精密吸取供試品溶液，採用離子色譜，色譜柱為1nPac/AS-11-HC，保護柱為1nPac/AG-11-HC，進樣，測定，用標準曲線法計算樣品中硫酸根含量，折算成樣品中二氧化硫的含量。
[0004]上述現有的檢測方法雖然對《中國藥典》上的方法做了一定的改進，但也必需配備一定的設備和裝置，過程繁瑣，不適宜普通消費者的日常使用。普通消費者需要的是一種便宜、方便、直觀、不需要任何儀器的二氧化硫檢測方法，這種方法能快速地判斷市售商品中是否有二氧化硫的殘留，以及大概的殘留量範圍，但不需要準確定量。而且，它不僅能用於檢測中藥材的二氧化硫殘留，也能用於食品的檢測。但是目前市面上還沒有這樣一種二氧化硫快速檢測方法。
【發明內容】
[0005]因此，針對目前硫燻在中藥材和食品加工的普遍現象，本發明提供了一種快速鑑別硫燻的檢測試紙，以滿足普通消費者的需要，同時本發明還提供了該試紙的製備方法。
[0006]本發明檢測試紙的檢測原理:碘遇澱粉溶液會變藍色，亞硫酸根離子與碘發生氧化還原反應使單質碘變成碘離子，藍色褪去。其化學反應方程式如下:
[0007]SO32 +Ι2+Η20 — 21 +SO42 +2H.[0008]一種用於檢測二氧化硫殘留量的試劑盒，所述試劑盒包括檢測試紙和標準比色卡;
[0009]其中，所述檢測試紙含有層析濾紙，所述層析濾紙使用浸潰液浸潰；其中所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，溶液A為含有I~5%w/v的澱粉，0.05~0.2%w/v的羧甲基纖維素鈉，0.05~0.5%w/v的碘化鉀的水溶液；溶液B為5~15%w/V碘的無水乙醇溶液；
[0010]所述標準比色卡標識不同的二氧化硫標準溶液的濃度範圍，優選地，所述標準比色卡標識的二氧化硫濃度的範圍為O~1300mg/kg，所述標識的二氧化硫濃度的精度為50 ~100mg/kg。
[0011]優選地，所述標準比色卡標識的二氧化硫濃度的精度為50mg/kg，所述濃度範圍為O ~1300mg/kg,
[0012]優選地，所述標準比色卡有十三個濃度範圍，標識的二氧化硫濃度為100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg。優選地，所述標準比色卡有十五個濃度範圍，標識的二氧化硫濃度為50、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg。
[0013]優選地，所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，溶液A為含有2~3%w/v的澱粉，0.1~0.2%w/v的羧甲基纖維素鈉，0.1~0.4%w/v的碘化鉀的水溶液；溶液B為5~15%w/v碘的無水乙醇溶液；
[0014]優選地，所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，溶液A為含有2%w/v的澱粉,0.l%w/v的羧甲基纖維素鈉,0.2%w/v的碘化鉀的水溶液；溶液B為10%w/V碘的無水乙醇溶液；
[0015]一種用於檢測二氧化硫殘留量的試劑盒的製備方法，所述方法包括以下步驟:
[0016]I)檢測試紙的製備:
[0017]將層析濾紙在浸潰液中浸潰I~2min ;然後將浸潰後的層析濾紙在_20°C的冰箱中冷藏20~30min，取出自然乾燥，既得；
[0018]其中，所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，溶液A為含有I~5%w/v的澱粉，0.05~0.2%w/v的羧甲基纖維素鈉，0.05~0.5%w/v的碘化鉀的水溶液；溶液B為5~15%w/v碘的無水乙醇溶液；
[0019] 優選地，所述溶液A配製方法如下:取I~5mg的澱粉和0.05~0.2!1^的羧甲基纖維素鈉溶於IOOmL水中，加熱煮沸使上述兩種物質充分溶解，冷卻,然後添加0.05?0.5mg的碘化鉀；
[0020]優選地，將所述乾燥後的層析濾紙截切成長為4.0?6.0cm,寬為0.8?1.2cm的試紙條；
