傳遞類固醇到膽甾醇酯合成組織的製作方法
2023-04-30 04:52:11
專利名稱：傳遞類固醇到膽甾醇酯合成組織的製作方法
傳遞類固醇到膽留醇酯合成組織技術領域
本發明主要涉及醫藥領域，特別是，治療類固醇合成組織中膽留醇酯貯存降低的特徵性疾病，降低組織產生類固醇的能力，特別是在需求，應激和或全身炎症期間的能力。
背景技術：
通常情況下，多餘的膽固醇從組織，如血管中去除，通過一個稱為膽固醇逆向轉運 (RCT)過程輸送到肝臟中排洩膽汁。在RCT第一步，膽固醇在循環中通過組織細胞到高密度脂蛋白(HDL)。在第二步驟中，酶卵磷脂膽固醇醯基轉移酶(LCAT)通過催化HDL中卵磷脂的脂肪酸酯交換反應，以形成膽留醇酯(CE)，增強了膽固醇對HDL的承載能力。膽甾醇的酯產物在HDL內部積累，直到其在肝臟HDL-受體中被除去。大部分CE進入肝臟後被轉換成膽固醇和膽汁酸在膽汁中排洩。CE傳遞中相同的HDL受體介導過程發生在類固醇合成組織以維持膽固醇對類固醇產物的供給。此過程中的HDL受體目前認為是清道夫受體 BI (SR-Bl)。
膽甾醇酯轉運蛋白(CETP)是一種血漿 蛋白，負責從HDL到β -脂蛋白(VLDL和 LDL)淨轉移CE。人類缺陷CETP，極大地提升了大CE-富集HDL的水平。CETP抑制劑已經顯示出阻止CE從HDL到LDL的轉化，從而迅速增加HDL-C (其中C代表總膽固醇，包含膽固醇和CE)並降低了 LDL-C。所得的HDL在CE中典型豐富，類似於從CETP缺陷的血漿中分離的 HDL。
類固醇合成組織，包括腎上腺，性腺(睪丸和卵巢)和胸腺，依賴於細胞內儲存的膽甾醇酯，作為膽固醇合成類固醇的一個來源，如皮質醇，雌激素和雄激素。在需要時，由膽甾醇酯酶酶裂解酯鍵，釋放膽固醇用於留族化合物的產生。在應激時，CE儲存可被迅速耗盡，而且沒有補充CE，類固醇的產生大大受損。體外實驗已經證明，通過SR-B1，在CETP缺陷患者中分離的HDL可比在正常樣本中的HDL傳遞更多的CE。
在小鼠中，低HDL-CE導致腎上腺，睪丸和卵巢中CE含量的減少。CE含量的降低似乎影響應激期間腎上腺的產生和產生皮質醇能力。在人類中，低高密度脂蛋白膽固醇(低 HDL-C)為一種標誌性的遺傳性疾病，如LCAT缺陷和(Tangier)的疾病。低高密度脂蛋白膽固醇也會發生各種非遺傳性疾病，包括感染、炎症、自體免疫疾病、關節炎的疾病、敗血症、 創傷、燒傷、肝臟疾病(例如肝炎、肝纖維化、肝硬化、膽管增生、器官移植、膽管閉鎖、重金屬中毒)及腎臟疾病。
雖然在這些疾病中不是一個主要的病理，HDL-CE的減少降低了類固醇合成組織中膽固醇的傳遞，從而減少了身體產生關鍵糖皮質激素、激素和其他類固醇激素的能力。這種甾體產生能力的下降可能會加劇潛在的疾病。作為一種複合因素，潛在的疾病的惡化可進一步降低HDL-CE的水平。在這個周期的某些情況下，可導致一個威脅生命的情況，甚至死亡。在外傷或嚴重感染的患者中可能已經降低了 HDL-C水平，或可能冒著HDL-C水平下降的風險。為了使這些患者中類固醇的正常化或增加，使HDL-C水平正常化或增加是有效的。
人造形式的HDL組成包括磷脂和載脂蛋白A-1、或磷脂和載脂蛋白A_1類似物，正被研究用於治療有心血管疾病如動脈粥樣硬化的病人。這種治療方法取決於這些人造HDLs 從組織(如動脈)中移除多餘膽固醇的能力。然而，由於這些版本的HDL缺乏膽固醇或膽甾醇酯，它們不是馬上就能為腎上腺提供CE，其需要正常化或增加類固醇激素合成，而事實上需要從組織中清除膽固醇的作用。在某些情況下，腎上腺皮質功能不全的風險患者的LCAT 水平下降，並因此減弱了製作HDL-CE的能力(形成膽固醇用於補充腎上腺)，導致HDL-CE 水平較低。由於這些人造形式的HDL不能正確糾正LCAT或HDL-CE的不足，他們無法對腎上腺皮質功能不全的風險危重患者提供一種有效的治療。
