與脫氧膽酸及其多晶型物有關的組合物和方法

2023-05-15 23:59:41

與脫氧膽酸及其多晶型物有關的組合物和方法【專利摘要】本發明提供脫氧膽酸（DCA）的多晶型形式、合成DCA及其中間體的改良方法，以及使用本發明提供的DCA的組合物和去脂方法。【專利說明】與脫氧膽酸及其多晶型物有關的組合物和方法[0001]相關申請的交叉引用[0002]根據35U.S.C.119(e)，本申請要求2011年9月22日提交的美國臨時申請第61/538，084號、2011年11月10日提交的美國臨時申請第61/558，375號以及2012年6月14日提交的美國臨時申請第61/659,920號的權益，上述美國臨時申請中的每一個的全部內容通過引入併入本文。【
技術領域：
】[0003]本發明提供脫氧膽酸(DCA)的多晶型形式，合成DCA及其中間體的改良方法，以及使用本發明提供的DCA的組合物和使用本發明提供的DCA的去脂方法。因此，在一些方面，本發明提供DCA多晶型物，優選地，本發明提供具有意想不到的水穩定性和熱穩定性的DCA的結晶無水多晶型物。在其他方面，本發明還提供純化的DCA組合物以及用於DCA純化的方法和組合物，在所述DCA純化中，DCA的純度優選為至少99%。在其他方面，本發明提供與製備合成的DCA相關的化合物、組合物和方法。【
背景技術：
】[0004]迅速除去身體脂肪是人們長久以來的願望，並且已聲稱有許多物質可達到這種效果，但幾乎沒有物質實際展現出這種效果。雖然自上世紀五十年代以來已經出現了對「美塑療法」的同類療法以及美容產品的需求，但是，出於安全性和有效性考慮，「美塑療法」或者用於去除脂肪的血管注射劑的使用並不被醫師廣泛接受。美塑療法最初在歐洲被設計為一種使用皮膚注射劑的方法，所述皮膚注射劑含有用於治療局部醫學症狀和美容症狀的化合物的混合物。儘管美塑療法一般用於緩解疼痛，但是，最近在美國，美塑療法的美容用途，尤其是去除脂肪和脂肪團的用途，已受到關注。有報導稱，在巴西得到推廣且使用磷脂醯膽鹼注射劑的降低局部脂肪的治療方法被錯誤地認為與美塑療法類同。雖然上述治療方法由於所宣稱的「脂肪溶解」注射劑而受到關注，但是這些美容治療方法幾乎沒有安全性和有效性數據。參見Rotunda,A.M.和Μ.Kolodney,DermatologicSurgery32:,465-480(2006)(「MesotherapyandPhosphatidylcholineInjections!HistoricalClarificationandReview」)。[0005]最近發表的文章報導了膽汁酸、DCA和它們的鹽在注射至體內脂肪堆積物中時具有去除脂肪的性質。參見W02005/117900和W02005/112942,以及US2005/0261258;US2005/0267080;US2006/127468和US20060154906，這些文獻中的每一個的全部內容通過引用併入本文。注射至脂肪組織中的脫氧膽酸鹽通過細胞溶解機制降解脂肪細胞。因為注射至脂肪中的脫氧膽酸鹽通過暴露於蛋白質而快速失活，然後迅速回到小腸內容物中，因此其通過空間方式起效。這種衰減效應提供了臨床安全性，因此，脂肪去除一般需要4至6個階段。這種無需外科手術的局部脂肪去除不僅有益於與病態局部脂肪堆積(例如，HIV治療中的醫療幹預易發生的血脂異常)相關的治療，還有益於美容性脂肪去除，這消除了外科手術(例如，抽脂術)所伴隨的內在風險。參見Rotunda等人，Dermato1.Surgery30:1001-1008(2004)(「Detergenteffectsofsodiumdeoxycholateareamajorfeatureofaninjectablephosphatidylcholineformulationusedforlocalizedfatdissolution」)和Rotunda等人，J.Am.Acad.Dermatol.