使用lhrh拮抗劑檢測緻密乳腺組織中損害的方法

2023-05-22 05:00:36

專利名稱：使用lhrh拮抗劑檢測緻密乳腺組織中損害的方法
背景技術：
乳腺癌是婦女中最普遍流行的癌症之一併且是導致婦女因癌症死亡的主要原因之一。已經證實乳房X線攝影術(或乳腺組織的放射性顯影成象術)是一種檢測和診斷早期乳腺腫瘤的有效方法。然而，當前進行的乳房X線攝影術無法檢測到所有的乳腺癌。乳房X線攝影術在婦女中檢測早期腫瘤的能力是可變的，這取決於所檢驗乳腺組織的特徵。用放射性方法檢測婦女體內「緻密」乳腺的乳腺損害是非常疑難的問題即在進行乳房X線攝影術時乳腺組織顯示出緻密的實質型。乳腺組織的放射性顯影密度可以使得乳腺損害模糊不清，使得檢測變得更為困難並增加了所述損害被忽略的可能性。這類假陰性乳房X線照片導致診斷和隨後治療乳腺癌的延誤。
在放射性緻密乳腺中檢測損害的難題不完全是一個小問題。儘管緻密乳腺的普遍性因年齡而下降(例如據Threat B.等在(1980)《癌症》(Cancer)452550-2556中報導在超過60歲的婦女中大約有6％)，但是據報導大約有25-50％的婦女在乳房X線攝影術時有緻密實質型(參見Threat，B.等(1980)《癌症》(Cancer)452550-2556；Jackson，V.P.等(1993)《放射學》(Radiology)188297-301；Van Gils，C.H.等(1995)《英國放射學雜誌》(Br.J.Radiol.)681133-1135)。已經在大量臨床研究中報導了放射性乳腺密度和乳腺癌危害增加之間的相關性(參見例如Wolfe，J.N.(1976)《癌症》(Cancer)372486-2492；Krook，P.M.等(1978)《癌症》(Cancer)411093-1097；Threat，B.等，同上；Andersson，I.等(1981)《放射學》(Radiology)13859-62；Saftlas，A.F.和Szklo，M.(1987)《流行病學回顧》(Epidemiol.Rev.)9146-174；Warner，E.等(1992)《癌症的檢測與預防》(Cancer Det.Prevent.)1667-72；Ma，L.等(1992)《國際癌症研究雜誌》(J.Natl.Cancer Inst.)84781-785；Ciatto，S.和Zappa，M.(1993)《歐洲放射學雜誌》(Eur.J.Radiol.)17122-125；Oza，A.M.和Boyd，N.F.(1993)《流行病學回顧》(Epidemiol.Rev.)15196-208；Jenks，S.(1994)《國際癌症研究雜誌》(J.Natl.CancerInst.)86578-580；Boyd，N.F.等(1995)《國際癌症研究雜誌》(J.Natl.Cancer Inst.)87670-675)。所觀察到的與乳腺密度相關的增加的癌症危險性歸因於1)屬於乳腺腫瘤發展中實際危險因素的乳腺實質型與2)「掩蓋」緻密乳腺中早期腫瘤(參見例如Egan，R.I.和Mosteller，R.C.(1977)《癌症》(Cancer)402087-2090；Saftlas，A.F.和Szklo，M.，同上；Oza，A.M.和Boyd，N.F.，同上)。由於所報導的乳腺密度與癌症發生率的相關性，所以建議帶有緻密乳腺的婦女更為經常作乳房X線攝影術，它可給這些婦女帶來與乳房X線攝影術自身相關的另外的危險性。
已經指出對使放射性緻密乳腺成象的難題幾乎沒有解決方法。改善在緻密乳腺中檢測乳腺損害的手段已經集中到開發代替乳房X線攝影術的成象方式上諸如超聲波掃描術、透射術、溫度記錄術(thermo-graphy)、電腦化X射線斷層術、磁共振成象術、放射性核素成象術和數位化乳房X線攝影術，它們可以提供更好地確定緻密乳腺中損害的方法(參見例如Jackson，V.P.等(1993)《放射學》(Radiology)188297-301；Braeuning，M.P.等(1995)《乳腺癌的研究與治療》(Breast Cancer Res.Treat.)3531-38)。不過，使用另外的成象方法可能需要健康保健提供者用於新設備和全體人員培訓的大量經費，這可以阻礙這種手段的廣泛應用。仍然需要改進乳腺組織中損害檢測的另外的策略，特別是與傳統乳房X線攝影術共同使用的策略。
在一個實施方案中，本發明提供了一種用於降低受檢測者乳腺密度中的方法。該方法包括在產生乳腺組織的影象前按照足以降低乳腺密度的量和時間期限對受檢測者給予LHRH拮抗劑。
在另一個實施方案中，本發明提供了一種用於檢測受檢測者乳腺組織中損害的方法。該方法包括按照足以降低乳腺組織密度的量和時間期限對受檢測者給予LHRH拮抗劑；和產生所述乳腺組織的影象以便檢測到乳腺組織中的損害。
例如，所檢測到的乳腺損害可以是惡性或良性乳腺腫瘤。例如，通過標準螢屏乳房X線攝影術或通過另一種可選擇的用於使乳腺組織成象的方法諸如超聲波掃描術、透射術、溫度記錄術、電腦化X射線斷層術、磁共振成象術、放射性核素成象術或數位化乳房X線攝影術可以檢測乳腺組織的影象。