[0021]2)標準比色卡的製備，以檢測時取樣量為0.1g藥材溶於2mL水中計，用亞硫酸氫鈉配製不同標識濃度(以二氧化硫計)的溶液，分別將根據步驟I)製得的檢測的試紙一端浸潤到溶液中3秒後拿出，觀察試紙顏色變化並與浸潤了水的試紙比較，將顯色後的試紙掃描，依濃度梯度製作成標準比色卡；
[0022]優選地，所述標識濃度為100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg ；
[0023]優選地，所述標識濃度為50、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg ；
[0024]一種二氧化硫殘留量的檢測方法，所述方法包括以下步驟:
[0025]I)稱取待測的中藥材或飲片溶於水中，其中所述中藥材或飲片與水的質量體積之比為0.1g:2mL，震蕩l_3min，靜置至不溶物沉澱並呈現上清液；
[0026]2)取所述的檢測試紙浸潤到步驟I)的上清液中，觀察試紙的顏色變化並與浸潤了水的試紙比較；
[0027]若藍色褪去或顏色與浸潤了水的試紙比較變淺了，則該被測中藥材或飲片中含有二氧化硫，可與製作的標準比色卡對照，確定中藥材或飲片的二氧化硫殘留含量。
[0028]上述檢測試劑盒、其製備方法在檢測中藥材或中藥材飲片中二氧化硫殘留量的應用。
[0029]上述檢測試劑盒、其製備方法在檢測食品中二氧化硫殘留量的應用。
[0030]與現有技術相比，本申請具備以下優點:
[0031]1.安全無毒:所使用的藥均對人體無毒副作用的試劑，反應產物也無毒；
[0032]2.使用方便，無需實驗室專業測試人員和檢測設備，適宜日常檢測；
[0033]3.穩定性好，溶液中添加了碘化鉀後單質碘就和碘化鉀形成碘配離子，使碘不易揮發，並且增加了碘的溶解度；
[0034]4.顏色變化明顯，實驗前後顏色變化明顯。
[0035]5.檢測限低，實驗室研究表明，該試紙的檢測限可以達到50mg/kg (以二氧化硫計)；能粗略定量，可比照二氧化硫標準比色卡初步確定中藥材及飲片中的二氧化硫殘留量，確定中藥材及飲片中的二氧化硫殘留量是否超過《中國藥典》(2010年版)第二增補本(2013年)的限量標準。
[0036]試紙採用避光的塑料盒包裝，保存期一年。
[0037]本發明能用於檢測含有二氧化硫或亞硫酸根的待測物，包括中藥材、食品等。
[0038]由於硫燻技術或二氧化硫消毒技術在各行業的應用很廣泛，導致很多可食性商品含有不同程度的二氧化硫殘留；加上人們對食品安全問題也來越重視，急需一種快速檢測方法。但是現有的二氧化硫檢測都需要專業的設備和技術，目前缺乏適合普通消費者使用的技術。本發明能夠彌補市場的空白，因此在普通商品的檢測中有很大的應用前景。【專利附圖】
【附圖說明】
[0039]以下，結合附圖來詳細說明本發明的實施方案，其中:
[0040]圖1為本發明的二氧化硫殘留量標準比色卡；
[0041]圖2為根據本發明的試劑檢測藥材含硫量的結果，其中，A:無硫山藥、B:高硫燻山藥(SO2 殘留約為 1300mg/kg)、C:低硫山藥(SO2:70mg/kg)、D:硫燻白苟(SO2:1000mg/kg)。
【具體實施方式】
[0042]實施例1本發明的試劑盒的製備
[0043]將層析濾紙在室溫浸潰液中浸潰I?2min後，取出放在平板上，在_20°C的冰箱中冷藏20?30min後,取出自然乾燥，然後截切成長為4.0?6.0cm,寬為0.8?1.2cm的試紙條。
[0044]所述浸潰液由溶液A和溶液B按1000:3混合而成,溶液A配製方法如下:取Img的澱粉和0.05mg的羧甲基纖維素鈉溶於IOOmL水中，加熱煮沸使上述兩種物質充分溶解，冷卻，然後添加0.05mg的碘化鉀；溶液B為5?15% (w/v)碘的無水乙醇溶液。
[0045]標準比色卡製備:以檢測時取樣量為0.1g藥材溶於2mL水中計，用亞硫酸氫鈉配製濃度分別為 50、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg (以二氧化硫計)的溶液，分別用檢測的試紙一端浸潤到溶液中約3秒後拿出，觀察試紙顏色變化並與浸潤了水的試紙比較，將顯色後的試紙掃描，依濃度梯度製作成標準比色卡。
[0046]實施例2本發明的試劑盒的製備