(2005:973-978)(「Lipomastreatedwithsubcutaneousdeoxycholateinjections」)，這兩篇文獻的全部內容通過引用併入本文。美國專利第7，622，130號和第7，754，230號描述了將DCA用於脂肪去除。[0006]此外，許多重要的類固醇在類固醇的C環上具有12-α-羥基-取代基。這些化合物包括，例如，諸如DCA、膽酸、石膽酸等的膽汁酸。迄今為止，基於成本效益，這些化合物通常從牛類和羊類動物源中回收得到，所述牛類和羊類動物源提供現成的膽汁酸來源。然而，最近發現諸如朊病毒之類的病原體可汙染這些來源，因此通過植物來源或合成的原料合成膽汁酸的替代方法變得越來越重要。例如，根據美國的管理制度，來自紐西蘭的動物的DCA是人類用膽汁酸的來源，只要這些動物繼續保持隔離或者不含可觀測量的病原體。這些嚴格條件對合適的哺乳動物來源的膽汁酸的量強加限制，而且這些嚴格條件沒有排除膽汁酸不含這些病原體的可能性。美國專利公開第8，242，294號涉及含有少於Ippt14C的DCA。[0007]本領域仍然需要合適的量的諸如DCA之類的膽汁酸，優選地，用於人體給藥的膽汁酸。因此，本領域亟需提供一種用於製備和純化DCA的方法。[0008]此外，當將如DCA之類的結晶藥劑用於人體給藥時，重要的是，如DCA之類的結晶藥劑隨時間和生產批次的變化保持其多晶型穩定性和化學穩定性、溶解性和其它物理化學性質。如果物理化學性質隨著時間和批次的變化而發生改變，那麼有效劑量的給藥會難以確定並可導致毒副作用或導致給藥無效。因此，選擇穩定的、可重複生產的並具有有利於人體給藥用途的物理化學性質的結晶藥劑的形式是重要的。對於諸如DCA之類的化合物而言，其溶劑化多晶型物可能含有對於人體給藥而言不期望的量的有機溶劑。然而，從DCA晶體中除去這些殘留的溶劑可能會帶來一些問題。因此，無法預見到用於DCA的結晶，特別是用於製備藥品或活性藥物成分(API)的這些溶劑的使用，並且這些溶劑的使用受到限制。[0009]此外，本領域仍然不能預測藥劑的哪種晶型，特別是DCA的哪種晶型，一般會具有期望的性質的組合且適於人體給藥，以及如何製備這種晶型的藥劑。【
發明內容】[0010]本發明提供脫氧膽酸(DCA)的多晶型形式、合成DCA及其中間體的改良方法，以及使用本發明提供的這種DCA的組合物和去脂方法。[0011]因此，一方面，本發明提供DCA多晶型物，優選地，本發明提供具有意想不到的水穩定性和熱穩定性的DCA的結晶無水多晶型物。[0012]本發明提供DCA的結晶多晶型物，例如在本發明中表徵的A型、B型、C型、D型多晶型物。加熱後，觀察到以下多晶型形式轉化:C—B—D—A，這說明A型是熱力學上最穩定的多晶型物。並且出乎意料地，當在環境溫度下將A型和B型漿狀懸浮於約1:1.2v/v的乙醇(EtOH)/水中時，A型轉化為C型，但B型沒有轉化為C型。[0013]基於在40°C至160°C下，在C型的熱重量分析(TGA)中觀察到2.4%的失水量，C型多晶型物被認為每摩爾DCA含有半摩爾弱結合的水。因為A型、B型、D型在其TGA中均未顯示出任何實質性失水，並且因為半水合物C型加熱後轉化為B型，B型在加熱後進一步轉化為D型和A型，所以，A型、B型和D型是無水多晶型形式。基於差式掃描量熱法(DSC)分析，A型看起來是一種非溶劑化物，因為其在DSC中顯示單吸熱峰(見圖6)。[0014]在一種實施方式中，本發明提供的DCA的結晶無水多晶型物是A型多晶型物。