本發明進一步提供了一種在產生乳腺組織的影象前用於降低乳腺密度的包裝製劑。該包裝製劑包括LHRH拮抗劑和關於在產生受檢測者乳腺組織的影象前使用該LHRH拮抗劑來降低受檢測者乳腺密度的說明書。發明詳述本發明提供了用於緻密乳腺組織中損害的改進檢測方法和組合物。本發明方法的一般特徵在於在產生乳腺組織的影象前按照足以降低乳腺密度的量和時間期限對受檢測者給予LHRH拮抗劑。LHRH是一種由下丘腦產生的與垂體中LHRH受體(LHRH-R)發生相互作用以刺激黃體生成素(LH)產生的天然激素。LHRH拮抗劑抑制LHRH受體，使得LH的釋放被抑制，這最終導致性激素(例如婦女體內的雌激素)的循環水平下降。在本發明的一個實施方案中，性激素(例如婦女體內的雌激素)的循環水平下降到暫時失去生殖能力狀態的水平(例如低於約20-30pg/ml)。在本發明的另一個實施方案中，性激素(例如婦女體內的雌激素)的循環水平下降到暫時失去生殖能力狀態的水平(例如低於約20-30pg/ml)且然後在產生乳腺組織影象前使之升至中等水平(例如約30-50pg/ml)。儘管不受機理的限制，但是認為因LHRH拮抗劑治療而導致的這些循環雌激素水平的下降會導致或至少有助於放射性乳腺密度下降。這種機理例如與絕經後婦女的乳腺密度比絕經前婦女的乳腺密度顯著降低這一觀察結果相一致。
為了更容易理解本發明，首先定義本文中所用的某些術語。
本文所用的術語「LHRH拮抗劑」指的是抑制促黃體素釋放激素受體以使LH的釋放被抑制的化合物。術語「LHRH拮抗劑」可以與術語「LHRH-R拮抗劑」交換使用以指可抑制LHRH-R而使LH釋放被抑制的化合物。在本領域中已經描述了LHRH拮抗劑；參見例如Folkers等的美國專利5,470,947；Folkers等與Roeske等的美國專利5,843,901；Haviv的美國專利5,413,990；Haviv的美國專利5,300,492；Koerber等的美國專利5,371,070；Hoeger等的美國專利5,296,468；Janaky等的美國專利5,171,835；Coy等的美國專利5,003,011；Coy等的美國專利4,431,635；De等的美國專利4,992,421；Roeske等的美國專利4,851,385；Nestor，Jr.等的美國專利4,801,577；和Roeske等的美國專利4,689,396。
例如，可以用於本發明方法的優選的LHRH-R拮抗劑包括含有下列結構的肽類或其藥物上可接受的鹽A-B-C-D-E-F-G-H-I-J其中A是焦-Glu、Ac-D-Nal、Ac-D-Qal、Ac-Sar或Ac-D-PalB是Hi s或4-Cl-D-PheC是Trp、D-Pal、D-Nal、L-Nal-D-Pal(N-O)或D-TrpD是SerE是N-Me-Ala、Tyr、N-Me-Tyr、Ser、Lys(iPr)、4-Cl-Phe、His、Asn、Met、Ala、Arg或Ile；F是 其中R和X各自是H或烷基；且
Y含有偶極部分；G是Leu或TrpH是Lys(iPr)、Gln、Met或ArgI是Pro；且J是Gly-NH2或D-Ala-NH2。
在優選的實施方案中，Y選自內鎓鹽、叔胺氧化物、腈氧化物、吡啶-N-氧化物和吡啶鎓兩性離子。在特別優選的實施方案中，Y是內鎓鹽、吡啶-N-氧化物和吡啶鎓兩性離子。在優選的實施方案中，所述的肽包括下列結構Ac-D-Nal-4-Cl-Phe-D-Pal-Ser-Tyr-D-Pal(N-O)-Leu-Lys(iPr)-Pro-D-Ala-NH2；在另一個優選的實施方案中，所述的肽包括下列結構或其藥物上可接受的鹽Ac-D-Nal-4-Cl-D-Phe-D-Pal-Ser-Tyr-D-Pal(CH2COO-)-Leu-Lys(iPr)-Pro-Ala-NH2；在另一方面中，本發明方法中所用的LHRH-R拮抗劑包括含有下列結構的肽或其藥物上可接受的鹽A-B-C-D-E-F-G-H-I-J其中A是焦-Glu、Ac-D-Nal、Ac-D-Qal、Ac-Sar或Ac-D-PalB是His或4-Cl-D-PheC是Trp、D-Pal、D-Nal、L-Nal-D-Pal(N-O)或D-TrpD是SerE是N-Me-Ala、Tyr、N-Me-Tyr、Ser、Lys(iPr)、4-Cl-Phe、His、Asn、Met、Ala、Arg或Ile；
F是D-Arg、D-Lys(iPr)、D-Pal(iPr)、D-Cit或Q，其中Q具有下列結構 其中R和X各自是H或烷基；且Z含有陽離子部分，所述的陽離子部分選自陽離子型吡啶鎓部分和鋶部分，條件是陽離子部分不是N-甲基吡啶鎓；G是Leu或TrpH是Lys(iPr)、Gln、Met、Arg或QI是Pro；且J是Gly-NH2或D-Ala-NH2，條件是F和H中至少一個是Q。
在優選的實施方案中，F是Q且Z是陽離子型吡啶鎓部分。在優選的實施方案中，Z是N-苄基吡啶鎓部分。在其它優選實施方案中，F是Q且Z是鋶部分。在其它優選的實施方案中，H是Q且Z是鋶部分。在特別優選的實施方案中，所述的肽包括下列結構或其藥物上可接受的鹽Ac-Sar-4-Cl-D-Phe-D-Nal-Ser-Tyr-D-Pal(Bzl)-Leu-Lys(iPr)-Pro-Ala-NH2；在另一個特別優選的實施方案中，所述的肽包括下列結構或其藥物上可接受的鹽Ac-D-Nal-4-Cl-D-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Met(S+Me)-Leu-Arg-Pro-Ala-NH2；