[0047]將層析濾紙在室溫浸潰液中浸潰I?2min後，取出放在平板上，在_20°C的冰箱中冷藏20?30min後,取出自然乾燥，然後截切成長為4.0?6.0cm,寬為0.8?1.2cm的試紙條。
[0048]所述浸潰液由溶液A和溶液B按1000:3混合而成,溶液A配製方法如下:取5mg的澱粉和0.2mg的羧甲基纖維素鈉溶於IOOmL水中，加熱煮沸使上述兩種物質充分溶解，冷卻，然後添加0.5mg的碘化鉀；溶液B為15% (w/v)碘的無水乙醇溶液。
[0049]標準比色卡製備:以檢測時取樣量為0.1g藥材溶於2mL水中計，用亞硫酸氫鈉配製濃度分別為 50、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg (以二氧化硫計)的溶液，分別用檢測的試紙一端浸潤到溶液中約3秒後拿出，觀察試紙顏色變化並與浸潤了水的試紙比較，將顯色後的試紙掃描，依濃度梯度製作成標準比色卡。
[0050]實施例3本發明的試劑盒的製備
[0051]將層析濾紙在室溫浸潰液中浸潰I?2min後，取出放在平板上，在_20°C的冰箱中冷藏20?30min後,取出自然乾燥，然後截切成長為4.0?6.0cm,寬為0.8?1.2cm的試紙條。
[0052]所述浸潰液由溶液A和溶液B按1000:3混合而成，溶液A配製方法如下:取2mg的澱粉和0.1mg的羧甲基纖維素鈉溶於IOOmL水中，加熱煮沸使上述兩種物質充分溶解，冷卻，然後添加0.2mg的碘化鉀；溶液B為10% (w/v)碘的無水乙醇溶液。
[0053]標準比色卡製備:以檢測時取樣量為0.1g藥材溶於2mL水中計，用亞硫酸氫鈉配製濃度分別為 50、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg(以二氧化硫計)的溶液，分別用檢測的試紙一端浸潤到溶液中約3秒後拿出，觀察試紙顏色變化並與浸潤了水的試紙比較，將顯色後的試紙掃描，依濃度梯度製作成標準比色卡，見圖1。
[0054]實施例4本發明的試劑盒的使用
[0055]稱取待測的中藥材或飲片0.1g溶於2mL水中，震湯Imin,待不溶物沉澱後檢測。
[0056]取一張試紙條浸潤到溶液中約3秒，觀察試紙的顏色變化並與浸潤了水的試紙比較，若藍色褪去或顏色與浸潤了水的試紙比較變淺了，則該被測中藥材或飲片中含有二氧化硫，可與製作的標準比色卡對照，確定中藥材或飲片的二氧化硫殘留含量。
[0057]實施例5本發明的試劑盒的使用
[0058]選取如下藥材進行試驗，A:無硫山藥、B:高硫燻山藥(SO2殘留約為1300mg/kg)、C:低硫山藥(SO2:70mg/kg)、D:硫燻白苟(SO2:1000mg/kg)分別稱取上述藥材各0.1g溶於2mL水中，震蕩lmin，待不溶物沉澱後用本發明的試紙根據實施例4的方法進行檢測，試驗結果詳見附圖2。通過試紙檢測結果和使用《中國藥典》(2010年版)「附錄IX U 二氧化硫殘留量測定法」進行檢測結果比較接近，該試紙可以準確地確定中藥材及飲片是否被硫燻，並且能根據顏色變化深淺得知SO2的殘留量。
【權利要求】
1.一種用於檢測二氧化硫殘留量的試劑盒，所述試劑盒包括檢測試紙和標準比色卡； 其中，所述檢測試紙為層析濾紙，所述層析濾紙使用浸潰液浸潰；所述浸潰液溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，溶液A為含有I~5%w/v的澱粉，0.05~0.2%w/V的羧甲基纖維素鈉，0.05~0.5%w/V的碘化鉀的水溶液；溶液B為5~15%w/v碘的無水乙醇溶液； 所述標準比色卡標識不同的二氧化硫標準溶液的濃度範圍。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其中，所述標準比色卡標識的二氧化硫濃度的範圍為0~1300mg/kg,標識精度為50~100mg/kg ； 優選地，所述標準比色卡標識的二氧化硫濃度的精度為50mg/kg。
3.根據權利要求1或2所述的試劑盒，其中，所述標準比色卡有十三個濃度範圍，標識的二氧化硫濃度為 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg ； 優選地，所述標準比色卡有十五個濃度範圍，標識的二氧化硫濃度為50、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg。
