一種藥物組合物在製備防治骨質疏鬆藥物中的應用的製作方法

2023-05-08 19:25:21

專利名稱：：一種藥物組合物在製備防治骨質疏鬆藥物中的應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉屬於醫藥領域，具體涉及一種藥物組合物在製備防治骨質疏鬆藥物中的應用。
背景技術：
：骨質疏鬆症是人類的一種常見疾病，在各年齡層及各種族群裡都有發生，它的發病率隨著年齡增加而增加，尤其在65歲以上的老年人中患病率最高，其中由於激素類別的影響，女性患骨質疏鬆症是男性的兩倍。目前全世界約有2億人患有骨質疏鬆症，其發病率已躍居常見病、多發病的第七位，如美國約有2500萬患者，每年由骨質疏鬆症引起的骨折病人不下150萬例，日本全國65歲以上的1500萬老年人中就約有1/3的人數患有骨質疏鬆症。骨質疏鬆症會引起的各類骨折，其中還有相當一部分會出現各種併發症，約20%的骨折患者在1年內並發肺栓塞、肺炎而死亡，在婦女此類死亡率超過乳房癌、宮頸癌和子宮癌的總和，在存活者中也有50%的人行動不便，給家庭和患者帶來諸多不利。因此骨質疏鬆症導致各種骨折醫療費用耗資巨大，據官方統計，美國每年用於骨質疏鬆方面的直接和間接耗資達100億美元；英國的健康與社會保險機構每年為骨質疏鬆提供的資金超過5億英鎊；法國僅支付平均每年3萬股骨脛骨折患者的住院費就達到13.5億法郎。骨質疏鬆所造成的如此巨大的社會和經濟負擔，構成了一個嚴重的全球性問題，已經引起世界各國的極大關注。我國是世界上老年人口最多的國家，骨質疏鬆患者己達6000-8000萬例，作為最大的發展中國家，這樣的患者給家庭和社會帶來的影響比發達國家更沉重，因此，防治骨質疏鬆是抗衰老，延長壽命，保證人民生活質量十分迫切的研究課題。根據1994年WHO組織的界定，骨質疏鬆症是指以骨組織顯微結構受損，骨礦成分和骨基質等比例地不斷減少，骨質變薄，骨小梁數量減少，骨脆性增加和骨折危險度升高的一種全身骨代謝障礙的疾病。按照病症特點，目前治療策略大致有兩類，一為抗骨吸收的藥物，二為促成骨藥。如雌激素、降鈣素、二磷酸鹽等為骨吸收抑制劑，此類藥物在臨床使用中佔90%以上；促成骨藥有骨礦化促進劑，如鈣劑、維生素D等。這些治療藥物非常有限，長期使用不但價格昂貴，而且有較明顯的副作用，隨著中醫藥現代化的發展，更多的人將目光轉向中醫藥的研究開發上，近年來申請了很多治療骨質疏鬆症的中藥組合物發明專利。丹紅注射液2004年上市後，一直在心腦血管疾病治療中起著重要作用，該藥物成分相對簡單，劑型先進，臨床療效顯著，起效迅速，深受廣大患者的青睞。我們在大量的臨床使用中，發現丹紅注射液除了主治功能外，還具有防治骨質疏鬆症的良好療效，並且起效迅速，不良反應少等優點。多年來，人們對於丹紅注射液中兩味主藥丹參和紅花的研究一直沒有停止過，尤其是它們新治療用途的研究蓬勃發展，如申請號為200310116281.9的專利申請中公開了丹參水提物或丹參素、丹參酮等有效成分具有防治骨質疏鬆症的作用，申請號200710031802.9的申請中公開了以丹參、三七、冰片為主藥的複方丹參片用於治療骨質疏鬆症的新用途等。因此，為了進一步開發丹紅注射液新的治療用途，減少藥物的資源浪費，在前人研究的基礎上結合我們的臨床發現，本發明將對丹紅注射液進行了一系列的劑型及藥效研究，為更廣泛的臨床應用打下堅實基礎。
發明內容本發明的目的在於提供一種藥物組合物新的治療用途，具體涉及到一種藥物組合物在製備防治骨質疏鬆藥物中的應用。本發明的藥物組合物原料由丹參、紅花兩味藥材組成，其中丹參750份、紅花250份。本發明藥物組合物具有活血化瘀、通脈舒絡的作用，目前臨床常用於瘀血閉阻所致的胸痺及中風。本發明的技術方案是這樣實現的丹參750份、紅花250份兩味藥材，加水煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.10-1.20(65°C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加入適宜輔料製成不同劑型。