在特別優選的實施方案中，所述的肽包括下列結構或其藥物上可接受的鹽Ac-D-Nal-4-Cl-D-Phe-D-Pal-Ser-Tyr-D-Arg-Leu-Met(S+Me)-Pro-Ala-NH2；在另一方面中，本發明方法中所用的LHRH-R拮抗劑包括含有下列結構的肽或其藥物上可接受的鹽A-B-C-D-E-F-G-H-I-J其中A是p-Glu、Ac-D-Nal、Ac-D-Qal、Ac-Sar或Ac-D-PalB是His或4-Cl-D-PheC是Trp、D-Pal、D-Nal、L-Nal-D-Pal(N-O)或D-TrpD是SerE是N-Me-Ala、Tyr、N-Me-Tyr、Ser、Lys(iPr)、4-Cl-Phe、His、Asn、Met、Ala、Arg或Ile；F是下列結構 其中R和X各自是H或烷基；且T含有修飾受體部分；G是Leu或TrpH是Lys(iPr)、Gln、Met或ArgI是Pro；且J是Gly-NH2或D-Ala-NH2。
在優選的實施方案中，T選自內鎓鹽、鋶部分、α-滷代羰基、硫酸鹽、磺酸鹽、烷基滷化物和苄基滷化物。在特別優選的實施方案中，T是α-滷代羰基。
在另一個實施方案中，本發明方法中所用的LHRH-R拮抗劑包括含有下列結構的肽或其藥物上可接受的鹽A-B-C-D-E-F-G-H-I-J其中A是pyro-Glu、Ac-D-Nal、Ac-D-Qal、Ac-Sar或Ac-D-PalB是His或4-Cl-D-PheC是Trp、D-Pal、D-Nal、L-Nal-D-Pal(N-O)或D-TrpD是SerE是N-Me-Ala、Tyr、N-Me-Tyr、Ser、Lys(iPr)、4-Cl-Phe、His、Asn、Met、Ala、Arg或Ile；F是下列結構 其中R和X各自是H或烷基；且T含有N-醯基親水部分；G是Leu或TrpH是Lys(iPr)、Gln、Met或ArgI是Pro；且J是Gly-NH2或D-Ala-NH2。
在另一方面中，本發明方法中所用的LHRH-R拮抗劑包括含有下列結構的肽或其藥物上可接受的鹽
A-B-C-D-E-F-G-H-I-J其中A是焦-Glu、Ac-D-Nal、Ac-D-Qal、Ac-Sar或Ac-D-PalB是His或4-Cl-D-PheC是Trp、D-Pal、D-Nal、L-Nal-D-Pal(N-O)或D-TrpD是SerE是N-Me-Ala、Tyr、N-Me-Tyr、Ser、Lys(iPr)、4-Cl-Phe、His、Asn、Met、Ala、Arg或Ile；F是下列結構 其中R和X各自是H或烷基；且L含有小的極性部分；G是Leu或TrpH是Lys(iPr)、Gln、Met或ArgI是Pro；且J是Gly-NH2或D-Ala-NH2。
在優選的實施方案中，L選自D-Cit、D-Asn、D-Gln和D-Thr。
優選的LHRH拮抗劑是那些具有低釋放組胺活性(例如在標準體外組胺釋放檢測試驗中的組胺釋放ED50至少是3μg/ml、更優選至少5μg/ml、且更優選至少10μg/ml)並表現出水溶性的LHRH拮抗劑。具有低釋放組胺活性和水溶性的優選的LHRH拮抗劑包括美國專利申請順序號08/480,494和相應的PCT申請WO96/40757中所公開的化合物，特別將這兩篇文獻的全部內容引入本文作為參考。特別優選的LHRH拮抗劑包括下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、N-Me-Tyr5、D-Asn6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH(本文稱作PPI-149且在WO96/40757中有進一步的描述)。通過Roeske的美國專利4,851,385中所述的方法可以檢測LHRH拮抗劑的釋放組胺活性。例如，在諸如Corbin和Beattie在《內分泌研究通訊》(Endocrine Res.Commun.)21(1975)中所述的動物模型中可以檢測候選LHRH拮抗劑在抑制LH釋放中的功效。在該檢測試驗中，通過測定化合物在大鼠中的抑制排卵活性(AOA)來檢測候選化合物的LHRH拮抗劑活性。
術語「乳腺密度」用來指通過乳房X線攝影術反映出的乳腺實質外觀。乳腺組織的放射攝影外觀隨乳腺內相應脂肪、結締組織和上皮組織的相對量而改變。在放射性條件下，脂肪看起來是透明的(即較暗的外觀)；而結締組織和上皮組織看起來是緻密的(即較明亮的外觀)。用於將乳腺密度分類的常規系統是Wolfe的系統(《癌症》(Cancer)(1976)372486-2492)，Wolfe定義了4種乳腺實質型。根據Wolfe所述，N1表示幾乎完全由可能具有少量纖維性結締組織而沒有明顯導管的脂肪組成的基本上正常的乳腺；P1表示包括最低程度顯著導管輪廓的乳腺、一般主要由乳暈下區域(或通常幾乎不會在乳腺的腋上四分之一或其它部分)的脂肪組成，在乳暈下區域可以觀察到表示突出導管的珠狀線性輪廓(高達乳腺的四分之一體積)，在通常情況中這些導管的直徑可以在約1mm至最高達3或4mm之間改變；P2表示包含中度至重度突出導管輪廓的乳腺(大於乳腺的四分之一體積)，其中導管通常在乳腺的中心部分有三角形沉積且包含的程度可以在實質的二分之一體積至接近實質的全部體積且結締組織增生足以在某些區域中產生導管的融合；且DY表示極其緻密的實質，它通常指的是結締組織增生。一般將具有使用Wolfe系統的P2或DY實質型的乳腺組織看作「緻密乳腺」。