因此，需要經過治療以增加病患者的CE對類固醇合成組織(如腎上腺、性腺和胸腺)的可用性，這些病患者具有類固醇合成組織功能下降有關的疾病。
發明概述
在本公開中公開的組織和方法揭示了 通過正常化或增加血漿中HDL-CE的濃度來調節類固醇合成組織的類固醇產生量，從而通過施用有效劑量的LCAT、增加血漿LCAT活性的化合物、CETP抑制劑、膽固醇輸送粒子(CDP)，或它們的任意組合來維持或者增加血漿類固醇的水平。本公開描述治療疾病的方法，其特徵在於減少類固醇合成組織的功能，包括給需要的患者給藥試劑，所述試劑選自LCAT、增加血漿LCAT活性化合物、CETP抑制劑和 ⑶P組成的組。本公開描述了治療疾病的方法，所述疾病的特徵在於腎上腺皮質功能不全。 本發明還公開了治療疾病的方法，其特徵在於低水平睪酮的產生，包括給需要的患者施用有效劑量的CETP抑制劑、LCAT、增加血漿LCAT活性的化合物、⑶P、或它們的任意組合。另外描述的治療疾病的方法，其特徵在於低水平卵巢激素的產生，包括給需要患者施用的方法、有效劑量的LCAT、增加血漿LCAT活性的化合物、CETP抑制劑、⑶P、或它們的任意組合。
發明詳述
此處所用「腎上腺皮質功能不全」是指一種疾病，這種疾病的腎上腺不能分泌產生足量的類固醇激素。這些疾病包括先天疾病，如阿狄森氏病和非先天性腎上腺皮質功能不全。
如本文所述的非先天性腎上腺皮質功能不全包括「後天疾病」，例如全身炎症反應綜合症，感染，炎症，敗血症，創傷，灼傷，肝臟疾病(包括但不局限於肝炎、肝腎症候群、 肝纖維化、肝硬化、膽管增生、或膽管閉鎖、腎臟疾病、器官移植、重金屬中毒、自體免疫疾病、關節疾病、肝臟疾病)；以低水平睪丸激素產生為特徵的疾病，包括但不限於男性更年期，勃起功能障礙；或以低水平卵巢激素產生為特徵的疾病，包括但不限於更年期。
相對腎上腺皮質功能不全也包括類固醇水平的疾病(如皮質醇水平)，其在正常範圍內，但其對抑制創傷、燒傷、感染或敗血症的炎症反應的腎上腺反應仍然不足。
「全身炎症反應綜合症」或「SIRS」指的是影響全身的炎症狀態以及可引起局部缺血、炎症、外傷、感染或幾種損傷的組合,例如敗血症。
如本文中使用的術語「治療」或其他形式的「治療」或「治療」 一詞，意思是用本發明的化合物給藥可減輕疾病在宿主中的疾病和/或減少、抑制、或消除與疾病相關的特定特徵或結果(例如減少的類固醇)。因此，術語「治療」包括，防止一種疾病在宿主中發生 (尤其是當該宿主傾向於獲取疾病時)；抑制疾病；和/或減輕或扭轉疾病。本發明的方法是指防止疾病，可以理解的是，術語「防止」不要求該病情被完全遏制。相反，本文所述的術語預防是指本領域技術人員識別人群是否易受疾病的能力，使得可能在疾病的發病前將本發明的化合物給藥。此術語並不意味著病情能完全避免。
在本說明書的整個描述和權利要求書中，詞語「包括」和其他形式的詞語，例如「包含」和「包括」是指包括但不限於，而且不打算排除，例如，其它添加劑、組件、整數或步驟。
如本文所述的，除非上下文清楚地指出，否則，單數形式「a」，「an」，和「the」包括複數參考。
如本文所述的「之間」是包括性的，例如，「在I毫克和5000毫克之間」包括I毫克和5000毫克。
如本文所述的「從」是包括性的，例如，「從I毫克到5000毫克」，包括I毫克和 5000mgo
「SC」是指皮下注射。
「IV」是指靜脈內注射或輸注。
「頂」是指肌肉注射。
「FC」是一個游離膽固醇縮寫，如本文所述的是指非酯化的膽固醇。
「 CE 」是一個膽甾醇酯縮寫。