本發明藥物組合物的製備輔料可以是藥劑學上可接受的任意賦形劑或載體。本發明藥物組合物的應用可以是藥劑學上可接受的劑型，包括注射劑、丸劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、滴丸劑或口服液體製劑，優選注射劑。我們將本發明的靜脈注射製劑大量應用於臨床治療心腦血管疾病時，偶然發現其還具有治療骨質疏鬆症作用的現象，為了進一步開發其治療用途，因此通過小樣本的臨床研究，以日本東京大學教授折茂肇提出的PMD診斷標準，篩選了100例患者，隨機單盲法分為治療組50例，對照組50例，以骨代謝生化指標、骨密度、血尿&的變化情況等為監測指標進行初步臨床研究，結果發現本發明與對照組比較有比較明顯的治療效果，因此，為了將本發明的研究深入推廣，現將主要的藥效實驗詳述如下實驗l:本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症預防作用的影響l.試驗材料1.1受試藥物取丹參750g、紅花250g兩味藥材，加水10倍量煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.10-L20(65。C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加入適量蒸餾水溶解濃縮液，靜置後離心，分離上清液並製備成適量濃度備用。陽性對照藥羥乙基磷酸鈉，市售。1.2受試動物SD大鼠，雌雄各半，西安醫科大學實驗動物部提供。1.3試劑維甲酸，市售，用0.5y。CMC配成混懸液備用；鈣試劑盒，上海生物製品研究所提供；磷試劑盒，上海捷門生物技術公司。1.4儀器DPX-L型雙能X線骨密度測定儀，美國LunAR公司生產；馬福爐，上海浦東躍欣科學儀器廠；722S分光光度計，上海科學精密儀器有限公司。2.試驗方法與結果2.1.1建立模型大鼠隨機分為6組，分別為正常對照組、模型對照組、本發明高、中、低劑量組、陽性對照組，除正常對照組外，各組大鼠均灌胃給藥維甲酸70mg/kg，服用量lml/100g大鼠，每天1次，連續14天，同時每天各組大鼠依次灌胃同體的積蒸餾水(正常對照組)、0.5%CMC溶劑(維甲酸模型組)、本發明高劑量2ml/kg、本發明中劑量lml/kg、本發明低劑量組0.5ml/kg，羥乙基磷酸鈉50mg/kg(陽性對照藥)，每天1次，連續28天，期間每周稱體重l次，以體重調整給藥用量。2.1.2觀察指標給藥結束，斷頭處死大鼠，取血分離血清，按試劑盒方法測S-Ca、S-P含量，取大鼠雙側股骨，剝淨肉及其它組織，其中一側股骨在骨密度儀上做大鼠股骨掃描，測出骨密度(g/cm2)，稱骨重(W)，測骨長(L)，骨直徑(d)，計算骨表觀線密度(W/L)、表觀面密度(W/L.d)，然後ll(TC烘乾1小時，再置於馬福爐內200、400、600、800'C各灰化2小時，灰化結束冷卻後，稱灰重(Wash.g)，用6NHCL提取後測骨灰Ca、骨灰P含量，以100g骨灰含Ca或P的克數表示。另一側股骨頭用3MHN03脫鈣後做石蠟切片，HE染色，顯微鏡下測骨小梁寬度。2.2試驗結果2.2.1大鼠體重變化結果見表l。表1本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症預防作用的體重變化影響tableseeoriginaldocumentpage6與空白對照組比較，P〈0.01;*與空白對照組比較，P<0.05。助與模型對照組比較，P〈0.01;#與模型對照組比較，P〈0.05。試驗結果表明，試驗當天及第l周內各組動物體重均無明顯差異，給藥後2、4周模型組體重比正常組體重均有明顯減輕(P〈0.05，P〈0.01)，表明實驗造模成功。用藥2周後，各給藥組與模型組比較，本發明高、中、低劑量組均有增加大鼠體重的作用，其中本發明高、中劑量組體重增加有顯著差異(P<0.05，P<0.01)，且療效與陽性對照組羥乙基磷酸鈉相當。2.2.2大鼠股骨骨密度及S-Ca、S-P的影響結果見表2。