羊含鋅精液稀釋保存液及其配製方法

2023-05-16 00:25:26

羊含鋅精液稀釋保存液及其配製方法
【專利摘要】本發明公開了一種羊含鋅精液稀釋保存液及其配製方法，它由如下原料配製而成：二水合檸檬酸三鈉1.8～2.9g、果糖1.5～2.5g、L-賴氨酸鋅0.5～1.0g、催產素15～25IU、新鮮卵黃離心上清液5～15ml、鮮牛乳離心液100.0ml。本發明採用的牛乳離心液中含有精子運動所需的各種營養物質和微量元素，所含的多種糖類和添加的果糖，可以共同更好地為精子提供能量，來彌補能量消耗，延長精子存活時間。並添加L-賴氨酸鋅，同時補充了精液中L-賴氨酸和鋅的含量，改善稀釋後的精漿生化成分，有助於精漿的正常代謝，減緩精子死亡，增加精子運動能力，提高精子活力；同時適量的鋅可以保護頂體酶免於被水解。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發明屬於動物繁殖【技術領域】，具體說涉及一種用於提高羊新鮮精液長途運輸後 的精液品質及其受精率的精液稀釋保存液及其配製方法。 羊含鋅精液稀釋保存液及其配製方法

【背景技術】
[0002] 人工授精採用的精液主要有兩種，即新鮮精液和冷凍精液，前者常簡稱為鮮精，後 者簡稱為凍精。為提高種公羊的利用率，便於精液的保存及運輸，一些種羊場及家畜改良工 作站常製作凍精，用於羊的配種工作。但生產凍精的設備昂貴，保存運輸過程需要及時補充 液氮，精液解凍技術要求較高，羊凍精的受精率較低等，針對羊凍精的這些缺點，很難普及 應用到各養殖場和養殖戶；因而使用凍精大大限制了羊人工授精相關技術的推廣應用。 [0003]目前，市場上擁有大量的羊凍精稀釋液及稀釋保存液，鮮精稀釋液及稀釋保存液 較少，其主要組份多為葡萄糖、檸檬酸鈉、抗菌素，此類精液稀釋液配方，存在稀釋後精子活 力迅速降低，質膜完整率低，頂體完整率低，精子存活時間短等缺點；尤其是精子活率，質膜 完整率，頂體完整率在48小時以後都有較大幅度的降低，見表2,也就是說羊的鮮精液保存 2?3天後受精率會有大幅度下降，添加抗菌素會導致濫用抗生素，而產生細菌耐藥性。
[0004] 生產一線常常採用生理鹽水進行羊的鮮精稀釋，這種方法僅可以滿足現場採精， 現場稀釋，即時輸精的生產需求。然而，在優質種羊數量有限，精液需求區域面積較廣的 情況下，就需要把優質鮮精進行長途運輸，這就需要延長精液保存時間，有時需要運輸達到 12h以上，特殊情況下甚至需要保存三四天時間。因此，良好的羊鮮精稀釋保存液成為提高 人工輸精受精率的關鍵因素。