可以將另一種分類系統用於評估乳腺密度。例如Threat等(《癌症》(Cancer)452550-2556)進一步改進了Wolfe分類系統。除維持N1、P1和P2類別外，Threat等還定義了如下的另外的細分類DY1充滿不超過乳腺二分之一的均勻密度；DY2充滿超過乳腺二分之一的均勻密度；DY混合脂肪和在乳腺緻密區域內具有明顯突出導管的緻密乳腺，密度量在乳腺內含物的二分之一至大於二分之一中改變且在各密度內突出導管是明顯的；和QDY非常組織化的纏繞型乳腺組織的特定型，它具有幾乎與密度不相關的透明組織化彎曲(QDY1)或大於50％乳腺的均勻密度的組織化彎曲(QDY2)。將分類為DY1、DY2、DY或QDY2的乳腺看作「緻密乳腺」，將分類為P2的乳腺看作「中等密度」並將分類為N1、P1或QDY1的乳腺看作是「透明的」。還可以將計算機輔助的測定方法用於評估和分類乳腺密度(例如正如Boyd，N.F.等在(1995)《國際癌症研究雜誌》(J.Natl.Cancer Inst)87670-675中所述)。
「用來使乳腺密度下降」或「用於降低乳腺密度」的本發明的方法和組合物指的是相對於不使用本發明方法或組合物治療的受檢測者的乳腺實質型而言可導致受檢測者的乳腺實質型改變至更為透明(即幾乎不緻密)外觀的方法和組合物。
本文所用的術語「受檢測者」指的是恆溫動物、優選哺乳動物、更優選人且最優選女性。儘管本文在上下文中均以女性乳腺組織為例(它是最優選的實施方案)描述了本發明，但是本發明的組合物和方法在檢測男性乳腺組織中罕有損害中的應用也在關注之列。
術語「產生乳腺組織影象」指的是本領域公知的不同技術之一在觀測乳腺結構中的應用。這類技術的實例包括但不限於螢屏乳房X線攝影術(即標準乳房X線攝影術)、超聲波掃描術、透射術、溫度記錄術、電腦化X射線斷層術、磁共振成象術、放射性核素成象術和數位化乳房X線攝影術。通過本領域眾所周知的程序來進行標準螢屏乳房X線攝影術。作為用於觀測乳腺結構的上述其它成象技術在Jackson，V.P.等(1993)《放射學》(Radiology)188297-301和Braeuning，M.P.等(1995)《乳腺癌的研究與治療》(Breast CancerRes.Treat.)3531-38中有描述。
術語「乳腺損害」或單純的「損害」指的是可以通過產生乳腺組織影象而檢測到的乳腺組織中任何異常情況。這類損害的實例包括但不限於惡性乳腺腫瘤、良性惡性腫瘤和囊腫。
本發明的一個方面涉及在產生受檢測者乳腺組織的影象前降低受檢測者乳腺密度的方法。該方法包括在產生受檢測者乳腺組織的影象前按照足以降低乳腺密度的量和時間期限對受檢測者給予LHRH拮抗劑。
LHRH拮抗劑的給藥時間期限可以隨諸如所涉及的特定受檢測者、治療前乳腺組織的密度、所用的特定LHRH拮抗劑和所需的結果(例如所需乳腺組織的透明程度)這類因素而改變。然而，在不同的優選實施方案中，將所述的LHRH拮抗劑在產生乳腺組織的影象前大約一個月給藥、在產生乳腺組織的影象前大約一周給藥、在產生乳腺組織的影象前大約1-3天給藥或在產生乳腺組織的影象前大約6-24小時給藥。
LHRH拮抗劑的給藥量可以隨諸如所涉及的特定受檢測者、治療前乳腺組織的密度、所用的特定LHRH拮抗劑和所需的結果這類因素而改變。足以降低受檢測者乳腺密度的LHRH拮抗劑的用量的非限制性範圍在0.01μg/kg-10mg/kg。在不同的優選實施方案中，LHRH拮抗劑的給藥劑量為約5-1000μg/kg/天、約10-500μg/kg/天或約10-100μg/kg/天。優選的劑量包括30μg/kg/天、50μg/kg/天和100μg/kg/天。
治療方式也可以隨如所涉及的特定受檢測者、治療前乳腺組織的密度、所用的特定LHRH拮抗劑和所需的結果這類因素而改變。例如，可以按單次劑量形式諸如單次注射(例如單次皮下注射或靜脈注射)來給予LHRH拮抗劑。另一方面，可以在一段時間內按多重劑量形式諸如多次注射(例如多次皮下注射或靜脈注射)給予LHRH拮抗劑。本文所用的術語「多重劑量」和「多次注射」分別指的是一次以上的劑量或一次以上的注射。例如，可以通過將多次注射分成幾小時至幾天的間隔來給予LHRH拮抗劑，諸如將2-10次注射分成3、4、5、6、7、8、9、10、12、24、36或48小時的間隔來給予LHRH拮抗劑。
另一方面，可以以使LHRH拮抗劑在一段時間內持續釋放入受檢測者的形式諸如通過連續輸注(例如經商購於Alzet的皮下滲透泵)或以緩釋製劑形式給予LHRH拮抗劑。本文所用的術語「緩釋製劑」指的是包括在一段時間期限內、優選幾天到1-4周至1-3個月將LHRH拮抗劑連續輸送給受檢測者的製劑。一般經皮下或肌內給予這類製劑並使預定量的藥物在一段時間內連續穩定地釋放在受檢測者體內。