表2本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症預防作用時的股骨骨密度、Sca、Sp的影響(S土SD)tableseeoriginaldocumentpage7tableseeoriginaldocumentpage7**與空白對照組比較，P〈0.01;*與空白對照組比較，P<0.05。ttft與模型對照組比較，P〈0.01;tt與模型對照組比較，P<0.05。試驗結果表明，模型組大鼠股骨骨密度、血清Ca含量比正常對照組明顯降低(P〈0.01或P〈0.05),血清磷含量有降低趨勢，但變化不大，整個情況說明造模成功。用藥後，各給藥組與模型組比較，骨密度、血清鈣含量、血清磷含量均有較大幅度的升高，其中本發明的高、中劑量組三項指標均有顯著性差異(P<0.01或P〈0.05)，療效與陽性對照組相當。2.2.3本發明對維甲酸誘導大鼠骨質疏鬆症預防作用骨指數的作用結果見表3。(動物數均為10隻)表3本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症預防作用骨指數的作用(5土SD)tableseeoriginaldocumentpage7tableseeoriginaldocumentpage7**與空白對照組比較，P〈0.01;*與空白對照組比較，P<0.05。站與模型對照組比較，P〈0.01;tf與模型對照組比較，P<0.05。試驗結果表明，模型組與對照組比較，模型組的W、L、d、W/L、W/Ld均有明顯降低，表明造模成功。給藥後，各給藥組與模型組比較均有升高實驗大鼠骨指數的作用，其中本發明的中、高劑量組療效最為顯著(P〈0.01或P〈0.05)，與陽性對照組比較療效相當。2.2.4對股骨灰分、骨Ca及骨P的影響結果見表4。(動物數均為10隻)表4本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症預防作用的股骨灰分、骨Ca、骨P的影響(；土SD)tableseeoriginaldocumentpage8林與空白對照組比較，P〈0.01;*與空白對照組比較，P<0.05。抑與模型對照組比較，P〈0.01;共與模型對照組比較，P<0.05。實驗結果表明，模型組與對照組比較，模型組的骨灰重量、骨灰中骨Ca、骨P含量均顯著降低(P〈0.01或P〈0.05),說明造模成功。給藥後，給藥組與模型組比較均有不同程度的升高骨灰重量、骨灰中骨Ca、骨P含量的作用，其中本發明的中、高劑量組療效最好，且與陽性對照組治療效果相當。實驗2:本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症治療作用的影響l.試驗材料1.l受試藥物同實驗l。1.2受試動物SD大鼠，雌雄各半，西安醫科大學實驗動物部提供。1.3試劑同實驗l。1.4儀器同實驗l。2.試驗方法與結果2.1.1建立模型大鼠隨機分為6組，分別為正常對照組、模型對照組、本發明高、中、低劑量組、陽性對照組，除正常對照組外，各組大鼠均灌胃給藥維甲酸70mg/kg，服用量lml/100g大鼠，每天1次，連續14天，結束後各給藥組按各劑量組灌胃給藥，每天1次，連續28天，正常對照組及模型組給予等體積的溶劑，期間根據體重調整給藥量。2.1.2觀察指標給藥結束，斷頭處死大鼠，取血分離血清，按試劑盒方法測S-Ca、S-P含量，取大鼠雙側股骨，剝淨肉及其它組織，其中一側股骨在骨密度儀上做大鼠股骨掃描，測出骨密度(g/cm2)，稱骨重(W)，測骨長(L)，骨直徑(d)，計算骨表觀線密度(W/L)、表觀面密度(W/L.d)，然後ll(TC烘乾1小時，再置於馬福爐內200、400、600、800。C各灰化2小時，灰化結束冷卻後，稱灰重(Wash.g)，用6NHCL提取後測骨灰Ca、骨灰P含量，以100g骨灰含Ca或P的克數表示。另一側股骨頭用3%剛03脫鈣後做石蠟切片，HE染色，顯微鏡下測骨小梁寬度。2.2試驗結果2.2.l大鼠體重變化結果見表5。