一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法
2023-05-21 18:36:06 1
專利名稱：一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法
一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法技術領域
本發明屬於生物化學技術領域，尤其涉及一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法。
背景技術：
纈草是我國傳統的中藥材，其有效成份主要有揮髮油類、環烯醚萜類、黃酮類、生物鹼類等。纈草烯酸是纈草屬植物揮髮油中分離出的一種倍半萜類成分；臨床試驗表明 纈草烯酸具有鎮靜、抗焦慮的作用，並且藥物依賴性小、不易成癮，因此纈草烯酸在開發安全、低毒、有效的鎮靜催眠藥和抗焦慮藥方面具有很大潛力。
目前，現有技術中存在兩種從纈草中提取纈草烯酸的方法
第一種方法利用一定濃度的乙醇進行提取，但由於乙醇對很多物質都有很好的溶解性，因此在提取纈草烯酸的過程中會帶入很多不必要的雜質；這些雜質不僅降低了纈草烯酸的純度，而且給後續的分離純化工藝帶來很大的負擔，增加了整個纈草烯酸提取工藝的成本。
第二種方法採用超臨界二氧化碳裝置，並通過高速逆流方法分離得到纈草提取物，但是這種設備十分昂貴，大大增加了生產成本，因此在實際生產中很少使用。發明內容
本發明提供了一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，不僅提升了從纈草中獲取纈草烯酸的有效產量，提高了纈草烯酸的純度，而且節約了生產成本、環保無汙染、經濟效益高，因此十分適合工業化生產。
本發明的目的是通過以下技術方案來實現的
一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，包括如下步驟
A、原料破碎選取闊葉纈草粉碎，並過10目篩，得到至少70%過10目篩的纈草顆粒;
B、回流提取向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，並進行回流提取，得到繳草醇提液；
C、減壓濃縮在50 60°C的真空環境下，對纈草醇提液進行減壓濃縮，直至無醇味，得到纈草浸膏；
D、熱水溶解向纈草浸膏中加入70 100°C的熱水，直至該纈草浸膏溶解成質量分數為20% 24%的纈草混合液；
E、過濾除雜向纈草混合液中加入除雜劑，並進行過濾，得到纈草濾液；
F、層析精製將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，並靜置I 4小時；然後向該層析柱中注入去離子水進行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色；再向該層析柱中注入甲醇溶液進行洗脫，得到含纈草烯酸的洗脫液；
G、濃縮乾燥在50 60°C的真空環境下，對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮，直至濃縮成質量分數為60% 80%纈草烯酸濃縮液；再對該纈草烯酸濃縮液進行乾燥，即得到成品的纈草烯酸粉末。
其中，所述的除雜劑由下述重量份的原料混合而成有機矽膠30 40份，殼聚糖 40 50份，明膠10 30份；
所述的大孔樹脂由下述重量份的原料混合而成活性炭10 30份，氧化鋁20 40份，聚醯胺40 80份。
優選地，所述的向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，並進行回流提取包括以下步驟
BI、向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，並在80 85°C的加熱溫度下回流提取2小時，過濾，得到首次提取的濾渣和濾液；
B2、向首次提取的濾渣中添加8倍重量的甲醇溶液，並在80 85°C的加熱溫度下回流提取I. 5小時，過濾，得到再次提取的濾渣和濾液；
B3、將兩次提取的濾液混合在一起，即得到纈草醇提液。
優選地，所述的層析精製包括以下步驟
F1、以每小時2BV的流速，將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，並靜置I 4 小時；
F2、以每小時I. 5BV的流速，向該層析柱中注入去離子水進行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色；
F3、以每小時I. O I. 2BV的流速，向該層析柱中注入甲醇溶液進行洗脫；當該層析柱排出的洗脫液有顏色時開始收集洗脫液，直至該層析柱排出的洗脫液無顏色；所收集的洗脫液即為含纈草烯酸的洗脫液。
優選地，在除雜劑的組分中，殼聚糖為未經過醯化處理的殼聚糖。
優選地，在50 60°C的真空環境下，對纈草醇提液進行減壓濃縮包括在對纈草醇提液進行減壓濃縮的同時，回收纈草醇提液中的甲醇溶液。
優選地，在50 60°C的真空環境下，對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮包括 在對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮的同時，回收纈草醇提液中的甲醇溶液。
優選地，纈草烯酸濃縮液在50 60°C的真空環境下，進行微波真空乾燥，得到成品的纈草烯酸粉末。