【發明內容】

[0005] 本發明的目的在於提供一種羊含鋅精液稀釋保存液及其配製方法，用以解決鮮精 運輸過程中延長精子存活時間，保持精子活力，提高精子頂體完整率，質膜完整率，提高受 精率。
[0006] 本發明的技術方案如下：
[0007] 羊含鋅精液稀釋保存液，它由如下原料配製而成：
[0008] 二水合檸檬酸三鈉（C6H5Na307 · 2H20) 1. 8 ?2. 9g、果糖（C6H1206) 1. 5 ?2. 5g、L-賴 氨酸鋅（Zn(Lys)2 · 2Η20)0· 5?1. 0g、催產素（C43H66N12012S 2) 15?25IU、新鮮卵黃離心上清 液5?15ml、鮮牛乳離心液100. 0ml。
[0009] 上述配方的進一步方案為：二水合檸檬酸三鈉（C6H5Na 307 · 2H20)2.2g、果糖 (C6H1206) 1.8g、L-賴氨酸鋅（Zn(Lys)2 · 2H20)1.0g、催產素（C43H66N120 12S2)20IU、新鮮卵黃離 心上清液l〇ml、鮮牛乳離心液100. 0ml。
[0010] 上述羊含鋅精液稀釋保存液配製方法由如下步驟組成：
[0011] 1. 1、取鮮牛乳，先經4?8層滅菌紗布過濾，然後於110°C高壓滅菌lOmin，靜置至 室溫，用滅菌鑷子將奶皮除淨，於4°C 3000g離心lOmin，棄上層漂浮物及下層沉澱，吸取中 間層即獲得鮮牛乳離心液A;
[0012] 1. 2、準確稱取二水合檸檬酸三鈉1. 8?2. 9g，果糖1. 5?2. 5g，L-賴氨酸鋅0. 5? 1. 0g，加入到100. 0ml的鮮牛乳離心液A中，於50?60°C水浴加熱，並進行順時針攪拌溶解 5?lOmin，獲得溶液B ;
[0013] 1.3、無菌吸取新鮮卵黃液，用滅菌生理鹽水進行1:1稀釋後，加入到滅菌的離心 管中，於4°C 5000g離心lOmin，吸取上清液5?15ml，於20?30°C靜置lOmin，獲得卵黃離 心上清液C ;
[0014] 1.4、在37°C恆溫水浴條件下，將卵黃離心上清液C緩緩加入到溶液B中，混勻獲得 溶液D ;稀釋精液後，於4°C恆溫進行保存運輸；
[0015] 1. 5、在輸精前，於每100ml稀釋保存液中加入催產素15?25IU。
[0016] 本發明的優點在於：
[0017] 1、本發明採用的牛乳離心液中含有精子運動所需的各種營養物質和微量元素，牛 乳離心液中的多種糖類和添加的果糖，可以共同更好地為精子提供能量，來彌補能量消耗， 延長精子存活時間。
[0018] 2、本發明首次在羊精液稀釋保存液中添加L-賴氨酸鋅，同時補充了精液中L-賴 氨酸和鋅的含量，改善稀釋後的精漿生化成分，有助於精漿的正常代謝，減緩精子死亡，增 加精子運動能力，提高精子活力；同時適量的鋅可以保護頂體酶免於被水解。
[0019] 3、催產素除了促進母畜排卵，還有促進母畜生殖道蠕動，有利於精子運行，使精子 提iu到達受：精部位，從而提1?受:胎率的作用。
[0020] 4、該羊精液稀釋保存液中的卵黃和牛乳採用離心後進行添加，含有抗冷休克因 子，具有抗冷凍功能，同時，離心除掉了其他無用或有害的顆粒物質，避免了精子膽固醇的 流失。
[0021] 5、該羊精液稀釋保存液均是無菌配製，且不添加任何抗生素，可以在避免濫用抗 生素的基礎上減少疫病感染和傳播。
[0022] 6、該羊精液稀釋保存液成本低廉，製作方法簡單，容易配製，稀釋保存效果好。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0023] 圖1是本發明配製的工藝流程圖。