在一個優選的實施方案中，將LHRH拮抗劑配製成如美國申請順序號08/762,747和相應PCT申請PCT/US97/22881中所述的緩釋製劑，特別將這兩篇文獻的內容引入本文作為參考。簡單地說，將LHRH拮抗劑配製成含有LHRH拮抗劑和載體大分子複合物的藥物組合物，所述的載體大分子可在給予所述複合物時在體內持續輸送所述的LHRH拮抗劑。通過將LHRH拮抗劑與載體大分子在使得形成基本上不溶於水的複合物的條件下混合而製成這種複合物，例如將LHRH拮抗劑的水溶液與載體大分子混合至所述複合物沉澱為止。所述的複合物可以是固體形式(例如膏、顆粒、粉或凍乾物)或可以將粉狀形式的所述複合物精細粉碎成足以形成穩定的液體混懸液或半固體分散體。在體內給藥前，該複合物適合於滅菌諸如通過γ射線照射或電子束照射。用於所述複合物的優選載體大分子是陰離子型聚合物(諸如陰離子聚醇衍生物)或其片段及其鹽(例如鈉鹽)。可用來將聚醇衍生化的陰離子部分包括例如羧酸酯、磷酸酯或硫酸酯基團。特別優選的陰離子型聚合物是陰離子多糖衍生物或其片段及其鹽(例如鈉鹽)。載體大分子可以包括單一分子種類(例如單一類型的聚合物)或兩種或多種不同的分子種類(例如兩種類型聚合物的混合物)。特殊陰離子型聚合物的實例包括羧甲基纖維素、藻膠、藻酸鹽、陰離子型乙酸酯聚合物、陰離子型丙烯酸聚合物、黃原膠(xantham gum)、乙醇酸澱粉鈉及其片段、衍生物及其藥物上可接受的鹽；以及陰離子型交叉菜膠衍生物、陰離子型聚半乳糖醛酸衍生物和硫酸化和磺酸化的聚苯乙烯衍生物。優選的陰離子型聚合物是羧甲基纖維素鈉鹽。在某些實施方案中，所述的載體大分子(優選羧甲基纖維素鈉)和LHRH拮抗劑(優選PPI-149)的混合比例為載體大分子∶肽類化合物＝0.2∶1(w/w)。在各種其它的實施方案中，載體大分子與肽類化合物的混合比例(w/w)例如是0.5∶1、0.4∶1、0.3∶1、0.25∶1、0.15∶1或0.1∶1。在其它的優選實施方案中，LHRH拮抗劑與載體大分子的固體離子型複合物中的肽含量按重量計為57％、60％、65％、70％、75％、79％或更高。在其它優選的實施方案中，LHRH拮抗劑與載體大分子的固體離子型複合物中的肽含量按重量計為57-79％。
另一方面，例如，LHRH拮抗劑的緩釋製劑可以是含有聚合物的製劑，所述的聚合物選自聚丙交酯聚合物、聚乙交酯聚合物和聚丙交酯/聚乙交酯共聚物(例如，所述的藥物被包裹在含有所述聚合物或共聚物的微囊中)。這類適合於儲藥注射的 緩釋製劑在本領域中是公知用於給予LHRH興奮劑諸如亮丙瑞林(參見例如美國專利4,677,191和4,728,721；還在下面進一步描述合適的製劑)的。可以配製緩釋製劑以便在預定時間期限內輸送藥物。
為了實現持續治療延長的時間期限，有必要重新給予緩釋製劑。例如，可以以每月為基礎重新給予輸送一個月期限LHRH拮抗劑的緩釋製劑以便實現持續幾個月的治療(例如6個月)。類似地，可以以每周為基礎重新給予輸送一周期限LHRH拮抗劑的緩釋製劑以便實現持續幾周的治療。本文提供的緩釋製劑(參見實施例2)可以輸送LHRH拮抗劑至少約一個月的期限且由此可以以每月為基礎重新給予緩釋製劑以便實現延長的治療。
本發明的方法可以與本領域中公知的具有LHRH拮抗劑活性的任意不同化合物共同使用，所述化合物的非限制性實例包括Nal-Glu(具有下列結構Ac-D-Nal(2)1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、Arg5、D-Glu6(AA)、D-Ala10-LHRH)和SB-75(也稱作CetrorelixTM)(具有下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、D-Cit6、D-Ala10-LHRH)。LHRH拮抗劑通常是LHRH十肽的類似物。可以用於本發明方法的另一個LHRH拮抗劑實例具有下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、N-Me-Tyr5、D-Lys(N-g-煙醯基)6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH(在歐洲專利EP400 065B中進一步有描述)。
用於本發明方法的特別優選的LHRH拮抗劑具有下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、N-Me-Tyr5、D-Asn6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH(本文稱作PPI-149)。