由上述本發明實施例提供的技術方案可以看出，本發明實施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法依次經過原料破碎、回流提取、減壓濃縮、熱水溶解、過濾除雜、層析精製以及濃縮乾燥處理後得到成品的纈草烯酸粉末；該纈草烯酸粉末中纈草烯酸的含量為8.6%，遠遠高於國家產品質量中的規定指標(即O. 8%)，而從闊葉纈草中提取纈草烯酸的收率達到O. 1% O. 4%，由此可見，本發明實施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法提升了從纈草中獲取纈草烯酸的有效產量，提高了纈草烯酸的純度。此外，本發明實施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法未採用價格高昂的提取設備，也未使用低沸點、容易揮發的有機溶劑(例如石油醚、乙酸乙酯等)，並且採用了層析柱的層析精製工藝，因此在提高生產安全性的同時，降低了能耗和對環境的汙染，大大的節約了生產成本， 十分適合工業化生產。
為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對於本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。
圖I為本發明實施例所提供的從纈草中提取纈草烯酸方法的流程示意圖。
具體實施方式
下面將結合本發明實施例中的附圖，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，可以理解的是，所描述的實施例僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基於本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬於本發明保護的範圍。
下面將結合附圖對本發明實施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法作進一步地詳細描述。
如圖I所示，一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，包括如下步驟
A、原料破碎選取闊葉纈草粉碎，並過10目篩，得到至少70%過10目篩的纈草顆粒;
B、回流提取向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，並進行回流提取，得到繳草醇提液；
C、減壓濃縮在50 60°C的真空環境下，對纈草醇提液進行減壓濃縮，直至無醇味，得到纈草浸膏；
D、熱水溶解向纈草浸膏中加入70 100°C的熱水，直至該纈草浸膏溶解成質量分數為20% 24%的纈草混合液；
E、過濾除雜向纈草混合液中加入除雜劑，並進行過濾，得到纈草濾液；
F、層析精製將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，並靜置I 4小時；然後向該層析柱中注入去離子水進行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色；再向該層析柱中注入甲醇溶液進行洗脫，得到含纈草烯酸的洗脫液；
G、濃縮乾燥在50 60°C的真空環境下，對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮， 直至濃縮成質量分數為60% 80%纈草烯酸濃縮液；再對該纈草烯酸濃縮液進行乾燥，即得到成品的纈草烯酸粉末。
其中，相應的除雜劑可以由下述重量份的原料混合而成有機矽膠30 40份，殼聚糖40 50份，明膠10 30份；在實際應用中，所述的殼聚糖最好為未經過醯化處理的殼聚糖。相應的大孔樹脂可以由下述重量份的原料混合而成活性炭10 30份，氧化鋁 20 40份，聚醯胺40 80份。
具體地，本發明實施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其每個步驟可以採用以下技術方案中的至少一項
(I)原料破碎本發明所選取闊葉纈草最好是經過剔除雜質、洗淨、乾燥處理後的闊葉纈草，從而可以保證纈草烯酸具有較高的純度和提取率。至少70%過10目篩的纈草顆粒是指在粉碎後的纈草顆粒中，至少佔纈草顆粒總體積70%的纈草顆粒能夠通過10目篩，也就是說，粒度小於10目的纈草顆粒至少佔纈草顆粒總體積的70%。
(2)回流提取所述的回流提取可以包括以下步驟
BI、向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，並在80 85°C的加熱溫度下回流提取2小時，過濾，得到首次提取的濾渣和濾液；
B2、向首次提取的濾渣中添加8倍重量的甲醇溶液，並在80 85°C的加熱溫度下回流提取I. 5小時，過濾，得到再次提取的濾渣和濾液；
B3、將兩次提取的濾液混合在一起，即得到纈草醇提液。
(3)減壓濃縮，在對纈草醇提液進行減壓濃縮的同時，最好回收纈草醇提液中的甲醇溶液，這可以節省整個工藝流程中甲醇溶液的使用量，進而降低了生產成本。
(4)層析精製所述的層析精製具體可以包括以下步驟
F1、以每小時2BV (BV是指層析柱中樹脂床的體積；每小時2BV可寫作2BV/h，是指每小時流動的液體相當於多少個層析柱中樹脂床的體積)的流速，將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，並靜置I 4小時；
F2、以每小時I. 5BV的流速，向該層析柱中注入去離子水進行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色，從而可以將層析柱中的雜質洗出；
F3、以每小時I. O I. 2BV的流速，向該層析柱中注入甲醇溶液進行洗脫；此步驟開始時，該層析柱中排出的液體無色的，該液體是步驟F2中殘留在該層析柱中的水；當該層析柱排出的洗脫液有顏色時開始收集洗脫液，直至該層析柱排出的洗脫液無顏色；所收集的洗脫液即為含纈草烯酸的洗脫液。
(5)濃縮乾燥在50 60°C的真空環境下，對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮， 直至濃縮成質量分數為60% 80%纈草烯酸濃縮液；再對該纈草烯酸濃縮液進行乾燥，即得到成品的纈草烯酸粉末；