表5本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症治療作用的體重變化影響tableseeoriginaldocumentpage9**與空白對照組比較，P〈0.01;*與空白對照組比較，P〈0.05。##與模型對照組比較，P〈0.01;ft與模型對照組比較，P<0.05。試驗結果表明，試驗當天及第l周內各組動物體重均無明顯差異，給藥後3、6周模型組體重比正常組體重均有明顯減輕(P〈0.05，P<0.01)，表明實驗造模成功。用藥3周後，各給藥組與模型組比較，本發明高、中、低劑量組均有增加大鼠體重的作用，其中本發明高、中劑量組體重增加有顯著差異(P<0.05，P〈O.OD，且療效與陽性對照組羥乙基磷酸鈉相當。2.2.2對大鼠股骨骨密度及Sca、SP的影響結果見表6中。(動物數均為10隻)表6本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症治療作用時股骨密度及SCa、SP變化影響(^士SD)tableseeoriginaldocumentpage10**與空白對照組比較，P〈0.01;*與空白對照組比較，P〈0.05。抑與模型對照組比較，P〈0.01;tt與模型對照組比較，P〈0.05。實驗結果表明，模型組與對照組比較，模型組的骨密度、骨灰中骨Ca、骨P含量均顯著降低(P〈0.01或P〈0.05)，說明造模成功。給藥後，給藥組與模型組比較均有不同程度的升高骨密度、骨灰中骨Ca、骨P含量的作用，其中本發明的中、高劑量組療效最好，且與陽性對照組治療效果相當。2.2.3本發明對維甲酸誘導大鼠骨質疏鬆症治療作用骨指數變化的影響結果見表7中。(每組動物數均為10隻)表7本發明對維甲酸致大鼠骨質疏鬆症治療作用骨指數變化的影響(*±SD)tableseeoriginaldocumentpage11**與空白對照組比較，P〈0.01;*與空白對照組比較，P〈0.05。湘與模型對照組比較，P〈0.01;fl與模型對照組比較，P<0.05。試驗結果表明，模型組與對照組比較，模型組的W、L、d、W/L、W/Ld均有明顯降低(P〈0.01或P〈0.05)，表明造模成功。給藥後，各給藥組與模型組比較均有升高實驗大鼠骨指數的作用，其中本發明的中、高劑量組療效最為顯著(P〈0.01或P<0.05),與陽性對照組比較療效相當。實驗3:本發明對去勢大鼠骨質疏鬆實驗模型的影響l.試驗材料1.1受試藥物同實驗l。陽性對照藥骨疏康顆粒，市售。1.2受試動物SD大鼠，雌雄各半，西安醫科大學實驗動物部提供。1.3試劑水合氯醛，市售，用前配成10%濃度備用；四環素，市售；甲苯胺藍，市售；血清鈣、磷、鹼性磷酸酶試劑盒，北京中生生物工程高技術公司；羥基脯氨酸標準品，中國科學院上海生化所；肌酐試劑盒，北京中生生物工程高技術公司；雌二醇放免試劑盒，天津德普生物技術和醫學產品有限公司；降鈣素放免藥盒，中國人民解放軍總醫院科技開發中心放免研究所研製；骨鈣素放免藥盒，中國人民解放軍總醫院科技開發中心放免研究所研製。.1.4儀器NORLANDX2-36型雙能X線骨密度測定儀，美國LunAR公司生產；TO-1型電子萬能試驗機，西安明克斯檢測設備有限公司；Jarrell-AshICAP9000型電感耦合等離子光譜儀，上海科學精密儀器有限公司；LEICA2163型切片機，德國Leica公司；奧林巴斯BH-2顯微鏡，南京奧力科學儀器有限公司。2.試驗方法與結果2.1.1建立模型各組大鼠用1(^水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，在脊柱兩側正對卵巢的部位切開1.5cm大小的切口，分離背部肌肉，暴露後腹膜，剪開腹膜後取出雙側卵巢。假手術組將卵巢取出後，不做任何處理放回腹腔，縫合創口，消毒；手術組將雙側卵巢結紮後切除，縫合創口，消毒。假手術組給正常飼料，其餘各組給低鈣飼料，自由飲水。詞養3個月後處死。2.1.2分組與給藥取雌性SD大鼠60隻，隨機分為6組，每組10隻大鼠。假手術組保留卵巢，骨質疏鬆模型組、陽性對照組(骨疏康顆粒)、本發明大劑量組、本發明中劑量組、本發明低劑量組等各組大鼠做卵巢切除術5天後，假手術組、模型組大鼠每天給予一定量水，其餘各組按劑量給藥，每天灌胃給藥一次，連續給藥3個月。