PPI-149表現出低組胺釋放活性和高溶解性。此外，在給藥時，PPI-149可快速使性激素水平下降到失去生殖能力的水平。例如，當以300或1000μg/kg的劑量對雄性大鼠給予單次劑量的PPI-149時，截止到給藥後6小時血漿睪酮水平下降到接近無法檢測到的水平。截止到給藥300μg/kg劑量後24小時，睪酮水平恢復到正常水平；而在給藥1000μg/kg劑量後，直到72小時時睪酮水平才恢復到正常水平。當將1、10或100μg/kg的PPI-149以8次靜脈劑量、每3小時給予一次(分別相當於8、80或800μg/kg/天)給藥時，在每3小時給予一次10μg/kg的劑量時睪酮達到失去生殖能力水平。低到1μg/kg的劑量(相當於8μg/kg/天)可誘發血漿睪酮水平的顯著下降。使用300或1000μg/kg/天的劑量(「高劑量」)經滲透泵連續皮下輸注PPI-149兩周、隨後另外用5、15或50μg/kg/天(「低劑量」)連續輸注兩周這一治療過程可在使用兩種最初高劑量之一的第一個7天內(且可能在第一個24小時內)產生睪酮的去生殖能力水平，且通過另外給予隨後的所有三個低劑量21天來維持這種去生殖能力水平。在撤去滲透泵後，睪酮水平的恢復在兩周內完全。
本發明的另一個方面涉及用於檢測受檢測者乳腺組織中損害的方法。該方法包括下列按照足以降低受檢測者乳腺組織密度的量和時間期限對受檢測者給予LHRH拮抗劑；和產生所述乳腺組織的影象以便檢測到乳腺組織中的損害。
優選的情況是，通過該方法檢測的損害是腫瘤諸如惡性或良性腫瘤。通過本領域中公知的用於使乳腺結構顯影的各種技術中的任意一種可以生成所述乳腺組織的影象，所述的技術的實例包括但不限於螢屏乳房X線攝影術(即標準乳房X線攝影術)、超聲波掃描術、透射術、溫度記錄術、電腦化X射線斷層術、磁共振成象術、放射性核素成象術和數位化乳房X線攝影術。在一個優選的實施方案中，通過標準螢屏乳房X線攝影術來產生所述乳腺組織的影象。
正如上述降低乳腺密度的方法中所述，在檢測乳腺組織中損害的本發明方法中，給予LHRH拮抗劑的時間期限可以根據許多不同因素(如上所述)而改變，而在不同的實施方案中，將所述的LHRH拮抗劑在產生乳腺組織的影象前對受檢測者給藥大約一個月、在產生乳腺組織的影象前給藥大約一周、在產生乳腺組織的影象前給藥大約1-3天或在產生乳腺組織的影象前給藥大約6-24小時。
正如上述降低乳腺密度的方法中所述，在檢測乳腺組織中損害的本發明方法中，給予LHRH拮抗劑的量可以根據許多不同因素(如上所述)而改變，而在不同的實施方案中，LHRH的給藥劑量在約5-1000μg/kg/天、約10-500μg/kg/天或約10-100μg/kg/天的範圍。足以降低受檢測者乳腺密度的LHRH拮抗劑的用量的非限制性範圍是0.01μg/kg-10mg/kg。優選的劑量包括30μg/kg/天、50μg/kg/天和100μg/kg/天。
正如上述降低乳腺密度的方法中所述，在檢測乳腺組織中損害的本發明方法中，LHRH拮抗劑給藥的治療方式可以根據許多不同因素(如上所述)而改變，而在不同的實施方案中，按照單次注射形式、通過多次注射、通過連續輸注或以緩釋製劑形式給予LHRH拮抗劑。
本發明的另一個方面涉及一種在產生受檢測者乳腺組織的影象前降低乳腺密度的包裝製劑。該包裝製劑包括LHRH拮抗劑和關於在產生受檢測者乳腺組織的影象前使用該LHRH拮抗劑來降低乳腺密度的說明書。在一個實施方案中，所述包裝製劑內的LHRH拮抗劑是適合於皮下或靜脈注射的劑型。在另一個實施方案中，所述包裝製劑內的LHRH拮抗劑是適合於連續輸注的劑型。在另一個實施方案中，所述包裝製劑內的LHRH拮抗劑是緩釋製劑形式。
可以將適用於本發明方法和包裝製劑的LHRH拮抗劑製成適合於對受檢測者給藥的藥物組合物。優選的情況是，所述的藥物組合物包括LHRH拮抗劑和藥物上可接受的載體。本文所用的「藥物上可接受的載體」包括生理可相容的任何溶劑、分散介質、包衣材料、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑和延緩吸收劑等。優選的情況是，所述的載體適合於靜脈、肌內、皮下或非腸道給藥(例如通過注射)。根據給藥途徑的不同，可以將所述的活性化合物包衣以便防止所述化合物受到酸類作用和其它可使化合物失活的自然條件的影響。
通過本領域中公知的各種方法可以給予LHRH拮抗劑。在一個實施方案中，以一種按時間釋放的製劑形式(也稱作緩釋製劑)例如以一種包含緩慢釋放聚合物的組合物形式或適合於儲存注射的組合物形式來給予所述的LHRH拮抗劑。可以將活性化合物與防止所述化合物快速釋放的載體一起進行製備，諸如包括植入物、經皮藥貼和微囊化輸送系統在內的控釋製劑。特別優選的緩釋製劑包括與如上進一步所述的陰離子型聚合物(優選羧甲基纖維素)複合的LHRH拮抗劑(優選PPI-149)。可以使用生物可降解、生物可相容聚合物，諸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐類、聚乙醇酸、膠原蛋白、聚原酸酯類、聚乳酸和聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLG)。用於製備這類製劑的許多方法已經被申請專利或是本領域技術人員所一般公知的。參見例如《緩釋和控釋藥物輸送系統》(Sustained snd Controlled Release DrugDelivery Systems)J.R.Robinson編輯，Marcel Dekker，Inc.，New York，1978。製劑包括控釋組合物諸如本領域公知用於給予亮丙瑞林(商品名Lupron)的組合物，例如微囊劑(美國專利4,652,441和4,91 7,893)、注射劑(美國專利4,849,228)、用於製備微囊劑或注射劑的乳酸-乙醇酸共聚物(美國專利4,677,191和4,728,721)；和用於水溶性多肽類的緩釋組合物(美國專利4,675,189)。