4.根據權利要求1-3中任一項所述的試劑盒，其中，所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，溶液A為含有2~3%w/v的澱粉，0.1~0.2%w/v的羧甲基纖維素鈉，0.1~0.4%w/v的碘化鉀的水溶液；溶液B為5~15%w/v碘的無水乙醇溶液。
5.根據權利要求4所述的試劑盒，其中，所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，溶液A為含有2%w/v的澱粉，0.l%w/v的羧甲基纖維素鈉，0.2%w/v的碘化鉀的水溶液；溶液B為10%w/v碘的無水乙醇溶液。
6.權利要求1-5中任一項所述的試劑盒的製備方法，所述方法包括以下步驟: 1)檢測試紙的製備: 將層析濾紙在浸潰液中浸潰I~2min ;然後將浸潰後的層析濾紙在-20°c的冰箱中冷藏20~30min，取出自然乾燥，既得； 其中，所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，所述溶液A配製方法如下:取I~5mg的澱粉和0.05~0.2mg的羧甲基纖維素鈉溶於IOOmL水中，加熱煮沸使上述兩種物質充分溶解，冷卻，然後添加0.05~0.5mg的碘化鉀； 溶液B為5~15%w/v碘的無水乙醇溶液； 優選地，將所述乾燥後的層析濾紙截切成長為4.0~6.0cm,寬為0.8~1.2cm的試紙條; 2)標準比色卡的製備，以檢測時取樣量為0.1g藥材溶於2mL水中計，用亞硫酸氫鈉配製以二氧化硫計不同標識濃度的溶液，分別將根據步驟I)製得的檢測的試紙一端浸潤到溶液中3秒後拿出，觀察試紙顏色變化並與浸潤了水的試紙比較，將顯色後的試紙掃描，依濃度梯度製作成標準比色卡； 優選地，所述標識濃度為 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg ； 優選地，所述標識濃度為 50、100、150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300mg/kg。
7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，所述溶液A配製方法如下:取2~3mg的澱粉和0.1~0.2mg的羧甲基纖維素鈉溶於IOOmL水中，加熱煮沸使上述兩種物質充分溶解，冷卻，然後添加0.1~0.4mg的碘化鉀； 溶液B為5~15%w/v碘的無水乙醇溶液； 優選地，所述浸潰液由溶液A和溶液B按體積比為1000:3的比例混合而成，所述溶液A配製方法如下:取2mg的澱粉和0.1mg的羧甲基纖維素鈉溶於1OOmL水中，加熱煮沸使上述兩種物質充分溶解，冷卻，然後添加0.2mg的碘化鉀； 溶液B為10%w/v碘的無水乙醇溶液。
8.—種二氧化硫殘留量的檢測方法，所述方法包括以下步驟: 1)稱取待測的中藥材或飲片溶於水中，其中，所述中藥材或飲片與水的質量體積之比為0.1g:2mL，震蕩l_3min，靜置至不溶物沉澱並呈現上清液； 2)取所述的檢測試紙浸潤到步驟1)的上清液中，觀察試紙的顏色變化並與浸潤了水的試紙比較； 3)若藍色褪去或顏色與浸潤了水的試紙比較變淺了，則該被測中藥材或飲片中含有二氧化硫，可與製作的標準比色卡對照，確定中藥材或飲片的二氧化硫殘留含量範圍。
9.如權利要求1-5中任一項所述的檢測試劑盒，權利要求6或7所述的製備方法，或權利要求8所述的檢測方法在檢測中藥材或中藥材飲片中二氧化硫殘留量中的應用。
10.如權利要求1-5中任一項所述的檢測試劑盒，權利要求6或7所述的製備方法，或權利要求8所述的檢測方法 N在檢測食品中二氧化硫殘留量的應用。
【文檔編號】G01N21/78GK103940811SQ201410088695
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年3月11日 優先權日:2014年3月11日
【發明者】鄭玉忠, 張勇, 張振霞, 曹暉, 賀震旦, 詹華強, 向飛軍, 許冬瑾, 馬興田 申請人:康美藥業股份有限公司, 廣東康美藥物研究院有限公司