2.1.3觀察指標給藥結束後，各組動物麻醉後取材，分別測定如下指標(1)血鈣、血磷和血鹼性磷酸酶頸總動脈插管取血，4'C保存4小時，4000轉/分鐘離心IO分鐘，分離血清。血鈣測定採用OCPC法，血磷測定採用鉬酸法，血清鹼性磷酸酶測定採用金氏法，均按試劑盒說明書程序操作，用MD-100自動生化儀測定。(2)尿羥基脯氨酸(HOP)、肌酐大鼠處死前一天入代謝籠，禁食，正常飲水，收集其24小時尿液。測定採用改良氯胺-T氧化法測定；肌酐測定採用苦味酸法，按試劑盒說明書操作，用MD-100自動生化分析儀測定。(3)血清激素(雌二醇、降鈣素、骨鈣素)頸總動脈插管取血，4t:保存4小時，4000轉/分鐘離心10分鐘，分離血清。雌二醇使用雌二醇放免試劑盒按說明書操作；降鈣素使用降鈣素放免藥盒按說明書操作；骨鈣素使用骨鈣素放免藥盒按說明書操作。(4)骨密度大鼠處死後，剝取其左側股骨，剔淨骨周圍肌肉及軟組織，用生理鹽水擦洗乾淨，用生理鹽水紗布分別包裹，-4(TC保存，備測骨密度和骨力學強度。用骨密度測定儀測股骨骨密度，將左側股骨仰置於有機玻璃板上進行掃描，步距0.5*0.5咖；掃描速度30mm/s;掃描寬度6.55cm。骨密度測定結束後，仍將股骨-4(TC保存，送測骨力學強度。(5)骨力學強度將股骨置於WD-1型電子萬能試驗機作三點彎曲力學試驗，跨距25mm，加載速度2mm/min，記錄載荷-變形曲線。從曲線上計算最大載荷、最大橈度、抗彎剛度、能量吸收。(6)骨無機元素含量大鼠處死後，剝取其右側股骨，剔淨骨周圍肌肉及軟組織，用生理鹽水擦洗乾淨。測定骨鈣、骨磷、骨鎂、骨鋅、骨鋁等無機元素的含量。(7)椎骨骨組織形態計量學大鼠處死前第14天，灌胃四環素35-40mg/kg，連續2天。相隔10天後，再以同樣方法連續灌胃2天四環素。處死後，取第三、四腰椎，經固定、脫水、包埋等處理後，用骨切片機製備5pra的縱向不脫鈣骨切片，甲苯胺藍染色。用於螢光觀察的切片不作甲苯胺藍染色。用顯微鏡、JVCPK-C1380圖像採集卡觀測，採用骨組織計量學分析軟體對觀測指標進行計量和分析。採用的各項參數為骨小梁表面百分比、骨形成表面百分比、骨吸收表面百分比、平均骨壁厚度及或礦化沉積率。2.2實驗結果2.2.1大鼠血鈣、血磷和血鹼性磷酸酶的變化情況結果見表8中。表8本發明對模型大鼠血鈣、磷、鹼性磷酸酶和尿脯氨酸/肌酐的影響(^士SD)組別劑量Ca(mmol/UP(mmol/L)ALP(U/L)H0P/Cr(g生藥/kg)假手術組2.75±0.301.39±0.1848.7±5.20.90±0.13模型組2.49±0.331.41±0.2168.5±6.(T2.38±0.26抖骨疏康顆粒組3.02.71±0.281.42±0.2452.6±5.5s1.25±0.15加本發明低0.52.58±0.291.40±0.2566.9±7.21.83±0.16s本發明中12.74±0.341.43±0.2753.9±4.381.56±0.23s"本發明高22.74±0.381.42±0.1751.3±5.4*L37±0.22s*與假手術組比較，林P〈0.01;與模型組比較，#P〈0.05，抑P〈0.01。由表8結果顯示，模型組大鼠的血清鹼性磷酸酶(ALP)與尿羥基脯氨酸/肌酐(H0P/Cr)均比假手術組的明顯升高(P<0.01)，表明去勢引起的骨形成與骨吸收作用同時增強，但骨吸收相對大於骨形成，骨量不能很好地維持平衡從而會導致大鼠骨質疏鬆症的發生，即造模成功。在給予藥物後，本發明各劑量組及陽性對照組均能使ALP活性和H0P/Cr比值顯著降低(P〈0.05或P〈0.01)，其中本發明中、高劑量組療效與陽性對照組相當。說明，本發明可顯著改善去勢大鼠骨質疏鬆引起的鹼性磷酸酶及尿羥基脯氨酸/肌酐比值的異常升高。2.2.2血清激素變化影響結果見表9中。