北蟲草菌種的培育方法
2023-04-30 00:08:21 1
專利名稱：北蟲草菌種的培育方法
技術領域：
本發明涉及一種北蟲草菌種的培育方法。
背景技術：
北蟲草又名蛹蟲草、北冬蟲夏草。由於北蟲草內含有較高的蟲草素和蟲草多糖， 以及蟲草酸等活性成份，是ー種具有神奇藥用與滋補功效為一體的珍貴藥材，所以，北蟲草現已在世界上得到逐步普及，其市場潛カ不可估量。但，由於北蟲草是人工培育的植物，其內活性成份含量的高低主要取決於菌種的優劣，而菌種的優劣來源於培養基的配比是否合理，選擇菌種的方式和培養菌種的時間等因素。在現有技術中，培育北蟲草菌種有多種方式，如中國專利1309823C號授權公告的名稱為「提高蛹蟲草優良菌種篩選效率和繁殖穩定性的生產方法」給出ー種培育北蟲草菌種的方式。該專利對子實體不先採用消毒，只是先選擇子實體上部體積較大的部位，然後切除該子實體上部的外層，再取子實體內部組織放入培養基中，選擇菌株作為菌種。雖然該種方式可以培養出北蟲草菌種，但由於北蟲草子實體並不是怕感染細菌的物料，通常不將其放置在無菌的環境中，如果子實體表面有可感染菌種的細菌，在切除其外層時很容易使子實體的內部組織受到細菌感染，不僅會大大降低生產菌種的效率，而且還會使培養出的菌種因受到細菌感染而退化；同吋，從選擇子實體內部組織的部位來看，經實踐證明，子實體中白色的內部組織能夠培養出更加優良的菌種，如果採用子實體上部膨大部位，因膨大部位是子嚢果，用此部位培養菌種易變異。現有技術中也有對子實體先消毒，再取子實體內部組織的技木，對子實體消毒主要採用汞進行消毒，雖然採用汞可以殺菌，其殺菌效果也相對較好，但由於汞對人體有害， 同時對生態環境也會帶來多方面危害，所以，該種消毒方式不適合於被廣泛地應。
發明內容
本發明的任務是提供ー種利用酒精殺菌和取合適子實體內部組織的方式解決北蟲草質量問題的北蟲草菌種的培育方法。本發明所提出的北蟲草菌種的培育方法，包括以下步驟取鮮北蟲草子實體放入含量為72 — 78%的酒精中浸泡3 5分鐘進行殺菌，然後用無菌水清洗乾淨後切除子實體外層，再將去除外層的子實體中白色組織放入培養基中培養11 一 15天，白色組織中長出白色絨毛狀菌絲作為菌種。酒精含量如果小於72%，其殺菌效果不理想，酒精含量如果大於 78%,易使子實體的內部組織受到損害。所述培養基是由以下質量百分比的物料構成馬鈴薯70 — 85%，葡萄糖5 — 12%， 磷酸ニ氫鉀1 一洲，硫酸鎂0.5 — 1%，瓊脂5 — 12%，蛋白腖3 — 6%。由於培養基中的馬鈴薯和葡萄糖是為菌絲生長提供能量的物料，且主要是為其提供碳原，所以，馬鈴薯的含量不低於70%，葡萄糖不能低於5%，最佳選擇是馬鈴薯的質量含量為78 一 79%，葡萄糖為8 一 9. 5% ； 磷酸ニ氫鉀是用於調節PH值的物料，可以將培養基往中性調整，最佳選擇是1. 1 一 2% ；硫酸鎂是ー種無機鹽，可以平衡細胞膜內外壓力，如果細胞外離子濃度大，細胞易失水導致細胞死亡，培養失敗，如果細胞外離子濃度小，細胞吸水膨脹，會導致因細胞膜破裂而死亡，所以，硫酸鎂最佳質量含量不應該超過1%，但也不應小於0. 5%，最佳含量為0. 6 — 0. 8% ；瓊脂可以起到讓培養基定型的作用，其最佳質量含量應該在7 — 8% ；蛋白腖可為培養基提供氮原，為菌種提供生長所必須的成份，其最佳質量含量應該在4 一 5% ；由上述物料構成的培養基，在培養菌種吋，向構成培養基物料中加入是質量培養基5 — 7倍的水作為液體培養基。本發明所提出的北蟲草菌種的培育方法採用合適的酒精含量對子實體殺菌，而酒精是無毒液體，且殺菌的效果也非常理想，操作也非常簡單，再加上選擇子實體中白色組織作為培養菌種基料(該白色組織是長在子實體的中部區域)，取該部位的白色組織培養出的菌種不易產生變異，且因沒有雜菌汙染，致使培養出的菌種成活率非常高，經實踐證明，菌種成活率在97 — 98%，比現有技術培養菌種的成活率高出30 — 40%。