【具體實施方式】
[0024] 由圖1可以看到本發明的製作的工藝流程，在下面結合方法的實施例對圖1作進 一步說明。
[0025] 實施例 1 :二水合檸檬酸三鈉 （C6H5Na307 · 2H20) 2. 2g、果糖（C6H1206) 1. 8g、L-賴氨 酸鋅（Zn(Lys)2 ·2Η20) 1. Og、催產素 （C43H66N12012S2)20IU、新鮮卵黃離心上清液10ml、鮮牛乳 離心液100. 0ml。
[0026] 上述精液稀釋保存液配製方法為：
[0027] 由圖1可以看到，取鮮牛乳，先經8層滅菌紗布過濾，然後於110°C高壓滅菌 lOmin，靜置至室溫，用滅菌鑷子將奶皮除淨，於4°C 3000g離心lOmin，棄上層漂浮物及下 層沉澱，吸取中間層即獲得鮮牛乳離心液A。準確稱取二水合檸檬酸三鈉2. 2g，果糖1. 8g， L-賴氨酸鋅0. 8g，加入到100. Oml的鮮牛乳離心液A中，於50?60°C水浴加熱，並進行順 時針攪拌溶解5?lOmin，獲得溶液B。無菌吸取新鮮卵黃液，用滅菌生理鹽水進行1:1稀 釋後，加入到滅菌的離心管中，於4°C 5000g離心lOmin，吸取上清液10ml，於20?30°C靜 置lOmin，獲得卵黃離心上清液C。在37°C恆溫水浴條件下，將卵黃離心上清液C緩緩加入 到溶液B中，混勻獲得溶液D。在輸精前，於每100ml稀釋保存液中加入催產素20IU。
[0028] 實施例 2 :二水合檸檬酸三鈉（C6H5Na307 · 2H20) 2. Og，果糖（C6H1206) 1. 5g，L-賴氨 酸鋅（Zn(Lys)2 ·2Η20)0· 8g，催產素（C43H66N12012S 2) 15IU，新鮮卵黃離心上清液12ml，鮮牛乳 離心液100. Oml。
[0029] 實施 3 :二水合檸檬酸三鈉（C6H5Na307 · 2H20) 2. 8g，果糖（C6H1206) 2. 5g，L-賴氨酸 鋅（Zn(Lys)2 ·2Η20)0· 5g，催產素（C43H66N12012S 2)25IU，新鮮卵黃離心上清液15ml，鮮牛乳離 心液 100. Oml。
[0030] 上述三實施例所用藥品的生產廠家如下：
[0031] 表1藥品生產廠家 1234

【權利要求】
1. 一種羊含鋅精液稀釋保存液，其特徵在於：它由如下原料配製而成： 二水合檸檬酸三鈉1. 8?2. 9g、果糖1. 5?2. 5g、L-賴氨酸鋅0. 5?1. Og、催產素 15?25IU、新鮮卵黃離心上清液5?15ml、鮮牛乳離心液100. 0ml。
2. 根據權利要求1所述的羊含鋅精液稀釋保存液，其特徵在於：它由如下原料配製而 成： 二水合檸檬酸三鈉2. 2g、果糖1. 8g、L-賴氨酸鋅1. 0g、催產素20IU、新鮮卵黃離心上 清液10ml、鮮牛乳離心液100. 0ml。
3. 根據權利要求1所述的羊含鋅精液稀釋保存液的配製方法，其特徵在於：由如下步 驟組成： 1. 1、取鮮牛乳，先經4?8層滅菌紗布過濾，然後於11(TC高壓滅菌lOmin，靜置至室 溫，用滅菌鑷子將奶皮除淨，於4°C 3000g離心lOmin，棄上層漂浮物及下層沉澱，吸取中間 層即獲得鮮牛乳離心液A ; 1. 2、準確稱取二水合檸檬酸三鈉1. 8?2. 9g，果糖1. 5?2. 5g，L-賴氨酸鋅0. 5? 1. 0g，加入到100. 0ml的鮮牛乳離心液A中，於50?60°C水浴加熱，並進行順時針攪拌溶解 5?10min，獲得溶液B ; 1.3、無菌吸取新鮮卵黃液，用滅菌生理鹽水進行1:1稀釋後，加入到滅菌的離心管中， 於4°C 5000g離心10min，吸取上清液5?15ml，於20?30°C靜置10min，獲得卵黃離心上 清液C ; 1. 4、在37°C恆溫水浴條件下，將卵黃離心上清液C緩緩加入到溶液B中，混勻獲得溶液 D ;稀釋精液後，於4°C恆溫進行保存運輸； 1. 5、在輸精前，於每100ml稀釋保存液中加入催產素15?25IU。
【文檔編號】A01N1/02GK104082276SQ201410340270
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月17日 優先權日:2014年7月17日
【發明者】韓天龍, 王敏, 毛冉, 李清泉, 石巖, 王麗萍, 李志明 申請人:赤峰市農牧科學研究院