表9本發明對大鼠激素水平變化的影響作用(Je土SD)組別劑量雌二醇(ng/L)降鈣素(ng/L)骨鈣素(Pg/L)(g生藥/kg)假手術組14.28±2.31240.1±18,71.47±0.20模型組7.05±1.06**150.3±12.5**0.84±0.08M骨疏康顆粒組3.011.26士1.48""187.6±19.6s1.08±0.12s本發明低0.59.11±1.70160.4±14.3l.Ol士O.17s本發明中110.54±1.64*215.7±13.88站1.25±0.198挑本發明高212.30±2.62*8218.4±16.9鵬1.30土0.21自與假手術組比較，**P〈0.01;與模型組比較，SP〈0.05，抑P〈0.01;與陽性對照組比較，&P〈0.05。由表9結果顯示，模型組大鼠的三項血清激素均比假手術組顯著降低(P〈0.01)，給予藥物後，各給藥組均能明顯提高血清激素水平(P〈0.05或P〈0.01)，其中本發明中、高劑量組療效最為顯著，與陽性對照組比較，在降鈣素、骨鈣素水平變化上具有顯著性差異(P<0.05)，說明本發明能非常有效地提高骨質疏鬆模型大鼠的血清激素水平。2.2.3股骨骨密度變化影響結果見表10中。表10本發明對大鼠股骨骨密度變化的影響情況(X±SD)組別劑量(g生藥/kg)骨密度(g/cm2)假手術組0.1602±0.0037模型組0.1436±0.0062"骨疏康顆粒組3.00.1534±0.0055本發明低0.50.1447±0.0063本發明中10.1538±0.0046s"本發明高20.1598±0.0071"*與假手術組比較，**P〈0.01;與模型組比較，##P<0.01;與陽性對照組比較，&P〈0.05。大鼠去勢後可引起骨密度顯著降低，形成骨質疏鬆，給予藥物後，各給藥組可明顯增高大鼠骨密度，其中本發明高劑量組療效最為顯著，與陽性對照組比較，本發明高劑量組具有顯著性差異(P<0.05)。由此可以看出，本發明能明顯增加去勢骨質疏鬆症大鼠的骨密度。2.2.4股骨無機元素的變化影響表11本發明對去勢大鼠股骨無機元素含量變化的影響(^土SD)組別劑量Ca(mg/kg)P(mg/kg)Zn(ug/g)Mg(mg/g)(g生藥/kg)假手術組■199.3±8.264.7±2.5215.9±6.83.50±0.28模型組177.5±7.8材61.8±3.2*189.7±5.8'2.29±0.33"骨疏康顆粒組3.0191.9±4.9M63.9±3.6**208.3±7.l*s3.36±0.26甜本發明低0.5178.6±9.762.1±4.2194.8±8.2"2.76±0.44"本發明中1185.7±10.3863.8±4.0"207.4±10.6抑3.08±0.38**本發明高2194.8±9.58"64.2±4.5B2il.2士9.73.45士0.4(T與假手術組比較，*P<0.05，**P<0.01;與模型組比較，ttP〈0.05，雜P〈0.01。有表ll結果顯示，去勢大鼠骨組織中鈣、鎂、鋅的含量顯著降低，給予藥物後，各給藥組均能明顯提高上述無機元素的含量(P〈0.05或P〈0.01)，其中本發明高劑量組與陽性對照組療效最佳，且相當。2.2.5股骨生物力學的影結果見表12中。表12本發明對大鼠股骨生物力學強度的影響情況〔*±SD)組別劑量(g生藥/kg)最大載荷(N)最大撓度(mm)抗彎剛度(N/mm)能量吸收(N.mnO假手術組118.6±9.70.88±0.09181.4±22.744.7±5.5模型組90.4±8.1"0.60±0.05"145.3±13.6*25.9±3.4"骨疏康顆粒組3.0108.5土8.2"0.74±0.06*177.2±23.540.3±4.8""本發明低0.595.2±7.80.66±0.08s161.3士27.0'34.6±5.2"本發明中1103.l土8.4"0.75±0.ll鵬179.5±25.r39.1±6.7本發明高2112.8±9,0稱0.81±0.13"*跳6±28.2*"41.5±7.2**與假手術組比較，*P<0.05，**P〈0.01;與模型組比較，#P<0.05，抑P〈0.01。由表12結果顯示，模型組大鼠的各項指標均明顯低於假手術組，即較小的外力和能量可發生骨折，說明摘除卵巢後大鼠患上了骨質疏鬆，骨組織結構發生改變，彈性下降，骨折危險性提高。