發酵濾液中側耳素的提取方法
2023-04-26 22:37:06 1
專利名稱：發酵濾液中側耳素的提取方法
技術領域：
本發明涉及抗生素提取技術，是一種用鹽析法提取發酵濾液中殘 留的短截側耳素。
背景技術：
短截側耳素pleuromulin(以下稱側耳素)是由傘菌科的斜頂菌 pleuarotus mutifis經液體發酵產生。側耳素主要是胞內產物，但是還 有約300~1000ug/ml側耳素被釋放到胞外，尤其是當發酵條件控制不 當時其胞外側耳素可達2000ug/ml以上。回收發酵濾液中的側耳素可 以提高收率降低側耳素的生產成本。側耳素在乙酸乙酯、4-甲基-2-戊酮等疏水溶劑中的溶解度大都在15%左右，從發酵濾液中萃取殘留 的側耳素，溶劑用量大，成本分析表明單獨用溶劑萃取側耳素並不合 算。本發明用氯化鈉、硫酸鈉等無機鹽採用鹽析的方法使側耳素從濾 液中析出，或採用少量的溶劑並在濾液中加入少量的氯化鈉或硫酸鈉 來萃取側耳素，可顯著的降低提取成本。
發明內容
本發明技術是關於側耳素提取方法，其特徵在於向含有側耳素的 發酵濾液中加入足夠量的氯化鈉或硫酸鈉，從而使側耳素從濾液中析 出，然後用離心或過濾的方法將析出的側耳素分離出來。 一般而言， 在發酵濾液中加入25~35%氯化鈉(重量/體積比)或加入10~25%硫 酸鈉(重量/體積比)即可使側耳素的析出率達80~99%，隨著鹽的加入量越多側耳素析出率越高，當鹽在發酵濾液中達到飽和時，側耳素 析出率為最大。
還可以在發酵濾液中加入少量的氯化鈉或硫酸鈉(大約在
5~10%)，同時加入乙酸乙酯或4-甲基-2-戊酮等疏水性溶劑，進行萃 取，由於鹽的加入可提高側耳素在有機相中的分配係數。同樣可以減 少溶劑用量，降低提取成本。 脈雄^ 實例1、
發酵結束，發酵液用高壓板框壓濾，得含側耳素的菌素濾餅(幹 燥後，進一步用有機溶劑提取)和含少量側耳素(大於300ug/ml)的 發酵濾液。向濾液中加入重量/體積比為35%的氯化鈉，充分攪拌使 氯化鈉全部溶解，然後過濾或離心，即得含側耳素的粗提取物。經 HPLC分析，側耳素的回收率達99%。 實例2、
發酵結束，發酵液用高壓板框壓濾，得含側耳素的菌素濾餅(幹 燥後，進一步用有機溶劑提取)和含少量側耳素(大於300ug/ml)的 發酵濾液。向濾液中加入重量/體積比為22%的硫酸鈉，充分攪拌使 氯化鈉全部溶解，然後過濾或離心，即得含側耳素的粗提取物。經 HPLC分析，側耳素的回收率達99%。 實例3、
發酵結束，發酵液用高壓板框壓濾，得含側耳素的菌素濾餅(幹 燥後，進一步用有機溶劑提取)和含少量側耳素(大於300ug/ml)的發酵濾液。向濾液中加入重量/體積比為20%的氯化鈉，充分攪拌使 氯化鈉全部溶解，然後過濾或離心，即得含側耳素的粗提取物。經
HPLC分析，側耳素的回收率達82~88%。 實例4、
發酵結束，發酵液用高壓板框壓濾，得含側耳素的菌素濾餅(千 燥後，進一步用有機溶劑提取)和含少量側耳素(大於300ug/ml)的 發酵濾液。向濾液中加入重量/體積比為15%的硫酸鈉，充分攪拌使 氯化鈉全部溶解，然後過濾或離心，即得含側耳素的粗提取物。經 HPLC分析，側耳素的回收率達84~88%。 實例5、
發酵結束，發酵液用高壓板框壓濾，得含側耳素的菌素濾餅(幹 燥後，進一步用有機溶劑提取)和含少量側耳素(大於300ug/ml)的 發酵濾液。向濾液中加入相當於濾液5%的4-甲基-2-戊酮和15%的硫 酸鈉，充分攪拌萃取，然後靜置或離心分相，得含側耳素的有機相， 萃取率達97%以上，不加入鹽的對照組，其萃取率為88%。
權利要求
1、一種短截側耳素的提取方法，其特徵在於向含有短截側耳素的發酵濾液中加入重量/體積比為10～40％氯化鈉或硫酸鈉，充分混合，待短截側耳素析出完成，進行固液分離，即得含短截側耳素的粗提物。
2、 一種短截側耳素的提取方法，其特徵在於向含有短截側耳素 的發酵濾液中加入重量/體積比為5~30%氯化鈉或硫酸鈉，同時加入 相當於發酵濾液體積的5~100%的乙酸乙酯或4-甲基-2-戊酮，充分混 合，然後靜置或離心分相，即可獲得含短截側耳素的有機相。
全文摘要
本發明技術是用鹽析法從發酵濾液中回收殘留的短截側耳素，方法要點是向含有短截側耳素的發酵濾液中加入足夠量的氯化鈉或硫酸鈉，殘留在發酵濾液中的側耳素從濾液中析出，經固液分離，得含側耳素的粗提物，粗提物收率大於98％。
文檔編號C07C67/00GK101531592SQ200810084608
公開日2009年9月16日 申請日期2008年3月13日 優先權日2008年3月13日
發明者孫玉勝, 戴曉曦, 潘貞德, 王玉萬, 蘭 馬 申請人:邁德金生物技術(北京)有限公司