具體實施例方式
實施例1
取鮮北蟲草子實體放入酒精中浸泡5分鐘進行殺菌，該酒精的含量為72%，將酒精浸泡後的子實體取出用無菌水清洗乾淨後切除子實體外層，然後將外層內的子實體中白色組織成塊取出，將每ー塊白色組織放入培養基中培養11天，當白色組織中長出白色絨毛狀菌絲作為菌種，白色組織長出白色絨毛狀菌絲見光後有淺黃色色素產生為最佳菌種。製取培養基取馬鈴薯70Kg，葡萄糖Hg，磷酸ニ氫鉀Ig，硫酸鎂lKg，瓊脂 Hg，蛋白腖Ig，將所有物料放入容器中後，再向容器內加入500Kg水，將其攪拌均勻後即為北蟲草培養基。實施例2
按照實施例1的方法製作菌種和培養基，與實施例1所不同的是將子實體放入酒精中浸泡3分鐘，該酒精的含量為78%，白色組織放入培養基中培養15天。培養基中馬鈴薯 85Kg，葡萄糖^(g，磷酸ニ氫鉀lKg，硫酸鎂0. ^(g，瓊脂^(g，蛋白腖3. 5Kg,再向容器內加入 700Kg 水。實施例3
按照實施例1的方法培養菌種和製作培養基，與實施例1所不同的是將子實體放入酒精中浸泡3. 5分鐘，該酒精的含量為75%，白色組織放入培養基中培養14天。培養基中馬鈴薯78. Ig，葡萄糖8Kg，磷酸ニ氫鉀1. lKg，硫酸鎂0.6Kg，瓊脂8Kg，蛋白腖4Kg，再向容器內加入600Kg水。實施例4
按照實施例1的方法培養菌種和製作培養基，與實施例1所不同的是將子實體放入酒精中浸泡4分鐘，該酒精的含量為75%，白色組織放入培養基中培養13天。培養基中馬鈴薯 78Kg,葡萄糖8. 5Kg,磷酸ニ氫鉀1. 7Kg，硫酸鎂0. 8Kg，瓊脂7Kg，蛋白腖4Kg，再向容器內加入650Kg水。
權利要求
1.北蟲草菌種的培育方法，其特徵在於包括以下步驟取鮮北蟲草子實體放入含量為72 — 78%的酒精中浸泡3 5分鐘進行殺菌，然後用無菌水清洗乾淨後切除子實體外層，再將去除外層的子實體中白色組織放入培養基中培養 11 一 15天，白色組織中長出白色絨毛狀菌絲作為菌種。
2.根據權利要求1所述的培育方法，其特徵在於所述培養基是由以下質量百分比的物料構成馬鈴薯70 — 85%，葡萄糖5 — 12%，磷酸ニ氫鉀1 一 2%，硫酸鎂0. 5 一 1%，瓊脂 5 一 12%，蛋白腖 3 一 6%ο
3.根據權利要求1所述的培育方法，其特徵在於所述浸泡北蟲草子實體的酒精含量為 75%。
4.根據權利要求1所述的培育方法，其特徵在於所述白色組織長出白色絨毛狀菌絲並有淺黃色色素產生後將其作為菌種。
全文摘要
本發明涉及一種北蟲草菌種的培育方法，該方法包括用酒精浸泡鮮北蟲草子實體，然後用無菌水清洗乾淨後切除子實體外層，再將去除外層的子實體中白色組織放入培養基中培養11－15天，白色組織中長出白色絨毛狀菌絲作為菌種。該培育方法採用合適的酒精含量對子實體殺菌，且選擇子實體中白色組織作為培養菌種基料，所培養出的菌種不易產生變異，且因沒有雜菌汙染，致使培養出的菌種成活率非常高。
文檔編號A01G1/04GK102550290SQ20121001366
公開日2012年7月11日 申請日期2012年1月17日 優先權日2012年1月17日
發明者劉明輝, 孫紅霞, 李洪波, 李福全 申請人:遼寧仙榆灣北冬蟲夏草(集團)有限公司