給予藥物治療後，各給藥組能明顯提高最大載荷、最大橈度、抗彎剛度、能量吸收等指標(P〈0.05或P〈0.01)，其中本發明中、高劑量組與陽性對照組療效為佳，且相當，說明本發明能顯著改善骨質疏鬆大鼠骨組織的力學性能，降低骨折的危險性，可能與本發明升高骨密度，增加骨礦鹽含量及增加骨量有關。2.2.6骨組織形態計量學的影響結果見表13中。表13本發明對大鼠骨組織形態計量學參數的影響情況(*±SD)組別劑量骨小梁表面骨吸收表面百骨形成表面平均骨壁厚礦化沉積率(g生藥/kg)百分比(％)分比(%)百分比(%)度(um)(um/d)假手術組56.8±2.94.65±0.6510.9±1.24.08±0.550.46±0.02模型組36.4±4.1"12.26±2.8廣21.5±2.4**2.90±0.33"0.22±0.04**骨疏康顆3.045.2±5.688.92±0.90"15.3±2.8"3.40±0.37"0.38±0.06抑粒組本發明低0.541.7±6.010.96±2.0318.7±2.13.25±0.420.28±0.058本發禍中144.2土6.8*8.99±2.38"15.6±2.083.82±0.59抑0.34±0.08**本發明高249.3±7.2s7.47±2.94s*12.1±3.2糊3.94±0.53**0.42±0.06抑與假手術組比較，**P<0.01;與模型組比較，WKO.05，井共P<0.01;與陽性對照組比較，&P<0.05。由表13結果顯示，大鼠摘除卵巢後，骨小梁及其形態發生明顯變化，骨小梁表面百分比、平均骨壁厚度和礦化沉積率均明顯低於假手術組，而骨形成表面百分比、骨吸收表面百分比明顯增加，骨小梁數目減少、間隙增大，表明了大鼠去勢後，骨形成與骨吸收均亢進，但骨吸收相對大於骨形成，從而導致骨量丟失造成骨質疏鬆。給予藥物治療後，各給藥組均能顯著提高骨小梁表面百分比、礦化沉積率，降低骨形成表面百分比、骨吸收表面百分比，使平均骨壁厚度增加。其中本發明高劑量組療效最為顯著，與陽性對照組比較，在骨吸收表面百分比、骨形成表面百分比及平均骨壁厚度方面有顯著性差異(P<0.05)。由此說明，本發明能朋顯促進骨質疏鬆大鼠類骨質的形成和礦化，並顯著抑制骨吸收、骨形成的異常情況，能改善骨的顯微結構，從而增加骨重、改善骨結構，促進骨的力學性能提高。由此可見，以上藥效學試驗結果為本發明治療骨質疏鬆症的臨床新用途打下了堅實的基礎。具體實施方式實施例1丹參750g、紅花250g兩味藥材，加水10倍量煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.10-1.20(65°C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水至1000ml，冷藏，濾過，加水至規定量，分裝，滅菌，即得注射劑。用法用量肌內注射，一次2-4ml，一日1-2次；靜脈注射，一次4ml，加入50。/。葡萄糖注射液20ml稀釋後緩慢注射，一日1-2次；靜脈滴注，一次20-40ml，加入5%葡萄糖注射液100-500ml稀釋後緩慢滴注，一日1-2次；伴有糖尿病等特殊情況時，改用0.9%的生理鹽水稀釋後使用；或遵醫囑。實施例2丹參750g、紅花250g兩味藥材，加水10倍量煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.10-1.20(65°C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加入適量澱粉、羧甲基纖維素鈉、甜菊甙，混勻過80目篩，加適量水制粒，6(TC減壓乾燥，整粒，分裝，製成1000g顆粒劑。用法用量一次服用20-40g，一日1-2次。實施例3丹參750g、紅花250g兩味藥材，加水10倍量煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為l.10-1.20(65°C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓乾燥，粉碎過篩，加入澱粉，混勻，經制粒後裝入膠囊，製成1000g硬膠囊劑。