「⑶P」和的「膽固醇酯輸送顆粒」被交 替使用，並且在此所用的，是指一種分子，它能夠將CE提供至類固醇合成組織，其中包括但不限於載脂蛋白Al、磷脂和膽留醇酯複合物，載脂蛋白Al、磷脂、膽固醇和膽留醇酯複合物；一種或多種18-40個胺基酸長度的兩親性肽、磷脂和膽固醇酯的複合物；一種或多種18-40個胺基酸長度的兩親性肽、磷脂、膽固醇和膽留醇酯複合物；或原生HDL。磷脂適合用於產生⑶P，包括但不限於卵磷脂、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲氨酸、鞘磷脂、磷脂醯膽鹼、磷脂醯甘油、心磷脂及其它們的混合物。術語CDP 包括但不限於rHDL、mHDL、和原生HDL。
「rHDL可以」和「重組HDL」交替使用，而且此處所用的，指載脂蛋白Al、磷脂和膽甾醇酯複合物；或載脂蛋白Al、磷脂、膽固醇和膽固醇酯複合物。適合用於產生rHDL的磷脂，包括但不限於磷脂醯膽鹼、鞘磷脂、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯肌醇、磷脂醯甘油、心磷脂及它們的混合物。
「mHDL」和「模仿HDL」用於交換使用，和本文所述的裝置指一種或多種18_40個胺基酸長度的兩親性肽、磷脂和膽留醇酯的複合物，或一種或多種18-40個胺基酸長度的兩親性肽、磷脂、膽固醇和膽固醇酯的複合物。磷脂適合使用產生mHDL，包括但不限於磷脂醯膽鹼、鞘磷脂、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯肌醇、磷脂醯甘油、心磷脂及它們的混合物。兩親性的肽適合用於產生⑶P，包括但不限於D4F(Song等，(2009) Int J Biol Sci 5:637-646)，(A. V. Bocharov et al. (2004) J. Biol. Chem. 279 :36072-36082), 5A 和類似物(ff. D ' Souza et al (2010) Circ. Res. 107 :217-227), A-1ConA (G. M. Anantharamaiah (2007) J. Lipid Res. 48 :1915-1923),三聚 apoAI 變體(Graversen, et al, 2008) ;Ac_hE18A_NH2 (Datta, et al, 2000 ;2001),和在 D Busseuil et al. (2008)Br J Pharmacol. 154(4) :765-773 中公開的多肽。
「天然高密度脂蛋白膽固醇」是指從血漿中分離出的HDL。這些顆粒中含有的磷脂、 蛋白質、膽固醇和膽固醇酯。
如本文所述，「正常水平的HDL-CE」是指血漿中HDL-CE的濃度，在目前沒有服用可能改變HDL-CE水平的任何藥物，未處理的一般健康個體。
如本文所述的「正常水平的類固醇」是指血漿中特定的類固醇濃度，其存在於目前沒有服用可能改變該特定類固醇水平的任何藥物、未處理的健康受試者中。
「LCAT」是卵磷脂膽固醇醯基轉移酶的縮寫。
本文使用的「LCAT」或者「LCAT多肽」包括天然序列LCAT、LCAT變體、修飾的LCAT、 LCAT衍生物和嵌合LCAT。「天然序列LCAT」包括多肽，所述多肽具有相同的胺基酸序列作為從天然衍生的LCAT。因此，天然序列LCAT具體地包括LCAT天然斷裂的形式，和LCAT的天然發生等位基因變體，和天然發生變體形式((例如交替拼接形式)。優選的天然序列LCAT 是成熟天然序列LCAT。
「修飾的LCAT」意思是具有LCAT活性的多肽，其中在所述天然LCAT多肽中的一個或多個 胺基酸被另一個胺基酸替代，部分的天然多肽中被添加一個或多個胺基酸、被刪除一個或多個胺基酸，其包括但不限於N-端胺基酸或者C-端胺基酸。替代的實施例包括但不限於保守胺基酸替代，或者被非天然發生的胺基酸替代。非限制示例性的保守胺基酸替代在表I中提供。例如但不作為限制，所述修飾LCAT可以使修飾的LCAT蛋白，其在美國專利出版號2009/0081182中描述。