當適當配製時，可以將LHRH拮抗劑例如與惰性稀釋劑或可吸收可食用的載體一起進行口服給藥。將LHRH拮抗劑(和其它也可以包裹在硬或軟殼膠囊內的組分)壓製成片劑或直接混入受檢測者的食物中。對於口服療法的給藥來說，可以將LHRH拮抗劑與賦形劑混合併以可食用的片劑、含片、錠劑、膠囊劑、酏劑、混懸劑、糖漿劑、糯米紙囊劑等的劑型使用。當然，LHRH拮抗劑在所述組合物和製劑中的百分比可以改變。
為了經不是非腸道的途徑給予LHRH拮抗劑，有必要用一種物質對所述化合物包衣以便防止其失活或將所述的化合物與防止其失活的物質共同給藥。例如，可以將LHRH拮抗劑在一種合適的載體例如脂質體或一種稀釋劑中對受檢測者進行給藥。藥物上可接受的稀釋劑包括鹽水和含水緩衝溶液。脂質體包括水包油包水CGF乳劑以及常用的脂質體(Strejan等(1984)《神經免疫學雜誌》(J.Neuroimmunol.)727)。藥物上可接受的載體包括無菌水溶液或分散體和用於無菌注射溶液或分散體臨時配製的無菌粉末。用於藥物活性物質的這類介質和試劑的應用是本領域眾所周知的。除任意與活性化合物相容的常用介質或試劑以外，所關注的是它們在本發明藥物組合物中的應用。還可以將輔助活性化合物混入所述的組合物中。
LHRH拮抗劑組合物在製備和儲存條件下一般必須是無菌而穩定的。可以將該組合物配製成溶液、微乳液、脂質體或適合於高藥物濃度的其它有序結構。所述的載體可以是溶劑或含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇等)的分散介質及其適當混合物。例如，通過使用包衣材料諸如卵磷脂、通過在分散體的情況中維持所需的顆粒大小並通過使用表面活性劑可以維持合適的流動性。在許多情況中，優選在組合物中包括等滲劑例如糖類、諸如甘露糖醇、山梨醇這樣的聚醇類或氯化鈉。通過在組合物中包括延緩吸收的試劑例如單硬脂酸鹽和明膠可以產生注射用組合物的延長吸收。
通過將以所需量溶於合適溶劑的活性化合物(例如LHRH拮抗劑)根據需要與一種上述列舉的組分之一或組分的混合物混合、隨後過濾滅菌可以製備無菌注射用溶液。一般來說，通過將活性化合物混入含有鹼性分散介質和來自上述列舉的所需其它組分的無菌載體中來製備分散體。就用於製備無菌注射用溶液的粉末而言，優選的製備方法是可產生來自預先無菌過濾溶液的活性組分和任意另外所需組分的真空乾燥和冷凍乾燥。在體內給藥前，例如通過γ射線照射或電子束照射也可以對含有LHRH拮抗劑與載體大分子複合物(諸如上述PPI-149/羧甲基纖維素複合物)的緩釋製劑進行滅菌。
通過下列實施例來進一步解釋本發明，這些實施例不應用來限制本發明。將貫穿於本申請中所引用的所有參考文獻、專利和公開專利申請的內容引入本文作為參考。實施例1將LHRH拮抗劑諸如Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、N-Me-Tyr5、D-Asn6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH(PPI-149)按約5-1000μg/kg、更優選10-100μg/kg的劑量經足以降低乳腺組織密度的途徑和時間期限對女性受檢測者進行給藥。隨後，例如通過標準螢屏乳房X線攝影術來獲得所述乳腺組織的影象。實施例2為了製備緩釋LHRH拮抗劑製劑，通過將6.25mg/ml的PPI-149溶於水來製備100ml LHRH拮抗劑PPI-149溶液。製備0.125％w/v的USP羧甲基纖維素鈉(CMC)(低粘度級，Hercules Chemical Co.)的等份樣品(最低100ml)並混合至溶解為止。將等份的PPI-149和CMC溶液混合(使得CMC∶肽之比為0.2∶1(w/w))並獲得固體物質。將該固體物質攪拌過夜且然後通過用0.45微米的尼龍濾膜過濾來收集它們。對溶液濾液的HPLC評估顯示至少有95％的PPI-149化合物轉化成了所述的固體複合物。將其從溶液中取出。將回收的白色膏狀物用水衝洗兩次且然後轉入小瓶並在真空中乾燥。在乾燥72小時時，獲得633mg的白色粉末。接著用研杵將固體物質研粉。元素分析表明所述複合物中有57％的肽。
相同技術方案本領域技術人員會認識到或僅僅使用常規實驗進行的能夠確定與本文所述的本發明特定實施方案相同的許多技術方案。這類相同的技術方案被包括在下列權利要求中。
權利要求
1.一種用於在產生受檢測者的乳腺組織的影象前降低受檢測者乳腺密度的方法，該方法包括在產生受檢測者乳腺組織的影象前按照足以降低受檢測者乳腺組織密度的量和時間期限對受檢測者給予LHRH拮抗劑。
2.權利要求1的方法，其中在產生受檢測者乳腺組織的影象前大約一個月對受檢測者給予所述的LHRH拮抗劑。
3.權利要求1的方法，其中在產生受檢測者乳腺組織的影象前大約一周對受檢測者給予所述的LHRH拮抗劑。