在另一實施方式中，A型多晶型物由15.0°2Θ處的粉末X-射線衍射峰表徵，或者由選自8.9。2Θ,10.7°2Θ,14.0°2Θ，15.0。2Θ，16.2。2Θ和19.1。2Θ處的I個、2個或3個PXRD峰表徵。在另一實施方式中，A型多晶型物由基本如圖1所示的PXRD圖表徵。在另一實施方式中，A型多晶型物由通過差示掃描量熱法測量的174°C下的吸熱峰(±2°C範圍內)表徵。在另一實施方式中，A型多晶型物由通過差示掃描量熱法測量的在低於(174±2)V的吸熱峰的溫度條件下基本無熱事件表徵，或者由通過差示掃描量熱法測量的在高於溫度高達300°C的吸熱峰的溫度條件下基本無熱事件表徵。[0015]在另一實施方式中，本發明提供的結晶無水DCA多晶型物為B型多晶型物。在一種實施方式中，B型多晶型物由7.4°2Θ處的粉末X-射線衍射(PXRD)峰表徵，或者由選自6.7。2Θ,7.3°29,7.4°2Θ，8.4。2Θ,9.3°2Θ,11.2°2Θ,12.9°2Θ，13.9。2Θ,14.4°2Θ,14.6°2Θ,14.8°2Θ，15.8。2Θ，16.0。2Θ，16.9。2Θ和17.8°2Θ處的I個、2個或3個PXRD峰表徵。在另一實施方式中，B型多晶型物由基本如圖2所示的PXRD圖表徵。在另一實施方式中，B型多晶型物由通過差示掃描量熱法測量的135°C的吸熱峰(±2°C範圍內)表徵。[0016]另一方面，本發明提供DCA的結晶水合C型多晶型物。在另一實施方式中，C型多晶型物由15.8°2Θ處的粉末X-射線衍射峰表徵，或者由選自6.6°29,7.3°2Θ，7.4°29,9.6°2Θ,9.9°2Θ,12.6°2Θ,13.0°2Θ，13.2。2Θ,13.9。2Θ，14.2。2Θ，15.1。2Θ,15.6。2Θ,15.8°2Θ,16.4°2Θ，17.0。2Θ，17.1。2Θ和17.6。2Θ處的I個、2個或3個PXRD峰表徵。在另一實施方式中，C型多晶型物由基本如圖3所示的PXRD圖表徵。在另一實施方式中，C型多晶型物由差示掃描量熱法測量的低於100°C的寬轉變峰表徵。在另一實施方式中，C型多晶型物由對應於TGA分析中40°C至140°C下約2.4%的質量損失的轉變峰表徵。[0017]在另一實施方式中，本發明提供的結晶無水DCA多晶型物為D型多晶型物。在另一實施方式中，D型多晶型物由10.0°2Θ處的粉末X-射線衍射(PXRD)峰表徵，或者由選自7.0。2Θ,7.4°2Θ,10.0°2Θ，14.2。2Θ，15.3。2Θ，15.8。2Θ，16.6。2Θ和17.3°2Θ處的I個、2個或3個PXRD峰表徵。在另一實施方式中，D型多晶型物由基本如圖5所示的PXRD圖表徵。在另一實施方式中，D型多晶型物由通過差示掃描量熱法測量的156°C的吸熱峰(±2°C範圍內)表徵。[0018]另一方面，本發明提供DCA多晶型物，優選地，本發明提供與至少一種藥學上可接受的賦形劑混合的DCA的結晶無水多晶型物。在一種實施方式中，所述DCA多晶型物為B型。在另一實施方式中，所述DCA多晶型物為A型或D型。在另一實施方式中，混合的多晶型物基本不包括水合多晶型物，優選地，不包括C型多晶型形式。在另一實施方式中，混合的組合物包括約0.l%w/V至約2%w/vDCA,或優選地,約0.5%w/v至約1.5%w/vDCA。在另一實施方式中，混合的組合物為適於皮下注射的水性製劑。在另一實施方式中，所述至少一種藥學上可接受的賦形劑和/或載劑選自水、緩衝液和防腐劑。[0019]另一方面，本發明提供將DCA的一種多晶型物形式轉化為另一種多晶型物形式的方法。