LCAT的衍生物包括天然或者修飾的LCAT多肽，其已經被改變以提高其活性、溶解性、吸收性、和/或生物半衰期。本領域技術人員對將多肽衍生以改善其藥物性質的方法是熟悉的。
表I
權利要求
1.治療特徵在於減少類固醇合成組織的功能的疾病的方法，包括對有需要的病人給藥 試劑，所述試劑選自LCAT、增加血漿LCAT活性的化合物、CETP抑制劑、⑶P及其任意組合。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述疾病特徵在於腎上腺皮質功能不全、低水平 睪丸激素的產生、或者低水平卵巢激素的產生。
3.根據權利要求2所述的方法，其中所述疾病特徵在於腎上腺皮質功能不全。
4.根據權利要求1、2或3中任一項所述的方法，其中所述試劑是天然HDL。
5.根據權利要求1、2或3中任一項所述的方法，其中所述試劑是重組HDL。
6.根據權利要求1、2或3中任一項所述的方法，其中所述試劑是模擬HDL。
7.根據權利要求1、2或3中任一項所述的方法，其中所述試劑是LCAT。
8.根據權利要求1、2或3中任一項所述的方法，其中所述試劑是增加血漿LCAT活性的 化合物。
9.根據權利要求1、2或3中任一項所述的方法，其中所述試劑是CETP抑制劑。
10.根據權利要求4、5、6、8或9中任一項所述的方法，進一步包括給藥LCAT。
11.根據權利要求4、5、6、7或8中任一項所述的方法，進一步包括給藥CETP抑制劑。
12.根據權利要求1-11中任一項所述的方法，其中所述疾病是急性疾病，選自全身炎 症反應綜合症、感染、炎症、敗血症、創傷、燒傷、肝疾病、腎疾病、器官移植或重金屬中毒。
13.根據權利要求12所述的方法，其中所述疾病是敗血症。
14.根據權利要求12所述的方法，其中所述疾病是全身炎症反應綜合症。
15.根據權利要求12所述的方法，其中所述疾病是肝疾病，選自肝炎、肝腎綜合症、纖 維症、肝硬化、膽管增生或者膽管閉鎖。
16.根據權利要求1-11中任一項所述的方法，其中所述疾病是慢性疾病，選自自身免 疫疾病、關節疾病或者肝疾病。
17.根據權利要求2所述的方法，其中所述疾病特徵在於低水平睪丸激素的產生。
18.根據權利要求17所述的方法，其中所述疾病是低睪丸激素水平綜合症。
19.根據權利要求17所述的方法，其中所述疾病是男性更年期。
20.根據權利要求17所述的方法，其中所述疾病是勃起功能障礙。
21.根據權利要求17-20中任一項所述的方法，其中所述試劑是天然HDL。
22.根據權利要求17-20中任一項所述的方法，其中所述試劑是重組HDL。
23.根據權利要求17-20中任一項所述的方法，其中所述試劑是模擬HDL。
24.根據權利要求17-20中任一項所述的方法，其中所述試劑是LCAT。
25.根據權利要求17-20中任一項所述的方法，其中所述試劑是增加血漿LCAT活性的 化合物。
26.根據權利要求17-20中任一項所述的方法，其中所述試劑是CETP抑制劑。
27.根據權利要求21、22、23、25或26中任一項所述的方法，進一步包括給藥LCAT。
28.根據權利要求21、22、23、24或25中任一項所述的方法，進一步包括給藥CETP抑制劑。
29.根據權利要求2所述的方法，其中所述疾病特徵在於低水平卵巢激素的產生。
30.根據權利要求29所述的方法，其中所述試劑是天然HDL。
31.根據權利要求29所述的方法，其中所述試劑是重組HDL。
32.根據權利要求29所述的方法，其中所述試劑是模擬HDL。
33.根據權利要求29所述的方法，其中所述試劑是LCAT。