4.權利要求1的方法，其中在產生受檢測者乳腺組織的影象前大約1-3天對受檢測者給予所述的LHRH拮抗劑。
5.權利要求1的方法，其中在產生受檢測者乳腺組織的影象前大約6-24小時對受檢測者給予所述的LHRH拮抗劑。
6.權利要求1的方法，其中LHRH拮抗劑的給藥劑量在約5-1000μg/kg/天的範圍。
7.權利要求1的方法，其中LHRH拮抗劑的給藥劑量在約10-500μg/kg/天的範圍。
8.權利要求1的方法，其中LHRH拮抗劑的給藥劑量在約10-100μg/kg/天的範圍。
9.權利要求1的方法，其中將LHRH拮抗劑的按照單次注射方式給藥。
10.權利要求1的方法，其中將LHRH拮抗劑的按照多次注射方式給藥。
11.權利要求1的方法，其中將LHRH拮抗劑的以緩釋製劑形式給藥。
12.權利要求1的方法，其中LHRH拮抗劑具有下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、N-Me-Tyr5、D-Asn6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH。
13.權利要求1的方法，其中還包括產生乳腺組織影象。
14.權利要求13的方法，其中所述的乳腺組織的影象通過螢屏乳房X線攝影術來產生。
15.權利要求13的方法，其中所述的乳腺組織的影象通過選自下列方法的方法產生的超聲波掃描術、透射術、溫度記錄術、電腦化X射線斷層術、磁共振成象術、放射性核素成象術和數位化乳房X線攝影術。
16.權利要求13的方法，其中在產生受檢測者乳腺組織的影象前大約一個月對受檢測者給予所述的LHRH拮抗劑。
17.權利要求13的方法，其中在產生受檢測者乳腺組織的影象前大約一周對受檢測者給予所述的LHRH拮抗劑。
18.權利要求13的方法，其中在產生受檢測者乳腺組織的影象前大約1-3天對受檢測者給予所述的LHRH拮抗劑。
19.權利要求13的方法，其中在產生受檢測者乳腺組織的影象前大約6-24小時對受檢測者給予所述的LHRH拮抗劑。
20.權利要求13的方法，其中LHRH拮抗劑的給藥劑量在約5-1000μg/kg/天的範圍。
21.權利要求13的方法，其中LHRH拮抗劑的給藥劑量在約10-500μg/kg/天的範圍。
22.權利要求13的方法，其中LHRH拮抗劑的給藥劑量在約10-100μg/kg/天的範圍。
23.權利要求13的方法，其中將LHRH拮抗劑的按照單次注射方式給藥。
24.權利要求13的方法，其中將LHRH拮抗劑的按照多次注射方式給藥。
25.權利要求13的方法，其中將LHRH拮抗劑的以緩釋製劑形式給藥。
26.權利要求13的方法，其中LHRH拮抗劑具有下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、N-Me-Tyr5、D-Asn6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH。
27.權利要求13的方法，其中LHRH拮抗劑具有下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、Tyr5、D-Asn6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH。
28.一種用於在產生受檢測者乳腺組織的影象前降低受檢測者乳腺密度的包裝製劑，它包括LHRH拮抗劑和關於在產生受檢測者乳腺組織的影象前使用該LHRH拮抗劑來降低受檢測者乳腺密度的說明書。
29.權利要求28的包裝製劑，其中LHRH拮抗劑是適合於皮下或靜脈注射的劑型。
30.權利要求28的包裝製劑，其中LHRH拮抗劑是適合於連續輸注的劑型。
31.權利要求28的包裝製劑，其中LHRH拮抗劑是緩釋製劑。
32.權利要求28的包裝製劑，其中所述的LHRH拮抗劑具有下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、N-Me-Tyr5、D-Asn6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH。
33.權利要求28的包裝製劑，其中所述的LHRH拮抗劑具有下列結構Ac-D-Nal1、4-Cl-D-Phe2、D-Pal3、Tyr5、D-Asn6、Lys(iPr)8、D-Ala10-LHRH。
全文摘要
本發明公開了用於檢測緻密乳腺組織中損害的改進方法。本發明方法的一般特徵在於在例如通過乳房X線攝影術產生乳腺組織的影象前按照足以降低乳腺組織密度的量和時間期限對受檢測者給予LHRH拮抗劑以便檢測乳腺組織中的損害。本發明還公開了在產生受檢測者的乳腺組織的影象前降低受檢測者乳腺密度的包裝製劑,它包括LHRH拮抗劑和關於在產生乳腺組織的影象前使用該LHRH拮抗劑來降低受檢測者乳腺密度的說明書。
文檔編號A61K49/00GK1307488SQ99807943
公開日2001年8月8日 申請日期1999年4月27日 優先權日1998年4月27日
發明者M·B·加尼克 申請人:普雷西斯藥品公司