具體而言，在對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮的同時，最好回收纈草醇提液中的甲醇溶液，這可以節省整個工藝流程中甲醇溶液的使用量，進而降低了生產成本。纈草烯酸濃縮液最好是在50 60°C的真空環境下，進行微波真空乾燥，得到成品的纈草烯酸粉末，這樣可以保證纈草烯酸具有較高的純度。將該成品的纈草烯酸粉末按照中國藥典 (HPLC)中的檢測方法進行檢測可以得到如下表I中所示的數據
表I :
權利要求
1.一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特徵在於，包括如下步驟 A、原料破碎選取闊葉纈草粉碎，並過10目篩，得到至少70%過10目篩的纈草顆粒； B、回流提取向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，並進行回流提取，得到纈草醇提液； C、減壓濃縮在50 60°C的真空環境下，對纈草醇提液進行減壓濃縮，直至無醇味，得到纈草浸膏； D、熱水溶解向纈草浸膏中加入70 100°C的熱水，直至該纈草浸膏溶解成質量分數為20% 24%的纈草混合液； E、過濾除雜向纈草混合液中加入除雜劑，並進行過濾，得到纈草濾液； F、層析精製將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，並靜置I 4小時；然後向該層析柱中注入去離子水進行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色；再向該層析柱中注入甲醇溶液進行洗脫，得到含纈草烯酸的洗脫液； G、濃縮乾燥在50 60°C的真空環境下，對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮，直至濃縮成質量分數為60% 80%纈草烯酸濃縮液；再對該纈草烯酸濃縮液進行乾燥，即得到成品的纈草烯酸粉末。
其中，所述的除雜劑由下述重量份的原料混合而成有機矽膠30 40份，殼聚糖40 50份，明膠10 30份； 所述的大孔樹脂由下述重量份的原料混合而成活性炭10 30份，氧化鋁20 40份，聚醯胺40 80份。
2.根據權利要求I所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特徵在於，所述的向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，並進行回流提取包括以下步驟 BI、向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，並在80 85°C的加熱溫度下回流提取2小時，過濾，得到首次提取的濾渣和濾液； B2、向首次提取的濾渣中添加8倍重量的甲醇溶液，並在80 85°C的加熱溫度下回流提取I. 5小時，過濾，得到再次提取的濾渣和濾液； B3、將兩次提取的濾液混合在一起，即得到纈草醇提液。
3.根據權利要求I至2中任一項所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特徵在於，所述的層析精製包括以下步驟 Fl、以每小時2BV的流速，將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，並靜置I 4小時； F2、以每小時I. 5BV的流速，向該層析柱中注入去離子水進行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色； F3、以每小時I. 0 I. 2BV的流速，向該層析柱中注入甲醇溶液進行洗脫；當該層析柱排出的洗脫液有顏色時開始收集洗脫液，直至該層析柱排出的洗脫液無顏色；所收集的洗脫液即為含纈草烯酸的洗脫液。
4.根據權利要求I至3中任一項所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特徵在於，在除雜劑的組分中，殼聚糖為未經過醯化處理的殼聚糖。
5.根據權利要求I至3中任一項所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特徵在於，在50 60°C的真空環境下，對纈草醇提液進行減壓濃縮包括在對纈草醇提液進行減壓濃縮的同時，回收纈草醇提液中的甲醇溶液。
6.根據權利要求I至3中任一項所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特徵在於，在50 60°C的真空環境下，對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮包括在對含纈草烯酸的洗脫液進行減壓濃縮的同時，回收纈草醇提液中的甲醇溶液。
7.根據權利要求I至3中任一項所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特徵在於，纈草烯酸濃縮液在50 60°C的真空環境下，進行微波真空乾燥，得到成品的纈草烯酸粉末。
全文摘要
本發明涉及一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，包括如下步驟選取闊葉纈草粉碎，並過10目篩，得到至少70%過10目篩的纈草顆粒；向纈草顆粒中添加8～10倍重量的甲醇溶液，並進行回流提取，得到纈草醇提液；在50～60℃的真空環境下，將纈草醇提液減壓濃縮至無醇味，得到纈草浸膏；向纈草浸膏中加入70～100℃的熱水，直至溶解成質量分數為20%～24%的纈草混合液；向纈草混合液中加入除雜劑，並進行過濾，得到纈草濾液；對纈草濾液進行層析精製，得到含纈草烯酸的洗脫液；對含纈草烯酸的洗脫液進行濃縮乾燥，即得到成品的纈草烯酸粉末。本發明實施例不僅提升了從纈草中獲取纈草烯酸的有效產量，提高了纈草烯酸的純度，而且節約了生產成本、環保無汙染、經濟效益高，因此十分適合工業化生產。
文檔編號A61K36/185GK102973618SQ201210574410
公開日2013年3月20日 申請日期2012年12月26日 優先權日2012年12月26日
發明者何莉, 路貴霖, 吳瓊明, 田 浩 申請人:江口縣苗藥生物科技有限公司