34.根據權利要求29所述的方法，其中所述試劑是增加血漿LCAT活性的化合物。
35.根據權利要求29所述的方法，其中所述試劑是CETP抑制劑。
36.根據權利要求29、30、31、32、34或者35中任一項所述的方法，進一步包括給藥 LCAT。
37.根據權利要求29、30、31、32、33或者34中任一項所述的方法，進一步包括給藥 CETP抑制劑。
38.組合物，包括載脂蛋白Al、一種或多種脂質和膽留醇酯的複合物。
39.根據權利要求38所述的組合物，進一步包括膽固醇。
40.組合物，包括一種或多種的具有數目為18和40之間的胺基酸的兩親性肽，一種或多種的脂質和膽留醇酯的複合物。
41.根據權利要求40所述的組合物，其中所述複合物進一步包括膽固醇。
42.根據權利要求38-41中任一項所述的組合物，其中所述一種或多種的脂質獨立地選自卵磷脂、鞘磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯肌醇、磷脂醯甘油或心磷脂。
43.根據權利要求42所述的組合物，其中所述一種或多種的脂質是磷脂。
44.根據權利要求43所述的組合物，其中所述磷脂是卵磷脂、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯肌醇或者磷脂醯甘油。
45.增加有需要的病人的類固醇生成的方法，包括對有需要的病人給藥試劑從而增加類固醇水平，所述試劑選自LCAT、增加血漿LCAT活性的化合物、CETP抑制劑、CDP或者其任意組合。
46.根據權利要求45所述的方法，其中所述類固醇是皮質類固醇或者性激素。
47.根據權利要求46所述的方法，其中所述類固醇是皮質醇。
48.根據權利要求46所述的方法，其中所述類固醇是醛固酮。
49.根據權利要求46所述的方法，其中所述類固醇是睪丸激素。
50.根據權利要求46所述的方法，其中所述類固醇是雌激素。
51.根據權利要求45-50中任一項所述的方法，其中所述CDP是天然HDL。
52.根據權利要求45-50中任一項所述的方法，其中所述CDP是rHDL。
53.根據權利要求45-50中任一項所述的方法，其中所述CDP是mHDL。
54.根據權利要求45-53中任一項所述的方法，其中所述病人被給藥如下藥物a)CDP ;和b)試劑，所述試劑選自LCAT、增加血漿LCAT活性的化合物、CETP抑制劑及其任意組口 ο
55.根據權利要求54所述的方法，其中所述試劑是LCAT。
56.根據權利要求54所述的方法，其中所述試劑是增加血漿LCAT活性的化合物。
57.根據權利要求54所述的方法，其中所述試劑是CETP抑制劑。
58.根據權利要求54-57中任一項所述的方法，其中在給藥所述試劑之前，以注射劑量給藥所述⑶P。
59.根據權利要求54-58中任一項所述的方法，其中所述類固醇水平增加到正常水平。
60.根據權利要求54-58中任一項所述的方法，其中所述類固醇水平增加到高於正常水平。
61.根據權利要求54-58中任一項所述的方法，其中所述試劑是以劑量給藥或者多次給藥，以有效維持期望的類固醇水平。
62.根據權利要求61所述的方法，其中所述期望的類固醇水平是正常水平。
全文摘要
本發明公開了治療低水平的HDL-CE表徵的疾病的組合物和方法，該疾病能使向類固醇合成組織傳遞的膽甾醇酯減少，使所述器官產生類固醇的能力下降，特別是在需要、應激和或者全身炎症反應綜合症的情況下。
文檔編號A61K38/45GK103025348SQ201180022792
公開日2013年4月3日 申請日期2011年5月6日 優先權日2010年5月6日
發明者B.J.奧爾巴赫, R.霍曼, B.克勞澤 申請人:阿爾法科製藥有限責任公司