用法用量一次服用20-40g，一日l-2次。實施例4丹參750g、紅花250g兩味藥材，加水10倍量煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.10-1.20(65°C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓乾燥，粉碎過120180目篩。將明膠、水及甘油(1:1:0.3-0.45)融膠後保溫待用，藥粉加適量植物油(大豆油或色拉油)攪勻，膠體磨研磨成均勻粘稠的糊狀物，減壓除氣，壓制，製成1000g軟膠囊劑。用法用量一次服用20-40g，一日1-2次。實施例5丹參750g、紅花250g兩味藥材，加水10倍量煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.10-1.20(65°C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓乾燥，粉碎過篩，加入適量澱粉、微粉矽膠及硬脂酸鎂，制粒，壓製成片，包衣，製成1000g片劑。用法用量一次服用20-40g,一日1-2次。實施例6丹參750g、紅花250g兩味藥材，加水10倍量煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.10-1.20(65°C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓乾燥，粉碎過120目篩，加入到4倍量3:1的熔融聚乙二醇4000-聚乙二醇6000中，攪拌均勻，轉移至滴丸機，滴製成丸，除去表面的二甲基矽油，包裝，製成1000g滴丸劑。用法用量一次服用20-40g，一日1-2次。實施例7丹參750g、紅花250g兩味藥材，加水10倍量煎煮兩次，每次1小時，合併水煎液，濾過，澄清冷藏後濾過。濾液加入適量明膠，冷藏，濾過。濾液濃縮至相對密度為1.10-1.20(65°C)，加入乙醇至含醇量80%以上，冷藏，濾過，調pH值到8-9，冷藏，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水靜置，濾過，濾液加適量1.2-丙二醇、尼泊金乙酯、阿斯巴坦，最後再加蒸餾水，攪拌均勻後，灌封滅菌，製成1000ml口服液。用法用量一次服用20-40ml，一日1-2次。權利要求1、一種藥物組合物在製備預防和治療骨質疏鬆藥物中的應用，其特徵在於按照重量份計，製成該藥組合物有效組分的原料為丹參750份、紅花250份。2、如權利要求1所述的製備防治骨質疏鬆藥物中的應用，其特徵在於丹參750份、紅花250份為原料製備成注射劑、丸劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、滴丸劑或口服液體製劑。3、如權利要求2所述的製備防治骨質疏鬆藥物中的應用，其特徵在於所述藥物組合物為注射劑。4、如權利要求l、2或3所述的製備防治骨質疏鬆藥物中的應用，其特徵在於所述的骨質疏鬆為原發性骨質疏鬆和繼發性骨質疏鬆。5、如權利要求4所述的製備防治骨質疏鬆藥物中的應用，其特徵在於所述的骨質疏鬆為原發性骨質疏鬆。6、如權利要求5所述的原發性骨質疏鬆為退行性骨質疏鬆。全文摘要本發明涉及一種藥物組合物在製備預防和治療骨質疏鬆藥物中的新用途，處方由丹參750份、紅花250份組成，劑型包括注射劑、丸劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、滴丸劑或口服液體製劑。本發明目的在於提供一種藥物組合物新的治療用途，擴大該發明的臨床應用範圍，避免良好藥物資源的浪費。文檔編號A61K36/537GK101406517SQ20081023242公開日2009年4月15日申請日期2008年11月26日優先權日2008年11月26日發明者濤趙申請人:鹹陽步長醫藥科技發展有限公司