在一種實施方式中，在低於135°C的溫度下，優選地，在低於100°C的溫度下，更優選地，在約40°C的溫度下，在真空(例如，約50mmHg)下加熱C型多晶型物，生成B型多晶型物。[0020]在本發明提供的各種不同的組合物、方法和步驟方面以及實施方式範圍內，在一種實施方式中，本發明使用的DCA為非微生物的DCA和/或非哺乳動物的DCA。在一種實施方式中，這種本質上是合成的DCA包括以合成方式加至DCA分子中的下式側鏈或其酯。【權利要求】1.一種化合物，所述化合物選自:2.一種組合物，所述組合物含有下式化合物以及2碳烯化試劑。3.如權利要求2所述的組合物，其中，2碳烯化試劑為Wittig試劑。4.一種組合物，所述組合物含有下式化合物、叔丁基氫過氧化物和CuI。5.如權利要求4所述的組合物，所述組合物不含次氯酸鹽(OCl(-))。6.—種組合物，所述組合物含有下式化合物和氫化催化劑，7.如權利要求6所述的組合物，所述組合物還含有氫。8.一種製備下式的脫氧膽酸或其鹽的方法，9.如權利要求8所述的方法，其中:Ca)所述含有MeOH的溶劑為MeOH；(b)所述2碳烯化試劑包括EtPPh3Br和叔丁醇金屬；(c)步驟(iv)中的還原劑為氫硼化物；(d)P為R2-CO-,其中，R2為C1-C6烷基或芳基，其中，所述烷基和所述芳基被I至3個芳基、C1-C6烷氧基和滷素任選地取代；Ce)所述路易斯酸催化劑為EtAlCl2；Cf)所述氫化條件包括使用負載型Pd、Pt或Rh催化劑；(g)步驟(ix)中的氧化反應使用氫過氧化物和Cu(I)鹽進行；(h)步驟(X)中的氧化反應優選在無水條件下，使用氯鉻酸吡啶鎗(PCC)進行；(i)步驟(xii)中的任選的氧化使用PCC進行；(j)步驟(xiii)中的還原使用LiAl(OCMe3)3H進行；(k)所述脫保護使用鹼的水溶液進行；和/或(I)所述脫保護條件包括與亞硫醯氯接觸。10.一種氧化類固醇的12-位亞甲基的方法，該12-位亞甲基與Λ-9，11-烯相鄰，所述方法包括:在生成12-羥基Λ-9，11-烯類固醇，以及任選地12-酮Λ-9，11_烯類固醇的條件下，使含有所述亞甲基的類固醇與叔丁基氫過氧化物和CuI接觸。11.如權利要求10所述的方法，所述方法還包括:在生成12-酮Λ-9，11-烯類固醇的條件下，使所述12-羥基Λ-9，11-烯類固醇與氯鉻酸吡啶鎗接觸。12.—種製備下式的化合物的方法，13.—種DCA的結晶無水多晶型物。14.如權利要求13所述的DCA的無水多晶型物，所述無水多晶型物為B型。15.—種DCA的結晶B型多晶型物，所述B型多晶型物通過選自6.7°29,7.3°2Θ,7.4°2Θ,8.4°29,9.3°20,11.2°20,12.9°2Θ，13.9。2Θ，14.4。2Θ，14.6。2Θ，14.8。2Θ,15.8°2Θ,16.0°2Θ,16.9°2Θ和17.8。2Θ處的I個、2個或3個PXRD峰表徵。16.如權利要求15所述的B型多晶型物，所述B型多晶型物通過基本如圖2所示的PXRD圖表徵。17.如權利要求13至16中任一項所述的多晶型物，所述多晶型物與藥學上可接受的賦形劑混合。18.一種減少受治者體內皮下脂肪堆積物的方法，所述方法包括在溶解所述脂肪堆積物的條件下，將與至少一種藥學上可接受的賦形劑混合的有效量的權利要求13至16中任一項所述的B型多晶型物局部給藥於所述受治者體內的脂肪堆積物。【文檔編號】A61K31/56GK103906517SQ201280049972【公開日】2014年7月2日申請日期:2012年9月21日優先權日:2011年9月22日【發明者】阿查姆佩塔·普拉薩德,桑卡爾·蘇布拉馬尼安,尼古拉斯·霍爾曼,約翰·格雷戈裡·裡德,史蒂文·法伊弗,孫旭峰,約翰·奈特,蘭迪·施泰因布林克申請人:凱瑟拉生物製藥有限公司